KR101828167B1 - 아로니아 추출물을 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 아로니아의 비만 억제 활성 증진을 위한 아로니아의 추출 방법 및 그 추출물에 관한 것으로, 보다 구체적으로는 아로니아의 열수, 에탄올, 초음파 및 초고압분쇄혼합 추출 공정을 이용하여 수득한 추출물이 우수한 비만 억제활성 효과가 있어 본 발명에 따르면, 아로니아의 비만 억제 활성물질의 용출을 증진시킴과 비만 억제활성을 증진시킴으로써 비만억제에 쓰이는 화학약물과 비교하여 인체에 대한 안전성과 낮은 부작용을 가지므로 식품 및 의약품 소재로서의 아로니아 추출물의 가치가 크게 증진될 수 있다.
Description
본 발명은 아로니아 추출물을 함유하는 비만의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 지방억제 활성 증진을 목적으로 하는 아로니아 추출물의 제조방법, 그 추출물 및 이의 용도에 관한 것이다.
현대사회는 각종 기술의 발달로 인간은 풍족하고 편리한 생활을 유지하고 있다. 그에 따라 신체활동의 비율이 줄어, 섭취하는 칼로리에 비해 소모하는 칼로리 양 또한 줄어들고 있다. 이로 인해 과체중, 비만 등의 질환이 전 세계적으로 증가하고 있다. 우리나라도 마찬가지로 점차 서구화되는 식습관으로 비만 인구가 나날이 급격하게 늘어나는 추세이다. 우리나라는 성인 비만율이 2013년 기준 남성은 37.6%, 여성은 28.0%로 보고되었으며, 향후 더욱 증가할 것이라고 예상하고 있다. 비만은 심각한 질병으로 부상하였으며, 세계보건기구(WHO)에서는 2000년부터 비만을 주요 보건의료 문제로 지정하였다. 비만은 심혈관계 질환, 고지혈증, 간기능 저하, 당뇨병, 내분비 장애, 폐기능 장애, 각종 암의 원인이 되는 등 합병증의 발병을 증가시키기도 한다.
이러한 비만의 급격한 증가로 비만 치료제 역시 세계 시장에서 막대한 이윤이 창출되고 있으나, 부작용 또한 만만치 않아 치료제 사용에 많은 제한이 있다. 그에 따라 비만 치료제의 부작용을 최대한 없애고 효능이 향상된 치료제 개발이 시급하다. 이것을 타개할 수 있는 방법으로 천연물을 이용한 치료제의 개발이 주목받고 있는데, 천연물은 오래전부터 약재로 사용되어 수많은 생리활성을 나타낸다. 현재 천연물을 이용한 치료제 개발이 활발하게 진행되고 있다.
한편, 아로니아(Aronia melanocarpa)는 장미과에 속하는 베리류로서, 동북 아메리카 및 동유럽에서 자생하고 있다. 검붉은색을 띠는 아로니아는 근래에는 전 세계에 널리 재배되고 있으며, 또한 원예종에서 2품종 간에 교배육종으로 재배되고 있다.
아로니아는 특히, 안토시아닌 함유량이 자연계 식물들 중에서 가장 높은 군에 속하는 것으로 잘 알려져있다. 안토시아닌 중에서도 Cyanidin-3-galactoside를 가장 많이 함유하고 있으며, 그 밖에도 다양한 종류의 안토시아닌이 함유되어있다. 기타 다른 생리활성물질로 플라보노이드 및 페놀류의 물질이 다량 함유된 것으로 연구 및 보고된 바 있다.
이러한 아로니아는 뛰어난 항산화 효과와 항염증과 면역의 증강에 효능을 보이는 것으로 밝혀졌으며, 항암, 당뇨 및 심혈관계 질환 관련 효능에 대해서도 많은 연구가 이루어졌다.
일반적인 천연물의 추출방법은 물, 에탄올, 메탄올, 헥산 등 다양한 용매를 사용하혀 용매별로 추출하는 것이고, 그 밖에도 초음파, 초고압 등의 물리적인 공정을 도입하여 추출하는 방법이 있으며, 용매 없이 착즙하는 방법도 있다.
그러나 안토시아닌은 열에 매우 불안정한 물질이므로, 아로니아의 비만 억제 활성물질의 용출을 증진시킴과 동시에 안토시아닌 파괴를 최소한으로 할 수 있는 추출법의 확립이 시급하다.
