KR101718193B1

KR101718193B1 - 초록갈파래 추출물을 포함하는 탈모 방지 또는 육모 촉진을 위한 조성물

Info

Publication number: KR101718193B1
Application number: KR1020140181331A
Authority: KR
Inventors: 강희경; 강정일; 현진원; 유은숙; 고영상; 이남호; 고미희; 이종철; 고창식
Original assignee: 제주대학교 산학협력단; 재단법인 제주테크노파크
Priority date: 2014-12-16
Filing date: 2014-12-16
Publication date: 2017-04-04
Also published as: KR20160073042A

Abstract

본 발명은 해조류의 추출물을 이용한 두피개선 및 탈모예방에 관한 것으로 더욱 상세하게는 초록갈파래(Ulva japonica)의 추출물을 유효 성분으로 함유하는 두피 개선 및 탈모 방지용 조성물에 관한 것이다. 본 발명에서는 상기 초록갈파래 추출물이 모유두세포를 증가 시키는 효과를 가지고 있어 탈모 예방 및 발모 촉진 효과가 있음을 규명함으로써, 초록갈파래(Ulva japonica)를 탈모 예방 및 발모 촉진제의 용도로 사용할 수 있음을 제공한다.

Description

초록갈파래 추출물을 포함하는 탈모 방지 또는 육모 촉진을 위한 조성물{Composition comprising the extract of Ulva japonica for prevention of hair loss or promoting hair growth}

본 발명은 초록갈파래 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 육모 촉진을 위한 조성물에 관한 것이다.

인체의 모발은 약 10만~15만 개 정도이며 "모낭"에서 형성된다. 모낭에는 유두가 있는데, 이 부위에는 작은 혈관이 분포되어 모발의 성장에 필요한 영양분을 공급하고 유두 위의 옆으로는 모발에 윤기를 주는 기름을 공급해주는 지루샘이 있다.

각각의 모발은 서로 다른 주기를 가지며 성장기(anagen), 퇴행기(catagen), 휴지기(telogen)를 거쳐서 성장하고 탈락한다. 이러한 주기는 3~6년에 걸쳐 반복되는데, 일일 평균 50~100개의 모발이 정상적으로 탈락하게 된다.

일반적으로 탈모증이라 함은 이러한 주기 중에서 성장기 모발의 비율이 짧아지고 퇴행기 또는 휴지기 모발이 많아져 탈락하는 모발의 숫자가 비정상적으로 많아지는 것을 일컫는다.

탈모의 원인으로는 남성호르몬 작용 과잉설, 피지분비 과잉설, 혈액순환 불량설, 과산화물, 세균 등에 의한 두피기능 저하설, 유전적 요인, 노화, 스트레스 등이 논의되고 있다.

지금까지 탈모를 방지하여 주고 발모촉진 및 모발에 생장에 효과를 가지고 있다고 알려져 있는 미녹시딜(minoxidil)이나 트리코사카라이드 (trichosaccharide) 등의 제제들의 경우, 뚜렷한 효능의 부재 및 인체 안정성, 피부자극 유발 등의 부작용 문제가 대두되고 있어 안전성 및 효능이 확보된 조성물 개발이 시급한 실정이다.

대한민국 등록특허 제1,229,762호

이에 본 발명자들은 초록갈파래 추출물이 피부에 안전하고 탈모를 방지하며 육모를 촉진하는 효과가 나타난다는 사실을 규명함으로써 본 발명을 완성하였다.

따라서 본 발명의 목적은 초록갈파래의 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 약학적 조성물을 제공함에 있다.

또한 본 발명의 다른 목적은 초록갈파래의 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 화장료 조성물을 제공함에 있다.

