KR101439927B1 - 백화고 추출물을 포함하는 피부 외용제 조성물 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 백화고 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 백화고의 추출물을 함유함으로써 우수한 항산화, 피부 미백, 항노화, 피부 보습 개선 및 피부 장벽기능 강화 효과를 제공할 수 있는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.

Description

백화고 추출물을 포함하는 피부 외용제 조성물{Composition of skin external application containing Lentinula edodes (Berk.) Sing. extract}
본 발명은 백화고 추출물을 함유하는 피부 외용제 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 백화고의 추출물을 함유함으로써 우수한 항산화, 피부 미백, 항노화, 피부 보습 개선 및 피부 장벽기능 강화 효과를 제공할 수 있는 피부 외용제 조성물에 관한 것이다.
백화고는 일 년 중 기온이 낮고 습도가 낮은 봄철에만 생산되는 표고버섯으로서, 표고버섯이 생성될 때 5% 이내만이 백화고로 자라나며, 천연의 자연환경에서만 자라기 때문에 인공재배가 불가능한, 표고버섯 중에서도 최고급으로 선호되는 것이다. 백화고는 겨울 내 움츠리다 천천히 자라서 이른 봄에만 생산되기 때문에, 조직이 단단하고 향이 매우 좋으며, 씹히는 질감이 뛰어나다. 육질이 두꺼우며 형상은 갓의 모양이 거북이 등처럼 갈라져 있고 색상은 흰 부분이 많다. 표고버섯 몇 백개 중 2~3개 정도가 백화고로 되기 때문에 그만큼 귀하다고 알려져 있다.
백화고의 알려진 효능으로는 혈액순환 촉진 작용, 항암 효과, 항산화 효과, 빈혈, 콜레스테롤, 고혈압, 골다공증 예방 등이 있지만, 피부 미용 효능에 대한 연구는 미미한 실정이다. 또한 표고버섯 추출물을 화장료 조성물로 특허를 낸 경우가 있지만, 백화고는 재배에 관련된 특허 이외에 현재 추출물을 화장료 조성물로 이용한 예가 없다.
한편, 백화고의 성분을 보면 비타민 B, D를 많이 함유하고, 각종 무기질이 풍부하며 코리오린(Coriorin), 글리폴리(Glifolin), 베타-글루칸(β-glucan) 등은 항균 활성을 보인다. 이로부터 백화고 추출물의 미백, 노화, 항산화 효과 등으로 인한 피부 미용 효과를 갖는 화장료 조성물로의 조제 가능성이 시사된다.
국내공개 제10-2009-30830호(공개일: 2009.03.25.)
이에 본 발명자들은 백화고 추출물에 우수한 항산화 효능이 있으며, 또한 피부 미백, 항노화, 피부 보습 개선 및 피부 장벽기능 강화 효과 등이 있음을 확인하고, 피부 상태 개선 효과를 제공할 수 있는 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서, 본 발명의 목적은 백화고 추출물을 함유함으로써 화장료 및 제약 등으로 이용하여 피부 개선 효과를 제공할 수 있는 피부 외용제 조성물을 제공하는 것이다.
상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 백화고 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 외용제 조성물을 제공한다.
또한, 본 발명은 백화고 추출물을 유효성분으로 함유하는 항산화용, 미백용, 항노화용, 보습용 피부 외용제 조성물을 제공한다.
본 발명의 조성물은 백화고 추출물을 함유함으로써 우수한 항산화력을 통하여 피부 노화 방지, 피부 보습력 개선, 미백 효과 등의 피부 상태 개선 효과를 제공할 수 있다.
도 1은 백화고 추출물의 제조공정을 나타낸 흐름도이다.
도 2는 백화고 추출물의 PPAR-α 활성화 정도를 분석한 결과를 나타내는 그래프이다.
본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 백화고 추출물을 유효성분으로 함유한다.
