KR101252132B1 - Feed additives for producing milk having high amount of milk proteins and process for the preparation of feed for lactating dairy cattle using the same - Google Patents

Feed additives for producing milk having high amount of milk proteins and process for the preparation of feed for lactating dairy cattle using the same Download PDF

Info

Publication number
KR101252132B1
KR101252132B1 KR1020120061261A KR20120061261A KR101252132B1 KR 101252132 B1 KR101252132 B1 KR 101252132B1 KR 1020120061261 A KR1020120061261 A KR 1020120061261A KR 20120061261 A KR20120061261 A KR 20120061261A KR 101252132 B1 KR101252132 B1 KR 101252132B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
chlorella
milk
feed
liquid
culture
Prior art date
Application number
KR1020120061261A
Other languages
Korean (ko)
Inventor
전진영
문병헌
안병기
임순업
Original Assignee
대상 주식회사
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 대상 주식회사 filed Critical 대상 주식회사
Priority to KR1020120061261A priority Critical patent/KR101252132B1/en
Application granted granted Critical
Publication of KR101252132B1 publication Critical patent/KR101252132B1/en

Links

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K10/00Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/12Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes by fermentation of natural products, e.g. of vegetable material, animal waste material or biomass
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K10/00Animal feeding-stuffs
    • A23K10/10Animal feeding-stuffs obtained by microbiological or biochemical processes
    • A23K10/16Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions
    • A23K10/18Addition of microorganisms or extracts thereof, e.g. single-cell proteins, to feeding-stuff compositions of live microorganisms
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K20/00Accessory food factors for animal feeding-stuffs
    • A23K20/10Organic substances
    • A23K20/189Enzymes
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23KFODDER
    • A23K50/00Feeding-stuffs specially adapted for particular animals
    • A23K50/10Feeding-stuffs specially adapted for particular animals for ruminants

Abstract

PURPOSE: A feed additive and a manufacturing method of milk-free feed for milk cows are provided to minimize the smell of fermenting chlorella by mixing liquid chlorella with a solid medium and inoculating and co-culturing lactobacillus and yeast. CONSTITUTION: A feed additive for milk-free feed for milk cows includes a chlorella-fermentation product as an active ingredient, wherein the chlorella fermentation product is obtained by a manufacturing method comprising the following steps of: (a) providing a culture mixture by inoculating Bacillus thuringiensis subspecies, lactobacillus and yeast in a mixture medium containing 30 to 50 weight% of liquid chlorella, wherein the mixture medium is obtained by mixing the liquid chlorella and a solid medium; (b) co-culturing the medium mixture obtained from the step (a) at a temperature of 35 to 40>= for 72 to 90 times; and (c) drying the cultured product obtained from the step (b). The liquid chlorella is chlorella cultivation source liquid. The liquid chlorella is a concentrate and is obtained by concentrating the chlorella cultivation source liquid to contain 40 to 60 g of a chlorella solid material based on a wet weight per 100g of the concentrate.

Description

고-유단백 우유 생성을 위한 사료 첨가제 및 이를 이용한 비유 젖소 사료의 제조방법{Feed additives for producing milk having high amount of milk proteins and process for the preparation of feed for lactating dairy cattle using the same}Feed additives for producing milk having high amount of milk proteins and process for the preparation of feed for lactating dairy cattle using the same

본 발명은 클로렐라-발효물, 바람직하게는 발효취를 최소화하여 가축의 섭취 기호도를 높인 클로렐라-발효물을 함유하는 고-유단백 우유 생성을 위한 비유 젖소용 사료 첨가제, 및 이를 이용한 고-유단백 우유 생성을 위한 비유 젖소(lactating dairy cattle) 사료의 제조방법에 관한 것이다.The present invention provides a feed additive for lactating cows for producing high-milk protein milk containing chlorella-fermented product, preferably chlorella-fermented product which minimizes the fermentation odor, thus increasing the acceptability of livestock, and high-milk protein milk using the same. It relates to a method of producing a lactating dairy cattle (lactating dairy cattle) feed for.

클로렐라는 미세 담수 녹조류로 그리스어로 '녹색'을 의미하는 클로로스(chloros)와 라틴어의 '작은 것'을 의미하는 엘라(ella)를 조합해 만든 단어로 단백질을 포함한 여러 영양소를 포함하고 있다. 또한 증식 속도가 다른 식물에 비해 매우 빠르고, 엽록소 및 클로렐라 성장촉진인자(Chorella Growth Factor, CGF)라는 특수한 생리작용인자 및 인체에 유익한 비타민, 미네랄 등을 골고루 함유하고 있는 것으로 알려져 있어, 건강기능식품뿐만 아니라 다양한 식품첨가물로도 널리 이용하고 있다. 실제로 클로렐라의 구성성분은 단백질 50% 이상, 지방 10∼20%, 클로로필 2% 이상으로 엽록소, 섬유소, 비타민, 미네랄 등이 풍부하다. 클로렐라 내의 구성성분은 체내 흡수 시에 장 기능 개선 효과, 동맥경화 예방, 체내 중금속 배출, 항산화 효과, 부족한 영양화 소화기관 문제 해결 및 스트레스에 효과를 나타내는 것으로 알려져 있다. 그러나, 클로렐라는 고가의 물질로 인식되어 있어 사료첨가제로서의 연구가 상대적으로 활발히 진행되지 못하고 있다. 따라서, 가격 경쟁력이 있는 사료 첨가제를 개발하는 것은 국내의 가축 산업 및 가축의 건강 증진에 크게 기여할 것이다.Chlorella is a fine freshwater green algae that combines chloros, which means 'green' in Greek, and ella, which means 'small' in Latin, and contains many nutrients, including proteins. It is also known to contain a special physiological factor called chlorophyll and chlorella growth factor (CGF) and vitamins and minerals that are beneficial to the human body. It is also widely used as a variety of food additives. In fact, chlorella's constituents are more than 50% protein, 10-20% fat, and more than 2% chlorophyll, rich in chlorophyll, fiber, vitamins and minerals. The components in chlorella are known to have effects on improving intestinal function, preventing atherosclerosis, releasing heavy metals in the body, antioxidant effects, solving insufficient nutrient digestive problems and stress upon absorption in the body. However, chlorella is recognized as an expensive substance, and research as a feed additive has not been relatively active. Therefore, developing a price-competitive feed additive will greatly contribute to the domestic livestock industry and the health of the livestock.

