KR101863694B1 - 홍삼 에탄올 추출물의 정제 분획물을 포함하는 항산화용 화장료 조성물 - Google Patents
홍삼 에탄올 추출물의 정제 분획물을 포함하는 항산화용 화장료 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 홍삼 에탄올 추출물의 정제 분획물을 포함하는 항산화용 화장료 조성물에 관한 것으로, 정제 분획물 제조시 사용되는 탈착 용매의 에탄올 농도를 조절함으로써, 항산화 효과가 우수하면서도 제형 안정성이 높은 홍삼 에탄올 정제 분획물 얻을 수 있으므로, 본 발명에 따른 홍삼 에탄올 추출물의 정제 분획물을 항산화 효과를 요하는 화장료 조성물, 건강보조식품 조성물 및 약학적 조성물에 이용할 수 있다.
Description
홍삼 에탄올 추출물의 정제 분획물을 포함하는 항산화용 화장료 조성물에 관한 것이다.
자유라디칼이나 활성산소는 미토콘드리아, 식세포 또는 세포질 중 크산틴 산화효소(xanthine oxidase)나 글루타티온 환원 효소(glutathion reductase)에 의한 정상적인 대사 과정 또는 자외선, 외부자극에 의한 염증 반응 등 여러 가지 생물학적 반응에 의해 형성된다. 이렇게 반응성이 큰 활성산소와 자유라디칼, 특히 그 중에서도 반응성과 파괴성이 매우 큰 과산화물(superoxide) 음이온 라디칼이 인체 내에 과량으로 축적되면, 염증 반응 이외에도 세포의 노화를 비롯하여 뇌졸중, 심근경색, 당뇨병성 혈관 장애, 고지혈증, 당뇨병, 신경퇴행성 질환 등 각종 인체 질환을 일으키게 된다. 따라서, 상기 활성산소 또는 자유라디칼을 제거할 수 있는 소거물질은 이들 질병을 예방 또는 치료하는 효과가 있는 것으로 보고되고 있으며, 미생물 및 식물체로부터 다양한 활성산소(또는 자유라디칼) 소거 물질을 개발하기 위한 연구가 계속되고 있다.
한편, 인삼(Panax Ginseng)은 한의학뿐만 아니라 민간요법으로 널리 알려져 사용되어 온 오가피과 인삼속의 한방 약제로서, 오랜 기간 약재로 사용되면서 안전성과 효능이 검증된 소재이다. 상기 인삼은 방사선에 대한 방어 효과, 알킬화제에 의한 염색체 이상 및 미세핵 방어 효과, 배양세포에서 돌연변이 감소 및 세포 변형 감소 효과가 있음이 보고되어 있다. 특허문헌 1에는 인삼이 나타내는 항산화 효과에 관하여 특정 진세노사이드를 증가시키는 방법이 보고된 바 있다.
이와 같이, 인삼이 나타내는 생리활성이 특정 진세노사이드에 의한 것임이 보고된 바 있지만, 개별적인 진세노사이드의 효과외에 인삼 유래 추출물을 컬럼으로 분획시 얻어지는 특정 분획물의 항산화 효과에 대해서는 아직까지 연구가 이루어지지 않은 실정이다.
본 발명자들은 인삼 유래 추출물을 컬럼을 이용하여 정제하여 항산화 효과를 나타내는 분획물을 조사하였고, 에탄올 추출 후 컬럼을 이용하여 정제시 탈착 용매로서 특정 농도의 에탄올 수용액을 사용하여 얻어진 분획물이 우수한 항산화 효과를 가지는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 홍삼 에탄올 추출물의 정제 분획물을 포함하는 항산화용 화장료 조성물, 항산화용 건강보조식품 및 산화 스트레스 관련 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명의 일 측면은 홍삼 에탄올 추출물의 정제 분획물을 포함하는 항산화용 화장료 조성물, 항산화용 건강보조식품 및 산화 스트레스 관련 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명에서 일컫는 "추출물"은 원료로부터 임의의 방법으로 추출된 물질을 의미하며, 이렇게 추출된 추출액, 이로부터 얻을 수 있는 농축액, 상기 농축액의 건조물 및 분말을 제한 없이 모두 포함하는 의미로 사용된다.
