KR101855989B1 - Method for producing buckwheat seed extract with increased effective component using water adding solubilizer as extraction solvent and buckwheat seed extract produced by the same - Google Patents

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강위수
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강원대학교산학협력단
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Abstract

The present invention relates to a method for producing a Fagopyrum esculentum seed extract containing increased effective components using water with an added solubilizer as an extraction solvent, and to a Fagopyrum esculentum seed extract containing increased effective components produced by the method. When the water and solubilizer of the present invention is used as the extraction solvent, the amount of the effective components extracted from the Fagopyrum esculentum seed and the efficacy thereof can be maximized, and as organic solvents such as methanol, ethanol, acetone and the like are not used, the Fagopyrum esculentum seed extract has an effect of enhancing human safety and reducing environmental problems, thereby being very useful for related industries using the same.

Description

가용화제를 첨가한 물을 추출용매로 이용한 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물의 제조 방법 및 그에 따른 메밀 종자 추출물{Method for producing buckwheat seed extract with increased effective component using water adding solubilizer as extraction solvent and buckwheat seed extract produced by the same}FIELD OF THE INVENTION [0001] The present invention relates to a method for preparing buckwheat seed extracts with increased solubility by using water with a solubilizing agent as an extraction solvent, and a buckwheat seed extract produced from the buckwheat seed extract by the same}

본 발명은 가용화제를 첨가한 물을 추출용매로 이용한 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물의 제조 방법 및 상기 방법에 의해 제조된 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물에 관한 것이다.The present invention relates to a process for preparing buckwheat seed extract having increased availability by using water containing a solubilizing agent as an extraction solvent and to an buckwheat seed extract having an increased amount of the buoyancy oil produced by the above method.

물에 대한 용해도가 아주 낮은 물질이 가용화제로 인해 본래의 용해도 이상으로 용해되는 것을 가용화라고 한다. 가용화는 유화와는 다르게 열역학적으로 안정한 계이므로 가용화제와 유화의 중간 상태로 여겨질 수 있다. 가용화 현상은 난용성 물질이 미셀 내부나 표면에 흡착되어 용해되는 것 같이 보이므로 가용화의 위치는 미셀의 내부, 미셀의 내부와 펠리사이드의 계면, 펠리사이드 층, 미셀의 표면으로 나뉜다. 본래 수용성인 것이 막과 그 외의 구조체와 결합해서 수용액이 되지 않는 경우, 그리고 그것을 약한 변성제, 알칼리 처리, 또는 그 외의 처리로 해리시켜 가용화하는 경우가 있다. 가용화제를 이용한 가용화 기술은 비용해성 물질의 용해, 세정제에서의 유성 성분 제거, 오일 리커버리 등에 이용된다.Solubilization refers to the fact that a substance with a very low solubility in water dissolves beyond its original solubility due to the solubilizing agent. Since solubilization is a thermodynamically stable system unlike emulsification, it can be regarded as an intermediate state between the solubilizing agent and emulsification. The solubilization phenomenon seems to be that the poorly soluble substance is adsorbed and dissolved in the inside of the micelle, and thus the solubilization position is divided into the interior of the micelle, the interior of the micelle and the interface of the pellicle, the pellicle layer, and the surface of the micelle. There is a case where an aqueous solution which is inherently water-soluble is not combined with a membrane and other structural body to become an aqueous solution, and is solubilized by dissociation thereof with a weak denaturant, an alkali treatment, or other treatment. Solubilization techniques using solubilizing agents are used for dissolving non-solubilizing materials, removing oily components from cleaning agents, and oil recovery.

플라보노이드(Flavonoid)계 화합물은 자연 상태에서 비배당체인 아글리콘(aglycone)과 당과 결합한 상태인 배당체로 다른 구조적 특성을 지니고 있는데, 대개 저분자, 중분자, 고분자 물질과 같이 결합 형태에 따라 물, 메탄올, 아세톤 등으로 추출 용매가 달라진다. 이는 화학 구조에 따라 용해도가 달라지기 때문이다. 이러한 특징으로 인해 용매에 따라 추출되는 물질의 종류나 생리 활성 능력이 달라질 수 있다.Flavonoid-based compounds have different structural characteristics, such as aglycone and glycoside bonded to sugar in natural state, and they have different structural characteristics such as low molecular weight, middle molecular weight and high molecular weight, , And acetone. This is because the solubility varies depending on the chemical structure. Due to this characteristic, the kind of the substance to be extracted and the physiological activity ability can be changed depending on the solvent.

메밀에 함유된 플라보노이드 화합물을 비롯한 식물의 항산화 물질을 추출할 때 가장 많이 이용하는 용매는 주로 메탄올, 에탄올, 아세톤 등의 유기 용매를 이용하는데 이는 항산화 효과가 높은 극성물질의 추출이 용이하기 때문이다. 그러나 이러한 유기 용매는 세포를 손상시킬 수 있어 안전성에 심각한 위험을 초래한다. 따라서 용매를 물로 바꿀 수 있다면 안전성과 더불어 환경 문제에도 도움을 줄 수 있다. 또한, 물을 이용해 추출하면 체내 부작용이 없기에 원료를 이용함에 제약이 줄어들 것으로 사료된다.The most widely used solvents for extracting antioxidants from plants, including flavonoid compounds in buckwheat, are organic solvents such as methanol, ethanol and acetone. This is because it is easy to extract polar substances with high antioxidative effects. However, these organic solvents can damage cells, posing a serious risk to safety. Therefore, if the solvent can be replaced with water, it can contribute to safety as well as environmental problems. In addition, it is considered that extraction with water will not restrict the use of raw materials because there is no side effect in the body.

하지만 가용화제는 현재까지 식품이나 화장품의 유화제로 주로 이용될 뿐, 식물에 적용하여 유용 성분이나 생리 활성에 대한 연구는 아직까지 미비한 실정이다. 따라서 본 발명은 단메밀과 쓴메밀을 물로 추출할 때, 가용화제를 첨가하여 그 생리 활성 능력을 측정함으로써 메밀의 유용한 성분과 효능을 극대화하고자 한다.However, the solubilizing agent is mainly used as an emulsifying agent for foods or cosmetics so far, and studies on the useful components and the physiological activities thereof have not been studied yet. Accordingly, the present invention aims to maximize useful components and efficacy of buckwheat by measuring the physiological activity of buckwheat and bitter buckwheat by adding a solubilizing agent to the buckwheat.

