KR101640906B1 - Control composition of plant disease and noxious insects using microorganism and natural materials and producing method thereof - Google Patents

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Abstract

천연물과 미생물을 이용한 시설원예 병해충 복합 방제제 조성물 및 그 제조방법에 관한 것으로, 시설원예의 병해충을 방제하는 조성물로서, 고삼(Sophora flavescens) 식물의 추출물과 항균활성을 나타낸 균주를 함유하는 구성을 마련하여, 병해충을 방제할 수 있다.The present invention relates to a composition for controlling harmful pests of plant horticulture using natural products and microorganisms and a method for preparing the same, and is a composition for controlling harmful insects of plant horticulture, which comprises an extract of a plant of Sophora flavescens and a strain containing antimicrobial activity , So that the pests can be controlled.

Description

천연물과 미생물을 이용한 시설원예 병해충 복합 방제제 조성물 및 그 제조방법{Control composition of plant disease and noxious insects using microorganism and natural materials and producing method thereof} TECHNICAL FIELD The present invention relates to a composition for controlling harmful plants and plants using natural products and microorganisms and a method for producing the same,

본 발명은 병해충 복합 방제제 조성물 및 그 제조방법에 관한 것으로, 특히 천연물과 미생물을 이용한 시설원예 병해충 복합 방제제 조성물 및 그 제조방법에 관한 것이다.The present invention relates to a composition for controlling harmful insect pests and a method for preparing the same, and more particularly, to a composition for controlling harmful plants and plants of horticulture using natural materials and microorganisms and a method for producing the same.

또한, 본 발명은 시설원예의 병해충을 방제하는 방법에 관한 것이다.
The present invention also relates to a method for controlling pests of institutionalized horticulture.

일반적으로 나방의 방제를 위해 주로 화학 살충제를 사용하여 왔으나, 화학살충제는 토양의 산성화 및 오염 문제, 인축에의 독성문제, 농약성분의 잔류로 인한 환경문제 등을 유발한다. 최근 환경문제에 대한 인식 제고와 소비자들의 친환경식품 선호현상으로 인해 화학농약을 대체할 수 있는 친환경농자재에 대한 관심이 커지고 있으며 그 사용도 점차 확대되고 있다. In general, chemical insecticides have been used mainly for the control of moths, but chemical insecticides cause acidification and pollution problems of the soil, toxicity to the drawing, and environmental problems due to residual pesticide components. Due to recent environmental awareness and consumers' preference for eco-friendly foods, interest in eco-friendly farm products that can replace chemical pesticides has been growing, and its use is increasing.

화학살충제를 대체할 수 있는 친환경농자재로는, 식물에서 추출한 천연물 살충제의 사용 및 천적을 활용한 생물적 방제 인자의 사용이 있다. 이중 천연추출물을 이용한 나방 방제의 경우 대부분 효과가 객관적으로 검증되지 않은, 농민 개개인의 민간요법 차원인 경우가 많다. 또, 몇몇 제조사에 의해 상용화가 시도된 제품들도 있으나 방제효과의 한계, 제조방법의 까다로움, 제한된 유통기간 등의 문제로 화학 살충제를 대체하여 상용화되기에는 아직까지 해결해야 할 문제를 많이 갖고 있다. Examples of eco-friendly farm products that can replace chemical insecticides include the use of plant-derived natural insecticides and the use of biological control agents utilizing natural enemies. In the case of moth control with natural extracts, it is often the case for individual farmers who have not been tested objectively. In addition, some products have been commercialized by some manufacturers, but they still have a lot of problems to be solved in order to replace chemical insecticides due to limitations of the effect of control, difficulty of manufacturing method, limited circulation period, etc. .

이러한 친환경농자재로서, 살충효과가 있는 천연 식물성분인 고삼 뿌리 추출물을 이용하는 시도는 종래에도 있었으나, 대부분 과거부터 살충효과가 있다고 알려져 있는 다른 식물과 혼합하여 사용하는 형태로서, 그 효과가 불분명하여 실질적으로 화학 살충제를 대체하여 사용하거나 나방을 방제하기 위한 나방 방제제로 사용할 수 없는 실정이었다.As an eco-friendly farming material, it has been attempted to use a ginseng root extract which is a natural plant ingredient having an insecticidal effect. However, most of them have been used in combination with other plants known to have an insecticidal effect from the past, It was not possible to use it as a substitute for chemical insecticide or as a moth control agent for controlling moths.

고삼(Sophora flavescens: 도둑놈의 지팡이)은 콩과의 다년생 초본으로서 한국과 일본, 중국, 시베리아 등지에 주로 분포하는 식물이다. 한방에서는 뿌리를 말린 것을 고삼(苦蔘)이라 하여 맛이 쓰고 소화불량, 신경통, 간염, 황달, 치질 등에 처방하며, 민간에서는 줄기나 잎을 달여서 해열과 진통제로 쓰기도 하였다. Gosam (Sophora flavescens) is a perennial herb of soybean and is a plant mainly distributed in Korea, Japan, China, and Siberia. In one room, dried root is called gamseng, and it is tasted, and it is prescribed to indigestion, neuralgia, hepatitis, jaundice, hemorrhoids, etc. In private, it is used as fever and pain medicine by dulling stem or leaf.

이와 같은 고삼은 80~100cm로 녹색이지만 어릴 때는 검은빛을 띠며, 줄기는 곧고 작은 잎은 15~40개이고 긴 타원형 또는 긴 달걀 모양이며 길이 2~4cm, 나비 7~15mm이고, 잎자루가 길며 가장자리는 밋밋하다. It is green with 80 ~ 100cm but it is black when it is young. Its stem is straight and has 15 ~ 40 small leaves, long oval or long ovate, 2 ~ 4cm long, 7 ~ 15mm wide, with long petiole, Do.

즉, 한방에서는 뿌리를 말린 것을 고삼이라 하며, 맛이 쓰고 인삼의 효능이 있어 소화불량·신경통·간염·황달·치질 등에 처방하고, 민간에서는 줄기나 잎을 달여서 살충제로 쓰기도 한다.
In other words, dried roots in one room called gosam, taste and ginseng has the efficacy of indigestion, neuralgia, hepatitis, jaundice, hemorrhoids and prescribes, in private, stem or leaf is also used as an insecticide.

이러한 기술의 일 예가 하기 문헌 1 및 2 등에 개시되어 있다.Examples of such techniques are described in documents 1 and 2 below.

예를 들어, 하기 특허문헌 1에는 고삼 뿌리를 5 내지 15 부피배의 90%~99% 에탄올에 넣고 상온에서 암상태로 40~60 시간 추출한 후 여과지로 여과하여 추출물을 얻는 단계, 상기에서 얻어진 추출물을 감압 농축기로 30~43℃에서 농축시키는 단계, 상기 농축시킨 추출물을 동결건조시키는 단계를 포함하는 나방방제를 위한 고삼뿌리 추출물의 제조방법에 대해 개시되어 있다.For example, Patent Literature 1 discloses a method in which the roots of ginseng are placed in 90 to 99% ethanol in an amount of 5 to 15 times the volume, extracted at 40 to 60 hours in a dark state at room temperature, filtered through a filter paper to obtain an extract, Concentrating the extract at 30 to 43 째 C with a vacuum concentrator, and lyophilizing the concentrated extract to produce a ginseng root extract for moth control.

