KR101336804B1 - Fermented ear shell using mushroom, manufacturing method thereof and cosmetic composition comprising the same - Google Patents

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유병국
강영기
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김미애
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Abstract

The present invention relates to a fermented ear shell using mushrooms which is obtained by fermenting the ear shell using a mushroom mycelium and a cosmetic composition including the same for moisturizing, firming, whitening, and improving wrinkles. The fermented ear shell is obtained by fermenting the ear shell using a mushroom mycelium. The mushroom mycelium is selected from a group including Ganoderma lucidum mycelium, Phellinus linteus mycelium, Hericium erinaceum mycelium, Pleurotus cystidiosus mycelium, and a mixture of two or more of the above mycelia.

Description

버섯을 이용한 전복 버섯 발효물, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 화장품 조성물{Fermented ear shell using mushroom, manufacturing method thereof and cosmetic composition comprising the same}Fermented mushrooms abalone mushroom using mushrooms, a method for manufacturing the same and a cosmetic composition comprising the same {Fermented ear shell using mushroom, manufacturing method

본 발명은 전복 버섯 발효 추출물, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 화장품 조성물에 관한 것으로 특히, 전복을 버섯 균사체로 발효시켜서 수득되는 전복 버섯 발효물 및 이를 유효성분으로 포함하는 보습, 탄력, 미백, 피부 주름 개선용 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to an abalone mushroom fermented extract, a preparation method thereof, and a cosmetic composition comprising the same, in particular, an abalone mushroom fermented product obtained by fermenting abalone with mushroom mycelium and moisturizing, elasticity, whitening, and skin wrinkles comprising the same as an active ingredient. It relates to a cosmetic composition for improvement.

발효는 미생물이 자신이 가지고 있는 효소를 이용해 유기물을 분해 또는 합성시키는 과정을 의미하며, 대표적인 발효 미생물로는 고초균, 유산균, 누룩균, 효모, 곰팡이, 초산균, 버섯 균사체 등이 있다. Fermentation refers to a process in which microorganisms decompose or synthesize organic matter using their own enzymes. Representative fermentation microorganisms include Bacillus subtilis, lactic acid bacteria, yeast bacteria, yeast, mold, acetic acid bacteria, and mushroom mycelium.

최근 화장품 분야에서는 천연소재들을 이용한 발효 식품 및 화장품에 대한 관심이 증가되면서, 미백, 피부 주름개선, 항산화, 보습, 탄력 등의 연구들이 활기를 띠고 있다.Recently, as the interest in fermented foods and cosmetics using natural materials has increased in the cosmetics field, researches on whitening, skin wrinkle improvement, antioxidant, moisture, elasticity, etc. are active.

발효물 또는 발효물 추출물은 다른 어떠한 용매를 사용하지 않고, 발효와 숙성과정을 거쳐 천연소재가 함유하고 있는 당성분을 알콜로 변화시키고, 천연소재 속에 들어있는 플라보노이드, 비타민C, 비타민P, 아미노산, 카테킨 등의 유효성분에 대한 추출효율을 높일 수 있다. 또한, 때론 자극적이거나 독성을 줄 수 있는 천연소재는 발효추출법을 통해 천연소재를 안정화시키거나 독성을 줄이거나 안정한 유도체로 전환시키는 방법으로 사용될 수 있으며, 훨씬 뛰어난 미용상의 효과를 얻을 수 있다. 또한, 유산균 및 효모 등의 발효공정에 의해 흡수가 용이한 저분자 물질로의 전환, 불안정하거나 불활성인 형태에서 활성 형태로 전환되는 과정에서 천연소재의 효능을 극대화 시키고, 보습 및 탄력성 증진, 미백, 피부주름 개선 효과를 극대화 시킬 수 있다.The fermented product or fermented product extract does not use any other solvents, and after fermentation and ripening, the sugar component contained in the natural material is converted into alcohol, and flavonoids, vitamin C, vitamin P, amino acids, Extraction efficiency for catechins and other active ingredients can be improved. In addition, sometimes irritating or toxic natural materials can be used as a method of stabilizing or reducing the natural materials through the fermentation method or converting them into stable derivatives, it is possible to obtain a much better cosmetic effect. In addition, by the fermentation process such as lactic acid bacteria and yeast, it is possible to maximize the efficacy of natural materials in the process of conversion to low molecular weight materials that are easily absorbed, from the unstable or inactive form to the active form, to enhance moisturizing and elasticity, whitening, skin Wrinkle improvement effect can be maximized.

전복(ear shell ; Haliotis discus hannai)은 원시복족목 전복과에 속하는 연체동물의 총칭이며, 바닷물이 깨끗한 암초 주변에서 서식하고, 해조류를 먹이로 이용하는 수산생물로서, 칼슘, 인 등의 무기질이 풍부하며, 비타민 B1, B2 및 단백질이 풍부하여 피부미용, 자양강장 및 산후조리 등의 효능이 있다. 특히, 타우린 성분이 풍부하여 간장보호, 피로회복, 심근경색 등에 대한 예방효과가 있으며, 간장과 신장을 보호하며 눈을 맑게 하고, 위를 열어주며, 해수를 다스리고, 자양강장, 두통, 현기증 등에 효능이 있으며, 콜라겐 함량이 높아 세포의 재생 및 피부 신진대사를 활성화시켜 피부미용에 도움이 된다. 고급 어패류로서 예로부터 영양 면에서나 맛에서 다른 해산물과는 비교할 수 없을 정도의 특징을 가지고 있어 우리나라에서는 건강식으로 애용되고 있으나, 가격이 비싸기 때문에 보편화되지는 못하고 있다.The abalone (ear shell ( Haliotis discus hannai )) is a general term for mollusks belonging to the abalone family of primitive abalone, and it is aquatic organisms that live near the clean reefs and feed algae. It is rich in vitamins B1, B2 and protein, and it is effective in skin care, nourishing tonic and postpartum cooking. In particular, it is rich in taurine, which is effective in protecting liver, recovering from fatigue, myocardial infarction, etc., protecting liver and kidney, clearing eyes, opening stomach, controlling sea water, nourishing tonic, headache, dizziness, etc. There is a high content of collagen, thereby rejuvenating the cells and activating the skin metabolism to help skin beauty. As a high-quality seafood, it has been characterized as incomparable to other seafoods in terms of nutrition and taste since ancient times, and has been used as a healthy food in Korea, but it is not popularized because of its high price.

현재 시중에 판매되고 있는 전복은 1 내지 4년생이 대부분으로, 3년생 이상은 횟감으로 2년생 이하는 전복죽 등 식재료로 사용된다. 그러나 전복의 연령에 따른 육과 내장의 이화학적 특성 비교 연구에 의하면 전복의 연령에 따라 타우린 등을 비롯한 아미노산류, 지방산과 콘드로이친황산 등의 영양성분 및 유효성분의 함량이 다름이 확인된바 있어, 전복의 연령은 원료로써 전복 선정할 시 고려할 사항으로 간주된다.Most abalones on the market are 1 to 4 years old, and more than 3 years old are used for food such as abalone porridge. However, according to a comparative study of physicochemical characteristics of meat and intestines according to the age of abalone, the contents of nutrients and active ingredients such as taurine, fatty acids and chondroitin sulfate are different according to the age of abalone. The age of is considered to be considered when selecting abalone as a raw material.

전복에 관한 연구로는 전복의 연령에 따른 육과 내장의 이화학적 특성 비교, 전복 내장 추출물을 유효성분으로 하는 면역 강화 조성물, 전복 추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 주름 개선용 화장료 조성물, 전복 추출물을 함유하는 화장품 조성물 및 이의 제조방법, 전복 내장 추출물을 유효성분으로 하는 면역 강화 조성물, 조개류추출물 함유 간질환 개선 및 예방용 식품 조성물, 활성 산소종 소거 활성을 갖는 전복 소화 가수분해물, 전복엑기스를 함유하는 기능성 음료조성물과 그 제조방법, 전복 동결건조 육을 함유한 숙취해소음료 및 그 제조방법, 천연재료를 이용한 기능성 화장품 조성물, 증숙 건조 전복의 제조방법 및 그에 의해 제조된 증숙 건조전복, 젖산과 자몽종자추출물을 이용한 항균제 조성물 및 이를 이용한 전복의 가공방법 등 식품 및 음료 뿐만 아니라 화장품 분야까지 확장되고 있지만, 아직 도입 단계이고, 발효 공정을 통해 유효성분을 극대화 시킬 수 있는 전복의 발효 추출물에 관한 연구는 없는 실정이다.Studies on abalone include comparison of physicochemical properties of meat and intestines according to the age of abalone, immune enhancing composition containing abalone viscera extract as an active ingredient, cosmetic composition for improving skin wrinkles containing abalone extract as an active ingredient, abalone extract Cosmetic composition and its preparation method, immune enhancing composition comprising the abalone viscera extract, food composition for improving and preventing liver disease containing shellfish extract, abalone digestion hydrolyzate having active oxygen species scavenging activity, abalone extract Beverage composition and its preparation method, hangover quenching beverage containing abalone lyophilized meat and its manufacturing method, functional cosmetic composition using natural ingredients, method of manufacturing steamed dried abalone and steamed dried abalone produced by it, lactic acid and grapefruit seed extract Antimicrobial composition and food processing method of abalone using same And cosmetics as well as expanding the field of cosmetics, but is still in the introduction phase, there is no research on the fermented extract of abalone that can maximize the active ingredient through the fermentation process.

전복느타리버섯(Pleurotus cystidiosus)는 느타리과(Pleurotaceae)에 속하며, 육질이 전복과 비슷하다고 해서 이름이 붙여졌고, 밀러느타리(O.K. Miller에 의해 Pleurotus cystidiosus으로 명명됨), 단풍나무느타리, 대만느타리 등으로 불리기도 한다. 일반 느타리는 재배온도가 25℃ 이하의 중, 저온성인데 비해, 전복느타리는 25 내지 30℃의 고온기에도 발생된다. 우리나라에서의 최적 재배 시기는 평균온도가 20 내지 28℃인 때, 즉 6월 중순부터 9월 초순까지다. 전복느타리의 형태적 특징을 살펴보면, 갓의 모양은 평편형이며, 크기는 6.6 내지 9.8㎝, 대의 길이는 1.6 내지 3.8㎝로, 일반 느타리류에 비해 갓은 상당히 큰 반면에 대가 짧은 특징을 가지고 있다. 그리고 원형느타리처럼 다발 형태로 형성되는 것이 아니라 개체 발생되며, 개체중은 평균 12.8g 정도이다. 갓은 암갈색을 띠고 대는 미색을 띠나, 온도와 빛에 의해 색깔이 진하고 연한 정도의 차이를 나타낸다.Abalone Pleurotus cystidiosus belongs to the Plerotaceae family and is named because it resembles abalone, and is called by O. Miller (named Pleurotus cystidiosus by OK Miller), maple beetle , and Taiwan beetle . Also do. While the common lodge has a medium and low temperature of cultivation temperature of 25 ° C. or lower, abalone is also generated at a high temperature of 25 to 30 ° C. The optimal cultivation time in Korea is when the average temperature is 20 to 28 ℃, that is from mid-June to early September. The morphological features of abalone elk are flat in shape, 6.6 to 9.8 cm in size, and 1.6 to 3.8 cm in length. . It is not formed in the form of a bundle like a circular blade, but is generated individually, and the average is about 12.8g. The shade is dark brown, and the off-white color is dark, but the color is dark and light due to temperature and light.

