KR100840723B1 - 베타2 활성을 촉진하는 천식 치료용 약용식물 추출물 - Google Patents
베타2 활성을 촉진하는 천식 치료용 약용식물 추출물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 약용식물로부터 얻은 베타2 촉진 활성 추출물에 관한 것으로 더욱 상세하게는 전통적으로 동양에서 사용해온 약용식물인 감수 (Euphorbiae kansui), 전호 (Anthriscus sylvestris), 파두 (Croton Tiglium), 천오 (Aconitum carmichaeli), 팥꽃나무 (Daphne genkwa), 갯메꽃 (Calystegia soldanella), 사람주나무 (Sapium japonicum)로부터 베타2 수용체의 활성을 촉진하여 천식 질환의 증상인 기도관 수축을 완하시킬 수 있는 활성 추출물과 이를 효율적으로 추출하는 방법, 그리고 그 추출물들을 유효성분으로 함유하는 천식 예방 및 치료의 원료, 건강식품, 생약제에 관한 것이다.
감수 (Euphorbiae kansui), 전호 (Anthriscus sylvestris), 파두 (Croton Tiglium), 천오 (Aconitum carmichaeli), 팥꽃나무 (Daphne genkwa), 갯메꽃 (Calystegia soldanella), 사람주나무 (Sapium japonicum), 베타2 수용체, 베타2 촉진, 천식 예방 및 치료
Description
도 1은 형광단백질이 부착된 베타2 수용체 과발현 세포주에서 약용식물 처리에 따라 활성이 촉진된 수용체가 세포질 내로 이동하는 것을 형광현미경으로 관찰한 사진이다.
도 2는 감수 (Euphorbiae kansui) 추출물의 농도별 베타2 수용체 활성 촉진 정도를 나타낸 그래프이다.
도 3은 전호 (Anthriscus sylvestris) 추출물의 농도별 베타2 수용체 활성 촉진 정도를 나타낸 그래프이다.
도 4는 파두 (Croton Tiglium) 추출물의 농도별 베타2 수용체 활성 촉진 정도를 나타낸 그래프이다.
도 5는 천오 (Aconitum carmichaeli) 추출물의 농도별 베타2 수용체 활성 촉 진 정도를 나타낸 그래프이다.
도 6은 팥꽃나무 (Daphne genkwa) 추출물의 농도별 베타2 수용체 활성 촉진 정도를 나타낸 그래프이다.
도 7은 갯메꽃 (Calystegia soldanella) 추출물의 농도별 베타2 수용체 활성 촉진 정도를 나타낸 그래프이다.
도 8은 사람주나무 (Sapium japonicum) 추출물의 농도별 베타2 수용체 활성 촉진 정도를 나타낸 그래프이다.
본 발명은 약용식물로부터 얻은 베타2 수용체 활성 촉진용 추출물에 관한 것으로 더욱 상세하게는 감수 (Euphorbiae kansui), 전호 (Anthriscus sylvestris), 파두 (Croton Tiglium), 천오 (Aconitum carmichaeli), 팥꽃나무 (Daphne genkwa), 갯메꽃 (Calystegia soldanella), 사람주나무 (Sapium japonicum)로부터 베타2 수용체 활성을 촉진하여, 천식 환자들에서 나타나는 기도관 수축을 완화시킬 수 있는 추출물과 이를 효율적으로 추출하는 방법, 그리고 그 추출물을 함유하는 천식 예방 및 치료의 원료, 건강식품, 생약제에 관한 것이다.
천식은 기관지의 과민반응에 의해 기관지를 비롯한 기도점막에 염증이 생겨 부어오르면서 기관지가 좁아져 기침과 호흡곤란이 발작적으로 나타나는 호흡기계 질환으로서 산업화된 국가에서 많이 발생하며 발병률과 사망률이 계속 증가하고 있다. 천식은 모든 연령층에서 발생하는 질환이며, 세계인구의 5~10%가 천식을 앓고있고, 매년 18만명이 이 질환으로 사망하며, 한국에서도 매년 4천여명이 사망하는 것으로 보고되었다. 미국의 경우, 1980년대 성인 670만명, 소아 400 만명에서 1990년대 성인 1400 만명, 소아 520 만명으로 증가한 것으로 나타났고, 2000 년에 이 질환에 대응하기 위해 총 14조 5천억달러가 소모된 것으로 보고되었다.