한편, 한국공개특허 제2012-0118752호에서는 '쓴메밀 추출물을 포함하는 화장료 조성물 및 그 제조 방법'이 개시되어 있고, 한국공개특허 제2012-0118326호에서는 '고추냉이 추출물의 복합 나노 입자화를 통한 식품 첨가용 천연 식용 항균제의 제조방법 및 그 식용 항균제'가 개시되어 있으나, 본 발명에서와 같이 '가용화제를 첨가한 물을 추출용매로 이용한 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물의 제조 방법 및 상기 방법에 의해 제조된 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물'에 대해서는 개시된 바가 전혀 없다.Korean Patent Laid-Open Publication No. 2012-0118752 discloses a cosmetic composition containing bitter buckwheat extract and a method for preparing the same, and Korean Patent Publication No. 2012-0118326 discloses a cosmetic composition containing a bitter buckwheat extract, A method for producing natural antimicrobial agent for food addition and an antimicrobial agent for edible food "has been disclosed. However, as described in the present invention, a method for producing buckwheat seed extract having increased oil content using water containing a solubilizing agent as an extraction solvent, ≪ RTI ID = 0.0 > buckwheat seed extract < / RTI >

본 발명은 상기와 같은 요구에 의해 도출된 것으로서, 본 발명에서는 메밀 종자로부터 총 폴리페놀과 루틴, 오리엔틴, 이소오리엔틴, 비텍신 및 이소비텍신인 플라보노이드 화합물을 비롯한 메밀의 유용물질을 추출할 때, 가용화제[brij35(폴리옥시에틸렌 라우릴 에테르), 트윈80(폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레이트) 또는 트윈20(폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트)]를 첨가한 물을 이용하여 추출한 결과, 메밀 종자로부터 추출된 유용성분 함량과 그 효능이 극대화를 이루는 점을 확인하였다.SUMMARY OF THE INVENTION The present invention has been made in view of the above needs, and it is an object of the present invention to provide a method for extracting useful materials of buckwheat, including total polyphenols and flavonoid compounds, such as rutin, orientin, isoorientin, , Water with the addition of a solubilizing agent [brij35 (polyoxyethylene lauryl ether), Tween 80 (polyoxyethylene sorbitan monooleate) or Tween 20 (polyoxyethylene sorbitan monolaurate)]. As a result, It was confirmed that the content of the useful ingredient extracted from the buckwheat seeds and the effect thereof were maximized.

기존에는 항산화 효과가 높은 극성물질의 추출이 용이하게 때문에 메탄올, 에탄올, 아세톤 등 유기 용매를 주로 이용하였는데, 이러한 유기 용매는 세포를 손상시킬 수 있어 안전성에 심각한 위험을 초래할 수 있고 더불어 환경문제를 유발한 수 있었다. 그러나, 본 발명은 가용화제를 첨가한 물을 이용해 추출하면 체내 부작용이 없기 때문에 원료로 이용함에 있어서 제약이 줄어들 것으로 예상됨을 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.In the past, organic solvents such as methanol, ethanol, and acetone were mainly used because it is easy to extract polar substances having a high antioxidative effect. Such organic solvents can damage cells, causing serious safety hazards and environmental problems. I was able to. However, the present invention has been accomplished by confirming that extraction with water containing a solubilizing agent does not have side effects in the body, and that restrictions on the use as a raw material are expected to be reduced.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 메밀 종자에 가용화제를 첨가한 물을 추출용매로 이용하여 추출하는 단계를 포함하는 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물의 제조 방법을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention provides a method for producing buckwheat seed extract having an increased oil content, comprising extracting buckwheat seeds with water containing a solubilizing agent as an extraction solvent.

또한, 본 발명은 상기 방법에 의해 제조된 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물을 제공한다.In addition, the present invention provides buckwheat seed extract with increased oil content by the above method.

또한, 본 발명은 상기 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition for whitening skin comprising the buckwheat seed extract with increased oil content as an active ingredient.

또한, 본 발명은 상기 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화용 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides an antioxidative cosmetic composition comprising the buckwheat seed extract with increased oil content as an active ingredient.

또한, 본 발명은 상기 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 색소 침착 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.The present invention also provides a pharmaceutical composition for preventing or treating skin pigmentation diseases containing the buckwheat seed extract having an increased amount of the above-mentioned component as an active ingredient.

또한, 본 발명은 상기 가용화제를 첨가한 물을 유효성분으로 함유하는 메밀 종자의 유용성분 추출용 조성물을 제공한다.The present invention also provides a composition for extracting useful components of buckwheat seeds containing water with the above-mentioned solubilizing agent added as an active ingredient.

또한, 본 발명은 메밀 종자에 가용화제를 첨가한 물을 추출용매로 이용하여 추출하는 단계를 포함하는 메밀 종자 추출물의 유용성분을 증가시키는 방법을 제공한다.The present invention also provides a method for increasing useful components of buckwheat seed extract comprising extracting buckwheat seeds with water containing a solubilizing agent as an extraction solvent.

본 발명은 가용화제[brij35(폴리옥시에틸렌 라우릴 에테르), 트윈80(폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레이트) 또는 트윈20(폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트)]를 첨가한 물을 추출용매로 이용하여 메밀 종자로부터 유용성분을 추출하는 방법 및 상기 방법에 의해 추출된 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물의 용도에 관한 것으로, 본 발명의 물 및 가용화제를 추출용매로 사용할 경우, 메밀 종자로부터 추출된 유용성분 함량과 그 효능의 극대화를 이룰 수 있으며, 메탄올, 에탄올, 아세톤 등 유기 용매를 사용하지 않으므로 인체 안전성 증대 및 환경문제 감소의 효과를 가질 수 있어 이를 이용한 관련 산업에 매우 유용하다.The present invention relates to a process for the production of a water-insoluble polyurethane foam by dissolving water in which an additive agent [brij35 (polyoxyethylene lauryl ether), Tween 80 (polyoxyethylene sorbitan monooleate) or Tween 20 (polyoxyethylene sorbitan monolaurate) The present invention relates to a method for extracting useful components from buckwheat seeds and to the use of buckwheat seed extracts having an increased amount of useful components extracted by the method. When water and a solubilizing agent of the present invention are used as extraction solvents, It is possible to maximize the content of the useful ingredient and its effect, and it is very useful for the related industry using the organic solvent because it does not use organic solvent such as methanol, ethanol, acetone, and therefore has an effect of increasing human safety and reducing environmental problems.

도 1은 추출용매 종류에 따른 단메밀과 쓴메밀 종자 추출물의 DPPH 소거능(%)을 조사한 결과이다. (A) 단메밀, (B) 쓴메밀
도 2는 추출용매 종류에 따른 단메밀과 쓴메밀 종자 추출물의 총 폴리페놀 함량(㎎/g)을 조사한 결과이다. (A) 단메밀, (B) 쓴메밀
도 3은 추출용매 종류에 따른 단메밀과 쓴메밀 종자 추출물의 버섯 티로시나제 억제 활성능(%)을 조사한 결과이다. (A) 단메밀, (B) 쓴메밀
도 4a 및 도 4b는 추출용매 종류에 따른 단메밀 종자 추출물의 루틴을 비롯한 5개 플라보노이드 화합물(피크 순서대로 오리엔틴, 이소오리엔틴, 비텍신, 이소비텍신 및 루틴)의 함량을 HPLC로 분석한 결과이다.
도 5a 및 도 5b는 추출용매 종류에 따른 쓴메밀 종자 추출물의 루틴을 비롯한 5개 플라보노이드 화합물(피크 순서대로 오리엔틴, 이소오리엔틴, 비텍신, 이소비텍신 및 루틴)의 함량을 HPLC로 분석한 결과이다.
FIG. 1 shows the DPPH scavenging ability (%) of the soybean buckwheat and the bitter buckwheat seed extract according to the extraction solvent type. (A) sweet buckwheat, (B) bitter buckwheat
FIG. 2 shows the results of the total polyphenol content (mg / g) of the soybean buckwheat and the bitter buckwheat seed extract according to the type of the extraction solvent. (A) sweet buckwheat, (B) bitter buckwheat
Fig. 3 shows the results of the mushroom tyrosinase-inhibiting activity (%) of soybean buckwheat and bitter buckwheat seed extract according to the type of extraction solvent. (A) sweet buckwheat, (B) bitter buckwheat
FIGS. 4A and 4B are graphs showing the content of five flavonoid compounds (orienting, isoordantene, bitescic, isovichecin, and rutin in the order of peak) including the rutin of short buckwheat seed extract according to the type of extraction solvent Results.
FIGS. 5A and 5B are graphs showing the contents of five flavonoid compounds (orienting, isoordantene, bitescic, isovichecin, and rutin in the order of peak) including the rutin of bitter buckwheat seed extract according to the kind of extraction solvent Results.

