KR101621446B1 - 감수 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 갑상선 질환의 예방 또는 치료용 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 감수(Euphorbia kansui Liou ex Wang) 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 갑상선 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 감수 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 갑상선 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물, 또는 갑상선 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물에 관한 것이며, 상기 조성물을 이용하여 갑상선 질환을 예방, 개선 또는 치료하는 방법에 관한 것이다.

Description

감수 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 갑상선 질환의 예방 또는 치료용 조성물{COMPOSITION FOR PREVENTING OR TREATING THYROID DISORDERS COMPRISING EUPHORBIA KANSUI LIOU EX WANG EXTRACTS OR FRACTION THEREOF}

본 발명은 감수(Euphorbia kansui Liou ex Wang) 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 갑상선 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물에 관한 것이다. 구체적으로, 본 발명은 감수 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 갑상선 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물, 또는 갑상선 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물에 관한 것이며, 상기 조성물을 이용하여 갑상선 질환을 예방, 개선 또는 치료하는 방법에 관한 것이다.

갑상선은 요오드를 원료로 갑상선 호르몬을 만들어 혈류로 분비하는 내분비 기관이다. 갑상선 호르몬은 우리 몸의 신진대사의 속도를 조절하는 역할을 한다. 이러한 갑상선 호르몬 중에서 가장 중요한 것은 T4(요오드 원자4개)라고 불리는 티록신(thyroxine)과 T3(요오드 원자 3개)라고 불리는 트리요오드티로닌(triiodothyronine)이다. 이들 호르몬은 신체의 성장 발육과 인체에 필요한 당질, 단백질, 지방질 등의 생성 등, 몸이 스스로를 유지해나가는 각종 물질대사 과정을 조절한다. 또한 대사 과정을 촉진시켜 에너지를 만드는 역할을 하여 열을 발생시킴으로써 체온 조절에도 관여하여 모든 기관이 제 기능을 적절히 유지하도록 한다.

최근 갑상선 질환 환자의 수가 급증하고 있는데, 갑상선 질환의 주된 원인 중 하나가 갑상선 호르몬의 분비 조절의 이상에 있다.

체내에서 갑상선 호르몬의 분비를 위해서는 뇌하수체에서 갑상선 자극 호르몬(Thyroid Stimulating Hormone; TSH)이 분비되어야 한다. 이는 피드백 작용에 의해서 조절되는데, 구체적으로 TSH의 분비가 억제된 상태이면 갑상선에서 호르몬 분비에 대한 자극이 감소되어 갑상선 호르몬이 부족하게 되며, 이에 뇌하수체에서 TSH의 분비를 촉진하게 되어 갑상선 호르몬 분비가 증가되도록 한다. 반대로 TSH의 분비가 촉진된 상태이면 갑상선 호르몬이 과잉 분비되어, 이에 뇌하수체에서 TSH의 분비를 억제하게 되어 갑상선 호르몬 분비가 억제되도록 한다.

갑상선 호르몬 분비 조절 이상에 따른 질환으로는 대표적으로 갑상선 기능 항진증(hyperthyroidism) 및 갑상선 기능 저하증(hypothyroidism)이 있다. 갑상선 기능 항진증은 갑상선 호르몬이 혈액내로 과다 방출되어 일어나는 증상을 가진 모든 질환을 총칭한다. 갑상선 기능 항진증의 주요 특징은 갑상선이 증대되고 기초 대사율이 증가하며 자율 신경계통의 실조를 야기하는 것인데, 최근 통계에 따르면 여성이 남성에 비해 4:1의 비율로 많이 발생하며, 그 중에서도 20대 내지 50대에서 많이 발생한다.

갑상선 기능 저하증이란 갑상선 호르몬의 생성 부족으로 인한 모든 질환을 총칭한다. 갑상선 기능 저하증은 일반적으로 매우 서서히 진행하는 질환이므로 인식하기 어려운 경우가 많으며, 그 증상이 질환의 진행 정도에 따라 매우 다양하나, 일반적으로 우리 몸의 대사 상태가 감소되어 쉽게 피로해지고 무기력해지며 의욕이 상실되고, 추위에 민감해지며 체중이 증가하고 기억력 감퇴, 식욕 감퇴, 근육통, 관절통, 발한 감소 등의 증상을 야기한다.

이러한 갑상선 기능 항진증 및 저하증을 포함하는 갑상선 질환은 갑상선 호르몬과 관련된 것이 대부분이며, 따라서 현재 갑상선 질환을 치료하기 위해서는 호르몬 등을 외부로부터 체내로 공급해야 하는 등 지속적인 약물 치료에 의존해야 하는 경우가 대부분이어서, 급성 심근경색이나 불안정성 협심증 등의 허혈성 심질환 유발의 위험성, 환자의 체내 갑상선 호르몬 요구량의 변화 등 여러 문제점이 나타나는 것으로 보고되고 있다. 따라서 부작용이 적고 적용이 보다 용이한 갑상선 질환 치료제의 개발이 요구되는 실정이다.

이러한 배경하에, 본 발명자들은 갑상선 질환을 치료할 수 있는 물질에 대한 연구를 수행하였으며, 이에 감수(Euphorbia kansui Liou ex Wang) 추출물이 갑상선 호르몬의 분비를 조절하는 효능이 있음을 규명하고, 이를 활용한 갑상선 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 완성하기에 이르렀다.