한편, 클로렐라는 세포벽이 매우 단단한 구조를 가지고 있어, 이를 섭취할 경우 그 세포벽 내부에 함유되어 있는 물질들이 체내로 좀처럼 흡수되지 않는다. 따라서 클로렐라의 세포벽 내부물질의 소화 흡수율을 높이기 위하여 다양한 방법으로 세포 내용물을 추출하는 방법이 알려져 있다. 예를 들어, 클로렐라를 미세하게 파쇄하거나 세포벽 분해효소(β-1,3-glucanase, cellulase, xylanase, pectinase) 및 단백질 분해효소(papain, kojizyme, alkalase, esperase, nutrase, flacourzyme)를 첨가하여 반응시킨 후 추출하는 방법과 열수로 세포 내용물을 분리하는 방법 등이 알려져 있다. 그러나, 물리적 파쇄방법은 세포벽과 세포막이 충분하게 파쇄되지 않는 단점이 있고 세포벽 분해효소나 단백질 분해효소를 이용하여 반응시키는 방법은 생산비용이 너무 높고, 열수 추출방법은 열수와 함께 고도의 분리장치를 사용해야 하므로 생산 공정이 까다롭고 많은 설비가 소요되는 문제점이 있다. Chlorella, on the other hand, has a very rigid structure, so that when it is ingested, the substances contained in the cell wall are rarely absorbed into the body. Therefore, in order to increase the digestive absorption rate of the material inside the cell wall of chlorella, a method of extracting cell contents is known. For example, chlorella is finely crushed or reacted with the addition of cell wall degrading enzymes (β-1,3-glucanase, cellulase, xylanase, pectinase) and proteolytic enzymes (papain, kojizyme, alkalase, esperase, nutrase, flacourzyme). Post-extraction methods and methods for separating cell contents with hot water are known. However, the physical crushing method has a disadvantage in that the cell wall and the cell membrane are not sufficiently crushed, and the reaction using the cell wall degrading enzyme or protease is too expensive to produce, and the hydrothermal extraction method uses a high separation device with hot water. Since it has to be used, there is a problem that the production process is difficult and requires a lot of equipment.

이러한 클로렐라의 문제를 해결하기 위한 방법으로서, 클로렐라를 발효물 형태로 제조하는 것이 보고된 바 있다. 미국특허 제7,914,832호는 클로렐라 발효 식품의 제조방법으로서, 클로렐라 특유의 냄새를 감소시킨 제조방법을 개시한 바 있다. 상기 제조방법은 정선된 클로렐라 분말[(i) 대장균군 시험(coliform bacteria count)에서 음성을 나타내고, (ii) 페오포르비드(pheophorbide)가 18 mg% 이하이고, (iii) 일반세균수(viable general bacteria count)가 8000 cfu/ml]를 효모(baker's yeast) 및 유산균 존재하에서 발효시키는 것을 포함하거나; 혹은 클로렐라 분말을 가열 멸균(heat treatment)하여 전처리한 후, 효모(baker's yeast) 및 유산균 존재하에서 발효시키는 것을 포함한다. 그러나, 저온 세척 및 원심분리 공정의 반복적 수행을 통한 정선된 클로렐라 분말을 얻는 공정은 제조비용이 높아 가축용 사료 첨가제의 제조에 적합하지 않고, 또한 가열 멸균 처리 공정 또한 제조비용을 상승시키는 원인이 된다. 또한, 미국특허 제7,914,832호에 따른 제조방법은 클로렐라 분말 제조공정을 필수적으로 수행하여야 하므로, 분말화 과정에서 제조비용이 또한 상승되게 된다. 더욱이, 유산균 및 효모를 사용하여 발효를 수행하게 되므로, 발효 시간이 길어져 제조 원가가 상승하는 요인이 되며, 다른 오염균에 쉽게 오염될 수 있는 문제가 있다.As a method for solving this problem of chlorella, it has been reported to produce chlorella in the form of fermented products. US Patent No. 7,914,832 discloses a method for preparing chlorella fermented foods and a method for reducing odors peculiar to chlorella. The preparation method is negative in selected chlorella powder [(i) coliform bacteria count, (ii) pheophorbide is 18 mg% or less, (iii) viable general bacteria count) comprises fermenting 8000 cfu / ml] in the presence of baker's yeast and lactic acid bacteria; Or pretreatment by heat treatment of the chlorella powder, followed by fermentation in the presence of baker's yeast and lactic acid bacteria. However, the process of obtaining the selected chlorella powder through repeated execution of the low temperature washing and centrifugation process is not suitable for the production of feed additives for livestock due to the high manufacturing cost, and the heat sterilization process also increases the manufacturing cost. . In addition, the manufacturing method according to US Pat. No. 7,914,832 is required to perform the chlorella powder manufacturing process, the manufacturing cost is also increased during the powdering process. In addition, since the fermentation is performed using lactic acid bacteria and yeast, the fermentation time is long, which increases the manufacturing cost, and there is a problem that can be easily contaminated with other contaminating bacteria.

기타, 대한민국 특허공고 제72-46호는 클로렐라를 주원료로 하고 여기에 클로렐라 및 공지 배지로 제조한 유산균 중간 발효제를 첨가 28℃∼35℃에서 발효시켜 설폰 아미드류를 0.01∼0.05% 혼가시키는 것을 포함하는 발효사료의 제조방법을 개시한 바 있다.In addition, Korean Patent Publication No. 72-46 includes adding lactic acid bacterium intermediate fermentation agent made of chlorella as a main raw material and fermenting it at 28 ° C. to 35 ° C., thereby mixing sulfonamides with 0.01 to 0.05%. It has been disclosed a method for producing a fermented feed.

따라서, 클로렐라가 갖는 발효취를 최소화하면서 클로렐라의 세포벽 내부물질의 소화 흡수율을 높일 수 있을 뿐만 아니라, 처리 공정에 소요되는 비용을 최소화할 수 있는 클로렐라-발효물을 함유하는 사료 첨가제의 제조방법을 개발하는 것이 당업계에 요구되고 있다. Therefore, while minimizing the fermentation odor of chlorella, it is possible to not only increase the digestion absorption rate of the material inside the cell wall of chlorella, but also to develop a method of preparing a feed additive containing chlorella-fermented product which can minimize the cost of the treatment process. There is a demand in the art.

본 발명자들은 클로렐라 배양액으로부터 얻어진 액상 클로렐라를 고체 배지와 혼합하여 바실러스 속 균주, 유산균 및 효모를 접종하여 특정 조건에서 공배양(co-culturing)하여 사료 첨가제를 제조할 경우, 클로렐라의 발효취를 최소화할 수 있어 가축의 섭취 기호도를 높일 수 있으며, 클로렐라 정선, 열 처리, 분무건조 등의 공정을 수행할 필요가 없어 제조비용을 크게 낮출 수 있음을 발견하였다. 본 발명자들은 상기 클로렐라-발효물의 적용가능성을 연구하던 중, 놀랍게도 상기 클로렐라-발효물이 비유 젖소(lactating dairy cattle)에서 유단백의 함량이 높은 우유를 생산하도록 한다는 것을 발견하였다.The present inventors inoculated Bacillus strains, lactic acid bacteria and yeast by mixing the liquid chlorella obtained from the chlorella culture medium with a solid medium to co-cultivate under specific conditions to prepare a feed additive, minimizing the fermentation odor of chlorella It has been found that it is possible to increase the acceptability of livestock and can significantly reduce the manufacturing cost since there is no need to perform processes such as chlorella selection, heat treatment and spray drying. While studying the applicability of the chlorella-fermentation, the inventors have surprisingly found that the chlorella-fermentation produces milk with a high milk protein content in lactating dairy cattle.

