KR101976260B1 - 홍삼초의 제조 방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 홍삼초의 제조 방법에 관한 것으로, 누룩균으로 1차 발효한 후에, 초산균으로 2차 발효함으로써, 제조된 홍삼초 내의 진세노사이드 Rd, 컴파운드 O 및 F2 함량이 증가하므로, 본 발명의 제조 방법 및 이에 따른 홍삼초를 이들 진세노사이드의 효능을 필요로 하는 분야에서 유용하게 활용할 수 있다.

Description

홍삼초의 제조 방법{Method of Preparing Red-Ginseng Vinegar}

본 발명은 유효성분인 미량 진세노사이드가 강화된 홍삼초의 제조 방법에 관한 것이다.

인삼은 오가피과 인삼속의 한방 약제이며, 홍삼은 인삼의 뿌리를 쪄서 말리는 방법에 의해 제조된다. 인삼은 아미노산, 비타민, 유기산, 탄수화물, 각종 광물질을 포함하고 있어 강장 작용, 갈증 해소, 면역 기능 강화, 혈압, 당뇨, 피로 회복 등 각종 질병을 예방하고 치료하는 데 뛰어난 효과를 가진 약초로 알려져 있다.

이와 같은 효과는 주로 인삼 또는 홍삼 내에 함유된 진세노사이드에 의한 것이며, 특히 진세노사이드 Rd는 관절염 개선, 연골 재생, 콜라겐 형성 등의 효과를 가지는 것으로 알려져 있고, 진세노사이드 컴파운드 물질들은 면역 증강, 종양의 혈관신생 억제, 암세포 침윤 억제 및 암세포 증식 억제 등 여러 가지 우수한 효능을 지니고 있는 것으로 알려져 있으며, 진세노사이드 F2는 피부 염증에 효과가 우수한 것으로 알려져 있다. 이와 같이 생리 활성 효과가 우수하기 때문에, 건강식품 산업 분야에 있어서 이들 미량 진세노사이드들에 대해 점점 대량 공급이 요구되고 있는 실정이며, 미량 진세노사이드를 안정적이고 효율적으로 생산할 수 있는 제조 공정의 개선이 필요하다.

전술한 바와 같이 진세노사이드 성분들은 각각 다양한 약효를 나타내고, 그 구조에 따라 약효의 종류와 강도가 다르게 나타난다. 따라서, 원하는 진세노사이드를 강화하는 방법이 시도되어 왔다. 예를 들면 특허문헌 1에는 인삼 또는 홍삼 추출물에 오존을 처리하여 진세노사이드 Rg3가 강화된 인삼 또는 홍삼 추출물을 얻는 방법이 개시되어 있다. 진세노사이드 Rd, 진세노사이드 컴파운드 O 및 진세노사이드 F2를 강화시키는 기술은 현재까지 보고되지 않은 실정이다.

식초(vinegar)는 향신료로서 특히 신맛을 더해주는 역할을 한다. 또한 식초는 신맛을 내는 초산 이외에 발효 원료로부터 유래하는 각종 유효성분을 포함하도록 하여 건강보조식품과 같은 기능성 식초로서의 감식초나 홍삼초 등이 개발되어 있다. 특히, 홍삼초는 홍삼 자체의 뛰어난 약리 유효성분을 포함할 수 있기 때문에 건강보조식품으로 주목받고 있다.

본 발명자들은 홍삼초 내에 유효 성분인 진세노사이드를 강화시키기 위해서 연구하였으며, 발효 공정을 1차 누룩균 발효, 2차 초산균 발효로 하였을 때에 진세노사이드 Rd, 컴파운드 O 및 진세노사이드 F2를 포함하여 다양한 미량 진세노사이드가 원료인 홍삼에 비해서 현저히 강화되는 것을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.

한국 공개특허 제2012-0135784호

본 발명의 과제는 홍삼으로부터 전환사포닌이 강화된 발효물을 얻기 위해서 개선된 발효 공정을 제공하는 것이다.

상기 과제를 해결하기 위하여, 본 발명은 하기 단계를 포함하는 홍삼초의 제조 방법을 제공한다: 홍삼 분말을 누룩균으로 1차 발효하는 단계; 및 1차 발효에서 얻어진 발효물을 물과 혼합하여 초산균으로 2차 발효하는 단계.

본 발명의 홍삼초의 제조 방법을 이용하여 제조된 홍삼초의 경우 진세노사이드 Rd, 컴파운드 O 및 F2를 포함한 다양한 미량 진세노사이드 함량이 증가하므로, 이들 진세노사이드의 효능을 필요로 하는 약학적 조성물, 건강식품 조성물, 화장료 조성물에 원료로 이용가능하다.

도 1은 홍삼 미분을 누룩균으로 발효하였을 때 발효 효율성 결과를 나타낸다.
도 2는 발효 기간에 따른 pH 변화를 나타내는 그래프이다.
도 3은 본 발명의 홍삼초의 제조 방법을 적용하였을 때 최종 발효물 내의 진세노사이드 함량을 나타낸다.
도 4는 본 발명의 홍삼초의 항산화 효능을 나타낸다.
도 5는 본 발명의 홍삼초의 세포 활성 효과를 나타낸다.
도 6은 홍삼초의 보습 효과를 나타낸다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명은 하기 단계를 포함하는 홍삼초의 제조 방법을 제공한다: 홍삼 분말을 누룩균으로 1차 발효하는 단계; 및 1차 발효에서 얻어진 발효물을 물과 혼합하여 초산균으로 2차 발효하는 단계.

상기 홍삼 분말은 홍삼 자체 분말을 이용할 수 있고, 홍삼에 추가적인 가공을 실시한 후에 제조된 가공 홍삼을 분말로 제조하여 이용할 수 있다. 원료를 홍삼으로 하는 분말이라면 본 발명에 제한없이 적용가능하다.