이러한 천식을 치료하기 위해 사용되는 약물로는 크게 기관지 확장제, 항염증제, 항알레르기제가 있으며, 이 중 기관지 확장제는 아드레날린부터 시작하여 베타2 수용체를 촉진하는 물질이 오래전부터 사용되어져 왔고, 지속적으로 개발되어 최근까지도 천식 치료에 있어서 필수적인 약물로 사용되고 있다.
베타2-촉진제는 대표적인 기도 근육 이완제이며, 천식환자에 대해 응급상황은 물론, 만성적인 천식증상에도 이용되고 있는 약물로서, 베타2 수용체를 활성화시킴으로써 세포내 c-AMP를 상승시키고, 기도 평활근을 이완시킴으로써 기관지 확장 효과를 보인다.
현재 가장 주요하게 사용되고 있는 베타2 수용체 촉진제는 salmeterol, formoterol 등이 있으며, 이 약물들은 1회 투여시 12시간의 지속효과를 지님으로써 단독 투여 이외에 부신피질호르몬과 복합처방제로서도 널이 이용되고 있다. 세계적으로 시장 점유율이 높은 이 약물들은 효능 또한 우수하나, 심계항진, 근육경련, 불안 등과 같은 부작용으로 투여시 불쾌감을 호소하는 환자들이 많으며, 이에 더해 투여시 오히려 면역반응 증가로 인해 아프리카계 미국인의 경우 사망 사례가 보고되어, 처방에 있어서 제한사항이 규정되어 있는 상태이다. 따라서, 기존의 베타2 수용체 촉진제보다 효능이 우수하고, 부작용은 적은 새로운 약물의 개발이 절실히 요구된다.
전통의학과 민간에서 사용되고 있는 천연물 약제들을 이용할 경우 오랫동안 사용되어져 온 것이기 때문에 독성이 나타날 확율이 낮다는 장점 뿐만 아니라 확인된 효능을 바탕으로 하여 새로운 활성을 발견할 가능성이 매우 높다.
따라서, 경제적 효용가치가 크고 부작용이 적은 천연체제를 이용하여 보다 효율적인 천식 치료 및 예방법을 찾기 위하여, 베타2 수용체 촉진제를 탐색하게 되었다.
본 발명에서는 천식 치료 효과를 가지면서도 salmeterol, formoterol 과 같은 부작용을 최소화한 물질을 찾기 위해 한방과 민간에서 사용되어져온 모든 약용식물 수천종의 추출물을 대상으로 집중적인 탐색을 수행한 결과, 감수 (Euphorbiae kansui), 전호 (Anthriscus sylvestris), 파두 (Croton Tiglium), 천오 (Aconitum carmichaeli), 팥꽃나무 (Daphne genkwa), 갯메꽃 (Calystegia soldanella), 사람주나무 (Sapium japonicum) 등 각각의 추출물들이 베타2 수용체를 선택적으로 활성화하는 것을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 감수 (Euphorbiae kansui), 전호 (Anthriscus sylvestris), 파두 (Croton Tiglium), 천오 (Aconitum carmichaeli), 팥꽃나무 (Daphne genkwa), 갯메꽃 (Calystegia soldanella), 사람주나무 (Sapium japonicum)에서 분리한 추출물의 베타2 수용체 선택적 활성 촉진을 그 특징으로 한다.
본 발명에서 감수 (Euphorbiae kansui), 전호 (Anthriscus sylvestris), 파두 (Croton Tiglium), 천오 (Aconitum carmichaeli), 팥꽃나무 (Daphne genkwa), 갯메꽃 (Calystegia soldanella), 사람주나무 (Sapium japonicum)의 추출물을 제조함에 있어서,
(1) 감수 (Euphorbiae kansui), 전호 (Anthriscus sylvestris), 파두 (Croton Tiglium), 천오 (Aconitum carmichaeli), 팥꽃나무 (Daphne genkwa), 갯메 꽃 (Calystegia soldanella), 사람주나무 (Sapium japonicum)을 건조하여 분쇄하는 단계
(2) 메탄올을 약용식물 함량 대비 5~10 배량을 넣어 추출하는 단계 및,
(3) 메탄올 추출용액을 여과지를 사용하여 여과한 뒤 감압농축하는 단계를 포함하는 감수 (Euphorbiae kansui), 전호 (Anthriscus sylvestris), 파두 (Croton Tiglium), 천오 (Aconitum carmichaeli), 팥꽃나무 (Daphne genkwa), 갯메꽃 (Calystegia soldanella), 사람주나무 (Sapium japonicum)로부터 베타2 수용체 촉진 효능을 지닌 추출물을 분리하는 방법을 또 다른 특징으로 한다.
