KR101830860B1 - 닥나무 추출물을 함유하는 항노화용 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 항노화용 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 닥나무 추출물을 유효성분으로 함유하여 피부 주름을 개선하는 등 피부 노화 현상을 개선하는데 효과적이며 또한 피부 탄력 증진 효과가 우수한 화장료 조성물에 관한 것이다.

Description

닥나무 추출물을 함유하는 항노화용 화장료 조성물{Cosmetic composition containing Broussonetia extract for anti-aging}

본 발명은 항노화용 화장료 조성물에 관한 것으로, 보다 상세하게는 닥나무 추출물을 유효성분으로 함유하여 피부 주름을 개선하는 등 피부 노화 현상을 개선하는데 효과적이며 또한 피부 탄력 증진 효과가 우수한 화장료 조성물에 관한 것이다.

피부의 탄력은 진피 조직의 세포외 기질(ECM; extracelluar matrix) 성분이 담당하게 되는데, ECM은 크게 두 가지 성분으로 구성되어 있다. 하나는 ECM 전체의 약 2~4%를 차지하는 탄력섬유(elastic fiber)이며, 또 다른 하나는 ECM 전체의 약 70~80%를 차지하고 있는 콜라겐이다. 탄력섬유는 엘라스틴(elastin)이라는 무정형의 기질에 미원섬유(microfibrils)들이 박혀 있는 형태를 띠고 있으며, 엘라스틴은 라이신에서 유래한 데스모신(desmosine)과 아이소데스모신(isodesmosine)이라는 탄력섬유에서만 발견되는 아주 톡특한 아미노산으로 구성된 단백질이다. 이러한 데스모신과 아이소데스모신 등은 긴 펩타이드 사슬안에서 가교(cross-links)를 형성하고 있는데, 이러한 구조가 엘라스틴으로 하여금 고무와 같은 성질을 갖게 한다.

또한, 엘라스틴으로 구성된 탄력섬유는 콜라겐(collagen)이라고 하는 교원섬유와 함께 존재하는데, 엘라스틴과 콜라겐이 충분히 존재하는 상태에서 피부 탄력유지가 가능하다.

피부 탄력의 저하는 노화나 자외선 등에 의해 유발되는 콜라겐과 엘라스틴의 생성 저하 또는 파괴에 기인한다. 특히, 콜라게나아제(collagenase)와 엘라스타아제(elastase) 같은 기질 메탈로 프로테아제(matrix metallo protease)의 발현으로 인하여 피부 내에서 정상적으로 생성된 콜라겐과 엘라스틴이 분해되어 피부 탄력이 저하 되게 된다.

이러한 탄력감소의 원인이 되는 콜라겐 및 엘라스틴의 감소를 억제하려는 목적으로 여러 가지 물질들이 개발되어 사용되고 있으며, 레티놀과 레티노익산 등의 레티노이드 등이 탄력개선 효과를 나타내어(Dermatology therapy, 1998, 16, 357～364) 많이 이용되고 있다. 하지만, 이들 레티노이드들은 소량만을 피부에 적용하여도 자극이 나타난다는 단점을 가지고 있어 피부에 자극이 적으면서도 우수한 항노화 및 피부 탄력 향상 효과를 나타내는 물질에 대한 수요가 있다.

이에 본 발명자들은 천연물 추출물 중에서 우수한 항노화 및 탄력 향상 효과를 갖는 원료를 찾고자 하는 연구 중에, 닥나무 추출물이 항노화 및 피부 탄력 향상 효과가 우수하다는 것을 발견하여 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명의 목적은 닥나무 추출물을 유효성분으로 함유하여 항노화 및 피부 탄력 향상 효과가 우수한 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 닥나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화용 화장료 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 닥나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 탄력 향상용 화장료 조성물을 제공한다.