본 발명은 감수 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 조성물을 이용하여 갑상선 질환을 예방, 개선 또는 치료하는 것을 목적으로 한다.

구체적으로, 본 발명의 하나의 목적은 감수 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 갑상선 질환의 예방 또는 치료용 조성물, 또는 갑상선 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 상기 조성물을 개체에 투여하는 것을 포함하는 갑상선 질환의 예방, 개선 또는 치료 방법을 제공하는 것이다.

본 발명은 상기의 과제를 해결하기 위한 하나의 구현예로서, 감수 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 갑상선 질환의 예방 또는 치료용 조성물을 제공한다.

본 발명의 감수(甘遂; Euphorbia kansui Liou ex Wang)는 대극과(Euphorbiaceae)에 속하는 다년생 초본으로서 한국, 일본 사할린 등지에 주로 분포한다. 감수의 뿌리는 배뇨, 배변 작용을 원활히 하는 효능이 있으며, 붓는 증상이나 가슴과 배 등에 물이 차는 증상을 완화하는 효능이 있어 변비, 종양 치료 등에 사용되는 것으로 알려져 있다. 감수로부터 분리된 화합물로 디테르펜(Diterpene), 트리테르펜(Triterpene) 등의 테르펜 계열 화합물들이 알려져 있다.

본 발명에서 사용되는 용어, "추출물"은 감수의 추출 처리에 의하여 얻어지는 추출액, 상기 추출액의 희석액이나 농축액, 상기 추출액을 건조하여 얻어지는 건조물, 상기 추출액의 조정제물이나 정제물, 또는 이들의 혼합물 등, 추출액 자체 및 추출액을 이용하여 형성 가능한 모든 제형의 추출물을 포함한다. 본 발명의 상기 추출물 또는 분획물은 바람직하게는 추출 후 건조 분말 형태로 제조되어 사용될 수 있다.

본 발명의 상기 감수 추출물은, 상기 감수의 천연, 잡종 또는 변종 식물의 다양한 기관으로부터 추출될 수 있고, 예를 들어 감수의 뿌리, 지상부, 줄기, 잎, 꽃, 열매의 몸통, 열매의 껍질, 종자뿐만 아니라 식물 조직 배양물로부터도 추출이 가능하다.

본 발명의 상기 감수 추출물은 바람직하게는 감수의 뿌리의 추출물일 수 있다.

본 발명의 상기 감수 추출물에 있어서, 상기 감수를 추출하는 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 추출할 수 있다. 상기 추출 방법의 비제한적인 예로는, 열수 추출법, 초음파 추출법, 여과법, 환류 추출법 등을 들 수 있으며, 이들은 단독으로 수행되거나 2 종 이상의 방법을 병용하여 수행될 수 있다.

본 발명에서 상기 감수를 추출하는 데에 사용되는 추출 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 추출 용매의 비제한적인 예로는 물, 알코올 또는 이들의 혼합 용매 등을 들 수 있으며, 알코올을 용매로 사용하는 경우에는 보다 바람직하게는 C₁ 내지 C₄의 알코올을 사용할 수 있다. 본 발명의 감수 추출물은 바람직하게는 물 또는 에탄올 추출물일 수 있다.

본 발명에서 사용되는 용어, "분획물"은 여러 다양한 구성 성분들을 포함하는 혼합물로부터 특정 성분 또는 특정 성분 그룹을 분리하기 위하여 분획을 수행하여 얻어진 결과물을 의미한다.

본 발명에서 상기 분획물을 얻는 분획 방법은 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용하는 방법에 따라 수행될 수 있다. 상기 분획 방법의 비제한적인 예로는, 감수를 추출하여 얻은 추출물에 소정의 용매를 처리하여 상기 추출물로부터 분획물을 얻는 방법을 들 수 있다.

본 발명에서 상기 분획물을 얻는 데에 사용되는 분획 용매의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 당해 기술 분야에서 공지된 임의의 용매를 사용할 수 있다. 상기 분획 용매의 비제한적인 예로는 물, 알코올 등의 극성 용매; 헥산(Hexan), 에틸 아세테이트(Ethyl acetate), 클로로포름(Chloroform), 디클로로메탄(Dichloromethane) 등의 비극성 용매 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상 혼합하여 사용될 수 있다. 상기 분획 용매 중 알코올을 사용하는 경우에는 바람직하게는 C₁ 내지 C₄의 알코올을 사용할 수 있다.

본 발명의 상기 감수 추출물 또는 이의 분획물은 갑상선 호르몬, 특히 티록신의 분비를 조절하는 효능을 나타내며, 이는 본 발명에서 최초로 규명된 것이다. 구체적으로 본 발명의 감수 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 조성물은 갑상선 자극 호르몬(TSH)이 과잉된 조건에서는 티록신의 분비를 감소시키고, TSH가 부족한 조건에서는 티록신의 분비를 증가시켜 티록신의 분비를 조절하는 효능을 나타낸다.