본 발명에 의한 백화고 추출물의 제조 방법으로는 공지의 방법을 사용하는 것이 가능하다. 예를 들면, 백화고를 자연건조 또는 강제건조 등 임의의 방법으로 건조하여 잘게 분쇄 한 후 물, 메탄올, 에탄올, 부탄올, 아세톤 등의 극성용매; 에테르, 헥산, 클로로포름, 에틸아세테이트 등의 비극성 용매; 상기 비극성용매와 극성용매의 혼합용매; 알칼리수 등의 용매, 또는 콩기름, 참기름 등의 식물유 등을 사용하여 냉침, 페르콜레이션(percolation), 온침 등의 임의의 방법에 의해서 침출 처리하여 유효성분을 함유한 침출물을 얻는다. 침출 처리는 냉침과 페르콜레이션(percolation)의 경우 12~96시간 정도, 온침의 경우는 사용하는 용매 등의 종류와 온도에 상이하나, 적합하게는 용매의 환류 온도에 가까운 온도로 0.5~24시간 정도 수행하는 것이 좋다. 그 다음, 여과포 여과와 원심분리를 통해 잔사와 여액을 분리하고, 분리된 여액을 감압 농축하여 백화고 추출물을 얻을 수 있다. 이와 같이 용매를 이용하여 추출물을 얻은 이후 당업계에 알려진 통상적인 방법으로 상온에서 냉침, 가열 및 여과하여 액상물을 얻을 수 있으며, 또는 추가로 용매를 증발, 분무 건조 또는 동결 건조할 수 있다.
본 발명에 의한 피부 외용제 조성물은 상기 백화고 추출물을 조성물 총 중량에 대하여 0.0001~30중량%, 바람직하게는 0.01~10중량%의 양으로 함유할 수 있다. 상기 백화고 추출물의 함량이 0.0001중량% 미만이면 추출물의 사용에 따른 효과가 미미하고, 30중량%를 초과하면 피부 안정성 또는 제형상의 문제점이 생기게 된다.
본 발명의 조성물에 사용되는 백화고 추출물은 우수한 항산화력을 제공하며, 이와 함께 MMP-1의 생합성 감소를 통하여 콜라겐의 생합성을 촉진하여 피부 탄력을 증진시키고, 피부 주름을 개선시키므로, 본 발명은 항노화용 조성물로서 이용될 수 있다.
또한, 본 발명은 멜라닌의 생합성을 효과적으로 억제하는 미백용 조성물로서 이용될 수 있다.
또한, 본 발명은 피부 장벽 기능을 강화시키고 각질형성세포의 분화를 촉진시켜 피부 보습용 조성물로서 이용될 수 있으며, 따라서 표피 분화의 불완전함으로 생기는 피부건조증, 아토피 피부염, 접촉성 피부염 또는 건선 등을 예방 또는 개선하는 피부 외용제 조성물로서 유용하게 이용될 수 있다.
상기한 본 발명의 피부 외용제 조성물은 화장료 조성물로서 제형화될 수 있으며, 화장품학 또는 피부과학적으로 허용 가능한 매질 또는 기제를 함유하여 제형화될 수 있다. 이는 국소적용에 적합한 모든 제형으로서, 예를 들면, 용액, 겔, 고체, 반죽 무수 생성물, 수상에 유상을 분산시켜 얻은 에멀젼, 현탁액, 마이크로에멀젼, 마이크로캡슐, 미세과립구 또는 이온형(리포좀) 및 비이온형의 소낭 분산제의 형태로, 또는 크림, 스킨, 로션, 파우더, 연고, 스프레이 또는 콘실 스틱의 형태로 제공될 수 있다. 또한 폼(foam)의 형태로 또는 압축된 추진제를 더 함유한 에어로졸 조성물의 형태로도 사용될 수 있다. 이들 조성물은 당해 분야의 통상적인 방법에 따라 제조될 수 있다.