또 하기 특허문헌 2에는 고삼 뿌리를 채집하여 음건한 다음 마쇄기로 갈아 미세분말화한 후, 고삼 뿌리 시료 중량의 20 배에 달하는 부피의 물, 헥산 및 메탄올, 에탄올, 부탄올 등과 같은 C1 내지 C4의 저급알콜 또는 이들의 약 1:0.1 내지 1:10의 혼합비를 갖는 혼합용매로, 바람직하게는 에탄올로 약 5 내지 80 ℃, 바람직하게는 약 24 ℃에서 약 8일 동안 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 추출방법을 사용하여, 진공 여과에 의해 상층액을 회수한 다음, 상기의 과정을 2 내지 5회, 바람직하게는 2회 반복 수행하여 상층액을 모으고 감압농축하여 고삼 추출물을 수득하는 방제용 조성물에 대해 개시되어 있다.
In Patent Document 2, the roots of the roots are collected, shredded and finely pulverized to finely pulverize the roots. Then, the roots are washed with water having a volume of 20 times the weight of the roots of the roots of the roots, hexane, Alcohol, or a mixed solvent thereof having a mixing ratio of about 1: 0.1 to 1:10, preferably ethanol for about 8 days at about 5 to 80 占 폚, preferably about 24 占 폚, The supernatant was recovered by vacuum filtration using an extraction method such as extraction or ultrasonic extraction, and then the above procedure was repeated 2 to 5 times, preferably twice. The supernatant was collected and concentrated under reduced pressure to obtain a crude extract Based on the total weight of the composition.

대한민국 등록특허공보 제10-1153181호(2012.05.30 등록)Korean Registered Patent No. 10-1153181 (registered on May 30, 2012) 대한민국 등록특허공보 제10-1077178호(2011.10.20 등록)Korean Registered Patent No. 10-1077178 (registered on October 20, 2011)

그러나, 상술한 바와 같은 종래의 기술에서는 대량 생산이 곤란하고, 살충력이 충분하지 못해 실제로 사용되지 못하고, 실험실에서만 적용되고 있다는 문제가 있었다.
However, in the conventional techniques as described above, there is a problem that mass production is difficult, insecticidal power is insufficient, and therefore, it is not actually used and applied only in a laboratory.

본 발명의 목적은 상술한 바와 같은 문제점을 해결하기 위해 이루어진 것으로서, 환경에 대한 피해가 적고 인체에 해가 없는 고삼 식물의 추출물과 항균활성을 나타낸 균주를 이용한 병해충 복합 방제제 조성물 및 그 제조방법을 제공하는 것이다.Disclosure of the Invention The object of the present invention is to solve the above-mentioned problems, and an object of the present invention is to provide a pesticide complex controlling composition using an extract of a ginseng plant and a strain showing antibacterial activity, .

본 발명의 다른 목적은 병해충 복합 방제제를 대량으로 생산할 수 있는 병해충 복합 방제제 조성물 및 그 제조방법을 제공하는 것이다.Another object of the present invention is to provide a composition for controlling harmful insect pests and a method for producing the same, which can produce a large amount of a combined insect pest controlling agent.

본 발명의 또 다른 목적은 시설원예의 병해충을 분무 처리하여 방제하는 방제 방법을 제공하는 것이다.
It is another object of the present invention to provide a control method for spraying and controlling pests of the horticulture.

상기 목적을 달성하기 위해 본 발명에 따른 병해충 복합 방제제 조성물은 시설원예의 병해충을 방제하는 조성물로서, 고삼(Sophora flavescens) 식물의 추출물과 항균활성을 나타낸 균주를 함유하는 것을 특징으로 한다.To achieve the above object, the present invention provides a composition for controlling harmful insects of horticultural crops, which comprises an extract of a plant of Sophora flavescens and a strain showing antimicrobial activity.

또 본 발명에 따른 병해충 복합 방제제 조성물에 있어서, 상기 균주는 Streptomyces spp.인 것을 특징으로 한다.In the composition of the present invention, the strain is Streptomyces spp.

또 본 발명에 따른 병해충 복합 방제제 조성물에 있어서, 상기 추출물과 균주의 조성비는 부피%로 30~70: 70~30인 것을 특징으로 한다.The composition of the present invention is characterized in that the composition ratio of the extract to the strain is 30 to 70:70 to 30% by volume.

또 본 발명에 따른 병해충 복합 방제제 조성물에 있어서, 상기 추출물과 균주의 조성비는 부피%로 40: 60인 것을 특징으로 한다.In addition, the composition of the present invention is characterized in that the composition ratio of the extract and the strain is 40: 60 by volume.

또 본 발명에 따른 병해충 복합 방제제 조성물에 있어서, 보조제를 더 포함하고, 상기 보조제는 상기 추출물과 균주의 복합제제 100%에 대하여 1~10% 부피비로 첨가되는 것을 특징으로 한다.In addition, the composition according to the present invention may further comprise an adjuvant, wherein the adjuvant is added in a volume ratio of 1 to 10% based on 100% of the combined preparation of the extract and the strain.

또 본 발명에 따른 병해충 복합 방제제 조성물에 있어서, 상기 보조제는 폴리옥시에틸렌 도데실 모노 에테르(Polyoxyethylene dodecyl mono ether)인 것을 특징으로 한다.In the composition according to the present invention, the adjuvant is polyoxyethylene dodecyl monoether.

또한 상기 목적을 달성하기 위해 본 발명에 따른 병해충 복합 방제제 조성물의 제조방법은 시설원예의 병해충을 방제하는 조성물의 제조 방법으로서, (a) 항균활성을 나타낸 균주를 배양하는 단계, (b) 고삼(Sophora flavescens) 식물 추출물을 마련하는 단계, (c) 상기 단계 (a)에서 배양된 균주와 상기 단계 (b)에서 마련된 고삼 식물의 추출물을 혼합하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 한다.(A) culturing a strain exhibiting an antimicrobial activity, (b) cultivating a strain exhibiting antimicrobial activity, and (b) Preparing a plant extract of Sophora flavescens; (c) mixing the strain cultivated in step (a) with the extract of the ginseng plant prepared in step (b).

또 본 발명에 따른 병해충 복합 방제제 조성물의 제조방법에 있어서, (d) 상기 단계 (c)에 보조제를 혼합하는 단계를 더 포함하고, 상기 보조제는 폴리옥시에틸렌 도데실 모노 에테르(Polyoxyethylene dodecyl mono ether)인 것을 특징으로 한다.(D) mixing the adjuvant in the step (c), wherein the adjuvant is selected from the group consisting of polyoxyethylene dodecyl mono ether ).

또 본 발명에 따른 병해충 복합 방제제 조성물의 제조방법에 있어서, 상기 추출물과 균주의 혼합비는 부피%로 40: 60이고, 상기 보조제는 상기 추출물과 균주의 복합제제 100%에 대하여 1~10% 부피비로 첨가되는 것을 특징으로 한다.In the method of the present invention, the mixing ratio of the extract to the strain is 40: 60 by volume, and the adjuvant is 1 to 10% by volume relative to 100% of the combined extract of the extract and the strain Is added.

또 본 발명에 따른 병해충 복합 방제제 조성물의 제조방법에 있어서, 상기 단계 (a)에 의한 균주의 단독 배양 후, 상기 단계 (b)의 추출물이 혼합되는 것을 특징으로 한다.In addition, in the method for producing a composition for controlling harmful insect pests according to the present invention, the extract of step (b) is mixed after the culture of the strain according to the step (a).

또한 상기 목적을 달성하기 위해 본 발명에 따른 병해충 복합 방제 방법은 시설원예의 병해충을 방제하는 방법으로서, 상술한 병해충 복합 방제제 조성물이 해충인 나방류, 진딧물류, 응애류, 가루이류 중의 어느 하나를 방제 처리하는 것을 특징으로 한다.In order to accomplish the above object, the present invention also provides a method for controlling harmful insects in a horticultural field, wherein the composition for controlling harmful insect pests includes any one of moths, moths, aphids, .

또한 상기 목적을 달성하기 위해 본 발명에 따른 병해충 복합 방제 방법은 시설원예의 병해충을 방제하는 방법으로서, 상술한 병해충 복합 방제제 조성물이 식물 병원균인 역병류를 방제 처리하는 것을 특징으로 한다.In order to achieve the above-mentioned object, the present invention also provides a method for controlling harmful insects in horticulture, which is characterized in that the above-described composition for controlling harmful insect pests is a plant pathogenic insecticide.

또 본 발명에 따른 방제 방법에 있어서, 상기 방제 처리는 분무 처리인 것을 특징으로 한다.
In the controlling method according to the present invention, the controlling treatment is a spraying treatment.

