KR101788226B1

KR101788226B1 - 알레르겐 탈감작화 방법

Info

Publication number: KR101788226B1
Application number: KR1020107013043A
Authority: KR
Inventors: 크리스토프 듀퐁; 피에르-앙리 벤하모우; 벨트란드 듀퐁
Original assignee: 디비브이 테크놀로지스 (소시에떼 아노님)
Priority date: 2007-12-03
Filing date: 2008-12-03
Publication date: 2017-10-26
Also published as: US20240181046A1; CA2707013C; IL205822A; JP2011505410A; EP2217272A1; US10022439B2; CA2706020A1; US11931411B2; CN101951952A; IL205822A0; IL206028A; WO2009080934A3; US20220241405A1; KR20100103512A; US20170128566A1; US8202533B2; KR20110015408A; US20180318413A1; AU2008339833A1; EP2214704A2

Abstract

본 발명은 알러지 환자를 탈감작화시키는 방법에 관한 것이다. 보다 구체적으로는, 본 발명은 임의 형태의 알레르겐 및 임의의 환자에게 적용가능한 경피적 탈감작화 방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법은 필수적으로 비-침습성(non-invasive)이고 보체(adjuvants)의 사용이 요구되지 않다. 또한 본 발명은 실제 환자에서 용이하게 적용가능하고 조절가능하다.

Description

알레르겐 탈감작화 방법 {ALLERGEN DESENSITIZATION METHOD}

본 발명은 알러지 환자를 탈감작화시키는 방법에 관한 것이다. 보다 구체적으로는, 본 발명은 임의 형태의 알레르겐 및 임의의 환자에게 적용가능한 경피적 탈감작화 방법에 관한 것이다. 본 발명의 방법은 필수적으로 비침습성(non-invasive)이고 보체(adjuvants)의 사용이 요구되지 않는다. 또한 본 발명은 실제 환자에서 용이하게 적용가능하고 조절가능하다.

알레르기는 평상적 의약 분야에서 증가하는 큰 부분을 차지한다. 이는 WHO에 의하여 제 4차 재앙성 질병으로 분류되는 세계 공공 보건 현상이다. 프랑스에서는 3명 중 한 명의 프랑스인이 알러지 증상을 앓고 있고 호흡기성 및 식품 알러지 모두는 성인 및 소아 인구에서 증가된 분포를 초래한다.

탈감작화(Desensitization)는 다소간 알러지 현상을 정제할 수 있도록 최소량의 알레르겐(allergen)을 투여함에 따른 기술이다. 2000년 초기부터 WHO에 의하여 알레르기를 근본적으로 치료하기 위한 방법으로 간주되었다.

탈감작화가 알레르겐에 대한 면역반응이 그 최초 단계로서 영향을 미침이 밝혀졌고 (Tij et al., 2004), 이는 단기간 알러지 반응과 관련된 증상을 감소시킬뿐만 아니라 알러지(질환)의 자연적 진행을 변화시키고 신규 알레르겐에 대한 알러지 발생, 예를 들어, 알러지성 비염으로부터 천식으로의 진행과 같은, 보다 심각한 임상 증상에 대하여 증후학적 진행을 방지함을 의미한다.

면역요법은 제한된 수의 알레르겐에 감작화된, 극심한 IgE-의존성 알레르기를 앓는 환자 치료에 효과적임이 밝혀졌다.

면역요법에 의한 치료요법의 작용기전이 잘 알려져 있지 않음에도 불구하고, 상기 면역요법은 (1) 생체 내 시험에서는 그 효과가 아직 평가되지 않았다 하더라도 IgE의 시험관 내 시험 상에서의 생물학적 효과를 차단하는 항체인 IgG 및 특히 IgG4 분획(fraction)을 증가시키고; TH1 반응을 촉진시키는, TH1/TH2 균형을 변화시키고; 인터류킨(interleukin 10; IL-10)을 생산하는 T 세포를 생산(후자는 비만세포, 특정 T 임파구 및 호산구에 대한 다수 항알러지 특성을 갖고 IgG4 생산을 촉진함)함으로서 작용할 수 있다.

경피경로를 통한 면역요법은 대다수 알러지 치료 연구자에게 표준 경로로 대표되며 가장 널리 사용되고 있다. 개개 주사시 전문의사의 상담이 요구됨에도, 현재까지 소아의 표준적 탈감작화 경로로서 간주되고 있다 (Pajno et al., 2005).

그러나, 사망률이 1년간 평균 3.4명이 사망하는 2.5백만 주사 당 1인의 사망률을 나타내므로 위험성을 내재하고 있다.

고위험성을 갖는 특정 과민성 알레르겐은 경피적 탈감작화 치료법의 범위 내에서 사용되지 않는다. 이는 땅콩 및 대부분 식품 알레르겐의 경우이다.

설하 면역요법(Sublingual immunotherapy)은 경피 경로를 통한 면역요법(immunotherapy)의 만족스런 대체요법으로서 WHO에서 간주되고 있다. 본 요법은 많은 국가에서 평가되어 왔다. 널리 통용되기 위한 의도로 혀 밑에 투여하기 위한 최초의 상업적 정제 제제가 몇몇 유럽에서 판매되고 미국에서 시판준비중이다.

환자에게 보다 높은 선호도를 갖는 설하 면역요법은 다수 의사의 간섭이 요구되지 않으며 기타 경로보다 본 요법을 선호하는 환자에게 있어 자가-치료가 가능할 수 있으므로 다른 투여경로보다 비용 대비 보다 좋은 효율성을 갖는다 (Pajno et al ., 2005).

설하 경로를 통한 치료중에 1,000 투여 단위에 대하여 0.1 내지 0.2 반응으로 추정되는 정도로 부작용이 희박하다. 상기 반응은 주로 구강, 설하 부위 또는 위-장관 계에 작용하는 경미한 반응이다 (La Rosa et al ., 1999).

그러나, 유효성과 관련하여, 설하 경로는 일부 환자에게는 경피 경로보다 덜 효과적인 것으로 간주되며; 이는 다량의 알레르겐의 사용이 요구되며 만일 땅콩 및 우유에 대한 탈감작화를 위한 이러한 경로를 통한 시험법이 연구중임에도 아직 모든 알레르겐에 대해서는 승인되지 않았다. 식품 알레르겐에 의한 이러한 기법 사용상의 안전성은 연구되어야 할 사안이다.

비강 내 면역요법은 18개의 조절된 연구 대상에서 17개에서 효과적인 것으로 입증되었다. 따라서, 알러지성 비염에 대하여 가장 적은 량으로 효과적이고 안정한 경로이다. 그러나, 이는 환자들에게 전반적으로 순응도가 낮고 임상적 용도상에서 제한성이 증대된다. 서로 상이한 탈감작화 경로를 비교한 연구에서, 비강 경로를 통한 치료법은 1년도 되기 전에 모든 환자의 약 50%가 조기에 투여 상의 방해를 초래하였으나, 경피 또는 설하 경로를 통한 투여는 소아의 10% 이하에서만 치료중단이 나타났다 (Pajno et al ., 2005).

이러한 탈감작화 방법에 유리한 대체방법은 경피 경로, 즉, 전반적으로 어떠한 유의적인 피부 간 통과가 없이, 피부 표면상에 알레르겐의 분산을 초래하는, 피부 상의 알레르겐의 반복적 적용에 의한 면역요법으로 수행가능성이 대두되었다.

피부 상의 알레르겐의 반복적 적용이 상기 알레르겐에 대한 동물의 탈감작화를 야기할 수 있음이 동물에서 장기간 입증되어 왔다 (Golovanoff, 1926). 수득된 반응은 전신적 형태이고 전체로서 신체에 작용하며 단순한 경피적 영역을 초월하는 반응이다.

보다 최근에, 경피 경로를 통한 우유에 대한 감작된 마우스 모델이 개발되었다 (Chang). 이러한 경우에서, 방출된 면역반응이 서로 상이한 세포군과 관련되며 TH2 임파구의 활성화를 초래하며, 이는 알레르겐의 특이적 IgE 형 항체 생산을 촉진시킴이 밝혀졌다.