또한, 본 발명의 또다른 목적은 초록갈파래의 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 및 육모 촉진용 건강기능성 식품을 제공함에 있다.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 초록갈파래의 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 약학적 조성물을 제공한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 초록갈파래 추출물은 모유두세포 증식 증가 효과를 가질 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 초록갈파래 추출물은 조성물에 1~200 ug/mL의 농도로 함유되어 있는 것일 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 약학적 조성물은 피부외용제로서 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 및 카타플라스마제로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형일 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 초록갈파래의 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 화장료 조성물을 제공한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 초록갈파래 추출물의 조성물에 1~200 ug/mL의 농도로 함유되어 있는 것일 수 있다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 화장료 조성물은 헤어토닉, 헤어컨디셔너, 헤어에센스, 헤어로션, 헤어영양로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어트리트먼트, 헤어크림, 헤어영양크림, 헤어모이스처크림, 헤어맛사지크림, 헤어왁스, 헤어에어로졸, 헤어팩, 헤어영양팩, 헤어비누, 헤어클렌징폼, 머릿기름, 모발건조제, 모발보존처리제, 모발염색제, 모발용 웨이브제, 모발탈색제, 헤어겔, 헤어글레이즈, 헤어드레싱어, 헤어래커, 헤어모이스처라이저, 헤어무스 및 헤어스프레이로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형일 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 초록갈파래의 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 및 육모 촉진용 건강기능성 식품을 제공한다.

본 발명의 일실시예에 있어서, 상기 건강기능성 식품은 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 것일 수 있다.

본 발명에 따른 초록갈파래 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 탈모를 억제 및 예방하며 육모를 촉진하는 효과를 제공한다. 본 발명의 초록갈파래 추출물을 포함하는 조성물은 약학, 화장품, 식품 및 미용 등의 분야에서 다양하게 활용 가능하다.

도 1은 초록갈파래 추출물의 모발 성장 촉진 효과 결과이다.
도 2는 초록갈파래 추출물의 모유두세포 배양 결과이다.

이하, 본 발명을 상세히 설명한다.

본 발명에서 사용되는 모든 기술용어는 달리 정의되지 않는 이상, 본 발명의 관련 분야에서 통상의 당업자가 일반적으로 이해하는 바와 같은 의미로 사용된다. 또한 명세서에는 바람직한 방법이나 시료가 기재되나, 이와 유사하거나 동등한 것들도 본 발명의 범주에 포함된다. 본 명세서에 참고문헌으로 기재되는 모든 간행물들의 내용은 본 발명에 도입된다.

본 발명은 탈모 방지 및 발모 촉진을 위한 새로운 소재로서 초록갈파래(Ulva japonica) 추출물의 신규 용도를 제공함에 그 특징이 있다.

보다 구체적으로 본 발명은 초록갈파래(Ulva japonica)의 추출물을 유효성분으로 함유하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물을 제공한다.

본 발명에서 제공하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 조성물에 함유된 유효성분인 초록갈파래(Ulva japonica)는 한국 전연안에서 가장 흔하게 볼 수 있는 갈파래과에 속하며, 보통 식용하며 사료와 퇴비로도 쓰인다.

본 발명자들은 새로운 탈모 방지제로서 종래 합성 화합물이 아닌 천연 유래의 새로운 소재를 발굴하기 위해 연구하던 중, 초록갈파래(Ulva japonica)가 탈모 방지 및 발모 촉진 효능을 가지고 있음을 발견하였다.

즉, 본 발명의 일실시예에 의하면, 초록갈파래(Ulva japonica) 추출물에 대한 육모 효능 분석을 수행한 결과, 종래 탈모치료제로 사용되고 있는 미녹시딜(minoxidil)보다 우수한 효능을 가지고 있는 것으로 나타났고, 모유두세포 증식을 효과적으로 증가시켜 우수한 육모 효능을 갖는 것으로 나타났다.