본 발명은 상기 추출방법에 따라 분리된 감수 (Euphorbiae kansui), 전호 (Anthriscus sylvestris), 파두 (Croton Tiglium), 천오 (Aconitum carmichaeli), 팥꽃나무 (Daphne genkwa), 갯메꽃 (Calystegia soldanella), 사람주나무 (Sapium japonicum) 추출물들을 유효성분으로 하는 베타2 수용체 활성을 촉진하는 우수한 효과가 있으므로 천식의 예방과 치료의 원료, 건강식품, 생약제 등으로 사용하는 것을 포함한다.
이와 같이 본 발명을 더욱 상세히 설명하면 다음과 같다.
본 발명은 베타2 수용체 촉진효과의 측정 방법으로서 베타2 아드레날린 수용체를 과발현 시킨 사람골아세포인 U-2 OS 세포주에 처리하여, 베타2 활성을 우수하 게 촉진하는 감수 (Euphorbiae kansui), 전호 (Anthriscus sylvestris), 파두 (Croton Tiglium), 천오 (Aconitum carmichaeli), 팥꽃나무 (Daphne genkwa), 갯메꽃 (Calystegia soldanella), 사람주나무 (Sapium japonicum) 추출물에 관한 것이다.
즉, 감수 (Euphorbiae kansui), 전호 (Anthriscus sylvestris), 파두 (Croton Tiglium), 천오 (Aconitum carmichaeli), 팥꽃나무 (Daphne genkwa), 갯메꽃 (Calystegia soldanella), 사람주나무 (Sapium japonicum)로부터 얻은 추출물이 베타2 수용체 활성을 촉진하는 효과를 가지고 있는 것을 처음으로 관찰하여 상기 조성물을 유효성분으로 함유하는 베타2 수용체 활성 촉진효과를 지닌 활성 조성물을 개발하였다.
본 발명에 따른 활성 조성물 이외에도 약학적으로 허용 가능한 담체 또는 부형제를 사용하여 정제, 산제, 과립, 캅셀제, 흡입제, 현탁액, 유화액 또는 비경구 투여용의 단위 투여형 또는 수회 투여형 제제로 제형화하여 사용할 수 있다.
이하 본 발명을 실시예에 의거하여 더욱 상세히 설명하겠는 바, 본 발명이 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 감수 (Euphorbiae kansui), 전호 (Anthriscus sylvestris), 파두 (Croton Tiglium), 천오 (Aconitum carmichaeli), 팥꽃나무 (Daphne genkwa), 갯메꽃 (Calystegia soldanella), 사람주나무 (Sapium japonicum) 의 추출물 분리
건조하여 분쇄한 감수 (Euphorbiae kansui), 전호 (Anthriscus sylvestris), 파두 (Croton Tiglium), 천오 (Aconitum carmichaeli), 팥꽃나무 (Daphne genkwa), 갯메꽃 (Calystegia soldanella), 사람주나무 (Sapium japonicum)를 함량대비 5~10 배량의 메탄올을 넣어 24시간 동안 침지하여 추출물을 얻고, 이 추출물을 40 도에서 감압농축하여 메탄올을 제거한 후 사용하였다.