상술한 바와 같이, 본 발명에 따른 병해충 복합 방제제 조성물 및 그 제조방법에 의하면, 고삼 식물의 추출물과 항균활성을 나타낸 균주를 함유한 해충인 병해충 복합 방제제를 마련하는 것에 의해 해충인 담배거세미나방(Spodoptera litura), 담배가루이(Bemisia tabaci) 성충, 화랑곡나방(Plodia interpunctella) 성충, 벚나무응애(Amphitetranychus viennensis) 중의 어느 하나를 효과적으로 방제할 수 있다는 효과가 얻어진다.As described above, according to the composition of the present invention, it is possible to provide a complex control agent for pest insecticides, which is a pest insecticide containing extracts of the insect plants and a strain exhibiting antimicrobial activity, Room ( Spodoptera litura ), cigarette smoking in Louis ( Bemisia tabaci ) Adults, Plodia interpunctella ) Adult, cherry tree ( Amphitetranychus viennensis ) can be effectively controlled.

또, 본 발명에 따른 병해충 복합 방제제 조성물 및 그 제조방법에 의하면, 식물 병원균인 Phytophthora capsici Leonian KACC 40180(역병)을 방제할 수 있다는 효과도 얻어진다.Further, according to the composition of the present invention and the method for producing the same, phytophthora capsici Leonian KACC is also obtained an effect that can control the 40 180 (plague).

또, 본 발명에 따른 병해충 복합 방제제 조성물 및 그 제조방법에 의하면, 병해충 복합 방제제를 대량으로 생산할 수 있다는 효과도 얻어진다.
In addition, according to the pesticide composite control agent composition and the production method thereof according to the present invention, it is also possible to obtain an effect of mass production of a pest-controlling compound controlling agent.

도 1은 본 발명에 적용되는 살균력이 우수한 균주의 상태를 나타내는 사진,
도 2는 담배가루이에 대한 보조제의 투입비율별 살충 시험 결과를 나타내는 사진,
도 3은 본 발명에 따른 천연물과 미생물을 이용한 시설원예 병해충 복합 방제제 조성물의 제조 공정을 나타내는 도면.
BRIEF DESCRIPTION OF THE DRAWINGS FIG. 1 is a photograph showing the state of a strain having excellent sterilizing power applied to the present invention,
FIG. 2 is a photograph showing the result of insecticidal test for each dose of the adjuvant to tobacco,
FIG. 3 is a view showing a process for preparing a composition of a plant horticultural pest insecticide complex using a natural product and a microorganism according to the present invention. FIG.

본 발명의 상기 및 그 밖의 목적과 새로운 특징은 본 명세서의 기술 및 첨부 도면에 의해 더욱 명확하게 될 것이다.
These and other objects and novel features of the present invention will become more apparent from the description of the present specification and the accompanying drawings.

이하, 본 발명의 구성을 도면에 따라서 설명한다.Hereinafter, the configuration of the present invention will be described with reference to the drawings.

먼저, 살균력이 우수한 미생물 선별에 대해 기술한다.First, microbial screening with excellent sterilizing power is described.

본 발명에서는 살균력이 우수한 미생물로서 (주)엠알이노베이션이 보유한 균주 1종, 계명대학교 세균학실험실에 보유한 균주 1종과 토양시료에서 분리한 균주 3균주를 대상으로 확인 후 선별하였다. 토양시료는 102~103으로 희석한 후 오트밀(oat meal) 평판 배지(oat meal 30g, agar 15g/L)에 100㎕씩 도말 후 건조하여 28℃에서 7일간 배양하였다. 평판 배지에 증식된 균주는 순수분리를 하여 살균력을 확인하였다. In the present invention, a microorganism having excellent sterilizing power was selected and identified from one strain of Micro Innovation Inc., one strain belonging to Keimyung University Bacteriology Laboratory, and three microbial strains isolated from soil samples. Soil samples were diluted to 10 2 to 10 3 and then plated on oat meal plate (oat meal 30 g, agar 15 g / L) in an amount of 100 μl each, dried, and cultured at 28 ° C for 7 days. The strains grown on the plate medium were sterilized by pure separation.

살균력이 우수한 미생물은 다양한 균주로부터 확인 후, 하기 표 1에서 보는 바와 같이 Bacillus subtilis PCI 219에 18mm의 항균활성을 나타낸 균주를 선정하였다. 살균력이 우수한 미생물은 도 1의 A와 B에서 보는 바와 같이 현미경으로 확인한 결과 방선균으로 확인되었으며, SG 균주(Streptomyces spp.)로 명명하여 실험에 사용하였다.The microorganisms having excellent bactericidal activity were identified from various strains, and then, as shown in Table 1 below, Bacillus The strains exhibiting antimicrobial activity of 18 mm in subtilis PCI 219 were selected. The microorganisms having excellent germicidal activity were identified as actinomycetes by microscopic examination as shown in A and B of FIG. 1, and named as SG strain ( Streptomyces spp.).

도 1의 A는 YM배지에 접종하여 28℃, 7일간 배양한 상태를 나타내는 사진이고, 도 1의 B는 도 1의 A를 400배 확대한 현미경 사진이다.Fig. 1 (A) is a photograph showing a state of being inoculated on a YM medium and cultured at 28 캜 for 7 days, and Fig. 1 (B) is a microscope photograph showing a 400-fold magnification of Fig.

표 1은 SG 균주의 E. coli KCTC 1682와 Bacillus subtilis PCI 219에 대한 항균활성을 나타낸다.Table 1 shows the results of the transformation of E. coli KCTC 1682 and Bacillus subtilis It exhibits antimicrobial activity against PCI 219.

Figure 112015125960171-pat00001
Figure 112015125960171-pat00001

본 발명에 적용되는 고삼(Sophora flavescens) 식물의 추출물은 고삼의 뿌리를 구입하여 세척 건조 후 분말화하고, 고삼 분말 중량의 20배에 달하는 부피의 헥산(hexane), 클로로폼(chloroform), 아세트산 에틸(ethyl acetate), 메탄올(methanol), 에탄올(ethanol) 등과 같은 C1 내지 C4의 저급알콜 또는 이들의 혼합용매로 상온에서 1~10시간 동안 열수 추출, 냉침 추출, 환류 냉각 추출 또는 초음파 추출 등의 추출방법을 사용하고, 진공 여과에 의해 상층액을 회수한 다음, 상기의 과정을 3회 반복 수행하여 상층액을 모으고 감압농축 하여 고삼 추출물을 수득할 수 있다. 그러나, 본 발명에 적용되는 고산 식물의 추출물은 상기 방법에 한정되는 것은 아니고, 공지의 방법을 적용하여 실행할 수도 있다.The extracts of Sophora flavescens plants to be applied to the present invention are obtained by purchasing roots of ginseng root, washing and drying and powdering the roots, and then spraying the seeds with hexane, chloroform, ethyl acetate extraction with cold extraction, reflux cooling extraction or ultrasonic extraction for 1 to 10 hours at room temperature with C1 to C4 lower alcohols such as ethyl acetate, methanol, ethanol or the like or a mixed solvent thereof at room temperature Method, and the supernatant is recovered by vacuum filtration. The above procedure is repeated three times, and the supernatant is collected and concentrated under reduced pressure to obtain the extract. However, the extract of the alpine plant applied to the present invention is not limited to the above-mentioned method, but may be carried out by applying a known method.

또 본 발명에서는 미생물 배양 시 고삼 추출물을 혼합하여 배양할 경우, 항진균활성은 증가하나 균주성장에 영향을 주는 것으로 나타나 제품화 시 문제가 될 것으로 예상되어 복합 제형화에 있어 미생물 단독 배양 후 고삼 추출물을 혼합하는 방법을 고려해 보았다.In the present invention, when the microorganism is cultured in the presence of the extract, the antifungal activity is increased but the microorganism has an effect on the growth of the strain. Therefore, it is expected that the microorganism will be a problem in commercialization. I thought about how to do it.