이하, 본 발명을 상세히 설명한다.
본 발명의 일 측면은 홍삼 에탄올 추출물의 정제 분획물을 포함하는 항산화용 화장료 조성물, 항산화용 건강보조식품 및 산화 스트레스 관련 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
상기 추출물은 원료 또는 이의 건조물로부터 추출하여 얻을 수 있으며, 상기 추출물의 원료는 재배한 것 또는 시판되는 것 등 제한 없이 사용할 수 있다.
상기 추출물을 원료로부터 추출하여 수득할 때, 추출 방법으로는 용매 추출법, 초음파 추출법, 여과법 및 환류 추출법 등 종래 알려진 통상적인 추출 방법을 모두 사용할 수 있으며, 바람직하게는 용매 추출법이나 환류 추출법을 이용함으로써 제조할 수 있다. 상기 추출 과정은 수회 반복할 수 있으며, 이후에 농축 또는 동결건조 등의 단계를 추가적으로 거칠 수 있다. 구체적으로, 수득한 추출물을 감압 농축하여 농축액을 얻고, 상기 농축액을 동결건조시킨 후 분쇄기를 이용하여 고농도의 추출 분말을 제조할 수 있다.
상기 추출물은 에탄올 또는 에탄올이 포함된 수용액을 추출 용매로 하여 추출될 수 있고, 바람직하게는 에탄올 수용액으로 추출될 수 있다. 상기 에탄올 수용액은 50 내지 70%(v/v)일 수 있고, 바람직하게는 50 내지 65%(v/v)일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 50 내지 60%(v/v)일 수 있으나, 이에 한정하지 아니한다. 에탄올 수용액의 농도가 50%(v/v) 미만인 경우에는 독성이 적은 장점은 있지만 에탄올을 적정 함량으로 추출할 때 비해서 상대적으로 항산화 효과는 떨어진다. 또한, 70%(v/v)를 초과할 경우 효과는 더 좋아지지 않지만 독성이 높아지고, 특히 제조 과정에서 에탄올 증기에 의한 폭발 위험이 있는 단점이 있다.
상기 정제 분획물 제조시 사용되는 컬럼에는 실리카 겔, 활성 알루미나, 합성 고분자, 규산마그네슘, 활성탄, 셀룰로오스, 이온 교환 수지 등의 충진제가 이용될 수 있고, 방향족계 합성수지가 충진제로 이용되는 것이 바람직하며, Diaion HP-20 합성 흡착제가 충진제로 이용되는 것이 더욱 바람직하나, 이에 한정되지 아니한다. 상기 컬럼을 이용한 분리는 원하는 순도의 분획물이 정제될 때까지 1회 내지 수회에 걸쳐 수행할 수 있으며, 필요에 따라 농축, 재결정을 실시할 수 있다.
