KR101724550B1

KR101724550B1 - 발효된 패로부터 분리된 다당류를 유효성분으로 포함하는, 방사선 방호용 조성물

Info

Publication number: KR101724550B1
Application number: KR1020160027601A
Authority: KR
Inventors: 이원우; 전유진; 강나래; 오재영; 김은아
Original assignee: 제주대학교 산학협력단
Priority date: 2016-03-08
Filing date: 2016-03-08
Publication date: 2017-04-07

Abstract

본 발명은 발효된 패(Ishige okamurae)로부터 분리된 다당류를 유효성분으로 포함하는, 방사선 방호용 조성물, 상기 조성물을 포함하는 방사선 방호용 약학적 조성물 및 방사선 방호용 식품 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 발효된 패(Ishige okamurae)로부터 분리된 다당류를 유효성분으로 포함하는 방사선 방호용 조성물은 방사선 조사시 생성되는 유해 활성산소인 DPPH 라디칼과 히드록실 라디칼을 소거하는 효과가 있고, 방사선 조사에 의한 ROS 생성, NO 생성, 및 제브라피쉬의 세포 사멸 수준을 억제하는 효과가 있다. 또한, 패 (Ishige okamurae)는 식용으로 부작용이 없는 바, 인체에 안전하므로 방사선에 노출될 우려가 있는 다양한 작업 환경에서 유용하게 사용될 수 있다.

Description

발효된 패로부터 분리된 다당류를 유효성분으로 포함하는, 방사선 방호용 조성물{Radiation protective composition comprising polysaccharide from fermented Ishige okamurae}

본 발명은 발효된 패(Ishige okamurae)로부터 분리된 다당류를 유효성분으로 포함하는, 방사선 방호용 조성물, 이를 포함하는 방사선 방호용 약학적 조성물 및 방사선 방호용 식품 조성물에 관한 것이다.

현재 전 세계적으로 사망 우위를 차지하고 있는 암 질환은 매년 증가 추세이며, 이러한 환자들을 위한 치료제 및 치료법으로 화학요법과 방사선요법이 가장 널리 사용되고 있다. 방사선 요법은 선진국으로 갈수록 그 사용비중이 증가하고 있고 이용분야도 급증하고 있어 최근에는 방사선을 사용하는 병원 및 작업장이 크게 늘고 있다. 특히, 방사선을 암과 같은 질환의 치료 목적으로 인체에 사용하는 경우, 성공적으로 적용될 경우에는 치료 효과를 높이는 등 유용한 효과를 얻을 수 있으나, 불임증, 탈모 및 백내장 등과 같은 다른 질환들을 발병시킬 수 있고, 또한 각종 방사능 사고는 인간의 목숨뿐만 아니라 동식물에도 치명적인 피해를 줄 수 있으며, 방사선에 오염된 동식물 식품을 섭취하게 되면 간접적으로 방사선의 피해를 받을 수 있는 등 많은 부작용이 나타나고 있어 방사선의 사용시 많은 주의가 요구되고 있다.

한편, 방사선이 생물에 미치는 효과는 입사 방사선과 생물체를 구성하는 원자와의 상호작용 결과 발생하는 전리현상으로 설명할 수 있는데, 방사선이 궁극적으로 세포에 영향을 주는 메카니즘은 크게 직접적인 영향 및 간접적인 영향으로 구분할 수 있으며, 특히 방사선에 의한 직접적인 영향은 생물체를 구성하고 있는 많은 수의 원자가 방사선에 의해 영향을 받게 되어 염색체 복제에 이상을 초래하거나 DNA 정보에 심한 교란을 유발하여 세포의 사멸을 발생하게 한다. 또한, 방사선 조사에 의한 생물에 미치는 피해와 관련하여, 방사선이 조사될 경우 지질과산화에 의한 MDA(malondialdehyde) 및 과산화수소(hydrogen peroxide)의 형성 등으로 인해, 간 및 신장과 같은 장기가 크게 손상될 수 있는 문제가 발생하게 된다(Garner A 등, Int. J. Radiat. Biol. Relat. Stud. Phys.Chem. Med., 50,323~335, 1986).

또한, 치료요법의 경우, 치료 방사선이 비정상 조직에 흡수되는 방사선량은 최대화하면서 동시에 정상 조직 근처에 흡수되는 방사선량은 최소화하기 위하여 비정상 증식 조직을 함유하는 대상의 신체 중 일정 부분에만 방사선 조사를 적용하고 있으나 비정상 조직에 근접한 정상 조직의 경우, 잠재적으로 방사선 조사에 계속적으로 노출되고 있으므로 최선의 방사선 치료 기술에도 불구하고 불완전한 종양 감소, 종양 재발, 증가된 종양 존재량 및 내방사선 종양이 유발되는 문제점이 있다.

나아가 방사선의 노출은 질병 치료를 위한 방사선 치료 이외에도 다양한 직업상의 환경에서도 발생할 수 있다. 예컨대, 원자력 또는 핵무기 산업 등 방사선을 다루는 직업에 종사하는 사람, 핵무기 방사성 낙진에 의해 오염된 지역에서 일하는 군인 및 핵사고를 처리하는 구조 대원들에게 쉽게 노출될 우려가 있다.

따라서 현대 생활사에서 방사선의 활용 범위가 점차 다양화되면서 방사능 물질 및 장치에 대한 노출 비중이 늘어남에 따라 방사선으로부터 인체를 보호하려는 기술들이 개발되고 있다. 방사선 피복으로부터 생체를 보호하기 위한 보호 도구들로, 예컨대, 방사선 보호 안경, 방사선 차단 장치 및 방사선 보호복 등이 있으며, 베타-머캡토에틸아민과 같은 아미노티올류(스가하라 외, 방사선 의학, 공립출판사, 1986) 및 시스테아민 유도체가 방사선 방호 효과가 있는 것으로 밝혀진 바 있다(Ganasoundari 외, Mutation Research, 1997).

그러나 종래 기술에 따른 방사선 보호 도구들은 제작하는데 많은 비용이 든다는 문제점이 있으며, 아미노티올류 및 시스테아민 유도체의 경우에는 과민증이나 알러지와 같은 부작용이 유발된다는 문제점이 있다. 따라서 방사선 피복으로부터 생체를 방호하는 기능이 우수할 뿐만 아니라 인체 내에서 독성이 없으며 다른 부작용을 초래하지 않는 안전한 방사선 방호제로 사용할 수 있는 새로운 소재의 개발이 시급한 실정이다.