또한 본 발명에 의한 조성물은 지방 물질, 유기용매, 용해제, 농축제, 겔화제, 연화제, 항산화제, 현탁화제, 안정화제, 발포제(foaming agent), 방향제, 계면활성제, 물, 이온형 또는 비이온형 유화제, 충전제, 금속이온봉쇄제, 킬레이트화제, 보존제, 비타민, 차단제, 습윤화제, 필수 오일, 염료, 안료, 친수성 또는 친유성 활성제, 지질 소낭 또는 화장품에 통상적으로 사용되는 임의의 다른 성분과 같은 화장품학 또는 피부과학 분야에서 통상적으로 사용되는 보조제를 함유할 수 있다. 상기 보조제는 화장품학 또는 피부과학 분야에서 일반적으로 사용되는 양으로 도입된다.
또한, 본 발명의 조성물은 피부 개선 효과를 증가시키기 위하여 피부 흡수 촉진 물질을 함유할 수 있다.
이하, 시험예 및 제형예를 들어 본 발명의 구성 및 효과를 보다 구체적으로 설명한다. 그러나 이들 시험예 및 제형예는 본 발명에 대한 이해를 돕기 위해 예시의 목적으로만 제공된 것일 뿐 본 발명의 범주 및 범위가 하기 예에 의해 제한되는 것은 아니다.
[참고예 1] 백화고 추출물의 제조
건조된 백화고 1kg에 물과 에탄올이 3:7의 비율인 용매를 10리터 가한 후 24시간 동안 상온에서 교반 하면서 추출하였다. 80메쉬의 체를 이용하여 고형분을 제거한 후 남은 여액을 다시 여과한 후 감압 농축기를 이용하여 여액 중의 용매를 증류 제거하여 약 86그램의 갈색의 고형분을 얻었다.
[참고예 2] 일반 표고버섯 추출물의 제조
건조된 표고버섯 1kg에 물과 에탄올이 3:7의 비율인 용매를 10리터 가한 후 24시간 동안 상온에서 교반 하면서 추출하였다. 80메쉬의 체를 이용하여 고형분을 제거한 후 남은 여액을 다시 여과한 후 감압 농축기를 이용하여 여액 중의 용매를 증류 제거하여 약 75그램의 암갈색의 고형분을 얻었다.
[시험예 1] PPAR-α(Peroxisome Proliferator Activated Receptor-alpha) 활성화 시험
PPAR-α는 피부 세포의 분화 촉진, 증식 억제 및 지질 생합성 촉진과 항염에 있어서 역할을 하는 것으로서, 본원 발명에서 사용되는 백화고 추출물의 PPAR-α의 활성화 경향을 하기와 같은 방법으로 확인하였다.
원숭이 신장 상피 세포주인 CV-1세포(ATCC CCL 70)를 숯(charcol)/덱스트란 처리 10% 우태아 혈청을 포함하는 DMEM 배지에 계대 배양하였고, 페놀 레드(phenol red)의 에스트로겐에 의한 효과를 제거하기 위해 무-페놀 레드 배지를 사용하였다. 플라스미드는 일반적인 배양 조건에서도 발현되는 유니버셜 프로모터(universal promoter) 뒤에 PPAR-(유전자를 지닌 것과 리간드 결합 형의 PPAR-)이 결합하여 활성화되는 PPRE(PPARs Response Element)를 프로모터로 가지고 뒤에 리포터로서 역할을 하는 반디불(firefly) 루시퍼라제 유전자를 지닌 것, 그리고 참조로 사용될 유니버셜 프로모터에 레닐라 루시퍼라제(Renilla luciferase) 유전자가 결합된 플라스미드를 사용하였다.
CV-1 세포를 9x104의 농도로 24웰형 플레이트에 깐 후 24시간 배양한 다음 상기 세 종류의 플라스미드 유전자를 일시적 트랜스펙션(transient transfection)을 하였다. 그 후 24시간 배양한 다음 1xPBS(Phosphate Buffered Saline)로 세척한 후 상기 참고예 1에서 제조한 백화고 추출물을 1ppm 및 10ppm의 농도로 처리하고, 24시간 배양한 후 1xPBS로 세척하였으며, 1xPLB(Passive Lysis Buffer)로 세포를 깬 후 Dual-Luciferase Reporter Assay System kit를 사용하여 시료와 참조의 루시퍼라제 활성을 측정하였다. 또한 비교를 위하여, 백화고 추출물 대신에 상기 참고예 2에서 제조한 표고버섯 추출물을 1ppm 및 10ppm을 처리한 후 루시퍼라제 활성을 측정하였다.