상기 정제 분획물 제조시 탈착 용매는 에탄올 수용액이고, 상기 에탄올 수용액은 5 내지 30%(v/v)일 수 있고, 바람직하게는 5 내지 25%(v/v)일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 5 내지 20%(v/v)일 수 있으나, 이에 한정하지 아니한다. 탈착 용매로 사용되는 에탄올 수용액의 농도가 하한값 미만일 경우에는 얻어지는 분획물의 항산화 효과가 낮아지는 문제점이 있다. 상한값을 초과하는 경우에는 화장료 조성물에 포함시킬 때에 제형 입자 안정도가 떨어지며, 항산화 효과가 낮아진다. 또한, 상한값을 초과하는 경우 분획물이 높은 농도의 에탄올을 함유하게 되고, 별도의 에탄올 제거 공정 없이 분획물을 항산화용 화장료 조성물에 첨가시 피부 자극, 독성을 유발할 수 있고, 물성의 안정도 저하를 초래할 수 있다. 이러한 문제점을 해결하기 위해서 별도의 공정을 통하여 에탄올을 제거할 경우 분획물의 항산화 효능이 떨어지며, 에탄올 제거 공정이 추가됨으로써 원료 생산비가 증가되는 단점이 있다. 또한, 상기 에탄올 수용액이 5 내지 30%(v/v)일 경우에는 항산화 효과가 우수하나, 20%(v/v) 초과 내지 30%(v/v) 에탄올 수용액을 탈착 용매로 사용하여 얻어진 분획물을 화장료 조성물에 포함시킬 경우 입자 안정도가 떨어져 입자가 형성되지 않을 수 있다. 따라서, 탈착 용매로 5 내지 30%(v/v) 에탄올 수용액을 사용하여 얻어진 분획물은 약학적 조성물 또는 건강보조 식품에 활용할 수 있고, 탈착 용매로 5 내지 20%(v/v) 에탄올 수용액을 사용하여 얻어진 분획물은 화장료 조성물에 사용하기에 적합하다.
상기 정제 분획물 제조시 탈착 용매인 에탄올 수용액 첨가시에는 에탄올 수용액을 컬럼에 흘려주는 것, 예를 들면 가압하여 흘려주는 것을 포함한다.
본 발명의 한 실시예에 있어서, 홍삼에 55%(v/v) 에탄올 수용액을 가하여 홍삼 에탄올 추출물을 제조하고, 제조된 추출물을 HP-20 컬럼에 넣어 흡착시킨 후 컬럼에 흡착된 성분을 다양한 농도의 에탄올 용매(0(정제수), 5, 10, 20, 30, 50, 95%(v/v))를 이용하여 탈착시켜 분획물을 수득하였을 때, 10~30%(v/v) 에탄올 수용액을 탈착 용매로 이용하여 얻어낸 분획물이 홍삼 알코올 추출 농축액보다 높은 항산화 효과를 나타내고, 각 분획물들을 유화제형의 화장료 조성물에 5%씩 첨가하였을 때, 20%(v/v) 이하의 에탄올 수용액을 탈착 용매로 이용하여 얻어낸 분획물이제형 입자 안정도가 높다(표 1 및 도 1 참조).
본 발명에 따른 화장료 조성물은 활성 산소종의 작용에 의해 악화된 피부 상태를 개선하기 위한 용도로 이용될 수 있다. 보다 구체적으로, 피부의 산화에 의한 손상, 예를 들면 반점(갈색반), 주근깨, 피부균열, 자외선 손상(햇볕에 탐), 피부 표면의 주름 생성, 탄력의 감소와 같은 증상들을 예방 또는 개선할 수 있으므로, 피부 노화 억제용, 피부 탄력 유지용, 피부 주름 개선용, 피부 미백용으로 사용할 수 있다. 또한, 본 발명의 분획물은 항산화 활성이 있으므로, 화장품 자체의 산화를 방지함으로써 화장품의 품질을 유지하는데도 매우 유용하게 사용될 수 있다.
상기 홍삼 에탄올 추출물의 정제 분획물은 항산화 활성을 가지는 화장료 조성물에 0.01 내지 40중량%로 포함될 수 있고, 바람직하게는 0.01 내지 20중량%로 포함될 수 있다. 그 함량이 0.01중량% 미만일 경우에는 항산화 활성이 미미할 수 있으며, 40중량%를 초과할 경우에는 투입 농도대비 항산화 효과가 상대적으로 낮을 수 있다.
본 발명의 화장료 조성물에 있어서, 상기 분획물은 화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 기제, 보조제 및 첨가제를 사용하여 액체 또는 고체 형태로 제조될 수 있다. 액체 또는 고체 형태의 화장품으로는, 예를 들면 이에 한정되지는 않으나 화장수, 크림제, 로션제, 입욕제 등의 형태를 포함할 수 있다.