이러한 배경하에, 본 발명자들은 발효된 다수의 해조류를 비교 분석하였으며, 발효된 해조류보다 해조류에서 분리 정제된 다당류에 항산화 활성이 우수함을 확인하였으며, 상기 분리 정제된 다당류가 방사선 방호 효과가 있음을 확인하고, 본 발명을 완성하였다.

본 발명의 목적은 발효된 패(Ishige okamurae)로부터 분리된 다당류를 유효성분으로 포함하는, 방사선 방호용 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 방사선 방호용 조성물을 포함하는 방사선 방호용 약학적 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 방사선 방호용 조성물을 포함하는 방사선 방호용 식품 조성물을 제공하는 것이다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 하나의 양태로, 발효된 패(Ishige okamurae)로부터 분리된 다당류를 유효성분으로 포함하는, 방사선 방호용 조성물을 제공한다.

본 발명에서, 상기 "Ishige okamurae"는 갈조식물문(Phaeophyta), 패목(Ishigeales), 패과(Ishigeaceae)에 속하는 해조류로서, 흑갈색이며 굵기가 고르지 않으며, 이리저리 구부러진 철사모양으로 두 갈래로 갈라지듯이 가지를 낸다. 약 8cm정도 자라며, 작은 구슬 모양의 세포 10-14개가 연결된 곧은 실 모양인 것이 빽빽이 들어차 피층을 이루고 가지의 길이와 나란히 배열된 실과 이리저리 가며 피층의 가장 안쪽 세포와 연결되는 실로 수조직을 이른다. 지리적으로는 남해안, 제주도 연안, 및 북태평양 서안에 분포하는 것으로 알려져 있다. 생육지 조간대의 상부 바위에 넓은 개체군을 이루며 자라는 특징이 있다.

본 발명에서, 상기 용어 "발효"는 미생물이 자신이 가지고 있는 효소를 이용해 유기물을 분해시키는 과정을 말한다. 본 발명에서, 상기 발효에 사용되는 균주로, 락토바실러스 속에 해당하는 균주를 사용할 수 있으며, 구체적으로, 락토바실러스 플랜타럼(Lactobacillus plantarum), 락토바실러스 카제이(Lactobacillus casei), 락토바실러스 브레비스(Lactobacillus brevis), 및 락토바실러스 불가리커스(Lactobacillus bulgaricus)로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 균주를 사용할 수 있으며, 보다 구체적으로, 락토바실러스 플랜타럼(Lactobacillus plantarum)을 사용하여 패(Ishige okamurae)를 발효할 수 있다.

본 발명에서, 상기 다당류는 발효된 패의 효소 추출물에서 분리될 수 있으며, 구체적으로, 패의 효소 추출물과 C1 내지 C4의 저급 알코올과의 혼합물을 침전시켜 얻어진 침전물에서 분리될 수 있다.

본 발명에서, 용어 "다당류"는 단당류 3개 이상이 글리코시드결합을 통하여 큰 분자를 만들고 있는 당류를 통틀어 일컫는 것으로서, 가수분해하면 단당류가 된다. 가수 분해에 의해 1 분자에서 10개 이상의 단당류를 발생시키며, 보통 80~100개의 단당이 축합되어 있으며, 전분, 글리코겐, 셀룰로오스 등이 대표적이다.

본 발명의 일실시예에서는 패(I. okamurae)를 락토바실러스 플랜타럼(Lactobacillus plantarum)을 이용하여 발효를 하였으며(실시예 2), 탄수화물 가수분해효소로 잘 알려진 Celluclast을 이용하여 발효된 패의 효소 추출물을 제조하였으며(실시예 3), 상기 발효된 패의 효소 추출물과 에탄올을 혼합한 후, 이들의 혼합물을 원심분리한 후, 원심분리에 의해 얻어진 침전물을 수득하였으며(실시예 4), 상기 침전물을 대상으로, 음이온-교환크로마토그래피를 수행하여 패로부터 다당류를 분리 및 정제하였다(실시예 5).

본 발명의 상기 다당류는 푸코오스, 글루코스, 만나오스, 갈락토스, 및 아라비노스로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 단당류를 포함할 수 있다.

본 발명의 일실시예에서는 상기 다당류에 함유된 단당류를 분석하였으며, ED50 다이오넥스 전기화학 검출기를 사용하여 검출하고, 데이터는 Peack Net on-line software로 분석하였다(실시예 11). 그 결과, 패에서 분리된 다당류에 푸코오스, 글루코스, 만나오스, 갈락토스, 및 아라비노스가 포함되어 있는 것을 확인하였다(실험예 5).

본 발명에서 용어 "방사선"은 이온화 방사선을 의미하는 것으로서, 상기 이온화 방사선은 세포 및 조직에 흡수되는 경우, 반응성 산소종의 형성 및 DNA의 손상을 유도하는 등 세포 및 생체에 유해한 영향을 미칠 수 있는 에너지를 가지는 방사선을 말한다. 이러한 종류의 방사선으로는 X-선, 알파선, 베타선, 감마선 및 입자 충격(예컨대, 중성자빔, 전자빔, 양성자, 중간자 등)을 포함할 수 있으며, 구체적으로 감마선일 수 있다.

본 발명에서 용어 "방사선 방호"란 방사선에 노출된 또는 노출될 정상 DNA, RNA, 단백질, 세포, 조직, 기관 및 개체 등에 대하여 방사선에 의한 유해 작용을 감소 또는 제거하는 것을 말한다.

본 발명의 일실시예에서는 방사선 방호 효과를 평가하기 위하여, 발효된 패에서 분리 및 정제된 다당류 분획물(AP2)을 처리한 경우, 감마선 조사에 의해 유도된 제브라피쉬의 난황낭 부종의 크기가 농도 의존적으로 감소되는 것을 확인하였다(실험예 4). 또한, 감사선 조사에 의해 유도된 제브라피쉬의 꼬리 굽음이 발효된 패에서 분리된 다당류 분획물(AP2) 처리에 의해 현저히 감소되고 정상단계의 제브라피쉬의 수가 증가되는 것을 확인하였다. 또한, 감마선 조사에 의해 유도된 ROS, NO, 및 제브라피쉬의 세포 사멸 수준이 발효된 패에서 분리된 다당류 분획물(AP2) 처리에 의해 ROS 생성, NO 생성, 및 제브라피쉬의 세포 사멸 수준이 농도 의존적으로 감소되는 것을 확인하여, 본 발명의 발효된 패에서 분리된 다당류가 방사선 방호 효과를 가지는 것을 확인하였다 (실험예 4).