따라서, 본 발명은 클로렐라-발효물, 바람직하게는 액상 클로렐라를 바실러스 속 균주, 유산균 및 효모를 접종하여 특정 조건에서 공배양하여 얻어진 클로렐라-발효물을 포함하는 고-유단백 우유 생성을 위한 비유 젖소용 사료 첨가제를 제공하는 것을 목적으로 한다.Accordingly, the present invention is intended for lactating dairy cows for the production of high-milk protein comprising chlorella-fermented products, preferably chlorella-fermented products obtained by inoculating Bacillus strains, lactic acid bacteria and yeasts in liquid chlorella under certain conditions. It is an object to provide a feed additive.

또한, 본 발명은 상기 사료 첨가제를 이용한 고-유단백 우유 생성을 위한 비유 젖소 사료의 제조방법을 제공하는 것을 목적으로 한다.It is also an object of the present invention to provide a method for producing a non-milk feed for producing high-milk protein milk using the feed additive.

본 발명의 일 태양에 따라, 클로렐라-발효물을 유효성분으로 포함하는, 고-유단백 우유 생성을 위한 비유 젖소용 사료 첨가제가 제공된다.According to one aspect of the present invention, there is provided a feed additive for a non-milk cow for producing high-milk protein milk comprising chlorella-fermented product as an active ingredient.

일 구현예에서, (a) 액상 클로렐라 및 고체 배지를 혼합하여 얻어진 혼합 배지 중에 바실러스 속 균주, 유산균 및 효모를 접종하여 배양 혼합물을 제공하는 단계; (b) 단계(a)에서 얻어진 배양 혼합물을 35 내지 40 ℃에서 72 내지 90 시간 동안 공배양하는 단계; (c) 단계(b)에서 얻어진 배양물을 건조하는 단계를 포함하는 제조방법에 의해 얻어진 클로렐라-발효물을 유효성분으로 포함하는, 고-유단백 우유 생성을 위한 비유 젖소(lactating dairy cattle)용 사료 첨가제가 제공된다.In one embodiment, (a) inoculating Bacillus strains, lactic acid bacteria and yeast in the mixed medium obtained by mixing the liquid chlorella and solid medium to provide a culture mixture; (b) coculturing the culture mixture obtained in step (a) at 35 to 40 ° C. for 72 to 90 hours; (c) feed for lactating dairy cattle for the production of high-milk protein comprising chlorella-fermented product obtained by the manufacturing method comprising the step of drying the culture obtained in step (b) as an active ingredient. An additive is provided.

상기 액상 클로렐라는 클로렐라 배양원액일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 상기 배양원액의 농축액 즉, 농축액 100 g 당 습중량(wet weight) 기준으로 40∼60 g의 클로렐라 고형물이 함유되도록 클로렐라 배양원액을 농축하여 얻어진 농축액일 수 있다. 상기 혼합 배지 중 액상 클로렐라의 함량은 30 내지 50 중량%의 범위일 수 있다. 상기 단계(b)는 단계(a)에서 얻어진 배양 혼합물을 35 ℃에서 72 시간 동안 공배양함으로써 바람직하게 수행될 수 있다. 또한, 단계(c)의 상기 건조는 잔류 수분함량이 12 중량% 이하가 되도록 수행될 수 있다. The liquid chlorella may be a chlorella culture stock solution, and more preferably, the chlorella culture stock solution may be concentrated to contain 40 to 60 g of chlorella solids on a wet weight basis per 100 g of the culture stock solution. The concentrate may be obtained. The content of liquid chlorella in the mixed medium may range from 30 to 50% by weight. Step (b) may be preferably carried out by co-culturing the culture mixture obtained in step (a) at 35 ° C. for 72 hours. In addition, the drying of step (c) may be carried out so that the residual moisture content is 12% by weight or less.

본 발명의 다른 태양에 따라, 상기 사료 첨가제를 축우용 사료와 혼합하는 단계를 포함하는, 고-유단백 우유 생성을 위한 비유 젖소 사료의 제조방법이 제공된다. 상기 혼합은 축우용 사료 1 톤에 대하여 1 ∼ 5 kg의 비율로 상기 사료 첨가제를 혼합함으로써 바람직하게 수행될 수 있다.According to another aspect of the present invention, there is provided a method of producing a non-milk cow feed for producing high-milk protein milk, comprising mixing the feed additive with a cattle feed. The mixing may be preferably carried out by mixing the feed additive in a ratio of 1 to 5 kg per tonne of cattle feed.

클로렐라-발효물, 특히 발효취를 최소화하여 가축의 섭취 기호도를 높인 클로렐라-발효물이 비유 젖소(lactating dairy cattle)에서 유단백의 함량이 높은 우유를 생산하도록 한다는 것이 본 발명에 의해 밝혀졌다. 따라서, 상기 클로렐라-발효물은 비유 젖소에서 고-유단백 우유 생성용 사료 첨가제로 유용하게 사용될 수 있으며, 고-유단백 우유 생성을 위한 비유 젖소 사료의 제조에 유용하게 적용될 수 있다. 또한, 본 발명에 따른 소의 성장 촉진용 사료 첨가제는 클로렐라 특유의 발효취를 최소화하여 가축의 섭취 기호도를 높일 수 있을 뿐만 아니라, 클로렐라 정선, 열 처리, 분무건조 등의 공정을 수행할 필요가 없어 낮은 제조비용으로 제조될 수 있다.It has been found by the present invention that chlorella-fermented products, in particular chlorella-fermented products, which minimize the fermentation odor and increase the intake of livestock, produce milk with high milk protein content in lactating dairy cattle. Therefore, the chlorella-fermented product may be usefully used as a feed additive for producing high-milk protein milk in lactating cows, and may be usefully applied to the preparation of non-dairy cow feed for producing high-milk protein milk. In addition, feed additives for promoting growth of cattle according to the present invention can not only increase the intake of livestock by minimizing fermentation odor peculiar to chlorella, but also do not need to perform processes such as chlorella selection, heat treatment and spray drying. It can be manufactured at a manufacturing cost.

본 발명은 클로렐라-발효물을 유효성분으로 포함하는, 고-유단백 우유 생성을 위한 비유 젖소용 사료 첨가제를 제공한다. 본 발명의 일 구현예에서, (a) 액상 클로렐라 및 고체 배지를 혼합하여 얻어진 혼합 배지 중에 바실러스 속 균주, 유산균 및 효모를 접종하여 배양 혼합물을 제공하는 단계; (b) 단계(a)에서 얻어진 배양 혼합물을 35 내지 40 ℃에서 72 내지 90 시간 동안 공배양하는 단계; (c) 단계(b)에서 얻어진 배양물을 건조하는 단계를 포함하는 제조방법에 의해 얻어진 클로렐라-발효물을 유효성분으로 포함하는, 고-유단백 우유 생성을 위한 비유 젖소(lactating dairy cattle)용 사료 첨가제가 제공된다.The present invention provides a feed additive for a non-milk cow for producing high-milk protein milk, comprising chlorella-fermented product as an active ingredient. In one embodiment of the present invention, (a) inoculating Bacillus strains, lactic acid bacteria and yeast in a mixed medium obtained by mixing a liquid chlorella and a solid medium to provide a culture mixture; (b) coculturing the culture mixture obtained in step (a) at 35 to 40 ° C. for 72 to 90 hours; (c) feed for lactating dairy cattle for the production of high-milk protein comprising chlorella-fermented product obtained by the manufacturing method comprising the step of drying the culture obtained in step (b) as an active ingredient. An additive is provided.

