KR101592084B1 - 식물 추출물을 함유하는 화장료 조성물 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 식물 추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로서, 감국, 곰의말채 및 애기닥나무의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유함으로써, 바람직하게는 상기 감국, 곰의말채 및 애기닥나무로부터의 식물 추출물을 각각 1:1:1로 혼합하는 것을 특징으로 함으로써, 티로시나아제의 활성을 억제하여 피부 노화방지용 및 미백용 화장료 조성물로써 유용하게 이용될 수 있다.
Description
본 발명은 식물 추출물을 함유하는 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 애기닥나무, 곰의말채 및 감국의 혼합 추출물을 이용하여 멜라닌 생합성 과정에 핵심적으로 작용하는 티로시나아제(tyrosinase) 활성 및 그에 따른 멜라닌 색소의 생성을 효과적으로 억제함으로써 피부 노화 방지 및 미백 효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.
사람의 피부색은 주로 피부 세포 속에 함유되어 있는 멜라닌(melanin) 색소의 양에 따라 크게 좌우된다. 멜라닌 색소가 많은 사람은 갈색 또는 검은색 피부를 갖는 반면, 멜라닌 색소가 극히 적은 사람은 백반증의 원인이 된다. 멜라닌 색소는 피부의 기저막에 존재하는 멜라노사이트(melanocyte)라는 색소 세포에서 티로시나아제(tyrosinase)에 의해 티로신(tyrosine)으로부터 생성된다. 멜라닌 색소는 과도한 자외선으로부터 피부를 보호함으로써 광선에 의한 피부손상, 피부암의 발생을 억제하는 중요한 역할을 한다. 그러나 일광, 호르몬변화, 염증, 약제 등에 의해 멜라닌이 과다하게 생성되는 경우 피부의 색소가 침착되며, 이로 인해 미용상 여러 가지 문제를 야기한다. 예를 들어, 피부의 과색소 질환인 기미나 주근깨 등은 멜라닌 색소의 양이 증가한 것에 기인한 것으로, 이는 멜라닌 색소의 생성과정이 촉진되거나 멜라닌 세포의 수가 증가하였다는 것을 의미한다.
따라서, 최근에는 이러한 문제점을 예방 및 개선하기 위한 여러 미백용 화장품, 의약품 등이 개발되어 시판되고 있다. 현재 피부 미용을 위한 미백제의 개발에 있어서, 생성된 멜라닌 색소를 환원시켜 탈색하는 방법과 멜라닌 색소를 형성하는 효소인 티로시나아제의 활성을 억제하는 방법이 알려져 있다. 그러나 멜라닌 색소를 환원시키기 위해 사용되는 토코페롤(tocopherol) 등을 사용한 미백제는 멜라닌 색소의 탈색효과가 미미한 것으로 알려져 있다. 따라서 티로시나아제의 활성을 저해시킴으로써 멜라닌 색소의 생성을 억제하는 저해제가 주목받고 있다.
티로시나아제는 모노페놀(monophenol)류를 산화하는 반응을 촉매하는 효소로 고등동물의 멜라닌 세포 속에 들어있다. 이 효소에 의해 티로신은 산화되어 일련의 화학반응, 산화 등을 거쳐 멜라닌 색소가 생성되게 된다. 이 멜라닌 색소는 갈색이나 흑색을 띠는 것으로 생체 내에서 과량의 빛을 흡수하게 하여 피부 미용에 나쁜 영향을 미치게 된다. 티로시나아제 효소의 활성을 억제시키면 멜라닌 색소의 생성을 억제할 수 있다는 점에 착안하여, 종래의 화장품 분야에서는 천연 미백 추출물로서 천연 식물 추출물 등을 티로시나아제의 활성저해물질로 이용하고 있다.
따라서, 본 발명은 상기한 종래 기술의 문제점을 해결하기 위해 이루어진 것으로서, 본 발명의 목적은 티로시나아제의 활성을 억제하고 멜라닌 생성을 저해함으로서 우수한 피부 노화 방지 및 피부 미백효과를 갖고, 안정성에 문제가 없는 식물 추출물을 함유하는 피부 노화 방지용 및 미백용 화장료 조성물을 제공하는데 있다.