본 발명에서 상기 방사선 방호용 조성물은 추가로 항산화 활성을 가지는 것을 특징으로 한다.

본 발명의 일실시예에서 락토바실러스 플랜타럼(Lactobacillus plantarum)을 이용하여 발효된 패에서 분리된 조다당류(CPFI)와 발효되지 않은 패에서 분리된 조다당류(CPI)의 항산화 활성을 비교한 결과, 발효된 패에서 분리된 조다당류(CPFI)의 경우 DPPH 라디칼 소거 활성과 히드록실 라디칼 소거 활성이 발효되지 않은 패에서 분리된 조다당류(CPI)에 비해 우수함을 확인하여, 발효된 패에서 분리된 조다당류(CPI)의 항산화 활성이 높음을 확인하였다(실험예 1).

또한, 발효된 패에서 분리된 조다당류(CPFI)와 이로부터 분리 및 정제된 다당류(AP2)의 항산화 활성을 비교한 결과, 정제된 다당류(AP2)의 DPPH 라디칼 소거 활성이 조다당류(CPFI)의 2.2배, 히드록실 라디칼 소거 활성은 조다당류(CPFI)의 27.7배로 정제된 다당류(AP2)의 항산화 활성이 현저히 높음을 확인하였다.

본 발명은 다른 하나의 양태로서, 상기 방사선 방호용 조성물을 포함하는 방사선 방호용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명의 방사선 방호용 약학적 조성물은 방사선 조사시 생체를 보호할 수 있는 효과가 있는 약학적 조성물로 용이하게 활용할 수 있다. 이에, 방사선 방어를 필요로 하는 약학적 조성물 개발 등 다양한 소재 개발을 통해 방사선 직업종사자나 암치료시 환자의 방사선 피폭감소와 같이 방사선에 대한 안전성 확보에도 기여할 수 있게 된다.

본 발명에서, 상기 약학 조성물은 약학적으로 허용되는 담체(carrier) 또는 첨가제를 포함할 수 있다. 본 발명에서 상기 "약학적으로 허용되는" 의미는 유효성분의 활성을 억제하지 않으면서 적용(처방) 대상이 적응 가능한 이상의 독성을 지니지 않는다는 의미이다. 상기 "담체"는 세포 또는 조직 내로의 화합물의 부가를 용이하게 하는 화합물로 정의된다.

본 발명의 추출물은 단독으로 또는 어떤 편리한 담체 등과 함께 혼합하여 투여될 수 있고, 그러한 투여 제형은 단회투여 또는 반복투여 제형일 수 있다. 상기 추출물을 포함하는 약학 조성물은 고형 제제 또는 액상 제제일 수 있다. 고형 제제는 산제, 과립제, 정제, 캅셀제, 좌제 등이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 고형 제제에는 담체, 착향제, 결합제, 방부제, 붕해제, 활택제, 충진제 등이 포함될 수 있으나 이에 한정되는 것은 아니다. 액상 제제로는 물, 프로필렌 글리콜 용액 같은 용액제, 현탁액제, 유제 등이 있으나, 이에 한정되는 것은 아니며, 적당한 착색제, 착향제, 안정화제, 점성화제 등을 첨가하여 제조할 수 있다. 예를 들어, 산제는 본 발명의 유효 성분인 발효된 패(Ishige okamurae)로부터 분리된 다당류와 유당, 전분, 미결정셀룰로오스 등 약제학적으로 허용되는 적당한 담체를 단순 혼합함으로써 제조될 수 있다. 과립제는 본 발명의 상기 발효된 패(Ishige okamurae)로부터 분리된 다당류; 약학적으로 허용되는 적당한 담체; 및 폴리비닐피롤리돈, 히드록시프로필셀룰로오스 등의 약학적으로 허용되는 적당한 결합제를 혼합한 후, 물, 에탄올, 이소프로판올 등의 용매를 이용한 습식과립법 또는 압축력을 이용한 건식과립법을 이용하여 제조될 수 있다. 또한 정제는 상기 과립제를 마그네슘스테아레이트 등의 약학적으로 허용되는 적당한 활택제와 혼합한 후, 타정기를 이용하여 타정함으로써 제조될 수 있다.

본 발명의 발효된 패(Ishige okamurae)로부터 분리된 다당류는 치료해야 할 질환 및 개체의 상태에 따라 경구제, 주사제(예를 들어, 근육주사, 복강주사, 정맥주사, 주입(infusion), 피하주사, 임플란트), 흡입제, 비강투여제, 질제, 직장투여제, 설하제, 트랜스더말제, 토피칼제 등으로 투여될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 투여 경로에 따라 통상적으로 사용되고 비독성인, 약학적으로 허용되는 운반체, 첨가제, 비히클을 포함하는 적당한 투여 유닛 제형으로 제제화될 수 있다.

본 발명의 약학 조성물은 매일 약 0.0001 mg/kg 내지 약 10 g/kg이 투여될 수 있으며, 약 0.001 mg/kg 내지 약 1 g/kg의 1일 투여 용량으로 투여될 수 있다. 그러나 상기 투여량은 상기 혼합물의 정제 정도, 환자의 상태(연령, 성별, 체중 등), 치료하고 있는 상태의 심각성 등에 따라 다양할 수 있다. 필요에 따라 편리성을 위하여 1일 총 투여량을 하루 동안 여러 번 나누어 투여될 수 있다.

본 발명의 조성물이 약학 조성물로 사용될 경우, 상기 조성물 내의 발효된 패(Ishige okamurae)로부터 분리된 다당류의 함량은 질환의 증상, 증상의 진행 정도, 환자의 상태 등에 따라서 방사선 방호 효과를 나타낼 수 있는 유효량을 적절히 조절 가능하며, 예컨대, 상기 발효된 패(Ishige okamurae)로부터 분리된 다당류의 양은 전체 조성물 총 중량을 기준으로 0.0001 중량% 이상, 구체적으로 0.001 중량% 이상일 수 있고, 80 중량% 이하, 구체적으로는 50 중량% 이하일 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명은 다른 하나의 양태로서, 상기 방사선 방호용 조성물을 포함하는 방사선 방호용 식품 조성물을 제공한다.

본 발명의 방사선 방호용 식품 조성물은 방사선 조사시 생체를 보호할 수 있는 효과가 있는 식품, 예컨대, 식품의 주원료, 부원료, 식품 첨가제, 기능성 식품 또는 음료로 용이하게 활용할 수 있다.