현재, 이와 관련되어 전복느타리버섯 균사체 또는 자실체의 추출물을 유효성분으로 함유하는 항노화 및 피부 주름개선용 조성물(특허출원 제2010-0008638호)이 개시되어 있다.In this regard, a composition for anti-aging and skin wrinkle improvement (patent application No. 2010-0008638) containing an extract of Abalone mushroom mycelium or fruiting body as an active ingredient is disclosed.

또한, 최근에는 뽕잎 추출물과 누에 동충하초 균사체를 이용한 국내 공개특허공보 제2008-0078371호의 뽕잎추출물을 이용한 누에 동충하초 균사체 배양액의 피부미백용 화장품 원료와, 신선초, 어성초 및 삼백초로 구성된 생약초를 기질로 하여 배지에 버섯 균사체를 접종하여 배양하는 국내 등록특허공보 제10-0848515호의 버섯 균사체 배양물을 유효성분으로 함유하는 미백화장품 등 천연배지에 버섯 균사체를 배양하여 획득한 배양물을 이용한 다양한 화장품의 원료가 개발되고 있다.In addition, recently, as a substrate, a cosmetic raw material for skin whitening of silkworm Cordyceps sinensis mycelium culture medium using the mulberry leaf extract of Mulberry leaf extract and silkworm Cordyceps sinensis mycelium, and a fresh herb consisting of fresh vinegar, eochocho and triticale Development of various cosmetic raw materials using cultures obtained by culturing mushroom mycelium on natural medium such as whitening cosmetics containing mushroom mycelium culture of Korean Patent Publication No. 10-0848515 to inoculate and incubate mushroom mycelium on It is becoming.

이에 본 발명은 전복추출물이 가지는 생리활성물질 탐색하고, 버섯 균사체 발효공정을 통하여 유효성분의 함량 및 기능성을 증진시킨 화장료 조성물에 관한 것으로서, 전복 버섯 발효물 및 이를 유효성분으로 함유하는 보습, 탄력, 미백, 피부 주름 개선용 화장료 조성물을 개발하게 되었다. Accordingly, the present invention relates to a cosmetic composition for exploring the biologically active material of the abalone extract, and to enhance the content and functionality of the active ingredient through the mushroom mycelium fermentation process, moisturizing, elasticity, A cosmetic composition for whitening and improving skin wrinkles has been developed.

본 발명의 목적은 전복을 버섯 균사체로 발효시켜서 수득되는 전복 버섯 발효물 및 이를 유효성분으로 포함하는 보습, 탄력, 미백, 피부 주름 개선용 화장료 조성물을 제공하는 것이다.An object of the present invention is to provide a cosmetic composition for moisturizing, elasticity, whitening, skin wrinkle improvement comprising the abalone mushroom fermentation obtained by fermenting abalone with mushroom mycelium as an active ingredient.

상기와 같은 목적을 달성하기 위해 본 발명은 버섯 균사체를 이용하여 발효공정을 통한 전복 버섯 발효물을 만들고, 이 전복 버섯 발효물을 화장품의 제조에 사용하여 이러한 전복 버섯 발효물을 함유하는 보습, 탄력, 미백, 피부 주름 개선 활성을 갖는 화장료을 제공한다.In order to achieve the above object, the present invention makes mushroom abalone mushroom fermented product through the fermentation process using mushroom mycelium, moisturizing, elasticity containing the abalone mushroom fermented product using this abalone mushroom fermented product in the manufacture of cosmetics Provides a cosmetic having whitening, skin wrinkle improvement activity.

본 발명에 따른 전복 버섯 발효물은, 전복을 버섯 균사체로 발효시켜서 수득되는 것이다.The abalone mushroom fermentation product which concerns on this invention is obtained by fermenting abalone with mushroom mycelium.

상기 전복은 전복육과 전복내장을 모두 포함할 수 있다.The abalone may include both abalone muscle and abalone viscera.

상기 버섯 균사체는 영지버섯(Ganoderma lucidum)의 균사체, 상황버섯(Phellinus linteus)의 균사체, 노루궁뎅이버섯(Hericium erinaceum)의 균사체, 전복느타리버섯(Pleurotus cystidiosus)의 균사체 및 이들 중 2이상의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이 될 수 있다.The mushroom mycelia are mycelium of Ganoderma lucidum , mycelium of Phellinus linteus , mycelium of Hericium erinaceum , mycelium of abalone mushroom ( Pleurotus cystidiosus ) and a mixture of two or more of them May be selected from.

본 발명에 따른 전복 버섯 발효물의 제조방법은, (1) 전복을 버섯 균사체로 접종시키는 접종단계; 및 (2) 버섯 균사체로 접종된 전복을 발효시키는 발효단계를 포함하여 이루어진다.Method for producing an abalone mushroom fermented product according to the invention, (1) inoculation step of inoculating abalone with mushroom mycelium; And (2) a fermentation step of fermenting the abalone inoculated with mushroom mycelium.

상기 접종단계에서의 상기 전복은 전복육과 전복내장을 모두 포함할 수 있다.The abalone in the inoculation step may include both abalone meat and abalone internal organs.

상기 접종단계에서의 상기 버섯 균사체는 영지버섯(Ganoderma lucidum)의 균사체, 상황버섯(Phellinus linteus)의 균사체, 노루궁뎅이버섯(Hericium erinaceum)의 균사체, 전복느타리버섯(Pleurotus cystidiosus)의 균사체 및 이들 중 2이상의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이 될 수 있다. The mushroom mycelium at the inoculation step is mycelium of Ganoderma lucidum , mycelium of Phellinus linteus , mycelium of Hericium erinaceum , mycelium of Pleurotus cystidiosus and two of them It may be selected from the group consisting of the above mixture.

상기 접종단계 이전에 상기 전복을 급냉 및 동결건조시키는 전처리단계가 더 수행될 수 있다.A pretreatment step of quenching and lyophilizing the abalone may be further performed before the inoculation step.

상기 전처리단계와 상기 접종단계 사이에 상기 전처리단계에서 수득되는 건조된 전복을 분쇄하고, 이를 물과 혼합하여 균사체를 배양시킬 수 있는 배양액을 조성하는 배양액조성단계가 더 수행될 수 있다.Between the pretreatment step and the inoculation step, the dried abalone obtained in the pretreatment step may be further mixed and mixed with water to form a culture solution to form a culture solution for culturing mycelium.

상기 발효단계 이후에 상기 발효단계에서 수득되는 발효액을 숙성시키는 숙성단계가 더 수행될 수 있다.The fermentation step may be followed by an aging step of aging the fermentation broth obtained in the fermentation step.

상기 숙성단계는 상기 발효액을 3 내지 10℃에서 1 내지 3일간 저장하는 것에 의해 수행될 수 있다.The aging step may be performed by storing the fermentation broth at 3 to 10 ° C. for 1 to 3 days.

상기 발효단계 또는 상기 숙성단계 이후에 수득되는 발효액을 함수율 10%가 되도록 감압농축 및 동결건조시켜서 동결건조된 발효물을 수득하는 후처리단계가 더 수행될 수 있다.A post-treatment step may be further performed in which the fermentation liquid obtained after the fermentation step or the aging step is concentrated under reduced pressure and lyophilized to a water content of 10% to obtain a lyophilized fermentation product.

본 발명에 따른 버섯을 이용한 전복 버섯 발효물을 포함하는 화장품 조성물은 화장품 조성물 총 중량을 기준으로 하여 유효성분으로서 동결건조에 의해 수득되는 동결건조된 발효물 0.001 내지 80중량%의 범위 이내의 양으로 포함한다.Cosmetic composition comprising the abalone mushroom fermented product using the mushroom according to the present invention in an amount within the range of 0.001 to 80% by weight of the lyophilized fermented product obtained by lyophilization as an active ingredient based on the total weight of the cosmetic composition. Include.

본 발명에 따르면, 전복 버섯 발효물, 이의 제조방법 및 이를 유효성분으로 포함하는 화장료 조성물을 제공하며, 상기 전복 버섯 발효물은 콘트로이친황산을 포함한 유효성분을 포함하고, 버섯 균사체를 이용한 발효공정을 통하여 생성된 발효액은 발효공정 과정에서 생성되는 효소에 의해 고분자 화합물의 저분자 화합물로의 전환으로 피부에 유용한 물질이 증가하며, 균사체 자체의 유효 성분이 합쳐져 보습력, 탄력증진, 미백 효과를 갖는 화장품의 제조 등에서 유용하게 사용되는 효과를 제공한다.According to the present invention, there is provided an abalone mushroom fermented product, a preparation method thereof, and a cosmetic composition comprising the same as an active ingredient, wherein the abalone mushroom fermented product includes an active ingredient including controchin sulfate, and a fermentation process using mushroom mycelium. The fermentation broth produced through the fermentation process is converted into a low molecular weight compound by the enzyme produced during the fermentation process, which increases the useful substances for the skin, and the active ingredients of the mycelium are combined to bring about moisturizing, elasticity, and It provides an effect that is useful in manufacturing and the like.

또한, 상기 전복 버섯 발효물을 함유하는 화장료 조성물은 항산화 활성, 콜라겐의 생성, MMP-1(Matrix metalloproteinase ; 콜라겐의 분해를 촉진하는 효소)의 저해 효과가 우수하여 피부 주름 개선 효과를 발휘하는 효과를 제공한다.In addition, the cosmetic composition containing the abalone mushroom fermentation is excellent in antioxidant activity, the production of collagen, the inhibitory effect of MMP-1 (Matrix metalloproteinase; enzymes that promote the breakdown of collagen) to exert the effect of improving skin wrinkles to provide.

이하, 본 발명을 구체적인 실시예를 참조하여 상세히 설명한다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to specific examples.

본 발명은 버섯 균사체를 이용하여 발효공정을 통한 전복 버섯 발효물을 만들고, 이 전복 버섯 발효물을 화장품의 제조에 사용하여 이러한 전복 버섯 발효물을 함유하는 보습, 탄력, 미백, 피부 주름 개선 활성을 갖는 화장료을 제공한다.The present invention uses the mushroom mycelium to make the abalone mushroom fermentation through the fermentation process, and using this abalone mushroom fermentation in the manufacture of cosmetics moisturizing, elasticity, whitening, skin wrinkle improvement activity containing such abalone mushroom fermentation To provide cosmetics.

본 발명에 따른 전복 버섯 발효물은, 전복을 버섯 균사체로 발효시켜서 수득되는 것을 특징으로 한다.The abalone mushroom fermented product according to the present invention is characterized by being obtained by fermenting abalone with mushroom mycelium.

상기 전복은 전복육과 전복내장을 모두 포함할 수 있다.The abalone may include both abalone muscle and abalone viscera.

상기 버섯 균사체는 영지버섯(Ganoderma lucidum)의 균사체, 상황버섯(Phellinus linteus)의 균사체, 노루궁뎅이버섯(Hericium erinaceum)의 균사체, 전복느타리버섯(Pleurotus cystidiosus)의 균사체 및 이들 중 2이상의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이 될 수 있다.The mushroom mycelia are mycelium of Ganoderma lucidum , mycelium of Phellinus linteus , mycelium of Hericium erinaceum , mycelium of abalone mushroom ( Pleurotus cystidiosus ) and a mixture of two or more of them May be selected from.

본 발명에 따른 전복 버섯 발효물의 제조방법은, (1) 전복을 버섯 균사체로 접종시키는 접종단계; 및 (2) 버섯 균사체로 접종된 전복을 발효시키는 발효단계를 포함하여 이루어진다.Method for producing an abalone mushroom fermented product according to the invention, (1) inoculation step of inoculating abalone with mushroom mycelium; And (2) a fermentation step of fermenting the abalone inoculated with mushroom mycelium.