또한, 본 발명은 닥나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 닥나무 추출물은 엘라스타아제 및 콜라게나아제의 발현을 억제시키는 효능이 우수하며, 두 활성의 복합 상승 효과를 통하여 피부 탄력 향상 효과도 뛰어나므로, 닥나무 추출물은 화장료 조성물에 함유됨으로써 우수한 항노화 및 탄력 향상 효과를 제공하는 성분으로 유용하게 사용될 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 닥나무 추출물을 유효성분으로 함유한다.

본 발명에서 사용되는 닥나무속에는 닥나무(Broussonetia kazinoki Sieb), 꾸지나무(Broussonetia papyrifera Vent), 애기닥나무(Broussonetia kazinoki var. humilis) 등이 있으며, 낙엽활엽성의 관목으로 한국의 대부분 지역(주로 남부에 많이 분포됨), 중국, 대만, 일본 등에 분포하며 지리적으로 산기슭 양지쪽, 밭둑 등에 난다. 닥나무는 그 인피섬유가 제지의 원료로 사용되어 오고 있으며 또한 여러 가지 약효를 갖고 있어 강장, 명목(明目)작용, 음위, 수종, 익기, 이뇨 등에 효과가 있고 풍을 제거하며, 피를 맑게 하고 시력감퇴 등에 효능이 있는 것으로 알려지고 있다.

본 발명에 사용된 닥나무 추출물은 닥나무로부터 침출, 전출하여 얻은 침출액 뿐 아니라 침출액을 다시 일부 또는 전부 농축하여 얻은 농축물 또는 상기의 농축물을 다시 건조시켜 제조한 침체, 전제, 정기, 유동엑기스 및 닥나무 중에 함유되어 주 효과를 발휘하는 화학 물질은 물론 식물 그 자체를 모두 포함한다. 또한 본 발명에서는 줄기, 뿌리, 잎, 꽃, 열매 등 닥나무의 모든 부분으로부터의 추출물을 사용할 수 있으며, 어느 특정 부분의 추출물로 한정되지 않는다.

본 발명에서 사용되는 닥나무 추출물의 제조방법으로는 공지의 방법을 사용하는 것이 가능하다. 예를 들면, 닥나무를 자연 건조 또는 강제 건조 등 임의의 방법으로 건조하여 잘게 자른 후, 물, 에탄올, 부탄올, 아세톤 등의 극성 용매; 에테르, 헥산, 벤젠, 클로로포름, 에틸아세테이트 등의 비극성 용매; 상기 비극성 용매와 극성 용매의 혼합 용매; 알칼리 수 등의 용매, 또는 콩기름, 참기름 등의 식물유 등을 사용하여 냉침, 페르콜레이션(percolation), 온침 등의 임의의 방법에 의해서 침출 처리하여 유효 성분을 함유한 침출물을 얻는다. 침출 처리는 냉침과 페르콜레이션의 경우 12~96시간 정도, 온침의 경우는 사용하는 용매 등의 종류와 온도에 따라 상이하나 바람직하게는 용매의 환류 온도에 가까운 온도로 0.5~24시간 정도 수행하는 것이 좋다. 특히, 함수 알코올에 침출한 틴크나 유동 엑기스 또는 엑기스의 것을 사용하는 것이 좋다.

본 발명에 의한 화장료 조성물은 상기 닥나무 추출물을 조성물 총 중량에 대하여 0.001~90중량%로 함유할 수 있으며, 바람직하게는 0.001~50중량%로 함유할 수 있다. 상기 닥나무 추출물의 함량이 0.001중량% 미만이면 상기 추출물에 의한 피부 탄력 개선 및 주름 개선 효과를 크게 얻을 수 없고, 90중량%를 초과하면 피부 안전성 또는 제형상의 문제가 있기 때문이다.

본 발명에 의한 항노화용 화장료 조성물은 피부 탄력을 증진시키고 주름을 개선시키는 효과가 뛰어나다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 화장품학 또는 피부과학적으로 허용가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화될 수 있다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로서, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한 포말(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.

또한 본 발명에 의한 화장료 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다.

이하, 시험예 및 실시예를 들어 본 발명의 구성 및 효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 시험예 및 실시예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 발명의 범주 및 범위가 하기 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다.