본 실험에서 양성 대조군은 PPAR-α의 리간드 중 가장 강력한 것으로 알려진 Wy-14,643을 사용하였고, 음성 대조군은 시료들을 녹일 때 사용한 에탄올과 무처리군으로 하였다. 그 결과는 도 2에 나타내었다.
도 2에서 나타낸 바와 같이, 표고버섯 추출물은 음성 대조군에 비하여 PPAR-α의 활성화 정도가 약간 높은 정도이지만, 백화고 추출물은 표고버섯 추출물에 비하여 현저하게 높은 PPAR-α의 활성화도를 보임을 확인할 수 있다.
이를 통하여, 본원발명의 조성물은 피부 세포의 분화를 효과적으로 촉진할 수 있음을 알 수 있다.
[시험예 2] 활성산소 소거 효과
백화고 추출물의 자외선에 의해 생성되는 활성산소 생성 억제 효과 즉, 활성산소 소거 효과를 알아보기 위하여 형광물질을 이용하여 하기와 같은 방법으로 실험을 수행하였다.
먼저, 실험에 사용한 세포주는 독일 암연구센터의 퓌세니그 박사(Dr. Fusenig)로부터 분양 받은 인간 각질세포 HaCaT 세포주(Human keratinocytes HaCaT cell line)로서 이를 형광측정용 96 웰 블랙 플레이트(well black plate)에 웰당 2.0 × 104개로 분주하고, 페니실린/스트렙토마이신(penicillin/streptomycin)이 첨가된 DMEM(Dulbeccos Modification of Eagles Medium, FBS 10%, Gibco, USA) 배지를 사용하여 37℃, 5% CO2 조건에서 1일간 배양한 후, 상기 참고예 1에서 제조한 백화고 추출물을 0.5, 0.25, 0.125, 0.0625, 0.03125% 농도로 처리하였다. 또한 비교를 위하여, 백화고 추출물 대신에 상기 참고예 2에서 제조한 표고버섯 추출물을 백화고 추출물과 동일한 농도로 처리하였다. 시험물질을 처리하고 24시간 배양한 후 HCSS(HEPES-buffered control salt solution, Gibco, USA)로 세척하여 남아있는 배지를 제거한 다음, HCSS에 20μM로 준비된 DCFH-DA(2',7'-dichlorodihydro-fluorescein diacetate, Molecular Probes, USA)를 100㎕ 가하고, 37℃, 5% CO2조건에서 20분간 배양하였다. 이 후 각 시료 농도별로, 상기 배양 처리된 HCSS를 100㎕ 가한 후 초기에 활성산소로 산화된 DCF(dichlorofluorescein)의 형광도를 형광플레이트 리더(Ex=485nm, Em=530nm)로 측정하였다. 이후 UVB(30mJ/cm2)를 조사하고 처리 직후(표 1) 및 처리 3시간 후(표 2)의 형광도를 형광플레이트 리더(Ex=485nm, Em=530nm)로 측정하였다. 이 때, 대조군으로는 추출물의 처리하지 않고 UVB를 처리한 것과 추출물과 UVB를 모두 처리하지 않은 군을 사용하였다. 측정 결과는 표 1(처리 직후) 및 표 2(처리 3시간 후)에 각각 나타내었다.
% 0.5 0.25 0.125 0.0625 0.03125
백화고 71.57 75.70 75.73 79.75 80.75
표고버섯 75.65 78.50 79.50 82.20 81.21
무처리 + UVB 136 134 133 133 135
무처리(UVB 처리 안 함) 100 100 100 100 100
% 0.5 0.25 0.125 0.0625 0.03125
백화고 63.05 68.89 71.63 76.03 77.50
표고버섯 68.41 74.41 78.42 80.73 81.95
무처리 + UVB 136 134 133 133 135
무처리(UVB 처리 안 함) 100 100 100 100 100
상기 표 1 및 표 2의 결과를 보면, 백화고 추출물을 처리한 경우 추출물을 처리하지 않은 경우에 비하여 활성산소 소거 효과가 훨씬 우수하며, 특히 자외선을 처리하지 않은 경우보다도 활성산소의 양을 감소시킴을 확인할 수 있다. 또한, 표고버섯 추출물을 처리한 경우에 비하여도 백화고 추출물을 처리한 경우가 보다 우수한 결과를 나타냄을 알 수 있다.