상기 접종단계에서의 상기 전복은 전복육과 전복내장을 모두 포함할 수 있다.The abalone in the inoculation step may include both abalone meat and abalone internal organs.

상기 접종단계에서의 상기 버섯 균사체는 영지버섯(Ganoderma lucidum)의 균사체, 상황버섯(Phellinus linteus)의 균사체, 노루궁뎅이버섯(Hericium erinaceum)의 균사체, 전복느타리버섯(Pleurotus cystidiosus)의 균사체 및 이들 중 2이상의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이 될 수 있다. The mushroom mycelium at the inoculation step is mycelium of Ganoderma lucidum , mycelium of Phellinus linteus , mycelium of Hericium erinaceum , mycelium of Pleurotus cystidiosus and two of them It may be selected from the group consisting of the above mixture.

상기 접종단계 이전에 상기 전복을 급냉 및 동결건조시키는 전처리단계가 더 수행될 수 있다.A pretreatment step of quenching and lyophilizing the abalone may be further performed before the inoculation step.

상기 전처리단계와 상기 접종단계 사이에 상기 전처리단계에서 수득되는 건조된 전복을 분쇄하고, 이를 물과 혼합하여 균사체를 배양시킬 수 있는 배양액을 조성하는 배양액조성단계가 더 수행될 수 있다.Between the pretreatment step and the inoculation step, the dried abalone obtained in the pretreatment step may be further mixed and mixed with water to form a culture solution to form a culture solution for culturing mycelium.

상기 발효단계 이후에 상기 발효단계에서 수득되는 발효액을 숙성시키는 숙성단계가 더 수행될 수 있다.The fermentation step may be followed by an aging step of aging the fermentation broth obtained in the fermentation step.

상기 숙성단계는 상기 발효액을 3 내지 10℃에서 1 내지 3일간 저장하는 것에 의해 수행될 수 있다.The aging step may be performed by storing the fermentation broth at 3 to 10 ° C. for 1 to 3 days.

상기 발효단계 또는 상기 숙성단계 이후에 수득되는 발효액을 함수율 10%가 되도록 감압농축 및 동결건조시켜서 동결건조된 발효물을 수득하는 후처리단계가 더 수행될 수 있다.A post-treatment step may be further performed in which the fermentation liquid obtained after the fermentation step or the aging step is concentrated under reduced pressure and lyophilized to a water content of 10% to obtain a lyophilized fermentation product.

본 발명에 따른 버섯을 이용한 전복 버섯 발효물을 포함하는 화장품 조성물은 화장품 조성물 총 중량을 기준으로 하여 유효성분으로서 동결건조에 의해 수득되는 동결건조된 발효물 0.001 내지 80중량%의 범위 이내의 양으로 포함한다.Cosmetic composition comprising the abalone mushroom fermented product using the mushroom according to the present invention in an amount within the range of 0.001 to 80% by weight of the lyophilized fermented product obtained by lyophilization as an active ingredient based on the total weight of the cosmetic composition. Include.

본 발명에 따른 전복 버섯 발효물의 제조방법은 바람직하게는 (1) 전복육과 내장의 급냉 및 동결건조 단계; (2) 건조된 전복육과 내장의 분쇄물을 물과 혼합하여 균사체를 배양시킬 수 있는 배양액 조성 단계; (3) 버섯 균사체를 단독 접종하여 발효하는 단계; 및 (4) 발효액을 숙성하는 단계;로부터 얻은 발효액, 또는 그 발효액을 다시 일부 또는 전부 감압농축 및 동결건조 하여 제조하여 얻은 농축물, 또는 발효액 및 농축액 중에 함유되고 있는 주 효과를 발휘하는 화학물질 그 자체를 포함한다.Method for producing the abalone mushroom fermentation product according to the invention preferably comprises the steps of (1) quenching and freeze-drying of abalone meat and intestines; (2) a culture solution composition step of culturing the mycelium by mixing the dried abalone meat and viscera pulverized with water; (3) fermenting by inoculating the mushroom mycelium alone; And (4) fermentation broth obtained from the step of aging the fermentation broth, or concentrates obtained by partially or totally depressurizing and lyophilizing the fermentation broth from the fermentation broth, or chemical substances exerting the main effect contained in the fermentation broth and the concentrate. It includes itself.

상기 전복은 육질과 내장을 분리한 후 수세하였으며, -80℃에서 급속냉동 보관하여 동결건조 후 분쇄하여 미세 분말 형태로 제조하였다. 전복을 동결건조하여 분말한 후 사용함으로써 전복의 영양성분 및 기능성 성분을 유지하면서 장시간 보관이 가능하고 보관 시 취급이 용이하다는 장점이 있으며, 생리활성 성분의 증가는 물론 전복 양식 생산량의 상당부분을 차지하는 양식 3 내지 4년산 전복의 원활한 원료 공급이 가능하다.The abalone was washed with water after separating the meat and the intestines, and stored in a rapid freeze at -80 ℃ lyophilized and then pulverized to prepare a fine powder form. By lyophilizing and drying the abalone powder, the abalone can be stored for a long time while maintaining the nutritional and functional ingredients of the abalone, and it is easy to handle during storage. It is possible to supply the raw materials of aquaculture three to four year old abalone.

상기 전복 버섯 발효물은 동결건조하여 분쇄한 분말시료를 안정적인 온도에서 물에 혼합 후, 버섯 균사체를 단독으로 접종한 후 발효공정을 통해 발효액을 수득하였으며, 발효 후 발효액을 감압농축 및 동결건조하여 사용하거나, 발효공정 수행 후 저온 숙성 또는 고온 숙성하는 공정을 포함할 수 있다. The abalone mushroom fermented product was lyophilized and mixed with a powder sample crushed in water at a stable temperature, inoculated with mushroom mycelium alone to obtain a fermentation broth through a fermentation process. Alternatively, the fermentation process may include a low temperature aging or a high temperature aging process.

상기의 전복 버섯 발효를 위해 사용한 버섯 균사체는 영지버섯(Ganoderma lucidum)의 균사체, 상황버섯(Phellinus linteus)의 균사체, 노루궁뎅이버섯(Hericium erinaceum)의 균사체, 전복느타리버섯(Pleurotus cystidiosus)의 균사체 및 이들 중 2이상의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이 될 수 있다. 상기 버섯 균사체는 버섯균주 및 DNA은행(CCDBM)의 웹사이트(http://www.wildmush.or.kr/sub/catalog.php?CatNo=23&Sort=)에서 분양신청 가능하다.The mushroom mycelium used for fermentation of abalone mushrooms is mycelium of Ganoderma lucidum , mycelium of Phellinus linteus , mycelium of Hericium erinaceum , mycelium of Pleurotus cystidiosus It may be selected from the group consisting of two or more of the mixture. The mushroom mycelium is available for sale on the website of the mushroom strain and DNA bank (CCDBM) (http://www.wildmush.or.kr/sub/catalog.php?CatNo=23&Sort=).

상기 접종 및 발효단계는 상기 배양액이 들어있는 발효조에 배양된 버섯 균사체(전배양액)를 접종하는 것으로, 상기에 5 내지 15중량%로 버섯 균사체를 접종한다. 발효 단계는, 전배양액을 접종한 상기 배양액을 최적조건(온도 24 내지 28℃)에서 3 내지 10일 동안 발효시킨다. 상기 배양액이 들어있는 배양조에 배양되는 버섯 균사체는 그 종균의 종류에 따라 배양 및 발효의 온도 및 기간에서 약간의 차이가 있을 수 있나, 당해 기술분야에서 숙련된 자에게는 적절한 발효조건을 선택 사용하는 것은 용이하게 이해될 수 있는 것이다.The inoculation and fermentation step is to inoculate the mushroom mycelium (preculture) cultured in the fermenter containing the culture solution, inoculate the mushroom mycelium to 5 to 15% by weight. In the fermentation step, the culture solution inoculated with the preculture is fermented for 3 to 10 days under optimum conditions (temperature 24 to 28 ° C). Mushroom mycelium cultured in the culture tank containing the culture solution may have a slight difference in the temperature and duration of the culture and fermentation depending on the type of the seed, but for those skilled in the art to select the appropriate fermentation conditions It can be easily understood.

상기 숙성 단계는 버섯 균사체가 접종된 전복 추출물을 발효시키는 단계와, 발효물을 획득하는 단계에 의하여 획득된 발효물(발효소재)을 사용하는 제품화 방법에 따라 추가되는 단계로써, 발효소재를 3 내지 10℃의 저온에서 1 내지 3일간 숙성시킨다.The aging step is a step of fermenting the abalone extract inoculated mushroom mycelium, and the step of adding the product according to the commercialization method using the fermentation product (foot enzyme material) obtained by the step of obtaining a fermentation material, the fermentation material 3 to Aged at low temperature of 10 ℃ 1-3 days.

본 발명에 따른 화장료 조성물은 상기의 추출물 외에 본 발명이 목적으로 하는 주 효과를 손상시키지 않고, 주 효과에 상승효과를 줄 수 있는 다른 성분등을 함유하는 것도 무방하다. 상기 전복 발효추출물은 조성물 전체에 대하여 동결건조 중량 기준 0.001 내지 80중량%로 조성물에 존재할 수 있다.The cosmetic composition according to the present invention may contain, in addition to the above-mentioned extracts, other components that can give a synergistic effect to the main effect without impairing the main effect of the present invention. The abalone fermentation extract may be present in the composition in an amount of 0.001 to 80% by weight based on the total weight of the composition.

본 발명에 따른 상기 전복 버섯 발효물은 당해 기술분야에서는 공지된 기술을 사용하여 나노캡슐, 마이크로캡슐, 나노좀 등의 제형으로 용액 또는 파우더 형태로 가공이 가능하며, 당업자는 상기 농도 범위 내에서 본 발명에 따른 조성물 내에 이 용액 또는 파우더의 양을 조절할 수 있을 것이다. 상기한 바와 같이 보습, 탄력개선 효과가 있는 미백 및 피부주름 개선 활성을 갖는 조성물로 가공된 화장품, 식품, 의약품 등에 제공된다. The abalone mushroom fermentation product according to the present invention can be processed into a solution or powder form in the form of nanocapsules, microcapsules, nanosomes, etc. using techniques known in the art, and those skilled in the art It will be possible to control the amount of this solution or powder in the composition according to the invention. As described above, the present invention is provided to cosmetics, foods, medicines, and the like processed into a composition having a whitening and skin wrinkle improving activity having a moisturizing and elasticity improving effect.

본 발명의 전복 발효 추출물은 피부외용제로서 그 제형에 있어서 특별히 한정되지 않으며, 유연화장수, 밀크로션, 영양크림, 마사지 크림, 에센스, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩 또는 보디 오일 등의 기초 화장료 및 파운데이션, 립스틱, 마스카라 또는 메이크업 베이스 등의 색조 화장료 형태로 제조할 수 있다. 본 발명의 화장료를 세정제로 사용할 경우, 세안제 및 목욕제를 제조할 수 있다. Abalone fermented extract of the present invention is not particularly limited in its formulation as an external preparation for skin, basic cosmetics and foundations such as softener, milk lotion, nutrition cream, massage cream, essence, cleansing foam, cleansing water, pack or body oil, It may be prepared in the form of a color cosmetic such as lipstick, mascara or makeup base. When the cosmetic of the present invention is used as a detergent, a cleanser and a bath agent can be produced.

이하 본 발명을 하기 위해 실시예와 실험예를 통하여 상세하게 설명하나, 이는 본 발명의 이해를 돕기 위하여 제시된 것일 뿐, 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to Examples and Experimental Examples. However, the present invention is not limited thereto.