화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 기제, 보조제 및 첨가제는 특별히 제한되지 않으며, 예를 들면 물, 알코올, 프로필렌글리콜, 스테아르산, 글리세롤, 세틸알코올, 유동 파라핀 등이 있다.
또한, 본 발명은 상기 분획물을 유효성분으로 포함하는 건강보조식품을 제공한다.
본 발명에 따른 건강보조식품은 항산화 효과가 우수하므로, 산화 스트레스를 예방하기 위해 섭취할 수 있다. 상기 분획물은 본 발명의 항산화 효과 증진용 건강보조식품에 0.01 내지 10중량%로 포함되는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 0.05 내지 8중량%로 포함될 수 있다. 그 함량이 0.01중량% 미만일 경우에는 건강보조식품의 항산화 증진 효과가 미미할 수 있으며, 10중량%를 초과할 경우에는 첨가 농도 대비 항산화 증진 효과가 상대적으로 낮을 수 있다.
상기 건강보조식품으로는 그 종류가 한정되는 것은 아니나, 예를 들어 통상적인 기호성 식품 즉, 라면, 생면 등의 면류, 두부, 시리얼, 빵류, 츄잉 껌, 사탕, 과자류 등에 첨가하여 통상적으로 알려진 방법에 의하여 각종 식품으로 제조할 수 있고, 식용가능한 색소로서 적용할 수도 있다. 또한, 정제, 과립제, 환제, 경질캅셀제, 연질캅셀제 또는 액제 제형 등 일반적인 제형으로 제형화 될 수 있으며, 생즙, 파우치, 음료, 또는 다류 등으로 제조될 수도 있다. 상기한 성분 이외에 다른 성분은 제형에 따라 당업자가 적절하게 선택하여 배합할 수 있음은 물론이다.
또한, 본 발명의 건강보조식품에 포함되는 분획물은 항산화 활성이 우수하여 산화에 의해서 일어나는 식품의 냄새나 풍미의 변화, 유지의 산패, 그리고 식품의 변색을 효과적으로 방지할 수도 있다. 따라서, 본 발명의 분획물을 통상의 각종 식품류에 배합함으로써 이들 식품류를 보존하거나 식품의 신선도 및 품질을 장기간에 걸쳐 유지하기 위해 사용할 수도 있다.
상기 식품류로는 전형적인 식품뿐만 아니라, 음료(알콜성 음료도 포함함), 과실 및 그의 가공식품(예: 과일통조림, 병조림, 잼, 마말레이드 등), 어류, 육류 및 그 가공식품(예: 햄, 소시지 콘비이프 등), 빵류 및 면류(예: 우동, 메밀국수, 라면, 스파게이트, 마카로니 등), 과즙, 각종 드링크, 쿠키, 엿, 유제품(예: 버터, 치이즈 등), 식용 식물유지, 마아가린, 식물성 단백질, 레토르트 식품, 냉동식품, 각종 조미료(예: 된장, 간장, 소스 등) 등을 포함한다.
또한, 본 발명은 상기 분획물을 유효성분으로 포함하는 산화 스트레스 관련 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 약학적 조성물은 항산화 효과가 우수하므로, 산화 스트레스 관련 질환에 적용될 수 있다. 산화 스트레스 관련 세포의 병태로서는 미토콘드리아 기능이상, 라이소좀 및 프로테아좀 기능 이상, 핵산(예를 들어, RNA 및 DNA)의 산화, 아폽토시스의 개시, 지질 퍼옥사이드화 및 막지질 환경의 파괴가 있을 수 있으나, 이에 한정되지 아니한다. 본 발명의 약학적 조성물을 적용할 수 있는 질환으로는 뇌졸중, 심근경색, 당뇨병성 혈관장애, 고지혈증, 당뇨병, 간질, 파킨슨씨병 및 치매로 구성된 군으로부터 선택되는 질환이 있으나, 이에 한정하지 아니하며 본 발명에 따른 약학적 조성물은 활성 산소로 인해 발생하는 질환 또는 증상을 완화시키는데 사용될 수 있다.