본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 메밀 종자에 가용화제를 첨가한 물을 추출용매로 이용하여 추출하는 단계를 포함하는 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물의 제조 방법을 제공한다.In order to accomplish the object of the present invention, the present invention provides a method for producing buckwheat seed extract having increased oil content, comprising extracting buckwheat seeds with water containing a solubilizing agent as an extraction solvent.

본 발명의 일 구현 예에 따른 방법에서, 상기 가용화제는 폴리옥시에틸렌 라우릴 에테르(Polyoxyethylene(23) lauryl ether), 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레이트(Polyoxyethylene(20) sorbitan monooleate) 또는 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트(Polyoxyethylene(20) sorbitan monolaurate)일 수 있고, 바람직하게는 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In a method according to an embodiment of the present invention, the solubilizing agent is selected from the group consisting of polyoxyethylene (23) lauryl ether, polyoxyethylene (20) sorbitan monooleate or polyoxyethylene May be polyoxyethylene (20) sorbitan monolaurate, preferably polyoxyethylene sorbitan monolaurate, but is not limited thereto.

본 발명에서, 상기 폴리옥시에틸렌 라우릴 에테르는 brij35와 동일하며, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레이트는 트윈80와 동일하며, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트는 트윈20과 동일한 물질이다.In the present invention, the polyoxyethylene lauryl ether is the same as brij 35, the polyoxyethylene sorbitan monooleate is the same as Tween 80, and the polyoxyethylene sorbitan monolaurate is the same substance as Tween 20. [

본 발명의 일 구현 예에 따른 방법에서, 상기 가용화제는 물에 4~12mM의 농도로 첨가하는 것일 수 있고, 바람직하게는 8~12mM의 농도로 첨가하는 것일 수 있고, 가장 바람직하게는 10mM의 농도로 첨가하는 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In the method according to one embodiment of the present invention, the solubilizing agent may be added to water at a concentration of 4 to 12 mM, preferably at a concentration of 8 to 12 mM, and most preferably at a concentration of 10 mM But the present invention is not limited thereto.

본 발명의 일 구현 예에 따른 방법에서, 상기 메밀은 단메밀(Fagopyrum esculentum Moench) 또는 쓴메밀(Fagopyrum tataricum Gaertner)일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In a method according to an embodiment of the present invention, the buckwheat may be, but is not limited to, Fagopyrum esculentum Moench or Fagopyrum tataricum Gaertner.

본 발명의 일 구현 예에 따른 방법에서, 상기 유용성분은 총 폴리페놀 및 플라보노이드인 것일 수 있고, 상기 플라보노이드는 루틴, 오리엔틴, 이소오리엔틴, 비텍신 또는 이소비텍신일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In a method according to one embodiment of the present invention, the useful ingredient may be total polyphenols and flavonoids, and the flavonoids may be, but are not limited to, rutin, orientin, isoorientin, .

또한, 본 발명은 상기 방법에 의해 제조된 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물을 제공한다.In addition, the present invention provides buckwheat seed extract with increased oil content by the above method.

본 발명의 일 구현 예에 따른 메밀 종자 추출물에서, 상기 유용성분은 총 폴리페놀 및 플라보노이드인 것일 수 있고, 상기 플라보노이드는 루틴, 오리엔틴, 이소오리엔틴, 비텍신 또는 이소비텍신일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In the buckwheat seed extract according to an embodiment of the present invention, the useful ingredient may be total polyphenol and flavonoid, and the flavonoid may be lutein, orientin, isoorientin, bapticin or isobutyric acid, It does not.

또한, 본 발명은 상기 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a cosmetic composition for whitening skin comprising the buckwheat seed extract with increased oil content as an active ingredient.

본 발명에 있어서, '미백'이라 함은 피부의 과다 색소 침착을 억제, 저해 또는 완화시키는 것을 말한다. 피부의 과다 색소 침착은 주근깨, 기미, 자외선 노출 후 과다 색소 침착, 염증 후 과다 색소 침착, 노인흑색점, 갈색 반점 또는 검버섯 등을 포함한다. 상기 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물은 바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 라우릴 에테르, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레이트 또는 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트가 4~12mM로 첨가된 물 추출물일 수 있고, 더욱 바람직하게는 8~12mM로 첨가된 물 추출물일 수 있고, 가장 바람직하게는 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트가 10mM로 첨가된 물 추출물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In the present invention, 'whitening' refers to inhibiting, inhibiting or alleviating hyperpigmentation of the skin. Hyperpigmentation of the skin includes freckles, stains, hyperpigmentation after exposure to ultraviolet light, hyperpigmentation after inflammation, aging black spots, brown spots or black spots. The buckwheat seed extract with increased oil content may preferably be a water extract added with 4 to 12 mM of polyoxyethylene lauryl ether, polyoxyethylene sorbitan monooleate or polyoxyethylene sorbitan monolaurate, More preferably from 8 to 12 mM, and most preferably a water extract to which 10 mM of polyoxyethylene sorbitan monolaurate is added, but is not limited thereto.

본 발명의 일 구현 예에 따른 피부 미백용 화장료 조성물에서, 상기 가용화제를 첨가한 물을 추출용매로 이용하여 추출한 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물은 가용화제를 첨가하지 않은 물 또는 메탄올을 추출용매로 이용하여 추출한 메밀 종자 추출물에 비해 DPPH 자유 라디칼 소거능 및 티로시나제 억제능이 우수하며, 총 폴리페놀 함량과 루틴, 오리엔틴, 이소오리엔틴, 비텍신 및 이소비텍신인 플라보노이드 함량이 높다.In the cosmetic composition for whitening skin according to an embodiment of the present invention, the buckwheat seed extract having an increased amount of the useful component extracted with water containing the solubilizing agent as an extraction solvent may be prepared by dissolving water or methanol not containing a solubilizing agent in an extraction solvent The extracts showed higher DPPH free radical scavenging activity and inhibition of tyrosinase, and higher contents of total polyphenols and rutin, orientin, isoorientin, bitescic and isobutyric acid flavonoids.

본 발명의 일 구현 예에 따른 상기 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물은 티로시나제 활성을 억제하여 멜라닌 생성을 저해시킬 수 있다.The buckwheat seed extract with increased oil content according to an embodiment of the present invention may inhibit tyrosinase activity and inhibit melanin production.

본 발명의 일 구현 예에 따른 피부 미백용 화장료 조성물은 피부 미백 효과를 갖는 화장품 및 세안제 등에 다양하게 이용될 수 있는데, 특히 피부외용연고, 크림, 유연화장수, 영양화장수, 팩, 에센스, 헤어토닉, 샴푸, 린스, 헤어컨디셔너, 헤어트리트먼트, 젤, 스킨로션, 스킨소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 파운데이션, 영양에센스, 선스크린, 비누, 클렌징폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션 및 바디클렌저로 이루어지는 군에서 선택된 1종의 제형을 가질 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.The cosmetic composition for skin whitening according to one embodiment of the present invention can be widely used for cosmetics and cleanser having a skin whitening effect, and is particularly suitable for skin external ointment, cream, softening longevity, nutritional lotion, pack, essence, Shampoo, rinse, hair conditioner, hair treatment, gel, skin lotion, skin softener, skin toner, astringent, lotion, milk lotion, moisturizing lotion, nutrition lotion, massage cream, nutritional cream, moisturizing cream, hand cream, foundation nutrition But are not limited to, one type of formulation selected from the group consisting of essence, sunscreen, soap, cleansing foam, cleansing lotion, cleansing cream, body lotion and body cleanser.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물섬유, 식물섬유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, animal fiber, plant fiber, wax, paraffin, starch, tracant, cellulose derivative, polyethylene glycol, silicone, bentonite, silica, talc or zinc oxide may be used as the carrier component .