본 발명에서 용어 "식품"은 영양소를 한 가지 또는 그 이상 함유하고 있는 천연물 또는 가공품을 의미하며, 구체적으로 어느 정도의 가공 공정을 거쳐 직접 먹을 수 있는 상태가 된 것을 의미하며, 통상적인 의미로서, 각종 식품, 기능성 식품, 음료, 식품 첨가제 및 음료 첨가제를 모두 포함하는 의미로 사용된다. 상기 식품의 예로서 각종 식품류, 음료, 껌, 차, 비타민 복합제, 기능성 식품 등이 있다. 추가로, 본 발명의 식품에는 특수영양식품(예, 조제유류, 영,유아식 등), 식육가공품, 어육제품, 두부류, 묵류, 면류(예, 라면류, 국수류 등), 건강보조식품, 조미식품(예, 간장, 된장, 고추장, 혼합장 등), 소스류, 과자류(예, 스넥류), 유가공품(예, 발효유, 치즈 등), 기타 가공식품, 김치, 절임식품(각종 김치류, 장아찌 등), 음료(예, 과실, 채소류 음료, 두유류, 발효음료류, 아이스크림류 등), 천연조미료(예, 라면 스프 등), 비타민 복합제, 알코올 음료, 주류 및 그 밖의 건강보조식품류를 포함하나 이에 한정되지 않는다. 상기 기능성 식품, 음료, 식품첨가제 또는 음료첨가제는 통상의 제조방법으로 제조될 수 있다.

상기 "기능성 식품"이란 식품에 물리적, 생화학적, 생물공학적 수법 등을 이용하여 해당 식품의 기능을 특정 목적에 작용, 발현하도록 부가가치를 부여한 식품군이나 식품 조성이 갖는 생체방어리듬조절, 질병 방지와 회복 등에 관한 체내조절기능을 생체에 대하여 충분히 발현하도록 설계하여 가공한 식품을 의미하며, 구체적으로는 건강 기능성 식품일 수 있다. 특히, 본 발명의 조성물의 경우 방사선 방호용 식품 조성물로 적용하기에 좋다. 상기 기능성 식품에는 식품학적으로 허용 가능한 식품 보조 첨가제를 포함할 수 있으며, 기능성 식품의 제조에 통상적으로 사용되는 적절한 담체, 부형제 및 희석제를 더욱 포함할 수 있다.

또한, 상기 식품 조성물에서, 상기 발효된 패(Ishige okamurae)로부터 분리된 다당류의 양은 식품 조성물 총 중량의 0.00001 중량% 이상, 구체적으로 0.1 중량% 이상일 수 있고, 80 중량% 이하, 구체적으로 50 중량% 이하, 더욱 구체적으로 40 중량% 이하로 포함될 수 있으며, 상기 식품이 음료인 경우에는 식품 전체의 부피 100 ml를 기준으로 0.001 g 이상, 구체적으로 0.01 g 이상, 50 g 이하, 구체적으로 10 g 이하, 더욱 구체적으로 2g 이하의 비율로 포함될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.

본 발명의 식품 조성물에는 그 유효성분 이외에 감미제, 풍미제, 생리활성 성분, 미네랄 등이 포함될 수 있다. 감미제는 식품이 적당한 단맛을 나게 하는 양으로 사용될 수 있으며, 천연의 것이거나 합성된 것일 수 있다. 구체적으로는 천연 감미제를 사용하는 경우인데, 천연 감미제로서는 옥수수 시럽 고형물, 꿀, 수크로오스, 프록토오스, 락토오스, 말토오스 등의 당 감미제를 들 수 있다. 풍미제는 맛이나 향을 좋게 하기 위하여 사용될 수 있는데, 천연의 것과 합성된 것 모두 사용될 수 있다. 구체적으로는 천연의 것을 사용하는 경우이다. 천연의 것을 사용할 경우에 풍미 이외에 영양 강화의 목적도 병행할 수 있다. 천연 풍미제로서는 사과, 레몬, 감귤, 포도, 딸기, 복숭아 등에서 얻어진 것이거나 녹차잎, 둥굴레, 대잎, 계피, 국화 잎, 자스민 등에서 얻어진 것일 수 있다. 또한, 인삼(홍삼), 죽순, 알로에 베라, 은행 등에서 얻어진 것을 사용할 수 있다. 천연 풍미제는 액상의 농축액이나 고형상의 추출물일 수 있다. 경우에 따라서 합성 풍미제가 사용될 수 있는데, 합성 풍미제는 에스테르, 알콜, 알데하이드, 테르펜 등이 이용될 수 있다. 생리 활성 물질로서는 카테킨, 에피카테킨, 갈로카테킨, 에피갈로카테킨 등의 카테킨류나, 레티놀, 아스코르브산, 토코페롤, 칼시페롤, 티아민, 리보플라빈 등의 비타민류 등이 사용될 수 있다. 미네랄로서는 칼슘, 마그네슘, 크롬, 코발트, 구리, 불소화물, 게르마늄, 요오드, 철, 리튬, 마그네슘, 망간, 몰리브덴, 인, 칼륨, 셀레늄, 규소, 나트륨, 황, 바나듐, 아연 등이 사용될 수 있다.

또한, 본 발명의 식품 조성물은 상기 감미제 등 이외에도 필요에 따라 보존제, 유화제, 산미료, 점증제 등을 포함할 수 있다.

이러한 보존제, 유화제 등은 그것이 첨가되는 용도를 달성할 수 있는 한 극미량으로 첨가되어 사용되는 것이 바람직하다. 극미량이란 수치적으로 표현할 때 식품 조성물 전체 중량을 기준으로 할 때 0.0005 중량％ 내지 약 0.5 중량％ 범위를 의미한다. 사용될 수 있는 보존제로서는 소듐 소르브산칼슘, 소르브산나트륨, 소르브산칼륨, 벤조산칼슘, 벤조산나트륨, 벤조산칼륨, EDTA(에틸렌디아민테트라아세트산) 등을 들 수 있다. 사용될 수 있는 유화제로서는 아카시아검, 카르복시메틸셀룰로스, 잔탄검, 펙틴 등을 들 수 있다. 사용될 수 있는 산미료로서는 연산, 말산, 푸마르산, 아디프산, 인산, 글루콘산, 타르타르산, 아스코르브산, 아세트산, 인산 등을 들 수 있다. 이러한 산미료는 맛을 증진시키는 목적 이외에 미생물의 증식을 억제할 목적으로 식품 조성물이 적정 산도로 되도록 첨가될 수 있다. 사용될 수 있는 점증제로서는 현탁화 구현제, 침강제, 겔형성제, 팽화제 등을 들 수 있다.