유단백(milk proteins) 함량은, 체세포수와 함께, 우유의 중요한 품질 및 가격 결정인자이다. 특히 유단백 함량은 치즈의 생산수율과 직결되는 인자이다. 따라서, 고품질의 우유를 얻기 위해서는 낮은 체세포수를 유지하면서, 높은 유단백 함량을 가질 것이 요구된다.Milk proteins content, along with somatic cell counts, is an important quality and price determinant of milk. In particular, the milk protein content is a factor directly affecting the yield of cheese. Therefore, in order to obtain high quality milk, it is required to have a high milk protein content while maintaining a low somatic cell count.

상기 클로렐라-발효물의 제조방법은 액상 클로렐라 및 고체 배지를 혼합하여 얻어진 혼합 배지 중에 바실러스 속 균주, 유산균 및 효모를 접종하여 배양 혼합물을 제공하는 단계[단계(a)]를 포함한다.The method of preparing the chlorella-fermented product comprises the step of inoculating Bacillus sp. Strain, lactic acid bacteria and yeast in a mixed medium obtained by mixing a liquid chlorella and a solid medium [step (a)].

상기 클로렐라는 예를 들어, 클로렐라 불가리스(Chlorella vulgaris), 클로렐라 피레노이도사(Chlorella pyrenoidosa ), 클로렐라 레귤라리스(Chlorella regularis), 클로렐라 사코로필라(Chlorella saccharophila), 클로렐라 소로키니아나(Chlorella sorokiniana), 클로렐라 프로토테코이드(Chlorella prototecoide) 등을 제한없이 포함하며, 당업자가 입수가능한 모든 것을 포함한다. The chlorella, for example, Chlorella vulgaris ( Chlorella vulgaris ), Chlorella pyrenoidosa pyrenoidosa ) , Chlorella regularis , Chlorella saccharophila , Chlorella sorockina sorokiniana ), Chlorella prototecoide , and the like, without limitation, and everything available to those skilled in the art.

상기 액상 클로렐라는 클로렐라 배양원액일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 상기 배양원액의 농축액 즉, 농축액 100 g 당 습중량(wet weight) 기준으로 40∼60 g의 클로렐라 고형물이 함유되도록 클로렐라 배양원액을 농축하여 얻어진 농축액일 수 있다. 상기 클로렐라 배양원액은 클로렐라를 통상의 배양방법(예를 들어, 대한민국 특허등록 제10-0193748호)에 의해 배양함으로써 얻을 수 있으며, 통상 배양이 종료된 상태의 클로렐라 배양원액에는 약 2,000∼3,000만(갯수/리터)개의 클로렐라가 존재한다. 상기 클로렐라의 배양은 무균 탱크에서 무균적, 유기종속적(예를 들어, 당원으로서 무수포도당을 사용하여)으로 수행될 수 있으며, 공기를 0.3∼1.0vvm, 교반을 200∼500rpm, pH는 6.5∼7.5로 조절하여 유가식으로 배양할 수 있다.The liquid chlorella may be a chlorella culture stock solution, and more preferably, the chlorella culture stock solution may be concentrated to contain 40 to 60 g of chlorella solids on a wet weight basis per 100 g of the culture stock solution. The concentrate may be obtained. The chlorella culture stock solution can be obtained by culturing chlorella according to a conventional culture method (for example, Korean Patent Registration No. 10-0193748), and the chlorella culture stock solution in the state of completion of the culture is about 20 to 30 million ( Number / liter) of chlorella. The chlorella can be cultured in a sterile tank aseptically, organically (for example, using anhydrous glucose as a sugar source), 0.3-1.0vvm air, 200-500 rpm stirring, 6.5-7.5 pH It can be adjusted to fed-batch culture.

상기 제조방법은 클로렐라 배양원액 혹은 이의 농축액을 그대로 사용함으로써, 클로렐라 정선, 열 처리, 분무건조 등의 공정을 수행할 필요가 없어 제조비용을 크게 낮출 수 있다. 더욱이, 배양후 생산된 살아있는 상태의 '생 클로렐라'를 이어지는 공배양 공정에 직접 사용함으로써, 클로렐라가 가지고 있는 영양소의 파괴를 최소화할 수 있으며, 클로렐라 가지고 있는 고유의 기능성(건강기능식품법 고시 기능성)인 면역 증강 효과를 극대화할 수 있다.By using the chlorella culture stock or its concentrated solution as it is, the manufacturing method does not need to perform a process such as chlorella selection, heat treatment, spray drying, etc. can greatly reduce the manufacturing cost. Furthermore, by directly using the live 'fresh chlorella' produced after cultivation in the subsequent coculture process, it is possible to minimize the destruction of chlorella's nutrients, and the inherent functionality of the chlorella (the functional food notification notice) Maximize immune boosting effect.

상기 고체 배지는 사료 첨가제로서 사용될 수 있는 배지라면 제한 없이 사용될 수 있다. 상기 고체 배지는 곡물을 주로 포함하는 배지일 수 있으며, 예를 들어 옥수수 분말, 대두박, 당밀, 탈지강, 및 무기물류(예를 들어, 탄산칼슘, 황산암모늄 등)를 포함하는 배지일 수 있으며, 각각의 함량은 당업자에 의해 적절히 조절될 수 있다. 바람직하게는 압출기 등을 이용하여 고온(약 125℃)에서 압출하여 얻어진 고체 배지가 전분의 호화도를 높이고 잡균의 증식을 억제할 수 있으므로, 바람직하게 사용될 수 있다. 상기 혼합 배지 중 액상 클로렐라의 함량은 30 내지 50 중량%의 범위일 수 있으며, 더욱 바람직하게는 약 40 중량%일 수 있다.The solid medium can be used without limitation so long as it can be used as a feed additive. The solid medium may be a medium mainly containing grains, and may be, for example, a medium including corn powder, soybean meal, molasses, skim steel, and minerals (eg, calcium carbonate, ammonium sulfate, etc.), Each content can be appropriately adjusted by those skilled in the art. Preferably, the solid medium obtained by extruding at high temperature (about 125 ° C.) using an extruder or the like can increase the gelatinization degree of the starch and can suppress the growth of various germs, and thus can be preferably used. The content of the liquid chlorella in the mixing medium may be in the range of 30 to 50% by weight, more preferably about 40% by weight.