본 발명의 구체적인 일 실시예에 따르면, TSH가 포함된 배지(6H 배지) 및 TSH가 포함되지 않은 배지(5H 배지) 각각에 본 발명의 감수 추출물을 제공하고, 상기 각 배지에서 배양된 랫트의 갑상선 세포주 FRTL-5 세포에서의 티록신 분비 변화를 측정한 결과, 감수 추출물 무처리 대조군과 비교하여, 6H 배지에서는 티록신의 분비가 감소되고, 5H 배지에서는 반대로 티록신의 분비가 증가되는 결과를 나타내어, 감수 추출물이 티록신의 분비를 조절하는 효능이 있음을 확인할 수 있었다(실시예 2 및 3).

본 발명의 구체적인 일 실시예에 따르면, TSH가 포함되지 않은 배지(5H 배지)에 감수 추출물을 처리한 경우, 감수 추출물 무처리 대조군과 비교하여 FRTL-5 세포의 증식을 유도함을 확인하였으며, 이러한 효과는 estradiol과 시너지 효과를 가짐을 확인하였다(실시예 4).

또한, 본 발명의 상기 조성물은 갑상선 질환의 예방, 개선 또는 치료 효과를 충분히 나타내는 농도 범위에서 세포 독성을 나타내지 않으며, 천연물로부터 유래된 것이어서 체내에 심각한 자극을 가한다거나 유해한 작용을 유발함이 없이 안정하게 사용될 수 있는 이점이 있다.

본 발명에서 사용되는 용어, "갑상선 질환"은 갑상선에 야기된 모든 질환 및 갑상선의 기능 이상 증상을 나타내는 모든 질환을 의미한다. 상기 갑상선 질환의 비제한적인 예로 갑상선 기능 항진증, 갑상선 기능 저하증, 갑상선염, 갑상선 결절, 갑상선암 등을 들 수 있다. 본 발명의 상기 갑상선 질환은 특별히 제한되지 아니하나, 본 발명의 목적상, 바람직하게는 갑상선 기능 항진증 및/또는 갑상선 기능 저하증을 의미할 수 있다.

상기 갑상선 기능 항진증(hyperthyroidism)이란 갑상선 호르몬의 과잉 생성으로 인한 모든 질환을 총칭하며, 갑상선 기능 저하증(hypothyroidism)이란 갑상선 호르몬의 생성 부족으로 인한 모든 질환을 총칭한다.

본 발명에서 사용되는 용어, "예방"이란, 본 발명의 상기 조성물을 개체에 투여하여 갑상선 질환의 발병을 억제시키거나 지연시키는 모든 행위를 의미한다.

본 발명에서 사용되는 용어, "치료"란, 본 발명의 상기 조성물을 개체에 투여하여 갑상선 질환의 증세가 호전되도록 하거나 이롭게 되도록 하는 모든 행위를 의미한다.

본 발명의 상기 약학적 조성물에 있어서, 상기 감수 추출물 또는 이의 분획물은 상기 약학적 조성물의 전체의 중량을 기준으로 바람직하게는 1 중량% 내지 99.99 중량%로 함유될 수 있고, 보다 바람직하게는 10 중량% 내지 99.99 중량%로 함유될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 50 중량% 내지 99.99 중량%로 함유될 수 있다. 상기 범위내에서, 상기 감수 추출물 또는 이의 분획물에 따른 갑상선 호르몬 분비 조절 효과를 비롯한 갑상선 질환 치료 효과가 충분히 발휘되어 본 발명의 목적을 달성하기에 보다 적합해지는 이점이 있다.

본 발명의 상기 약학적 조성물은, 상기 감수 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 것에 더하여, 약학적으로 허용 가능한 담체를 추가로 포함할 수 있다.

본 발명에서, 상기 "약학적으로 허용 가능"하다는 것은, 이를 투여 시 생물체를 자극하지 않으면서, 투여되는 화합물의 생물학적 활성 및 특성을 저해하지 않는, 약학 분야에서 통상적으로 사용되는 것을 의미한다.

본 발명의 상기 약학적 조성물은, 상기 담체와 함께 제제화되어, 식품, 의약품, 사료 첨가제, 음용수 첨가제 등으로 활용될 수 있다.

본 발명에서, 상기 담체의 종류는 특별히 제한되지 아니하며 당해 기술 분야에서 통상적으로 사용되는 담체라면 어느 것이든 사용할 수 있다. 상기 담체의 비제한적인 예로는, 식염수, 멸균수, 링거액, 완충 식염수, 알부민 주사 용액, 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 말토 덱스트린, 글리세롤, 에탄올 등을 들 수 있다. 이들은 단독으로 사용되거나 2 종 이상을 혼합하여 사용될 수 있다.

또한, 본 발명의 상기 약학적 조성물은 필요한 경우, 부형제, 희석제, 항산화제, 완충액 또는 정균제 등 기타 약학적으로 허용 가능한 첨가제 들을 첨가하여 사용할 수 있으며, 충진제, 증량제, 습윤제, 붕해제, 분산제, 계면 활성제, 결합제 또는 윤활제 등을 부가적으로 첨가하여 사용할 수 있다.

본 발명의 상기 약학적 조성물은 경구 투여 또는 비경구 투여를 위한 적합한 다양한 제형으로 제제화되어 사용될 수 있다.

상기 경구 투여용 제제의 비제한적인 예로는, 트로키제(troches), 로젠지(lozenge), 정제, 수용성 현탁액, 유성 현탁액, 조제 분말, 과립, 에멀젼, 하드 캡슐, 소프트 캡슐, 시럽 또는 엘릭시르제 등을 들 수 있다.