상기 홍삼은 완전히 건조된 홍삼의 뇌두를 제거한 후 분쇄기를 이용하여 적정 수준으로 분말화시키는 것이 바람직하나 이제 한정하지 아니한다. 홍삼의 뇌두 부분은 수세가 제대로 되지 않을 경우 발효 중에 타 미생물에 의한 비정상적인 반응을 유발할 수 있다. 또한 홍삼을 적정 수준으로 분쇄할 경우 발효시 효율이 높아져 발효 시간을 줄일 수 있다.

누룩균은 홍삼 분말 대비 중량 기준으로 6중량% 내지 25중량%로 첨가될 수 있고, 바람직하게는 6중량% 내지 20중량%로 첨가될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 6중량% 내지 15중량%로 포함될 수 있으나, 이에 한정되지 아니한다. 하한값 미만으로 포함될 경우에는 홍삼 미분 대비 누룩균의 함량이 작아서, 발효 기간이 동일하더라도 전환사포닌의 양이 적을 수 있다. 상한값을 초과할 경우에는 누룩균 대비 홍삼 미분의 양이 적어서 전환 사포닌의 양이 감소할 수 있다.

1차 발효는 5일 내지 15일 동안 수행될 수 있으며, 바람직하게는 7일 내지 10일 동안 수행될 수 있으나, 이에 한정하지 아니한다. 1차 발효가 하한값 미만의 기간 동안 진행될 경우에는 누룩균에 의한 발효가 충분히 이루어지지 않기 때문에 2차 발효시 초산균의 배양이 충분하게 이루어지지 않는다. 상한값을 초과하는 기간 동안 진행될 경우에는 불필요한 배양 기간의 증가로 인해 원료의 제조 기간 및 단가가 상승하게 되며, 다른 미생물에 의한 오염이 발생하여 발효물이 부패할 위험성이 커질 수 있다.

초산균은 아세토박터속의 균이면 제한 없이 적용할 수 있으며, 초산균은 아세토박터 아세티(Acetobacter aceti)인 것이 바람직하지만 이에 한정하지 아니한다. 1차 발효 후 2차 발효 진행시에는 별도로 초산균을 접종하지 않을 수 있는데, 이는 1차 발효시에 누룩 발효에 의해 초산균 배양에 적합한 환경이 조성됨과 동시에, 공기 중에 노출된 면을 통해서 자연에 존재하는 초산균이 유입될 수 있기 때문이다. 자연적으로 유입되는 초산균 중에서도 아세토박터 아세티가 다량으로 유입되고 우점종이 된다. 발효 효율을 높이기 위해서 추가적으로 초산균을 접종할 수 있다.

2차 발효는 5일 내지 45일 동안 수행될 수 있고, 바람직하게는 5일 내지 40일 동안 수행될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 5일 내지 35일 동안 수행될 수 있으나, 이에 한정하지 아니한다. 하한값 미만으로 발효가 진행될 경우에는 사포닌의 전환이 충분히 일어나지 않기 때문에, 진세노사이드 Rd, 컴파운드 O 및 F2를 포함한 미량 진세노사이드의 함량이 낮아질 수 있다. 상한값을 초과하여 발효가 진행될 경우에는 미량 진세노사이드가 모두 아글리콘 등으로 전환되어 미량 진세노사이드의 함량이 낮아질 수 있는 문제점이 있다. 또한 홍삼초에 생성된 유기산에 의한 추가적인 가수분해를 저해하기 위하여 2차 발효가 종료된 후 중화 과정을 거칠 수 있다.

2차 발효 기간에 있어서, 전환사포닌 중에서 Rd를 표적으로 하는 경우에는 2차 발효는 5일 내지 30일 동안 수행할 수 있고, 바람직하게는 5일 내지 27일 동안 수행될 수 있다. 상기 범위의 기간 동안 2차 발효를 진행함으로써, Rd 함량이 높은 발효물을 얻을 수 있다.

2차 발효인 초산균 발효는 종래에 전환사포닌 제조시 사용되었던 방법인 산 처리 방법으로 대체될 수 없다. 홍삼을 원료로 하고, 산을 처리하는 경우 진세노사이드가 강화되기도 하지만, 일부 진세노사이드의 경우 그 양이 감소된다. 예를 들면, 약산으로 가수분해시에는 진세노사이드 Rg3가 다량으로 생성되는 반면에, 본 발명의 경우와 같이 초산균 발효를 실시할 경우에는 Rg3가 분해되어 없어지므로(표 4), 본 발명의 진세노사이드 Rd, 컴파운드 O 및 F2는 산 가수분해와는 다른 방식으로 사포닌이 전환되는 것을 알 수 있다. 또한 산가수분해시 용매나 온도 조건에 따라 사포닌의 전환이 급격하게 진행되면, 미량 진세노사이드보다는 아글리콘과 같은 성분이 주요하게 형성될 수 있다. 이 때문에 진세노사이드 Rd, 컴파운드 O 및 F2를 강화시키기 위해서는 2차 발효는 초산균 발효로 진행되어야 한다.

1차 발효 및 2차 발효는 상온에서, 예를 들면 15℃ 내지 35℃에서 실시될 수 있다. 상온 범위 내에서 실시됨으로써, 누룩균과 초산균의 생장과 물질대사가 이루어지며, 최종 산물에서 진세노사이드 Rd, 컴파운드 O 및 F2를 포함하는 미량 진세노사이드가 강화된다. 상기 온도 범위를 벗어나서 실시될 경우 저온에서는 미생물 생장에 문제가 생겨 발효 효율이 떨어지고, 고온에서는 미생물이 사멸하거나 열에 의한 가수분해가 진행되어 원하는 미량 진세노사이드의 전환 정도가 낮을 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 홍삼초를 제공한다.