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used as a carrier component. In the case of a spray, in particular, / Propane or dimethyl ether.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액의 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용매화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.In the case of the solution or emulsion of the present invention, a solvent, a solvent or an emulsifier is used as a carrier component, and examples thereof include water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, , 3-butyl glycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan fatty acid esters.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, a carrier such as water, a liquid diluent such as ethanol or propylene glycol, a suspending agent such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, Cellulose, aluminum metahydroxide, bentonite, agar or tracant, etc. may be used.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클렌징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 리놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is an interfacial active agent-containing cleansing, the carrier component is selected from aliphatic alcohol sulfate, aliphatic alcohol ether sulfate, sulfosuccinic acid monoester, isethionate, imidazolinium derivative, methyltaurate, sarcosinate, fatty acid amide Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, linolenic derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters.

본 발명의 제형은 형광물질, 살진균제, 굴수성 유발물질, 보습제, 방향제, 방향제 담체, 단백질, 용해화제, 당유도체, 일광차단제, 비타민, 식물 추출물 등을 포함하는 부형제를 추가로 함유할 수 있다.The formulation of the present invention may further contain an excipient including a fluorescent substance, a fungicide, a hygroscopic substance, a humectant, a fragrance, a fragrance carrier, a protein, a solubilizing agent, a sugar derivative, a sunscreen, a vitamin, a plant extract and the like.

상기와 같이 피부 미백용 화장료 조성물을 의약품 또는 화장품으로 제형화할 경우, 활성 성분에 대한 담체로 작용하는 피부에 적용가능한 공지의 부형제를 포함할 수 있다. 의약품으로의 제형화시에는 [Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA]에 개시되어 있는 내용을 참조할 수 있으며, 화장품으로 제형화시에는 [International cosmetic ingredient dictionary, 6th ed., The cosmetic, Toiletry and Fragrance Association, Inc., Washington, 1995]에 개시되어 있는 내용을 참조할 수 있을 것이다. When the cosmetic composition for skin whitening as described above is formulated into pharmaceuticals or cosmetics, it may contain known excipients applicable to the skin acting as a carrier for the active ingredient. When formulating into pharmaceuticals, reference is made to the disclosure of [Remington ' s Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA], and in formulation into cosmetics, International cosmetic ingredient dictionary, 6th ed., The cosmetic, Toiletry and Fragrance Association, Inc., Washington, 1995).

본 발명의 일 구현 예에 따른 피부 미백용 화장료 조성물은 지방 물질, 유기 용매, 용해제, 농축제 및 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온 봉쇄제 및 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 중에서 선택된 하나 이상의 보조제를 추가로 포함할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.The cosmetic composition for skin whitening according to an embodiment of the present invention may contain at least one selected from the group consisting of fatty substances, organic solvents, solubilizers, thickeners and gelling agents, softeners, antioxidants, suspending agents, stabilizers, foaming agents, One or more adjuvants selected from water, ionic or nonionic emulsifiers, fillers, sequestering and chelating agents, preservatives, vitamins, blocking agents, wetting agents, essential oils, dyes, pigments, hydrophilic or lipophilic active agents, But are not limited thereto.

또한, 본 발명은 상기 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화용 화장료 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides an antioxidative cosmetic composition comprising the buckwheat seed extract with increased oil content as an active ingredient.

상기 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물은 바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 라우릴 에테르, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레이트 또는 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트가 4~12mM로 첨가된 물 추출물일 수 있고, 더욱 바람직하게는 8~12mM로 첨가된 물 추출물일 수 있고, 가장 바람직하게는 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트가 10mM로 첨가된 물 추출물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.The buckwheat seed extract with increased oil content may preferably be a water extract added with 4 to 12 mM of polyoxyethylene lauryl ether, polyoxyethylene sorbitan monooleate or polyoxyethylene sorbitan monolaurate, More preferably from 8 to 12 mM, and most preferably a water extract to which 10 mM of polyoxyethylene sorbitan monolaurate is added, but is not limited thereto.

본 발명의 일 구현 예에 따른 항산화용 화장료 조성물에서, 상기 가용화제를 첨가한 물을 추출용매로 이용하여 추출한 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물은 가용화제를 첨가하지 않은 물 또는 메탄올을 추출용매로 이용하여 추출한 메밀 종자 추출물에 비해 DPPH 자유 라디칼 소거능이 우수하다.In the cosmetic composition for antioxidation according to an embodiment of the present invention, the buckwheat seed extract having an increased amount of the useful component extracted with the water containing the solubilizing agent as the extraction solvent is obtained by using water or methanol without the solubilizing agent as an extraction solvent DPPH radical scavenging ability is superior to that of buckwheat seed extract.

또한, 본 발명은 상기 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 색소 침착 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.The present invention also provides a pharmaceutical composition for preventing or treating skin pigmentation diseases containing the buckwheat seed extract having an increased amount of the above-mentioned component as an active ingredient.

본 발명의 일 구현 예에 따른 피부 색소 침착 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물에서, 상기 피부 색소 침착 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물은 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제 제형인 것일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.In the pharmaceutical composition for the prevention or treatment of skin pigmentation diseases according to an embodiment of the present invention, the pharmaceutical composition for preventing or treating skin pigmentation diseases includes a cream, a gel, a patch, a spray, an ointment, A starch, a starch, a liniment, a pasta or a cataplasma.

또한, 본 발명은 가용화제를 첨가한 물을 유효성분으로 함유하는 메밀 종자의 유용성분 추출용 조성물을 제공한다.The present invention also provides a composition for extracting useful components of buckwheat seeds containing water with an added solubilizing agent as an active ingredient.

상기 가용화제를 첨가한 물은 바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 라우릴 에테르, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레이트 또는 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트가 4~12mM로 첨가된 물일 수 있고, 더욱 바람직하게는 8~12mM로 첨가된 물일 수 있고, 가장 바람직하게는 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트가 10mM로 첨가된 물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.The water to which the solubilizing agent is added may preferably be water added with 4 to 12 mM of polyoxyethylene lauryl ether, polyoxyethylene sorbitan monooleate or polyoxyethylene sorbitan monolaurate, May be water added in an amount of 8 to 12 mM, and most preferably, water added with 10 mM of polyoxyethylene sorbitan monolaurate, but is not limited thereto.

또한, 본 발명은 메밀 종자에 가용화제를 첨가한 물을 추출용매로 이용하여 추출하는 단계를 포함하는 메밀 종자 추출물의 유용성분을 증가시키는 방법을 제공한다.The present invention also provides a method for increasing useful components of buckwheat seed extract comprising extracting buckwheat seeds with water containing a solubilizing agent as an extraction solvent.