본 발명의 상기 약학적 조성물을 경구 투여용으로 제제화하기 위하여, 락토오스, 사카로오스, 솔비톨, 만니톨, 전분, 아밀로펙틴(Amylopectin), 셀룰로오스(Cellulose) 또는 젤라틴(Gelatin) 등과 같은 결합제; 디칼슘 포스페이트(Dicalcium phosphate) 등과 같은 부형제; 옥수수 전분 또는 고구마 전분 등과 같은 붕괴제; 스테아르산 마그네슘(Magnesium stearate), 스테아르산 칼슘(Calcium stearate), 스테아릴 푸마르산 나트륨(Sodium stearyl fumarate) 또는 폴리에틸렌 글리콜 왁스(Polyethylene glycol wax) 등과 같은 윤활유 등을 사용할 수 있으며, 감미제, 방향제, 시럽제 등도 사용할 수 있다.

나아가 캡슐제의 경우에는 상기 언급한 물질 외에도 지방유와 같은 액체 담체 등을 추가로 사용할 수 있다.

상기 비경구용 제제의 비제한적인 예로는, 주사액, 좌제, 호흡기 흡입용 분말, 스프레이용 에어로졸제, 연고, 도포용 파우더, 오일, 크림 등을 들 수 있다.

본 발명의 상기 약학적 조성물을 비경구 투여용으로 제제화하기 위하여, 멸균된 수용액, 비수성용제, 현탁제, 유제, 동결 건조 제제, 외용제 등을 사용할 수 있으며, 상기 비수성용제, 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 기름, 에틸올레이트와 같은 주사 가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다.

또한, 보다 구체적으로 본 발명의 상기 약학적 조성물을 주사액으로 제제화하는 경우, 본 발명의 상기 조성물을 안정제 또는 완충제와 함께 물에서 혼합하여 용액 또는 현탁액으로 제조하고 이를 앰플(ampoule) 또는 바이알(vial)의 단위 투여용으로 제제화할 수 있다. 또한, 본 발명의 상기 약학적 조성물을 에어로졸제로 제제화하는 경우, 수분산된 농축물 또는 습윤 분말이 분산되도록 추진제 등이 첨가제와 함께 배합할 수 있다.

또한, 본 발명의 상기 약학적 조성물을 연고, 크림 등으로 제제화하는 경우에는, 동물성 유, 식물성 유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크, 산화 아연 등을 담체로 사용하여 제제화할 수 있다.

본 발명의 상기 약학적 조성물의 약학적 유효량, 유효 투여량은 상기 약학적 조성물의 제제화 방법, 투여 방식, 투여 시간 및/또는 투여 경로 등에 의해 다양해질 수 있으며, 상기 약학적 조성물의 투여로 달성하고자 하는 반응의 종류와 정도, 투여 대상이 되는 개체의 종류, 연령, 체중, 일반적인 건강 상태, 질병의 증세나 정도, 성별, 식이, 배설, 해당 개체에 동시 또는 이시에 함께 사용되는 약물 기타 조성물의 성분 등을 비롯한 여러 인자 및 의약 분야에서 잘 알려진 유사 인자에 따라 다양해질 수 있으며, 당해 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자는 목적하는 치료에 효과적인 투여량을 용이하게 결정하고 처방할 수 있다.

본 발명의 상기 약학적 조성물의 보다 바람직한 효과를 위한 투여량은, 바람직하게는 1일 1 mg/kg 내지 1,000 mg/kg, 보다 바람직하게는 10 mg/kg 내지 500 mg/kg일 수 있다. 본 발명의 상기 약학적 조성물의 투여는 하루에 1 회 투여될 수 있고, 수회에 나누어 투여될 수 있다. 따라서 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.

본 발명의 상기 약학적 조성물의 투여 경로 및 투여 방식은 각각 독립적일 수 있으며, 그 방식에 있어 특별히 제한되지 아니하며, 목적하는 해당 부위에 상기 약학적 조성물이 도달할 수 있는 한 임의의 투여 경로 및 투여 방식에 따를 수 있다. 상기 약학적 조성물은 경구 투여 또는 비경구 투여 방식으로 투여할 수 있다.

상기 비경구 투여하는 방법으로는, 예를 들어 정맥 내 투여, 복강 내 투여, 근육 내 투여, 경피 투여 또는 피하 투여 등을 이용할 수 있으며, 상기 조성물을 질환 부위에 도포하거나 분무, 흡입하는 방법 또한 이용할 수 있으나 이들에 제한되지 아니한다.

본 발명의 상기 약학적 조성물은 바람직하게는 경구 투여 또는 주사 투여될 수 있다.

본 발명의 또 다른 일 구현예에 따르면, 본 발명의 상기 약학적 조성물을 개체에 투여하여 갑상선 질환을 예방 또는 치료하는 방법을 제공한다.

본 발명에서 사용되는 용어, "개체"는 쥐, 가축, 인간 등을 포함하는 포유 동물을 비롯한 모든 동물을 의미한다.

본 발명의 상기 갑상선 질환의 예방 또는 치료 방법에서, 상기 약학적 조성물의 투여량, 투여 경로, 투여 방식 등은 본 발명의 상기 약학적 조성물과 관련하여 상기에서 설명한 바와 동일하다.