실시예 1Example 1

전복은 생전복을 구입하여 껍질에 붙어 있는 이물질을 제거한 다음 통째로 세척하였고, 육질과 내장을 분리하여 전복육과 전복내장을 준비한 후, 한번 더 세척하였다. -80℃에서 급속냉동 보관하여 동결건조 후 분쇄하여 분말 형태로 제조하였다.Abalone purchased live abalone to remove foreign matters attached to the shell and then washed whole, separated meat and viscera to prepare abalone meat and abalone gut, and then washed once more. Rapid freeze storage at -80 ° C lyophilized and then ground to prepare a powder form.

전복육과 전복내장 분말의 건조 중량의 10배 양의 증류수를 가하여 잘 섞어준 후, 미리 배양된 버섯 균사체(전배양액 ; 전복느타리 버섯균사체를 전복 추출물에 접종하기 위해 배양에 최적화된 균사체를 준비하는 것으로, 전복느타리버섯 균사체를 온도 25℃, 진탕속도(ShakingRate) 120RPM에서 3일간 배양하여 나온 수득물을 말함)를 10중량%로 접종하였다. 그 후, 최적조건(온도 26℃)에서 5일 동안 발효시켰다. 발효를 종료하기 위해 80℃에서 10분간 열을 가하여 버섯 균사체의 기능상실을 유도하였다. 발효물의 숙성을 위해 4℃ 저온에서 2일간 숙성시켰다. 원심분리기를 이용하여 침전물을 제거하고, 상등액을 채취하거나, 여과된 상등액을 60℃ 이하에서 함수율 10% 이하로 감압농축한 후, 동결건조된 것을 사용하였다.After mixing 10 times the distilled water of the abalone meat and abalone viscera powder, mix well, and prepare the mycelium optimized for cultivation to inoculate the abalone extract with the precultured mushroom mycelium (Pear culture liquid; abalone mushroom mycelium). , The abalone mushroom mycelia were incubated at a temperature of 25 ℃, shaking rate (ShakingRate) 120 RPM for 3 days) to 10% by weight. Thereafter, the fermentation was carried out for 5 days under optimum conditions (temperature 26 ° C). In order to terminate the fermentation, heat was applied at 80 ° C. for 10 minutes to induce a malfunction of the mushroom mycelium. The fermented material was aged at a low temperature of 4 캜 for 2 days for aging. The precipitate was removed using a centrifuge, the supernatant was collected, or the filtered supernatant was concentrated under reduced pressure to a water content of 10% or less at 60 ° C or lower and then freeze-dried.

비교예 1: 전복 일반 추출물의 제조Comparative Example 1: Preparation of Abalone General Extract

대조군으로 사용된 전복 일반 추출물은 발효 공정 없이 동일한 열수 추출 공정을 통해 수득하였다. 즉, 건조 중량의 10배 양의 증류수를 가하여 잘 섞어준 후, 80℃에서 3시간 가온 환류 추출하여 상등액과 침전물을 분리하여 3회 반복 추출하였다. 각 추출물은 냉침한 후, 8㎛ 투과사이즈를 갖는 여과지로 여과하였다. 이 여과된 추출액을 60℃ 이하에서 감압농축한 후 감압건조기를 이용해 완전히 건조시켜 전복 일반 추출물을 수득하였다.Abalone general extract used as a control was obtained through the same hydrothermal extraction process without the fermentation process. That is, 10 times the amount of dry weight of distilled water was added and mixed well, and extracted by heating under reflux at 80 ℃ for 3 hours to separate the supernatant and the precipitate was extracted three times. Each extract was air-cooled and then filtered with a filter paper having a permeation size of 8 mu m. The filtered extract was concentrated under reduced pressure at 60 ° C. or lower and completely dried using a reduced pressure dryer to obtain a general abalone extract.

비교예 2: 전복 효모 발효 추출물의 제조Comparative Example 2: Preparation of Abalone Yeast Fermented Extract

대조군으로 사용된 전복 효모 발효 추출물은 전복육질과 내장 분말의 건조 중량의 10배 양의 증류수를 가하여 잘 섞어준 후, pH를 4.0 내지 5.0 내지 6.5 내지 7.5 로 조정하고, 미리 배양된 효모(Bacillus subtilis)를 107 내지 108 CFU/㎖ 농도가 되도록 첨가하였다. 효모는 50 내지 60℃ 온도에서 24 내지 72시간 배양하였다. 발효를 종료하기 위해 80℃에서 10분간 열을 가하여 효모의 기능상실을 유도하였다. 원심분리기를 이용하여 침전물을 제거하고 상등액을 채취하거나, 여과된 상등액을 60℃ 이하에서 감압농축한 후 동결건조된 것을 사용하였다.Abalone yeast fermented extract used as a control was mixed well by adding distilled water of 10 times the dry weight of abalone flesh and viscera powder, adjust the pH to 4.0 to 5.0 to 6.5 to 7.5, and pre-cultured yeast ( Bacillus subtilis ) Was added to a concentration of 10 7 to 10 8 CFU / mL. Yeast was incubated for 24 to 72 hours at 50-60 ℃ temperature. To terminate the fermentation, heat was applied at 80 ° C. for 10 minutes to induce a loss of function of the yeast. The precipitate was removed using a centrifuge and the supernatant was collected, or the filtered supernatant was concentrated under reduced pressure at 60 ° C. or lower and then lyophilized.

실험예 1: 전복 발효 추출물에 함유된 성분 및 성분의 함량 측정Experimental Example 1: Determination of the Components and Contents of the Abalone Fermented Extract

1-1: 총 페놀함량 및 총 플라보노이드 함량 측정1-1: Determination of total phenol content and total flavonoid content

총 페놀 함량 측정은 하기와 같이 수행하였다. 시료 200㎕에 1N 폴린 시오칼토(Folin Ciocalteau) 용액 200㎕을 넣고 10% 탄산나트륨 용액 200㎕을 넣어 상온에서 10분간 방치하였다. 반응액을 150g에서 10분간 원심분리하여 상등액을 마이크로플레이트 리더(microplate reader ; 미합중국 소재 크로메이트사(Chromate) 제품)를 이용하여 540㎚에서 흡광도를 측정하였다. 이때 표준곡선은 갈릭산(galic acid) 0.1% 농도로 희석하여 작성하였고, 검량선으로부터 시료의 총페놀함량을 산출하였다.Total phenol content determination was performed as follows. 200 μl of 1N Folin Ciocalteau solution was added to 200 μl of sample, and 200 μl of 10% sodium carbonate solution was added thereto and left at room temperature for 10 minutes. The reaction solution was centrifuged at 150 g for 10 minutes and the supernatant was measured for absorbance at 540 nm using a microplate reader (Chromate, USA). At this time, the standard curve was prepared by diluting the concentration of galic acid to 0.1%, and the total phenol content of the sample was calculated from the calibration curve.

총 플라보노이드 함량 측정은 하기와 같이 수행하였다. Total flavonoid content measurement was performed as follows.

시료용액 1% 100㎕과 에탄올 300㎕, 10% 질산알루미늄용액 20㎕, 1M 초산칼륨용액 20㎕, 물 560㎕을 가하여 충분히 교반시켰다. 실온에서 40분간 정치 후, 액층을 마이크로플레이트 리더(크로메이트사 제품)를 이용하여 405㎚에서 흡광도를 측정하였다. 공시험은 시료 용액 대신 에탄올 용액을 이용하여 동일하게 처리하였고, 대조시료(blank)는 질산알루미늄 용액 대신 물을 사용한 것을 사용하였다. 이때 표준곡선은 쿼세틴(Quercetin)을 0.05% 농도로 희석하여 작성하였고, 검량선으로부터 시료의 총플라보노이드 함량을 산출하였으며, 그 결과를 하기 표 1(총 페놀함량 및 총 플라보노이드 함량)에 나타내었다.100 μl of sample solution, 300 μl of ethanol, 20 μl of 10% aluminum nitrate solution, 20 μl of 1M potassium acetate solution, and 560 μl of water were added thereto, and the mixture was sufficiently stirred. After standing at room temperature for 40 minutes, the liquid layer was measured for absorbance at 405 nm using a microplate reader (manufactured by Chromate). The blank test was conducted in the same manner using an ethanol solution instead of a sample solution, and a blank was used in which water was used instead of an aluminum nitrate solution. The standard curve was prepared by diluting quercetin to 0.05% concentration, and calculated the total flavonoid content of the sample from the calibration curve, and the results are shown in Table 1 (total phenol content and total flavonoid content).

시료명Name of sample 총 페놀 함량
(㎍/㎎)
Total phenol content
(Μg / mg)
총 플라보노이드 함량
(㎍/㎎)
Total flavonoid content
(Μg / mg)
실시예 1Example 1 22.822.8 20.120.1 비교예 1Comparative Example 1 15.315.3 5.95.9 비교예 2Comparative Example 2 22.122.1 9.89.8

1-2: 콘드로이틴황산 함량1-2: Chondroitin Sulfate Content

콘드로이친황산은 건강기능식품공전에 따라 측정하였다. 즉, 시료 3g을 물을 가하여 혼합하고 100㎖로 하여, 이 액 4㎖를 정확히 취하여 물을 가해 20㎖로 하고, 정량분석용 여지(미합중국 소재 어드밴테크사(Adventec.) 제품 5C를 사용하여 여과한 것을 검액으로 하였다. 별도로 두 개의 비색관에 붕산나트륨황산 시약 5㎖를 각각 넣고 얼음물로 충분히 냉각한 후, 검액과 표준용액을 1㎖를 시약 위에 주의하여 가하고 얼음물 속에서 냉각하였다. 각각에 카바졸시액 0.2㎖를 정확히 가하여 혼합하고, 수욕 상에서 15분간 가열하고, 얼음물로 실온까지 냉각시켰다. 이들의 액에 대하여 물 1㎖를 사용하여 동일하게 조작한 것을 대조액으로 하여, 마이크로플레이트 리더(크로메이트사 제품)를 이용하여 530㎚에서 흡광도를 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 2(콘드로이친황산 함량)에 나타내었다.Chondroitin sulfate was measured according to the dietary supplement. In other words, 3 g of the sample was mixed with water to make 100 ml, and 4 ml of this solution was precisely taken up to 20 ml with water, followed by filtration using a room for quantitative analysis (Advantec, USA 5C). Separately, 5 ml of sodium borate sulfate solution was added to each of two colorimetric tubes, and after cooling sufficiently with ice water, 1 ml of the sample solution and the standard solution were carefully added on the reagent and cooled in ice water. 0.2 ml of the solving solution was added correctly, mixed, heated for 15 minutes in a water bath, and cooled to room temperature with ice water.The same operation was carried out using 1 ml of water for these liquids as a control solution, and a microplate reader (Chromate) Product) and the absorbance at 530 nm was measured, and the results are shown in the following Table 2 (content of chondroitin sulfate).