[시험예 3] MMP-1 및 프로콜라겐 분석(procollagen assay)
백화고 추출물의 피부기질의 분해에 관련된 자외선에 의한 MMP-1의 생합성을 감소시켜 타입 1 프로콜라겐의 생합성을 촉진시키는 효과를 알아보기 위하여, MMP-1 및 프로콜라겐 분석(procollagen assay)을 하기와 같은 방법으로 수행하였다.
먼저, 정상표피의 지방층을 제거하고 잘게 잘라 콜라게나제(collagenase)로 표피와 진피를 분리한 후, 표피와 진피조직을 각각 0.25% 트립신(trypsin) 용액에 넣고 37℃, 5% CO2 배양기에서 10분간 처리하였다. 이후 보텍스(vortex)를 시행하여 각질형성세포와 섬유아세포를 각각 유리시켰다. 유리된 세포를 모아 세척한 후 각질형성세포는 KGM(keratinocyte growth medium, Clonetics, USA)에 1× 104cells/cm2농도로 배양하였으며, 섬유아세포는 10% 우태아혈청(FBS)이 첨가된 DMEM 배지에서 배양하였다. 70~80% 정도 자라면 1:3의 비율로 분주하여 계대 배양하였고, 3~4차 계대 배양한 세포를 실험에 이용하였다.
MMP-1의 양을 측정하는 실험을 위해서 섬유아세포를 48 웰 플레이트(well plate)에 90% 이상 배양한 후 하루동안 기아(starvation)상태로 하였다. 이후 PBS로 2회 세척한 다음 PBS를 100㎕씩 넣어준 상태에서 플레이트(plate)의 뚜껑을 열고 자외선 A(UVA 필터가 장치된 Dermlight cube 401, UVAtec, USA)를 15J/cm2로 조사하였다. 조사 직후 다시 PBS로 1회 세척하고, 상기 참고예 1의 백화고 추출물이 각각 0.001, 0.01% 포함된 우태아 혈청을 포함하지 않은 DMEM을 넣어 37℃, 5% CO2 배양기에서 48시간 동안 배양하였다. 또한 비교를 위하여, 백화고 추출물 대신에 상기 참고예 2에서 제조한 표고버섯 추출물을 백화고 추출물과 동일한 농도로 처리하고 배양하였다. 배지 중에 유리된 MMP-1의 양을 MMP-1 인간 ELISA 시스템(human ELISA system)(RPN2610, Amersham Pharmacia Biothch, UK)을 이용하여 측정하였고, 섬유아세포의 총 단백질 양으로 보정하였다. 이 때, 대조군으로는 추출물의 처리하지 않고 자외선 A를 처리한 것과 추출물과 자외선 A를 모두 처리하지 않은 군을 사용하였다. 측정 결과는 하기 표 3에 나타내었다.
한편, 프로콜라겐의 양을 측정하기 위해 상기 MMP-1의 양을 측정하는 방법과 동일한 조건에서 기아(starvation)상태로 자외선 조사 없이 상기 참고예 1의 백화고 추출물 및 참고예 2의 표고버섯 추출물을 각각 0.001 및 0.01%로 가하고, 24시간 후에 배지 중에 유리된 프로콜라겐의 양을 프로콜라겐 타입-1 C-펩타이드 EIA 키트(procollagen type-1 C-peptide EIA kit)(MK101, Takara, Japan)를 사용하여 측정하였다. 대조군으로는 추출물의 무처리군을 사용하였다. 측정 결과는 하기 표 4에 나타내었다.
