KR101893597B1 - 아로니아 및 오미자 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물 - Google Patents
아로니아 및 오미자 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 아로니아 및 오미자 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는, 아로니아 및 오미자를 중량비 5:1로 혼합한 후 추출한 추출물을 3T3-L1(1×105/well) 세포주 기준으로 열수 추출물은 31.2~500 ug/ml로, 80 중량% 에탄올 추출물은 250~1,000 ug/ml 처리하는 것을 특징으로 하는 비만의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물에 관한 것이다.
Description
본 발명은 아로니아 및 오미자 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는, 아로니아 및 오미자를 중량비 5:1로 혼합한 후 추출한 추출물을 3T3-L1(1×105/well) 세포주 기준으로 열수 추출물은 31.2~500 ug/ml로, 80 중량% 에탄올 추출물은 250~1,000 ug/ml 처리하는 것을 특징으로 하는 비만의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물에 관한 것이다.
상기 조성물은 천연물을 사용함으로써 세포독성이 없고, 마우스 유래의 3T3-L1 세포주에서 지방세포의 분화를 억제하는 효능을 보유하고 있다.
비만은 음식물의 섭취와 에너지소비 사이의 불균형으로 인하여 유발되는 대사 장애로 체내에 지방이 과잉 축적된 상태를 말한다.
이러한 비만인구는 점차 증가하고 있으며 2008년 전 세계 성인 인구 중 15억 명이 과체중 및 비만이고, 2030년에는 과체중 인구가 약 21억 명에 이를 것으로 추산되고 있다.
비만을 발생시기별로 분류하자면, 성인형 비만증과 성장기 비만증으로 나눌 수 있다.
여기서 성장기 비만증은, 소위 말하는 소아 비만이며, 아동기에 형성되는 비만증으로서 지방세포의 크기와 세포수가 증가는 형태를 나타낸다.
체중을 감소시키면 지방세포의 크기는 줄어들지만 세포수는 일생동안 감소하지 않는다.
성장기 비만증은, 전신에 균등하게 비만이 일어나고 정도도 더욱 심하게 된다.
이와 달리, 성인형 비만증은 지방세포의 비대는 있으나 증가는 없는 형태를 나타낸다. 비만의 분포 또한 복부를 중심으로 체간에 국한되는 경향이 있다.
일반적으로 소아청소년기의 과체중 또는 비만은 2007년 성장도표의 성별 및 연령별 체질량지수 백분위수를 이용하여 평가한다.
체질량지수란, 체중(kg)을 신장(m)의 제곱으로 나누어 계산한 값을 말하며, 백분위수란, 전체 집단의 체질량지수 값(BMI)을 100 등분하여 정렬하였을 때 몇 번째에 해당하는지 나타낸 값으로, 95 백분위수 이상이면 비만, 85~95 백분위수 사이면 과체중으로 정의한다.
성인기 비만과 관련하여 중요한 세 시기가 있는데, 바로 영아기, 유아기의 체지방 반동기 및 청소년기이다.
영아기의 체중 증가가 많을수록 비만 위험이 높고, 미숙아 또는 저체중(부당경량아)으로 출생하여 영아기에 체중이 급속히 증가하면 비만이 되기 쉽다.
유아기는 영아기에 비해 체중 증가 속도가 감소하여 체질량지수가 감소하다가 6~8세경 다시 증가하는데, 이를 체지방 반동기라고 부르며, 이러한 체지방 반동기가 일찍 올수록 비만이 되기 쉽다.
청소년기는 신장의 급성장과 함께 2차 성징이 완성되는 시기로 생리적으로 인슐린 저항성이 증가하는 시기이다.
우리나라 국민 건강 영양 조사에 의하면, 청소년 비만은 1998년부터 2005년까지 7년간 약 2배가량 증가하였다. 열량 섭취는 증가한 반면에, 바람직하지 못한 식습관으로 인한 영양 불균형, 신체 활동과 운동 가능한 여가 시간의 부족 및 학교 체육 시간 활용의 부족 등이 원인이 될 수 있다.
앞서 설명한 바와 같이, 성인이 되고 나서 시작된 비만은 지방세포의 크기가 증가한다.