상기 혼합 배지 중에 접종되는 바실러스 속 균주, 유산균, 및 효모는 예를 들어 각각 약 1 X 109 cells의 농도로 배양한 배양액을 500∼5,000 ml, 더욱 바람직하게는 1,000∼2,000 ml의 범위로 접종될 수 있으나, 크게 제한되는 것은 아니다. 필요에 따라, 약 1 X 108 cells의 농도로 배양한 배양액을 5000∼50,000 ml를 사용할 수도 있다. 상기 바실러스 속 균주, 유산균, 및 효모는 공지된 균주를 제한 없이 사용할 수 있다. 예를 들어, 바실러스 속 균주로는 바실러스 서브틸리스 CT-10(Bacillus subtilis CT-10, KFCC11381p), 등을 사용할 수 있고, 유산균으로는 락토바실러스 엑시도필러스 (Lactobacillus acidophillus , ATCC314) 등을 사용할 수 있으며, 효모로는 사카로마이세스 세레비지아(Saccharomyces cerevisiae, ATCC26108) 등을 사용할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다. Bacillus sp., Lactic acid bacteria, and yeast to be inoculated in the mixed medium may be inoculated in a range of 500 to 5,000 ml, more preferably 1,000 to 2,000 ml, respectively, for example, in culture at a concentration of about 1 X 10 9 cells. May be, but is not limited to. If necessary, 5000 to 50,000 ml of the culture cultured at a concentration of about 1 X 10 8 cells may be used. The strains of the genus Bacillus, lactic acid bacteria, and yeast can use any known strain without limitation. For example, Bacillus sp. Strains can be used Bacillus subtilis CT-10 (KFCC11381p), and the like, Lactobacillus exidophilus ( Lactobacillus acidophillus , ATCC314) can be used as a lactic acid bacteria and may, in the yeast Saccharomyces Mai Jia access Celebi (Saccharomyces cerevisiae , ATCC26108) and the like, but are not limited thereto.

상기 클로렐라-발효물의 제조방법은 또한 단계(a)에서 얻어진 배양 혼합물을 35 내지 40 ℃에서 72 내지 90 시간 동안 공배양하는 단계[즉, 단계(b)]를 포함한다.The method for preparing the chlorella-fermentation also includes co-culturing the culture mixture obtained in step (a) at 35 to 40 ° C. for 72 to 90 hours (ie, step (b)).

상기한 바와 같이, 바실러스 속 균주, 유산균 및 효모를 동시에 사용하여 공배양을 수행함으로써, 발효 시간이 길어져 제조 원가가 상승하는 요인을 막을 수 있으며, 유산균과 효모균의 균체 증식시간이 길기 때문에 발생되는 다른 오염균의 증식을 바실러스 속 균주와 함께 배양함으로써 저해할 수 있는 장점이 있다. 특히, 단백질 분해력이 높은 바실러스 속 균주를 유산균 및 효모와 함께 공배양함으로써, 세포내용물의 이용성을 저해하는 클로렐라 균체의 불용성 물질을 효과적으로 분해하여 클로렐라의 세포벽 내부물질의 소화 흡수율을 현저하게 높일 수 있다.As described above, by carrying out co-cultivation using the strains of Bacillus, lactic acid bacteria and yeast at the same time, the fermentation time is long, which can prevent the increase of the manufacturing cost, and the other cells that occur due to the long cell growth time of lactic acid bacteria and yeast There is an advantage that can be inhibited by incubating the growth of contaminating bacteria with strains of the genus Bacillus. In particular, by co-culturing Bacillus sp. With high protein degrading power together with lactic acid bacteria and yeast, it is possible to effectively degrade the insoluble material of chlorella bacteria that inhibit the availability of the cell content, thereby significantly increasing the digestive absorption rate of the chlorella cell inner material.

본 발명자들은 공배양을 통한 발효균주의 증식이 바실러스속 균주, 유산균, 효모의 순으로 증식될 경우, 클로렐라의 발효취를 최소화할 수 있다는 것을 발견하였으며, 이러한 증식을 달성하기 위해서는 특정 배양 조건을 채용한다는 것을 발견하였다. 즉, 배양 혼합물을 35 내지 40 ℃에서 72 내지 90 시간 동안 공배양할 경우, 바실러스속 균주, 유산균, 효모의 순으로 증식이 달성되며, 클로렐라의 발효취를 최소화할 수 있다. 일 구현예에서, 상기 단계(b)는 단계(a)에서 얻어진 배양 혼합물을 약 35 ℃에서 약 72 시간 동안 공배양함으로써 바람직하게 수행될 수 있다. 상기 공배양은 통상의 발효기, 예를 들어 리본(Ribbon)이 장착된 드럼식 발효기를 사용하여 약 5∼10 rpm으로 교반하면서 수행될 수 있다.The present inventors found that fermentation strain of fermented strain through coculture can minimize the fermentation odor of chlorella when it is grown in the order of Bacillus strain, lactic acid bacteria, and yeast. I found that. That is, when the culture mixture is co-cultured at 35 to 40 ° C. for 72 to 90 hours, the growth is achieved in the order of Bacillus strain, lactic acid bacteria, and yeast, and the fermentation odor of chlorella can be minimized. In one embodiment, step (b) may be preferably carried out by co-culturing the culture mixture obtained in step (a) at about 35 ° C. for about 72 hours. The co-culture may be carried out while stirring at about 5 to 10 rpm using a conventional fermenter, for example, a drum type fermenter equipped with a ribbon.

상기 클로렐라-발효물의 제조방법은 또한 단계(b)에서 얻어진 배양물을 건조하는 단계[즉, 단계(c)]를 포함한다. The method for preparing the chlorella-fermentation also includes the step of drying the culture obtained in step (b) (ie step (c)).

상기 건조는 잔류 수분함량이 12 중량% 이하, 바람직하게는 4 내지 12 중량%가 되도록 수행하는 것이 바람직하다. 잔류 수분함량이 12 중량%를 초과할 경우에는 사료 첨가제로서 사료와의 혼합 과정에서 응집 현상이 발생하여 혼합 공정을 수행하는 것이 어려워질 수 있고, 또한 케이킹(caking) 현상이 발생할 수 있어 유통 및 보관 과정 중에 2차 오염의 가능성이 발생할 수 있다. 상기 건조 공정은 통상의 건조방법을 사용하여 수행될 수 있으며, 저온풍 건조방법을 사용하는 것이 제조비용을 최소화할 수 있으며, 클로렐라의 영양소 및 면역증강 물질의 파괴를 최소화할 수 있으므로 바람직하게 사용될 수 있다.The drying is preferably carried out so that the residual moisture content is 12% by weight or less, preferably 4 to 12% by weight. If the residual moisture content exceeds 12% by weight, it may be difficult to carry out the mixing process due to coagulation phenomenon in the mixing process with the feed as a feed additive, and caking may occur. The possibility of secondary contamination may occur during the storage process. The drying process may be carried out using a conventional drying method, it can be preferably used because the low temperature air drying method can minimize the production cost, and minimize the destruction of chlorella nutrients and immune enhancing substances have.

본 발명자들은 상기와 같이 제조된 클로렐라-발효물이 비유 젖소에서 유단백의 함량이 높은 우유를 생산하도록 한다는 것을 새롭게 발견하였다. 상기 클로렐라-발효물은 비유 젖소에서 고-유단백 우유 생성용 사료 첨가제로 유용하게 사용될 수 있으며, 고-유단백 우유 생성을 위한 비유 젖소 사료의 제조에 유용하게 적용될 수 있다. The present inventors newly discovered that the chlorella-fermented product thus prepared allows milk of high milk protein content in lactating cows. The chlorella-fermented product may be usefully used as a feed additive for producing high-milk protein milk in non-milk cows, and may be usefully applied to the preparation of non-milk feed for high-milk protein milk production.