상기 홍삼초는 Rd, 컴파운드 O 및 F2로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상이 강화된 홍삼초이며, 상기 Rd는 8㎍/㎖ 내지 20㎍/㎖일 수 있고, 컴파운드 O는 0.3㎍/㎖ 내지 5㎍/㎖일 수 있으며, F2는 1㎍/㎖ 내지 10㎍/㎖일 수 있고, 바람직하게는 Rd는 8㎍/㎖ 내지 17㎍/㎖일 수 있고, 컴파운드 O는 0.3㎍/㎖ 내지 4㎍/㎖일 수 있으며, F2는 1㎍/㎖ 내지 7㎍/㎖일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 Rd는 8㎍/㎖ 내지 15㎍/㎖이고, 컴파운드 O는 0.3㎍/㎖ 내지 3㎍/㎖이며, F2는 1㎍/㎖ 내지 5㎍/㎖일 수 있다. 홍삼초에 포함되는 진세노사이드 Rd, 컴파운드 O, 및 F2의 함량이 하한값 미만일 경우에는 원하는 만큼의 생리 효과를 얻을 수 없다.

또한 본 발명은 상기 방법으로 제조된 홍삼초를 함유하는 항산화용 화장료 조성물을 제공한다. 예를 들면, 본 발명에 따른 화장료 조성물은 활성 산소종의 작용에 의해 악화된 피부 상태를 개선하기 위한 용도로 이용될 수 있다. 보다 구체적으로, 피부의 산화에 의한 손상, 예를 들면 반점(갈색반), 주근깨, 피부 균열, 자외선 손상(햇볕에 탐), 피부 표면의 주름 생성, 탄력의 감소와 같은 증상들을 예방 또는 개선할 수 있으므로, 피부 노화 억제용, 피부 탄력 유지용, 피부 주름 개선용, 피부 미백용으로 사용할 수 있다. 또한, 본 발명의 홍삼초는 항산화 활성이 있으므로, 화장품 자체의 산화를 방지함으로써 화장품의 품질을 유지하는데도 매우 유용하게 사용될 수 있다.

또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 홍삼초를 함유하는 보습용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 홍삼초는 항산화용 또는 보습용 화장료 조성물에 포함될 수 있으나, 이에 한정되지 않으며 항산화 효과, 세포 활성 효과, 보습 효과를 필요로 하는 화장료 조성물에 포함될 수 있다.

본 발명의 홍삼초는 화장료 조성물에 0.01 내지 30중량%로 포함될 수 있고, 바람직하게는 0.01 내지 20중량%로 포함될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 0.01 내지 10중량%로 포함될 수 있고, 보다 더욱 바람직하게는 0.01 내지 5중량%로 포함될 수 있다. 그 함량이 0.01중량% 미만일 경우에는 홍삼초에 의한 효과가 미미할 수 있으며, 30중량%를 초과할 경우에는 투입 농도 대비 홍삼초에 의한 효과가 상대적으로 낮을 수 있다.

상기 화장료 조성물은 화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 기제, 보조제 및 첨가제를 사용하여 액체 또는 고체 형태로 제조될 수 있다. 액체 또는 고체 형태의 화장품으로는, 예를 들면 이에 한정되지는 않으나 화장수, 크림제, 로션제, 입욕제 등의 형태를 포함할 수 있다.

화장품 분야에서 통상적으로 사용되는 기제, 보조제 및 첨가제는 특별히 제한되지 않으며, 예를 들면 물, 알코올, 프로필렌글리콜, 스테아르산, 글리세롤, 세틸알코올, 유동 파라핀 등이 있다.

상기 화장료 조성물은 본 발명의 홍삼초뿐만 아니라, 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.

상기 화장료 조성물은 본 기술 분야에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.

상기 화장료 조성물의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.

상기 화장료 조성물의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.

상기 화장료 조성물의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸카보네이트, 에틸아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.

상기 화장료 조성물의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.

상기 화장료 조성물의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 오일, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.

상기 화장료 조성물은 단독 또는 중복 도포하여 사용하거나, 본 발명 이외의 다른 화장료 조성물과 중복 도포하여 사용할 수 있다. 또한 본 발명에 따른 화장료 조성물은 통상적인 사용 방법에 따라 사용될 수 있으며, 사용자의 피부 상태 또는 취향에 따라 그 사용 횟수를 달리할 수 있다.

상기 화장료 조성물이 비누, 계면활성제 함유 클렌징 또는 계면활성제 비함유 클렌징 제형일 경우, 피부에 도포한 후 닦아내거나 떼거나 물로 씻어낼 수도 있다. 구체적인 예로서, 상기 비누는 액상비누, 가루비누, 고형비누 및 오일비누이며, 상기 계면활성제 함유 클린징 제형은 클렌징 폼, 클렌징 워터, 클렌징 수건 및 클렌징 팩이며, 상기 계면활성제 비함유 클렌징 제형은 클렌징 크림, 클렌징 로션, 클렌징 워터 및 클렌징 겔이며, 이에 한정되는 것은 아니다.

또한, 본 발명은 상기 방법으로 제조된 홍삼초를 포함하는 건강보조식품을 제공한다.

본 발명에 따른 건강보조식품은 항산화 효과가 우수하므로, 산화 스트레스를 예방하기 위해 섭취할 수 있다. 상기 홍삼초는 본 발명의 항산화 효과 증진용 건강보조식품에 0.01 내지 10중량%로 포함되는 것이 바람직하며, 더욱 바람직하게는 0.05 내지 8중량%로 포함될 수 있다. 그 함량이 0.01중량% 미만일 경우에는 건강보조식품의 항산화 증진 효과가 미미할 수 있으며, 10중량%를 초과할 경우에는 첨가 농도 대비 항산화 증진 효과가 상대적으로 낮을 수 있다.

상기 건강보조식품으로는 그 종류가 한정되는 것은 아니나, 예를 들어 통상적인 기호성 식품 즉, 라면, 생면 등의 면류, 두부, 시리얼, 빵류, 츄잉 껌, 사탕, 과자류 등에 첨가하여 통상적으로 알려진 방법에 의하여 각종 식품으로 제조할 수 있다. 또한, 정제, 과립제, 환제, 경질캅셀제, 연질캅셀제 또는 액제 제형 등 일반적인 제형으로 제형화 될 수 있으며, 생즙, 파우치, 음료, 또는 다류 등으로 제조될 수도 있다. 상기한 성분 이외에 다른 성분은 제형에 따라 당업자가 적절하게 선택하여 배합할 수 있음은 물론이다.