그러나 소아 시기에 시작되어 성인기까지 지속된 비만은 지방세포의 크기와 함께 지방세포의 수가 증가하게 된다. 이에 따라, 성인기에 힘겹게 체중을 감량하더라도 일시적으로 지방세포의 크기만 감소하고 지방세포의 수는 여전히 많은 상태이므로 비만이 쉽게 재발할 수 있다.
따라서 소아기 비만과 성인기 비만 모두에 있어서, 지방세포의 수를 줄일 수 있는 근본적인 해결방안이 절실하다고 할 수 있다.
지방세포는 한번 만들어지면 크기는 줄일 수 있지만 자연적으로 제거하는 것은 불가능하여 중증 비만의 경우 수술요법을 시행할 수 있다.
이러한 수술요법으로는 지방을 제거하는 수술이나 몸이 소화할 수 있는 음식량을 제한하기 위한 위성형술 또는 위 밴드 삽입술 등이 시행되고 있다.
위 성형술 또는 위 밴드 삽입술은 반강제적으로 식습관을 교정하는 방법으로, 수술 후에 비만환자가 식습관을 조절하지 않으면 요요현상이 나타나며, 합병증이나 부작용이 발생할 수 있다.
이러한 위 성형술 또는 위 밴드 삽입술은 중증 비만 환자가 시행하는 수술로, 대부분의 비만환자는 지방흡수를 감소시키는 약물을 복용하고 있다.
현재 미국 FDA가 장기 사용을 승인한 비만 치료 약물은 2가지로, 노르에피네프린(norepinephrine)과 세로토닌(serotonin)의 재흡수를 억제하는 작용을 가진 시부트라민(sibutramine)과 췌장 및 소화기계에서 분비되는 지질분해효소(lipase)를 억제하여 항비만 효과를 나타내는 오리스타트(orlistat)가 있다.
그러나, 시부트라민의 경우, 혈압상승, 불면증, 구강건조, 어지러움 등의 부작용이 흔하게 발생하고, 심혈관질환, 조절되지 않는 고혈압을 가진 환자에게는 사용할 수 없다는 단점이 있다.
또한, 오리스타트는 설사, 지방변, 요실금 등의 부작용이 나타나며, 한국인과 같이 지방섭취가 서양인과 비교하여 적은 경우에는 약물의 효과가 뚜렷하지 않다는 점으로 인해 사용이 제한적이다.
따라서, 최근 천연물 유래 생리활성물질을 이용하여 부작용이 적고 안전하며, 체중 조절에 효과적인 비만을 예방 및 치료할 수 있는 방법에 대한 연구가 활발하게 진행되고 있다.
본 발명자는 아로니아와 오미자를 함께 이용하여 본 발명을 완성하였는바, 이와 관련된 선행특허문헌을 살펴보면 다음과 같다.
먼저, 공개특허공보 제10-2012-0112137호 '오미자 에틸아세테이트 분획물 또는 이로부터 분리한 우웨이지수 C를 유효성분으로 포함하는 비만 예방 또는 치료용 조성물'에 지방세포의 분화를 억제하고 지질의 축적을 억제하는 오미자의 효능에 대해 기재되어 있다. 또한, 등록특허공보 제10-1617590호 '아로니아, 아사이베리 및 스테비아 추출물을 포함하는 항비만 식품 조성물'에는 아사이베리 추출물 100 중량부, 아로니아 추출물 50~100 중량부 및 스테비아 추출물 10~20 중량부를 포함하는 것이 기재되어 있다. 그러나 상기 문헌들에는 아로니아와 오미자를 함께 사용할 경우의 문헌은 기재되어 있지 않다.
본 발명에서 해결하고자 하는 과제는, 아로니아 및 오미자 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 조성물로서, 아로니아 및 오미자 혼합 추출물을 4~200 ㎍/㎖ 농도로 함유하는 비만의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물을 제공하는 데에 있다.
본 발명에서 해결하고자 하는 과제는, 천연물을 사용함으로써 세포독성이 없고, 마우스 유래의 3T3-L1 세포주에서 지방세포의 분화를 억제하는 효능을 보유하고 있는 조성물을 제공하는 데에 있다.