상기와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명의 식물 추출물인 혼합추출물을 함유하는 미백용 화장료 조성물은, 감국, 곰의말채 및 애기닥나무의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 한다.
바람직하게는, 상기 감국, 곰의말채 및 애기닥나무로부터의 혼합 추출물은, 각각 1:1:1로 혼합되는 것을 특징으로 한다.
삭제
바람직하게는, 상기 혼합 추출물은, 미백용 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.0001 내지 30.0%로 포함되는 것을 특징으로 한다.
상술한 바와 같이, 본 발명에 의한 식물 추출물인 혼합추출물을 함유하는 피부 노화 방지용 및 미백용 화장료 조성물에 따르면, 애기닥나무, 곰의말채 및 감국의 혼합 추출물을 혼합하여 티로시나아제의 활성을 억제함으로써 피부 노화방지용 및 미백용 화장료 조성물로서 유용하게 이용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 식물 추출물을 함유하는 화장료 조성물이 티로시나아제 활성 저해율(%)에 미치는 영향을 나타낸 그래프이다.
이하, 본 발명의 식물 추출물을 함유하는 피부 노화 방지용 및 미백용 화장료 조성물에 대하여 첨부된 도면을 참조하여 상세히 설명하기로 한다.
본 발명의 일 실시예에 따른 미백용 화장료 조성물은 애기닥나무 추출물, 곰의말채 추출물 및 감국 추출물의 혼합 추출물을 포함하여 이루어진다. 바람직하게는, 본 발명의 일 실시예에 따른 피부 노화 방지용 및 미백용 화장료 조성물은 애기닥나무 추출물, 곰의말채 추출물 및 감국 추출물을 각각 1:1:1로 혼합하여 이루어진다.
애기닥나무(Broussonetia kazinokivar. humilis)는 뽕나무과에 속하는 식물로서, 이의 천연, 잡종 또는 변종을 포함한 뿌리, 줄기, 잎 또는 열매 등이 포함된 것을 말한다. 애기닥나무는 한국이 원산지로 위봉산, 내장산, 울릉도 및 완도에서 자라는 낙엽활엽관목이다. 덩굴성 줄기가 1m 정도 자라며 잎은 어긋나기를 하며 달걀형이거나 타원형이며 끝은 길게 뾰족하며 아랫부분은 둥글거나 심장모양이고 가장자리에는 톱니가 있고 앞면은 거칠며 길이는 5~8cm인 식물이다. 꽃은 암수한그루로 5~6월에 핀다. 수꽃화서는 어린가지 아랫부분에 달리며 길이는 1.5cm이며 타원형이고 암꽃화서는 잎겨드랑에서 나오며 둥글다. 수꽃은 수술이 4개이며 암꽃은 끝이 2~4갈래로 갈라진다. 열매는 6~7월에 붉게 익으며 둥글고 지름은 6~7mm이다.
곰의말채(Corus macrophylla)는 층층나무과에 속하는 식물로서, 이의 천연, 잡종 또는 변종을 포함한 뿌리, 줄기, 잎 또는 열매 등이 포함된 것을 말한다. 곰의말채는 한국을 비롯한 중국, 일본, 히말라야 등지에 분포하는 낙엽활엽교목으로 우리나라 중부 이남의 숲 속에서 자라며 음지와 양지를 가리지 않고 해변 및 도심지에서도 양호한 생장을 보인다. 높이 15m 에 달하고 수피는 회갈색으로 세로로 불규칙하게 갈라지고 마주나게 달리는 잎은 넓은 타원형으로 가장자리가 밋밋하고 뒷면에 회백색을 띤다. 양면, 특히 뒷면에 털이 많고 측맥이 6~10쌍으로 말채나무보다 많다. 양화서로 7~8월에 가지 끝에서 산형화서로 황백색의 꽃이 달린다. 화서에는 털이 없고 피침형의 꽃잎이 있다. 핵과인 열매는 10월에 흑색으로 익는다.