특정한 연구는 자극 조건하에서의 피부의 자연적 반응이 실제 TH2 형인 경우에, 피부에 다양한 자극, 즉 (1)자외선과 같은 물리적 시약에 의한 침범, (2) 각막 층 구조를 변화시키는 번복된 스트리핑 (stripping)에 의한 피부의 기계적 침범, (3) 콜레라 독소와 같은 미생물제에 의한 침범, (4) 피부 투과성 변화를 수행함으로써 반응의 면역적 양상을 변화시킬 수 있었다.

알레르겐 접촉에 대한 면역 반응의 형태는 이러한 상이한 시약에 의하여 변화가능하며 IgG4 형의 항체 생산을 촉진하는 TH1 임파구의 선호적인 활성화를 초래한다.

1950년대에 경피적 경로가 알러지 치료 연구자에게 사용되어 왔다. 이는 주당 수차례 알레르겐 1방울을 피부 상에 투여하는 난절법으로 수행됨으로 구성되었다 (Pautrizel et al ., 1957). 이 방법은 숙련된 알러지 치료 연구자에 의한 수행방법으로서는 유효성 및 안전성을 제공한다. 그러나, 매우 적은 양으로 규격화되지 않아 널리 통용되기에는 제한성이 있다. 결국, 이러한 방법이 현재에는 폐기된 이유는 반복된 난찰법에 의해 지나치게 길고 반복적인 단점 때문이다.

유럽특허출원 EP 1031346호는 탈감작화를 위하여 경피적 기구 및 항원 또는 알레르겐을 포함하는 백신을 제시하고 국제특허출원 제WO2007/122226호는 알러지 객체를 탈감작화시키기 위한 경피기구의 사용을 개시한 바있다. 그러나, 이러한 문헌들에 개시된 방법들은 시토킨(cytokins, 예를 들어 보체)의 활성을 자극하며 알러지 객체의 효과적인 탈감작화를 허용하는 면역허용원 형 염증 반응을 목표화하지 않는 화합물을 사용한다.

본 발명은 선원 기술상의 결점 및 제한점을 극복가능하고 효과적인 경피적 탈감작화 방법의 개발에 그 목적이 있다.

본 발명은 알레르겐의 경피적 적용으로 야기되는 특이적 염증 반응이 내성의 관점에서 면역 세포의 반응에 주로 영향을 미치고 반응에 참가함을 입증하는데 그 목적이 일부 있다.

본 발명은 염증 반응을 유발하도록 반복되고 연장된 방법으로 알레르겐(allergen)을 피부에 적용하는 것으로 구성되고, 상기 적용의 적용 기간 및 반복에 의해 지향되는 양상은 면역허용원 (tolerogenic) 형태인 것이다. 따라서, 본 발명은 염증 반응을 나타낼 뿐만 아니라 이를 지향하는 것이다.

본 발명은 이러한 염증 반응 조건을 조절함에 있어서, 내성 정도는 경피적 탈감작화 공정상의 필수적 요소로서 대표됨을 나타낸다. 본 발명은 이러한 특이적 염증 반응의 반복된 도출은 수용가능성의 관점에서 면역반응을 점진적으로 역전시키는데 중요하고, 이는 어떠한 보체(adjuvants) 또는 피부의 전처리 과정(pre-treatment)이 없더라도 경피적 탈감작화를 가능하게 한다.

따라서 본 발명은 처음으로, 객체 피부 상에 알레르겐을 반복적으로 적용함으로써 치료기간 중에 염증이 지속되도록 하는 조건 하에서 객체 피부 상에 알레르겐을 반복적으로 경피투여함을 포함하는 경피적 탈감작화 방법을 제시한다. 유리하게는, 본 발명은 피부 상에 알레르겐의 적용으로 발생되는 염증 정도, 내성(tolerance)의 관점에서 알레르겐에 대한 신체 반응을 유발할 가능성을 부여하는 상기 반응의 발생(elicitation), 지속(sustainment) 및/또는 조절(control)을 검색 및/또는 평가하는 단계를 적어도 추가하는 것이다.

따라서 본 발명의 목적은 치료기간 중에 염증이 지속 되도록 하는 조건 하에서 피부 상에 알레르겐을 적용함을 특징으로 하는, 객체 피부 상에 알레르겐을 반복적으로 적용함으로서 상기 알레르겐에 대하여 알러지 반응을 갖는 객체의 경피적 탈감작화을 위한 조성물을 제조하기 위한 알레르겐의 용도를 제공하는 것이다.

본 발명은 이러한 염증 반응의 지속으로 인하여 알레르겐에 대한 면역 시스템으로부터 면역허용원 형태 반응을 촉진함을 사실상 나타낸다.

본 발명의 또 다른 목적은 치료기간 중, 바람직하게는 알레르겐의 개개 적용 기간 중에 피부 상에 알레르겐의 적용으로 발생하는 염증 반응을 조절 및/또는 지속시키는 단계를 포함함을 특징으로 하는, 객체 피부 상에 알레르겐을 반복적으로 적용함으로 상기 알레르겐에 대하여 알러지 반응을 갖는 객체의 경피성 탈감작화를 위한 조성물을 제조하기 위한 알레르겐의 용도를 제공한다.

본 발명의 또 다른 목적은 치료기간 중, 피부 상에 알레르겐의 적용으로 발생하는 염증 반응의 치료(treatment), 조절(control) 및 지속(sustainment)을 포함함을 특징으로 하는, 객체 피부 상에 알레르겐을 반복적으로 적용함으로 상기 알레르겐에 대하여 알러지 반응을 갖는 객체의 경피성 탈감작화를 위한 조성물을 제조하기 위한 알레르겐의 용도를 제공한다.

본 발명의 또 다른 목적은 치료기간 중, 염증 반응의 지속을 허용하는 조건하에서 객체 피부 상에 알레르겐을 반복적으로 적용함을 포함하는, 상기 알레르겐에 대하여 알러지 반응을 갖는 객체의 면역 반응을 내성화의 관점에서 변화시키기 위한 조성물을 제조하기 위한 알레르겐의 용도를 제공하는 것이다.

본 발명은 또한 치료기간 중, 염증 반응의 지속을 허용하는 조건하에서 피부 상에 알레르겐을 적용함을 특징으로 하는, 객체 피부 상에 상기 알레르겐을 반복적으로 적용함으로서 상기 알레르겐에 대하여 알러지 반응을 갖는 객체의 경피적 탈감작화 방법에 관한 것이다.

본원에서 하기에 상술하는 바와 같이, 상기 염증 반응은 유리하게는 치료기간 중 알레르겐 및/또는 이의 특성의 용량, 빈도 또는 적용 기간을 조절 또는 조정함으로서 지속되는 것이다.

본 발명의 또 다른 목적은 적어도 치료기간 중에 피부 상에 알레르겐의 적용으로 발생하는 염증 정도를 평가하기 위한, 하나 이상의 단계를 포함함을 특징으로 하는, 상기 알레르겐에 대하여 알러지 반응을 갖는 객체의 경피성 탈감작화 방법을 제공한다. 염증 반응을 평가함으로서, 탈감작화 조건은 필요 시 조정가능하다.

본 발명은 추가적으로 알레르겐의 개개 적용시에, 염증 반응을 조절하는 단계를 포함함을 특징으로 하는, 객체 피부 상에 알레르겐의 반복된 적용으로 상기 알레르겐에 대하여 알러지 반응을 갖는 객체를 탈감작화시키는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 추가적으로 치료기간 중, 피부 상에 알레르겐의 적용으로 발생하는 염증 반응의 지속을 포함함을 특징으로 하는, 객체 피부 상에 알레르겐을 반복적으로 적용함으로 상기 알레르겐에 대하여 알러지 반응을 갖는 객체를 탈감작화시키는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 알레르겐에 대하여 경피적 탈감작화를 위하여 환자 치료를 알레르겐에 적용시키기 위하여, 상기 환자 피부 상에 상기 알레르겐을 마커(marker)로서 적용함으로서 발생되는 염증성 반응의 용도에 관한 것이다.