Bacillus subtilis PCI 219에 18mm의 항균활성을 나타낸 균주(이하, 'SG 균주(Streptomyces spp.)'라 한다)와 고삼 추출물을 하기 표 2와 같은 조성비로 혼합하여 복합 제형화를 한 후 35±2℃에서 12주 동안 4주 간격으로 경시변화를 통해 압축세포용적(packed cell volume), 식물 병원균에 대한 억제율, 해충에 대한 방제율을 파악하였다. Bacillus a 18mm antimicrobial activity of the subtilis PCI 219 shown strain (hereinafter, 'SG strains (Streptomyces spp.)'quot;) and to a Sophora flavescens extract were mixed in a composition ratio as shown in Table 2 eseo 35 ± 2 ℃ after the composite formulation The packed cell volume, inhibition rate against plant pathogens, and control rate against pests were determined through aging changes at intervals of 4 weeks for 12 weeks.

표 2는 복합 제형화 조성비이다.Table 2 shows the combined formulation ratio.

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경시변화는 농촌진흥청 고시 ‘생물농약의 등록시험방법 및 등록신청서류 검토기준’의 ‘경시변화 시험기준과 방법(미생물농약 및 생화학농약 공통)’에 준하여 실시하였다. The aging change was carried out according to the 'criteria and method of aging change test (common to microbial pesticides and biochemical pesticides)' of the 'Examination methods for registration of biological pesticides and registration application documents' notified by Rural Development Administration.

본 발명에 따른 병해충 복합 방제제 조성물은 해충인 나방류, 진딧물류, 응애류, 가루이류 중의 어느 하나를 방제 처리한다.The pesticide complex control composition composition according to the present invention treats any one of pests, moths, aphids, mites and powdery moths.

또 본 발명에 따른 병해충 복합 방제제 조성물은 식물 병원균인 역병류를 방제 처리한다.In addition, the composition according to the present invention is effective for controlling a disease caused by a plant pathogen.

식물 병원균에 대한 억제율은 SG 균주에 대해 항진균활성이 뛰어난 Phytophthora capsici Leonian KACC 40180(역병)을 대상으로 실시하였으며, 시료를 채취하여 희석배수 1,000배로 하여 20㎕를 paper disc(=6mm, Whatman Co.)에 첨가하여 건조시킨 후 검정 균주가 함유된 평판 배지 위에 얹고 30℃에서 7일간 배양한 후 생성된 억제범위(inhibitory zone)의 직경을 측정하여 판단하였다. Phytophthora capsici Leonian KACC 40180 (Plasmodium vivax), which has an excellent antifungal activity against plant pathogens, was used. The samples were collected and diluted 1,000 times with 20 μl of paper disc (= 6mm, Whatman Co.) , Dried, and placed on a plate culture medium containing a black stain. After incubation at 30 ° C for 7 days, the diameter of the inhibitory zone produced was determined.

해충에 대한 살충률은 안동에 소재한 생물이용연구소에서 분양받은 담배거세미나방(Spodoptera litura) 감수성계통 3령 유충으로 사육실에서 온도 25±2℃, 광조건 16L:8D, 상대습도 50~60%를 유지하며 누대 사육하면서 이용하였으며, 살충효과는 케일 잎을 직경 8cm로 잘라 증류수에 적신 여과지가 놓인 샤레(petridish:φ90mm)에 놓고 담배거세미나방 3령 유충을 10마리씩 접종한 후 복합제제를 1,000배 농도에서 각각 10초간 수동식 분무기(hand sprayer)로 살포하여 후드에서 2시간 건조하였다. 각 처리는 처리 당 3 반복으로 수행하였고, 무처리는 증류수를 살포하였다. 처리 후 사육실에서 보관하면서 48시간 후에 살충률을 조사하였다.The insecticidal rate of insect pests was maintained at 25 ± 2 ℃, light intensity 16L: 8D, and relative humidity of 50 ~ 60% in the 3rd instar larvae of Spodoptera litura susceptible strain distributed in Andong, Korea. . The insecticidal effect was obtained by inoculating caleb leaves with 8 cm diameter petridish (φ90 mm) with filter paper soaked in distilled water, inoculating 10 larvae of Tobacco spp. For 10 seconds each with a hand sprayer and dried in a hood for 2 hours. Each treatment was carried out in 3 replicates per treatment and untreated was sprayed with distilled water. After treatment, the mortality rate was measured 48 hours after storage in the breeding room.

표 3에서와 같이 선정된 SG 균주에 고삼 추출물을 5종류의 조성비로 혼합하여 경시변화에 따른 미생물의 압축세포용적을 관찰한 결과 12주 동안 감소율이 약 15% 내로 나타나 비교적 혼합 안정성이 양호한 것을 알 수 있었다. 그리고 식물 병원균의 억제율과 해충에 대한 살충률은 sample 4의 SG 균주 60% + 고삼 추출물 40%의 조성에서 가장 높은 효과를 나타내어 sample 4의 조성비로 복합제형을 하여야 가장 효과가 뛰어남을 알 수 있었다. 또한 복합제제의 효능은 12주간 감소율이 10% 내로 나타나 비교적 복합제제의 효능지속기간도 양호한 것을 알 수 있었다.As shown in Table 3, when the selected ginseng extract was mixed with five kinds of composition ratio, the compression cell volume of the microorganism was observed to be about 15% for 12 weeks, I could. The inhibition rate of plant pathogens and the insecticidal rate of insect pests were the highest at 60% of the SG strain of sample 4 and 40% of the ginseng extract, indicating that the combination of sample 4 had the best effect. In addition, the efficacy of the combination product was 10% in 12 weeks, indicating that the duration of efficacy of the combination product was also good.

표 3은 경시변화 시간별 압축세포용적(P.C.V.), 식물 병원균 억제율, 살충률을 나타낸다.Table 3 shows the compression cell volume (P.C.V.), the inhibition rate of plant pathogens, and the insecticidal rate according to aging time.

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상기 표 3에서 Sample 4의 SG 균주 60% + 고삼 추출물 40% 조성에서 식물 병원균의 억제율과 해충에 대한 살충률은 약 60~70% 정도로 개발상의 목표 방제가인 70%에 약간 못미쳐 확정된 병해충 복합방제제의 제제화에 있어 효능상승을 위한 보조제를 선정하고자 하였다. In Table 3, the rate of inhibition of plant pathogens and the insect pest insecticide ratio in the composition of 60% of the SG strain and 40% of the ginseng extract in the sample 4 are about 60 to 70% The purpose of this study was to select an adjuvant for increasing the efficacy in the formulation of combination control agents.

보조제는 일반적인 농업용으로 사용되고 있는 비이온화 계면활성제 중 분산성이 높고 안정성이 입증된 4종의 계면활성제에 대하여 물리적 특성을 검토하였다(표 4). 표 4는 시험에 사용된 보조제를 나타낸다.Among the nonionic surfactants used in general agricultural applications, the physical properties of four surfactants with high dispersibility and proven stability were examined (Table 4). Table 4 shows the adjuvants used in the test.

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4종의 계면활성제는 농림축산식품부령 ‘친환경농어업 육성 및 유기식품 등의 관리 지원에 관한 법률 시행규칙’에 명시된 미국 환경보호국(EPA)에서 정하는 농약제품에 허가된 불활성 성분목록(Inert Ingredients List) 3 또는 4에 해당하는 보조제로서 유기농업자재 제조 시 보조제로 사용가능한 물질만을 선택하였다.Four types of surfactants are listed in the Inert Ingredients List of the pesticide products prescribed by the US Environmental Protection Agency (EPA) specified in the Agriculture, Forestry and Livestock Food Ordinance 'Enforcement of the Act on the Promotion of Environmentally Friendly Farming and Fisheries and Management of Organic Foods' 3 or 4, only those substances that can be used as adjuvants in the production of organic agricultural materials were selected.

다음에 혼합제제의 효능상승을 위한 보조제의 물리성을 조사하였다.Next, the physical properties of the adjuvants for enhancing the efficacy of the mixed preparations were examined.

확산 시험 Diffusion test

평평한 탁자 위에 각각의 보조제를 희석배수 2,000배로 하여, 20㎕씩 3번씩 떨어뜨린 후 4분 뒤 확산면적을 조사하였다.Each of the adjuvants was diluted 2,000 times on a flat table and dropped 20 쨉 l three times. Four minutes later, the diffusion area was examined.