감국(Chrysanthemumindicum)은 국화과에 속하는 식물로서, 이의 천연, 잡종 또는 변종을 포함한 뿌리, 줄기, 잎 또는 열매 등이 포함된 것을 말한다. 감국은 전국의 산과 들에서 자라는 다년생 초본이다. 생육환경은 양지 혹은 반그늘의 풀숲에서 자라며 키는 30~80cm이고, 잎은 길이 3~5cm, 폭 2.5~4cm이며 새의 날개처럼 깊게 갈라지고 끝에 톱니가 있다. 꽃은 황색으로 줄기와 가지 끝에 펼쳐지듯 뭉쳐서 달리며 지름은 2.5cm 정도이다. 열매는 12월경에 맺으며 작은 종자들이 많이 들어 있다.
이에 본 발명자들은, 피부 미백에 효능이 있는 식물성 천연물질을 찾고자 제주도 자생 식물 추출물을 연구한 결과, 본 발명의 애기닥나무, 곰의말채 및 감국의 혼합추출물이 티로시나아제의 활성을 억제하고 멜라닌 생성을 저해함을 확인함으로써 본 발명을 완성하였다.
본 발명에서 사용된 용어, "추출물(extract)"은 천연물로부터 분리된 티로시나아제 활성 억제 및 멜라닌 생성을 억제하는 활성을 가지는 물질을 말한다. 또한 본 발명에서 추출물은 추출액뿐만 아니라 이의 건조 분말 또는 이를 이용하여 제형화된 모든 형태를 포함하는 의미로 사용된다.
본 발명에서 식물 추출물은 물, 유기 용매 또는 이의 혼합 용매를 사용하여 추출할 수 있으며, 바람직하게는 유기 용매를 사용하여 추출할 수 있다. 추출한 액은 액체 형태로 사용하거나 또는 농축 및/또는 건조하여 사용할 수 있다.
유기용매를 사용하여 추출하는 경우, 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 부탄올, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, N, N-디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합용매인 유기용매를 사용하며, 추출물의 유효 성분이 파괴되지 않거나 최소화된 조건에서 실온 또는 가온하여 추출할 수 있다. 추출 방법은 예를 들어, 냉침 추출, 초음파 추출, 환류 냉각 추출 등이 있으나, 이에 한정되지 않는다.
여과는 추출액으로부터 부유하는 고체 입자를 제거하는 과정으로, 면, 나일론 등을 이용하여 입자를 걸러 내거나 한외여과, 냉동여과법, 원심분리법 등을 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 크로마토그래피)에 의한 분리 과정을 추가로 포함할 수 있다. 여액을 건조하는 단계는 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조, 감압건조, 포말건조, 고주파건조, 적외선건조 등을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 경우에 따라, 최종 건조된 추출물을 분쇄하는 공정을 추가할 수 있다.
본 발명의 일 실시예에 있어서, 본 발명의 애기닥나무, 곰의말채 및 감국 추출물의 혼합 추출물은 건조된 애기닥나무와 곰의말채 및 감국의 혼합 시료를 조말로 하여 무게(㎏)의 3배 내지 20배, 바람직하게는 3배 내지 15배의 물; C1 내지 C4의 저급 알코올 또는 이들의 혼합용매, 바람직하게는 에탄올 또는 메탄올 용매; 10 내지 40℃, 바람직하게는 15 내지 37℃ 추출 온도; 5시간 내지 15일, 바람직하게는 3일 내지 14일의 시간; 1회 내지 5회, 바람직하게는 1회 내지 3회의 회수; 냉침, 초음파 추출, 환류 냉각 추출, 바람직하게는 냉침 추출 방법을 이용하여 수득한 추출액을 여과, 감압 농축함으로써 수득하였다. 상기 제조 방법에 의하여 얻어진 애기닥나무 추출물, 곰의말채 추출물 및 감국 추출물의 혼합물은 티로시나아제의 활성 및 멜라닌 생성을 효과적으로 억제하는 바, 피부 노화를 방지하고 피부의 미백 효과를 발휘한다. 또한, 상기 식물 추출물은 독성 및 부작용이 거의 없으므로 본 발명의 화장료 조성물에 안심하고 사용할 수 있다. 상기 제조 방법에 의하여 얻어진 애기닥나무 추출물, 곰의말채 추출물 및 감국 추출물의 혼합 추출물은 본 발명의 조성물의 전체 중량에 대하여 0.0001 내지 5 중량%, 바람직하게는 0.001 내지 5 중량%, 보다 바람직하게는 0.001 내지 3중량%로 포함될 수 있다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다. 하기 실시예는 단지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서 본 발명을 이에 제한하고자 함이 아니다.