본원에서 하기에 상술하는 바와 같이, 상기 발명은 어떠한 형태의 알레르겐에도 적용가능하고 어떠한 경피적 적용 기구로도 적용가능하다. 이는 미리 환자 피부를 처치할 필요도 없이 효과적인 탈감작화를 허용한다. 게다가, 보체 화합물의 공동투여를 요구하지 않는다.

알러지 환자 피부에 고착된 알레르겐의 용도는 아토피 패취 시험(atopy patch test)으로 진단 분야에서 축적된 경험으로 입증되는 바와 같이 완벽하게 안전하다. 2004년부터 최초로 시판된 즉시-사용형 아토피 패취 시험 제품(Diallertest^?)으로 프랑스에서 알려진 바와 같이, 이들에 대해서 극심한 국소 작용 또는 전신성 포괄적 반응과 같은 부작용은 보고된 바 없다.

피부 상에 상기 알레르겐을 적용시킨 후에, 면역 시스템은 전신성 면역 반응의 국소적(경피) 염증 반응을 야기하거나 한 바가 없다.

본 발명의 특정한 구현예로서, 상기 알레르겐에 알러지를 갖는 객체 피부 상에 알레르겐의 적용은 알레르겐의 피부 표면에 존재하는 각질 세포 및 랑거한스 세포(Langerhans cells)와의 접촉에 의하여 촉발되는, 경피적 반응, 특히 염증형의 경피적 반응을 유도한다.

본 발명의 방법에 따른 경피적 면역요법 동안에, 상기 알레르겐에 알러지를 갖는 객체 피부 상에 알레르겐의 적용에 의하여 야기되는 이러한 반응은 치료기간 동안 지속되고 및/또는 조절되는 것이다. 본 발명은 상기 반응의 지속 및 조절이 내성의 관점으로서 상기 알레르겐에 대한 객체의 면역 반응의 점진적 배향을 초래함을 나타낸다. 상기 반응은 경피적 반응성의 점진적 감소 또는 완전한 소멸 및 상기 알레르겐에 대한 내성 역치 상의 증가에 의하여 임상적으로 구체화된다.

상술한 기전은 임의의 알레르겐, 특히 소화기계 분야(오발부민, 땅콩, 조개류 등의 식품 알레르기), 기관지계 분야 (예를 들어 화분과 같은 기관지성 알레르기) 또는 경피계 분야에 작용하는 알레르겐에 적용된다.

따라서, 본 발명의 방법에 기초하고 하기한 실험 데이터들에 의하여 완전하고 상세하게 설명되는 원칙은 이전에 알레르겐에 민감했던 객체의 내성을 경피적 경로를 통하여 유도할 수가 있다는 점이다. 이러한 효과는 상기 알레르겐에 알러지를 갖는 객체 피부 상에 알레르겐을 유지시키고 그럼으로써 내성 관점에서 상기 알레르겐에 대하여 신체 반응을 지향시키기 위하여 염증 반응을 유도, 지속 및 조절시킴으로써 얻어진다.

따라서, 본 발명의 경피적 면역요법 방법은 상기 알레르겐에 알러지를 갖는 객체에서 피부 면역세포 (예를 들어, 랑거한스 세포, 비만세포, 대식세포, 임파구)를 알레르겐과 접촉시키게 하는 단계; 및 상기 알레르겐에 대한 상기 알러지 환자의 내성을 초래하는 면역반응의 전환공정을 특이적이고, 조절되고 지속되는 세포 면역 반응을 통하여 발휘하는 단계로 구성되는 알러지에 대한 치료학적 방법이다. 탈감작화를 위한 종래 기술상의 접근법과는 달리 본 발명의 방법에 있어서, 상기 탈감작화 과정은 환자의 염증 반응의 특성 및 정도에 따라 검색되고 안내된다. 이러한 접근법은 개개 환자의 요구 및 특성에 따라 조정가능한 효과적인 탈감작화 방법을 제공하며, 보체 화합물의 사용 또는 피부의 천공 또는 찰과성 처치를 요구하지 않는다.

본 발명의 방법은 치료기간 중, 피부 상에 알레르겐에 특이적인 염증 반응의 지속을 허용하는 조건하에서 (예를 들어, 용량 및/또는 빈도 및/또는 적용시간 조건), 상기 알레르겐에 대하여 알러지 반응을 갖는 객체 피부 상에 알레르겐을 반복적이고, 연장되고 조절되는 방법으로 적용함도 일반적으로 포함된다. 본 발명의 유리한 구현예로서, 상기 적용은 어떠한 보체 화합물 및/또는 건강한 피부를 요구하지 않고 달성되는 것이다.

본 발명의 방법은 일반적으로 하기 상(phase)들을 포함한다:

(a) 환자 및/또는 알레르겐 (용량, 특성, 제형 등)의 임의적 선택, (b) 환자에 대한 알레르겐의 적용; 및 (c) 염증 반응의 조절 (상기 단계 (a) 및 (b)는 유리하게 치료기간 중 1회 이상 반복되며 알레르겐의 조건(용량, 특성, 제형, 적용 빈도, 노출 회수 등)은 염증 반응을 유지시키기 위하여 치료기간 중에 조정됨).

지금까지 본 발명은 염증 반응의 조절을 기반으로 하며, 치료 중 알러지 환자는 피부 상에 알레르겐을 최초로 적용시의 반응이 중요하다. 이를 위해, 유리하게는 상기 환자는 치료 초기에 가장 적절한 반응성을 제시하는 알레르겐 제제를 결정하기 위하여 알레르겐을 최초로 적용(계열)하게 된다.

이러한 목적으로, 상기 환자는 유리하게는 미리 결정된 형태 및 단회 용량으로 알레르겐을 최초로 적용하게 된다.

만일 객체가 적절한 염증 반응을 나타내면, 이러한 알레르겐 용량/형태에 기초하여 치료가 수행가능하다. 상기 적절한 반응은 예를 들어 구진을 동반하거나 동반하지 않는 침윤된 홍반성 병변 또는 습진 형 증상으로 간주되는 육안으로 식별가능한 염증반응을 의미한다.

만일 알아낸 반응이 소수포 또는 수포를 포함하는 강력한 강도이거나, 인접 피부 영역까지 넓게 분산되거나 또는 매우 양진성(가려움)인 경우는, 치료를 개시하기 위한 상기 알레르겐 농도는 적절한 반응을 얻기 위하여 감소되거나 또는 피부상으로의 상기 알레르겐의 적용 회수가 감소될 것이다.

반대로, 알아낸 반응이 매우 미약한 강도인 경우는 상기 알레르겐 용량 및/또는 적용 회수 및/또는 동시에 적용되는 기구의 숫자는 상술한 바대로 초기 유의적인 반응을 얻기 위하여 증가될 것이다. 이 경우에, 객체에 대한 보다 우수한 반응성을 부여하는 제제를 동정하기 위하여, 기타 형태의 알레르겐을 시험할 수도 있다. 따라서, 상기 알레르겐은 알러지 환자에서 서로 상이한 염증 반응을 나타낼 수 있는 서로 상이한 형태로 존재할 수 있다 (완전 식품, 단백질 추출물, 펩티드, 재조합 또는 합성 산물 등). 따라서, 상기 치료의 초기 상은 치료 개시를 위한 가장 적합한 형태의 알레르겐을 결정할 수 있다.

이러한 관점에서, 본 발명의 구현예로서, 상기 환자는 알레르겐의 다양한 농도 및/또는 형태를 포함하는 기구들의 계열들을 치료 초기에 수행하는 것이다. 최초 치료와 더불어, 치료 초기에 참고용(reference)로서 환자에 따른 용량 및/또는 적당한 형태를 결정할 수 있다. 필요 시, 다양한 농도 및/또는 형태를 갖는 이러한 기구의 사용은 객체의 반응성 변화에 따라 치료기간 중에 사용되는 용량/형태를 조정하기 위하여 치료 중에 반복될 수도 있다.