이에 본 발명자들은 아로니아의 비만 억제 활성물질의 용출을 극대화시킴과 동시에 비만 억제활성을 증진시키기 위하여 다양한 추출방법으로 비만 억제 활성 물질을 증진시킬 수 있음을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 아로니아 추출물을 포함하는 비만의 예방 및 개선용 조성물의 제조방법을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 본 발명의 아로니아 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제공하는데 있다.
본 발명의 또 다른 목적은 본 발명의 아로니아 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방 및 개선용 식품 조성물을 제공하는데 있다.
상기와 같은 본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은
(a) 아로니아 생과를 동결건조하여 건조된 아로니아를 분쇄하여 분말을 얻는 단계;
(b) 상기 단계 (a)의 아로니아 분말과 물 또는 에탄올을 혼합한 후 초고압분쇄혼합기를 이용하여 추출한 다음 농축 및 동결건조하는 단계; 및
(c) 상기 단계 (b)에서 얻은 동결건조 아로니아를 분쇄하여 분말화하는 단계를 포함하는 비만의 예방 및 개선용 조성물의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 아로니아는 블랙초크베리, 레드초크베리, 아로니아 멜라노카파 아론, 아로니아 멜라노카파 네로, 아로니아 멜라노카파 바이킹 및 아로니아 멜라노카파 메킨지로 이루어진 군 중에서 선택될 수 있다.
본 발명의 일실시예에서, 상기 단계 (a)의 동결은 -60℃ 내지 -50℃에서 급속냉동하여 동결하는 것이 바람직하고, -50℃에서 동결하는 것이 보다 바람직하나 이에 한정하지 않는다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 물 또는 에탄올을 이용하여 추출한 추출물은 열을 가한 추출법이 아닌 초고압분쇄혼합기에서 처리하여 수득한 추출물이라는 점에 특징이 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 아로니아 추출물은 (a) 아로니아와 물, 또는 아로니아와 70% 에탄올을 1:10 (w/w)의 중량비로 혼합한 후 초고압분쇄혼합기 20,000 psi의 조건에서 15분간 추출하는 단계; 및 (b) 초고압분쇄혼합기에서 추출된 아로니아 추출물을 여과, 감압농축 및 동결건조하는 단계를 통해 수득할 수 있다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 아로니아 추출물은, (a) 아로니아와 물, 또는 아로니아와 70% 에탄올을 1:10 (w/w)의 중량비로 혼합한 후 120 kHz 조건에서 1시간 동안 초음파 처리하여 60℃에서 12시간 추출하는 단계; 및 (b) 추출된 아로니아 추출물을 여과, 감압농축 및 동결건조하는 단계를 통해 수득할 수 있다.
또한, 본 발명은 상기 방법에 따라 제조된 아로니아 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방 및 개선용 조성물을 제공한다.
본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 조성물은 비만의 예방 및 개선 효과를 갖는 기능성 식품 조성물 또는 비만의 예방 및 치료 효과를 갖는 약학적 조성물일 수 있다.
본 발명의 제조방법에 따라 제조된 아로니아 초고압 분쇄 추출물 및 초음파 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방 및 개선용 조성물은 비만 억제활성이 우수하며, 그동안 비만 억제 용도로 사용된 화학합성약물에 비해 인체에 대한 안전성이 높고 부작용이 적어 기능성 식품 및 의약품 소재로 유용하게 사용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 일실시예에 따라 제조된 아로니아 추출물을 처리한 지방세포의 분화억제 평가를 나타낸 그래프이다.
도 2는 본 발명의 일실시예에 따라 제조된 아로니아 추출물을 처리한 지방세포에서 확인한 PPAR-γ, CREB, SREBP1 및 FAS의 발현억제 정도를 나타낸 도면이다.
도 3은 본 발명의 일실시예에 따라 제조된 아로니아 추출물을 투여한 실험용 쥐의 체중 증가율을 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일실시예에 따라 제조된 아로니아 추출물을 투여한 실험용 쥐를 촬영한 사진이다.
도 2는 본 발명의 일실시예에 따라 제조된 아로니아 추출물을 처리한 지방세포에서 확인한 PPAR-γ, CREB, SREBP1 및 FAS의 발현억제 정도를 나타낸 도면이다.