부착력 시험 Adhesion test

각각의 보조제를 희석배수 2,000배로 하여, 비커에 고추잎을 5초간 침지시킨 후 시험 탁자에 올려놓고 비교하였다.Each of the supplements was diluted 2,000 times, and the pepper leaves were immersed in a beaker for 5 seconds and placed on a test table.

③ 건조시간 시험③ Drying time test

각각의 보조제를 희석배수 2,000배로 하여, 비커에 고추잎을 5초간 침지시킨 후 시험 탁자에 올려놓고 시험 약제가 90%이상 건조된 시간을 측정하였다.Each of the supplements was diluted 2,000 times, the pepper leaves were immersed in a beaker for 5 seconds, placed on a test table, and the time when the test agent was dried at 90% or more was measured.

④ 소포력 시험④ Pore force test

각각의 보조제를 희석배수 2,000배로 하여, 정량플라스크 넣고 20회 흔들어 비커에 따른 후 10분 후 소포되는 모양을 비교하였다.Each supernatant was diluted 2,000 times, and the cells were shaken 20 times by adding a quantitative flask, and the shape of the supernatant after 10 minutes was compared.

시험 결과는 다음과 같았다.The test results were as follows.

확산시험 Diffusion test

각각의 보조제로 시험탁자 위에서 확산시험을 한 결과, 확산이 가장 좋은 보조제는 폴리옥시에틸렌 도데실 모노 에테르(Polyoxyethylene dodecyl mono ether)이었으며, 그 다음으로는 Polyoxyethylene sorbitan monooleate, Polyoxyethylene (1,1,3,3-tetramethylbutyl)phenyl ether, Sodium bis(2-ethylhexyl) sulfosuccinate 순이었다.As a result of the diffusion test on the test table with each adjuvant, the best adjuvant was polyoxyethylene dodecyl mono ether, followed by Polyoxyethylene sorbitan monooleate, Polyoxyethylene (1,1,3, 3-tetramethylbutyl) phenyl ether, and sodium bis (2-ethylhexyl) sulfosuccinate.

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상기 표 5는 보조제별 확산 정도를 나타낸다.Table 5 shows the degree of diffusion for each adjuvant.

부착력 시험 Adhesion test

각각의 보조제를 고추잎에 침지시킨 후 결과, 가장 부착력이 좋았던 약제는 Polyoxyethylene dodecyl mono ether이었으며, 그 다음으로는 Polyoxyethylene sorbitan monooleate, Polyoxyethylene (1,1,3,3-tetramethylbutyl)phenyl ether, Sodium bis(2-ethylhexyl) sulfosuccinate 순이었다.Polyoxyethylene sorbitan monooleate, polyoxyethylene (1,1,3,3-tetramethylbutyl) phenyl ether, and sodium bis (1,1,3,3-tetramethylbutyl) phenyl ether were the most adherent agents. 2-ethylhexyl) sulfosuccinate.

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상기 표 6은 보조제별 부착 정도를 나타낸다.Table 6 shows the degree of adhesion of each adjuvant.

③ 건조시간 시험③ Drying time test

고추잎이 가장 빠르게 건조되는 보조제는 Polyoxyethylene sorbitan monooleate(PLE)이었으며, 그 다음으로는 Polyoxyethylene dodecyl mono ether(BKS-1), Polyoxyethylene (1,1,3,3-tetramethylbutyl)phenyl ether, Sodium bis(2-ethylhexyl) sulfosuccinate 순이었다.Polyoxyethylene sorbitan monooleate (PLE) was the fastest adjuvant for pepper leaves. Polyoxyethylene dodecyl mono ether (BKS-1), Polyoxyethylene (1,1,3,3-tetramethylbutyl) phenyl ether, Sodium bis -ethylhexyl) sulfosuccinate.

Figure 112015125960171-pat00007
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상기 표 7은 보조제별 건조시간을 나타낸다.Table 7 shows the drying time for each adjuvant.

④ 소포력 시험④ Pore force test

소포력 시험 결과, 가장 소포력이 좋았던 보조제는 Polyoxyethylene dodecyl mono ether이었으며, 그 다음으로는 Polyoxyethylene sorbitan monooleate, Polyoxyethylene (1,1,3,3-tetramethylbutyl)phenyl ether, Sodium bis(2-ethylhexyl) sulfosuccinate 순이었다.As a result of the vesicidal test, the best adjuvant was polyoxyethylene dodecyl mono ether, followed by Polyoxyethylene sorbitan monooleate, Polyoxyethylene (1,1,3,3-tetramethylbutyl) phenyl ether and Sodium bis (2-ethylhexyl) sulfosuccinate .

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상기 표 8은 보조제별 소포력을 나타낸다.
Table 8 shows the vapors per supporter.

다음에 복합제제의 효능상승을 위한 보조제의 효능 조사를 실시하였다.Next, the efficacy of the adjuvant to increase the efficacy of the combined preparation was investigated.

먼저, 식물 병원균에 대한 억제율을 조사하였다.First, the inhibition rate against plant pathogenic bacteria was examined.

보조제에 대한 물리성 실험 결과 Polyoxyethylene dodecyl mono ether의 효과가 가장 좋은 것으로 판단되어 상기 복합제제 sample 4 100%에 대하여 1~10% 부피비로 첨가하여 희석배수 1,000배로 식물 병원균의 억제율을 확인하였다. The physical properties of the adjuvant were evaluated as the best effect of polyoxyethylene dodecyl mono ether. The inhibition rate of plant pathogens was confirmed to be 1,000 times dilution by adding 1 to 10% by volume of 100%

식물 병원균에 대한 억제율은 상술한 바와 같이, SG 균주에 대해 항진균활성이 뛰어난 Phytophthora capsici Leonian KACC 40180(역병)을 대상으로 실시하였으며, 시료를 채취하여 희석배수 1,000배로 하여 20㎕를 paper disc(=6mm, Whatman Co.)에 첨가하여 건조시킨 후 검정 균주가 함유된 평판 배지 위에 얹고 30℃에서 7일간 배양한 후 생성된 억제범위의 직경을 측정하여 판단하였다.As described above, the inhibition rate against phytopathogenic fungi is Phytophthora was conducted for capsici Leonian KACC 40180 (plague), the 20㎕ to 1,000-fold dilution of the sample was collected paper disc (= 6mm, Whatman Co. ) was added to the dry laid on a plate medium containing the test strains The diameter of the inhibition range generated after culturing at 30 ° C for 7 days was measured and determined.

해충에 대한 살충률은 상술한 바와 같이, 안동에 소재한 생물이용연구소에서 분양받은 담배거세미나방 감수성계통 3령 유충으로 사육실에서 온도 25±2℃, 광조건 16L:8D, 상대습도 50∼60%를 유지하며 누대 사육하면서 이용하였으며, 살충효과는 케일 잎을 직경 8cm로 잘라 증류수에 적신 여과지가 놓인 샤레에 놓고 담배거세미나방 3령 유충을 10마리씩 접종한 후 복합제제를 1,000배 농도에서 각각 10초간 hand sprayer로 살포하여 후드에서 2시간 건조하였다. 각 처리는 처리 당 3반복으로 수행하였고, 무처리는 증류수를 살포하였다. 처리 후 사육실에서 보관하면서 48시간 후에 살충률을 조사하였다.As described above, the insecticidal rate of insects was 25 ± 2 ℃ in temperature, 16L: 8D in light condition and 50 ~ 60% in relative humidity in the 3rd instar larvae of Tobacco spp. The cage leaves were cut into 8 cm diameter and placed on filter paper, which was soaked in distilled water. Ten birds of tobacco budworm larvae were inoculated, and the compound preparation was inoculated for 10 seconds at 1,000 times concentration. hand sprayer and dried in a hood for 2 hours. Each treatment was carried out in 3 replicates per treatment and untreated was sprayed with distilled water. After treatment, the mortality rate was measured 48 hours after storage in the breeding room.