초기 용량/형태가 결정되면, 경피적 면역요법치료가 개시될 수 있다. 이러한 치료법은 피부상에 알레르겐의 반복된 적용을 포함한다. 이러한 적용(application)은 유리하게는 객체의 등 상부 또는 팔 또는 팔뚝의 내측 면에서 수행되는 것이다. 이는 또한 알레르겐에 대한 국소 반응성이 사전에 확인되는 바람직한 조건하에서 신체의 기타 부위에서 수행가능하다. 치료기간 중에 상기 알레르겐은 신체의 서로 상이한 영역에 적용가능하다. 상기 적용은 사용된 치료학적 과정(전형적인 과정은 약 6 내지 72시간을 포함하는 초기 적용 시간을 포함한다)에 따라 다양한 빈도로 갱신가능하다. 이들은 개개 적용 간 (예를 들어, 1일 내지 3주 범위)의 시간 간격 마다의 변화를 관찰하면서 연속적으로 또는 회분식 방법으로 적용가능하다. 상기 알레르겐의 수개월에 걸친 반복되고 연장된 적용은 염증 매개체의 국소적 방출 및 내성의 관점에서 면역 세포 반응에 영향을 미치는 염증 세포의 유입을 초래한다. 전형적인 과정은 수개월을 초과하지 않을 수 있는 객체를 탈감작화시키기 위해 요구되는 기간을 넘어서, 약 6 내지 72시간 동안, 5-15일간의 간격을 두고 알레르겐을 반복적으로 적용함을 포함한다.

적절한 탈감작화를 담보하기 위하여, 본 발명은 치료기간 중에 국소적 염증 반응을 조절 및 유지(알레르겐 또는 이의 형태의 용량 및/또는 기간 및/또는 노출빈도를 조정함으로써)시키는 것이 중요함을 입증한다. 따라서, 본 발명의 방법은 피부 상에 알레르겐의 반복된 적용으로 발생하는 염증 반응의 정도를 규칙적으로 평가하는 단계를 포함한다. 따라서, 상기 치료기간 도중에, 상기 알레르겐 용량 및/또는 투여 기간 및/또는 동시적으로 사용되는 기구의 숫자들은 경피적 반응성 정도에 따라 조정될 것이다. 상기 치료기간 중에 경피적 반응의 강도 감소는 적용 빈도 및/또는 동시에 적용되는 기구 숫자, 및/또는 알레르겐 용량 및/또는 이 형태상의 변형상의 증가를 초래한다. 이와 반대로, 경피적 반응의 강도 증가는 적용 빈도, 및/또는 동시에 적용되는 기구 숫자, 및/또는 상기 기구 내의 알레르겐 농도 및/또는 그 형태상의 변형 감소를 초래한다.

상기 염증 반응, 특히 경피적 반응의 강도 평가는 의사 및/또는 실제 환자에 의하여 수행가능하다. 이러한 평가는 시각적 검사 또는 예를 들어, EAACI의 합의성 측정용 격자 그리드(consensual assessment grid)를 이용한 접촉법으로 편리하게 임의의 방법으로 수행가능하다 (참조: Allergy 61 (2006) 1377-1384). 따라서, 경피적 염증 반응은 상이한 정도 단계: (1) 홍반(erythema) ― (2) 홍반 및 침윤(infiltrations) ― (3) 홍반 및 소수의 구진(papules) ― (4) 홍반 및 다수의 구진 ― (5) 홍반 및 소수포(vesicles)들이 존재한다. 적절한 염증 반응은 전형적으로 III 형(type III) 염증 반응, 즉, 홍반 및 소수의 구진을 포함하는 염증 반응이다. 가능하기만 하다면, 이것이 치료기간 동안 지속시키고자 하는 반응 형태이다. 물론, 환자가 초기에 덜 강력한 반응을 유발시에는, 참고용 반응(reference reaction)이 반드시 덜 강력하게 될 것이고 이는 환자에 기반하여 조정될 것이다. 게다가, 치료 도중에, 상기 염증 반응은 객체의 탈감작화 때문에 감소할 것이다.

본 발명을 적용하기 위하여, 또한 시토킨(cytokine) 또는 인터페론 (interferon)과 같은 염증성 마커들을 투여함으로써 염증성 반응을 평가할 수 있다.

가능한 가장 우수한 치료효과를 발휘하기 위하여, 본 발명의 특정한 구현예로서, 상기 염증 반응성은 치료 유지를 위한 가장 우수한 조정된 용량이 선택되도록, 객체를 다양한 용량의 알레르겐과 접촉시킴으로서 치료기간 동안 1회 이상 평가하는 것이다.

상기 염증 반응의 평가는 모든 치료기간 내내, 즉, 알레르겐의 새로운 개개 적용시마다 수행가능하다.

또한 개개 적용시가 아니고 특정한 간격으로만 상기 평가를 수행하는 것도 가능하다.

게다가, 모든 치료기간 내내 염증 반응을 유지시키는 것이 바람직하다면, 이는 강제적이 아니고 면역적 접촉이 최초로 확인되고, 특정한 캐스케이드 반응(cascade reaction)(면역학적으로 상응하는 세포들의 활성화 및 시토킨 및 항체들의 생성)이 충분하게 촉발되는 경우에 또한 효과적인 탈감작화가 달성될 수도 있다. 따라서, 실무상, 염증 반응이 예를 들어, 목적하는 강도의 경피적 반응으로 표현되는 적절한 수준에 도달 시, 기구를 제거하고 잠시 후에, 기구를 결정하여 또 다른 경피 영역으로 다른 기구를 부착할 수 있다.

본 발명의 호환예로서, 상기 알레르겐(또는 적용 기구)은 적어도 염증 반응이 참고용 (reference) 강도에 도달할 때까지 피부 상에 유지되는 것이다. 상기 강도에 도달 시에 상기 알레르겐(또는 기구)은 제거가능하고 새로운 적용 전에 잠복 기간동안 관찰한다. 상기 참고용 반응은 전형적으로 예를 들어, 침윤된 홍반성 병변 또는 습진 형 증상과 같은 육안으로 식별가능한 반응이다.

또한 상기 알레르겐(또는 기구)은 염증성 반응을 유지하도록 피부 상에 유지될 수도 있다. 전형적으로 이 경우에, 상기 적용 기구는 모든 알레르겐이 분산되거나 또는 염증 반응이 너무 강력한 강도를 나타내는 경우에 제거된다.

치료기간 중에 이러한 선택사항은 선택가능한 것으로 이해되어야 한다.

본 발명의 구현예로서, 1 내지 21일간을 포함하는 시간 간격은 기구들을 장착하는 사이에 경과하도록 한다.

상기 치료법은 알레르겐에 대한 어떠한 경피적 반응이 소멸되거나 또는 매우 유의적으로 감소되는 때에 완성되고 성공적으로 수행된 것으로 간주 될 수 있다. 상기 치료의 성공은 경구 유발시험법(oral elicitation test) 또는 알러지 연구 분야에서 인정되는 기타 다른 수단으로서 확인가능하다. 따라서, 상기 치료기간은 변화가능하고 알레르겐에 대한 경피적 반응의 진전 상황에 따라 좌우된다. 본 발명의 방법에 따른 탈감작화 치료법의 목적은 연장된 접촉 후에 알레르겐에 대한 국소 경피적 반응이 완전하게 소실되거나 또는 알레르겐에 대한 객체의 반응성이 경피적 면역 요법에 의하여 유의적으로 감소되고 알레르겐과 접촉 동안에 과민성 쇼크 위험성이 유의적으로 감소되는 것으로 간주되도록 반응성이 감소되게 하는 것이다.