본 발명의 발효된 패(Ishige okamurae)로부터 분리된 다당류를 유효성분으로 포함하는 방사선 방호용 조성물은 방사선 조사시 생성되는 유해 활성산소인 DPPH 라디칼과 히드록실 라디칼을 소거하는 효과가 있고, 방사선 조사에 의한 ROS 생성, NO 생성, 및 제브라피쉬의 세포 사멸 수준을 억제하는 효과가 있다.

또한, 패는 식용으로 부작용이 없는 바, 인체에 안전하므로 방사선에 노출

될 우려가 있는 다양한 작업 환경에서 유용하게 사용될 수 있다.

도 1은 발효 전후의 패 당침전물의 항산화 활성을 비교한 것이다.
도 2는 발효된 패 당침전물의 DEAE-셀룰로오즈 이온교환 크로마토그램을 나타낸 것이다.
도 3은 패 당침전물로부터 분리한 다당류 프랙션(AP1-AP6)의 항산화 활성을 나타낸 것이다.
도 4는 AP2의 처리에 따른 감마선 조사된 제브라피쉬(gamma ray-irradiated zebrafish)의 생존률을 나타낸 것이다.
도 5 는 AP2의 처리에 따른 감마선 조사된 제브라피쉬(gamma ray-irradiated zebrafish)의 기형을 나타낸 것이다.
도 6은 감마선 조사된 제브라피쉬(gamma ray-irradiated zebrafish)에서의 AP2의 ROS 및 NO 생성, 세포사멸에 대한 보호 효과를 나타낸 것이다.

이하, 본 발명을 실시예에 의해 보다 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기의 실시예에 한정되는 것은 아니다.

<실험 재료 및 방법>

실시예 1. 화학물질 및 시약

Celluclast 1.5L FG는 Novo Co. (Novozyme Nordisk, Bagsvaerd, Denmark)에서 구입하였다. 1,1-diphenyl-2-pricrylhydrazyl (DPPH), 5,5-dimethyl-1-pyrroline N-oxide (DMPO), 2',7'-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCF-DA), diaminofluorophore 4-amino-5-methylamino-2',7'-difluorofluorescein diacetate (DAF-FM DA) 및 아크리딘 오렌지베이스는 Sigma Chemical Co. (St. Louis, USA)에서 구입하였다. HiPrep DEAE FF 16/10 컬럼은 GE healthcare Bio-Sciences Co. (Buckinghamshire, UK)에서 구입하였다. 다른 화학 물질과 시약은 분석 등급이었다.

실시예 2. L. plantarum 을 사용한 해조류(seaweed) 발효

갈색 조류 패(I. okamurae, Ishige okamurae)은 제주도의 해안을 따라 수집하였다. 상기 조류는 염, 모래, 착생식물(epiphytes)를 제거하기 위해, 수돗물로 3 회 세척하였으며, 조심스럽게 신선한 물로 세정하고 -20℃의 냉동고에 보관을 하였다. 그 후, 냉동된 조류는 동결 건조 및 분쇄 균질화하였다. 그 후, 동결 건조된 I. okamurae는 락토바실러스 플랜타럼(Lactobacillus plantarum)을 이용한 발효를 적용하였다. 발효 공정은 Dordevic et al (2010)에 의해 기재된 방법을 일부 수정하여 수행하였다. I. okamurae 분말 (15g)을 1L 플라스크에서 증류수(300 mL)로 균질화하였다. 이어서, 상기 혼합물은 미생물을 첨가하기 전에 멸균 및 냉각시켰다. 상기 혼합물에 1%(v/v) L. plantarum을 접종하였으며, 30℃에서 1,200 rpm, 24 시간동안 발효시켰다. 발효의 완료는 pH 4.0의 배양 배지의 pH 감소로 확인하였다. 발효 후, 상기 혼합물을 동결 건조시킨 다음 실험에 사용하였다.

실시예 3. 해조류(seaweed)의 효소 추출

효소 추출물은 공지된 방법에 따라 제조하였다(Lee W.W. 등, Algae, 26,343-350, 2011). 탄수화물 가수분해효소로 잘 알려진 Celluclast은 해조류의 효소 추출에 사용되었다. 해초 분말(50g)은 물(2L)로 균질화하고, 500μL의 celluclast와 혼합하였다. 반응물은 최적 pH 및 효소의 온도 범위로 조정하고, 효소 반응은 24시간 동안 수행하였다. 추출 후, 반응물은 100℃에서 10분 동안 끓여서, 효소를 불활성화시켰다. 이어서, 반응물은 잔류 물을 제거하기 위하여, 4℃에서 3000 RPM, 20분간 처리했다. 반응물의 pH를 7.0로 조정하고 효소 추출물로 지정하였다. 추출물을 추가 실험을 위해 -20℃에 보관 하였다.

실시예 4. 조다당류(crude polysaccharide) 의 분리

실시예 3에서 얻어진 효소 추출물 (750 mL)을 99.5% 에탄올(1.5 L)과 잘 혼합하였다. 이어서, 혼합물을 4℃에 3-4일간 두고, 4℃에서 20분 동안 10,000×g에서 원심분리하였다. 침전물은 조다당류(crude polysaccharide)로 지정하였으며, 추가 실험을 위해 -20℃에 보관하였다.

실시예 5. 음이온-교환 크로마토그래피에 의한 다당류 분리 및 정제

실시예 4에서 얻어진 조다당류(50 mg)을 50 mM의 아세트산 나트륨 (PH 4.0)으로 평형화시킨 DEAE-셀룰로오스 칼럼 (100mm × 16mm)에 적용하였으며, 1 M NaCl을 함유하는 동일한 완충액으로 세척하였다. 용출은 0-1 M의 NaCl 완충액 구배로 2mL/min의 유속으로 수행하였다. 음이온 교환 크로마토그래피는 GE healthcare Bio-Sciences Co. (Buckinghamshire, UK)으로부터 제공받은 AKTA prime을 이용하여 수행하였다. 60개의 튜브 (튜브당 5 ㎖)을 수집하고, 페놀-H2SO4 분석에 의해 다당류 함량을 측정하였다. 정제된 다당류는 동결 건조에 의해 농축하고 다음 실험에 사용하였다.