하기 표 9에서와 같이, Polyoxyethylene dodecyl mono ether를 첨가하였을 때 식물 병원균에 대한 억제율과 해충 살충률은 증대되었다. 투입비율은 복합제제 sample 4 100%에 대하여 10% 부피비로 첨가했을 때 가장 효능이 좋았으며, 그 이상에서는 오히려 감소하는 결과가 나타났다. 따라서 최적 제형화를 위해서는 복합제제 sample 4 100%에 대하여 보조제를 10% 부피비로 첨가하는 것이 가장 이상적일 것으로 판단되었다.As shown in Table 9 below, when the polyoxyethylene dodecyl mono ether was added, the inhibition rate and pest insecticidal rate against the plant pathogenic bacteria were increased. The addition ratio was the most effective when added in a 10% volume ratio to 100% of the composite preparation sample 4, and the result was lower than that. Therefore, it was concluded that the addition of the adjuvant in a 10% volume ratio to 100% of the sample preparation 4 of the combination preparation would be ideal for optimal formulation.

표 9는 Polyoxyethylene dodecyl mono ether의 투입비율별 식물 병원균의 억제율과 해충에 대한 살충률을 나타낸다.Table 9 shows the rate of inhibition of plant pathogens and the insecticidal rate against pests by the input ratio of polyoxyethylene dodecyl mono ether.

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다음에 선발 보조제의 다양한 해충에 대한 작용기작별 효능을 검증하였다.Next, the efficacy of the functional group farewell to various insect pests of the selection aid was verified.

해충의 경우 일반적으로 식물추출물에 의해 방제될 때 접촉이나 습식에 의한 작용기작으로 방제가 되는데 선발된 보조제가 이러한 작용기작에 어떠한 영향을 주는지 추가적인 실험을 진행하였다. In case of insect pests, it is generally controlled by the action mechanism by contact or wet when it is controlled by the plant extract. Further experiments have been conducted on how the selected adjuvant has an effect on the action mechanism.

담배가루이(Bemisia tabaci) 성충에 대한 경구독성을 실험하기 위하여 파라필름 사이에 각각의 제제를 집어넣어 이를 직접 흡즙하게 하는 방법으로 처리 후 살충율을 관찰하였다. 사용한 처리 제제의 양은 희석배수 1,000배로 하여 각 처리구별로 300㎕이며, 20%의 자당(Sucrose) 희석액을 모든 처리구에 공통적으로 사용하였다. 담배가루이는 경북대학교 농생물학과 온실에서 누대사육하던 개체를 분양받아 이용하였다. The tobacco is Louis ( Bemisia tabaci) was observed insecticidal rate after processing in a manner that the holster each formulation between parafilm in order to test the oral toxicity heupjeup them directly for adults. The amount of the used treatment formulation was 300 μL for each treatment group with a dilution factor of 1,000, and 20% sucrose diluted solution was commonly used for all treatments. Tobacco powder was used in the greenhouse of the Department of Agricultural Biology, Kyungpook National University.

처리 후 48시간 동안 관찰한 결과 농가에서 일반적으로 사용하는 농도인 선발 보조제의 투입비율이 10%, 20%에서 살충률이 100%로 나타났으며, 5%일 때 93.33±3.85%, 보조제를 넣지 않았을 때는 75.55±5.87%로 나타났다. 시간대별 살충력을 확인한 결과 보조제 투입량이 10%일 때 가장 살충률이 좋은 것으로 확인되었다.As a result of observation for 48 hours after the treatment, the addition ratio of the auxiliaries generally used in the farms was 10%, the insecticidal rate was 100% at 20%, 93.33 ± 3.85% at 5% And 75.55 ± 5.87%, respectively. As a result of checking the insecticidal power by time, it was confirmed that the insecticidal rate was the best when the amount of the adjuvant was 10%.

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상기 표 10은 선정보조제의 다양한 농도별 경구 독성을 나타내고, 도 2는 담배가루이에 대한 보조제의 투입비율별 살충 시험 결과를 나타내는 사진이다.Table 10 shows the oral toxicity of various concentrations of the adjuvant, and Fig. 2 is a photograph showing the results of the insecticidal test for each dose of the adjuvant to the tobacco.

다음에 화랑곡나방에 대한 살충효과를 실시하였다.Next, the insecticidal effect on the moth moth was carried out.

화랑곡나방(Plodia interpunctella) 성충에 대한 경구 독성을 실험하기 위하여 화랑곡나방 먹이 1g에 희석배수 1,000배로 하여 각 처리구별로 1mL 첨가하여 고루 섞고, 하루 동안 먹이를 말린 후 살충률과 우화율을 측정하였다. Plodia interpunctella) to the Indian Mealmoth feeding 1g to test the oral toxicity of the adult-fold dilution 1,000 mixed evenly to 1mL was added to each of the processing distinguished, then dried to feed for one day to measure the insecticidal rate and emergence rate.

화랑곡나방은 경북대학교 농생물학과 온실에서 누대사육하던 개체를 분양받아 이용하였다. Hwangryonggam moth was used in the greenhouse of Kyungpook National University.

처리 후 4일 동안 관찰한 결과 살충률은 선발 보조제의 투입비율이 표 10과 같이, 10% > 20% > 5% > 0% 순으로 높게 나타났다(표 11).As shown in Table 10, 10%> 20%> 5%> 0% of the insecticidal rates of the insecticides were higher in the order of 0% (Table 11).

처리 후 30일 동안 관찰한 결과 우화률은 보조제의 투입비율이 5%, 10%, 20%일 때는 우화하지 않았으며, 보조제가 투입되지 않았을 경우 5%가 우화하였다(표 12)As a result of observation for 30 days after the treatment, the feral rate was not alienated when the supplementary inputs were 5%, 10%, 20%, and 5% when no supplementary agent was added (Table 12)

표 11은 화랑곡나방에 대한 각 제제의 살충률을 나타내고, 표 12는 화랑곡나방에 대한 각 제제의 우화률을 나타낸다. Table 11 shows the insecticidal rate of each formulation against the moth moth, and Table 12 shows the rate of occurrence of each formulation relative to the moth moth.

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다음에 벚나무응애에 대한 살충효과를 실시하였다.Next, insecticidal effect on cherry mite was carried out.

벚나무응애(Amphitetranychus viennensis)에 대한 접촉 독성을 실험하기 위하여 벚나무응애가 붙어 있는 엽면에 각각의 제제를 희석배수 1,000배로 50cm 거리에서 분무 처리한 후 샤레(φ90mm)에 넣어 18시간 동안 살충율을 관찰하였다. Amphitetranychus viennensis ) were sprayed at a distance of 50cm with a dilution of 1,000 times at each leaf surface attached to the cherry tree mite. The mortality rate was monitored for 18 hours in Chare (φ90mm).

처리 후 18시간 동안 관찰한 결과 6시간 후 선발 보조제의 투입량이 10%, 20%에서 살충률이 100%로 나타났으며, 5%일 때 50.3±5.8, 보조제를 넣지 않았을 때는 43.3±3.3로 나타났다. 이상의 결과로 볼 때 보조제 투입량이 10%일 때 가장 살충률이 좋고 경제적인 것으로 확인되었다.As a result of observation for 18 hours after the treatment, the dosage of supplementary adjuvant was 10% at 20%, 100% at 5%, and 43.3 ± 3.3 at 5% . From the above results, it was confirmed that the insecticide rate was the best and economical when the supplementary dose was 10%.

표 13은 벚나무응애에 대한 각 제제의 살충률을 나타낸다. Table 13 shows the insecticidal rate of each formulation against cherry mite.

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Figure 112014051521520-pat00013

다음에 본 발명에 따른 복합제제의 최적 배합을 결정하였다.The optimal formulation of the combination preparation according to the invention was then determined.