상기 메밀 종자 추출물의 유용성분을 증가시키는 가용화제를 첨가한 물은 바람직하게는, 폴리옥시에틸렌 라우릴 에테르, 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레이트 또는 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트가 4~12mM로 첨가된 물 추출물일 수 있고, 더욱 바람직하게는 8~12mM로 첨가된 물 추출물일 수 있고, 가장 바람직하게는 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트가 10mM로 첨가된 물 추출물일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다.The water to which the solubilizing agent for increasing useful ingredients of the buckwheat seed extract is added is preferably 4 to 12 mM of polyoxyethylene lauryl ether, polyoxyethylene sorbitan monooleate or polyoxyethylene sorbitan monolaurate May be added water extract, more preferably 8 to 12 mM added water extract, most preferably polyoxyethylene sorbitan monolaurate added to 10 mM, but not limited thereto Do not.

또한, 상기 가용화제를 첨가한 물을 추출용매로 이용하여 추출한 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물은 가용화제를 첨가하지 않은 물 또는 메탄올을 추출용매로 이용하여 추출한 메밀 종자 추출물에 비해 DPPH 자유 라디칼 소거능 및 티로시나제 억제능이 우수하며, 총 폴리페놀 함량과 루틴, 오리엔틴, 이소오리엔틴, 비텍신 및 이소비텍신인 플라보노이드 함량이 높다.In addition, the buckwheat seed extract having an increased amount of the soluble fraction extracted by using the water with the solubilizing agent as the extracting solvent, compared to the buckwheat seed extract extracted with water or methanol without the solubilizing agent, showed DPPH free radical scavenging ability and It has excellent tyrosinase inhibition, high total polyphenol content, and high content of rutin, orientin, isoorientin, bitexin and isobutyric acid flavonoids.

또한, 본 발명은 상기 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 식품 조성물을 제공한다.In addition, the present invention provides a skin whitening food composition comprising buckwheat seed extract having an increased amount of the above-mentioned component as an active ingredient.

본 발명의 상기 유용성분이 증가된 메밀 종자 추출물을 식품첨가물로 사용하는 경우, 상기 추출물을 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다. 유효 성분의 혼합양은 그의 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 본 발명의 추출물은 원료에 대하여 15 중량부 이하, 바람직하게는 10 중량부 이하의 양의로 첨가된다. 그러나, 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 양은 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은 상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다. When the buckwheat seed extract of the present invention is used as a food additive, the extract may be suitably used according to a conventional method. The amount of the active ingredient to be mixed can be suitably determined according to its intended use (prevention, health or therapeutic treatment). Generally, the extract of the present invention is added in an amount of not more than 15 parts by weight, preferably not more than 10 parts by weight, based on the raw material, in the production of food or beverage. However, in the case of long-term consumption intended for health and hygiene purposes or for health control purposes, the amount may be less than the above range, and since there is no problem in terms of safety, the active ingredient may be used in an amount exceeding the above range .

상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 구체적인 예로, 상기 추출물을 이용하여 농산물, 축산물 또는 수산물의 특성을 살려 변형시키는 동시에 저장성을 좋게 한 가공식품을 제조할 수 있다. 이런 가공식품에는 예를 들어, 과자, 음료, 주류, 발효식품, 통조림, 우유가공식품, 육류가공식품, 국수 등을 포함한다. 과자는 비스킷, 파이, 빵, 캔디, 젤리, 껌, 시리얼(곡물푸레이크 등의 식사대용품류 포함) 등을 포함한다. 음료는 탄산음료, 기능성 이온음료, 쥬스(예를 들어, 사과, 배,포도, 알로에, 감귤, 복숭아, 당근, 토마토쥬스 등), 식혜 등을 포함한다. 주류는 청주, 위스키, 소주, 맥주,양주, 과실주 등을 포함한다. 발효식품은 간장, 된장, 고추장 등을 포함한다. 통조림은 수산물 통조림(예를 들어, 참치, 고등어, 공치, 소라 통조림 등), 축산물 통조림(쇠고기, 돼지고기, 닭고기, 칠면조 통조림 등), 농산물 통조림(옥수수, 복숭아, 파인애플 통조림 등)을 포함한다. 우유가공식품은 치즈, 버터, 요구르트 등을 포함한다. 육류가공식품은 돈까스, 비프까스, 치킨까스, 소세지, 탕수육, 너겟류, 너비아니 등을 포함한다. 밀봉포장생면 등의 국수를 포함한다. 이 외에도 상기 조성물은 레토르트식품, 스프류 등에 사용될 수 있다.There is no particular limitation on the kind of the food. As a specific example, the above-mentioned extract can be used to produce a processed food having good storage properties while utilizing the characteristics of agricultural products, livestock products or aquatic products. Such processed foods include, for example, confectionery, drinks, liquor, fermented foods, canned foods, milk processed foods, meat processed foods, noodles and the like. The sweets include biscuits, pies, breads, candies, jellies, gums, cereals (including dinner utensils such as cereal flakes). Drinks include carbonated beverages, functional ionic beverages, juices (such as apples, pears, grapes, aloes, citrus fruits, peaches, carrots, tomato juices, etc.) and sikhye. The mainstream includes sake, whiskey, shochu, beer, liquor, and fruit wine. Fermented foods include soy sauce, miso, and kochujang. Canned products include canned products (for example, tuna, mackerel, sandwiches, canned fish, etc.), canned products (canned beef, pork, chicken and turkey canned products) and canned products (canned products such as corn, peach and canned pineapple). Milk processed foods include cheese, butter, yogurt and the like. Meat processed foods include pork cutlet, beef cutlet, chicken cutlet, sausage, sweet and sour pork, nuggets, nubucki, and the like. And noodles such as sealed packaging raw noodles. In addition, the composition may be used in retort food, soup and the like.

또한, 상기 추출물을 이용하여 기능성식품, 건강식품 또는 건강보조식품을 제조할 수 있다. 기능성식품, 건강식품 또는 건강보조식품은 영양 기능 외에도 생리활성 성분을 포함하여 생체조절 기능을 제공하는 식품을 의미하고, 본 발명의 추출물은 피부 미백 예방 또는 개선 효과를 가지므로 기능성식품, 건강식품 또는 건강보조식품 등의 제조에 이용될 수 있다.In addition, functional foods, health foods or health supplements can be produced using the above extract. The functional food, the health food or the health supplement food refers to a food which provides a bio-controlling function including a physiologically active ingredient in addition to the nutritional function, and the extract of the present invention has a skin whitening prevention or improvement effect, Health food supplements and the like.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail by way of examples. However, the following examples are illustrative of the present invention, and the present invention is not limited to the following examples.

재료 및 방법Materials and methods

1) 실험 재료1) Experimental material

강원도 평창군에서 2015년에 재배한 단메밀과 쓴메밀을 구입하여 4℃ 냉장고에서 보관하여 실험에 이용하였다. 실험에 이용한 가용화제와 HPLC 분석에 이용한 루틴, 오리엔틴, 이소오리엔틴, 비텍신, 이소비텍신은 SIGMA사(Sigma Chemical Co., St. Louis, MO, USA)에서 구입하여 이용하였다.Buckwheat and bitter buckwheat grown in 2015 in Pyeongchang, Gangwon Province were purchased and stored in a refrigerator at 4 ℃ for the experiment. The solubilizer used in the experiment and the routine used for the HPLC analysis, orientin, isoorientin, bitexin and isovitectin were purchased from Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA).