한편, 탈모는 질병에 의한 탈모, 호르몬적 원인에 의한 탈모, 영양 불균형에 의한 탈모 또는 스트레스에 의한 탈모가 원인이 될 수 있는데, 상기 질병에 의한 탈모는 유전, 자가 면역질환, 화상, 화학요법, 건선, 진균 감염, 방사선 노출 또는 종양이 원인일 수 있고, 상기 호르몬적 원인에 의한 탈모는 약물, 임신 출산 전 후, 갱년기, 당뇨병, 뇌하수체 기능 이상, 부갑상선 또는 갑상선 기능 이상이 원인일 수 있다.

따라서 본 발명자들이 규명한 초록갈파래(Ulva japonica)는 다양한 원인에 의한 탈모 현상을 예방할 수 있고 나아가 발모 촉진 활성도 가지고 있음을 확인함으로써 초록갈파래를 탈모방지 및 발모 촉진을 위한 의약품, 기능성 건강식품 및 화장품의 소재로 활용할 수 있음을 알 수 있었다.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 유효성분이 초록갈파래(Ulva japonica) 추출물뿐만 아니라, 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함할 수 있으며, 예컨대 항산화제, 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 상술한 초록갈파래(Ulva japonica) 추출물 이외에, 발모(탈모)방지 및 모발 개선의 작용을 손상시키지 않는 한도에서 종래부터 사용되어오던 양모제 또는 육모제를 혼합하여 사용할 수 있다.

또한, 본 발명의 화장료 조성물은 당 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 헤어토닉, 헤어컨디셔너, 헤어에센스, 헤어로션, 헤어영양로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어트리트먼트, 헤어크림, 헤어영양크림, 헤어모이스처크림, 헤어맛사지크림, 헤어왁스, 헤어에어로졸, 헤어팩, 헤어영양팩, 헤어비누, 헤어클렌징폼, 머릿기름, 모발건조제, 모발보존처리제, 모발염색제, 모발용 웨이브제, 모발탈색제, 헤어겔, 헤어글레이즈, 헤어드레싱어, 헤어래커, 헤어모이스처라이저, 헤어무스 및 헤어스프레이 등 다양한 형태로 제조될 수 있으며 특히 헤어토닉, 모발 영양화장수, 스칼프트리트먼트, 헤어트리트먼트, 헤어린스, 헤어샴푸 및 헤어로션으로 이루어진 군으로부터 선택된 어느 하나의 제형으로 제조될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 본 발명의 초록갈파래(Ulva japonica) 추출물의 농도는 조성물에 0.0001~500 ug/mL의 농도이며, 바람직하게는 1~200 ug/mL의 농도로 함유되어 있는 것이다. 상기 추출물의 농도가 0.0001 ug/mL 미만이면, 상기 추출물에 의한 탈모방지 및 발모개선 효과가 크게 감소되고, 500 ug/mL를 초과하는 경우에는 오히려 피부 자극을 초래할 수 있고, 제형상의 문제점이 있다.

또한, 본 발명의 조성물은 초록갈파래(Ulva japonica) 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 치료 및 예방용 약학적 조성물일 수 있다.

본 발명의 약학적 조성물은 상기 유효성분 이외에 약제학적으로 적합하고 생리학적으로 허용되는 보조제를 사용하여 제조될 수 있으며, 상기 보조제로는 부형제, 붕해제, 감미제, 결합제, 피복제, 팽창제, 윤활제, 활택제 또는 향미제 등을 사용할 수 있다.

상기 약학적 조성물은 투여를 위해서 상기 기재한 유효성분 이외에 추가로 약제학적으로 허용 가능한 담체를 1종 이상 포함하여 약학적 조성물로 바람직하게 제제화할 수 있다.