따라서, 본 발명은 또한 상기 제조방법으로 얻어진 클로렐라-발효물을 함유하는 사료 첨가제를 축우용 사료와 혼합하는 단계를 포함하는, 고-유단백 우유 생성을 위한 비유 젖소 사료의 제조방법을 제공한다. 상기 축우용 사료는 축우에 사용되는 통상의 축우 사료, 예를 들어, 초기 및/또는 중기 축우 사료를 사용할 수 있다. 상기 혼합은 축우용 사료 1 톤에 대하여 1 ∼ 5 kg의 비율로 상기 사료 첨가제를 혼합함으로써 바람직하게 수행될 수 있다.Accordingly, the present invention also provides a method for producing a non-dairy cow feed for producing high-milk protein milk, comprising mixing a feed additive containing chlorella-fermented product obtained by the above production method with cattle feed. The cattle feed may use conventional cattle feed used for cattle, such as early and / or medium cattle feed. The mixing may be preferably carried out by mixing the feed additive in a ratio of 1 to 5 kg per tonne of cattle feed.

이하, 본 발명을 실시예를 통하여 상세히 설명한다. 그러나, 이들 실시예는 본 발명을 예시하기 위한 것이며, 본 발명이 이들 실시예에 의해 제한되는 것은 아니다. Hereinafter, the present invention will be described in detail through examples. However, these examples are for illustrating the present invention, and the present invention is not limited by these examples.

하기 실시예에서, 농축액 100 g 당 습중량 기준으로 50 g의 클로렐라 고형물이 함유되도록 클로렐라 배양원액을 농축하여 얻어진 농축액을 액상 클로렐라로 사용하였다. 또한, 고체 배지는 옥수수 분말 30 중량%, 대두박 30 중량%, 당밀 5 중량%, 탈지강 30 중량%, 및 무기물류(탄산칼슘, 황산암모늄) 5%의 혼합물을 단일 스크류가 장작된 압출기(extruder having single screw)를 이용하여 약 125℃에서 압출하여 제조한 것을 사용하였다. 또한, 공배양은 리본(Ribbon)이 장착된 드럼식 발효기를 사용하여 약 10 rpm으로 교반하면서 배양하였다. 또한, 잔류 수분함량은 수분측정기를 이용하여 측정하였다.
In the following examples, the concentrate obtained by concentrating the chlorella culture stock so as to contain 50 g of chlorella solids on a wet basis per 100 g of the concentrate was used as a liquid chlorella. In addition, the solid medium is a single screw extruder of a mixture of 30% by weight of corn powder, 30% by weight of soybean meal, 5% by weight molasses, 30% by weight of skim steel, and 5% of minerals (calcium carbonate, ammonium sulfate). Using a single screw extruded at about 125 ℃ was used. In addition, co-culture was incubated with stirring at about 10 rpm using a drum-type fermenter equipped with a ribbon (Ribbon). In addition, the residual moisture content was measured using a moisture meter.

실시예Example 1. 액상 클로렐라의 함량에 따른 영향 평가 1. Evaluation of the Effect of Liquid Chlorella Content

액상 클로렐라 및 고체 배지를 혼합하여 액상 클로렐라의 함량이 각각 20 중량%, 30 중량%, 40 중량%, 50 중량%, 및 60 중량%를 함유하는 혼합 배지를 준비하였다. 각각의 혼합 배지 1,000 kg에 바실러스 서브틸리스 CT-10(Bacillus subtilis CT-10, KFCC11381p) 약 1 X 109 cells를 함유하는 배양액 1,000ml, 락토바실러스 엑시도필러스 (Lactobacillus acidophillus , ATCC314) 약 1 X 109 cells를 함유하는 배양액 1,000ml, 및 사카로마이세스 세레비지아(Saccharomyces cerevisiae, ATCC26108) 약 1 X 109 cells를 함유하는 배양액 1,000ml을 접종하고, 약 37℃에서 72 시간 동안 공배양한 후, 각각의 혼합 배지에서 증식된 각 균주의 수를 측정하였다. 얻어진 배양물을 잔류 수분함량이 12% 가 되도록 저온풍 건조하였으며, 각각의 건조 시간을 측정하였다. 얻어진 건조물의 발효취(우수: 7인 이상[좋다], 보통: 5인 이상[좋다], 불량: 5인 이하 [좋다]) 및 색상(양호: 7인 이상, 불량: 7인 이하)을 측정하였다. 상기 평가 결과는 하기 표 1과 같다.The liquid chlorella and the solid medium were mixed to prepare a mixed medium containing 20% by weight, 30% by weight, 40% by weight, 50% by weight, and 60% by weight of the liquid chlorella, respectively. Bacillus subtilis CT-10 ( Bacillus) in 1,000 kg of each mixing medium subtilis CT-10, KFCC11381p) 1,000 ml culture medium containing about 1 X 10 9 cells, Lactobacillus acidophillus ( ATCC314) 1,000 ml culture medium containing about 1 X 10 9 cells, and Saccharomyces Saccharomyces cerevisiae , ATCC26108) 1,000 ml of the culture solution containing about 1 X 10 9 cells were inoculated, co-cultured at about 37 ° C. for 72 hours, and the number of each strain propagated in each mixed medium was measured. The obtained culture was cryogenically dried to have a residual moisture content of 12%, and the respective drying times were measured. Fermentation odor (excellent: 7 or more [good], normal: 5 or more [good], poor: 5 or less [good]) and color (good: 7 or more, bad: 7 or less) It was. The evaluation results are shown in Table 1 below.

구분division 혼합 배지 중 액상 클로렐라 함량 (중량%)Liquid Chlorella Content in Mixing Medium (% by weight) 항목Item 미생물 종류Microbial species 2020 3030 4040 5050 6060 미생물 검사
(cfu/g)
Microbiological testing
(cfu / g)
B. B. subtilissubtilis 5.9 x 106 5.9 x 10 6 2.5 x 107 2.5 x 10 7 3.8 x 108 3.8 x 10 8 4.2 x 108 4.2 x 10 8 3.8 x 107 3.8 x 10 7
L. L. acidophillusacidophillus 4.7 x 104 4.7 x 10 4 4.6 x 105 4.6 x 10 5 1.2 x 106 1.2 x 10 6 7.2 x 106 7.2 x 10 6 5.2 x 105 5.2 x 10 5 S. S. cerevisiaecerevisiae 2.7 x 104 2.7 x 10 4 3.9 x 104 3.9 x 10 4 8.4 x 104 8.4 x 10 4 5.3 x 106 5.3 x 10 6 7.8 x 106 7.8 x 10 6 관능 검사Sensory test 발효취1 Fermented odor 1 불량Bad 보통usually 우수Great 우수Great 불량 Bad 색상2 Color 2 불량Bad 양호Good 양호Good 양호Good 불량Bad 건조 소요시간(hr)Drying time (hr) 1616 2020 2828 5252 8686