[실시예 1] 닥나무 추출물의 제조

건조된 닥나무 전초 1kg을 정제수 10L에 가한 후 끓을 때까지 가열하고 10분간 더 가열한 다음 물을 제거하여 세척한 후 따로 정제수 10L를 가하여 다시 한 번 세척하였다. 잔류물을 풍건한 후 70% 에탄올 20L에 가한 다음 환류장치를 연결한 후 가온하여 24시간 환류 추출하였다. 80메쉬의 체를 이용하여 고형분을 제거한 후 남은 여액을 다시 여과한 후 감압 농축기를 이용하여 여액 중의 용매를 증류 제거하여 약 50g의 녹색 고형분을 얻었다.

[시험예 1] 엘라스타아제 활성 억제 효능 측정

상기 실시예 1의 닥나무 추출물의 엘라스타아제 활성 저해능을 EGCG와 비교하여 측정하였다. 사용된 엘라스타아제와 기질은 미국 시그마알드리치 사로부터 상업적으로 구매하였다(Cat.No. E0127).

하기의 시험방법으로 엘라스타아제 활성 저해작용을 시험하였다.

96 웰 플레이트에서 10mg/L Tris-HCL 완충액(pH 8.0)으로 조제한 실시예 50μL 및 20㎍/mL 엘라스타아제·타입 III 용액 50μL를 혼합하였다. EGCG 250μM은 양성 대조군으로 사용하였으며 음성 대조군인 비처리군은 증류수를 사용하였다. 그 후, 상기 완충액으로 조제한 0.4514㎎/mL N-SUCCINYL-ALA-ALA-ALA-p-NITROANILIDE 100μL를 첨가하고, 25℃에서 15분 반응시켰다. 반응종료 후, 파장 415㎚에 있어서의 흡광도를 측정하였다. 동일한 방법으로 공시험을 행하여 보정하였다.

엘라스타아제 활성 저해작용의 계산방법은 이하와 같다. 결과를 표 1에 나타낸다.

엘라스타아제 활성 저해율(%) = {1-(C-D)/(A-B)}×100

A: 실험시료 무첨가, 효소 첨가에서의 파장 415 ㎚에 있어서의 흡광도

B: 실험시료 무첨가, 효소 무첨가에서의 파장 415 ㎚에 있어서의 흡광도

C: 실험시료 첨가, 효소 첨가에서의 파장 415 ㎚에 있어서의 흡광도

D: 실험시료 첨가, 효소 무첨가에서의 파장 415 ㎚에 있어서의 흡광도

화합물	발현정도(%)
비처리군	100
EGCG	90±1.2
실시예 1	85±3.2

상기 표 1에 나타낸 바와 같이, 실시예 1의 엘라스타아제 활성 억제 정도가 엘라스타아제 활성 억제제로 알려져 있는 EGCG와 비교하여서도 비슷하거나 보다 우수한 것으로 나타나 본 발명의 닥나무 추출물의 엘라스타아제 활성 억제 효과가 우수함을 확인할 수 있다.

[시험예 2] 콜라게나아제(MMP-1) 저해능

상기 실시예 1의 닥나무 추출물의 콜라게나아제 생성 저해능을 레티노익산과 비교하여 측정하였다.

2.5%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Media) 배지가 들어있는 96공 평판배양기(96-well microtiter plate)에 인간의 섬유아세포를 5,000 세포/공(well)이 되도록 넣고, 70~80% 정도 자랄 때까지 CO₂ 5%, 37℃ 배양기(incubator)에서 배양하였다. 그 후 실시예 1의 닥나무 추출물을 10㎍/ml 농도로 24시간 동안 처리한 다음, 세포배양액을 채취하였다.