도 3은 본 발명의 일실시예에 따라 제조된 아로니아 추출물을 투여한 실험용 쥐의 체중 증가율을 나타낸 그래프이다.
도 4는 본 발명의 일실시예에 따라 제조된 아로니아 추출물을 투여한 실험용 쥐를 촬영한 사진이다.
이하, 본 발명을 상세하게 설명한다.
본 발명은 아로니아 초고압 분쇄 추출물 및 초음파 추출물을 유효성분으로 포함하는 비만의 예방 및 개선용 조성물을 제공한다.
상기 조성물은 하기 단계를 포함하는 방법에 따라 제조될 수 있다:
(a) 아로니아 생과를 동결건조하여 건조된 아로니아를 분쇄하여 분말을 얻는 단계;
(b) 상기 단계 (a)의 아로니아 분말과 물 또는 에탄올을 혼합한 후 초고압분쇄혼합기 또는 초음파 추출기를 이용하여 추출한 다음 농축 및 동결건조하는 단계; 및
(c) 상기 단계 (b)에서 얻은 동결건조 아로니아를 분쇄하여 분말화하는 단계.
본 발명에 따른 비만 억제 활성이 증진된 아로니아 추출물의 제조방법을 보다 구체적으로 설명하면 다음과 같다.
[제1단계:
아로니아
생과의 건조]
아로니아 생과를 동결건조기에 넣고 3일간 동결건조를 진행한다. 구체적으로 -50℃, 5m torr 조건에서 3일간 건조하였다. 건조된 아로니아를 분쇄기에서 충분히 분쇄하여 분말상태로 제조한다.
[제2단계:
아로니아
추출물 시료의 제조]
상기 1단계에서 얻은 아로니아 분말에 대해 10배 중량의 물 또는 70% 에탄올 용매를 사용하여 추출을 진행한다. 초고압분쇄혼합기를 이용하여 20,000 psi 압력 조건에서 15분간 추출액을 통과시켜 추출물을 획득하였다. 이때 아로니아 분말은 충분히 분쇄된 분말을 사용하여야 한다.
또한, 상기 1단계에서 얻은 아로니아 분말에 대해 10배 중량의 물 또는 70% 에탄올 용매를 사용하여 추출을 진행한다. 초음파 120 kHz 조건에서 1시간 동안 처리하여 60℃에서 12시간을 추출하여 추출물을 획득하였다. 이때 아로니아 분말은 충분히 분쇄된 분말을 사용하여야 한다.
추출이 끝나고 난 후 필터종이를 이용하여 추출물의 불순물을 제거한 뒤, 회전감압농축 후, 동결건조기를 사용하여 시료를 제조할 수 있다.
[제3단계:
아로니아
추출물 시료의 비만 억제 활성 증진을 위한 최적의 추출 방법 확립]
본 발명의 방법으로 제조된 아로니아 시료를 통하여, 비만 억제 활성에 관한 실험을 실시하여 초고압 분쇄 혼합 추출이 비만 억제 활성에 미치는 영향을 확인한 후 최적의 추출공정을 확립한다.
또한, 본 발명은 상기 추출 방법에 의해 제조된 지방 억제 활성이 증진된 아로니아의 추출물을 제공한다.
본 발명의 아로니아의 추출물은 상술한 추출 방법을 이용하여 제조된 것으로서, 양 발명의 공통된 내용은 반복 기재에 따른 명세서의 과도한 복잡성을 피하기 위하여, 그 기재를 생략한다.
본 발명에 따른 아로니아의 추출 방법에 의해 제조된 아로니아 추출물은 천연물로서 인체에 대한 안전성과 낮은 부작용을 가지며, 지방세포 분화를 억제하고(도 1 참조), 지방세포 분화 유도 인자 PPAR-γ, CREB, SREBP1, FAS를 억제시키며(도 2 참조), 실험용 쥐의 체중 증가량을 감소시켜(도 3, 4 참조), 비만 질환의 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
따라서 본 발명의 상기 조성물은 비만의 예방 및 개선 효과를 갖는 기능성 식품 조성물 또는 비만의 예방 및 치료 효과를 갖는 약학적 조성물을 제공한다.