2) 추출용매 제조2) Extraction solvent preparation

추출용매는 물, 메탄올, 그리고 가용화제가 첨가된 물로 준비하였다. 가용화제는 brij35(폴리옥시에틸렌 라우릴 에테르), 트윈80(폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노올레이트), 트윈20(폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트)을 준비하였으며, 각 가용화제마다 1mM, 5mM 및 10mM의 3가지 농도로 희석하여 추출용매로 사용하였다.The extraction solvent was prepared with water, methanol, and water to which the solubilizer was added. Tween 80 (polyoxyethylene sorbitan monooleate) and Tween 20 (polyoxyethylene sorbitan monolaurate) were prepared as the solubilizing agents, and 1 mM, 5 mM and 10 mM each of the solubilizing agents were prepared. And diluted to three concentrations of 10 mM, and used as an extraction solvent.

3) 추출물 제조3) Preparation of extract

분쇄한 시료 1g을 취해 준비된 용매 50mL을 가하고 울트라사운드 배스(ultrasound bath)를 이용하여 40℃에서 30분간 추출한 후 원심분리기(비전과학, VS-5000N, 대한민국)로 5000rpm에서 5분간 원심분리한 뒤 상등액을 취하여 시료로 사용하였다. 1 g of the pulverized sample was taken and 50 mL of the prepared solvent was added. The mixture was extracted with an ultrasound bath at 40 ° C for 30 minutes, centrifuged at 5000 rpm for 5 minutes using a centrifuge (Vision Science, VS-5000N, Was used as a sample.

4) DPPH 자유 라디컬 소거능 측정4) Measurement of DPPH free radical scavenging ability

각 추출물 1mL를 시험관에 넣고 0.15mM DPPH 용액 4mL을 가하여 균일하게 혼합한 뒤 실온에서 30분간 방치한 후 517nm에서 흡광도를 측정하였다. DPPH 자유 라디컬 소거능은 시료첨가구와 무첨가구의 흡광도 차를 백분율로 표시하였다.1 mL of each extract was put into a test tube, 4 mL of 0.15 mM DPPH solution was added thereto, and the mixture was uniformly mixed. The mixture was allowed to stand at room temperature for 30 minutes and absorbance was measured at 517 nm. The DPPH free radical scavenging ability was expressed as a percentage of the absorbance difference between the sample added and the non-added sample.

DPPH 자유 라디컬 소거능(%) = [1-(시료첨가구의 흡광도/시료무첨가구의 흡광도) × 100]DPPH free radical scavenging ability (%) = [1- (absorbance of sample addition sphere / absorbance of sample not added sphere) x 100]

5) 총 폴리페놀 함량 측정5) Total polyphenol content measurement

Folin-Denis법을 약간 변형하여 측정하였다. 추출물 0.2 mL를 시험관에 넣고 증류수 1.8 mL를 가하여 잘 혼합하고 실온에서 3분간 방치하였다. 10% Na2CO3 포화용액 0.4 mL를 첨가하여 혼합하고 증류수 1.4 mL를 더해 총 4 mL로 만든 뒤, 실온에서 1시간 동안 방치한 후 725 nm에서 흡광도를 측정하였다. 총 폴리페놀 화합물은 갈산(gallic acid)을 이용해서 작성한 표준곡선으로부터 함량을 구하였다.The Folin-Denis method was slightly modified and measured. 0.2 mL of the extract was placed in a test tube, mixed with 1.8 mL of distilled water, mixed well, and left at room temperature for 3 minutes. 0.4 mL of a saturated solution of 10% Na 2 CO 3 was added and mixed, and 1.4 mL of distilled water was added to make a total of 4 mL. The mixture was allowed to stand at room temperature for 1 hour and absorbance was measured at 725 nm. Total polyphenol compounds were determined from standard curves prepared using gallic acid.

6) 티로시나제(tyrosinase) 억제 활성 측정6) Measurement of inhibitory activity of tyrosinase

멜라닌 생성에 영향을 주는 효소인 티로시나제의 억제 활성은 버섯 티로시나제를 효소원으로 하는 기질인 L-DOPA와의 반응하여 생성되는 물질인 L-도파퀴논(L-dopaquinone)의 흡광도를 구하는 방법으로 측정하였다. 준비된 시험관에 0.1M 포스패이트 버퍼(pH 6.8) 0.2mL와 5mM L-DOPA 용액 0.2mL 그리고 시료 0.5mL을 혼합하고 티로시나제(250U/mL) 0.1mL을 더하여 35℃에서 2분간 반응시킨 후 475nm에서 흡광도를 측정하였다.The inhibitory activity of tyrosinase, an enzyme affecting melanin production, was measured by measuring the absorbance of L-dopaquinone (L-dopaquinone), which is produced by reaction with L-DOPA, which is a substrate containing mushroom tyrosinase as an enzyme source. To the prepared test tube, 0.2 mL of 0.1 M phosphate buffer (pH 6.8), 0.2 mL of 5 mM L-DOPA solution and 0.5 mL of sample were mixed and 0.1 mL of tyrosinase (250 U / mL) was added and reacted at 35 ° C. for 2 minutes. Absorbance was measured.

7) HPLC 분석7) HPLC analysis

분석용 시료를 HPLC용 물 또는 메탄올에 용해 후 0.45㎛ 맴브레인 필터 (Toyo Roshi Kaisha, Japan)로 여과한 다음 분석에 이용하였으며, HPLC 분석 조건은 아래와 같다.The analytical sample was dissolved in HPLC water or methanol, filtered through a 0.45 μm membrane filter (Toyo Roshi Kaisha, Japan) and used for analysis. HPLC analysis conditions are as follows.

HPLC 분석 조건HPLC analysis conditions 조건Condition 기구Instrument Shimadzu LC system
(CBM-20A, Shimadzu Co, Ltd., Japan)
Shimadzu LC system
(CBM-20A, Shimadzu Co, Ltd., Japan)
칼럼column PrevailC18reversephase 150 x 4.6mmPrevailC18reversephase 150 x 4.6mm 이동상Mobile phase timetime A : 0.1% formic acid waterA: 0.1% formic acid water B : 0.1% formic acid methanolB: 0.1% formic acid methanol 00 7070 3030 3535 3030 7070 오븐 온도Oven temperature 40℃40 주입 부피Injection volume 10㎕10 μl 유속Flow rate 1㎖/min.1 ml / min. 파장wavelength 355nm355 nm

8) 통계처리8) Statistical processing

실험을 통해 얻은 결과는 SPSS(statitical package for social sciences, Version 10.0, Chicago, USA)를 사용하여 던칸의 다중 범위 테스트(Duncan's multiple range test)를 통해 ρ < 0.05 수준에서 통계적 유의성을 검증하였다.Statistical significance was verified at the ρ <0.05 level by Duncan's multiple range test using SPSS (statistical package for social sciences, Version 10.0, Chicago, USA).

실시예Example 1.  One. DPPHDPPH 자유  freedom 라디컬Radical 소거 활성 측정 Measurement of scavenging activity

단메밀의 경우, 물, 메탄올에서 각각 24.19%, 33.87%의 활성을 보였다(도 1A). Brij35, 트윈80 및 트윈20을 첨가한 추출물은 10mM의 농도에서 각각 51.31%, 52.53% 및 53.44%의 활성을 보였으며, 농도 의존적으로 활성이 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 쓴메밀은 물, 메탄올에서 각각 44.93%, 63.21%의 활성을 보였다(도 1B). Brij35, 트윈80 및 트윈20을 첨가한 추출물은 10mM의 농도에서 각각 73.05%, 75.15% 및 76.59%의 활성을 보였으며, 농도 의존적으로 활성이 증가하는 것을 확인할 수 있었다.In the case of buckwheat, 24.19% and 33.87% of activity was observed in water and methanol, respectively (FIG. 1A). The extracts of Brij 35, Tween 80 and Tween 20 showed 51.31%, 52.53% and 53.44% activity at 10 mM concentration, respectively, and the activity was increased in a dose dependent manner. The bitter buckwheat showed 44.93% and 63.21% activity in water and methanol, respectively (Fig. 1B). Brij 35, Tween 80 and Tween 20 showed 73.05%, 75.15% and 76.59% of activity at 10 mM concentration, respectively, and the activity was increased in a concentration-dependent manner.