본 발명은 피부 접촉이 알레르겐으로 확보되도록 하는 임의의 경피적 투여 기구로 적용가능하다. 바람직하게는, 본 발명은 패취형(patches) 또는 밴드형(bandage), 바람직하게는, 예를 들어 밀폐형 패취와 같은 패취형 기구인 것이다.

전형적으로 이러한 기구는 알레르겐이 고정되는 지지체, 및/또는 알레르겐을 함유하는 저장소 또는 챔버(chamber)를 포함하는 것이다.

전형적으로 상기 기구는 수동확산, 즉 피부의 천공 또는 찰과상을 야기하는 어떠한 수단도 포함하지 않는 경피적 특성을 갖는 것이다. 사실상, 얻어진 결과는 예비적 피부 처치를 하지 않음에도 경피적 탈감작화가 유도되도록 함을 나타낸다. 그러나, 알레르겐에 대한 피부 표면층의 투과성을 증진시키거나 및/또는 물리적, 화학적 또는 생물학적 수단으로 경피적 반응성을 증가시키기 위한 특성이 제공되는 기구를 사용할 수 있다. 따라서, 본 발명의 하나의 호환예로서, 상기 적용 기구는 표피 기저층으로의 알레르겐의 통과를 촉진시키기 위한 미세-침(micro-needles) 또는 전기적 수단(electric means)에 의한 투과성에 작용할 수 있다. 게다가, 필수적이지 않음에도 불구하고 탈감작화 치료법을 보다 촉진시키기 위하여 기구의 개개 적용 전에 피부를 전처리(예를 들어 찰과적 처치)하는 것이 가능하다.

본 발명의 바람직한 구현예로서, 국제특허 출원 WO02/071950호에 개시된 전기장형 패취 (Viaskin^?)와 같은 밀폐형 패취 기구가 사용되는 것이다.

게다가, 본 발명의 바람직한 구현예로서, 상기 기구는 피부 상에 기구를 유지토록 하는 수단을 제공하는 것이다. 강력한 점착성을 갖는 검(gum), 중합체 (polymer) 또는 플라스틱형(plastic type) 재료를 포함하는 임의의 점착성 수단이 사용가능하다. 예를 들어 프랑스 특허출원 제 FR0753787호에 개시된 바와 같은, 팔찌형 (bracelet) 또는 프랑스 특허출원 제 FR0753265호에 개시된 바와 같은, 박리형 시트(exfoliation sheet)를 장착한 기구를 사용할 수 있다.

기구의 특이적 특성 및 형태는 당업자에 의해 조정가능하고 상기 요구되는 특성은 적용 부위에서 알레르겐 및 피부 사이에 접촉을 담보하도록 해야 하는 것으로 이해되어야 할 것이다.

본 발명의 특정한 구현예로서, 상기 치료법은 염증 반응(예를 들어 홍반 증상)이 투명막을 통하여 직접 관찰될 수 있도록, 적어도 일부가 투명한 배킹부(backing)(예를 들어, VIASKIN^? 기구)를 갖는 기구를 수단으로 수행하는 것이다. 상기 기구의 배킹부는 환자들이 기구를 제거할 수 있도록 경피적 반응 역치 수준을 결정하는 것을 돕기 위하여 조정될 수도 있다. 따라서, 본 발명의 특히 바람직한 구현예로서, 상기 기구는 상기 배킹부가 예를 들어, 적색 격자(grid) 또는 적색 동심원(concentric circle)과 같은 조사 양태(monitering pattern)로 인쇄되는 투명한 영역을 갖는 것을 사용하는 것이다. 피부가 반응되지 않을 시에는 도면이 잘 보이며 이들은 경피적 반응이 발생하면 삭제된다. 투명한 배킹부 시스템을 사용하는 것은 많은 장점, 특히 하기와 같은 장점을 갖는다:

(1) 이는 알레르겐과의 불필요한 연장된 접촉을 피하게 하고, 경피적 내성을 증대시키고, 소양증과 같은 불편한 부수적 효과를 최소화하고 사실상 수용도 (acceptance) 및 관찰성(observance)을 개선시킨다.

(2) 이는 안전성을 갖는 방법으로 수행이 증가하고 과거에는 땅콩에 탈감작화하기 위한 다수의 방법들에 대하여 치명적이었던 전신성 반응의 위험성을 추가로 최소화시킨다.

(3) 이는 알레르겐에 대한 다양한 노출 시간상의 관점이 산업적 공정으로 일체화가 될 수 있는 방안을 제공한다.

본원의 이러한 문맥에서, 본 발명의 목적은 피부 상에 알레르겐의 적용시에 도출되는 염증성 반응을 볼 수도 있는 투명한 영역을 제공하는 배킹부를 포함함을 특징으로 하는, 객체 피부 상에 알레르겐을 적용하기 위한 경피적 기구를 제공하는 것이다. 유리하게는, 상기 기구는 밀폐성 형태 및/또는 수동적 확산을 나타내는 기구이다. 상기 기구는 전형적으로 패취형이다.

본 발명의 또 다른 목적은 알레르겐의 경피적 적용을 위한 몇 개의 기구를 포함하며 상기 기구는 서로 상이한 용량의 알레르겐 및/또는 서로 상이한 형태의 알레르겐을 포함하는 키트를 제공하는 것이다.

본 발명의 범위 내에서 사용된 알레르겐은 다양한 특성, 형태 및 기원을 갖는 것일 수 있다. 따라서, 이는 예를 들어 식품, 기관지성 또는 경피성 알레르겐일 수 있다.

이들은 단백질 (또는 폴리펩티드 또는 펩티드), 지질, 당 등일 수 있으며, 이들은 추출 산물 형태, 재조합 형태, 및/또는 예를 들어, 필요시에 그 특성을 변화시키기 위하여 화학적으로 또는 면역학적으로 변형된 합성 기원물(synthetic origin)일 수 있다. 상기 알레르겐은 그 전체 형태, 자연형 또는 단편화된 형태 또는 변성된 형태일 수 있다. 본 제제는 몇몇 알레르겐성 항원들의 조합, 및/또는 접합체(conjugates) 또는 복합체(complex) 형태의 항원을 포함하여 사용하는 것이다. 본 발명의 방법은 필수적으로 항원 특성과는 무관하며 따라서, 예를 들어, 식품 알레르겐 (예를 들어, 땅콩, 조개류, 우유, 계란, 생선, 밀, 대두 등) 또는 경피성 또는 호흡기성 알레르겐 (진드기, 화분, 동물 털 등)과 같은 알레르겐을 포함하는 어떠한 제제로도 적용 가능한 것으로 이해되어야 한다.

유리하게는, 상기 알레르겐은 약학적 용도로 조정된 임의의 부형제 또는 담체로 제형화되는 것이다. 상기 적용된 알레르겐성 제제는 예를 들어, 액상 또는 고체상과 같은 서로 상이한 형태로 제조가능하다. 본 발명의 바람직한 구현예로서, 상기 알레르겐은 건조 형태, 즉 탈수된 형태, 특히 분말상(powder), 입자상(particles), 응집체(agglomerates), 와퍼상(wafer), 건조형(dried form) 등인 것이다. 상기 건조형은 동결건조법 또는 단순 증발법으로 수득가능하다.

본 발명의 특정한 구현예로서, 상기 알레르겐은 분말상인 것이다.