실시예 6. 전자 스핀 공명( ESR ) 분광학을 이용한 라디칼 소거 분석

DPPH 라디칼 소거 활성은 by Nanjo et al. (1996)에 의해 기술된 방법을 사용하여 측정하였다. 각각의 시료 (60μL)를 60μL의 DPPH 용액 (60μmol/L)에 첨가하였다. 10초 동안 격렬하게 혼합하고 2분간 반응 후, 반응물을 100μL 모세관 튜브에 옮기고 ESR 분광기(JES-FA macine, JOEL, Tokyo, Japan)의 캐비티(cavity)에 끼웠다. 사용된 측정 조건은 중심 필드 3475 G, 변조 주파수 100 kHz, 변조 진폭 2 G, 마이크로파 파워 5mW, 게인(gain) 6.3×10⁵, 및 298 K의 온도를 사용하였다.

히드록실 라디칼은 펜톤 반응에 의해 생성되었고, 니트론 스핀 트랩 DMPO 와 급격히 반응시켰다; 그 결과로 생긴 DMPO-OH 부가물(adducts)은 ESR 분광기로 검출되었다(Rosen and Rauckman, 1984). 각 샘플의 ESR 스펙트럼은, 중앙 필드 3475 G, 변조 주파수 100 kHz, 변조 진폭 2G, 마이크로파 파워 1 mW, 게인(gain) 6.3×10⁵ 및 298 K의 온도 조건으로 설정된 ESR 분광기를 이용하여 0.3 M DMPO(0.2 ㎖), 10 mM의 FeSO₄ (0.2 ㎖) 및 10 mM의 H₂O₂(0.2 mL)을 첨가한 후 2.5 분에 기록하였다.

실시예 7. parental zebrafish(제브라피쉬)의 원산지 및 유지

성년의 제브라피쉬(Adult zebrafish)는 Seoul aquarium(Seoul, Korea)에서 구입하였으며, 28.5 ± 1℃, 3.5 L acrylic tank에서 14/10 h의 빛/어둠 사이클에서 유지되었다. 제브라피쉬는 Tetra GmbH D-49304(Melle, Germany)로 하루에 두 번 먹였다. 제브라피쉬 자동 시스템에서 자연 산란으로 얻어진 배아는 30분이내로 배지에 수집되었다. 배아는 무작위로 다섯 그룹으로 분리하였다(n=그룹당 15): 비 조사군(Non IR), 조사군(IR), 세 가지 농도의 테스트 시료를 처리한 군(IR_S). 제브라피쉬 유충은 배아로부터 부화하였으며, 실험에 사용 하였다. 동물 연구는 제주 대학교의 동물 관리 및 사용위원회에 의해 승인되었다

실시예 8. 감마선 조사된 제브라피쉬 모델의 제조

⁶⁰Co 방사선 조사 장치 (Theratron-780 teletherapy unit, Applied Radiological Science Institute, Jeju National University)는 제브라피쉬를 조사하기 위해 사용되었다. 각 그룹은 1.5ml의 마이크로 시험관에 넣고, 150cm의 소스-표면 거리, 및 1.5 Gy/min의 투여율로 20Gy의 방사선의 세기로 전신 조사(WBI)에 노출시켰다.

실시예 9. 제브라피쉬의 기형 및 생존의 관찰

시료는 0.78, 1.56, 3.13 및 6.25μg/㎖의 농도로 1 dpf에서 제브라피쉬에 처리하였다. 2시간 후, 제브라피쉬는 Non IR를 제외하고 감마선 조사하였다. 생존율은 시료 처리 후 5 dpf 동안 매일 체크하였다. 난황낭 부종을 캡처하고 ISCapture V3.6(TUCSEN photonics co., Ltd)을 사용하여 2 dpf에서 크기를 측정하여 평가하였다. 꼬리의 굽음 비율은 굴곡 속도를 다음 4가지, (ⅰ) 0; 정상 단계, (ⅱ) 1; 초기 단계, (ⅲ) 2; 중간 단계, 및 (ⅳ) 3; 최종 단계로 나누어 3 dpf에서 평가하였으며, 해당 제브라피쉬 수를 카운트하였다.

실시예 10. 감마선 조사의 보호 효과에 대한 이미지 분석

감마선-조사에 대한 보호 효과는 ROS 및 NO 생산 및 세포 사멸을 측정함으로써 평가하였다. 시료는 0.78, 1.56, 3.13μg/㎖의 농도로 3dpf에서 제브라피쉬 처리하였다. 2시간 후, 제브라피쉬는 Non IR군을 제외하고, 감마선을 조사하였다. 상기 ROS 수준은 산화-민감성 형광 프로브 염료인 DCF-DA를 이용하여, 조사 후 1시간에 분석하였다. 감마선 조사된 제브라피쉬는 DCF-DA 용액 (20 μg/㎖)으로 처리하고, 28.5℃에서 어둠 속에서 1시간 동안 배양하였다. 배양 후, 제브라피쉬는 신선한 배지로 세정하고, 관찰 전에 0.001% MS 222(ethyl 3-aminobenzoate methanesulfonate)으로 마취시켰다. NO 수준은 형광 프로브 염료인 DAF-FM DA (10μM)을 사용하여 조사 후 12시간에 평가되었다. 세포 사멸 수준은 핵산 선택적 형광 양이온성 염료인 아크리딘 오렌지 (7μg/㎖)를 사용하여 조사 후 24 시간에 측정하였다. 이러한 염료는 배양 시간을 제외하고는 DCF-DA와 동일한 방법을 사용하여 처리하였다. 배양 시간은 다음과 같다; DAF-FM DA: 2시간, 아크리딘 오렌지 : 30분. 염색된 제브라피쉬의 이미지는 올림푸스 IX2-SLP (Olympus Japan)를 구비한 형광현미경을 이용하여 관찰하였다. 개별 제브라피쉬 형광 강도는 이미지 J를 사용하여 정량화하였다

실시예 11. 중성당 분석(Neutral sugar analysis)

중성당을 분석하기 위하여, 다당류는 100℃에서 4시간 동안 트리플루오로 아세트산 4M을 포함하는 밀봉된 유리 튜브에서 가수분해하였다. 단당류(monosaccharide)를 분석하기 위해, 샘플을 4시간 동안 6N의 HCl을 사용하여 분해하였다. 그 후, 샘플을 각각 CarboPac PA1 카트리지 (4.5mm×50mm) 컬럼에 적용한 후, 중성과 아미노 당을 각각 분석했다. 칼럼은 1.0mL/min의 유속으로 16mN NaOH를 사용하여 용출시켰다. 각 샘플의 당은 ED50 다이오넥스 전기화학 검출기를 사용하여 검출하고, 데이터는 Peack Net on-line software로 분석하였다.