또한, 본 발명의 홍삼초는 항산화 활성이 우수하여 산화에 의해서 일어나는 식품의 냄새나 풍미의 변화, 유지의 산패, 그리고 식품의 변색을 효과적으로 방지할 수도 있다. 따라서, 본 발명의 홍삼초를 통상의 각종 식품류에 배합함으로써 이들 식품류를 보존하거나 식품의 신선도 및 품질을 장기간에 걸쳐 유지하기 위해 사용할 수도 있다.

상기 식품류로는 전형적인 식품뿐만 아니라, 음료(알콜성 음료도 포함함), 과실 및 그의 가공식품(예: 과일통조림, 병조림, 잼, 마말레이드 등), 어류, 육류 및 그 가공식품(예: 햄, 소시지 콘비이프 등), 빵류 및 면류(예: 우동, 메밀국수, 라면, 스파게이트, 마카로니 등), 과즙, 각종 드링크, 쿠키, 엿, 유제품(예: 버터, 치이즈 등), 식용 식물유지, 마아가린, 식물성 단백질, 레토르트 식품, 냉동식품, 각종 조미료(예: 된장, 간장, 소스 등) 등을 포함한다.

또한, 본 발명은 상기 홍삼초를 유효성분으로 포함하는 산화 스트레스 관련 질환 예방 또는 치료용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명에 따른 약학적 조성물은 항산화 효과가 우수하므로, 산화 스트레스 관련 질환에 적용될 수 있다. 산화 스트레스 관련 세포의 병태로서는 미토콘드리아 기능이상, 라이소좀 및 프로테아좀 기능 이상, 핵산(예를 들어, RNA 및 DNA)의 산화, 아폽토시스의 개시, 지질 퍼옥사이드화 및 막지질 환경의 파괴가 있을 수 있으나, 이에 한정되지 아니한다. 본 발명의 약학적 조성물을 적용할 수 있는 질환으로는 뇌졸중, 심근경색, 당뇨병성 혈관장애, 고지혈증, 당뇨병, 간질, 파킨슨씨병 및 치매로 구성된 군으로부터 선택되는 질환이 있으나, 이에 한정하지 아니하며 본 발명에 따른 약학적 조성물은 활성 산소로 인해 발생하는 질환 또는 증상을 완화시키는데 사용될 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 경구 또는 비경구 투여가 가능하다. 본 발명의 약학적 조성물의 투여 경로는 이들로 한정되는 것은 아니지만 예를 들면, 구강, 정맥내, 근육내, 동맥내, 골순, 경막내, 심장내, 경피, 피하, 복강내, 비강내, 장관, 설하 또는 국소 투여가 가능하다.

이와 같은 임상 투여를 위해 본 발명의 약학적 조성물은 공지의 기술을 이용하여 경구투여, 비경구 투여용, 주사용 등의 적합한 제형으로 제제화할 수 있다. 예를 들어, 경구 투여 시에는 불활성 희석제 또는 식용 담체와 혼합하거나, 경질 또는 연질 젤라틴 캡슐에 밀봉되거나 또는 정제로 압형하여 투여할 수 있다. 경구 투여용의 경우, 활성 화합물은 제제화에 필요한 통상의 성분들과 혼합되어 섭취형 정제, 협측 정제, 트로키제(troches), 로진지(lozenge), 수용성 또는 유성현탁액, 조제분말 또는 과립, 에멀젼, 하드 또는 소프트 캡슐, 엘릭시르(elixirs), 서스펜션, 시럽, 웨이퍼 등의 형태로 사용될 수 있다. 이때, 정제, 캡슐 등의 제형으로 제제화하기 위해 락토오스, 사카로오스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아밀로펙틴, 셀룰로오스 또는 젤라틴과 같은 결합제; 디칼슘 포스페이트와 같은 부형제; 옥수수 전분 또는 고구마 전분과 같은 붕괴제; 스테아린산 마그네슘, 스테아린산 칼슘, 스테아릴푸마르산 나트륨 또는 폴리에틸렌글리콜 왁스와 같은 윤활유 등을 혼합할 수도 있다. 캡슐 제형의 경우는 상기에서 언급한 물질 이외에도 지방유와 같은 액체 담체를 혼합할 수도 있다.

또한, 비경구 투여는 피하주사, 정맥주사, 근육내 주사, 흉부내 주사 주입방식과 점막, 또는 국소에 적용되는데, 분산제, 좌제, 분제, 에어로졸(비강 스프레이 또는 흡입제), 겔, 현탁액제(수성, 또는 비수성 액상 현탁액, 수중유 에멀젼 또는 유중수 에멀젼), 용액제 등 비경구 투여에 적합한 액상 투여 형태 등에 의한다. 비경구 투여용 제형으로 제제화하기 위해서는 상기 조성물을 안정제 또는 완충제와 함께 물에서 혼합하여 용액으로 제조하고, 이를 앰플 또는 바이알의 단위 투여형으로 제제화할 수 있다.

상기와 같은 본 발명의 약학적 조성물의 유효투입량은 환자의 연령, 신체적 조건, 몸무게 등의 상태를 고려하여 임상의 판단에 따라 필요한 범위로 조절될 수 있다. 일반적으로, 상기 약학적 조성물의 유효투입량은 성인 환자 체중 1kg 당 1 내지 20㎎/일이고, 바람직하기로는 5 내지 10㎎/일이며, 의사 또는 약사의 판단에 따라 일정 시간 간격으로 1일 수회, 바람직하기로는 하루 2회 내지 5회 분할 투여될 수 있다.

이하, 본 발명을 제조예 및 실시예에 의해 상세히 설명한다.

단, 하기 제조예 및 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 제조예 및 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.