본 발명은 아로니아 및 오미자 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는, 아로니아 및 오미자 혼합 추출물은 3T3-L1(1×105/well) 세포주 기준으로 열수 추출물은 31.2~500 ug/ml 이고, 80 중량% 에탄올 추출물은 250~1,000 ug/ml 농도로 함유하는 비만의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물을 제공함으로써 기술적 과제를 해결하고자 한다.
본 발명은 천연물을 사용함으로써 세포독성이 없고, 마우스 유래의 3T3-L1 세포주에서 지방세포의 분화를 억제하는 효능을 보유하고 있는, 비만의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물을 제공함으로써 기술적 과제를 해결하고자 한다.
또한 본 발명은, 상기 유효성분을 포함하는 조성물을 포함하고 약제학적으로 허용되는 담체, 부형제 또는 희석제 등을 추가하여 약제학적 단위 투여형으로 제형화 된 비만의 예방 및 치료제를 제공함으로써, 기술적 과제를 해결하고자 한다.
여기에서, 담체, 부형제, 희석제로는 토즈, 덱스트로즈, 수크로스, 솔비톨,만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필 히드록시 벤조에이트,탈크, 마그네슘 스테아레이트 및 광물유를 들 수 있다.
또한 상기 약제학적 투여 형태는 약학적 허용 가능한 염의 형태로도 사용될 수 있고, 또한 단독으로 또는 타 약학적 활성 화합물과 결합뿐만 아니라 적당한 집합으로 사용될 수 있다.
또한 상기 유효성분을 포함하는 조성물을 제제화할 경우에는 통상적으로 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면 활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다.
또한 상기 약제학적 투여 형태는 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제, 및 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용될 수 있다.
상기 경구 투여를 위한 고형 제제에는 상기 추출물에 적어도 하나 이상의 부형제 예를 들면, 전분은 칼슘 카보네이트(calcium carbonate), 수크로스(sucrose)또는 락토오스(lactose), 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다.
상기 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제, 좌제가 포함될 수 있다.
상기 비 수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜(propylene glycol), 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸 올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.
좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지,라우린지, 글리세로제라틴 등이 사용될 수 있다. 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다.
본 발명의 추출물의 바람직한 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도,연령, 성별, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다.
그러나 바람직한 효과를 위해서, 본 발명의 추출물은 0.001~100 mg/kg(체중)으로 투여하는 것이 좋고, 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다.
상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
본 발명의 추출물은 쥐, 생쥐, 가축, 인간 등의 포유동물에 다양한 경로로 투여될 수 있다. 투여의 모든 방식은 예상될 수 있는데, 예를 들면, 경구, 직장 또는 정맥, 근육, 피하주사에 의해 투여될 수 있다.
본 발명은 상기 유효성분을 함유하는 조성물에 식품 보조 첨가제를 추가하여 비만의 예방 및 치료제의 건강기능식품 조성물을 제공함으로써 기술적 과제를 해결 하고자 한다.
상기 추출물을 첨가할 수 있는 식품으로는, 예를 들어, 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 건강 기능성 식품류 등이 있다.
본 발명의 건강 기능성 음료 조성물은 상기 추출물을 함유하는 외의 다른 성분에는 특별한 제한이 없으며 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.
상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨등의 당알코올이다.
상술한 것 이외에 향미제로써 천연 향미제(타우마틴, 스테비아추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제(사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.
상기 외에 본 발명의 추출물은 여러 가지 영양제, 비타민, 광물(전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제(치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다.
그 밖에 본 발명의 추출물들은 천연 과일 주스 및 과일 주스 음료 및 야채음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다.
본 발명에 따른 조성물은 천연물 추출물을 이용하여 부작용 및 독성이 유발 되지 않으면서, 비만의 예방, 개선 또는 치료 효과가 뛰어난 효능을 보유하고 있다.
또한 본 발명에 따른 조성물은 3T3-L1 세포주에서 지방세포의 분화를 억제하고, 지방 생성 및 축적을 억제하는 효능을 보유하고 있다.
도 1은 MTT assay를 통해 본 발명에 따른 아로니아 및 오미자 혼합 추출물의 세포독성을 나타낸 도이다.
도 2 및 도 3은 상기 아로니아 및 오미자 혼합 추출물을 각각 농도별로 처리하여 배양한 3T3-L1의 Oli Red O 염색결과로 계산한 중성지방함량을 나타낸 그래프이다.