실시예 12. 통계학적 분석

모든 데이터는 세 가지 결정의 평균 ± 표준 편차 (SD)로 표시하였다. 통계 비교는 Duncan’s multiple range test (DMRP) 다음 one-way ANOVA에 의해 수행 하였다. P 값은 0.001 (P<0.01) 및 0.05 (P<0.05) 미만은 유의한 것으로 간주하였다.

<실험 결과>

실험예 1. 발효된 패( I. okamurae )의 능력: 추출 수율 및 항산화 활성

발효된 I. okamurae은 조다당류를 얻기 위해 순차적으로 효소 추출 및 에탄올 침전에 적용하였다. 발효 공정의 효과는 I. okamurae와 발효된 I. okamurae의 효과를 비교하여 평가하였다. 먼저, 산업적 탄수화물 가수분해효소인 Celluclast로 I. okamurae와 발효된 I. okamurae를 추출하였다. 표 1에 나타낸 바와 같이, 발효된 I. okamurae(EFI)의 추출물은 68.6 %의 추출 수율을 보여, I. okamurae (EI) (40.1 %)의 추출물보다 1.7 배 높았다. 또한, EFI는 EI보다 거의 2배 높은 값의 건조 중량의 다당류 50.67 %를 함유했다. 다만, EFI와 EI는 폴리페놀 함량에 있어서는 큰 차이가 없었다.

표 1의 결과를 통해, L. plantarum으로 발효는 I. okamurae의 불만족스러운 물질을 소비할 수 있는 다당류로 전환할 수 있는 다당류의 추출 능력을 증가시킨다는 것을 알았다.

다음으로, 패의 효소 추출물(EI)와 발효된 패의 효소 추출물(EFI)를 에탄올을 사용하여 다당류 침전을 적용한 후, 각각의 추출물로부터 두 종류의 조다당류를 수득하였다. 이러한 조다당류의 산화 전위를 조사하기 위하여, DPPH 및 히드록실 라디칼 소거 활성은 시험관내에서 측정되었다. 도 1a에 도시된 바와 같이. I. okamurae의 조다당류(CPI)와 발효된 I. okamurae의 조 다당류(CPFI)는 0.25, 0.5, 1 및 2㎎/㎖의 농도에서 농도 의존적으로 DPPH 라디칼 소거 활성을 보였다. 두 다당류 중에서 CPFI는 IC₅₀ 값이 0.47 ± 0.01 ㎎/㎖로, CPI의 IC₅₀ 값 0.55 ± 0.02 ㎎/㎖보다 더 높은 라디칼 소거 활성을 보였다. 또한, CPFI는 0.0625-1 mg/ml의 농도 범위 내에서 농도 의존적으로 히드록실 라디칼 소거 활성을 나타내었으며(도 1b), CPFI는 IC₅₀값이 0.13 ± 0.01 mg/mL로, CPI(0.25 mg/mL ± 0.05 mg/mL)보다 약 두 배 높은 항산화 활성을 나타내었다. 이러한 결과는 발효 과정이 다당류 추출 효율뿐만 아니라, I. okamurae의 항산화 활성 역시 개선시키는 것을 의미한다. 따라서 발효된 I. okamurae의 조다당류(CPFI)는 항산화 다당류 정제를 위해 선택되었다.

실험예 2. CPFI로부터 항산화 활성이 있는 다당류의 정제

항산화 활성이 있는 다당류를 분리하기 위하여, CPFI는 염화나트륨 구배 (0 ~ 1 M)를 가진 DEAE-셀룰로오스 칼럼에 도입되었다. 여섯개의 분획물을 크로마토그램으로 분리하고, 각 분획물은 AP1-AP6로 표시하였다(도 2).

실험예 3. CPFI(발효된 패의 조다당류)로부터 분리 및 정제된 다당류의 황산 화 활성

AP의 항산화 활성은 시험관내에서 측정하였다. 도 3a에 도시된 바와 같이, AP2는 0.125-0.5 ㎎/㎖의 농도 범위에서 농도 의존적으로 높은 DPPH 라디칼 소거 활성을 나타냈으며, 그 절반의 최대 억제 농도(IC₅₀) 값은 0.25±0.01 mg/mL였다.

또한, 정제된 다당류 모두 7.94, 11.79, 15.63 μg/㎖의 농도에서 농도 의존적으로 히드록실 라디칼 소거 활성을 보였으며, 이러한 활성은 CPFI(0.13 ± 0.01㎎/㎖)보다 현저히 높았다(도 3b). 모든 AP는 약 10 μg/㎖의 IC₅₀값을 보여, 이들 값에는 큰 차이가 없었다. 따라서, AP2는 DPPH 및 하이드록실 라디칼 소거 활성을 가진 강력한 항산화 다당류로 선정되었다. 결과적으로, AP2는 CPI보다 2.2배 높은 DPPH 라디칼 소거 활성과 27.7배 높은 히드록실 라디칼 소거 활성을 나타냈다. 결론적으로 정제된 다당류가 조다당류에 비해 항산화 활성이 높았다. 즉, 항산화 활성이 높은 다당류는 패의 발효 및 정제 과정에 의해 얻어졌다(표 2).

실험예 4. 감마선 조사된 제브라피쉬 모델에서 AP2의 방사선 방호 효과

상기 실험예 3에서 조다당류에 비해 항산화 활성이 현저히 높았던, AP2의 방사선 방호 효과를 조사하기 위해, 감마선 조사된 제브라피쉬 모델을 적용하였다. 도 4는 AP2 처리 후에 감마선 조사된 제브라피쉬의 생존율을 나타낸다. Non IR에서 생존율은 실험 기간(5 dpf) 중 100 %로 측정되었다. 한편, IR의 생존율은 5 dpf에서 46.7 %로 감소하였다. AP2 처리 군의 경우 (0.78, 1.56 및 3.13 μg/㎖), 생존율은 Non IR과 동일하게 4dpf까지 유지되었다. 생존율은 5 dpf에서 Non IR에 비해 감소되었지만, 비율은 각각 56.7, 73.3, 83.3%로 AP2 처리에 의해 농도 의존적으로 회복되었다(도. 4).