<실시예 1> 홍삼초의 제조 방법에 대한 조건 설정

<1-1> 1차 발효(누룩균 발효)

스팀 공정이나, 누룩 접종량, 홍삼 미분과 밀가루의 배합 비율에 따른 발효 효과를 확인하였다. 스팀 공정이나, 누룩 접종량은 하기 표 1의 조건으로 하였다.

	스팀 공정	누룩 접종량(중량%)
실험군 1	×	5
실험군 2	×	10
실험군 3	○	5
실험군 4	○	10

원료로는 분쇄된 홍삼미분(고려인삼창)을 이용하였고, 스팀 공정은 발효 전에 121℃에서 15분간 실시하였다. 각 실험군에 대해서, 홍삼 미분과 밀가루를 각각 10:0, 7:3, 5:5로 혼합하였으며, 혼합물 중량 기준으로 1배수 미만의 정제수를 혼합하고, 홍삼 미분 대비 중량 기준으로 하기 표 1의 접종량에 따라 누룩을 접종하여 덩어리 형태로 제조하여 상온에서 1차 발효(고체 발효)를 12일 동안 진행하였다.

<1-1-1> 밀가루 배합 비율에 따른 발효 효율 확인

발효가 완료된 후, 먼저 밀가루 배합 비율에 따른 누룩 발효 정도를 확인하였다. 발효의 효율을 높이기 위해서 밀가루를 첨가하였으나, 홍삼 미분만 첨가한 경우가 발효 효율성이 우수하고, 비린 냄새가 나지 않았다. 홍삼 미분과 밀가루를 혼합하여 발효시킨 경우에는 발효 효율이 떨어지고, 비린 냄새가 강하게 나서, 홍삼초의 제조에는 적합하지 않은 것을 확인하였다.

<1-1-2> 스팀 공정, 누룩균 접종 농도에 따른 발효 효율 확인

홍삼 미분만을 사용하였을 때 발효 효율이 우수하였기 때문에, 홍삼 미분을 사용한 실험군에 대해서, 누룩 발효 효율성을 알파-아밀라아제의 활성으로 확인하였다.

알파-아밀라아제의 활성은 하기 방법을 이용하여 측정하였다. 시약으로 1% 가용성 전분 용액, 맥바인 완충액(pH 6.0 또는 7.0), 0.1% 염화칼슘용액, 요오드 시액을 준비하였다. 요오드 시액은 요오드 0.2g과 요오드칼륨 2g을 물에 녹여 100㎖로 하고, 이 용액 중에서 1㎖에 1N 염산 1㎖을 넣고 나머지 잔량은 물을 채워서 100㎖로 하여 제조하였다. 검체 5.0g을 정량한 후 물에 녹여 100㎖로 맞춘 후 검액으로 사용하였다. 시험관 2개를 준비하여 시험용, 공시험용으로 사용하였다. 시험용 시험관에 1% 가용성 전분 용액 5㎖, 맥바인 완충액 13㎖, 0.1% 염화칼슘용액 1㎖을 넣고 37℃에서 가온하고, 검액 1㎖을 넣은 후 30분간 방치하였다. 공시험용으로는 별도로 검액 1㎖을 100℃에서 30분간 가열하여 효소의 활성을 제거한 후, 시험용 시험관 준비와 동일하게 용액을 처리하고, 방치하였다. 시험용과 공시험용 반응액 0.2㎖에 요오드시액 10㎖을 넣은 것을 시험 용액으로 사용하였다. 시험 용액 제조 후에는 분광광도계를 이용하여 시험용, 공시험용의 흡광도를 660nm에서 측정하였고, 물을 대조액으로 사용하였다. 알파 아밀라아제 표준품을 희석하여 상기 방법으로 활성을 측정하여 표준 곡선을 작성하고, 이 표준 곡선을 기준으로 시험용 시험관 내의 아밀라아제 활성을 확인하였다.

그 결과, 홍삼 미분에 대해서 중량 기준으로 10중량%로 누룩을 첨가한 경우가 5중량%로 첨가한 경우보다 발효 효율이 우수하였다(도 1 참조). 도 1에 나타낸 바와 같이 누룩균의 발효 기간이 늘어나면 발효 활성이 증가하는 것을 알 수 있었다. 한편으로 10일 이상 장기 배양시에는 다른 미생물이 함께 자랄 수 있어 오염이 우려되었다. 또한 발효 기간에 따른 pH 변화를 살펴보면, 스팀 공정을 진행한 경우 단시간 내 pH가 신속하게 떨어지는 것을 알 수 있었다(도 2 참조). 이를 통해서 스팀 공정이 선행될 경우 초산균의 배양이 보다 원활하게 이루어짐을 간접적으로 확인할 수 있었다. 또한 스팀 공정을 통해서 누룩균 외의 다른 미생물의 오염을 예방할 수 있었다.

실시예 <1-1>의 정리

홍삼초의 제조 조건 중에서 홍삼 미분을 스팀 공정으로 전처리한 후에 홍삼 미분 중량 대비 10중량%의 누룩균을 접종하여 7일 내지 10일 배양한 후에 초산균 발효를 진행하는 것이 최적 조건으로 판단되었다.

<1-2> 2차 발효(초산균 발효)

1차 발효가 완료된 누룩균 발효물(실험군 1 내지 4)에 중량기준으로 물을 5배수 섞은 후 상온에서 2차 발효(액상 발효)를 8일 동안 진행하여 실험군 1 내지 4에 대하여 각각 홍삼초를 수득하였다.

<실시예 2> 홍삼 발효물 내의 진세노사이드 함량 분석

<2-1> 2차 발효 후 진세노사이드 양 확인

실시예 <1-1>에서 얻은 홍삼초와, 발효 공정을 거치지 않은 대조군인 홍삼추출물(한국인삼공사) 각각에 포함되어 있는 진세노사이드 F2, Rg3, CK 및 Rh2의 함량을 비교하였다. 대조군은 홍삼 미분에 정제수를 첨가하고 상온에서 8일간 추출하고 별도의 발효공정을 거치지 않은 추출물을 사용하였다.