상기 약학적 조성물의 제제 형태는 과립제, 산제, 정제, 피복정, 캡슐제, 좌제, 액제, 시럽, 즙, 현탁제, 유제, 점적제 또는 주사 가능한 액제 등이 될 수 있다. 예를 들어, 정제 또는 캡슐제 형태로의 제제화를 위해, 유효성분은 에탄올 글리세롤, 물 등과 같은 경구, 무독성의 약제학적으로 허용 가능한 불활성 담체와 결합될 수 있다. 또한 원하거나 필요한 경우, 적합한 결합제, 윤활제, 붕해제 및 발색제 또한 혼합물로 포함될 수 있다. 적합한 결합제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 젤라틴, 글루코스 또는 베타-락토오스와 같은 천연 당, 옥수수 감미제, 아카시아, 트래커캔스 또는 소듐올레이트와 같은 천연 및 합성 검, 소듐 클로라이드 등을 포함한다. 붕해제는 이에 제한되는 것은 아니나, 녹말, 메틸 셀룰로스, 아가, 벤토니트, 잔탄 검 등을 포함한다. 액상 용액으로 제제화되는 조성물에 있어서 허용 가능한 약제학적 담체로는, 멸균 및 생체에 적합한 것으로서, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사용액, 덱스트로즈 용액, 말토 덱스트린 용액, 글리세롤, 에탄올 및 이들 성분 중 1 성분 이상을 혼합하여 사용할 수 있으며, 필요에 따라 항산화제, 완충액, 정균제 등 다른 통상의 첨가제를 첨가할 수 있다. 또한 희석제, 분산제, 계면활성제, 결합제 및 윤활제를 부가적으로 첨가하여 수용액, 현탁액, 유탁액 등과 같은 주사용 제형, 환약, 캡슐, 과립 또는 정제로 제제화할 수 있다. 더 나아가 해당분야의 적절한 방법으로 Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA에 개시되어 있는 방법을 이용하여 각 질환에 따라 또는 성분에 따라 바람직하게 제제화 할 수 있다.

본 발명의 피부외용 약제학적 조성물은 탈모 방지, 발모 촉진 및 두피 개선 효과를 갖는 피부외용제로서 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 또는 카타플라스마제의 피부 외용제 형태의 약학조성물로 제조하여 사용할 수 있으나, 이에 한정하는 것은 아니다.

본 발명의 조성물은 또한 식품 조성물일 수 있는데, 이러한 식품 조성물은 유효성분인 초록갈파래(Ulva japonica) 추출물을 함유하는 것 외에 통상의 식품 조성물과 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다.

상술한 천연 탄수화물의 예는 모노사카라이드, 예를 들어, 포도당, 과당 등; 디사카라이드, 예를 들어 말토스, 슈크로스 등; 및 폴리사카라이드, 예를 들어 덱스트린, 시클로덱스트린 등과 같은 통상적인 당, 및 자일리톨, 소르비톨, 에리트리톨 등의 당알콜이다. 상술한 향미제는 천연 향미제 (타우마틴), 스테비아 추출물(예를 들어 레바우디오시드 A, 글리시르히진 등) 및 합성 향미제 (사카린, 아스파르탐 등)를 유리하게 사용할 수 있다.

본 발명의 식품 조성물은 상기 약제학적 조성물과 동일한 방식으로 제제화되어 기능성 식품으로 이용하거나, 각종 식품에 첨가할 수 있다. 본 발명의 조성물을 첨가할 수 있는 식품으로는 예를 들어, 음료류, 육류, 초코렛, 식품류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 사탕류, 아이스크림류, 알코올 음료류, 비타민 복합제 및 건강보조식품류 등이 있다.

또한 상기 식품 조성물은 유효성분인 초록갈파래(Ulva japonica) 추출물 외에 여러 가지 영양제, 비타민, 광물 (전해질), 합성 풍미제 및 천연 풍미제 등의 풍미제, 착색제 및 중진제 (치즈, 초콜릿 등), 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알콜, 탄산음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그밖에 본 발명의 식품 조성물은 천연 과일 쥬스 및 과일 쥬스 음료 및 야채 음료의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다.

본 발명의 유효성분인 초록갈파래(Ulva japonica) 추출물은 천연물질로서 독성 및 부작용은 거의 없으므로 탈모 방지, 발모 촉진 및 두피 개선을 목적으로 장기간 복용시에도 안심하고 사용할 수 있다.