본 발명의 또 다른 일 구현예에 따르면, 감수 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 갑상선 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물을 제공한다.

본 발명의 상기 식품 조성물은 특별히 제한되지 아니하며, 건강 기능 식품 조성물을 포함한다.

본 발명의 상기 건강 기능 식품 조성물을 식품 첨가물로 사용할 경우, 상기 조성물을 그대로 첨가하거나 다른 식품 또는 식품 성분과 함께 사용될 수 있고, 통상적인 방법에 따라 적절하게 사용될 수 있다.

상기 식품의 종류는 특별히 제한되지 아니하며, 통상적인 의미에서의 식품을 모두 포함한다. 상기 물질을 첨가할 수 있는 식품의 비제한적인 예로는 육류, 소세지, 빵, 초콜릿, 캔디류, 스낵류, 과자류, 피자, 라면, 기타 면류, 껌류, 아이스크림류를 포함한 낙농제품, 각종 스프, 음료수, 차, 드링크제, 알코올 음료 및 비타민 복합제 등을 들 수 있다.

본 발명의 상기 건강 기능 식품 조성물이 음료 조성물인 경우, 통상의 음료와 같이 여러 가지 향미제 또는 천연 탄수화물 등을 추가 성분으로서 함유할 수 있다. 상기 천연 탄수화물의 비제한적인 예로 포도당, 과당과 같은 모노사카라이드; 말토스, 수크로오스와 같은 디사카라이드; 덱스트린, 사이클로덱스트린과 같은 천연 감미제; 사카린, 아스파르탐과 같은 합성 감미제 등을 들 수 있다. 상기 첨가되는 추가 성분의 비율은 당업자의 선택에 의해 적절하게 결정될 수 있다.

상기 외에 본 발명의 건강 기능 식품 조성물은 여러 가지 영양제, 비타민, 전해질, 풍미제, 착색제, 펙트산 및 그의 염, 알긴산 및 그의 염, 유기산, 보호성 콜로이드 증점제, pH 조절제, 안정화제, 방부제, 글리세린, 알코올, 탄산 음료에 사용되는 탄산화제 등을 함유할 수 있다. 그 밖에 본 발명의 건강 기능 식품 조성물은 천연 과일 주스, 과일 음료 또는 야채 음료 등의 제조를 위한 과육을 함유할 수 있다. 이러한 성분은 독립적으로 사용되거나 2 이상을 조합하여 사용할 수 있다. 이러한 첨가물의 비율 또한 당업자에 의해 적절히 선택될 수 있다.

본 발명에서 사용되는 용어, "개선"은 치료되는 상태와 관련된 파라미터, 예를 들면 증상의 정도를 적어도 감소시키는 모든 행위를 의미한다.

본 발명의 감수 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 조성물은 갑상선 질환을 효과적으로 예방, 개선 또는 치료하는 효과를 나타낸다.

구체적으로, 본 발명의 상기 감수 추출물 또는 이의 분획물을 함유하는 조성물은 갑상선 호르몬, 특히 티록신의 분비를 조절하는 효능이 있어, 갑상선 호르몬 조절 이상 증상을 나타내는 갑상선 질환에 특히 유용하며, 독성이 없고 천연물로부터 유래된 물질이어서 인체에 적용하여도 부작용없이 활용할 수 있는 이점이 있다.

도 1은 TSH 결핍 조건에서, 감수 추출물의 세포 증식에 대한 효과를 확인한 것으로, 도 1a는 FRTL-5 세포에 17β-estradiol (E2) (10 nM)를 처리하지 않거나 단독 처리하거나, 또는 감수의 물 추출물, 감수의 에탄올 추출물 10 μg/mL 또는 100 μg/mL 과 함께 처리하여 24시간 동안 5H 배지에서 배양한 후, WST를 처리하여 490nm에서 흡광도를 측정한 결과이다. 도 1b는 FRTL-5 세포에 17β-estradiol (E2) (10 nM)를 처리하지 않거나 단독 처리하거나, 또는 감수의 물 추출물, 감수의 에탄올 추출물 100 μg/mL과 함께 처리하여 24시간 동안 5H 배지에서 배양한 후 세포의 형태를 100배 배율의 현미경에서 관찰한 도이다.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명한다. 다만, 이들 실시예는 본 발명을 예시적으로 설명하기 위한 것에 불과하므로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 한정되는 것으로 해석되어서는 아니된다.

제조예 1: 감수 추출물의 제조

(1) 감수의 물 추출물

시중의 감수 뿌리를 입수하여, 감수 뿌리 100 g 당 1L의 물을 가하여 환류 추출기를 이용해 100℃에서 2시간 동안 환류 추출하는 과정을 2회 반복하였다. 그 다음, 환류 추출한 결과물을 여과지로 여과한 후 회전 진공 농축기를 이용하여 농축하였다. 농축된 샘플을 물에 녹인 후 -70℃에서 10시간 동안 보관한 다음 동결 건조기를 이용하여 -40℃에서 동결 건조하여 분말로 제조하었다.