실시예Example 2. 총 폴리페놀 함량 측정 결과 2. Results of total polyphenol content measurement

단메밀의 경우 물 추출물에서 60.03mg/g, 메탄올 추출물에서 74.94mg/g의 함량을 보였다(도 2A). Brij35, tween80, tween20를 첨가한 추출물은 10mM의 농도에서 각각 142.93mg/g, 144.92mg/g, 159.97mg/g의 함량을 보였으며, 농도 의존적으로 함량이 증가하는 것을 확인할 수 있었다.In case of buckwheat, the content of water extract was 60.03 mg / g and that of methanol extract was 74.94 mg / g (FIG. 2A). The extracts containing Brij35, tween80, and tween20 showed 142.93 mg / g, 144.92 mg / g and 159.97 mg / g at 10 mM concentration, respectively.

쓴메밀은 물, 메탄올에서 각각 80.22mg/g, 151.31mg/g의 함량을 보였다(도 2B). Brij35, tween80, tween20를 첨가한 추출물은 10mM의 농도에서 각각 231.03mg/g, 237.85mg/g, 244.95mg/g의 함량을 보였으며, 농도 의존적으로 함량이 증가하는 것을 확인할 수 있었다.The bitter buckwheat contained 80.22 mg / g and 151.31 mg / g in water and methanol, respectively (Fig. 2B). The extracts containing Brij35, tween80, and tween20 showed 231.03 mg / g, 237.85 mg / g and 244.95 mg / g at 10 mM concentration, respectively.

실시예Example 3.  3. 티로시나제Tyrosinase (( tyrosinasetyrosinase ) 억제 활성 측정) Inhibitory activity measurement

단메밀의 경우, 물 및 메탄올에서 각각 86.02% 및 83.23%의 활성을 보였다(도 3A). Brij35, 트윈80 및 트윈20을 첨가한 추출물은 10mM의 농도에서 각각 79.36%, 78.48% 및 77.41%의 활성을 보였으며, 농도 의존적으로 억제 활성이 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 쓴메밀은 물 및 메탄올에서 각각 82.98% 및 80.05%의 활성을 보였다(도 3B). Brij35, 트윈80 및 트윈20을 첨가한 추출물은 10mM의 농도에서 각각 74.93%, 74.63% 및 74.20%의 활성을 보였으며, 농도 의존적으로 억제 활성이 증가하는 것을 확인할 수 있었다.In case of buckwheat, 86.02% and 83.23% of activity was observed in water and methanol, respectively (Fig. 3A). The extracts of Brij 35, Tween 80 and Tween 20 showed 79.36%, 78.48% and 77.41% activity at a concentration of 10 mM, respectively, and the inhibitory activity was increased in a concentration-dependent manner. The bitter buckwheat showed 82.98% and 80.05% activity in water and methanol, respectively (Fig. 3B). The extracts of Brij35, Tween 80 and Tween 20 showed 74.93%, 74.63% and 74.20% of activity at 10 mM, respectively, and the inhibitory activity was increased in a concentration-dependent manner.

실시예Example 4. 유용물질의  4. Of the useful substance HPLCHPLC 분석 analysis

단메밀의 경우, 가용화제를 첨가한 실험군이 물, 메탄올로 추출한 실험군에 비해 루틴을 비롯한 5개 플라보노이드 화합물이 증가하였다(도 4a 및 도 4b). 물 추출물에서 9.96mg/mL의 함량을 보인 루틴은 brij35, 트윈80 및 트윈20을 10mM의 농도로 첨가하여 추출한 실험군에서 각각 23.05mg/mL, 23.57mg/mL 및 25.78mg/mL로 약 2.4배 증가한 것을 확인할 수 있었다(표 2). In case of buckwheat, five flavonoid compounds including rutin were increased compared to the experiment group in which the solubilizing agent was added to water and methanol (Figs. 4A and 4B). The ratios of 9.96 mg / mL in water extracts were increased approximately 2.4 times to 23.05 mg / mL, 23.57 mg / mL and 25.78 mg / mL, respectively, in the experimental group which was added with 10 mM of brij35, tween 80 and tween 20 (Table 2).

쓴메밀 또한 가용화제를 첨가한 실험군에서 물, 메탄올로 추출한 실험군보다 높은 플라보노이드 화합물 함량을 보였다(도 5a 및 도 5b). 물 추출물에서 584.63mg/mL였던 루틴의 함량은 brij35, 트윈80 및 트윈20이 10mM의 농도로 포함된 추출물에서 각각 815.65mg/mL, 822.48mg/mL 및 829.58mg/mL로 약 1.4배 증가한 것을 확인할 수 있었다(표 2). The bitter buckwheat also showed a higher content of flavonoid compounds in the experimental group added with the solubilizer than in the experimental group extracted with water and methanol (FIGS. 5A and 5B). The contents of the rutin, which was 584.63 mg / mL in the water extract, were found to be about 1.4 times increased to 815.65 mg / mL, 822.48 mg / mL and 829.58 mg / mL in the extracts containing brij35, tween 80 and tween 20 at a concentration of 10 mM (Table 2).

가용화제마다 함량의 차이는 유의적이지 않았으나 농도가 높아질수록 플라보노이드의 함량이 조금씩 증가하는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 물, 메탄올 추출물에서 검출되지 않았던 플라보노이드 화합물이 가용화제를 첨가한 실험군에서 미량이나마 검출되어 농도가 증가할수록 함량 또한 증가하였다.The content of flavonoids was not significantly different for each of the solubilizing agents, but the content of flavonoids was slightly increased as the concentration was increased. The content of flavonoid compounds, which were not detected in water and methanol extracts, was detected in a small amount in the experimental group to which the solubilizing agent was added.