본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여가 가능하다. 본 발명의 약학적 조성물의 투여 경로는 이들로 한정되는 것은 아니지만 예를 들면, 구강, 정맥내, 근육내, 동맥내, 골순, 경막내, 심장내, 경피, 피하, 복강내, 비강내, 장관, 설하 또는 국소 투여가 가능하다.
이와 같은 임상 투여를 위해 본 발명의 약학적 조성물은 공지의 기술을 이용하여 경구투여, 비경구 투여용, 주사용 등의 적합한 제형으로 제제화할 수 있다. 예를 들어, 경구 투여 시에는 불활성 희석제 또는 식용 담체와 혼합하거나, 경질 또는 연질 젤라틴 캡슐에 밀봉되거나 또는 정제로 압형하여 투여할 수 있다. 경구 투여용의 경우, 활성 화합물은 제제화에 필요한 통상의 성분들과 혼합되어 섭취형 정제, 협측 정제, 트로키제(troches), 로진지(lozenge), 수용성 또는 유성현탁액, 조제분말 또는 과립, 에멀젼, 하드 또는 소프트 캡슐, 엘릭시르(elixirs), 서스펜션, 시럽, 웨이퍼 등의 형태로 사용될 수 있다. 이때, 정제, 캡슐 등의 제형으로 제제화하기 위해 락토오스, 사카로오스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아밀로펙틴, 셀룰로오스 또는 젤라틴과 같은 결합제; 디칼슘 포스페이트와 같은 부형제; 옥수수 전분 또는 고구마 전분과 같은 붕괴제; 스테아린산 마그네슘, 스테아린산 칼슘, 스테아릴푸마르산 나트륨 또는 폴리에틸렌글리콜 왁스와 같은 윤활유 등을 혼합할 수도 있다. 캡슐 제형의 경우는 상기에서 언급한 물질 이외에도 지방유와 같은 액체 담체를 혼합할 수도 있다.
또한, 비경구 투여는 피하주사, 정맥주사, 근육내 주사, 흉부내 주사 주입방식과 점막, 또는 국소에 적용되는데, 분산제, 좌제, 분제, 에어로졸(비강 스프레이 또는 흡입제), 겔, 현탁액제(수성, 또는 비수성 액상 현탁액, 수중유 에멀젼 또는 유중수 에멀젼), 용액제 등 비경구 투여에 적합한 액상 투여 형태 등에 의한다. 비경구 투여용 제형으로 제제화하기 위해서는 상기 조성물을 안정제 또는 완충제와 함께 물에서 혼합하여 용액으로 제조하고, 이를 앰플 또는 바이알의 단위 투여형으로 제제화할 수 있다.
상기와 같은 본 발명의 약학적 조성물의 유효투입량은 환자의 연령, 신체적 조건, 몸무게 등의 상태를 고려하여 임상의 판단에 따라 필요한 범위로 조절될 수 있다. 일반적으로, 상기 약학적 조성물의 유효투입량은 성인 환자 체중 1kg 당 1 내지 20㎎/일이고, 바람직하기로는 5 내지 10㎎/일이며, 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정 시간 간격으로 1일 수회, 바람직하기로는 하루 2회 내지 5회 분할 투여될 수 있다.
본 발명에 따른 홍삼 알코올 추출물의 정제 분획물은 항산화 효과가 우수하고, 화장료 조성물에 첨가하였을 때 제형 안정도가 높으므로, 항산화 효과를 요하는 화장료 조성물, 건강보조식품 조성물 및 약학적 조성물에 이용할 수 있다.
도 1은 본 발명에 따른 홍삼 에탄올 추출물의 정제 분획물을 유화제형의 화장료 조성물에 첨가하였을 때, 입자 형성 정도를 관찰한 사진이다.
이하, 본 발명을 제조예, 실시예 및 실험예에 의해 상세히 설명한다.
단, 하기 제조예, 실시예 및 실험예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 제조예, 실시예 및 실험예에 의해 한정되는 것은 아니다.