본 발명은 또한 초록갈파래(Ulva japonica) 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지, 두피 개선 및 탈모 방지용 건강기능식품을 제공한다.

본 발명의 건강기능식품은 탈모 방지, 발모 촉진 및 두피 개선을 목적으로, 정제, 캅셀, 분말, 과립, 액상, 환 등의 형태로 제조 및 가공할 수 있다.

본 발명에서 건강기능식품이라 함은 건강기능식품에 관한 법률 제6727호에 따른 인체에 유용한 기능성을 가진 원료나 성분을 사용하여 제조 및 가공한 식품을 말하며, 인체의 구조 및 기능에 대하여 영양소를 조절하거나 생리학적 작용 등과 같은 보건 용도에 유용한 효과를 얻을 목적으로 섭취하는 것을 의미한다.

본 발명의 건강기능식품은 통상의 식품 첨가물을 포함할 수 있으며, 식품 첨가물로서의 적합 여부는 다른 규정이 없는 한, 식품의약품안전청에 승인된 식품 첨가물 공전의 총칙 및 일반시험법 등에 따라 해당 품목에 관한 규격 및 기준에 의하여 판정한다.

상기 식품 첨가물 공전에 수재된 품목으로는 예를 들어, 케톤류, 글리신, 구연산칼슘, 니코틴산, 계피산 등의 화학적 합성물; 감색소, 감초추출물, 결정셀룰로오스, 고량색소, 구아검 등의 천연첨가물; L-글루타민산나트륨제제, 면류첨가알칼리제, 보존료제제, 타르색소제제 등의 혼합제제류 등을 들 수 있다.

예를 들어, 정제 형태의 건강기능식품은 본 발명의 유효성분인 상기 추출물을 부형제, 결합제, 붕해제 및 다른 첨가제와 혼합한 혼합물을 통상의 방법으로 과립화한 다음, 활택제 등을 넣어 압축성형하거나, 상기 혼합물을 직접 압축 성형할 수 있다. 또한 상기 정제 형태의 건강기능식품은 필요에 따라 교미제 등을 함유할 수도 있다.

캅셀 형태의 건강기능식품 중 경질 캅셀제는 통상의 경질 캅셀에 본 발명의 유효성분인 상기 추출물을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 충진하여 제조할 수 있으며, 연질 캅셀제는 초록갈파래(Ulva japonica) 추출물 추출물을 부형제 등의 첨가제와 혼합한 혼합물을 젤라틴과 같은 캅셀기제에 충진하여 제조할 수 있다. 상기 연질 캅셀제는 필요에 따라 글리세린 또는 소르비톨 등의 가소제, 착색제, 보존제 등을 함유할 수 있다.

환 형태의 건강기능식품은 본 발명의 유효성분인 상기 추출물과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 성형하여 조제할 수 있으며, 필요에 따라 백당이나 다른 제피제로 제피할 수 있으며, 또는 전분, 탈크와 같은 물질로 표면을 코팅할 수도 있다.

과립 형태의 건강기능식품은 본 발명의 유효성분인 상기 추출물과 부형제, 결합제, 붕해제 등을 혼합한 혼합물을 기존에 공지된 방법으로 입상으로 제조할 수 있으며, 필요에 따라 착향제, 교미제 등을 함유할 수 있다.

상기 건강기능식품은 음료류, 육류, 초코렛, 식품류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 사탕류, 아이스크림류, 알코올 음료류, 비타민 복합제 및 건강보조식품류 등일 수 있다.

또한 본 발명은 포유동물에게 초록갈파래(Ulva japonica) 추출물을 투여하는 것을 포함하는 탈모 예방 또는 치료방법을 제공한다.

여기에서 사용된 용어 "포유동물"은 치료, 관찰 또는 실험의 대상인 포유동물을 말하며, 바람직하게는 인간을 말한다.