상업적으로 이용가능한 콜라게나아제 측정기구(미국 아머샴파마샤 사, Catalog #: RPN 2610)를 이용하여 채취한 세포배양액의 콜라게나아제 생성 정도를 측정하였다. 먼저 1차 콜라게나아제 항체가 균일하게 도포된 96-공 평판(96-well plate)에 채취한 세포 배양액을 넣고 3시간 동안 항원-항체 반응을 항온조에서 실시하였다. 3시간 후 발색단이 결합된 2차 콜라겐 항체를 96-공 평판(96-well plate)에 넣고 다시 15분간 반응시켰다. 15분 후 발색유발물질(3,3',5,5'-tetramethylbenzidine, sigma)을 넣어 실온에서 15분간 발색을 유발시키고, 다시 1M 황산을 넣어 발색반응을 중지시키면 반응액의 색깔은 노란색을 띠게 되며 반응 진행의 정도에 따라 노란색의 정도가 다르게 나타났다.

노란색을 띠는 96-공 평판(96-well plate)의 흡광도를 흡광계를 이용하여 405nm에서 측정하고, 하기 수학식 1에 의해 콜라게나아제의 합성 정도를 계산하였으며, 그 결과는 하기 표 2에 나타내었다. 이때 조성물을 처리하지 않은 군에서 채취한 세포 배양액의 반응 흡광도를 대조군으로 하였다.

화합물	발현정도(%)
비처리군	100
레티노익산	75±3.4
실시예 1	72±2.1

상기 표 2에 나타낸 바와 같이, 실시예 1의 콜라게나아제 발현 정도가 콜라게나아제 발현 저해제로 알려져 있는 레티노익산과 비교하여서도 콜라게나아제 발현 저해 효과가 비슷한 수준임을 알 수 있다.

이와 같은 결과를 통하여, 본 발명에 의한 닥나무 추출물은 기질 메탈로 프로테아제(MMP-1)를 저해시키는 효과를 가짐을 확인할 수 있다.

[시험예 3] 피부 탄력 향상 효능 확인

사람에서의 피부 탄력 향상 효과를 확인하기 위하여 상기 실시예 1에서 얻은 닥나무 추출물을 활용하여 하기 표 3의 조성비에 따라 외용제를 영양크림의 제형으로 하여 제형예 1과 비교제형예 1을 제조하였다. 하기 배합성분의 함량비의 단위는 중량%이다.

배합성분	제형예1	비교제형예1
정제수	To 100	To 100
실시예 1	0.1	-
식물성 경화유	1.50	1.50
스테아린산	0.60	0.60
글리세롤 스테아레이트	1.00	1.00
스테아릴 알코올	2.00	2.00
폴리글리세릴-10 펜타스테아레이트 & 베헤닐 알코올 &소디움 스테아로일 락틸에이트	1.00	1.00
아라키딜 베헤닐 알코올 &아라키딜글루코사이드	1.00	1.00
세틸아릴 알코올 & 세테아릴글루코사이드	2.00	2.00
PEG-100 스테아레이트 & 글리세롤올레이트 & 프로필렌글리콜	1.50	1.50
카프릴릭/카르릭 트리 글리세라이드	11.00	11.00
사이클로메디콘	6.00	6.00
방부제, 향	적량	적량
트리에탄올 아민	0.1	0.1

상기 표 3의 제형예 1과 비교제형예 1의 탄력 개선 효과를 확인하기 위하여 다음과 같이 평가하였다. 30-40대의 건강한 여성 40명을 각각 제형예 1과 비교제형예 1의 2개 군에 대해 20명씩 2조로 나누어 영양크림을 매일 1회씩 12주간 안면에 도포하게 한 후, 피부탄력측정기(Cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)를 이용하여 피부탄력을 측정하였다. 그 결과는 하기 표 4에 나타내었다. 표 4의 결과값은 Cutometer SEM 575의 ΔR8(R8(왼쪽)-R8(오른쪽)) 값으로 기재하였는데, R8 값은 피부 점탄성(viscoelasticity)의 성질을 나타낸다.

실험제품	피부탄력효과
제형예 1	0.42
비교제형예 1	0.10

상기 표 4에 나타난 바와 같이, 본 발명의 닥나무 추출물이 함유된 제형예 1은 비교제형예를 도포한 군에 비하여 피부 탄력성이 더 증가되었다.