실시예 1의 실험군 1 내지 4로부터 얻은 시료 내 진세노사이드의 함량을 측정하기 위하여 시료를 감압농축시킨 후 부탄올과 정제수가 1:1로 혼합된 용매에 용해시킨 후 부탄올층만 회수하였다. 회수된 부탄올층에 다시 동량의 정제수를 혼합하는 분획 과정을 2회 더 실시한 후 회수된 부탄올층을 감압농축하여 무게를 측정하였고, 각 시료들의 부탄올 분획물에 대하여 3000ppm 농도로 시료를 조제하였다. 각 진세노사이드의 표준품을 메탄올에 100, 50, 10, 1, 0.5, 0.1, 0.05ppm으로 조제하였다. 하기 분석 조건으로 LC 분석을 진행하였다.

기기: Aglient Technologies 6410 Triple Quad(LC-MS/MS)

컬럼: C18(2.1mm×150mm, 2.7㎛)

용매: A; 0.1% 포름산(물에 희석), B; 0.1% 포름산(아세토니트릴에 희석)

흐름 속도: 0.2 ㎖/min

주입량: 1㎖

농도 구배
	시간(분)	B%
1	0	5
2	5	15
3	10	30
4	15	60
5	20	100
6	25	100
7	27	5
8	30	5

MS 조건
Ionization Mode	-ESI, sim mode
Gas temp.	350℃
Capillary volt.	4000V
Nebulizer	40 psig
Fragmentor	190V

측정 결과, 발효하지 않은 홍삼 미분 추출물의 경우 Rg3만 존재하며 나머지 다른 산가수분해 전환사포닌은 검출되지 않거나, 정량 한계 미만으로 나타났다. 반면에, 발효가 진행될 경우 산가수분해 전환사포닌이 검출되었으며 특히 F2가 다량 생성되는 것을 알 수 있었다. 특히 2차 발효 기간이 증가함에 따라 산가수분해 전환사포닌의 함량이 증가하는 것을 확인할 수 있었다.

<2-2> 2차 발효 기간에 따른 진세노사이드 양 확인

표 4의 결과를 통해 2차 발효 기간에 따라 미량 진세노사이드의 함량이 증가함을 확인하여, 2차 발효 기간을 8일에서 60일로 증가시켜 산가수분해 전환 사포닌 외 다양한 미량 진세노사이드의 함량을 확인하였다. 확인 방법은 실시예 <2-1> 방법에 따랐으며, 표 5에 진세노사이드 측정 결과를 나타낸다(단위: ㎍/㎖). 시료명은 초산발효 후 경과된 날짜를 나타낸다.

	Rg1	Re	Rh1	Rb1	Rc	Ra1	Rb2	Rd	Rg6	CO	Rk3	Rh4	F2	Rg3s	Rg3r	CK	Rk1	Rg5
홍삼초-1일	13.73	12.29	0.69	12.07	6.38	1.71	6.27	6.31	0.23	0.21	0.21	0.36	0.53	0.63	0.36	0.09	0.57	0.77
홍삼초-10일	18.64	9.06	1.17	3.91	4.11	1.48	5.13	10.61	0.39	0.51	0.24	0.53	1.75	0.62	0.38	0.10	0.54	0.78
홍삼초-15일	18.58	6.42	1.11	1.84	2.59	1.20	3.85	9.13	0.33	0.57	0.25	0.38	2.06	0.35	0.21	0.09	0.36	0.50
홍삼초-20일	25.41	6.33	1.47	1.39	2.36	1.37	4.19	10.78	0.36	0.75	0.28	0.40	2.96	0.29	0.19	0.13	0.35	0.47
홍삼초-25일	21.25	3.78	1.23	0.58	1.25	0.95	2.76	8.00	0.29	0.76	0.33	0.29	3.08	0.19	0.11	0.07	0.22	0.37
홍삼초-40일	16.12	1.18	0.81	0.17	0.09	0.23	0.39	1.81	0.07	0.42	0.23	0.12	1.82	-	-	-	0.05	0.10
홍삼초-50일	17.37	0.73	0.71	-	-	0.06	0.09	0.45	0.03	0.22	0.10	0.05	0.72	-	-	-	-	-
홍삼초-60일	20.21	0.42	0.75	-	-	-	0.03	0.19	-	0.05	0.19	0.02	0.37	-	-	-	-	-

측정 결과, 발효에 의해서 Rd, 컴파운드 O (Compound O), F2의 함량이 크게 증가하는 것을 확인하였다. Rd의 경우 누룩균 발효가 완료된 발효물인 초산균 발효 1일차의 발효물에 비해서, 발효가 진행될수록 증가되는 경향을 나타내었으며, 발효 10일에서 25일차에 함량이 가장 높았고 그 이상 발효를 진행하면 다른 성분으로 전환되어 양이 점차 감소하는 것으로 나타났다. 컴파운드 O, F2의 경우에도 Rd의 경우와 동일하게 누룩균 발효가 완료된 발효물인 초산균 발효 1일차의 발효물에 비해서 발효가 진행될수록 증가되었으며, 초산균 발효 10일에서 40일차에 함량이 가장 높았으며, 40일 이후에는 다른 성분으로 전환되어 양이 점차 감소하는 것으로 나타났다. 일반 홍삼 추출물에는 없는 컴파운드 O와 F2를 초산균 발효를 통해 얻을 수 있는 것을 알 수 있었다(도 3 참조).

반면에, 일부 진세노사이드에 대해서는 기존에 산을 이용한 가수분해와 초산균을 이용한 발효가 차이가 있는 것을 확인하였다. 예를 들면, Rg3의 경우에 산 가수분해할 경우에는 Rg3가 증가하지만, 본 발명에서와 같이 초산 발효를 할 경우에는 Rg3는 시간이 갈수록 감소하거나 변화가 없었다.

또한, Re, Rb1, Rf, Rc의 경우 지속적으로 감소하는 경향을 보였다. 이 결과로부터 본 발명의 초산균 발효에 의해서 특정 진세노사이드인 Rd, 컴파운드 O, F2가 증가하는 것을 알 수 있었다.