% 0.001 0.01
백화고 79 63
표고버섯 88 75
무처리 + UVA 128 130
무처리(UVA 처리 안 함) 100 100
% 0.001 0.01
백화고 111 123
표고버섯 105 116
대조군 100 100
상기 표 3을 보면, 백화고 추출물을 처리한 경우에 표고버섯 추출물을 처리한 경우와 비교하여 콜라겐의 분해효소인 MMP-1의 발현량이 더 적어 콜라겐의 분해를 보다 효과적으로 방지할 수 있음을 알 수 있다.
또한, 상기 표 4를 보면, 백화고 추출물을 처리한 경우에 프로콜라겐의 생합성 양이 표고버섯을 처리한 경우보다 더 높음을 확인할 수 있다.
따라서, 상기 결과로부터 백화고 추출물은 콜라겐의 생합성을 증가시키면서 분해는 방지하여, 피부 노화를 효과적으로 방지할 수 있음을 알 수 있다.
[시험예 4] B16/F10 흑색종 세포를 이용한 멜라닌 생성 억제능 평가
백화고 추출물의 멜라닌 생성 억제능을 알아보기 위하여, B16/F10 흑색종 세포(한국세포주은행)를 이용하여 하기와 같은 방법으로 실험을 수행하였다.
상기 참고예 1의 백화고 추출물 및 참고예 2의 표고버섯 추출물을 시험물질로 하여 10% FBS가 함유된 DMEM으로 6 웰 플레이트(멜라닌 정량)에 2 X 104cell/웰(최종 부피 3ml), 96 웰 플레이트(MTTassay)에 2 X 103cell/웰(최종 부피 200μl)로 넣고 37℃, 5% CO2 인큐베이터(MCO-20AIC, Sanyo)에서 24시간 배양하였다. 배양 후 배지를 제거하고, 10% FBS, 2μM α-MSH(Melanocyte stimulating hormone), 2mM 테오필린이 함유된 DMEM 배지를 새로운 배지로 사용하며 배지에 시험물질을 첨가하여 3일간 매일 처리하였다. 5일째에 6 웰 플레이트에서 배양된 배지를 제거하고 0.25% 트립신-EDTA(Sigma Chemical Co.) 용액을 처리하여 세포 펠렛을 회수하고 1.5ml 튜브로 옮겨 10,000rpm으로 10분간 원심분리하여 상등액을 제거하였다. 얻어진 펠렛을 60℃에서 건조시킨 후 1N NaOH 100μl를 넣어 세포 내 멜라닌을 녹였다. 이 용액을 PBS로 희석시킨 다음 ELISA 판독기 475nm에서 흡광도를 측정하여 시료의 멜라닌 생성저해율을 구하였다. 상기 추출물을 첨가하지 않은 세포를 음성대조군으로 하여 대조군에서의 멜라닌 함량과 비교하여 시험물질의 멜라닌 생성 저해정도를 측정하여 미백효과를 측정하였다. 하기 수학식 1에 따라 멜라닌 생성 억제율을 계산하여 그 결과를 표 5에 나타내었다. 양성대조군으로는 코지산 및 멜라솔브를 사용하였다.
Figure 112012058735746-pat00001
% 0.001 0.01
백화고 24.8 36.2
표고버섯 8.2 13.7
코지산 38.0 52.6
멜라솔브 43.8 57.4
대조군 - -
상기 표 5에 나타낸 바와 같이, 백화고 추출물이 표고버섯 추출물보다 멜라닌 생성 억제효과가 우수하게 나타남을 알 수 있었으며, 대체로 사용한 추출물의 농도가 높을수록 생성된 멜라닌 생성 억제가 증가함을 알 수 있었다.
[시험예 5] 피부 내 수분량 증가 효과 평가
백화고 추출물의 사용에 따른 피부 내 수분량 증가 정도를 다음의 방법으로 평가하였다. 피부 내 수분 증가 측정 실험은 탈모 기니피그(hairless Guinea pig) 40마리를 10마리씩 4개조로 나누고, 시험물질로서 상기 참고예 1 및 2에서 얻은 백화고 및 표고버섯 추출물, 비히클(프로필렌글리콜(PG):EtOH) 및 글리세롤을 사용하여 이들을 각 조에 나누어 도포하고 결과를 측정하였다.