홍삼 추출물의 제조
1-1. 홍삼 물 추출물 제조
홍삼 1kg에 정제수 5.5배수를 가하여 70℃에서 8시간 동안 3회 추출한 다음 저온에서 원심분리를 한 후 감압 농축하여 수분 함량 40%인 홍삼 물 추출 농축액 50g 이상을 얻었다.
1-2. 홍삼 에탄올 추출물 제조
홍삼 1kg에 55%(v/v) 에탄올을 5.5배수 가하여 70℃에서 8시간 동안 3회 추출하였다. 추출물을 감압 농축기를 이용하여 수분 함량 40%인 홍삼 알코올 추출 농축액 50g 이상을 얻었다.
1-3. 에탄올 추출물의 정제 분획 제조
상기 실시예 1-2에서 얻어진 에탄올 추출 농축액을 HP-20 컬럼(Mitsubishi Chemical Industry)에 넣어 흡착시켰다. 이후 정제수로 컬럼에 흡착되지 않은 부분을 세척 제거한 후 컬럼에 흡착된 성분을 다양한 농도의 에탄올 용매(0(정제수), 5, 10, 20, 30, 50, 95%(v/v))를 이용하여 탈착시켜 분획물을 수득하였다.
정제 분획물 제조시 사용된 탈착 용매의 알코올 농도에 따른 항산화 효과 비교
상기 실시예 1에서 얻어진 홍삼 물 추출물, 홍삼 에탄올 추출물, 홍삼 에탄올 추출물의 HP-20 컬럼 분획물의 항산화 효과를 확인하였다.
DPPH 라디칼 포착능을 확인하기 위하여 Yasushi 등의 문헌("Stopped-flow and spectrophotometric study on radical scavenging by tea catechins and model compound", Chem Pharm Bull 47: 1369-1374(1999))을 변형하여 실험하였다. 2.0×10-4 M 농도가 되도록 에탄올에 용해한 DPPH 1.5㎖, 시료 0.15㎖ 및 증류수 1.35㎖를 첨가하여 30분 동안 25℃에서 반응시킨 후, 520nm에서 흡광도를 측정하였다. 시료의 경우 각각 10mg/㎖ 농도로 제조한 후, 이 용액을 1/2로 희석하고(즉, 5mg/㎖), 희석된 용액을 1/2씩 단계적으로 희석하여 0.0097mg/㎖까지 희석한 각각의 용액을 사용하였다(10, 5, 2.5, 1.25, 0.625, 0.3125, 0.1562, 0.0781, 0.039, 0.0195, 0.0097mg/㎖). 양성대조군으로 L-아스코르브산을 사용하였다. 각 시료별 항산화 효과 비교는 활성산소를 50% 제거할 때의 농도 값인 IC50값을 비교하여 평가하였다.
| 시료명 | IC50 |
| 양성 대조군 | 0.006 |
| 홍삼 물 추출 농축액 | 1.67 |
| 홍삼 알코올 추출 농축액 | 1.58 |
| 알코올 추출-정제수 분획 | 2.98 |
| 알코올 추출-95% EtOH 분획 | 0.68 |
| 알코올 추출-50% EtOH 분획 | 0.62 |
| 알코올 추출-30% EtOH 분획 | 0.42 |
| 알코올 추출-20% EtOH 분획 | 0.38 |
| 알코올 추출-10% EtOH 분획 | 0.36 |
| 알코올 추출-5% EtOH 분획 | 0.58 |
그 결과, 홍삼 알코올 추출 농축액을 HP-20 컬럼에 흡착시켜 에탄올로 탈착한 분획물들은 IC50 값이 1 이하로 낮은 농도에서도 항산화 효과를 나타내는 반면, 홍삼 물 또는 알코올 추출 농축액은 IC50 값이 1.5 이상으로 낮은 항산화 효과를 나타내었다.