(2) 감수의 에탄올 추출물

감수 뿌리 100 g 당 1L의 70% 에탄올을 가하고, 2시간 동안 소니케이션(Sonication) 처리를 한 후, 70시간 동안 침출 추출을 수행한 다음, 여과지로 여과한 후 회전 진공 농축기를 이용하여 농축하였다. 농축된 샘플을 물에 녹인 후 -70℃에서 10시간 동안 보관한 다음 동결 건조기를 이용하여 -40℃에서 동결 건조하여 분말로 제조하었다.

실시예 1: 감수 추출물의 효능을 확인하기 위한 갑상선 세포주 배양

랫트의 갑상선 세포주인 FRTL-5(Rat thyroid follicular cell)을 ATCC사(미국)에서 분양받아 사용하였다. FRTL-5 갑상선 세포주를, 0.5%의 신생 우 혈청(newborn calf serum) 및 1%의 페니실린-스트렙토마이신을 포함하고, 6가지 호르몬 혼합물(10 mU/ml의 TSH, 0.01 mg/ml의 인슐린, 10 nM의 하이드로코르티솔(hydrocortisone), 0.005 mg/ml의 트랜스페린(transferrin), 10 ng/ml의 소마토스탄틴(somatostatin), 10 ng/ml의 글리실-L-히스티딜-L-리신 아세테이트)이 포함된 Ham's F12 배지(이하, 6H 배지)에서, 온도 37℃, CO₂ 5%인 조건에서 배양기에서 배양하였다. 배양액은 23일마다 교환하였고, 세포는 57일마다 계대 배양하였다.

실시예 2: TSH 과잉 조건에서, 감수 추출물 처리에 따른 티록신 분비 감소 확인

상기 제조예 1에서 제조한 감수의 물 추출물 및 에탄올 추출물 각각을 1 mg/ml로 6H 배지에 녹인 후, 0.2 μm의 멤브레인 필터로 여과한 다음, -20℃에서 보관하였다.

상기 실시예 1에서 배양한 FRTL-5 세포를 96 웰-조직 배양 플래이트에 웰당 1.5 ×10⁴ 세포가 되도록 분주하여 24시간 동안 배양한 후, 이를 6H 배지에 옮기고 상기에서 처리한 감수의 물 추출물 또는 에탄올 추출물을 각각 10 μg/ml가 되도록 처리하고, 10분 간 37℃에서 배양하였다. 10분 후 1 nM의 NaI를 배지에 첨가하여 3시간 더 배양하고, 세포 배양액의 상청액을 원심 분리기로 1000 rpm으로 5분 동안 원심 분리하여 상층액을 모아 Total thyroxine(Total T4) ELISA kit(Alpha Diagnostic Intl. Inc, USA)의 각 웰에 25 μl의 standards, control 그리고 상기 상층액 시료를 넣고, 100 μl의 enzyme conjugate를 더 넣어 살짝 흔들어준 후 1시간 동안 실온에서 배양하였다.

그 다음, 상층액을 모두 버리고, 300 μl의 증류수로 웰을 5회 반복하여 세척하였다. 그 다음, 200 μl의 HRP-substrate mix(soln. A 와 B)를 넣고 다시 실온에서 10분간 배양한 후, 50 μl의 stop solution을 넣고 450 nm에서 ELISA reader로 흡광도를 측정하였다.

하기 표 1은 상기 실험 결과를 나타낸 것이다. 하기 표1에서 티록신의 양은 무처리 대조군에서의 티록신 양 대비 백분율로 계산한 수치이다.

시료	티록신 양(%)
대조군	100.0±1.8
감수의 물 추출물	82.3±10.7*
감수의 에탄올 추출물	58.9±6.2***

*P＜0.05, ***P＜0.001

상기 실험 결과, TSH이 존재하는 조건인 6H 배지에서는, 감수 추출물을 처리한 경우 무처리 대조군에 비해 티록신 양이 감소된 것으로 확인되었다.

구체적으로, 6H 배지는 TSH가 함유되어 있어 티록신의 분비가 촉진되는 조건에 해당하는데, 감수의 물 추출물 또는 에탄올 추출물 모두에서 티록신의 분비가 유의성있게 감소한 것으로 확인되었으며, 70% 에탄올 추출에서 티록신 감소 활성이 더욱 강하게 나타났다.

즉, 갑상선 호르몬은 뇌하수체 전엽에서 TSH가 분비되어 피드백 작용에 의해서 조절되는데, 티록신 분비가 과잉되면 TSH의 분비가 억제되어 갑상선 호르몬 분비가 억제된다. 감수 추출물이 6H 배지의 조건에서 티록신을 증가시키지 않고 감소시킨 것은 감수 추출물이 갑상선 호르몬의 피드백을 잘 수용하고 있다는 것을 뒷받침하는 것으로, 본 발명의 감수 추출물이 TSH와 유사한 작용을 하여 갑상선 호르몬의 분비 조절에 효과적으로 사용될 수 있음을 보여준다.

실시예 3: TSH 결핍 조건에서, 감수 추출물 처리에 따른 티록신 분비 증가 확인

상기 실시예 2에 있어서, 하기의 사항을 제외하고는 상기 실시예 2와 동일한 방법으로 실험을 수행하였다.

상기 제조예 1에서 제조한 감수의 물 추출물 및 에탄올 추출물 각각을 1 mg/ml로 5H 배지(6H 배지 중 TSH만이 불포함된 배지)에 녹인 후, 0.2 μm의 멤브레인 필터로 여과한 다음, -20℃에서 보관하였다.