여기에서 사용된 용어 "치료상 유효량"은 연구자, 수의사, 의사 또는 기타 임상에 의해 생각되는 조직계, 동물 또는 인간에서 생물학적 또는 의학적 반응을 유도하는 유효 성분 또는 약학적 조성물의 양을 의미하는 것으로, 이는 치료되는 질환 또는 장애의 증상의 완화를 유도하는 양을 포함한다. 본 발명의 유효 성분에 대한 치료상 유효 투여량 및 투여횟수는 원하는 효과에 따라 변화될 것임은 당업자에게 자명하다. 그러므로 투여될 최적의 투여량은 당업자에 의해 쉽게 결정될 수 있으며, 질환의 종류, 질환의 중증도, 조성물에 함유된 유효성분 및 다른 성분의 함량, 제형의 종류, 및 환자의 연령, 체중, 일반 건강 상태, 성별 및 식이, 투여 시간, 투여 경로 및 조성물의 분비율, 치료기간, 동시 사용되는 약물을 비롯한 다양한 인자에 따라 조절될 수 있다. 본 발명의 치료방법에 있어서, 성인의 경우, 본 발명의 초록갈파래(Ulva japonica) 추출물을 1일 1회 내지 수회 투여시, 1mg/kg~250mg/kg의 용량으로 투여하는 것이 바람직하다.

본 발명의 치료방법에서 본 발명의 초록갈파래(Ulva japonica) 추출물을 유효성분으로 포함하는 조성물은 경구, 직장, 정맥내, 동맥내, 복강내, 근육내, 흉골내, 경피, 국소, 안구내 또는 피내 경로를 통해 통상적인 방식으로 투여할 수 있다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.

<실시예 1>

초록갈파래 추출물의 제조

본 실험재료인 초록갈파래(Ulva japonica)는 제주생물종다양성연구소에서 추출물 형태로 제조하였다. 초록갈파래 건조분말 100g에 80% 에탄올 2 L를 첨가하고, 24시간 동안 상온에서 침지시켜 3회 반복 추출한 후 여과하였으며, 그 여액을 감압농축기를 사용하여 분말상의 추출물을 얻었다. 추출물은 DMSO에 녹인 후 4℃에 보관하면서 육모 관련 활성을 실험 예의 시료로 사용하면서 평가하였다.

<실시예 2>

2-1. 초록갈파래 추출물의 모발(hair-fiber) 길이 성장 효과 측정을 위한 쥐 비모 모낭(vibrissa follicles)의 분리 및 배양

생후 3주령인 Wistar rat 수컷을 (Japan SLC, Hamamatsu, Janpan) (주)중앙실험동물로부터 구입하여 ethyl ether로 마취 후 경추도살 하였다. Rat 왼쪽과 오른쪽 mystacial pads를 분리하여 100 units/ml penicillin-100 μg/ml streptomycin (Gibco Inc, NY, USA)이 함유된 E/P buffer [Earle's balanced salts solution (EBSS, Sigma MO, USA) + phosphate-buffered saline (PBS, Sigma MO, USA)]에 넣었다. 해부 현미경으로 관찰하며 vibrissa follicles을 조심스럽게 분리하였다. 모낭이 모두 분리될 때까지 E/P buffer를 넣은 Petri dish에 분리된 모낭을 넣고 37℃, 5% CO2 항온기에서 1시간 정도 배양하였다. 24 well plate의 각 well에 2 mM L-glutamine (Gibco Inc, NY, USA), 10 μg/ml insulin (Sigma MO, USA), 50 nM hydrocortisone (Sigma MO, USA)과 100 units/ml penicillin-100 μg/ml streptomycin을 포함하는 500 μl의 William E medium (Gibco Inc, NY, USA)을 넣고, 하나의 well에 하나씩의 모낭을 넣어서 37℃, 5% CO2 항온기에서 배양하였다. 배양 중에 배지는 3 일마다 교환하였고 초록갈파래는 0.1, 1 및 10 μg/ml의 농도로 처리하였다. 양성 대조물질인 minoxidil을 10 μM의 농도로 처리하였다 (Matsuda H, et al., 2003).