또한, 알코올 추출 후 HP-20으로 정제하여도, 탈착시 사용하는 용매에 따라서 항산화 효과가 다른 것을 알 수 있었다. 구체적으로, 물을 용매로 사용한 경우에는 IC50 값이 2.98로서 HP-20 컬럼으로 정제하지 않은 경우보다도 IC50 값이 1.8배 높아 항산화 효과가 낮은 것을 알 수 있었다. 반면에, 에탄올 수용액을 탈착 용매로 이용할 경우 얻어진 분획물이 항산화 효과가 높았다. 예를 들면, 95%(v/v) 에탄올을 이용하여 얻은 분획의 경우에는 홍삼 알코올 추출 농축액보다 2.32배 높은 항산화 효과를 보였다. 또한 10~30%(v/v)의 에탄올을 이용하여 얻어낸 분획물은 홍삼 알코올 추출 농축액보다 최대 4.38배 높은 항산화 효과를 보였고, 특히 10%~20%(v/v) 에탄올을 이용하여 얻은 분획의 경우에 항산화 효과가 가장 우수한 것을 알 수 있었다.
이를 통해 홍삼 농축액 중 항산화 효과가 높은 성분들은 HP-20 컬럼에 다수 흡착되며, 이를 효능 성분은 10~30% 에탄올 용매를 사용할 경우 가장 효과적으로 탈착이 되기 때문에 보다 높은 항산화 효능을 지닌 분획물을 얻을 수 있음을 알 수 있었다.
정제 분획물의 제형 안정성 확인
사용된 용매에 따른 각 분획물의 제형 안정성을 확인하였다. 유화 제형에 상기 실시예 2에서 얻은 분획물을 5중량%씩 첨가한 후 현미경으로 입자 상태를 확인하였다. 유화 제형의 조성은 하기 표 2와 같다.
| 원료명 | 함량(중량%) |
| 정제수 | 잔량 |
| 스테아릴 알코올 | 0.8 |
| 유화제 | 4.2 |
| 보조유화제 | 2.7 |
| 쉐어버터 | 2.0 |
| 실리콘계 오일 | 6.0 |
| 천연계 오일 | 2.0 |
| DPG | 5.0 |
| 글리세린 | 10.0 |
| D-판테놀 | 1.0 |
| 아리스토플렉스(Aristoflex) | 0.32 |
| 루브라젤 CG(Lubrajel CG) | 2.0 |
| DC-2501 화장용 왁스(cosmetic wax) | 1.0 |
| 향료 | 0.1 |
그 결과, 30%(v/v) 에탄올을 탈착 용매로 사용한 경우, 분획물에 포함된 알코올 함량이 높아 제형 입자 안정도가 떨어지고, 50%(v/v) 에탄올, 95%(v/v) 에탄올을 탈착 용매로 사용한 경우에는 입자가 형성되지 않는 반면, 5%(v/v)~20%(v/v) 에탄올을 탈착 용매로 사용한 경우에는 입자 안정도가 우수한 것이 확인되었다. 상기와 같은 결과로부터, 30%(v/v) 이하의 알코올로 분획할 때 항산화 효과가 가장 우수하고, 제형 안정성면에서는 20%(v/v) 이하의 에탄올 분획을 사용할 때에 가장 안정한 것을 알 수 있었다.
추출물의 사포닌 함량 측정
본 발명의 분획물의 항산화 효과가 사포닌에 의한 것인지 확인하기 위하여, 상기 실시예 1에서 얻어진 홍삼 정제수 추출 농축액과 홍삼 알코올 추출 농축액에 포함된 개별 진세노사이드 함량을 확인하였다(표 3). 또한, 실시예 1의 홍삼 에탄올 추출물을 HP-20컬럼에 로딩한 후 다양한 농도의 에탄올 수용액을 탈착 용매로 사용하여 얻은 분획물의 진세노사이드 함량을 확인하였다(표 4). 진세노사이드 함량은 HPLC를 이용하고, 건강기능식품 공전에 명시된 통상적인 시험 방법을 이용하여 측정하였다.