상술한 바와 같이, 본 발명의 장점은 보체의 공동투여가 없이도 탈감작화를 달성할 수 있다는 점이다. 또한 본 발명의 바람직한 구현예로서, 환자 피부에 적용되는 상기 알러지성 제제는 어떠한 추가의 보체 화합물이 없는 것이다. 본 발명의 의미내에서, 용어 “보체(adjuvant)”는 피부 상에 물리화학적 및/또는 생물학적 작용을 하여 항원의 피부로의 투과를 촉진시키고 항원에 대한 면역 반응을 증가시키는 임의의 모든 화합물을 의미한다. 물리화학적 및/또는 생물학적 작용으로, 본원에서 정의되는 보체는 각질층을 교란시켜 표피 투과성을 변형시키고, 항원을 통과하게 하여 표피의 면역학적 활성 세포들과 접촉하게 하는 화합물이다. 보체 화합물의 실례로는 특히, 콜레라 독소(choleric toxin, CT) 또는 대장균의 열불안정성 독소(thermolabile toxin, LT)이다. 기타 실례로는 막에서의 항원 수송을 허용하는 문헌(Paul A, Cevc G, Bachhawat BK. Transdermal immunization with large proteins by ultradeformable drug carriers. Eur.J. Immunol. 1995, 25 (12): 3521-4)에 개시된 트랜스퍼좀(transfersome)이다.

그럼에도 불구하고, 하나의 변형예로서, 상기 알레르겐은 보체 화합물과의 조합(combination)으로 사용가능하고/하거나 예를 들어 보체 또는 예를 들어, 시토킨, 화합물, Toll 수용체 리간드 등과 같은 면역-조절 활성을 갖는 화합물과 같은 상기 알레르겐에 염증성 반응을 증폭시키기 위한 특성을 제공할 수 있다. 본원에서 사용된 “조합(combination)” 이라는 표현은 상기 알레르겐 및 화합물들이 생체 내에서 협력 효과를 유도하기 위하여 동일한 객체에 투여되는 것을 의미한다. 그럼에도 불구하고, 이들은 다양한 공정 및 경로에 따라 투여가능하다. 따라서, 이들은 경피 경로 또는 기타 경로를 통하여 적용가능하며 상기 화합물들은 다른 경로로 적용된다. 게다가, 이들은 반드시 동시에 투여될 필요는 없으나, 연속적으로 반복적으로 또는 그렇지 않거나 또는 유사한 빈도로 또는 유사하지 않은 빈도로 적용가능하다. 전형적으로, 상기 보체 화합물은 항원으로서 이전에 또는 동시에 투여된다.

본 발명의 하나의 구현예로서, 상기 기구는 0.1 내지 1,000 ㎍/㎠ 기구 표면적, 바람직하게는 20 내지 500 ㎍/㎠ 기구 표면적, 보다 바람직하게는, 20 내지 200 ㎍/㎠ 기구 표면적을 포함하는 알레르겐 양을 포함하는 것이다. 이러한 양은 목표, 처치 기간, 객체 등에 따라 당업자에 의하여 조정될 수 있는 것으로 이해되어야 할 것이다.

하기한 실험예들은 반응성의 이러한 감소가 본 발명에 따른 용량을 조절함으로써 달성될 수 있음을 나타낸다. 본 발명의 경피적 면역요법은 본 분야의 현재 기술 수준에 비하여 상대적으로 다수의 장점을 갖는다.

본 발명은 내성에 대하여 이러한 알레르겐에 대한 신체 반응을 지향할 목적으로 상기 알레르겐에 알러지 반응을 갖는 객체 피부에 알레르겐을 규칙적으로 및 인내할 정도로 적용함으로써 염증 반응을 유발하고 조절하는 데에 목적을 갖는 근원적인 방법이다.

본 발명은 100,000 이상의 배포수를 갖는 최초 즉시-사용형 아토피 패취 시험제품인, 프랑스의 제품 DIALLERTEST^?의 도입시부터 축적된 데이터뿐만 아니라 아토피 패취 시험제품 분야에서 축적된 경험에 의하여 확인되는 바대로 완벽하게 안정한 방법이다. 이러한 본 발명의 방법에 따른 사용상의 우수한 안전성 때문에, 발생되는 위험성 때문에 표준 탈감작화 방법으로 관리되지 않는, 땅콩 또는 조개류와 같은 알레르겐에 대해 알러지를 갖는 객체를 탈감작화시키는 것이 가능하다.

면역요법은 피부 상에 적용되는 기구를 제거함으로써 언제든지 중지될 수 있으며, 이는 항원이 신체에 투여되는 동안에 전통적인 탈감작화 방법이 고려되지 않는다.

본 발명의 제 1단계로서, 한편으로는 경피적 면역요법이 객체에게 적합한지 여부 (경피적 반응을 갖는 객체가 합당한 경우)를 확인하고 경피적 면역용법의 가장 좋은 관리를 위하여 다른 한편으로는 알레르겐에 대한 객체의 경피적 반응성 정도를 측정하는 것이 가능하다. 따라서, 경피적 내성을 적정화하고 가장 우수한 효율성을 유지하기 위하여 객체에게 가장 잘 조정된 과정을 선택하는 것이 가능하다.

치유 기간 동안, 연속적으로 측정되는 바와 같이, 경피적 반응성의 발생에 따라 용량 및/또는 투여빈도를 조절할 수 있다. 따라서, 치료학적 작용을 영구적으로 적정화하고 치유기간 내내 가장 높은 수준의 유효성을 유지하는 것이 가능하다.

치유 기간은 치유 초기에 조정된 치료학적 목적 및 알레르겐에 대한 경피적 반응성의 발생에 따라 좌우된다. 상기 치유(cure)는 피부상에서 확인된 알레르겐에 대한 반응성을 감소시키는 목적이 달성되고 유발시험법(elicitation test) 또는 기타 알레르기학 분야 수단으로 확인되거나 경피적 반응성의 완전한 소멸이 확인되는 시점에 종료된 것으로 간주된다.

본 발명은 치료기간 중에 염증이 지속 되도록 하는 조건 하에서 피부 상에 알레르겐을 적용함을 특징으로 하는, 객체 피부 상에 알레르겐을 반복적으로 적용함으로서 상기 알레르겐에 대하여 알러지 반응을 갖는 객체의 경피적 탈감작화를 시킴으로써, 이는 어떠한 보체(adjuvants) 또는 피부의 전처리 과정(pre-treatment)이 없더라도 경피적 탈감작화를 가능하게 한다.

본 발명의 상기한 목적들 및 장점들은 하기한 발명의 상세한 설명뿐만 아니라, 명세서 전반에 걸친 설시되는 일부들을 의미하는 참고 기호 및 이에 제한되지 않은 첨부되는 하기 도에 대한 설명란을 고려한다면 보다 명확히 설명될 것이다.
도 1은 댁타일(Dactyle) 화분에 대한 탈감작화를 위하여 8주 (a) 및 16주 (b) 이후에 얻어진 체적 변동 기록법 결과이며( C: 대조군(control), ND: 비-감작화군(nondesensitized), SCD: 피하 탈감작화군(subcutaneous desensitization), EPD: 경피적 탈감작화군(epicutaneous desensitization)을 의미함);
도 2는 오발부민에 대한 탈감작화를 위하여 8주 (a) 및 16주 (b) 이후에 얻어진 체적 변동 기록법 결과이며( C: 대조군(control), ND: 비-감작화군(nondesensitized), SCD: 피하 탈감작화군(subcutaneous desensitization), EPD: 경피적 탈감작화군(epicutaneous desensitization)을 의미함);
도 3은 땅콩 단백질로 탈감작화 처치 8주 전후의 항체 수준 측정 결과이며 (좌측 그래프: IgE 특이적(specific), 우측 그래프: IgG1 및 IgG2a 특이적. EP: 경피적(epicutaneous), ID: 피내(intradermal), ND: 비-탈감작화군(non-desensitized)을 의미함);
도 4는 유발시험법 이후에 히스타민 분비결과를 나타낸 도이며(EP: 경피적(epicutaneous), ID: 피내(intradermal), ND: 비-탈감작화군(non-desensitized)을 의미하며 결과는 nM로 표시함);
도 5는 특이적 IgEs의 발생비를 나타낸 도이며(V0, 초기 시료(initial sample), V1, 1달 후 시료, V3, 3달 후 시료를 의미함);
도 6은 치료기간 중 경피적 염증 반응결과를 나타낸 도이며(A: 현저(marked) B: 중간(medium) C: 경감됨(attenuated)를 의미함);
도 7A는 VIASKIN^?으로 알레르겐 적용 24시간 및 48시간 후, 랑거한스 세포의 활성화 및 염증 세포의 유입을 나타낸 도이며,(적용 24시간 후에, 상기 랑거한스 세포는 활성화되고 임프절로 이동을 시작한다. 48시간 후에, 염증 세포들이 분발하고 염증성 육아종이 잘 관찰됨);
도 7B는 VIASKIN^?으로 알레르겐 (오발부민) 의 서로 상이한 적용기간 투여 후 국소적 세포 반응 발생을 나타낸 도이며 (적용 6시간 후, 세포 반응이 감지되지 않았다. 24시간후에 염증 세포의 국소적 비율 상의 상승이 VIASKIN^?의 제거 후에도 지속되었다. 이러한 발생은 48시간 적용 후에 더 강력함);
도 8는 VIASKIN^?으로 감작화한 동물 피부 상에 알레르겐을 연장된 적용 기간(6 및 12주) 후에 국소 반응 양상의 발생을 나타낸 도이며 (24시간 반복적용 후에, 상기 반응은 주로 TH2 형이 주로 나타났다. 48시간 반복 적용 후에, 상기 반응은 섞여 나타났고 결국 주로 TH1 형이 주로 나타났다).