도 2 및 도 3은 상기 아로니아 및 오미자 혼합 추출물을 각각 농도별로 처리하여 배양한 3T3-L1의 Oli Red O 염색결과로 계산한 중성지방함량을 나타낸 그래프이다.
본 명세서 및 청구범위에 사용된 용어나 단어는 통상적이거나 사전적인 의미로 한정해서 해석되어서는 안 되며, 발명자는 그 자신의 발명을 가장 최선의 방법으로 설명하기 위해 용어의 개념을 적절하게 정의할 수 있다는 원칙에 입각하여 본 발명의 기술적 사상에 부합하는 의미와 개념으로 해석되어야만 한다.
따라서 본 명세서에 기재된 실험예와 참고예는 본 발명의 가장 바람직한 일실시예에 불과한 뿐이고 본 발명의 기술적 사상을 모두 대변하는 것은 아니므로, 본 출원시점에 있어서 이들을 대체할 수 있는 다양한 균등물과 변형예들이 있을 수 있음을 이해하여야 한다.
실시예
1. 아로니아 및 오미자 혼합 추출물의 제조
1-1.
아로니아
및 오미자를 혼합 추출한다.
아로니아 및 오미자는 어떠한 전처리도 가하지 않은 것을 사용할 수 있으며, 건조,절단 또는 분쇄 등의 전처리를 가한 것을 사용할 수도 있다. 건조, 절단 등의 전처리 방법 또한 여러 가지 방법 중에서 선택될 수 있다. 바람직하게는 이물질을 제거한 후 바람이 통하는 음지에서 7일 이상 자연 건조한 후 세절한 아로니아를 사용할 수 있다.
바람직하게, 아로니아 및 오미자는 5:1의 중량비로 혼합한 후에 사용한다. 여기에서, 5:1의 중량비는 다양한 중량비로 실험하여 도출한 결과이다.
추출 방법에는 용매 추출법, 수증기 증류법, 이산화탄소 초임계 추출법, 수증기 증류법, 마이크로 웨이브 공정 추출법, 퍼콜레이션 추출법 등의 다양한 추출 방법이 사용될 수 있으며, 바람직하게는 환류추출법을 이용할 수 있다.
추출 방법에는 용매 추출법, 수증기 증류법, 이산화탄소 초임계 추출법, 수증기 증류법, 마이크로 웨이브 공정 추출법, 퍼콜레이션 추출법 등의 다양한 추출 방법이 사용될 수 있으며, 바람직하게는 환류추출법을 이용할 수 있다.
추출 용매도 다양하게 선택될 수 있다. 추출 가능한 용매에는 물,에탄올, 메탄올, 지방유, 글리세린, 마유, 플로필렌글리콜, 에테르, 클로르포름, 석유에테르, 헥산, 벤젠, 메틸렌클로라이드, 에틸아세테이트, 아세톤, 부탄올 및 이소프로판올 등이 있으며, 바람직하게는 에탄올을 사용할 수 있다. 추출용매의 농도도 다양하게 선택될 수 있으며, 바람직하게는 70% 농도의 용매를 사용할 수 있다.
설계 조건에 따라 아로니아 및 오미자와 용매의 중량비가 다르게 설정될 수 있으며, 바람직하게는 아로니아 및 오미자 10 g에 70% 에탄올 300 ml를 가하여 추출될 수 있다.
추출 진행시의 시간 및 온도 역시 설계 조건에 따라 달라질 수 있으며, 바람직하게는 105℃에서 4시간 추출할 수 있다.
1-2. 아로니아 및 오미자 혼합 추출물을 여과한다.
1-1의 과정에서 추출된 아로니아 및 오미자 혼합 추출물을 여과한다.
여과 방법에는 침강법, 막 분리법, 원심분리법, 분별증류법, 분배법 등이 있으며, 이외에도 다양한 방법이 사용될 수 있다. 여과 진행시의 시간 및 온도는 설계 조건에 따라 달라질 수 있다. 바람직하게는 거름종이를 이용하여 3번 거르는 과정을 수행할 수 있다.
1-3. 여과된 아로니아 및 오미자 혼합 추출물을 농축한다.