하나의 구체적인 양태로서, 본 발명의 조성물은 비만 예방 및 개선을 위하여 경구 또는 비경구로 투여가 가능한 약제학적 조성물의 형태로 사용할 수 있다. 즉, 본 발명의 조성물이 약제학적 조성물로 사용되는 경우 상기 약제학적 조성물은 실제 임상 투여 시에 경구 및 비경구의 여러 가지 제형으로 투여될수 있다. 상기 약제학적 조성물을 제제화할 경우에는 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제 및 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제된다. 경구 투여를 위한 고형 제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제 및 캡슐제 등을 섞어 조제된다. 또한 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스티레이트 탈크 같은 윤활제들도 사용된다. 경구 투여를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제 및 시럽제 등이 해당되는데 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제 및 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제가 포함된다. 비수성용제와 현탁용제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔(witepsol), 마크로골, 트윈(tween) 61, 카카오지, 라우린지, 글리세롤 및 젤라틴 등이 사용될 수 있다.
다른 하나의 구체적 양태로서, 본 발명의 조성물은 비만 개선, 특히 억제를 위하여 단독으로, 또는 수술, 방사선 치료, 호르몬 치료, 화학 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
본 발명의 조성물은 비만 예방 및 개선을 목적으로 식품 조성물의 형태로 사용될 수 있다. 본 발명의 조성물을 식품 조성물의 형태로 사용할 경우, 상기 식품 조성물을 그대로 사용하거나 또는 다른 식품에 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용할 수 있고, 이는 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용할 수 있다. 유효성분의 혼합양은 사용 목적(예방, 건강 또는 치료적 처치)에 따라 적합하게 결정될 수 있다. 일반적으로, 식품 또는 음료의 제조시에 본 발명의 조성물은 원료에 대하여 15중량% 이하, 바람직하게는 10 중량% 이하의 양으로 첨가된다. 그러나 건강 및 위생을 목적으로 하거나 또는 건강 조절을 목적으로 하는 장기간의 섭취의 경우에는 상기 범위 이하일 수 있으며, 안전성 면에서 아무런 문제가 없기 때문에 유효성분은상기 범위 이상의 양으로도 사용될 수 있다.
상기 식품의 종류에는 특별한 제한은 없다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 예로는 육류, 소세지, 빵, 쵸코렛, 캔디류, 스넥류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알콜 음료 및 비타민 복합제 등이 있으며, 통상적인 의미에서의 건강식품을 모두 포함한다.
본 발명의 식품 조성물은 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상술한 천연 탄수화물은 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드, 말토스, 슈크로스와 같은 디사카라이드, 및 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 천연 감미제나, 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 사용할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비율은 본 발명의 조성물 100㎖ 당 일반적으로 약 0.01 내지 0.4g, 바람직하게는 약 0.02 내지 0.03g이다.
상기 외에 본 발명의 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 조성물은 천연 과일쥬스, 과일쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 또는 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가제의 비율은 크게 중요하진 않지만 본 발명의 조성물 100중량부 당 0.01 내지 0.1 중량부의 범위에서 선택되는 것이 일반적이다.
이하, 본 발명을 실시예에 의해 상세히 설명하기로 한다. 그러나 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1> 아로니아 추출물의 제조
<1-1>
아로니아
초고압 분쇄 혼합 및 초음파 추출물 제조
아로니아 초고압 분쇄 혼합 추출물을 수득하기 위해, 건조된 아로니아(아로니아 멜라노카파 바이킹) 100g을 70% 에탄올과 1:10(w/w)의 중량비율로 혼합한 다음, 초고압분쇄혼합기 20,000 psi 조건에서 15분간 추출을 진행하였으며, 추출시 어떠한 열처리도 하지 않는다. 추출된 아로니아 추출물은 여과 및 감압 농축한 후, 동결건조하여 분말의 형태로 제조하였다.
<1-2>
아로니아
열수
추출물 제조(
비교예
)
아로니아 생과(아로니아 멜라노카파 바이킹)를 -50℃, 5m torr 조건에서 동결건조를 3일간 실시하였다. 동결건조 후 건조된 아로니아를 분쇄기에서 충분히 분쇄하여 분말로 제조하였다. 건조 아로니아 100g을 1L의 물과 혼합하여 추출을 실시하며, 열수 추출은 100℃에서 24시간 추출하였다. 추출물은 감압여과장치를 통해 여과 및 농축과정을 거쳐 동결건조를 실시하여 파우더로 제조하였다.