본 발명의 추가적 양상 및 이점은 하기한 실시예에서 설명될 것이며, 이는 본 발명의 범위를 한정함이 아니고 설명하고자 하는 것으로 간주되어야 한다. 모든 인용된 공개 문헌 또는 출원들은 본원에서 전체로서 단지 참고로 인용된다.

1. 오발부민(OVA) 및 화분(POL)에 대한 탈감작화

1.1. 실험법

OVA 및 POL에 BALB/c 마우스에 수산화 알루미늄을 수반한 10 ㎍ 알레르겐을 경피적 주사법으로 투여함으로서 연속적으로 (D0 및 D7) 2주간 감작화시켰다. 14일째(D14), 마우스를 10 ㎍ 알레르겐 단독으로 비강 투여하였다.

21일째(D21)부터, 마우스들은 탈감작화하거나 하지 않았다. 처치 마우스군 (treated mice)에는 경피적 염증 반응을 확보하는 조건하에서 시스템 (VIASKIN^? system) 수단을 이용한 경피적 투여법, 또는 수산화 알루미늄을 수반한 경피적 투여(양성 대조군)를 통하여 100 ㎍ 알레르겐을 8주간 1주 1회 투여하였다. 비-탈감작화 마우스군 (non-desensitized mice)은 정상적인 동물 사육 조건을 유지하였다.

항체 수준(IgE 및 IgG 특이적)의 발전상황을 탈감작화 8주 및 16주 후에 채취한 얼음 속 혈청을 분석하여 추적하였다.

OVA 및 POL 탈감작화 치료의 유효성도 또한 탈감작화되거나 되지 않은 마우스의 기관지 과반응성의 평가를 위한 체적변동 분석법(plethysmography measurements)으로 시험하였다.

1.2.결과

기관지 과반응성을 VIASKIN^?으로 처치하거나 처치하지 않은 마우스들을 대상으로 측정하였다 (도 1 및 도 2 참조).

경피적 염증 반응의 유지를 확보하는 조건하에 VIASKIN^?으로 처치된 마우스의 기관지 과반응성이 처치하지 않는 마우스에 비하여 상대적으로 3.7 내지 2.6 배로 유의적으로 감소하였다. 경피적으로 처치된 마우스의 기관지 과반응성은 VIASKIN^?으로 처치된 마우스의 기관지 과반응성과 유의적으로 상이하지 않았다.

2. 땅콩( ARA )에 대한 탈감작화

2.1. 실험법

ARA (땅콩)에 대하여, 마우스를 10 ㎍ 콜레라 독소를 수반하는 1mg ARA 단백질을 6일 간격으로 (D1, D7, D13, D19, D25, D33) 위내 삽입술로 6주 이상 감작화시켰다.

8주간 75일째(D75)에 탈감작화 과정을 시작하였다. 마우스를 염증 반응의 유지를 확보하는 조건 하에서 시스템(VIASKIN^? system) 수단을 이용한 피내 투여법, 또는 경피적 투여를 통하여 100 ㎍ ARA 제형을 1주 1회 투여하여 탈감작화를 수행하였다. 비-탈감작화 마우스군 (non-desensitized mice)은 감작화(sensitization) 이후에 어떠한 특별 처치를 수행하지 않았다. 정상적인 동물 사육 조건을 유지하였다.

탈감작화의 유효성은 경구 유발시험법 (oral elicitation tests)이후 히스타민 측정뿐만 아니라 항체 수준 (IgE, IgG1 및 IgG2a 특이적) 측정으로 추적하였다. 히스타민은 비만세포 또는 호염기구 등의 면역 세포의 탈과립화 중 분비되는 매개물질이다. 상기 탈과립화는 알러지 반응 유도에 대한 마커이다.

2.2. 결 과

ARA 탈감작화 치료법의 분석은 마우스의 특이적 항체 수준을 분석함으로서 평가하였다 (도 3 참조). 경피적 경로 또는 피내 경로 투여로 탈감작화된 마우스는 를 통한 특이적 IgE (ARA에 대한 알러지 마커) 수준 상의 감소 및 특이적 IgG2a 수준상의 증가를 나타냈다. 비-탈감작화된 마우스군에서 탐지된 특이적 IgE 수준은 높게 나타났고 특이적 IgG2a 수준은 탈감작화된 마우스보다 낮게 나타났다. 경피적 및 피내 탈감작화 경로 간에는 유의적인 차이가 발견되지 않았다.

경구 유발시험법 (oral elicitation tests)을 탈감작화되거나 되지 않은 마우스를 대상으로 수행하였다. 경피적 또는 피내 경로를 통하여 탈감작화된 마우스는 비-탈감작화된 마우스보다 저용량의 히스타민을 분비하였다. 이 결과는 탈감작화된 마우스의 알러지 반응성의 감소를 의미한다.

검토내용

서로 상이한 연구 모델들 및 서로 상이한 연구된 알레르겐 시험을 통하여 하기와 같은 결론을 확인하였다:

(1) 염증 반응의 유지에 기초한 경피적 면역요법은 전신성 형태(systemic type)의 임상적 및 생물학적 반응의 촉발을 가능하게 한다;

(2) 경구 및 경피적 경로를 통한 예비적 감작화 이후에 염증 반응의 유지에 기초한 경피적 면역요법을 받은 동물은 유발시험법에 대하여 감소된 반응을 나타냈으며, 이는 경피적 또는 피내 경로를 통한 면역요법을 받은 동물의 반응 결과와 필적하는 수준이었다;

(3) 수득된 혈청분석학적 반응은 경피적 면역요법에 의한 내성 과정의 유도를 확인시킨다.

3. 임상 데이타

환자 특성: 6년 5월 소아, 18.3 kg. 만성 설사, 구토, 전반적인 습진증상. 소 우유에 대한 단자시험(prick test) 양상. 총 IgE 486IU. 소 우유 특이적 IgE 32.7IU.

0.6 mL에서 우유 유발시험법 양성 (후두 소양증, 기침, 복통, 두드러기).

치료법: 130㎍ 우유 단백질을 함유한 VIASKIN^? 제품을 알레르겐과 접촉시 경피적 반응의 지속을 확보하는 조건하에서 3개월 동안 2일 간격으로 새로이 갈아 적용하였다.

결과: 결과는 도 5 및 도 6에 나타냈다. 이들은 치료기간 중 염증 반응의 검색과 관련하여, 소 우유에 대한 내성 역치 상의 실질적인 개선을 나타냈다. 면역 치유법 종료시에, 경피적 반응의 경감이 확인되었다. 3개월째 경구 유발 시험 결과는 어떠한 임상 반응이 없이 64.6 mL 까지의 내성 역치를 나타냈다.