실시예
1 : 본 발명에 따른 물 가용 추출물의 제조
완전 건조시킨, 애기닥나무, 곰의말채 및 감국 혼합시료 1kg을 증류수 3ℓ에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 15 내지 37℃에서 14일간 추출하였다. 그 추출물을 400 메쉬 여과포로 여과하고, 5 내지 15℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후 와트만 2번 여과지로 여과하였다. 이들 식물 추출물을 냉각 콘덴서가 달린 증류장치에서 감압 농축하여 각각 29g, 30g, 29g(건조중량)을 얻었다.
실시예
2 : 본 발명에 따른 에탄올 가용 추출물의 제조
완전 건조시킨, 애기닥나무, 곰의말채 및 감국 혼합시료 1kg을 에탄올 3ℓ에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 15 내지 37℃에서 14일간 추출하였다. 그 추출물을 400 메쉬 여과포로 여과하고, 5 내지 15℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후 와트만 2번 여과지로 여과하였다. 이들 식물 추출물을 냉각 콘덴서가 달린 증류장치에서 감압 농축하여 각각 31g, 39g, 37g(건조중량)을 얻었다.
실시예
3 : 본 발명에 따른 메탄올 가용 추출물의 제조
완전 건조시킨, 애기닥나무, 곰의말채 및 감국 혼합시료 1kg을 메탄올 3ℓ에 넣고 냉각 콘덴서가 달린 추출기에서 15 내지 37℃에서 14일간 추출하였다. 그 추출물을 400 메쉬 여과포로 여과하고, 5 내지 15℃에서 7일간 방치하여 숙성시킨 후 와트만 2번 여과지로 여과하였다. 이들 식물 추출물을 냉각 콘덴서가 달린 증류장치에서 감압 농축하여 각각 38g, 41g, 39g(건조중량)을 얻었다.
실험예
: 본 발명에 따른 식물 추출물을 함유한 조성물의 티로시나아제 저해 효과
상기 실시예 2에서 수득된 애기닥나무, 곰의말채 및 감국 혼합시료에 대하여 티로시나아제 저해효과를 측정하였다. 티로시나아제는 감자나 버섯으로부터 정제되는 효소로서, 본 실험에서는 버섯류로부터 추출한 시그마(Sigma)사의 것을 사용하였다. 먼저 기질인 티로신을 인산나트륨 완충용액(0.1M, pH6.8)에 용해시켜 0.3㎎/㎖의 농도를 갖는 용액으로 만들고, 그 용액을 334㎕를 취해 시험관에 넣은 후, 여기에 다시 인산나트륨 완충용액(0.1M, pH6.8)을 576㎕를 첨가하였다. 실시예 2의 건조 식물 추출물을 메탄올에 용해시켜 10㎎/㎖으로 한 후, 메탄올을 사용하여 각각 5, 1.5, 1㎎/㎖, 500,150, 100㎍/㎖로 희석시켜 실험군으로 하였다. 이 희석된 추출물 시료들을 각각 70㎕씩 취해 상기 시험관 내의 용액에 첨가하고 37℃ 항온조에서 10분 동안 반응시켰다.