이상의 실험에서 나온 결론을 토대로 최적 배합조건인 표 14의 조성으로 복합제제 sample을 제조하여, 35±2℃에서 12주 동안 4주 간격, 0±2℃에서 6일 동안 2일 간격으로 경시변화를 통해 물리성 변화, 식물 병원균에 대한 억제율과 해충에 대한 방제율을 파악하였다.Based on the conclusions from the above experiments, a composite preparation sample was prepared with the composition of Table 14 as the optimal mixing condition. The sample was changed at intervals of 2 days at 35 ± 2 ° C for 4 weeks at 0 ± 2 ° C for 12 weeks Physical activity, inhibition rate against plant pathogens and control rate against pests.

표 14는 복합제제의 최적 배합 조성을 나타낸다.Table 14 shows the optimal formulation composition of the combination preparation.

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경시변화는 농촌진흥청 고시 ‘생물농약의 등록시험방법 및 등록신청서류 검토기준’의 ‘경시변화 시험기준과 방법(미생물농약 및 생화학농약 공통)’에 준하여 실시하였다.The aging change was carried out according to the 'criteria and method of aging change test (common to microbial pesticides and biochemical pesticides)' of the 'Examination methods for registration of biological pesticides and registration application documents' notified by Rural Development Administration.

물리성 변화는 희석시 육안검사를 통하여 판단하였으며, 식물 병원균에 대한 억제율은 SG 균주에 대해 항진균활성이 뛰어난 Phytophthora capsici Leonian KACC 40180(역병)을 대상으로 실시하였으며, 시료를 채취하여 희석배수 1,000배로 하여 20㎕를 paper disc(=6mm, Whatman Co.)에 첨가하여 건조시킨 후 검정 균주가 함유된 평판 배지 위에 얹고 30℃에서 7일간 배양한 후 생성된 억제범위의 직경을 측정하여 판단하였다.Changes in physical properties were judged by visual inspection at dilution. The inhibition rate against phytopathogenic fungi was Phytophthora was conducted for capsici Leonian KACC 40180 (plague), the 20㎕ to 1,000-fold dilution of the sample was collected paper disc (= 6mm, Whatman Co. ) was added to the dry laid on a plate medium containing the test strains The diameter of the inhibition range generated after culturing at 30 ° C for 7 days was measured and determined.

해충에 대한 살충률은 안동에 소재한 생물이용연구소에서 분양받은 담배거세미나방 감수성계통 3령 유충으로 사육실에서 온도 25±2℃, 광조건 16L:8D, 상대습도 50∼60%를 유지하며 누대사육하면서 이용하였으며, 살충효과는 케일 잎을 직경 8cm로 잘라 증류수에 적신 여과지가 놓인 샤레(φ90mm)에 놓고 담배거세미나방 3령 유충을 10마리씩 접종한 후 복합제제를 1,000배 농도에서 각각 10초간 수동식 분무기로 살포하여 후드에서 2시간 건조하였다. 각 처리는 처리 당 3 반복으로 수행하였고, 무처리는 증류수를 살포하였다. 처리 후 사육실에서 보관하면서 48시간 후에 살충률을 조사하였다.The insecticidal rate of insect pests was maintained at 25 ± 2 ℃ in temperature, 16L: 8D in light condition and 50 ~ 60% in relative humidity in the 3rd instar larvae of Tobacco spp. , And the insecticidal effect was obtained by inoculating 10 ml of tobacco budworm larvae and third instar larvae in a shale (φ90 mm) in which filter paper moistened with distilled water was cut to a diameter of 8 cm, and the compound preparation was sprayed for 10 seconds with a manual sprayer And dried in a hood for 2 hours. Each treatment was carried out in 3 replicates per treatment and untreated was sprayed with distilled water. After treatment, the mortality rate was measured 48 hours after storage in the breeding room.

복합제제의 최적 배합 조성으로 제조된 sample의 경시변화에 따른 물리성, 식물 병원균의 억제율과 해충에 대한 살충률을 확인한 결과 변화가 미미하여, 복합제제의 물리성 및 효능면에서 상당히 안정적인 것을 알 수 있었다. 또한 경시변화 기준상 35±2℃에서 12주 동안 안정적인 것은 1년 동안 효능이 보증됨을 나타내므로 향후 시제품의 보증기간을 1년 이상으로 설정하여도 무방함을 알 수 있었다.As a result of examining physical properties, inhibition rate of plant pathogens and insecticidal rate against insect pests according to aging change of samples prepared with optimal combination composition of combination preparation, it was found that the physical properties and efficacy of the combination preparation were remarkably stable . In addition, it is shown that the stabilization for 12 weeks at 35 ± 2 ℃ on the aging change standard indicates that the efficacy is guaranteed for 1 year. Therefore, it is also possible to set the guarantee period of the prototype product to 1 year or more in the future.

표 15는 35±2℃ 경시변화 시간별 물리성, 식물 병원균 억제율, 해충 방제율을 나타내고, 표 16은 0±2℃ 경시변화 시간별 물리성, 식물 병원균 억제율, 해충 방제율을 나타낸다.Table 15 shows physical properties, plant pathogen inhibition rate, and pest control rate at 35 ± 2 ° C over time, and Table 16 shows physical properties, plant pathogen inhibition rate, and pest control rate at the time of 0 ± 2 ° C over time.

Figure 112014051521520-pat00015
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다음에 복합제제의 시제품 제작 및 현장 평가를 수행하였다.Next, prototype preparation and on-site evaluation of the combined preparation were carried out.

상기 표 15의 최종 복합제제 조성으로 도 3의 제조공정을 통해 시제품을 제조하여 고추의 역병 및 담배거세미나방에 대한 실내 포트(pot) 시험을 수행하였다.The prototype was manufactured through the manufacturing process of FIG. 3 with the composition composition of the final combination as shown in Table 15, and the indoor pot test for the blight of the red pepper and the tobacco cracking room was performed.

도 3은 본 발명에 따른 천연물과 미생물을 이용한 시설원예 병해충 복합 방제제 조성물의 제조 공정을 나타내는 도면이다.FIG. 3 is a view showing a process for producing a composition of a plant and horticultural pest insecticide complex using a natural product and a microorganism according to the present invention.

도 3에 도시된 바와 같이, pH 7이 되도록 하여 시드 배지와 생산 배지로 전배양(pre-culture)한 후, 본배양(mainculture)을 한다. 배양조건은 30℃, 200rpm, 공기량 0.5vvm으로 하였으며, 300L 파일럿플랜트(pilot plant)에서 작업부피(working volume) 150L로 4일간 배양한다.As shown in FIG. 3, pre-culture is performed with a seed medium and a production medium so that the pH is 7, followed by mainculture. The culture conditions were 30 ° C, 200 rpm, air volume 0.5 vvm, and cultured in a 300 L pilot plant for four days at 150 L working volume.

본 배양 과정에서는 배양의 속도를 증가시키기 위해 모터에 의해 배양액을 교반한다. 본 배양된 배양액에 고삼 식물 추출물과 보조제인 폴리옥시에틸렌 도데실 모노 에테르(Polyoxyethylene dodecyl mono ether)를 혼합하고, 여과하여 최종 생성물인 복합 제형화를 생성하였다.In this culturing process, the culture solution is stirred by a motor to increase the culturing speed. To this cultured medium, the extract of Bombyx mori L. plant was mixed with polyoxyethylene dodecyl mono ether, which is an adjuvant, and filtered to produce a final product, a complex formulation.

즉 본 발명에서는 도 3에 도시된 바와 같이, 미생물 단독 배양 후 식물 추출물인 고삼 추출물을 혼합하는 방법으로 실행하였다.That is, in the present invention, as shown in FIG. 3, the microorganism was cultured alone, and then the plant extract, Gossam extract, was mixed.

식물 병원균에 대한 방제가는 SG 균주에 대해 항진균활성이 뛰어난 Phytophthora capsici Leonian KACC 40180(역병) 병원균의 유주자를 수확하여 상토와 혼합 이병 토양(상토 80㎖: 병원균 20㎖, 105spore/㎖)을 조제하여 식물체가 식재되어 있는 포트에 1주일 간격 희석배수 1,000배 농도로 1~3회 약제가 흘러내릴 정도로 엽면 처리하였다. 이병 여부는 최종 처리 1주일 후부터 7일 간격으로 관찰하였다. Phytophthora capsici Leoniana KACC 40180 (Plague) pathogens were harvested for the SG strain and the mixed strains were mixed with the soil (80 ml on the soil: 20 ml, 10 5 spores / ㎖) The leaf surface was treated with the diluted water at a concentration of 1,000 times per week for one to three times. Patients were observed at intervals of 7 days after the first week of treatment.