4. 감작화 마우스에서 알레르겐의 적용후 세포 반응의 발생

미리 탈감작화된 마우스 피부 상에 알레르겐을 적용하면 랑거한스 세포를 활성화시키고 임프절로 이동하게 한다(도 7A 참조).

동일시간 내에서, 활성화된 세포는 피부 표면층으로 염증 세포를 끌어들이는 전여증성 시토킨을 생산한다. 이러한 “최초 상(first phase)”은 알레르겐에 대한 기억 세포(memory cells) 및 특이적 IgE를 갖기 때문에 감작화된 객체에서 발생한다. 따라서, 알레르겐과 접촉시에, 알레르겐 거부증(rejection)의 최초 반응이 발생한다.

제 2차 상(second phase)에서, 급성 염증 세포 (비만세포, 대식세포) 및 만성 세포 (임파구)의 유입을 특징으로 하는 국소 염증 반응이 나타났다 (도 7A 및 도 7B). 이전에 감작화된 마우스에서, Viaskin^?으로 피부에 알레르겐(오발부민)을 적용하면, 접촉 24시간 후에 미약한 염증 반응이 나타나고 다른 한편, 다핵화(polynuclears)에 의하여 경피 영역의 침입으로 접촉 24시간 후에 전면적인 염증 반응이 나타난다. 이는 치료법에 의해 목표화되는 보다 복잡한 반응이다.

감작화된 마우스에서 수행되는 연구에서, 알레르겐 적용 6시간, 24시간 및 48시간 후에 보다 유의적으로 나타나는 염증 반응(대식세포 수준상의 국소적 상승으로 구체화됨)을 측정한다 (도 7B).

검토의견:

경피적 탈감작화 치료법 도중에, 그 목적은 내성 과정과 불가분의 관계 역할을 하는 염증성 세포 반응을 유발하는 것이다.

실제적으로, 이는 시간에 따라 변화되는 염증 반응 강도가 아닌 특히 그 자연적 특성이다.

면역형광법(Immunofluorescence) 연구결과는 염증의 중심적 역할을 확인하고 적용기간에 따른 염증 반응 양상의 완전하게 다른 측면을 확인해 준다.

알레르겐의 적용기간은 세포 반응을 유발하기 위한 필수적 인자이다.

실시예 5. 알레르겐의 연장된 적용 후에 국소적 반응 양상의 발생

적용 기간은 추구하는 치료학적 (면역허용원) 반응 형태를 수득하기 위한 적절한 조건이 아니다. 마우스에서, 피부 상에 알레르겐의 반복된 투여는 그 적용 기간이 “단기간(short)”(24시간) 또는 “장기간(long)”(48시간)인지 여부와 상관없이 이러한 알레르겐의 특이적 항체 상의 증가를 야기한다. 적용기간이 연속되면(88일까지), 항체 수준도 아직 높으나, Th1/Th2 임파구의 상대적인 비율이 48시간 동안 Viaskin^?을 처치한 객체에서 Th1 임파구 상의 증가 방향으로 변화되었다 (도 8).

검토 의견

실험 데이터는 그 특징이 알레르겐 환자 피부 상에 알레르겐을 단지 고착함으로써 통상적으로 얻어지는 반응과는 상이한 반응을 유도함을 그 목적으로 함을 입증한다. 단기간 적용 후에 얻어진 반응이 Th2 형 인데 반하여, Th1 임파구 활성화에 의하여 구체화되고, “면역허용원(tolerogenic)” 효과가 얻어질 수 있는 Viaskin^? 수단으로 장기간 적용한 후에만 얻어지는 반응이다.

Viaskin^?에 의한 탈감작화 치유법 동안에, 미리 감작화된 환자의 온전한 피부상에 알레르겐을 반복하여 적용하면, 아토피 패취 시험법으로 임상적으로 현재 관찰되는 염증성 세포 반응이 도출된다.

알레르겐의 반복되고 연장된 적용을 도출하고 유지함으로서, 특이적 국소 염증 조건을 창제한다. 이러한 반응 중에서, 그 균형이 Th1 임파구 증가방향으로 이동한다.

따라서, 피부 상에 알레르겐의 연장되고 반복된 적용은 염증 반응을 야기 할 수 있을 뿐만 아니라 이러한 반응을 지향할 수 있는 것으로 나타났다.

Claims

알레르겐에 대하여 알러지 반응을 갖는 객체의 경피적 탈감작화에 의한 치료를 위한 특정 용량의 알레르겐을 함유한 알레르겐 조성물에 있어서,
상기 특정 용량의 알레르겐은 경피 적용시에 객체 피부의 적용 부위에서 염증 반응을 유발하기에 충분하고;
상기 알레르겐은 어떠한 보체 화합물없이 적용되고;
알레르겐 및 피부 사이의 접촉이 확보하도록 경피적 기구로 객체 피부 상에 상기 용량의 알레르겐을 적용시킴은 적용 부위에서의 염증 반응을 유도하도록 허용하고;
객체 피부 상에 알레르겐을 반복적으로 적용함으로서, 상기 염증 반응을 지속하도록 하고;
상기 염증 반응의 지속은 객체의 탈감작화를 초래하게 함을 특징으로 하는 알레르겐 조성물.
삭제
제 1항에 있어서, 상기 염증 반응의 치료는 알레르겐에 대하여 알러지 반응을 갖는 객체에 내성화를 유도하는 알레르겐 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 알레르겐의 용량, 빈도, 형태 또는 적용 기간을 염증반응을 지속시키기 위하여 반복된 적용 기간 도중에 조절하는 단계를 포함하는 알레르겐 조성물.
제 1항 또는 제 3항에 있어서,
상기 염증 반응의 정도는 시각적 검사에 의해 평가하는 알레르겐 조성물.
제 1항 또는 제 4항에 있어서,
상기 알레르겐의 용량, 빈도, 또는 적용 기간을 반복된 적용 기간 동안에 염증 반응이 증가시에, 감소시키는 단계를 포함하는 알레르겐 조성물.
제 1항 또는 제 4항에 있어서,
상기 알레르겐의 용량, 빈도, 또는 적용 기간을 반복된 적용 기간 동안에 염증 반응이 감소시에, 증가시키는 단계를 포함하는 알레르겐 조성물.
제 1항 또는 제 3항에 있어서,
상기 알레르겐은 객체의 온전한 피부에 적용되는 알레르겐 조성물.
제 1항 또는 제 3항에 있어서,
상기 알레르겐이 분말상 형태인 알레르겐 조성물.
삭제
삭제
제 1항에 있어서,
상기 경피적 기구는 경피적 밀폐형 기구인 알레르겐 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 알레르겐 또는 기구는 적어도 상기 염증 반응이 참고용 강도(a degree of reference)에 도달할 때까지 피부 상에 유지되는 알레르겐 조성물.
제 13항에 있어서,
상기 참고용 강도는 침윤된 홍반성 병변 또는 습진 형 증상을 육안으로 식별가능한 염증 반응인 알레르겐 조성물.
삭제
제 12항에 있어서,
상기 기구의 배킹부는 염증 반응이 투명막을 통하여 직접 관찰될 수 있도록, 허용하는 투명한 영역을 포함하는 알레르겐 조성물.
제 16항에 있어서,
상기 투명한 영역 상에, 격자가 염증 반응의 정도가 평가될 수 있게 인쇄된 알레르겐 조성물.
제 12항에 있어서,
상기 기구는 상기 염증 반응이 보이도록 하기 위하여 제거가능한 알레르겐 조성물.
삭제
삭제
삭제
제 1항 또는 제 3항에 있어서,
상기 알레르겐이 식품, 호흡기성 또는 경피성 알레르겐인 알레르겐 조성물.
제 22항에 있어서,
상기 알레르겐이 땅콩 알레르겐인 알레르겐 조성물.
제 22항에 있어서,
상기 알레르겐이 화분 알레르겐인 알레르겐 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 객체가 인체인 알레르겐 조성물.