시료명Name of sample 콘드로이친황산 함?(%)Contains Chondroitin Sulfate (%) 실시예 1Example 1 4141 비교예 1Comparative Example 1 1414 비교예 2Comparative Example 2 4040

실험예 2: 항산화 활성Experimental Example 2: Antioxidant Activity

전복 버섯 발효물의 항산화 활성을 측정하기 위하여, 2.2-디페닐-1-피크릴 히드라질 ; DPPH, 2.2-diphenyl-1-picryl hydrazyl, 이하 ‘DPPH’라 한다)라디칼 소거능 분석법을 사용하였다. 500μM DPPH 용액을 에틸알콜에 녹여 여과한 후, 즉시 사용하였다. 제조된 DPPH 용액과 시료 용액을 1:1로 혼합하여 격렬하게 섞은 후, 상온 암소에 20 분간 방치하였다. 마이크로플레이트 리더(크로메이트사 제품)를 이용하여 540㎚에서 흡광도를 측정한 후, 하기 수학식 1를 통해 DPPH 라디칼 제거율(%)을 산출하였다. 이때 라디칼을 제거하는 양성 대조군(positive control)으로 1mM의 아스코르브산(ascorbic acid)을 사용하였으며, 그 결과를 하기 표 3(전복 발효 추출물의 항산화 활성)에 나타내었다.To measure the antioxidant activity of the abalone mushroom fermentation, 2.2-diphenyl-1-picryl hydrazyl; DPPH, 2.2-diphenyl-1-picryl hydrazyl, hereinafter referred to as “DPPH”) radical scavenging assay was used. 500 μM DPPH solution was dissolved in ethyl alcohol, filtered, and used immediately. The prepared DPPH solution and the sample solution were mixed at a ratio of 1: 1 and mixed vigorously. The mixture was allowed to stand at room temperature for 20 minutes. After absorbance was measured at 540 nm using a microplate reader (manufactured by Chromate), DPPH radical removal rate (%) was calculated through Equation 1 below. At this time, 1mM of ascorbic acid was used as a positive control to remove radicals, and the results are shown in Table 3 (antioxidative activity of the abalone fermentation extract).

[수학식 1][Equation 1]

DPPH 라디칼 제거율(scavenging, %) = ((A B)) / A * 100DPPH radical scavenging (%) = ((A B)) / A * 100

상기 식에서, A는 공시험액에서 얻은 흡광도이고, B는 검액에서 얻은 흡광도임.Where A is the absorbance of the blank test solution and B is the absorbance of the test solution.

농도(%)
density(%)
항산화력(%)Antioxidant capacity (%)
실시예 1Example 1 비교예 2Comparative Example 2 0.00040.0004 3333 3535 0.0020.002 5454 6868 0.010.01 9696 9595

실험예 3: 피부주름 개선 효과Experimental Example 3: Skin wrinkle improvement

3-1: 콜라겐 생합성 평가3-1: Collagen Biosynthesis Evaluation

시료에 대한 섬유아세포(Fibroblast) 내에서 새로 생성되는 콜라겐(collagen) 양을 측정하기 위해 프로콜라겐 분석(procollagen assay)을 실시하였다. 콜라겐 생성에 관여하는 세포주의 하나인 섬유아세포를 1% 항생제-항진균제(Antibiotic-Antimycotic ; AA, 대한민국 소재 웰젠사(Welgene) 제품)과 10% 우태혈청(FBS ; Fetal bovine serum, 웰젠사 제품)을 포함한 둘베코 변성 필수 배지(DMEM ; Dulbecco's modified essential medium, 웰젠사 제품)를 이용하여 37℃, 5% 이산화탄소 배양기(CO2 incubator)에서 배양하였다. 2×105 농도의 섬유아세포를 6웰 플레이트(6 well plate)에 접종하여 24시간 동안 배양한 후, 배지를 제거하고, 무혈청 배지를 처리하여 24시간 동안 금식(starvation) 시켰다. 24시간 후, 무혈청 배지를 제거하고, 인산완충식염수(PBS)로 세척한 후, 312㎚ 파장의 자외선에서 12.5mJ로 조사하였다. 그 후, 시료를 무-페놀레드 둘베코 변성 필수 배지(phenolred free DMEM)에 농도 별로 처리하여 48시간 동안 추가 배양하였다. 아스코르브산 50μM을 양성 대조로, UV(+)군을 음성 대조(Negative control)로, 배지만 처리한 그룹을 대조군(control)으로 사용하여 시료의 결과와 비교하였다. 발효물 처리 후, 48시간 동안의 배양이 끝난 후 배지를 수거하였다. 수거한 배지는 프로콜라겐 I형 C-펩티드(Procollagen Type-I C-Peptide ; PIP) EIA 킷트(타카라바이오사(Takara Bio Inc.) 제품 MK101)를 이용하여 콜라겐 양을 측정하였다. 항체-과산화효소 공액 용액(Antibody-peroxidase conjugate solution) 100㎕를 각 웰(well)에 첨가하고, 샘플이나 표준물질을 20㎕씩 넣은 뒤, 잘 섞어서 37℃에서 3시간 방치하였다. 반응이 끝나면 내용물을 제거한 뒤 인산염완충식염수 400㎕로 4번 세척하였다. 제거 후, 기질용액 100㎕를 첨가하여 실온에서 15분간 반응시킨 뒤, 정지용액(stop solution) 100㎕를 첨가하여 부드럽게 섞어주었다. 마이크로플레이트 리더(크로메이트사 제품)을 이용하여 450㎚에서 흡광도를 측정한 후, 표준 농도곡선을 작성하여 콜라겐 양을 산정하였으며, 그 결과를 하기 표 4(전복 발효 추출물의 자외선에 의한 자극에 의한 콜라겐 생합성)에 나타내었다.A procollagen assay was performed to measure the amount of collagen newly generated in fibroblasts. Fibroblasts, one of the cell lines involved in collagen production, were treated with 1% Antibiotic-Antimycotic (AA, manufactured by Welgene, South Korea) and 10% Fetal bovine serum (Welzen). Dulbecco's modified essential medium (DMEM; Dulbecco's modified essential medium, manufactured by Welsen) was incubated in a 37 ° C., 5% carbon dioxide incubator (CO 2 incubator). Fibroblasts of 2 × 10 5 concentration were inoculated into 6 well plates (6 well plates) and incubated for 24 hours, and then the medium was removed, and serum-free medium was treated and starvated for 24 hours. After 24 hours, serum-free medium was removed, washed with phosphate buffered saline (PBS), and irradiated with 12.5 mJ in ultraviolet rays at 312 nm wavelength. Thereafter, the samples were treated by concentration in phenol red Dulbecco's denatured essential medium (phenolred free DMEM) and further incubated for 48 hours. 50 μM of ascorbic acid was used as a positive control, UV (+) group was used as a negative control, and only the treated group was used as a control. After fermentation treatment, the medium was harvested after the incubation for 48 hours. The collected media was measured for collagen amount using a Procollagen Type-I C-Peptide (PIP) EIA kit (MK101 from Takara Bio Inc.). 100 μl of an antibody-peroxidase conjugate solution was added to each well, 20 μl of a sample or standard was added thereto, mixed well, and left at 37 ° C. for 3 hours. After the reaction, the contents were removed and washed four times with 400 μl of phosphate buffered saline. After removal, 100 μl of substrate solution was added and reacted at room temperature for 15 minutes. Then, 100 μl of stop solution was added and mixed gently. After measuring the absorbance at 450 nm using a microplate reader (manufactured by Chromate), a standard concentration curve was prepared to calculate the amount of collagen, and the results are shown in Table 4 (Collagen due to stimulation by ultraviolet rays of the abalone fermentation extract). Biosynthesis).

시험군Test group 프로콜라겐 농도(㎍/㎖)Procollagen Concentration (µg / mL) 0.0004%0.0004% 0.002%0.002% UV(+)UV (+) 7878 AS 25μMAS 25μM 101101 실시예 1Example 1 145145 165165 비교예 1Comparative Example 1 112112 120120 비교예 2Comparative Example 2 125125 140140

상기 표 4 에 나타난 바와 같이, 발효물들의 자외선에 의한 자극에 의한 항주름 활성을 살펴보기 위해서, 실시예 1, 비교예 1 및 비교예 2(80℃, 3시간)을 함께 비교하였다. 비교예 1 및 비교예 2에 비해 본 발명에 따른 실시예 1로 처리하였을 때 새로 생성되는 콜라겐양이 증가하는 것을 확인할 수 있었다. As shown in Table 4, Example 1, Comparative Example 1 and Comparative Example 2 (80 ℃, 3 hours) were compared together to look at the anti-wrinkle activity by the stimulation of the ultraviolet light of the fermented products. Compared with Comparative Example 1 and Comparative Example 2 was confirmed that the amount of newly generated collagen increased when treated with Example 1 according to the present invention.

3-2: MMP-1 저해 평가3-2: MMP-1 Inhibition Evaluation

콜라겐을 분해하는 효소는 그 종류가 다양하며, 가장 많이 알려져 있는 것이 콜라겐 I형(collagen type I)을 분해하는 MMP-1 ; Matrix metalloproteinase I, collagenase)으로 이를 측정하기 위해 MMP-1 분석을 실시하였다. 콜라겐 생성에 관여하는 세포주의 하나인 섬유아세포를 1% 항생제-항진균제(웰젠사 제품)과 10% 우태혈청(웰젠사 제품)을 포함한 둘베코 변성 필수 배지(웰젠사 제품)를 이용하여 37℃, 5 % 이산화탄소 배양기에서 배양하였다. 2×105 농도의 섬유아세포를 6 웰 플레이트에 접종하여 24시간 동안 배양한 후, 배지를 제거하고, 무혈청 배지를 처리하여 24시간 동안 금식시켰다. 24시간 후, 무혈청 배지를 제거하고 인산염완충식염수로 세척한 후, UV 312㎚ 파장의 자외선에서 12.5mJ로 조사하였다. 그 후, 시료를 무-페놀레드 둘베코 변성 필수 배지(phenolred free DMEM)에 농도 별로 처리하여 48시간 동안 추가 배양하였다. 아스코르브산 50μM을 양성 대조로, UV(+)군을 음성 대조로, 배지만 처리한 그룹을 대조군으로 사용하여 시료의 결과와 비교하였다. 추출물 처리 후 48시간 동안의 배양이 끝난 후, 배지를 수거하였다. 수거한 배지는 MMP-1 측정 키트(영국 소재 아메르샴바이오사이언스사(Amersham Bioscience) 제품 RPN 2610)를 이용하여 엘리사 리더(ELISA reader)로 450㎚에서 흡광도를 측정하였다. 항-MMP1 항체(anti-MMP1 antibody)로 코팅된 96 웰 플레이트에 완충제(buffer)를 웰 하나에 첨가하여 대조군(blank)으로 하고, 배지 중에 유리된 샘플과 표준액 100㎕를 각각의 웰에 투입하였다. 실온에서 교반(shaking) 없이 2시간 동안 반응시켰다. 세척완충제(Washing buffer)로 웰을 가득 채워서 3회 반복해서 세척 한 후, 물기를 완전히 제거하였다. 100㎕ 과산화효소 공액 용액을 첨가하고, 실온에서 교반없이 2시간 동안 반응시켰다. 세척완충제로 웰을 가득 채워서 30분간 교반하면서 반응시켰다. 100㎕의 1M 황산(H2SO4)으로 반응을 중지시킨 후, 마이크로플레이트 리더(크로메이트사 제품)를 이용하여 450㎚에서 흡광도를 측정하여 비교하였으며, 그 결과를 하기 표 5(전복 효모발효 추출물의 자외선에 의한 자극에 의한 MMP-1 활성 저해도)에 나타내었다.There are various kinds of enzymes that break down collagen, and the most known ones include MMP-1 that breaks down collagen type I; Matrix metalloproteinase I, collagenase) was performed to analyze the MMP-1. Fibroblasts, one of the cell lines involved in collagen production, were treated with Dulbecco's denatured essential medium (from Welzen) containing 1% antibiotic-antifungal (from Welzen) and 10% fetal bovine serum (from Welsen). Incubated in a 5% carbon dioxide incubator. Fibroblasts at 2 × 10 5 concentrations were inoculated into 6 well plates and incubated for 24 hours, after which the medium was removed and the serum-free medium was treated and fasted for 24 hours. After 24 hours, the serum-free medium was removed, washed with phosphate buffered saline, and irradiated at 12.5 mJ in ultraviolet light with a UV 312 nm wavelength. Thereafter, the samples were treated by concentration in phenol red Dulbecco's denatured essential medium (phenolred free DMEM) and further incubated for 48 hours. 50 μM of ascorbic acid was used as a positive control, the UV (+) group was used as a negative control, and only the treated group was used as a control and compared with the results of the samples. After incubation for 48 hours after the extract treatment, the medium was collected. The collected media was measured for absorbance at 450 nm with an ELISA reader using an MMP-1 measurement kit (RPN 2610 from Amersham Bioscience, UK). A buffer was added to a single well to a 96 well plate coated with an anti-MMP1 antibody to be a control, and 100 μl of the sample and standard solution liberated in the medium were added to each well. . The reaction was carried out for 2 hours without shaking at room temperature. The wells were filled with a washing buffer, washed three times, and then completely drained. 100 μl peroxide conjugated solution was added and reacted for 2 hours without stirring at room temperature. The wells were filled with washing buffer and reacted with stirring for 30 minutes. After the reaction was stopped with 100 μl of 1M sulfuric acid (H 2 SO 4 ), the absorbance was measured at 450 nm using a microplate reader (manufactured by Chromate), and the results are shown in Table 5 below. Inhibition degree of MMP-1 activity by the stimulation by ultraviolet rays).