구체적으로, 핀(Finn) 챔버를 이용하여 아세톤으로 30분간 시험 동물들의 옆구리에 패취하여 피부 장벽을 손상시킨 다음, 패취한 자리에 시험물질을 각각 20씩 도포하였으며, 수분량 측정기(Corneometer)를 이용하여 각질층의 수분량을 측정하여 평가하였다. 기기측정은 아세톤 패치 제거 직후 및 패취 제거 후 6시간, 12시간, 24시간, 48시간에 측정하였다. 아세톤 처리 직후의 값을 100으로 하여 피부내 수분량 변화를 관찰 하였다. 그 결과를 하기 표 6에 나타내었다.
측정시기 아세톤 처리 직후 시료 도포 후
6시간 12시간 24시간 48시간
비히클
(PG:EtOH=8:2)
100 97 94 92 86
글리세롤 100 109 113 116 117
백화고 100 107 109 113 112
표고버섯 100 101 104 107 104
상기 표 6에서 보는 바와 같이, 본 발명의 백화고 추출물은 비히클(프로필렌글리콜:에탄올=8:2)과 일반 표고버섯 추출물에 비하여 피부내 수분량을 증가시키는 효과가 현저하게 높았으며, 피부 수분량을 증가시키는 것으로 공지된 글리세롤에 근사한 효과를 나타내었다.

Claims (10)

  1. 백화고 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 미백용 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 백화고 추출물은 조성물 총 중량에 대하여 0.0001~30중량%의 양으로 함유됨을 특징으로 하는 화장료 조성물.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR102561745B1 (ko) * 2017-11-22 2023-07-31 주식회사 지본코스메틱 마이크로스피어를 포함하는 항산화용 조성물
KR102128168B1 (ko) * 2018-09-28 2020-06-29 대구한의대학교산학협력단 표고버섯 추출물 및 고로쇠 잎 추출물을 포함하는 항노화 활성을 갖는 조성물
KR102389926B1 (ko) * 2019-12-17 2022-04-25 (주)맘씨생활건강 송육고 추출물을 함유하는 화장료 조성물
KR102126523B1 (ko) * 2020-01-07 2020-06-24 박경아 발아 현미 술지게미를 이용한 스킨 케어 발효 토너의 제조 방법

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100385335B1 (ko) 2000-06-10 2003-05-27 나드리화장품주식회사 표고버섯의 프로비타민 d2 추출물의 제조방법 및 이를 함유하는 화장료
KR20060031329A (ko) * 2004-10-08 2006-04-12 주식회사 태평양 베타-1,3-글루칸 및 해양심층수를 함유하는 피부탄력증진용 조성물
KR100848515B1 (ko) 2008-03-17 2008-07-25 주식회사 참선진 종합식품 버섯 균사체 배양물을 유효성분으로 함유하는 미백화장품
KR20120078327A (ko) * 2010-12-31 2012-07-10 주식회사한국신약 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체를 유효성분으로 함유하는 보습 및/또는 미백용 화장료 조성물

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100385335B1 (ko) 2000-06-10 2003-05-27 나드리화장품주식회사 표고버섯의 프로비타민 d2 추출물의 제조방법 및 이를 함유하는 화장료
KR20060031329A (ko) * 2004-10-08 2006-04-12 주식회사 태평양 베타-1,3-글루칸 및 해양심층수를 함유하는 피부탄력증진용 조성물
KR100848515B1 (ko) 2008-03-17 2008-07-25 주식회사 참선진 종합식품 버섯 균사체 배양물을 유효성분으로 함유하는 미백화장품
KR20120078327A (ko) * 2010-12-31 2012-07-10 주식회사한국신약 표고버섯 균사체 배양물에서 추출된 다당체를 유효성분으로 함유하는 보습 및/또는 미백용 화장료 조성물

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