단메밀 및 쓴메밀의 추출용매의 종류에 따른 유용성분 함량 변화Changes in the contents of useful ingredients depending on the type of extraction solvent of buckwheat and bitter buckwheat 루틴Routine 오리엔틴Orientin 이소오리엔틴Isoorientin 비텍신Beatty 이소비텍신Isovichecin water 9.96±0.08 a9.96 + 0.08 a N.D.N.D. N.D.N.D. 0.49±0.00 a0.49 ± 0.00 a 0.44±0.00 a0.44 ± 0.00 a 메탄올Methanol 11.95±0.11 b11.95 ± 0.11 b N.D.N.D. N.D.N.D. 0.58±0.00 b0.58 ± 0.00 b 0.53±0.00 b0.53 ± 0.00 b Brij35
1mM
Brij35
1 mM
12.95±0.15 c12.95 ± 0.15 c 0.66±0.00 a0.66 ± 0.00 a 0.49±0.00 a0.49 ± 0.00 a 0.64±0.01 c0.64 + - 0.01 c 0.57±0.01 c0.57 + - 0.01 c
Brij35
5mM
Brij35
5mM
15.28±0.17 e15.28 ± 0.17 e 0.79±0.01 c0.79 + - 0.01 c 0.58±0.00 c0.58 ± 0.00 c 0.76±0.02 d0.76 + 0.02 d 0.67±0.01 d0.67 ± 0.01 d
Brij35
10mM
Brij35
10 mM
23.05±0.21 f23.05 ± 0.21 f 1.17±0.05 d1.17 ± 0.05 d 0.87±0.01 e0.87 ± 0.01 e 1.14±0.07 e1.14 ± 0.07 e 1.01±0.04 f1.01 0.04 f
트윈80 1mMTwin 80 1mM 13.21±0.11 cd13.21 ± 0.11 cd 0.67±0.01 a0.67 ± 0.01 a 0.50±0.00 a0.50 0.00 a 0.65±0.01 c0.65 ± 0.01 c 0.58±0.00 c0.58 ± 0.00 c 트윈80 5mMTwin 80 5mM 15.80±0.18 e15.80 ± 0.18 e 0.81±0.03 c0.81 0.03 c 0.60±0.01 d0.60 ± 0.01 d 0.78±0.02 d0.78 + 0.02 d 0.70±0.01 e0.70 ± 0.01 e 트윈80 10mMTwin 80 10mM 23.57±0.24 f23.57 ± 0.24 f 1.20±0.04 d1.20 0.04 d 0.89±0.02 e0.89 0.02 e 1.16±0.07 ef1.16 ± 0.07 ef 1.04±0.02 f1.04 0.02 f 트윈20 1mMTwin 20 1mM 13.47±0.08 d13.47 ± 0.08 d 0.69±0.04 b0.69 + 0.04 b 0.51±0.01 ab0.51 ± 0.01 ab 0.67±0.03 c0.67 + - 0.03 c 0.59±0.01 c0.59 + - 0.01 c 트윈20 5mMTwin 20 5mM 15.93±0.05 e15.93 ± 0.05 e 0.81±0.01 c0.81 0.01 c 0.60±0.02 d0.60 0.02 d 0.79±0.02 d0.79 + 0.02 d 0.70±0.01 e0.70 ± 0.01 e 트윈20 10mMTwin 20 10mM 25.78±0.15 g25.78 + - 0.15 g 1.31±0.03 e1.31 ± 0.03 e 0.98±0.01 f0.98 ± 0.01 f 1.27±0.03f 1.27 ± 0.03f 1.13±0.01 g1.13 + - 0.01 g 루틴Routine 오리엔틴Orientin 이소오리엔틴Isoorientin 비텍신Beatty 이소비텍신Isovichecin water 584.63±2.74 a584.63 ± 2.74 a N.D.N.D. N.D.N.D. N.D.N.D. N.D.N.D. 메탄올Methanol 735.94±10.19 b735.94 ± 10.19 b N.D.N.D. N.D.N.D. N.D.N.D. N.D.N.D. Brij35
1mM
Brij35
1 mM
783.83±6.43 c783.83 + - 6.43 c 0.35±0.04 a0.35 + 0.04 a 0.30±0.02 a0.30 0.02 a 0.52±0.03 a0.52 + 0.03 a 0.74±0.05 a0.74 + 0.05 a
Brij35
5mM
Brij35
5mM
803.61±12.38 de803.61 + 12.38 0.48±0.03 b0.48 ± 0.03 b 0.48±0.03 b0.48 ± 0.03 b 0.76±0.04 b0.76 + 0.04 b 0.81±0.01 b0.81 + 0.01 b
Brij35
10mM
Brij35
10 mM
815.65±13.15 def815.65 ± 13.15 def 0.59±0.03 c0.59 + - 0.03 c 0.60±0.02 c0.60 0.02 c 0.85±0.03 c0.85 + - 0.03 c 0.95±0.03 c0.95 + - 0.03 c
트윈80 1mMTwin 80 1mM 783.85±11.21 c783.85 + - 11.21 c 0.36±0.02 a0.36 0.02 a 0.31±0.01 a0.31 + 0.01 a 0.53±0.01 a0.53 + 0.01 a 0.76±0.01 a0.76 + 0.01 a 트윈80 5mMTwin 80 5mM 807.98±13.25 de807.98 ± 13.25 0.49±0.03 b0.49 + 0.03 b 0.45±0.02 b0.45 + 0.02 b 0.78±0.03 b0.78 ± 0.03 b 0.83±0.02 b0.83 0.02 b 트윈80 10mMTwin 80 10mM 822.48±14.11 ef822.48 +/- 14.11 ef 0.62±0.04 c0.62 ± 0.04 c 0.58±0.02 c0.58 0.02 c 0.89±0.03 cd0.89 ± 0.03 cd 1.00±0.05 cd1.00 ± 0.05 cd 트윈20 1mMTwin 20 1mM 787.09±11.12 c787.09 ± 11.12 c 0.35±0.01 a0.35 + 0.01 a 0.32±0.01 a0.32 ± 0.01 a 0.54±0.03 a0.54 0.03 a 0.77±0.02 a0.77 + 0.02 a 트윈20 5mMTwin 20 5mM 811.14±13.39 de811.14 ± 13.39 0.50±0.02 b0.50 0.02 b 0.45±0.01 b0.45 + 0.01 b 0.79±0.02 b0.79 + 0.02 b 0.84±0.03 b0.84 0.03 b 트윈20 10mMTwin 20 10mM 829.58±14.17 ef829.58 +/- 14.17 eF 0.63±0.02 c0.63 + 0.02 c 0.58±0.01 c0.58 ± 0.01 c 0.90±0.03 cd0.90 ± 0.03 cd 1.01±0.04 cd1.01 ± 0.04 cd

Claims (12)

메밀 종자에 8~12mM의 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트를 첨가한 물을 추출용매로 이용하여 추출하는 단계를 포함하는 총 폴리페놀, 루틴, 오리엔틴, 이소오리엔틴, 비텍신 및 이소비텍신이 증가된 메밀 종자 추출물의 제조 방법.Wherein the total polyphenol, the lutein, the orientin, the isotrienethin, the biotecin and the isovitectin synthase, including the step of extracting the buckwheat seeds with water containing 8 to 12 mM polyoxyethylene sorbitan monolaurate as an extraction solvent, A method for producing an increased buckwheat seed extract. 삭제delete 삭제delete 제1항에 있어서, 상기 메밀은 단메밀(Fagopyrum esculentum Moench) 또는 쓴메밀(Fagopyrum tataricum Gaertner)인 것을 특징으로 하는 방법.The method according to claim 1, wherein the buckwheat is selected from the group consisting of Fagopyrum esculentum Moench) or bitter buckwheat ( Fagopyrum lt; / RTI &gt; Gaertner). 삭제delete 삭제delete 제1항 또는 제4항의 방법에 의해 제조된 총 폴리페놀, 루틴, 오리엔틴, 이소오리엔틴, 비텍신 및 이소비텍신이 증가된 메밀 종자 추출물.4. Buckwheat seed extract with increased total polyphenols, rutin, orientin, isoorientin, bitecin and isovitectin produced by the method of claims 1 or 4. 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 메밀 종자에 8~12mM의 폴리옥시에틸렌 소르비탄 모노라우레이트를 첨가한 물을 추출용매로 이용하여 추출하는 단계를 포함하는 메밀 종자 추출물의 총 폴리페놀, 루틴, 오리엔틴, 이소오리엔틴, 비텍신 및 이소비텍신을 증가시키는 방법.Which comprises extracting buckwheat seeds with water containing 8 to 12 mM polyoxyethylene sorbitan monolaurate as an extraction solvent, wherein the total amount of polyphenols, rutin, orientin, isoorientin, And isobutyric acid.
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