<1-3> 아로니아 에탄올 추출물 제조(비교예)
아로니아 생과(아로니아 멜라노카파 바이킹)를 -50℃, 5m torr 조건에서 동결건조를 3일간 실시하였다. 동결건조 후 건조된 아로니아를 분쇄기에서 충분히 분쇄하여 분말로 제조하였다. 건조 아로니아 100g을 1L의 에탄올과 혼합하여 추출을 실시하며, 에탄올 추출은 80℃에서 24시간 추출하였다. 추출물은 감압여과장치를 통해 여과 및 농축과정을 거쳐 동결건조를 실시하여 파우더로 제조하였다.
<
실험예
1>
아로니아
초고압 분쇄 혼합 추출물 및 초음파 추출물의 세포 분화 억제 분석
아로니아 추출물의 비만 억제 활성을 확인하기 위하여 얻어진 실시예 1에서 제조된 아로니아의 추출물로 하기의 비만 억제 실험을 시행하였다.
구체적으로, 상기 실시예 1-2과 1-3에서 제조한 일반적인 아로니아 추출물 및 상기 실시예 1-1에서 제조한 아로니아 초고압 초고압 분쇄 혼합 추출물과 초음파 추출물을 포함하는 각 시료의 지방세포 분화 억제 활성 측정을 위해 3T3-L1 세포(한국세포주은행 KCLB, 한국)를 배양하는데, 배양 및 분화 배지는 Dulbecco’ modified Eagle’ medium high glucose 에 10% calf serum, antibiotics를 첨가하여 5% CO2, 37℃ 인큐베이터에서 배양하여 세포가 confluent 상태가 되면 trypsin/EDTA를 처리하여 세포를 원심분리하여 세포를 모아서 3×105 cells/well의 밀도로 6 well에 분주한 후 100% confluency 상태에서 48시간 방치 후 DMEM에 10% BCS와 23mg/mL IBMX, 5mg/mL insulin, 1mM dexamethasone이 첨가된 배지(MDI)를 처리하여 분화를 48시간 동안 유도하고 그 후 2일 마다 10% FBS DMEM 배지에 5 mg/mL의 insulin이 첨가된 배지를 교체해주었다. 시료의 처리는 분화유도 배지 첨가 시점부터 같이 처리하였다.
Oil red O 염색은 3T3-L1 지방세포를 9일 동안 분화시킨 후 배지를 제거하고 phosphate buffered saline(PBS)로 세척하고 10% formaldehyde 용액으로 세포를 고정시켰다. 다시 PBS로 세척 후, Oil red O 용액을 첨가하여 30분간 실온에서 염색하고, Oil red O 용액을 제거한 후 증류수로 세척하여 건조시킨 다음 위상차 현미경을 이용하여 관찰하고 100% isopropyl alcohol로 염색된 지방구를 용해하여 510 nm에서 흡광도를 측정하였다.
그 결과, 아로니아 초고압 분쇄 혼합 추출물과 초음파 추출물이 일반적인 아로니아 추출물보다 지방 세포 분화 억제 활성이 증진되었고, 본 발명에 따른 초고압 분쇄 혼합 방법과 초음파 추출방법으로 추출한 아로니아 초고압 분쇄 혼합 추출물 및 초음파 추출물은 비만 억제 활성을 증가시켰으며, 지방세포 3T3-L1의 세포 분화 억제활성을 증가시키는 것을 확인하였다(도 1 참조).
<
실험예
2>
아로니아
초고압 분쇄 혼합 추출물과 초음파 추출물의 지방세포 분화
유도인자
발현 분석
아로니아 초고압 분쇄혼합 추출물과 초음파 추출물의 지방세포 분화 유도인자 발현 분석하기 위하여 지방전구세포에 아로니아 초고압 분쇄 혼합 추출물, 아로니아 초음파추출물, 아로니아 열수 추출물 및 아로니아 에탄올 추출물을 농도에 따라 처리하였다.