2-2. 쥐 비모 모낭(vibrissa follicles)의 성장 측정을 통한 초록갈파래의 육모 효능

생후 3 주령 rat의 성장기 vibrissa follicles을 분리하여 3주간 배양하면서 모낭 길이를 측정하여 초록갈파래이 육모 효능 있는지 조사하기 위해, 상기 <실시예 2-1> 에서 제조한 배양중인 vibrissa follicle 형태는 현미경 (Olympus, Japan)을 사용하여 촬영하였다. 모낭 길이는 image analyzer (eXcope; DIXI Optics, Korea)를 사용하여 측정하였다. 모낭 길이 변화의 평균값을 구하고 대조군의 평균길이와 비교하여 성장 정도를 측정하였다.

21일째 초록갈파래 처리군과 대조군과의 모낭의 길이 차이 (%)를 비교한 결과, 0.1, 1 및 10 μg/ml을 각각 처리하였을 때 대조군보다 hair fiber의 성장이 108.5±16.9%, 131.8±25.3% 및 153.2±22.0% (P<0.05)로 증가하였다 (도 1 참조). 이는 양성대조 물질로 사용한 10 μM 미녹시딜의 hair fiber 성장 증가 효과 140.6±29.9% 보다 높은 것으로 확인되었다. 따라서, 초록갈파래가 미녹시딜보다 우수한 육모효능을 나타낼 수 있음을 확인하였다(표 1 참조).

<표 1>

<실시예 3>

3-1. 초록갈파래 추출물의 모유두세포(dermal papilla cell) 증식 효능 측정을 위한 모유두세포 배양

모유두세포(dermal papilla cell)는 모낭의 기저에 위치한 중배엽 유래의 섬유아세포로서, 모낭의 모기질 세포와 상호작용을 통해 모발의 성장에서 중요한 역할을 하는 것으로 생각되고 있으며(Jahoda CA, et al., 1984; Horne K et al., 1986), 모유두 세포(dermal papilla cell)를 사용하여 초록갈파래 추출물의 육모효능을 조사하였다.

초록갈파래 추출물의 모유두세포 증식 효능을 측정하기 위해 흰쥐 수염에서 분리된 불멸화된 모유두세포(Rat vibrissa immortalized dermal papilla cell: Filsell W, et al., 1994)를 100 units/ml penicillin-100 μg/ml streptomycin (Gibco Inc, NY, USA)과 10% heat-inactivated fetal bovine serum (FBS; Gibco Inc, NY, USA)이 함유된 DMEM (Hyclone Inc, USA) 배지를 사용하여 37℃, 5% CO2 항온기에서 배양하였으며, 3 일에 한 번씩 계대배양 하였다. 모유두세포 (dermal papilla cell)의 증식은 MTT assay를 이용하여 측정하였다. 모유두세포 (dermal papilla cell) 1.0×10⁴ cells/ml를 1% FBS를 포함한 DMEM 배지에 혼탁하여 96 well plate에 넣고 24시간 배양 후 초록갈파래를 1, 10 및 40 μg/ml의 농도로 처리하였다. 양성 대조군인 minoxidil (Sigma, MO, USA)는 10 μM의 농도로 처리하였다. 4 일 동안 배양한 후 50 μl의 MTT (Sigma, MO, USA)을 첨가하고 4 시간 동안 반응시켰다. 상층액은 제거하고 DMSO 200 μl을 가하여 침전물을 용해시킨 후 VERSAmax microplate reader (Molecular Devices, CA, USA)를 사용하여 540 nm에서 흡광도를 측정하였다. 각 시료군에 대한 평균 흡광도 값을 구하였으며, 대조군의 흡광도 값과 비교하여 증식정도를 조사하였다.