따라서, 본 발명의 닥나무 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 피부 탄력 향상에 매우 효과적임을 확인할 수 있다.

[시험예 4] 피부 주름 개선 효능 확인

본 발명의 조성물에 의한 사람에서의 주름 개선 효과를 확인하기 위하여 상기 표 3의 조성비에 따라 외용제를 영양크림의 제형으로 하여 제형예 1과 비교제형예 1을 제조하였다.

상기 표 3의 제형예 1과 비교제형예 1의 주름 개선 효과를 확인하기 위하여 다음과 같이 평가하였다. 40대의 건강한 여성 40명을 각각 제형예 1과 비교제형예 1의 2개 군에 대해 20명씩 2조로 나누어 영양크림을 매일 1회씩 12주간 안면에 도포하게 한 후, 실리콘을 이용하여 레플리카를 떠서 주름의 상태를 피부측정기(visiometer, SV600, Courage+Khazaka electronic GmbH, Germany)로 측정하여 화상분석하였다. 그 결과는 하기 표 5에 나타내었다. 하기 표 5의 값은, 도포 12주 후의 각각의 변수(parameter)값에서 도포 전 변수값을 뺀 것의 평균을 나타낸 것이다.

사용 8주 후 임상 결과	R1	R2	R3	R4	R5
제형예 1	-0.19	-0.18	-0.10	-0.03	-0.03
비교제형예 1	0.27	0.26	0.21	0.03	0.03

R1 : 주름 등고선의 최고치와 최저치의 차이값

R2 : 주름 등고선을 임의로 5칸씩 나눈 후 그 중 R1값 들의 평균

R3 : 5개씩 나눈 R1값 중 최고 값

R4 : 주름 등고선의 베이스라인(baseline)에서 각 각의 꼭대기와 계곡의 값을 뺀 평균값

R5 : 주름 등고선의 베이스라인(baseline)에서 각 각의 주름 윤곽을 뺀 값의 차이 값

상기 표 5에서 나타낸 바와 같이, 제형예 1의 외용제 조성물은 피부 주름 개선 효과가 아주 우수함을 알 수 있었다.

따라서, 본 발명의 닥나무 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 피부 주름 개선에 매우 효과적임을 확인할 수 있다.

Claims (7)

1. 삭제
2. 닥나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 탄력 향상용 화장료 조성물로서,
   상기 닥나무 추출물은 조성물 전체 중량 대비 0.1 내지 50중량%로 함유되며,
   상기 닥나무 추출물은 닥나무 전초를 물에 넣고 끓인 다음, 물을 제거하고 세척하여 얻은 잔류물을 건조시킨 후, 이것을 환류 하에 에탄올 수용액으로 추출한 다음, 체로 걸러 고형분을 제거한 후, 남은 여액 중의 상기 용매를 감압농축기에서 제거하여 수득한 것이고,
   상기 닥나무 추출물이 엘라스타아제의 활성을 억제하여 피부 탄력을 향상시키는 것을 특징으로 하는, 피부 탄력 향상용 화장료 조성물.
3. 닥나무 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물로서,
   상기 닥나무 추출물은 조성물 전체 중량 대비 0.1 내지 50중량%로 함유되며,
   상기 닥나무 추출물은 닥나무 전초를 물에 넣고 끓인 다음, 물을 제거하고 세척하여 얻은 잔류물을 건조시킨 후, 이것을 환류 하에 에탄올 수용액으로 추출한 다음, 체로 걸러 고형분을 제거한 후, 남은 여액 중의 상기 용매를 감압농축기에서 제거하여 수득한 것이고,
   상기 닥나무 추출물이 콜라게나아제의 생성을 저해하여 피부 주름을 개선시키는 것을 특징으로 하는, 피부 주름 개선용 화장료 조성물.
4. 삭제
5. 삭제
6. 제2항의 화장료 조성물을 제형화하여 만든 피부 탄력 향상용 화장품.
7. 제3항의 화장료 조성물을 제형화하여 만든 피부 주름 개선용 화장품.