해충에 대한 방제가는 고추 묘가 심겨져 있는 직경 8㎝, 높이 7㎝ 육묘용 포트 한 개씩을 곤충사육용 아크릴 상자(가로 30㎝, 세로 30㎝, 높이 28.5㎝)에 넣고 각 유충 10마리씩을 잎에 부착시켰다. 유충이 완전히 잎에 정착할 수 있게 1시간 경과한 후 1,000배 농도로 50㎝ 거리에서 분무 처리하였다. 처리 후 48시간 후 해충의 치사유무는 가는 붓을 이용하여 유충의 몸을 뒤집어 놓은 뒤 일으켜 세우지 못하면 죽은 것으로 판정하여 조사하였다. 한 개의 포트를 1 반복으로 하여 3 반복으로 수행하였다.The control for insect pests was placed in an acrylic box for insect breeding (30 cm in length, 30 cm in height, 28.5 cm in height) with a diameter of 8 ㎝ and a height of 7 ㎝, planted with red pepper seedlings, Respectively. After 1 hour to allow larvae to settle completely on the leaves, they were sprayed at a distance of 50 cm at a concentration of 1,000 times. Forty-eight hours after the treatment, the presence or absence of death of the pest was determined by determining that the larvae were dead if they were unable to raise the larva by using a thin brush. One port was repeated with 3 iterations.

현장에서 시제품의 약해 유무를 판단하기 위해 실제 처리 농도인 희석배수 1,000배의 배량과 배배량에 대해 1주일 간격 3회 살포하여 약제 처리 7일 후마다 약해유무를 관찰하였다. 약해 평가는 농촌진흥청 고시 ‘농약의 등록시험 기준과 방법’의 ‘약해시험의 기준과 방법’에 준하여 실시하였다. In order to determine whether the prototype product was weak or not, on the spot, we sprayed three times per week for the dilution factor of 1,000 times and the amount of dilution, which was the actual treatment concentration, and observed the weakness every 7 days after the treatment. The evaluation of the weakness was carried out according to the 'criteria and method of the weak test' of the 'Pesticide registration test standards and methods' notified by Rural Development Administration.

고추역병에 대해 병원균 단독 처리구는 최종 조사에서 96.7%의 발병을 보였으나, 1회 처리구의 경우 43.3%의 이병주율을 보여 56.7%의 방제가를 보였다. 3회 처리구의 경우 8.3% 정도의 발병율을 보여 90% 이상의 방제가를 보였다(표 17).In the case of pepper blight, the pathogen alone treatment showed 96.7% incidence in the final investigation, but in the case of single treatment, 43.3% of the treated plants showed 56.7%. In the case of 3 treatments, the incidence rate was about 8.3%, showing more than 90% control (Table 17).

담배거세미나방에 대해 방제가는 처리 24시간 경과 후 80.0%의 방제가를 보였으며, 48시간 경과 후 86.7%의 방제가를 보였다(표 18).After 24 hours of treatment, 80.0% of control was observed in the tobacco budworm, and 86.7% of control was observed after 48 hours (Table 18).

표 17은 시제품의 처리회수별 고추역병 방제가를 나타내고, 표 18은 시제품의 처리 후 해충에 대한 방제가를 나타내며, 표 19는 시제품의 처리 후 약해 발생유무를 나타낸다.Table 17 shows the control of the pepper lice inhibition by the number of treatments of the prototype, Table 18 shows the control value against the pests after the treatment of the prototype, and Table 19 shows the occurrence of the weakness after the treatment of the prototype.

Figure 112014051521520-pat00017
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Figure 112015125960171-pat00018
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Figure 112014051521520-pat00019
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이상 본 발명자에 의해서 이루어진 발명을 상기 실시 예에 따라 구체적으로 설명하였지만, 본 발명은 상기 실시 예에 한정되는 것은 아니고 그 요지를 이탈하지 않는 범위에서 여러 가지로 변경 가능한 것은 물론이다.
Although the present invention has been described in detail with reference to the above embodiments, it is needless to say that the present invention is not limited to the above-described embodiments, and various modifications may be made without departing from the spirit of the present invention.

본 발명에 따른 병해충 복합 방제제 조성물 및 그 제조방법을 사용하는 것에 의해 시설원예 병해충을 방제할 수 있다.
By using the composition of the present invention and the method for producing the same, it is possible to control the pests of the horticultural plants.

Claims (13)

삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 삭제delete 시설원예의 병해충을 방제하는 조성물의 제조 방법으로서,
(a) 항균활성을 나타낸 균주로서 Streptomyces spp.를 28℃에서 7일간 배양하는 단계,
(b) 고삼(Sophora flavescens) 식물 추출물을 마련하는 단계,
(c) 상기 단계 (a)에 의한 균주의 단독 배양 후, 상기 단계 (b)의 추출물을 혼합하는 단계,
(d) 상기 단계 (c)에 보조제를 혼합하는 단계를 포함하고,
상기 단계 (b)에서 고삼 식물 추출물은 고삼의 뿌리를 세척 건조 후 분말화하고, 고삼 분말 중량의 20배에 달하는 부피의 클로로폼(chloroform) 또는 아세트산 에틸(ethyl acetate)로 상온에서 10시간 동안 추출하여 고삼 추출물을 수득하고,
상기 보조제는 폴리옥시에틸렌 도데실 모노 에테르(Polyoxyethylene dodecyl mono ether)이며,
상기 추출물과 균주의 혼합비는 부피%로 40: 60이고, 상기 보조제는 상기 추출물과 균주의 복합제제 100%에 대하여 10% 부피비로 첨가되는 것을 특징으로 하는 병해충 복합 방제제 조성물의 제조방법.
A method for producing a composition for controlling harmful insects,
(a) culturing Streptomyces spp. as a strain exhibiting antimicrobial activity at 28 ° C for 7 days,
(b) preparing a plant extract of Sophora flavescens,
(c) mixing the extract of step (b) after culture of the strain according to step (a)
(d) mixing the adjuvant in step (c)
In step (b), the roots of the ginseng plant were washed, dried and powdered, and extracted with chloroform or ethyl acetate in a volume of 20 times the weight of the ginseng powder for 10 hours at room temperature To obtain a crude extract,
The adjuvant is polyoxyethylene dodecyl monoether,
Wherein the mixing ratio of the extract to the strain is 40: 60 by volume, and the adjuvant is added in an amount of 10% by volume relative to 100% of the combined extract of the extract and the strain.
삭제delete 삭제delete 삭제delete 시설원예의 병해충을 방제하는 방법으로서,
청구항 제7항의 병해충 복합 방제제 조성물의 제조방법에 의해 제조된 조성물이 해충인 나방류, 진딧물류, 응애류, 가루이류 중의 어느 하나를 방제 처리하는 것을 특징으로 하는 방제 방법.
As a method for controlling pests of the horticulture in the facility,
Characterized in that the composition produced by the method for producing a pest-control compound composition according to claim 7 is a pest control composition, wherein any one of pests, aphids, mites, and powdery mushrooms is treated.
시설원예의 병해충을 방제하는 방법으로서,
청구항 제7항의 병해충 복합 방제제 조성물의 제조방법에 의해 제조된 조성물이 식물 병원균인 역병류를 방제 처리하는 것을 특징으로 하는 방제 방법.
As a method for controlling pests of the horticulture in the facility,
Characterized in that the composition produced by the method for producing a composition for controlling pest combinatorial disease as set forth in claim 7 is an antiseptic treatment for a disease caused by a plant pathogenic bacterium.
제11항 또는 제12항에서,
상기 방제 처리는 분무 처리인 것을 특징으로 하는 방제방법.
12. The method according to claim 11 or 12,
Wherein the controlling treatment is a spraying treatment.
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