시험군Test group MMP-1(대조군의 %)MMP-1 (% of control) 0.0004%0.0004% 0.002%0.002% UV(+)UV (+) 100100 AS 50μMAS 50μM 7373 실시예 1Example 1 9999 8484 비교예 1Comparative Example 1 114114 9090 비교예 2Comparative Example 2 9898 8282

상기 표 5 에 나타난 바와 같이, 발효물들의 자외선에 의한 자극에 의한 항주름 활성을 살펴보기 위해서, 실시예 1로 처리하였을 경우를 비교예 1 및 비교예 2로 처리하였을 경우와 함께 비교하였다(80℃, 3시간). 비교예 1로 처리했을 때보다 실시예 1로 처리하였을 때 MMP-1 활성 저해가 낮게 나타남을 확인할 수 있었다.이는 상기 표 4 의 콜라겐 생합성에 상응하는 결과를 보여준다.As shown in Table 5, in order to examine the anti-wrinkle activity of the fermentation products by the stimulation by ultraviolet rays, the case treated with Example 1 was compared with the case treated with Comparative Example 1 and Comparative Example 2 (80 C, 3 hours). It was confirmed that the inhibition of MMP-1 activity was lower when treated with Example 1 than when treated with Comparative Example 1. This shows the results corresponding to the collagen biosynthesis of Table 4.

실험예 4: 데시게이터를 이용한 보습력 측정Experimental Example 4: Measurement of moisturizing power using a desiccator

상기 실시예 1 및 비교예 1 각 5㎖을 플레이트에 넣은 후, 완전건조 된 염화칼슘(CaCl2)를 흡습제로 하여 35℃ 데시케이터에서 무게를 측정하였다. 무게는 총 144시간 동안 측정하였다. 보습력은 하기 수학식 2에 따라 계산하였으며, 화장품 배합의 보습성분으로서 일반적으로 사용되는 1,3-부틸렌글리콜(BG)을 대조군으로 하여 비교한 실험결과를 하기 표 6(전복 버섯 발효물의 데시케이터를 이용한 보습력 측정)에 나타내었다.5 ml of each of Example 1 and Comparative Example 1 were placed in a plate, and the total weight of dried calcium chloride (CaCl 2 ) was used as a hygroscopic agent in a 35 ° C. desiccator. The weight was measured for a total of 144 hours. The moisturizing power was calculated according to the following Equation 2, and the experimental results of comparing 1,3-butylene glycol (BG), which is generally used as a moisturizing ingredient in cosmetic formulations, as a control, are shown in Table 6 Moisturizing power measurement using a micrometer).

[수학식 2]&Quot; (2) "

보습력(%) = (1 - △S/S) * 100Moisturizing Strength (%) = (1-△ S / S) * 100

여기에서, S는 초기 표본의 무게이고, ΔS는 초기 표본의 무게에서 최종 표본의 무게를 차감한 값이다.Where S is the weight of the initial sample and ΔS is the weight of the final sample minus the weight of the final sample.

시간(hr)Time (hr) 보습력(%)Moisture power (%) 대조군
(BG)
Control group
(BG)
비교예 1Comparative Example 1 실시예 1Example 1
2424 100100 100100 100100 4848 9292 8787 9595 7272 8585 7575 9393 120120 8282 7070 9090 144144 7474 5858 8888

상기 표 6 에 나타난 바와 같이, 상기 비교예 1 및 1,3-부틸렌글리콜에 비해 본 발명에 따른 전복 버섯 발효물의 보습력이 시간 경과에 따라 유의적으로 높은 것을 알 수 있다.As shown in Table 6, compared to the Comparative Example 1 and 1,3-butylene glycol it can be seen that the moisturizing power of the abalone mushroom fermentation according to the present invention is significantly higher over time.

제형예 1: 에멀젼 베이스 제조Formulation Example 1: Emulsion Base Preparation

상기 실시예 1의 전복 버섯 발효물을 함유한 화장료를 포함한 에멀젼 베이스를 제조하였다. 본 실험에 사용된 화장료는 유화형 화장액 형태이고, 그 조성은 하기 표 7에 나타낸 바와 같다. 우선 표 7에 기록되어 있는 전복 버섯 발효물(실시예 1) 및 기타 함량을 중량별로 첨가한 후, (가)상을 가열하여 90℃로 유지하고, 정제수(30%)를 90℃까지 가열한 후, (가)상 중에 천천히 첨가하여 호모믹서로 균일하게 유화시켰다. 그 후 실온까지 냉각하고 남은 (나)상의 정제수를 첨가하고 균일하게 교반하여 화장액을 제조하였다. 이하에서 “적량”이라 함은 제조업자의 지시에 따라 또는 당해 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자가 적의 선택하여 용이하게 실시할 수 있을 정도로 공지된 양을 의미한다.An emulsion base including a cosmetic containing the abalone mushroom fermented product of Example 1 was prepared. The cosmetics used in this experiment is in the form of an emulsion cosmetic liquid, its composition is shown in Table 7 below. First, after adding the abalone mushroom fermented product (Example 1) and other contents recorded in Table 7, by weight, (a) the phase was heated to maintain at 90 ℃, purified water (30%) was heated to 90 ℃ Thereafter, the mixture was slowly added to the (a) phase to emulsify it homogeneously with a homomixer. Thereafter, the mixture was cooled to room temperature, and the remaining (b) phase purified water was added and stirred uniformly to prepare a cosmetic liquid. Hereinafter, "suitable amount" means a known amount so that it can be easily carried out according to the manufacturer's instructions or by those of ordinary skill in the art.

구분division 성분ingredient 중량%weight% end 실시예 1Example 1 1.51.5 글리세린glycerin 3.003.00 디소듐이디티에이Disodium iodide 0.020.02 폴리글리세릴-3-메틸글루코스 디스테아레이트Polyglyceryl-3-methylglucoside distearate 1.61.6 세테아릴알코올Cetearyl alcohol 0.50.5 카프릴릭/카프릭트리글리세라이드Caprylic / capric triglyceride 6.86.8 폴리아크릴아마이드 & C13-14이소파라핀 & 라우레스-7Polyacrylamide & C13-14 Isoparaffin & Laureth-7 0.600.60 방부제antiseptic 적량Suitable amount I 정제수Purified water 잔량(100까지)Remaining capacity (up to 100)

실험예 5: 피부 보습 평가Experimental Example 5: Evaluation of Skin Moisturizing

5-1: 피부수분 증가효과5-1: Skin moisture increase effect

본 발명에 따른 전복 버섯 발효물을 유효성분으로 포함하는 화장품의 피부의 보습력 효과를 측정하기 위하여, 설문조사로 피부가 건조하다고 느끼는 20 내지 40세의 여성 40명을 대상으로 상기 제형예 1에서 제조된 화장료를 1일 2회씩 얼굴에 도포하게 한 후, 1개월간 사용하게 하였다. 도포 시작 전, 항온, 항습 조건(온도 20 내지 22℃, 상대습도 40%)에서 수분보유측정기(독일국 소재 커리지 카자카 일렉트로닉 게엠베하(courage Khazaka electronic GmbH) 제품 corneometer CM825)를 이용하여 피부 전도도를 측정하여 기본값을 삼고, 1주, 2주, 4주 경과 후의 피부 전도도를 측정하여 보습의 증가율을 평가하였다. 이때, 양성대조군으로서 추출물 대신 지질혼합물(세라마이드 : 콜레스테롤 : 지방산 = 2 : 1 : 1)을 사용하였으며, 그 결과를 하기 표 8(피부수분 증가율(%))에 나타내었으며, 그 결과값은 평균값으로 나타내었다.In order to measure the moisturizing effect of the skin of cosmetics containing the abalone mushroom fermentation according to the present invention as an active ingredient, it was prepared in Formulation Example 1 for 40 women aged 20 to 40 feel dry skin by a survey The applied cosmetics were applied twice a day to the face and then used for one month. The skin conductivity is measured using a moisture meter (courier Khazaka electronic GmbH, corneometer CM825, Germany) from constant temperature and humidity conditions (temperature 20-22 ° C, relative humidity 40%). The rate of increase in moisturization was evaluated by measuring the skin conductivity after 1 week, 2 weeks, and 4 weeks. In this case, a lipid mixture (ceramide: cholesterol: fatty acid = 2: 1: 1) was used instead of the extract as a positive control group, and the results are shown in Table 8 (skin moisture growth rate (%)). Indicated.

시험군Test group 1주 경과1 week 2주 경과Two weeks 4주 경과4 weeks 비교예 1Comparative Example 1 4242 5353 6565 실시예 1Example 1 5353 6060 7373 양성대조군Positive control group 3838 4646 6262

상기 표 8에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 전복 버섯 발효물을 유효성분으로 포함하는 화장품 조성물의 피부수분 증가율이 비교예 1은 물론 양성대조군에 비하여도 우수하다는 것을 확인할 수 있었다.As shown in Table 8, it was confirmed that the skin moisture increase rate of the cosmetic composition comprising the abalone mushroom fermentation according to the present invention as an active ingredient is superior to the positive control group as well as Comparative Example 1.

5-2: 피부건조개선 평가(설문)5-2: Evaluation of Skin Dryness Improvement (Survey)

상기 실험예 5-1의 시험 대상자에 대한 설문지 조사를 통하여 주관적인 효능 평가를 시행하였으며, 그 결과를 하기 표 9(피부건조개선 평가)에 나타내었다. 그 결과, 피검자들의 주관적 건조감 개선평가에서 전복 일반 추출물(비교예 1) 및 전복 버섯 발효물(실시예 1) 모두 우수한 결과를 얻었다.Subjective efficacy evaluation was conducted through a questionnaire survey of the test subjects of Experimental Example 5-1, and the results are shown in Table 9 (Skin dryness improvement evaluation). As a result, both the general abalone extract (Comparative Example 1) and the abalone mushroom fermented product (Example 1) obtained excellent results in the subjective evaluation of drying feeling of the subjects.