상기 실시예 1에서 배양한 FRTL-5 세포를 96 웰-조직 배양 플래이트에 웰당 1.5 ×10⁴ 세포가 되도록 분주하여 24시간 동안 배양한 후, 이를 5H 배지에 옮기고 상기에서 처리한 감수의 물 추출물 또는 에탄올 추출물을 각각 10 μg/ml가 되도록 처리하였다.

하기 표 2은 상기 실험 결과를 나타낸 것이다. 하기 표2에서 티록신의 양은 무처리 대조군에서의 티록신 양 대비 백분율로 계산한 수치이다.

시료	티록신 양(%)
대조군	100.0±1.8
감수의 물 추출물	110.0±2.3*
감수의 에탄올 추출물	119.6±2.0**

*P＜0.05, **P＜0.01

상기 실험 결과, TSH이 불포함된 조건인 5H 배지에서는 6H 배지에서의 결과와 정반대로, 감수 추출물을 처리한 경우 무처리 대조군에 비해 티록신 양이 증가된 것으로 확인되었다.

구체적으로 감수의 물 추출물 및 에탄올 추출물은 TSH가 함유되어 있지 않은 5H 배지에서 무처리 대조군에 비해 티록신의 분비를 유의성있게 증가시키는 것으로 확인되었으며, 특히 에탄올 추출물의 경우 티록신의 분비 촉진 활성이 더욱 우수하였다. 상기 결과는 갑상선 호르몬이 부족한 상태에서 본 발명의 감수 추출물이 TSH와 유사한 작용하여 갑상선 호르몬의 분비를 조절한다는 것을 뒷받침한다.

실시예 4: TSH 결핍 조건에서, 감수 추출물의 세포 증식 효과 확인

TSH가 포함되지 않은 배지(5H 배지)에서 감수 추출물이 FRTL-5 세포의 증식을 유도하는지를 확인하기 위하여, WST (4-[3-(4-iodophenyl)-2-(4-nitrophenyl)-2H-5-tetrazolio]-1,3-benzene disulfonate) assay (Daeil Lab Service Co., Ltd)를 사용하였다.

먼저 FRTL-5 세포를 96-웰 플레이트에 1.5×104 세포/ml씩 분주하여 6H 배지에서 24시간 동안 배양하였다. 이후, 17β-estradiol (E2) (10 nM)를 처리하지 않거나 단독 처리하거나, 또는 감수의 물 추출물, 감수의 에탄올 추출물 10 μg/mL 또는 100 μg/mL 과 함께 처리하여 24시간 동안 5H 배지에서 배양하였다. 이 후, WST를 2시간 동안 더 처리하고, 490nm에서 흡광도를 측정하였다. 그 결과, 세포에 감수의 물 추출물, 감수의 에탄올 추출물 10 μg/mL 또는 100 μg/mL를 24시간 동안 처리 후에, 상대적인 세포의 수는 농도 의존적으로 증가하였다(도 1a). 또한, E2 (10 nM)과 감수의 물 추출물, 감수의 에탄올 추출물을 함께 처리한 경우, 감수 추출물에 의한 세포 증식이 더욱 증가하였다.

또한, TSH가 포함되지 않은 배지(5H 배지)에서 감수 추출물이 세포 증식에 미치는 영향을 확인하기 위하여, 세포 형태를 관찰하였다. 이를 위해, FRTL-5 세포는 96-웰 플레이트에 1.5×104 세포/ml씩 분주하여 6H 배지에서 24시간 동안 배양하였다. 이후, 17β-estradiol (E2) (10 nM)를 처리하지 않거나 단독 처리하거나, 또는 감수의 물 추출물, 감수의 에탄올 추출물 100 μg/mL과 함께 처리하여 24시간 동안 5H 배지에서 배양한 후 세포의 형태를 100배 배율의 현미경에서 관찰하였다. 그 결과, 무처리 대조군과 비교하여, 감수의 물 추출물, 감수의 에탄올 추출물 100 μg/mL을 처리한 세포에서 세포의 수와 부피가 증가하였다(도 1b). 또한, E2 (10 nM)과 감수 추출물을 함께 처리한 경우, 세포 수와 부피가 더욱 증가하였다. 상기 결과를 통해 감수 추출물이 5H 배지에서 FRTL-5 세포의 증식을 유도함을 확인하였으며, 이러한 효과는 estradiol과 시너지 효과를 가짐을 확인하였다.

실시예 5: 감수 추출물의 세포 독성 확인

감수 추출물의 세포 독성 여부를 확인하기 위하여 다음과 같은 실험을 수행하였다.

24-웰 플레이트에 FRTL-5 세포를 1.5×10⁴ 세포/ml씩 분주하여 24시간 동안 배양한 후, 10 g/ml 내지 100 g/ml의 농도로 희석시킨 상기 제조예 1에서 제조한 감수 추출물이 첨가된 새 배지로 교체하여 다시 24시간 동안 배양하였다. 그 다음, 상기 배지에 MTT(3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐테트라졸륨 브로마이드) 5 mg/ml를 첨가한 후 37℃, 5% CO₂ 배양기에서 2시간 동안 배양한 다음, 형성된 포마잔(fomazan)을 DMSO로 녹이고, 96 웰 플레이트로 옮긴 후 570 nm에서 ELISA reader로 흡광도를 측정하였다.