위 결과로부터, 단순히 산을 처리하여 전환사포닌을 제조하는 것과는 달리, 초산균 발효를 할 경우에 진세노사이드마다 전환되는 정도가 다른 것을 알 수 있었다. 본 발명의 방법을 사용할 경우 특히 Rd, 컴파운드 O 및 F2가 증가하였으므로, 이들 진세노사이드들이 나타내는 생리 활성을 필요로 하는 분야에서 본 발명의 방법을 통해 얻어진 발효물을 유용하게 쓸 수 있다.

<비교예 1> 산 처리시 진세노사이드 함량 확인

아세트산을 정제수에 희석하여 pH4.0 내외로 맞춘 후 홍삼미분과 아세트산 희석액을 1:5로 혼합하여 초산발효와 유사한 조건으로 산 가수분해를 진행하였다. 반응 후 1일, 10일, 20일차에 시료를 회수하여 홍삼초 분석과 동일한 방법으로 Rd, 컴파운드 O, F2의 함량을 분석 진행하였다.

		홍삼초	산가수분해
1일(pH 4.05)	Rd	6.31	6.38
	컴파운드 O	0.21	불검출
	F2	0.53	0.16
10일	Rd	10.61	9.55
	컴파운드 O	0.51	불검출
	F2	1.75	0.25
20일	Rd	10.78	7.54
	컴파운드 O	0.75	불검출
	F2	2.96	1.78

분석 결과, 본 발명의 실시예 1의 초산발효의 경우에는 시간이 경과함에 따라 진세노사이드 Rd, 컴파운드 O, F2의 함량이 증가하지만, 본 발명의 실시예 1의 초산발효와 유사한 산 처리 조건으로 홍삼 미분을 처리하는 경우, 진세노사이드 Rd 및 F2의 경우에는 시간이 경과하여도 증가하는 정도가 본 발명의 초산발효보다는 낮으며, 특히 컴파운드 O의 경우 검출이 되지 않았다.

위와 같은 결과로부터, 진세노사이드 Rd, 컴파운드 O, F2의 함량을 증가시키기 위해서는 아세트산과 같은 산의 처리로 산성 환경을 만들어주는 것보다 초산발효를 이용하는 것이 적합한 것을 알 수 있었다.

<비교예 2> 1차 발효 없이 2차 발효만 진행한 경우 진세노사이드 함량 확인

실시예 1에서 1차 발효(누룩균 발효)를 실시하지 않고, 2차 발효(초산균 발효)하였을 때, 진세노사이드 함량이 증가하는지 확인하였다.

확인 결과, 1차 발효를 실시하지 않고서 2차 발효를 진행할 경우에는 2차 발효가 진행되지 않았기 때문에 진세노사이드 함량의 확인이 어려웠다.

<실험예 1> 홍삼초의 효능 확인

<1-1> 항산화 평가

홍삼을 발효시키지 않은 추출물(실시예 2-1)과 2차 발효를 20일간 진행한 홍삼초 (실시예 2-2) 성분의 활성산소 제거 능력을 DPPH 법으로 확인하였다.

DPPH 라디칼 포착능을 확인하기 위하여 Yasushi 등의 문헌("Stopped-flow and spectrophotometric study on radical scavenging by tea catechins and model compound", Chem Pharm Bull 47: 1369-1374(1999))을 변형하여 실험하였다. 2.0×10^-4 M 농도가 되도록 에탄올에 용해한 DPPH 1.5㎖, 시료 0.15㎖ 및 증류수 1.35㎖를 첨가하여 30분 동안 25℃에서 반응시킨 후, 520nm에서 흡광도를 측정하였고, 시료의 경우 각각 1 ㎕/㎖의 농도로 처리하였다. DPPH 라디칼 포착능(%)은 100-[(시료를 첨가한 반응군의 흡광도/시료를 첨가하지 않은 대조군의 흡광도)×100] 식으로부터 구하였다. 양성대조군으로는 아스코브르산(L. ascorbic acid)를 사용하였다. 각 시료의 IC50 값을 표 7에 나타낸다.

	IC50(mg/ml)
홍삼 추출물	2.61
홍삼초(1일)	2.13
홍삼초(20일)	1.62
홍삼초(40일)	1.56
홍삼초(60일)	1.21

실험 결과, 홍삼초의 항산화 효능이 발효시키지 않은 홍삼추출물(대조군) 대비 약 25% 정도 향상되는 것을 확인할 수 있었다(도 4 참조). 또한, 홍삼초의 발효 기간이 길어질수록 항산화 효과가 증진되었다.

위와 같은 결과로부터, 홍삼을 초산발효할 경우에 발효를 실시하지 않은 홍삼추출물에 비해서 항산화 효과가 높은 것을 알 수 있고, 또한 발효 기간에 따라 홍삼초 내에 포함되는 진세노사이드 함량에는 변화가 있지만, 홍삼초 전체의 항산화 효과는 발효 기간과 비례해서 증가하는 것을 알 수 있었다. 따라서, 본 발명의 홍삼초의 제조 방법은 진세노사이드 Rd, CO, F2의 함량을 증가시키기 위해서 이용할 수 있고, 항산화 효과가 높은 홍삼초를 제조하기 위해서도 이용할 수 있는 것을 알 수 있었다. 아울러, 본 발명의 제조 방법에 따른 홍삼초는 항산화 효과가 높으므로, 항산화 효과를 필요로 하는 건강식품, 화장료 조성물 분야에서 유효성분으로 사용될 수 있다.

<1-2> 세포 활성 평가

홍삼을 발효시키지 않은 추출물(실시예 2-1), 및 2차 발효를 20일간 진행한 홍삼초(실시예 2-2) 성분의 세포 활성을 비교 확인하기 위하여 MTT 환원법(3(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide reduction method)을 수행하였다.