시험군Test group 응답자수Respondents 매우 양호Very good 양호Good 보통usually 미흡Inadequate 실시예 1Example 1 1313 66 1One 00 비교예 1Comparative Example 1 99 77 44 00 양성대조군Positive control group 55 55 99 1One

실험예 6: 피부 탄력 효과에 대한 측정Experimental Example 6: Measurement of Skin Elasticity Effect

본 발명에 따른 전복 버섯 발효물을 유효성분으로 포함하는 화장품의 피부 탄력 효과에 대한 검사를 측정하기 위하여, 건강한 30 내지 40대 성인 남녀 10명을 대상으로 하였다. 제형예 1에서 제조된 화장품을 이용하였으며, 시험 초기(baseline), 2주, 4주, 6주에 항온항습실(온도 20 내지 22℃, 상대습도 40 내지 60%)에서 피검자는 세안 후 1시간 동안 피부를 안정화한 다음, 측정을 수행하였다. 피부의 탄력도는 큐토미터(cutometer SEM 474 ; 독일국 소재 커리지 카자카 일렉트로닉 게엠베하 제품)로 눈가 부위를 측정하였으며, 측정 시 음압은 500mbar, 흡입시간은 2초, 반복 측정 횟수는 5회로 측정하여 평균 수치를 이용하였으며, 그 결과를 하기 표 10(피부 탄력성 측정)에 나타내었다.In order to measure the test for skin elasticity effect of cosmetics containing the abalone mushroom fermentation product according to the present invention, 10 healthy men and women in their 40s and 40s. The cosmetics prepared in Formulation Example 1 were used, and the subjects were treated in a constant temperature and humidity chamber (temperature 20-22 ° C., relative humidity 40-60%) at baseline, 2 weeks, 4 weeks, and 6 weeks for 1 hour after cleansing. After stabilizing the skin, measurements were taken. The elasticity of the skin was measured by the cutometer SEM 474 (Curage Kazaka Electronics GmbH, Germany) and measured the area around the eyes. The numerical value was used, and the result is shown in Table 10 (skin elasticity measurement).

시험군Test group 피부탄력도(%)Skin elasticity (%) 실시예 1Example 1 3737 비교예 1Comparative Example 1 1212

상기 표 10에 나타난 바와 같이, 본 발명에 따른 전복 버섯 발효물(실시예 1)을 유효성분으로 포함하는 화장품이 전복 일반 추출물(비교예 1)에 비해 피부탄력도가 3배 정도 더 뛰어나다는 사실을 확인할 수 있었다.As shown in Table 10, the cosmetics containing the abalone mushroom fermentation (Example 1) according to the present invention as an active ingredient is three times more skin elasticity than the abalone general extract (Comparative Example 1) I could confirm it.

실험예 7: 피부 안전도 시험Experimental Example 7: Skin Safety Test

본 발명에 따른 전복 버섯 발효물을 유효성분으로 포함하는 화장품의 피부 안전성 검사를 측정하기 위하여 통상의 패치시험(patch test)을 실시하였다. 연구대상은 건강한 30 내지 40대 성인 남녀 15명을 대상으로 팔 하박부 안쪽에 실험예 5에서 제조된 화장품을 첩포한 후, 48시간 후에 첨포를 제거하여 피부의 상태(자극 정도)를 관찰하였으며, 그 결과는 하기 표 11(피부 안전도 측정)에 나타내었다.In order to measure the skin safety test of cosmetics containing the abalone mushroom fermented product according to the present invention as an active ingredient, a conventional patch test was performed. The subjects were 15 healthy men and women in their 30s and 40s, and the cosmetics prepared in Experiment 5 were applied to the inner lower arm of the lower arm, and after 48 hours, the stylus was removed to observe the condition of the skin. The results are shown in Table 11 (skin safety measurement).

시험군Test group 패취테스트(사람수)Patch test (number of people) ****** **** ** 실시예 1Example 1 48시간 후48 hours later 00 00 1515 비교예 1Comparative Example 1 48시간 후48 hours later 00 1One 1414 *** : 매우 자극이 심함
** : 약간의 자극이 있음
* : 자극이 없음(음성)
***: Very irritating
**: slight irritation
*: No stimulus (voice)

실험예 8: 인체 피부에 대한 미백 효과 시험Experimental Example 8: Whitening Effect Test on Human Skin

연구대상은 건강한 30 내지 40대 성인 남녀 10명을 대상으로 피검자의 상박 부위에 직경 1.5㎝의 구멍이 뚫린 불투명 테이프를 부착한 뒤, 각 피검자의 최소 홍반량(Minimal Erythema Dose)의 1.5 내지 2배 정도의 자외선(UVB)을 조사하여 피부의 흑화를 유도하였다. 조사 후, 시험물질 각 1%(용매는 1,3-부틸렌글리콜 : 에탄올 = 7 : 3), 대조군으로 알부틴 2%, 용매(vehicle)만을 바르고, 한곳은 아무 것도 바르지 않고 10주 동안 상태 변화를 관찰하였다. 1주 단위로 피부의 색깔을 색차계(일본국 소재 미놀타사 제품 CR2002)로 측정하였다. 도포 개시시점과 완료시점에서의 피부색의 차이(△L*)를 하기 수학식 3에 따라 계산하였고, 그 결과를 하기 표 12(피부에 대한 미백 효과)에 나타내었다. 미백효과는 시료 도포 부위와 대조군 부위의 △L*의 비교로 판정하는데, △L* 값이 2 정도일 경우는 침착된 색소의 미백화가 뚜렷한 경우이고, 1.5 정도 이상이면 미백효과가 있다고 판정할 수 있다.The subjects were 10 adult males and females in their 30s and 40s, and 1.5 to 2 times the minimum erythema dose (Minimal Erythema Dose) of each subject. UV light was irradiated to a degree to induce skin blackening. After irradiation, 1% of each test substance (solvent 1,3-butylene glycol: ethanol = 7: 3), Arbutin 2% as a control, only a solvent (vehicle), one place without any change of state for 10 weeks Was observed. Skin color was measured on a weekly basis with a colorimeter (CR2002, Minolta, Japan). The difference in skin color (ΔL *) at the start and completion of application was calculated according to Equation 3 below, and the results are shown in Table 12 (whitening effect on skin). The whitening effect is determined by comparing ΔL * between the sample application site and the control site. When the value of ΔL * is about 2, the whitening of the deposited pigment is apparent, and when it is about 1.5 or more, the whitening effect may be determined. .

[수학식 3]&Quot; (3) "

△L* = 도포완료 시점에서의 L* 값 - 도포개시 할 때의 L* 값△ L * = L * value at the time of application completion-L * value at the start of application

시험군Test group 멜라닌 생성 억제율(%)Melanin production inhibition rate (%) 실시예 1Example 1 1.92 ± 0.131.92 ± 0.13 비교예 1Comparative Example 1 1.16 ± 0.251.16 ± 0.25 용매(Vehicle)Solvent (Vehicle) 0.50 ± 0.150.50 ± 0.15 알부틴Arbutin 1.56 ± 0.111.56 ± 0.11

상기 표 12의 결과로부터, 본 발명에 의한 전복 버섯 발효물(실시예 1)은 전복 일반 추출물(비교예 1) 뿐만 아니라 양성대조군인 알부틴 보다 우수한 미백 효과를 보이는 것을 확인하였다.From the results of Table 12, it was confirmed that the abalone mushroom fermented product (Example 1) according to the present invention showed an excellent whitening effect than the arbutin, a positive control as well as the general abalone extract (Comparative Example 1).

실험예 9: 엘라스틴 활성 저해도 시험Experimental Example 9: Elastin Activity Inhibition Test

본 발명품의 특성에 따라 피부의 탄력도를 저해시키는 엘라스타제의 활성을 억제시키는 효과를 시험하였다. 이 시험은 엘라스타제(미합중국 소재 시그마사 제품 Elastase)가 합성기질인 N-숙시닐 트리알라닌 P-니트로아닐리드(N-Succinyl Trialanine P-Nitroanilide ; 시그마사 제품)를 분해하면 노란색을 발색하게 되며, 이 발색 정도를 흡광도 측정기로 측정하여 저해율을 계산하는 방법이다. 좀 더 자세하게는, 먼저 추출물을 증류수에 녹여 필요 농도에 맞게 희석하여 시료를 준비하였다. 0.26M 트리스용액을 pH 8.0이 되도록 조정하여 완충용액을 준비하였다. 완충용액 1㎖에 엘라스타제 기질 N-숙시닐 트리알라닌 P-니트로아닐리드 8.8mM로 기질용액을 준비하였다. 엘라스타제 효소(Elastase)를 완충용액으로 10㎍/㎖ 농도로 만들었다. 상기 준비된 시료들로부터 시료 25㎕, 효소 25㎕, 완충용액 75㎕를 배합하여 25℃에서 10분간 전 반응을 시켰다. 전 반응 후, 기질용액 125㎕를 첨가하여 25℃에서 30분간 반응시킨 후, 405㎚에서 흡광도를 측정하였다. 공시험액으로는 시료 대신 완충용액을 배합하였으며, 엘라스타제 활성 억제율은 하기 수학식 4로 계산하였다. 실시예 1, 비교예 1, 비교예 2 및 대조군으로서의 전복 느타리버섯 균사체의 추출물의 엘라스틴 활성 저해도를 측정하였으며, 그 결과를 하기 표 13에 나타내었다.According to the characteristics of the present invention, the effect of inhibiting the activity of elastase that inhibits the elasticity of the skin was tested. This test results in the development of yellow color when Elastase (Elastase, Sigma, USA) decomposes N-Succinyl Trialanine P-Nitroanilide (Sigma). The degree of inhibition is calculated by measuring the degree of color development with an absorbance meter. More specifically, first, the extract was dissolved in distilled water to prepare a sample by diluting to the required concentration. The buffer was prepared by adjusting the 0.26M Tris solution to pH 8.0. The substrate solution was prepared in 1 ml of buffer solution with 8.8 mM of elastase substrate N-succinyl trialanine P-nitroanilide. Elastase enzyme (Elastase) was made to a concentration of 10 ㎍ / ㎖ buffer. 25 μl of the sample, 25 μl of enzyme, and 75 μl of buffer were mixed from the prepared samples, and the whole reaction was performed at 25 ° C. for 10 minutes. After the pre-reaction, 125 µl of the substrate solution was added and reacted at 25 ° C. for 30 minutes, and then the absorbance was measured at 405 nm. As a blank test solution, a buffer solution was added instead of the sample, and the inhibition rate of the elastase activity was calculated by the following Equation 4. Inhibition of the elastin activity of the extract of the abalone Pleurotus eryngii mycelia as a control example 1, Comparative Example 1, Comparative Example 2 and the control, the results are shown in Table 13 below.

[수학식 4]&Quot; (4) "

엘라스타제 활성 저해율(%) = ((A B)) / A * 100% Inhibition of elastase activity = ((A B)) / A * 100

상기 식에서, A는 공시험액에서 얻은 흡광도이고, B는 검액에서 얻은 흡광도임.Where A is the absorbance of the blank test solution and B is the absorbance of the test solution.

시험군Test group 농도 (%)Concentration (%) 0.050.05 0.10.1 실시예 1Example 1 1.21.2 46.946.9 버섯 균사체 추출물Mushroom Mycelium Extract 0.80.8 41.241.2 비교예 2Comparative Example 2 -1-One -2.8-2.8 비교예 1Comparative Example 1 -2.3-2.3 -3.6-3.6

상기 표 13의 결과로부터, 본 발명에 의한 전복 버섯 발효물(실시예 1)은 전복 일반 추출물(비교예 1) 뿐만 아니라 대조군인 전복느타리버섯 균사체의 추출물 보다 우수한 엘라스타제 저해 효과를 보이는 것을 확인하였다.From the results of Table 13, the abalone mushroom fermented product (Example 1) according to the present invention was confirmed to show an excellent elastase inhibitory effect than the extract of abalone mushroom mycelium as well as the general abalone extract (Comparative Example 1) It was.