하기 표 3은 상기 실험 결과를 나타낸 것이다.

시료	IC50(㎍/㎖)
감수의 물 추출물	37.1
감수의 에탄올 추출물	34.3

상기 실험 결과, 감수의 물 추출물 및 에탄올 추출물을 처리했을 때, 세포 생존율이 50%가 되는 농도와 갑상선 호르몬 조절 활성을 나타내는 농도를 비교하면, 갑상선 호르몬 조절 활성을 나타내는 농도에서는 세포 독성은 나타내지 않는 것으로 확인되었다.

실시예 6: 감수 추출물의 급성 독성 확인- in vivo

감수 추출물의 급성 독성 여부를 확인하기 위하여 다음과 같은 실험을 수행하였다.

실험 동물로 6주령의 특정 병원체 부재(specific pathogen-free, SPF) SD계 랫트를 사용하여 급성 독성 실험을 수행하였다. 각군당 2 마리씩의 랫트에 제조예 1에서 제조한 감수 추출물을 각각 0.5% 메틸셀룰로즈 용액에 현탁하여 10g/kg/㎖의 용량으로 1회 단회 경구투여 하였다. 시험 물질 투여 후 랫트의 폐사 여부, 임상 증상, 체중 변화를 관찰하고 혈액학적 검사 및 혈액 생화학적 검사를 실시하였으며, 부검하여 육안으로 복강 장기 및 흉강 장기의 이상 여부를 관찰하였다.

상기 실험 결과, 감수의 물 추출물 또는 에탄올 추출물을 투여한 모든 랫트에서 특기할 만한 임상 증상이나 폐사된 동물은 없었으며, 체중 변화, 혈액 검사, 혈액 생화학 검사, 부검 소견 등에서도 독성 변화는 관찰되지 않았다.

구체적으로, 본 발명의 감수 추출물은 모두 랫트에서 10g/kg 까지도 독성 변화를 나타내지 않았으며, 경구 투여 최소 치사량(LD₅₀)은 추출물 18g/kg 이상으로 판단되었다. 랫트의 복강에 감수의 70% 에탄올 추출물(에탄올은 증발시켜 없앰)을 주사한 경우의 LD₅₀은 18.46g/kg이었다.

따라서, 본 발명의 감수 추출물은 1회에 지나치게 과량으로 투여하지 않는 한, 생체 내에서 독성을 일으키지 않는 것으로 확인되었다

본 명세서는 본 발명의 기술 분야에서 통상의 지식을 가진 자이면 충분히 인식하고 유추할 수 있는 내용은 그 상세한 기재를 생략하였으며, 본 명세서에 기재된 구체적인 예시들 이외에 본 발명의 기술적 사상이나 필수적 구성을 변경하지 않는 범위내에서 보다 다양한 변형이 가능하다. 따라서 본 발명은 본 명세서에서 구체적으로 설명하고 예시한 것과 다른 방식으로 실시될 수 있으며, 이는 본 발명의 기술 분야에 통상의 지식을 가진 자이면 이해할 수 있는 사항이다.

Claims (12)

1. 감수(Euphorbia kansui Liou ex Wang) 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 갑상선 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
   
2. 제1항에 있어서, 상기 감수 추출물은 감수를 물, C₁ 내지 C₄의 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출하여 수득한 것인 약학 조성물.
   
3. 제2항에 있어서, 상기 감수 추출물은 감수를 물 또는 에탄올로 추출하여 수득한 것인 약학 조성물.
   
4. 제1항에 있어서, 상기 감수 추출물은 감수의 뿌리를 추출하여 수득한 것인 약학 조성물.
   
5. 제1항에 있어서, 상기 감수 추출물 또는 이의 분획물은 티록신의 분비를 조절함으로써 갑상선 질환을 예방 또는 치료하는 것인 약학 조성물.
   
6. 제1항에 있어서, 상기 갑상선 질환은 갑상선 기능 항진증, 갑상선 기능 저하증, 갑상선염, 갑상선 결절 및 갑상선암으로 이루어진 군에서 선택되는 질환인 약학 조성물.
   
7. 제1항 내지 제6항 중 어느 하나의 항의 상기 약학 조성물을 인간을 제외한 개체에 투여하는 것을 포함하는 갑상선 질환을 예방 또는 치료하는 방법.
   
8. 감수(Euphorbia kansui Liou ex Wang) 추출물 또는 이의 분획물을 유효 성분으로 함유하는 갑상선 질환의 예방 또는 개선용 식품 조성물.
   
9. 제8항에 있어서, 상기 감수 추출물은 감수를 물, C₁ 내지 C₄의 알코올 또는 이들의 혼합 용매로 추출하여 수득한 것인 식품 조성물.
   
10. 제9항에 있어서, 상기 감수 추출물은 감수를 물 또는 에탄올로 추출하여 수득한 것인 식품 조성물.
    
11. 제8항에 있어서, 상기 감수 추출물은 감수의 뿌리를 추출하여 수득한 것인 식품 조성물.
    
12. 제8항에 있어서, 상기 갑상선 질환은 갑상선 기능 항진증, 갑상선 기능 저하증, 갑상선염, 갑상선 결절 및 갑상선암으로 이루어진 군에서 선택되는 질환인 식품 조성물.

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