실시예 2: 베타2 수용체 활성의 정량적 마커
사람골아세포인 U2-OS 세포주에 베타2 수용체 유전자와 신호전달과정 말단에서 활성화되는 SRE에 luciferase 염기서열을 결합한 유전자를 과발현하여, 베타2 수용체가 활성화되면 결과적으로 luciferase의 발현이 증가하도록 하였고, 활성화 정도의 측정 기준으로 luciferase의 기질을 넣어 발생하는 luminescence의 세기를 이용하였다. 이와는 별도로 현미경으로 활성화된 베타2 수용체가 세포막에서 세포질 내로 이동하는 것을 측정하기 위하여 사람골아세포인 U2-OS 세포주에 카르복실기 말단에 녹색형광단백질 유전자를 포함하는 베타2 수용체를 과발현시켜 사용하였다.
실시예3. 베타2 수용체 활성의 측정.
활성화된 베타2 수용체를 형광 현미경을 이용하여 직접 관찰하기 위해서 먼저 사람골아세포인 U-2 OS 세포를 10% FBS (fetal bovine serum)이 들어있는 DMEM 배양액에서 세포 배양한다. 카르복실기 말단에 녹색형광단백질 유전자를 포함하는 베타2 아드레날린 수용체가 과발현 되도록 배양 중인 세포에 유전자를 도입하고 48시간 후에 대조물질인 이소프로테레놀, 살부타몰, 또는 감수 (Euphorbiae kansui), 전호 (Anthriscus sylvestris), 파두 (Croton Tiglium), 천오 (Aconitum carmichaeli), 팥꽃나무 (Daphne genkwa), 갯메꽃 (Calystegia soldanella), 사람주나무 (Sapium japonicum) 추출물을 각각 처리하여 형광현미경을 이용하여 세포막에 분포하고 있던 형광단백질이 세포질 내로 이동하는 것으로 수용체의 활성을 확인하였다 (도1).
추출물의 농도에 따른 촉진효과를 측정하기 위하여 먼저 사람골아세포인 U-2 OS 세포를 10% FBS (fetal bovine serum)이 들어있는 DMEM 배양액에서 세포배양한다. 24시간 후 베타2 수용체 유전자와 SRE-luciferase 유전자를 도입하여 과발현 시킨다. 베타2 수용체 활성은 감수 (Euphorbiae kansui), 전호 (Anthriscus sylvestris), 파두 (Croton Tiglium), 천오 (Aconitum carmichaeli), 팥꽃나무 (Daphne genkwa), 갯메꽃 (Calystegia soldanella), 사람주나무 (Sapium japonicum)로부터 추출한 물질은 유전자 도입 후 48 시간 후에 처리하여 대조군과 비교하였다 (도2-8).
이상에서 설명한 바와 같이, 본 발명에 따른 감수 (Euphorbiae kansui), 전 호 (Anthriscus sylvestris), 파두 (Croton Tiglium), 천오 (Aconitum carmichaeli), 팥꽃나무 (Daphne genkwa), 갯메꽃 (Calystegia soldanella), 사람주나무 (Sapium japonicum) 추출물들은 베타2 아드레날린 수용체의 활성 촉진 효과가 우수하므로 이들을 유효성분으로 함유하는 천식 예방 및 치료의 원료, 건강식품, 생약제로 사용할 수 있다.
Claims (7)
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- 감수, 파두, 천오, 팥꽃나무, 갯메꽃, 사람주나무 추출물로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 천식 예방 및 개선용 건강기능식품.
- 감수, 파두, 천오, 팥꽃나무, 갯메꽃, 사람주나무 추출물로 구성된 군으로부터 선택된 어느 하나를 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 하는 천식 예방 및 치료용 약학조성물.
- 제2항에 있어서, 베타2 수용체 활성 촉진이 있음을 특징으로 하는 천식 예방 및 개선용 건강기능식품.
- 제3항에 있어서, 베타2 수용체 활성 촉진이 있음을 특징으로 하는 천식 예방 및 치료용 약학조성물.
- 제2항 또는 제4항에 있어서, 감수, 파두, 천오, 팥꽃나무, 갯메꽃 및 사람주나무 추출물의 농도가 1 내지 10 ㎍/㎖ 임을 특징으로 하는 천식 예방 및 개선용 건강기능식품.
- 제3항 또는 제5항에 있어서, 감수, 파두, 천오, 팥꽃나무, 갯메꽃 및 사람주나무 추출물의 농도가 1 내지 10 ㎍/㎖ 임을 특징으로 하는 천식 예방 및 치료용 약학조성물.
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