구체적으로, 소혈청 10%를 함유하는 DMEM 배지(Dulbeco's modified eagle medium; Gibco, USA)를 사용하여 사람 섬유아세포 (ATCC 2076)를 5×10³ 세포수의 밀도로 96-웰 플레이트에 분주하였다. 1 일 후 새로운 배지(DMEM, 소 혈청 0%)로 갈아주면서 홍삼추출물과 홍삼초를 1.25 ㎎/㎖의 농도로 처리한 후 37℃에서 48시간 동안 배양하였다. 이때, 시료를 처리하지 않은 시험군을 음성 대조군, 소혈청 10%를 함유시킨 시험군을 양성 대조군으로 사용하였다. 그 후, 세포를 PBS로 세척하였고, MTT(5 ㎎/㎖)를 DMEM 배지에 10배 희석시킨 희석액을 100㎕ 첨가한 후 37℃에서 2 시간 동안 배양하였다. 배양이 완료된 후 배지를 버렸고, DMSO 100㎕를 첨가하여 상온에서 10 분 동안 완전히 녹인 후 570 ㎚에서 흡광도를 측정하였다. 결과를 표 8에 나타낸다.

	세포활성도
홍삼추출물	53%
홍삼초(1일)	76%
홍삼초(20일)	76%
홍삼초(40일)	64%
홍삼초(60일)	9%
양성대조군(10%, FBS)	76%
음성대조군(무혈청)	1%

실험 결과, 홍삼초가 발효시키지 않은 홍삼추출물(대조군) 대비 약 20% 정도의 효능이 향상되어 양성대조군과 거의 비슷한 수준의 세포 활성 효과를 보이는 것을 확인할 수 있었다(도 5 참조).

위 결과로부터 본 발명의 홍삼초가 세포의 활성을 높이는 효과가 있으므로, 홍삼초를 사용함으로써 피부 세포 증식의 감소로 인해서 나타나는 피부의 노화, 주름 증가, 탄력 감소 등을 방지할 수 있는 것을 알 수 있고, 홍삼초가 피부 세포의 활성도를 높이므로 상처 치유 효과를 높일 수 있는 것을 알 수 있다.

<1-3> 보습 효과

홍삼추출물 및 홍삼초를 각각 피험자 10명의 피부에 도포한 후 corneometer를 통해 피부 수분 보유량을 확인하여 단기 보습 증진 효과를 확인하였다.

그 결과, 홍삼추출물은 도포 30분 후부터는 보습 증진 효과가 없었지만, 홍삼초는 도포 1시간까지도 피부 수분 보유량을 증진시키는 효과가 있었다(도 6 참조).

홍삼초가 피부 수분 보유량을 증진시키는 효과를 발휘하게 하는 성분에 대해서 조사하였으며, 홍삼추출물과 홍삼초에서 차이를 나타내는 성분으로 젖산(lactic acid)이 확인되었다. 표 9에 홍삼추출물과 홍삼초에서 확인된 산 성분의 함량을 나타낸다.

	젖산(㎍/g)	아세트산(㎍/g)	시트르산(㎍/g)	옥살산(㎍/g)
홍삼추출물	불검출	불검출	170	불검출
홍삼초(20일)	3710	640	불검출	불검출

표 9의 결과로부터 홍삼초가 홍삼추출물에 비해서 보습 효과가 우수했었던 이유는 천연보습인자(natural moisturizing factor, NMF)라고 알려진 젖산 성분이 홍삼초 생성 과정에서 새로이 합성되었기 때문인 것으로 생각된다.

실험예 1 결과 정리

본 발명에 따른 홍삼초는 항산화 효과, 세포 활성 효과, 및 보습 효과가 우수하기 때문에, 식품 분야뿐만 아니라 항산화, 항노화, 상처 치료 및 보습 효과를 필요로 하는 화장료 조성물에 유효성분으로 사용될 수 있다.

Claims (16)

1. 홍삼 분말을 누룩균으로 1차 발효하는 단계; 및
   1차 발효에서 얻어진 발효물을 물과 혼합하여 초산균으로 2차 발효하는 단계;를 포함하는 진세노사이드 Rd, 컴파운드 O(Compound O) 및 F2로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상이 강화된 홍삼초의 제조 방법으로서,
   1차 발효에서 누룩균은 홍삼 분말 대비 중량 기준으로 6중량% 내지 25중량%로 첨가되며,
   1차 발효는 5일 내지 15일 동안 수행되고,
   2차 발효는 5일 내지 45일 동안 수행되는 홍삼초의 제조 방법.
2. 삭제
3. 삭제
4. 청구항 1에 있어서,
   초산균은 아세토박터 아세티(Acetobacter aceti)인 홍삼초의 제조 방법.
5. 삭제
6. 청구항 1 또는 청구항 4의 방법으로 제조된 진세노사이드 Rd, 컴파운드 O(Compound O) 및 F2로 이루어진 군으로부터 선택되는 어느 하나 이상이 강화된 홍삼초.
7. 삭제
8. 청구항 6에 있어서,
   상기 Rd는 8㎍/㎖ 내지 20㎍/㎖이고, 컴파운드 O는 0.3㎍/㎖ 내지 5㎍/㎖이며, F2는 1㎍/㎖ 내지 10㎍/㎖인 홍삼초.
9. 청구항 8에 있어서,
   상기 Rd는 8㎍/㎖ 내지 17㎍/㎖이고, 컴파운드 O는 0.3㎍/㎖ 내지 4㎍/㎖이며, F2는 1㎍/㎖ 내지 7㎍/㎖인 홍삼초.
10. 삭제
11. 청구항 6의 홍삼초를 포함하는 산화에 의한 피부 손상의 개선에 따른 피부 미백용 화장료 조성물.
12. 청구항 6의 홍삼초를 포함하는 피부 노화 억제용 화장료 조성물.
13. 청구항 6의 홍삼초를 포함하는 피부 탄력 유지용 화장료 조성물.
14. 청구항 6의 홍삼초를 포함하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물.
15. 청구항 6의 홍삼초를 포함하는 보습용 화장료 조성물.
16. 청구항 6의 홍삼초를 포함하는 건강식품 조성물.

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