1 발효취 관능 : 성인남자 10명의 관능 평가(우수: [좋다]7인 이상, 보통: [좋다]5인 이상, 불량:[좋다]5인 이하) 1 Fermentation odor Sensory evaluation: Sensory evaluation of 10 adult men

2 색상 관능: 성인남자 10명의 관능평가(양호: 7인 이상, 불량: 7인 이하) 2 color sensory evaluation: sensory evaluation of 10 adult men (good: 7 or more, poor: 7 or less)

상기 표 1의 결과로부터, 혼합 배지 중에 액상 클로렐라의 함량이 30 내지 50 중량%의 범위에서 발효취가 줄어들고, 색상이 양호함을 알 수 있으며, 40 중량%의 액상 클로렐라를 함유하는 것이 발효취 감소 및 색상 측면에서 가장 바람직함을 알 수 있다. 건조 소요시간은 액상 클로렐라의 함량이 증가할수록 증가하였으며, 특히 액상 클로렐라의 함량이 40 중량%를 초과할 경우에는 건조 소요시간이 더욱 가파르게 증가함을 알 수 있다. 따라서 생산 비용 측면, 발효취 감소, 및 색상의 측면을 감안할 때, 혼합 배지 중 액상 클로렐라의 함량은 40 중량% 내외가 바람직하다.
From the results of Table 1, it can be seen that the content of the liquid chlorella in the mixed medium in the range of 30 to 50% by weight of the fermentation odor is reduced, the color is good, containing 40% by weight of the liquid chlorella reduced fermentation odor It can be seen that the most preferable in terms of color. Drying time increased as the content of the liquid chlorella increased, especially when the content of the liquid chlorella exceeds 40% by weight it can be seen that the drying time increases more steeply. Therefore, considering the cost of production, reduced fermentation odor, and color, the content of the liquid chlorella in the mixed medium is preferably about 40% by weight.

실시예Example 2.  2. 공배양Co-culture 조건 평가 Condition evaluation

액상 클로렐라 및 고체 배지의 혼합배지(액상 클로렐라의 함량: 40 중량%) 1,000 kg에 바실러스 서브틸리스 CT-10(Bacillus subtilis CT-10, KFCC11381p) 약 1 X 109 cells를 함유하는 배양액 1,000ml, 락토바실러스 엑시도필러스 (Lactobacillus acidophillus , ATCC314) 약 1 X 109 cells를 함유하는 배양액 1,000ml, 및 사카로마이세스 세레비지아(Saccharomyces cerevisiae, ATCC26108) 약 1 X 109 cells를 함유하는 배양액 1,000ml을 접종하고, 30℃, 35℃, 또는 40℃의 조건에서, 각각 36, 54, 72, 및 90 시간 동안 공배양한 후, 증식된 각 균주의 수를 측정하였다. 얻어진 배양물을 28 시간 동안 건조한 후 잔류 수분함량을 측정하고, 발효취를 실시예 1과 동일한 방법으로 평가하였다. 상기 평가 결과는 하기 표 2와 같다.Bacillus subtilis CT-10 ( Bacillus ) in 1,000 kg of mixed medium of liquid chlorella and solid medium (content of liquid chlorella: 40% by weight) subtilis CT-10, KFCC11381p) 1,000 ml culture medium containing about 1 X 10 9 cells, Lactobacillus acidophillus ( ATCC314) 1,000 ml culture medium containing about 1 X 10 9 cells, and Saccharomyces Saccharomyces cerevisiae , ATCC26108) inoculated with 1,000 ml of a culture solution containing about 1 × 10 9 cells and co-cultured for 36, 54, 72, and 90 hours at 30 ° C., 35 ° C., or 40 ° C., respectively. The number of each strain isolated was measured. After the obtained culture was dried for 28 hours, the residual moisture content was measured, and the fermentation odor was evaluated in the same manner as in Example 1. The evaluation results are shown in Table 2 below.

항목Item 미생물 수 (cfu/g)Microbial Count (cfu / g) 발효취
Fermentation odor
수분
함량
(%)
moisture
content
(%)
배양 온도
(℃)
Incubation temperature
(℃)
배양 시간
(hr)
Incubation time
(hr)
B. B. subtilissubtilis L. L. acidophillusacidophillus S. S. cerevisiaecerevisiae
3030 3636 5.9 x 104 5.9 x 10 4 6.5 x 105 6.5 x 10 5 3.8 x 103 3.8 x 10 3 불량Bad 3131 5454 4.7 x 105 4.7 x 10 5 4.6 x 106 4.6 x 10 6 1.2 x 104 1.2 x 10 4 불량Bad 2525 7272 2.7 x 106 2.7 x 10 6 1.9 x 107 1.9 x 10 7 8.4 x 106 8.4 x 10 6 불량Bad 1717 9090 5.9 x 107 5.9 x 10 7 8.5 x 107 8.5 x 10 7 3.8 x 108 3.8 x 10 8 불량Bad 1313 3535 3636 5.9 x 105 5.9 x 10 5 1.5 x 104 1.5 x 10 4 1.8 x 103 1.8 x 10 3 보통usually 2727 5454 5.9 x 106 5.9 x 10 6 4.5 x 105 4.5 x 10 5 9.3 x 103 9.3 x 10 3 보통usually 2020 7272 3.9 x 108 3.9 x 10 8 2.5 x 106 2.5 x 10 6 8.5 x 104 8.5 x 10 4 우수Great 1111 9090 8.9 x 108 8.9 x 10 8 9.5 x 106 9.5 x 10 6 9.8 x 105 9.8 x 10 5 우수Great 88 4040 3636 1.4 x 105 1.4 x 10 5 3.5 x 103 3.5 x 10 3 5.8 x 102 5.8 x 10 2 보통usually 2626 5454 4.5 x 106 4.5 x 10 6 7.5 x 103 7.5 x 10 3 8.8 x 103 8.8 x 10 3 보통usually 1818 7272 7.9 x 107 7.9 x 10 7 3.5 x 104 3.5 x 10 4 7.8 x 103 7.8 x 10 3 우수Great 99 9090 2.3 x 108 2.3 x 10 8 4.5 x 104 4.5 x 10 4 8.1 x 103 8.1 x 10 3 우수Great 77

상기 표 2의 결과로부터, 발효취 감소 효과는 공배양에서 증식된 미생물의 상대적인 수에 의존함을 알 수 있으며, 바실러스속 균주 > 유산균 > 효모의 순으로 증식되는 것이 우수한 발효취 감소를 달성할 수 있음을 알 수 있고, 따라서 공배양의 배양 온도는 35 내지 40 ℃의 범위가 바람직함을 알 수 있다. 또한, 공배양은 적어도 72 시간 이상 즉, 72 내지 90 시간 동안 수행하여야 12% 이하의 잔류 수분함량을 갖는 건조물이 얻어질 수 있음을 알 수 있다. 따라서, 건조 공정에 따른 제조비용 및 발효취 감소의 측면을 감안할 때, 공배양은 35 내지 40 ℃에서 72 내지 90 시간 동안 수행하는 것이 바람직하며, 약 35℃에서 72 시간 동안 수행하는 것이 가장 바람직하다.
From the results of Table 2, it can be seen that the effect of reducing the fermentation odor is dependent on the relative number of microorganisms grown in co-culture, it is possible to achieve a good fermentation odor reduction is proliferated in the order of Bacillus strains> lactic acid bacteria> yeast It can be seen that, therefore, the culture temperature of the co-culture is preferably in the range of 35 to 40 ℃. In addition, it can be seen that the co-cultivation should be carried out for at least 72 hours or more, that is, 72 to 90 hours to obtain a dry matter having a residual moisture content of 12% or less. Therefore, in view of the manufacturing cost and the fermentation odor reduction in accordance with the drying process, the co-culture is preferably carried out at 35 to 40 ℃ for 72 to 90 hours, most preferably at about 35 ℃ for 72 hours. .