1-2의 과정에서 여과된 아로니아 및 오미자 혼합 추출물을 농축한다.
농축 방법에는 증발농축법, 냉동농축법, 막농축법, 건조농축법 등이 있으며, 다양한 방법이 사용될 수 있다. 바람직하게는 rotary evaporator(EYELA, Tokyo, Japan)를 사용하여 감압농축법을 사용할 수 있다. 농축 진행시의 시간 및 온도는 설계 조건에 따라 달라질 수 있다.
설계 조건에 따라 상기 기재된 공정 외에도 여과, 농축, 추출 등의 공정이 반복 실행될 수 있으며, 각 공정 전후에 발효, 냉동 등의 기타 공정이 추가로 실행될 수도 있다.
바람직하게는 위 농축액을 Ultra-Low temperature freezer(Nihon freezer, Japan)에서 동결시키고, 동결건조기(Labconco, USA)로 동결 건조하여 추출물 얻었으며, 사용 때까지 -70℃에 보관하였다.
실험예
1. 아로니아 및 오미자 혼합 추출물의 세포독성 확인
1-1. 실험 준비
아로니아 및 오미자 혼합 추출물은 실시예 1에 기재된 방법으로 제조된 것을 사용하였으며, 농도별(3.9 ~ 4000 ug/ml)로 제조하여 사용하였다.
1-2. 실험 과정
아로니아 및 오미자 열수 추출물과 에탄올 추출물의 세포독성은 MTT assay 방법으로 확인하였다.
즉, 96 웰 플레이트(well plate)에 세포를 1×104/well로 분주하여 배양한 다음 아로니아 및 오미자 열수 추출물과, 에탄올 추출물을 농도별(3.9 ~ 4000 ug/ml)로 처리하여 배양한 후 MTT 용액을 3시간 동안 반응시키고 용해하여 570 nm에서 흡광도를 측정하였다.
1-3. 실험 결과
도 1은 MTT assay를 통해 본 발명에 따른 아로니아 및 오미자 혼합 추출물의 세포독성을 나타낸 도이다.(AS(DW)는 아로니아 및 오미자 5:1 혼합 후 열수 추출물, AS(EtOH)는 아로니아 및 오미자 5:1 혼합 후 80중량% 에탄올 추출물)
실험 결과, 도 1에 나타나 있듯이 1,000 ug/ml 농도까지의 아로니아 및 오미자의 물 또는 에탄올 추출물들은 지방세포에 독성을 나타내지 않음을 확인하였다.
설명한 바와 같이 본 발명에 의해, 우수한 항비만 효과를 가지면서 부작용 및 독성유발의 우려가 없는 인체 무해한 비만 개선용 조성물을 제공함으로써 비만의 예방 및 치료를 위한 의약품 및 비만의 예방 및 개선을 위한 건강 기능식품으로 사용될 수 있다.
실험예
2. 아로니아 및 오미자 혼합 추출물의 지방 생성
억제능
분석
2-1. 실험 준비
1) 지방세포 분화유도
3T3-L1 지방전구세포(preadipocyte)를 MDI(medium, Adipogenic medium) 즉, 0.5 M 3-이소부틸-1-메틸크산틴(3-isobuty1-methylxanthine; IBMX), 1 mM 덱사메타손(dexamethasone; DEX) 및 10 ㎍/㎖ 인슐린(insulin)을 포함하는 지방형성 분화배지에 배양하여 지방세포(adipocyte)로의 분화를 유도하였다.
12 웰 조직 배양 플레이트에 웰 당 1×105/well 개의 세포를 분주하고 2일 후 10% 소태아혈청(fetal bovine serum; FBS)을 포함하는 배지로 교체하였다.
2일 경과 후 IBMX, DEX 및 인슐린을 포함하는 배지로 교환하면서 각각 아로니아 및 오미자 혼합 추출물을 농도별로(3.9 ~ 2000 ug/ml) 처리하고 2일 간격으로 총 4회 인슐린 및 상기 추출물을 처리하였다. 마지막 시료를 처리하고 2일 후 지방생성 억제능을 관찰하였다.