3-2. 모유두세포(dermal papilla cell) 증식 효능 측정을 통한 초록갈파래의 육모 효능

초록갈파래를 0.1, 1 및 10 μg/ml의 농도로 처리하였을 때, 대조군에 비하여 각각 101.7±5.9%, 108.2±10.0% 및 141.0±7.8% (P<0.001) 정도 모유두세포(dermal papilla cell)의 증식이 증가하였다(도 2 참조). 특히, 10 μg/ml의 농도에서 초록갈파래는 양성대조 물질로 사용한 10 μM 미녹시딜의 증식효과인 120.7±9.6% (P<0.001)보다 높은 모유두세포 증식 증가 효능을 나타내었고, 초록갈파래가 미녹시딜보다 우수한 육모효능을 나타낼 수 있음을 확인하였다(표 2 참조).

<표 2>

이상과 같은 결과를 통해 본 발명자들은 본 발명의 초록갈파래 추출물이 모유두세포를 효과적으로 증가시킬 수 있고, 모발의 길이 성장을 증진시킬 수 있는 효과가 있음을 확인함으로써 초록갈파래 추출물을 탈모예방 및 발모촉진을 위한 새로운 소재로 활용할 수 있음을 알 수 있었다.

이제까지 본 발명에 대하여 그 바람직한 실시예들을 중심으로 살펴보았다. 본 발명이 속하는 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 본 발명이 본 발명의 본질적인 특성에서 벗어나지 않는 범위에서 변형된 형태로 구현될 수 있음을 이해할 수 있을 것이다. 그러므로 개시된 실시예들은 한정적인 관점이 아니라 설명적인 관점에서 고려되어야 한다. 본 발명의 범위는 전술한 설명이 아니라 특허청구범위에 나타나 있으며, 그와 동등한 범위 내에 있는 모든 차이점은 본 발명에 포함된 것으로 해석되어야 할 것이다.

Claims

초록갈파래의 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 약학적 조성물.
제1항에 있어서,
상기 초록갈파래 추출물은 모유두세포 증식 증가 효과를 갖는 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 약학적 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 초록갈파래 추출물은 조성물에 1~200 ug/mL의 농도로 함유되어 있는 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 약학적 조성물.
제 1항에 있어서,
상기 약학적 조성물은 피부외용제로서 크림, 젤, 패취, 분무제, 연고제, 경고제, 로션제, 리니멘트제, 파스타제 및 카타플라스마제로 이루어진 군에서 선택된 제형인 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 약학적 조성물.
초록갈파래의 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 화장료 조성물.
제 5항에 있어서,
상기 초록갈파래 추출물은 조성물에 1~200 ug/mL의 농도로 함유되어 있는 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 화장료 조성물.
제 5항에 있어서,
상기 화장료 조성물은 헤어토닉, 헤어컨디셔너, 헤어에센스, 헤어로션, 헤어영양로션, 헤어샴푸, 헤어린스, 헤어트리트먼트, 헤어크림, 헤어영양크림, 헤어모이스처크림, 헤어맛사지크림, 헤어왁스, 헤어에어로졸, 헤어팩, 헤어영양팩, 헤어비누, 헤어클렌징폼, 머릿기름, 모발건조제, 모발보존처리제, 모발염색제, 모발용 웨이브제, 모발탈색제, 헤어겔, 헤어글레이즈, 헤어드레싱어, 헤어래커, 헤어모이스처라이저, 헤어무스 및 헤어스프레이로 이루어진 군에서 선택된 제형인 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 화장료 조성물.
초록갈파래의 추출물을 유효성분으로 포함하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 건강기능성 식품.
제 8항에 있어서,
상기 초록갈파래 추출물은 조성물에 1~200 ug/mL의 농도로 함유되어 있는 것을 특징으로 하는 탈모 방지 또는 육모 촉진용 건강기능성 식품.
제 8항에 있어서,
상기 건강기능성 식품은 분말, 과립, 정제, 캡슐 또는 음료인 탈모 방지 또는 육모 촉진용 건강기능성 식품.