구체적으로, 지방전구세포 3T3-L1이 분주된 6 well plate에 아로니아 초고압 분쇄 혼합 추출물, 아로니아 초음파 추출물, 아로니아 열수 추출물 및 아로니아 에탄올 추출물을 농도(50, 100, 200 및 400ug/ml)에 따라 처리하여 3일 동안 배양한 3T3-L1 세포를 PBS로 세척한 뒤에 RIPA buffer를 사용하여 균질화 하였다. 그 뒤 10% Sodium dodecyl sulfate (SDS)-PAGE에 분리하고 PVDF membrane으로 단백질을 전이시켰다. 그런 다음 5% skin milk를 처리하고 비특이적 단백질에 blocking 한 후에 1차 항체, PPAR-γ, CREB, SREBP1, FAS(PPAR-γ, CREB, FAS, cellsignaling, Danvers, MA, USA; SREBP1, Abcam, Cambridge, MA, USA)를 4℃에서 12시간 반응시킨 후에 HRP가 중합된 2차 항체를 반응시켰다. Immuno-positive bands는 enhanced chemiluminescent와 chemiluminescent detection system을 통해 현상하였다.
그 결과, 아로니아 초고압 분쇄혼합 추출물과 초음파 추출물이 아로니아 열수 추출물 및 아로니아 에탄올 추출물보다 지방세포 분화 유도인자인 PPAR-γ, CREB, SREBP1 및 FAS의 발현을 가장 많이 억제한 것을 확인하였으며, 그 중 초음파 추출물에서 뛰어난 억제효능을 확인하였다 (도 2 참조).
<
실험예
3> 초고압
분쇄 혼합
아로니아
추출물의 비만 억제 활성 분석
아로니아 추출물의 비만 억제 활성을 확인하기 위하여 아로니아 초고압 분쇄 혼합 추출물에 대해 농도별로 실험동물에 섭취시켜 체중변화를 확인하였다.
구체적으로, 하기 표 1에 기재된 실험용 쥐의 식이조성에 따라, 실험용 쥐(C57BL/6N, 수컷, 5주령)를 일주일간 기본식 (고형사료, (주) 카길애그리퓨리나, 군산, 한국 / 음수 자유섭취) 및 환경적응 후에 각 군당 유사한 평균체중을 갖도록 10수씩 배치하였다. 대조식이는 10kcal을 섭취하도록 하고, 고지방식이는 60kcal를 섭취하였으며, 고지방식이에 아로니아를 농도별(100mg/kg, 200mg/kg 및 400mg/kg)로 섭취시켜 비만 억제활성을 측정하였다. 물은 자유급여 하였고, 측정은 일주일 간격으로 체중을 측정하였다.
| 대조식이 (10 kcal % fat) | 고지방식이 (60 kcal % fat) | |||
| g | kcal | g | kcal | |
| Casein, 80 Mesh | 200 | 800 | 200 | 800 |
| L-Cystine | 3 | 12 | 3 | 12 |
| Corn starch | 315 | 1,260 | 0 | 0 |
| Maltodextrin 10 | 35 | 140 | 125 | 500 |
| Sucrose | 350 | 1,400 | 68.8 | 275 |
| Cellulose | 50 | 0 | 50 | 0 |
| Soybean oil | 25 | 225 | 25 | 225 |
| Lard* | 20 | 180 | 245 | 2,205 |
| Mineral mix | 10 | 0 | 10 | 0 |
| Dicalcium phosphate | 13 | 0 | 13 | 0 |
| Calcium carbonate | 5.5 | 0 | 5.5 | 0 |
| Potassium citrate, 1H2O | 16.5 | 0 | 16.5 | 0 |
| Vitamin mix | 10 | 40 | 10 | 40 |
| Choline bitartrate | 2 | 0 | 2 | 0 |
| Total | 1,055 | 4,057 | 773.8 | 4,057 |
그 결과, 아로니아 초고압 분쇄 혼합 추출물을 투여한 실험용 쥐의 체중 증가율을 확인하였을 때, 모든 농도에서 고지방식이에 비해 체중 증가 효과가 감소한 것을 확인할 수 있다. 이 때 2주가 지났을 때 까지는 100 mg/kg의 농도에서 체중증가율이 급감하여 가장 좋은 효과를 보였으며, 3주에서는 200 및 400 mg/kg에서 체중 증가의 감소 효과의 우수함을 확인하였다(도 3 참조).