2-2. 실험 과정
1) 오일 레드 오 염색(Oil-Red O staining)
분화를 유도한 3T3-L1의 지방생성에 대한 효과를 확인하기 위하여, 오일 레드 오 염색을 이용하여 중성지방(triglyceride; TG) 생성을 측정하였다.
지방세포로의 분화 유도 및 시료 처리가 완료된 세포를 1인산완충염용액(phosphate buffered saline; PBS)으로 세척한 다음 10% 포르말린(formalin)으로 고정하고 오일 레드 오 염색 용액으로 처리한 후 30분간 인큐베이션 하였다.
염색이 완료된 후 100% 이소프로판올(isopropanol)을 이용하여 세포에 침착된 염료를 추출하고 520 nm에서 상기 염료 추출액의 흡광도를 측정하였다.
2-3. 실험 결과
도 2는 상기 아로니아 및 오미자 혼합 추출물을 각각 농도별로 처리하여 배양한 3T3-L1의 Oli Red O 염색결과로 계산한 중성지방함량을 나타낸 그래프이다.
실험 결과, 아로니아 및 오미자 혼합 추출물은 농도 의존적으로 중성지방(triglyceride; TG) 생성을 감소시키며, 특히 열수 추출물에서는 250 ~ 2000 ug/ml에서 현저한 효과를 보였고, 에탄올 추출물에서는 31.2 ~ 500 ug/ml에서 현저한 효과를 보였다.
실험예
3.
아로니아
및 오미자 혼합 추출물의 지방 생성
억제능
분석
실험예 2와 동일한 방식으로 실험을 수행하되, 아로니아와 오미자의 혼합 비율을 달리해서 실험을 수행하였다.
즉 아로니아, 오미자, 아로니아 및 오미자의 1:1 혼합, 아로니아 및 오미자의 3:1 혼합, 아로니아 및 오미자의 5:1 혼합군을 설정하고, 각 군에 대해 80중량%에탄올로 추출하여 실험을 수행하고 또한, 열수 추출하여 실험을 수행하였다. 투여농도는 에탄올 추출물은 250 ug/ml, 열수 추출물은 500 ug/ml로 하였다.
도 3을 참조하여 보면, 5:1 혼합군에서 가장 효능이 우수함을 확인할 수 있다.
따라서 본 발명에 따른 아로니아 및 오미자 혼합 추출물은 3T3-L1의 지방세포 분화를 억제하고 지방세포에서 중성지방의 생성 및 축적을 억제함으로써, 비만을 예방, 개선 또는 치료하는 효능을 보유함을 알 수 있다.
Claims (5)
- 아로니아 및 오미자 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물로서, 상기 아로니아 및 오미자의 혼합 중량비는 5:1로 제조한 혼합 추출물이고, 상기 아로니아 및 오미자 혼합 추출물은 세포 독성이 없으며, 상기 아로니아 및 오미자 혼합 추출물은 인슐린(Insulin), 덱사메타손(Dexamethasone) 및 IBMX(Isobutyl methyl xanthine)로 분화를 유도한 지방세포 3T3-L1 (1×105/well) 세포주 기준으로 열수 추출물 31.2~500 ug/ml 과 80 중량% 에탄올 추출물 250~1,000 ug/ml 의 농도에서 지방세포의 분화를 억제함으로서, 중성지방의 축적을 억제하는 효능을 보유하는 것을 특징으로 하는 비만의 예방, 개선 또는 치료를 위한 조성물.
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- 아로니아 및 오미자 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 비만 예방 또는 개선을 위한 건강기능식품 조성물로써,
아로니아 및 오미자의 혼합 중량비는 5:1로 제조한 혼합 추출물이고, 상기 아로니아 및 오미자 혼합 추출물은 세포 독성이 없으며, 인슐린(Insulin), 덱사메타손(Dexamethasone) 및 IBMX(Isobutyl methyl xanthine)로 분화를 유도한 지방세포 3T3-L1 (1×105/well) 세포주 기준으로 열수 추출물 31.2~500 ug/ml 과 80 중량% 에탄올 추출물 250~1,000 ug/ml 의 농도에서 지방세포의 분화를 억제함으로써, 중성지방의 축적을 억제하는 효능을 보유하는 것을 특징으로 하는 비만 예방 또는 개선을 위한 건강기능식품 조성물.
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