또한, 감마선 조사에 의한 제브라피쉬의 기형은 난황낭 부종 크기와 꼬리굽음율로 평가 하였다. 난황낭 부종과 굽은 꼬리는 감마선 조사에 의해 유도 된 제브라피쉬의 전형적인 기형이었다. 도 5a에 도시 된 바와 같이, 감마선 조사 후, Non IR에 비해 120.3 %의 난황 부종을 유발하였다. 그러나, AP2 투여군에서 난황 부종의 크기는 1.56, 3.13, 6.25 μg/㎖의 농도에서 농도 의존적으로 감소하였다. 특히, 6.25 μg/㎖ AP2의 처리는 Non IR에 비해 112.0 %로 난황낭 부종 크기를 감소시켰다.

또한, 감마선 조사 후 초기, 중간, 최종 단계에서 꼬리의 굽음을 유도하였으며, 특히, 중간 단계의 제브라피쉬의 수는 62.1%로 나타났다. 반면, 정상 단계의 제브라피쉬의 수가 Non IR에 비해 13.8 % 감소하였다(도. 5b). AP2 투여군에서 중간 단계의 수는 농도 의존적으로 감소하는 반면, 정상 및 초기 단계의 제브라피쉬의 수가 증가하였다. 이러한 결과는 AP2가 감마선-조사에 대하여 제브라피쉬의 방호효과를 가지는 것을 의미한다.

또한, AP2의 방사선 방호 효과는 감마선 조사에 의한 ROS, NO, 및 제브라 피쉬의 세포 사멸 수준을 측정함으로써 평가하였다. 감마선 조사된 제브라피쉬의 ROS 수준은 산화-민감성 형광 프로브 염료인 DCF-DA를 이용하여 분석하였다. 도 6a에 도시된 바와 같이, Non IR과 비교하여, IR에서 ROS 수준은 1.4배 증가하였다. 그러나, AP2 처리 후에, ROS 수준은 1.56, 3.13, 6.25 μg/㎖의 농도에서 농도 의존적으로 감소하였다. 특히, AP2 6.25μg/㎖ 농도에서 Non IR과 비교하여 ROS 수준을 현저히 감소시켰다(*P<0.01). 또한, 감마선 조사된 제브라피쉬의 NO 수준은 형광 프로브 염료인 DCF-DA를 이용하여 평가하였으며, Non IR과 비교하여 IR에서 NO 수준은 1.55배 증가하였다. AP2는 농도 의존적으로 NO 수준을 감소시켰으며, 6.25μg/㎖에서 Non IR과 비교하여 NO 수준을 유의성 있게 감소시켰다(*P<0.05)(도 6b). 유사하게, AP2가 동일한 패턴으로 감마선 조사에 의해 유도된 세포 사멸을 감소시켰다(도 6c).

상기 결과에 따라, 상기 발효된 패의 조다당류 (CPFI)로부터 분리 및 정제된 다당류 AP가 항산화 활성과 함께 방사선 방호 효과가 있음을 알 수 있었다.

실험예 5. 다당류의 단당류 조성 분석

표 3에 나타낸 바와 같이, 패의 조다당류 (CPI)를 구성하는 주성분 단당류는 갈락토스 (20.84 %), 글루코스 (18.07 %), 만노오스 (14.76 %)이며, 이들 단당류 중 갈락토스와 글루코스는 발효 및 분리 정제 과정에 따라 그 함량이 크게 변화되었다. 그러나 만노오스의 함량은 분리에 의해 거의 변화되지 않았다. CPFI의 주성분 단당류는 푸코오스 (23.74 %), 갈락토스 (16.99 %), 글루코스 (16.7 %), 만노오스 (22.64 %)로 구성되어 있으며, CPFI로부터 분리정제된 AP2의 주성분 단당류는 푸코오스 (11.03 %), 글루코스 (44.3 %), 및 만노오스 (17.86 %)로 구성되어 있다. 위의 결과에 따라, 발효된 패의 조다당류 (CPFI)와 분리 및 정제된 다당류 AP2를 구성하는 단당류 중에서, 푸코오스와 글루코스가 중요한 역할을 단당류임을 확인하였다.

결론적으로, 본 발명에서, 발효에 의해 패에서 다당류의 함량이 증가하는 것을 확인하였으며, 발효된 패 추출물(EFI), 발효된 패에서 분리된 조다당류(CFPI)보다 발효된 패에서 분리 및 정제된 다당류(Aps)가 항산화 활성이 우수함과 동시에 방사선 방호 효과 역시 우수함을 확인하였다.

이상의 설명으로부터, 본 발명이 속하는 기술분야의 당업자는 본 발명이 그 기술적 사상이나 필수적 특징을 변경하지 않고서 다른 구체적인 형태로 실시될 수 있다는 것을 이해할 수 있을 것이다. 이와 관련하여, 이상에서 기술한 실시 예들은 모든 면에서 예시적인 것이며 한정적인 것이 아닌 것으로서 이해해야만 한다. 본 발명의 범위는 상기 상세한 설명보다는 후술하는 특허 청구범위의 의미 및 범위 그리고 그 등가 개념으로부터 도출되는 모든 변경 또는 변형된 형태가 본 발명의 범위에 포함되는 것으로 해석되어야 한다.

Claims

락토바실러스 플랜타럼(Lactobacillus plantarum)으로 발효된 패(Ishige okamurae)로부터 분리된 다당류를 유효성분으로 포함하는, 방사선 방호용 조성물.
제1항에 있어서, 상기 다당류는 패의 효소 추출물에서 분리된 것인, 방사선 방호용 조성물.
제1항에 있어서, 상기 다당류는 패의 효소 추출물과 C1 내지 C4의 저급 알코올과의 혼합물을 침전시켜 얻어진 침전물에서 분리된 것인, 방사선 방호용 조성물.
제1항에 있어서, 상기 다당류는 푸코오스, 글루코스, 만나오스, 갈락토스, 및 아라비노스로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 단당류를 포함하는 것인, 방사선 방호용 조성물.
제1항에 있어서, 상기 조성물은 추가로 항산화 활성을 가지는 것인, 방사선 방호용 조성물.
제1항에 있어서, 상기 방사선 방호는 NO 생성, ROS 생성, 또는 세포사멸 억제에 의한 것인, 조성물.
삭제
제1항에 있어서, 상기 방사선은 감마선인 것인, 방사선 방호용 조성물.
제1항 내지 제6항 및 제8항 중 어느 한 항의 조성물을 포함하는 방사선 방호용 약학적 조성물.
제1항 내지 제6항 및 제8항 중 어느 한 항의 조성물을 포함하는 방사선 방호용 식품 조성물.