화장료 조성물의 처방예Prescription example of cosmetic composition

이하는 각 화장품 제형에 있어서 본 발명에 따른 전복 버섯 발효물(실시예 1)을 함유하여 피부 내 활성 산소를 제거하고 피부미백, 피부탄력 강화, 미백 및 주름개선 효과를 갖는 제형으로서의 화장료 조성물의 처방예들을 보여주며, 처방은 다음과 같다.The following is the formulation of the cosmetic composition as a formulation containing the abalone mushroom fermented product (Example 1) according to the present invention in each cosmetic formulation to remove active oxygen in the skin and have skin whitening, skin elasticity strengthening, whitening and wrinkle improvement effects. Examples are given, and the prescription is as follows.

제형예 1: 스킨로션 제조(유연화장수)Formulation Example 1 Preparation of Skin Lotion (Flexible Cosmetic)

원료명Raw material name 중량%weight% 실시예 1Example 1 1.01.0 부틸렌글리콜Butylene glycol 2.52.5 올레일알코올Oleyl alcohol 1.51.5 에탄올ethanol 5.05.0 폴리솔베이트 80Polysorbate 80 0.50.5 폴리에틸렌글리콜 12 노닐페닐에테르Polyethylene glycol 12 nonylphenyl ether 0.20.2 카르복실비닐 폴리머Carboxyl Vinyl Polymer 0.10.1 글리세린glycerin 3.53.5 트리에탄올아민Triethanolamine 0.10.1 방부제, 색소, 향료Preservative, coloring, fragrance 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량(100까지)Remaining capacity (up to 100)

처방예 2: 밀크로션 제조(영양화장수)Formulation Example 2: Preparation of Milk Lotion (Nutrition Makeover)

원료명Raw material name 중량%weight% 실시예 1Example 1 1.51.5 스쿠알란Squalane 4.54.5 밀납Wax 3.83.8 솔비탄세스퀴올레이트Sorbitan sesquioleate 1.51.5 유동파라핀Liquid paraffin 0.50.5 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.51.5 부틸렌글리콜Butylene glycol 3.23.2 카프릭트리글리세라이드Capric triglyceride 5.05.0 프로필렌글리콜Propylene glycol 3.03.0 글리세린glycerin 3.03.0 카르복시비닐폴리머Carboxyvinyl polymer 0.10.1 트리에탄올아민Triethanolamine 0.10.1 방부제, 색소, 향료Preservative, coloring, fragrance 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량(100까지)Remaining capacity (up to 100)

처방예 3: 에센스 제조Formulation Example 3: Essence Preparation

원료명Raw material name 중량%weight% 실시예 1Example 1 4.04.0 부틸렌글리콜Butylene glycol 3.03.0 글리세린glycerin 3.03.0 알란토인Allantoin 0.70.7 판테놀Panthenol 0.20.2 소듐에틸렌디아민테트라아세테이트(EDTA-2Na)Sodium Ethylenediaminetetraacetate (EDTA-2Na) 0.050.05 에탄올ethanol 4.04.0 트리에탄올아민Triethanolamine 1.51.5 스쿠알란Squalane 2.02.0 밀납Wax 2.02.0 폴리솔베이트60Polysorbate 60 3.03.0 카르복실비닐폴리머Carboxyl vinyl polymer 1.01.0 솔비탄세스퀴올레이트Sorbitan sesquioleate 2.82.8 방부제, 색소, 향Preservative, coloring, incense 적량Suitable amount 정제수Purified water 잔량(100까지)Remaining capacity (up to 100)

본 발명은 전복을 활용한 발효산업 및 장업 분야에서 이용될 수 있다.The present invention can be used in the field of fermentation industry and industry using abalone.

이상에서 본 발명은 기재된 구체예에 대해서만 상세히 설명되었지만 본 발명의 기술사상 범위 내에서 다양한 변형 및 수정이 가능함은 당업자에게 있어서 명백한 것이며, 이러한 변형 및 수정이 첨부된 특허청구범위에 속함은 당연한 것이다.Although the present invention has been described in detail only with respect to the described embodiments, it will be apparent to those skilled in the art that various modifications and variations are possible within the technical scope of the present invention, and such modifications and modifications are within the scope of the appended claims.

Claims (14)

전복을 버섯 균사체로 발효시켜서 수득되는 것을 특징으로 하는 전복 버섯 발효물.Abalone mushroom fermentation product obtained by fermenting abalone with mushroom mycelium. 제 1 항에 있어서,
상기 전복이 전복육과 전복내장을 모두 포함하는 것임을 특징으로 하는 전복 버섯 발효물.
The method of claim 1,
Abalone mushroom fermented product, characterized in that the abalone includes both abalone meat and abalone intestine.
제 1 항에 있어서,
상기 버섯 균사체가 영지버섯(Ganoderma lucidum)의 균사체, 상황버섯(Phellinus linteus)의 균사체, 노루궁뎅이버섯(Hericium erinaceum)의 균사체, 전복느타리버섯(Pleurotus cystidiosus)의 균사체 및 이들 중 2이상의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것임을 특징으로 하는 전복 버섯 발효물.
The method of claim 1,
The mushroom mycelia are mycelium of Ganoderma lucidum , mycelium of Phellinus linteus , mycelium of Hericium erinaceum , mycelium of abalone mushroom ( Pleurotus cystidiosus ) and a mixture of two or more of them Abalone mushroom fermentation, characterized in that is selected from.
(1) 전복을 버섯 균사체로 접종시키는 접종단계; 및
(2) 버섯 균사체로 접종된 전복을 발효시키는 발효단계;
를 포함하여 이루어짐을 특징으로 하는 전복 버섯 발효물의 제조방법.
(1) an inoculation step of inoculating abalone with mushroom mycelium; And
(2) a fermentation step of fermenting abalone inoculated with mushroom mycelium;
Method for producing an abalone mushroom fermentation, characterized in that comprises a.
제 4 항에 있어서,
상기 접종단계에서의 상기 전복이 전복육과 전복내장을 모두 포함하는 것임을 특징으로 하는 전복 버섯 발효물의 제조방법.
5. The method of claim 4,
The abalone mushroom in the inoculation step of the abalone mushroom fermented product, characterized in that it comprises both abalone meat and internal organs.
제 4 항에 있어서,
상기 접종단계에서의 상기 버섯 균사체가 영지버섯(Ganoderma lucidum)의 균사체, 상황버섯(Phellinus linteus)의 균사체, 노루궁뎅이버섯(Hericium erinaceum)의 균사체, 전복느타리버섯(Pleurotus cystidiosus)의 균사체 및 이들 중 2이상의 혼합물로 이루어진 군으로부터 선택되는 것임을 특징으로 하는 전복 버섯 발효물의 제조방법.
5. The method of claim 4,
The mushroom mycelium at the inoculation step is mycelium of Ganoderma lucidum , mycelium of Phellinus linteus , mycelium of Hericium erinaceum , mycelium of Pleurotus cystidiosus and two of them Method for producing an abalone mushroom fermentation, characterized in that selected from the group consisting of the above mixture.
제 4 항에 있어서,
상기 접종단계 이전에 상기 전복을 급냉 및 동결건조시키는 전처리단계가 더 수행됨을 특징으로 하는 전복 버섯 발효물의 제조방법.
5. The method of claim 4,
A method of producing abalone mushroom fermentation, characterized in that the pretreatment step of quenching and lyophilizing the abalone is further performed before the inoculation step.
제 7 항에 있어서,
상기 전처리단계와 상기 접종단계 사이에 상기 전처리단계에서 수득되는 건조된 전복을 분쇄하고, 이를 물과 혼합하여 균사체를 배양시킬 수 있는 배양액을 조성하는 배양액조성단계가 더 수행됨을 특징으로 하는 전복 버섯 발효물의 제조방법.
The method of claim 7, wherein
Abalone mushroom fermentation, characterized in that the culture step of preparing a culture solution for cultivating mycelium by grinding the dried abalone obtained in the pretreatment step between the pretreatment step and the inoculation step is further carried out. Method of producing water.
제 4 항에 있어서,
상기 발효단계 이후에 상기 발효단계에서 수득되는 발효액을 숙성시키는 숙성단계가 더 수행됨을 특징으로 하는 전복 버섯 발효물의 제조방법.
5. The method of claim 4,
Method for producing abalone mushroom fermentation, characterized in that the further step of maturing the fermentation broth obtained in the fermentation step after the fermentation step is carried out.
제 9 항에 있어서,
상기 숙성단계가 상기 발효액을 3 내지 10℃에서 1 내지 3일간 저장하는 것에 의해 수행됨을 특징으로 하는 전복 버섯 발효물의 제조방법.
The method of claim 9,
The aging step is a method of producing abalone mushroom fermentation, characterized in that carried out by storing the fermentation broth at 3 to 10 ℃ for 1 to 3 days.
제 4 항에 있어서,
상기 발효단계 이후에 수득되는 발효액을 함수율 10%가 되도록 감압농축 및 동결건조시켜서 동결건조된 발효물을 수득하는 후처리단계가 더 수행됨을 특징으로 하는 전복 버섯 발효물의 제조방법.
5. The method of claim 4,
Concentrating the abalone mushroom fermented product, characterized in that the after-treatment step to obtain a freeze-dried fermented product by concentrating and lyophilizing the fermentation broth obtained after the fermentation step to a water content of 10%.
제 9 항에 있어서,
상기 숙성단계 이후에 수득되는 발효액을 함수율 10%가 되도록 감압농축 및 동결건조시켜서 동결건조된 발효물을 수득하는 후처리단계가 더 수행됨을 특징으로 하는 전복 버섯 발효물의 제조방법.
The method of claim 9,
The method of producing abalone mushroom fermented product, characterized in that the post-treatment step of obtaining a freeze-dried fermented product by concentrating and freeze-drying the fermentation broth obtained after the aging step to have a water content of 10%.
청구항 제 1 항 내지 제 3 항 중의 어느 한 항에 따른 전복 버섯 발효물을 포함하되, 화장품 조성물 총 중량을 기준으로 하여 유효성분으로서 동결건조에 의해 수득되는 동결건조된 발효물 0.001 내지 80중량%의 범위 이내의 양으로 포함함을 특징으로 하는 보습, 탄력, 미백, 피부 주름 개선용 화장품 조성물.0.001 to 80% by weight of a lyophilized fermentation product comprising the abalone mushroom fermentation according to any one of claims 1 to 3, obtained by lyophilization as an active ingredient based on the total weight of the cosmetic composition. Moisturizing, elasticity, whitening, cosmetic composition for improving skin wrinkles, characterized in that it comprises in an amount within the range. 청구항 제 4 항 내지 제 12 항 중의 어느 한 항에 따라 수득되는 전복 버섯 발효물을 포함하되, 화장품 조성물 총 중량을 기준으로 하여 유효성분으로서 동결건조에 의해 수득되는 동결건조된 발효물 0.001 내지 80중량%의 범위 이내의 양으로 포함함을 특징으로 하는 보습, 탄력, 미백, 피부 주름 개선용 화장품 조성물.A lyophilized fermented product obtained by lyophilization as an active ingredient, the abalone mushroom fermentation product obtained according to any one of claims 4 to 12, based on the total weight of the cosmetic composition. Moisturizing, elasticity, whitening, skin wrinkle improvement cosmetic composition, characterized in that it comprises in an amount within the range of%.
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