| Rb1 | Rb2 | Rc | Rd | Rg3s | Rg3r | Re | Rf | Rg1 | Rg2s | Rh1 | 총량 | |
| 홍삼 정제수 추출 농축액 |
6.97 | 2.79 | 3.06 | 1.01 | 2.22 | 0.79 | 1.97 | 1.40 | 1.67 | 1.23 | 0.77 | 23.88 |
| 홍삼 에탄올 추출 농축액 |
5.87 | 19.38 | 22.67 | 7.99 | 1.72 | 0.88 | 16.90 | 3.40 | 5.96 | 3.01 | 0.40 | 88.18 |
| Rb1 | Rb2 | Rc | Rd | Rg3s | Rg3r | Re | Rf | Rg1 | Rg2s | Rh1 | 총량 | |
| 알코올 추출-95 % EtOH 분획 |
991.5 | 438.9 | 483.0 | 189.4 | 37.4 | 27.2 | 868.6 | 105.5 | 238.9 | 103.8 | 51.0 | 3535.2 |
| 알코올 추출-50% EtOH 분획 | 1045.8 | 460.9 | 507.7 | 181.2 | 22.2 | 13.5 | 1078.6 | 131.5 | 294.1 | 131.6 | 59.5 | 3926.6 |
| 알코올 추출-30% EtOH 분획 | 260.5 | 106.4 | 117.3 | 23.8 | 7.2 | 5.7 | 206.3 | 25.1 | 53.1 | 22.3 | 17.9 | 845.6 |
측정 결과, 홍삼 정제수 추출 농축액보다 홍삼 알코올 추출 농축액에 포함된 진세노사이드 총량이 높은 것을 알 수 있었다(표 3). 아울러, 알코올 추출 후 HP-20 컬럼을 이용하여 정제할 때에 사용된 탈착 용매의 에탄올 농도에 따라서, 에탄올 농도가 높을수록 진세노사이드 총량이 많아지는 것을 알 수 있었다(표 4).
이와 같이 홍삼 알코올 추출 농축액에 포함된 진세노사이드 양이 홍삼 정제수 추출 농축액에 비하여 많지만, 상기 실시예 2의 표 1에서 홍삼 알코올 추출 농축액과 홍삼 정제수 추출 농축액의 항산화 효과가 유사하므로, 본 발명의 홍삼 알코올 추출 농축액의 항산화 효과가 진세노사이드에 의한 것이 아니며, 진세노사이드 외의 다른 성분에 의한 것임을 알 수 있었다. 또한, 홍삼 알코올 추출 농축액의 정제 분획물 중 탈착 용매의 에탄올 함량이 50%(v/v) 수준까지는 올라갈수록 진세노사이드 양이 많아지는 반면 효능은 탈착 용매의 에탄올 함량이 10~30%(v/v)가 가장 높은 것으로 볼 때, 본 발명의 홍삼 알코올 추출 농축액의 HP-컬럼을 이용한 분획물의 항산화 효과 역시 진세노사이드에 의한 것은 아니고, 분획물 내에 포함된 성분에 의한 것임을 알 수 있다.
Claims (12)
- 홍삼 에탄올 추출물의 정제 분획물을 포함하는 항산화용 화장료 조성물로서,
상기 정제 분획물 제조시 탈착 용매는 5 내지 20%(v/v)의 에탄올 수용액인 항산화용 화장료 조성물. - 청구항 1에 있어서,
상기 에탄올 추출물 제조시 사용되는 추출 용매는 에탄올 수용액인 항산화용 화장료 조성물. - 청구항 2에 있어서,
상기 에탄올 수용액은 50 내지 70%(v/v)인 항산화용 화장료 조성물. - 청구항 1에 있어서,
상기 정제 분획물 제조시 사용되는 컬럼은 HP-20인 항산화용 화장료 조성물. - 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 청구항 1에 있어서,
상기 항산화용 화장료 조성물은 산화에 의한 피부의 노화 억제용, 피부 탄력 유지용, 피부 주름 개선용 및 피부 미백용으로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상인 항산화용 화장료 조성물. - 삭제
- 삭제
- 삭제
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