1M Phosphate Buffer (PB) pH6.8를 121℃, 20분 멸균해서 쿨링(cooling) 한다.(실온: 25℃). 1M Phosphate Buffer (PB) pH6.8를 1/15 M (최종농도=66.6mM)로 만든다. L-DOPA를 2.0 mM 농도로 Phosphate Buffer(pH6.8)에 녹인다. Tyrosinase (46 units/ml)로 Phosphate Buffer(pH6.8)에 녹이고 1.5 ml 튜브에 분주하여 냉동보관 후 활성 평가 시 녹여서 사용한다. 96 well plate에 Blank(2wells)는 DMSO 2ul, PB 120ul를 처리한다., Control(2wells)은 DMSO 2ul, PB 120ul, Tyrosinase 40㎕를 처리한다. 실험군은 시료 2ul, PB 120ul, Tyrosinase 40㎕를 처리한다. L-DOPA solution(2 mM) 40㎕씩 각각 well에 분주한다. 37℃, 10min 반응시키며 475nm에서 O.D값을 측정한다.
알부틴에 대한 티로시나아제의 활성 저해효과를 측정하는 경우는, 알부틴을 DMSO에 용해시켜 농도 10㎎/㎖로 한 후, 다시 DMSO를 사용하여 5, 1.5, 1mg/㎖, 500, 150, 100㎍/㎖로 희석하여 실험군으로 하였다.
활성저해율은 하기 수학식 1을 이용하여 계산하였다. 그 실험 결과를 표 1에 나타내었다.
상기 표 1에 나타난 바와 같이, 애기닥나무, 곰의말채 및 감국 추출물의 혼합물은 티로시나아제의 활성을 억제하는 능력이 알부틴의 30배정도 높았다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 식물 추출물을 함유하는 화장료 조성물이 티로시나아제 활성 저해율(%)에 미치는 영향을 나타낸 그래프이다. 도 1에 나타난 바와 같이, 감국 추출물 및 곰의말채 추출물의 혼합물, 곰의말채 추출물 및 애기닥나무 추출물의 혼합물, 감국 추출물 및 애기닥나무 추출물의 혼합물의 경우에 비해서 감국 추출물, 곰의말채 추출물 및 애기닥나무 추출물의 혼합물의 경우 티로시나아제 활성 저해율이 높은 것을 확인할 수 있다. 이에 따라, 본 발명에 따른 감국, 곰의말채 및 애기닥나무의 식물 추출 혼합물은 멜라닌 생합성 과정에 핵심적으로 작용하는 티로시나아제 활성에 따른 멜라닌 색소의 생성을 효과적으로 억제함으로써 피부 노화 방지 및 미백 효과를 가질 수 있다.
이상에서 몇 가지 실시예를 들어 본 발명을 더욱 상세하게 설명하였으나, 본 발명은 반드시 이러한 실시예로 국한되는 것이 아니고 본 발명의 기술사상을 벗어나지 않는 범위 내에서 다양하게 변형실시될 수 있다.
Claims (4)
- 감국, 곰의말채 및 애기닥나무의 혼합 추출물을 유효성분으로 함유하는 미백용 화장료 조성물.
- 제1항에 있어서,
상기 혼합 추출물은,
물, 유기용매 또는 이들의 혼합용매로부터 선택된 용매로 추출되는 것을 특징으로 하는, 미백용 화장료 조성물.
- 제2항에 있어서,
상기 유기용매는,
에탄올, 메탄올, 부탄올, 아세톤, 에틸 아세테이트, 헥산, 프로판올, 부틸런글리콜 및 프로필렌글리콜로 구성된 군으로부터 선택된 1종 이상인 것을 특징으로 하는, 미백용 화장료 조성물.
- 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서,
상기 혼합 추출물은,
상기 미백용 화장료 조성물의 총 중량에 대하여 0.0001 내지 30.0%로 포함되는 것을 특징으로 하는, 미백용 화장료 조성물.
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