또한, 아로니아 초고압 분쇄 혼합 추출물을 투여한 실험용 쥐를 육안으로 확인하였을 때, 대조식이에 비해 고지방식이 쥐의 덩치가 커진것을 볼 수 있으며, 고지방식이에 아로니아 추출물을 투여한 쥐에서 줄어든 덩치를 육안으로 검증하여, 아로니아 초고압 분쇄 혼합 추출물의 비만억제 효과를 확인하였다(도 4 참조).
따라서, 본 발명에 따른 아로니아의 추출 방법에 의해 제조된 아로니아 추출물은 지방세포 분화를 억제시키고, 지방세포 분화 유도인자 PPAR-γ, SREBP1, CREB와 FAS의 발현을 억제시키며, 체중감소의 변화를 보여 이를 통해 비만 억제 효과를 나타내므로, 비만 관련 질환의 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예 및 실험예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.
Claims (9)
- 비만의 예방 및 개선용 조성물의 제조방법으로서,
상기 제조방법은
(a) 아로니아 생과를 -50℃에서 급속냉동하고 5m torr 조건에서 3일간 동결건조하여 건조된 아로니아를 분쇄하여 분말을 얻는 단계;
(b) 상기 단계 (a)의 아로니아 분말과 70% 에탄올을 1:10 (w/w)의 중량비로 혼합한 후 초고압분쇄혼합기를 이용하여, 20,000 psi 압력 조건에서 15분간 추출액을 통과시켜 추출하여 추출물을 얻는 단계;
(c) 상기 추출물을 감압 농축 및 동결건조하는 단계; 및
(d) 상기 단계 (c)에서 얻은 동결 건조된 추출물을 분쇄하여 분말화 하는 단계를 포함하고,
상기 (b)의 추출 단계에서 어떠한 열처리도 하지 않고,
상기 조성물은 지방세포 3T3-L1의 세포 분화 억제활성을 증가시키고,
상기 조성물은 지방세포 분화 유도인자인 PPAR-γ, CREB, SREBP1 및 FAS의 발현을 억제하는 것을 특징으로 하는 비만의 예방 및 개선용 조성물의 제조방법. - 제1항에 있어서,
상기 아로니아는 블랙초크베리, 레드초크베리, 아로니아 멜라노카파 아론, 아로니아 멜라노카파 네로, 아로니아 멜라노카파 바이킹 및 아로니아 멜라노카파 메킨지으로 이루어진 군 중에서 선택되는 것을 특징으로 하는 비만의 예방 및 개선용 조성물의 제조방법. - 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 삭제
- 제1항의 방법으로 제조된 조성물을 포함하는 비만의 예방 및 치료용 약학적 조성물.
- 제1항의 방법으로 제조된 조성물을 포함하는 비만의 예방 및 개선용 식품 조성물.
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| KR1020160105536A KR101828167B1 (ko) | 2016-08-19 | 2016-08-19 | 아로니아 추출물을 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법 |
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| KR1020160105536A KR101828167B1 (ko) | 2016-08-19 | 2016-08-19 | 아로니아 추출물을 함유하는 비만의 예방 또는 치료용 조성물 및 이의 제조방법 |
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Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20200023169A (ko) * | 2019-06-07 | 2020-03-04 | 주식회사 웰파인 | 안토시아닌 함량 및 비만억제 효능이 증진된 아로니아 추출물의 제조방법 및 그의 조성물 |
| KR102178539B1 (ko) | 2019-10-04 | 2020-11-24 | 변재달 | 아로니아 및 미인고추 건조분말을 포함하는 식품 조성물 및 이의 제조방법 |
-
2016
- 2016-08-19 KR KR1020160105536A patent/KR101828167B1/ko active IP Right Grant
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Journal of Oleo Science, Vol. 64, No. 12, pp.1243-150 (2015)* |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR20200023169A (ko) * | 2019-06-07 | 2020-03-04 | 주식회사 웰파인 | 안토시아닌 함량 및 비만억제 효능이 증진된 아로니아 추출물의 제조방법 및 그의 조성물 |
| KR102171001B1 (ko) * | 2019-06-07 | 2020-10-28 | 주식회사 웰파인 | 안토시아닌 함량 및 비만억제 효능이 증진된 아로니아 추출물의 제조방법 및 그의 조성물 |
| KR102178539B1 (ko) | 2019-10-04 | 2020-11-24 | 변재달 | 아로니아 및 미인고추 건조분말을 포함하는 식품 조성물 및 이의 제조방법 |
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