실시예Example 3. 젖소 사료의 제조 및 비유 성적 평가 3. Preparation of milk feed and evaluation of lactation

상기 실시예 2에서 35℃에서 72 시간 동안 공배양을 수행하여 얻어진 건조물을 사료 첨가제로 사용하여, 젖소의 비유 성적을 평가하였다. 즉, 기본 사료로서, 총 단백질량이 14%이고, TDN(Total Digesitible Nutrients, 가소화 영양소 총량)이 68%인 축우용 사료를 사용하여, 하기 표 3에 나타낸 바와 같이 3개의 처리군으로 나누어, 3x3 Latin square 방법으로(소를 5마리씩 3개 처리군으로 나누어 급여시험을 시행하여 결과를 도출하고, 다시 3개의 처리군을 재배치하여 동일한 방법으로 시험결과를 도출하고, 다시 3개의 처리구를 재배치하여 시험결과를 도출하였다) 3주간 급여하였다. 시험군-1 및 시험군-2는 상기 실시예 2에서 35℃에서 72 시간 동안 공배양을 수행하여 얻어진 건조물을 각각 0.1 중량% 및 0.2 중량%의 함량으로 혼합하여 사용하였다.In Example 2, the dry matter obtained by co-culture at 35 ° C. for 72 hours was used as a feed additive, and the lactation performance of cows was evaluated. That is, as a basic feed, using a cattle feed having a total protein content of 14% and TDN (Total Digesitible Nutrients) 68%, divided into three treatment groups as shown in Table 3, 3x3 In the Latin square method (dividing the cows into three treatment groups of five cows, conduct a salary test to derive the results, and then rearrange the three treatment groups to derive the test results in the same way, and then rearrange the three treatment groups. Results were obtained) for three weeks. Test group-1 and test group-2 were used by mixing the dry matter obtained by performing coculture at 35 ° C. for 72 hours in Example 2 in an amount of 0.1% by weight and 0.2% by weight, respectively.

처리군Treated group 사료 조성Feed composition 대조군-1Control group-1 기본사료Basic feed 시험군-1 Test group-1 기본사료 + 클로렐라 발효물(건조물) (0.1 중량%)Basic Feed + Chlorella Fermented Dried Food (0.1% by weight) 시험군-2 Test group-2 기본사료 + 클로렐라 발효물(건조물) (0.2 중량%)Basic feed + Chlorella fermented product (dried) (0.2 wt%)

상기와 같이 처리군의 비유 젖소를 3주간 급이한 후, 3주후 유량 및 유성분(유지방, 유단백, 유당, 체세포수)을 분석하였으며, 그 결과를 하기 표 4에 나타낸다.After feeding the non-dairy cows of the treated group for 3 weeks as described above, after 3 weeks, the flow rate and milk components (milk fat, milk protein, lactose, somatic cell count) were analyzed, and the results are shown in Table 4 below.

항목Item 대조군Control group 시험군-1Test group-1 시험군-2Test group-2 우유생산량 (ℓ/day)Milk yield (ℓ / day) 28.628.6 29.629.6 28.628.6 유지방 (%)Milk fat (%) 4.894.89 4.984.98 5.335.33 유단백 (%)Milk Protein (%) 3.293.29 3.463.46 3.633.63 유당 (%)Lactose (%) 4.534.53 4.634.63 4.634.63 체세포수 (cells/ml)Somatic cell count (cells / ml) 207,666207,666 65,65665,656 69,23369,233

상기 표 4의 결과로부터, 본 발명에 따라 특정 제조방법에 의해 얻어진 클로렐라-발효물을 사료 첨가제로서 사용한 경우, 비유 젖소의 유량은 유의성 있는 차이가 없는 반면, 유성분 중 유단백의 함량이 유의성 있게 증가함(SEM: 0.06, p 값: 0.001)을 알 수 있다. 또한, 체세포수가 현저하게 저하됨으로써, 고품질의 우유를 얻을 수 있음을 알 수 있다.From the results of Table 4, when the chlorella-fermented product obtained by the specific manufacturing method according to the present invention is used as a feed additive, there is no significant difference in the flow rate of the non-milk cow, while the content of milk protein in the milk component increases significantly. (SEM: 0.06, p value: 0.001). In addition, it can be seen that high quality milk can be obtained by remarkably lowering the somatic cell count.

Claims (9)

삭제delete (a) 액상 클로렐라 및 고체 배지를 혼합하여 얻어진 혼합 배지로서 액상 클로렐라의 함량이 30 내지 50 중량%인 혼합 배지 중에 바실러스 속 균주, 유산균 및 효모를 접종하여 배양 혼합물을 제공하는 단계; (b) 단계(a)에서 얻어진 배양 혼합물을 35 내지 40 ℃에서 72 내지 90 시간 동안 공배양하는 단계; (c) 단계(b)에서 얻어진 배양물을 건조하는 단계를 포함하는 제조방법에 의해 얻어진 클로렐라-발효물을 유효성분으로 포함하는, 고-유단백 우유 생성을 위한 비유 젖소용 사료 첨가제.(a) inoculating Bacillus sp. strain, lactic acid bacteria and yeast in a mixed medium obtained by mixing a liquid chlorella and a solid medium with a liquid chlorella content of 30 to 50% by weight to provide a culture mixture; (b) coculturing the culture mixture obtained in step (a) at 35 to 40 ° C. for 72 to 90 hours; (C) comprising a chlorella-fermented product obtained by the manufacturing method comprising the step of drying the culture obtained in step (b) as an active ingredient, feed additives for non-milk milk for the production of high-milk protein milk. 제2항에 있어서, 상기 액상 클로렐라가 클로렐라 배양원액인 것을 특징으로 하는 고-유단백 우유 생성을 위한 비유 젖소용 사료 첨가제.The feed additive for lactating dairy cow for producing high-milk protein milk according to claim 2, wherein the liquid chlorella is a chlorella culture stock. 제2항에 있어서, 상기 액상 클로렐라가, 농축액 100 g 당 습중량(wet weight) 기준으로 40∼60 g의 클로렐라 고형물이 함유되도록, 클로렐라 배양원액을 농축하여 얻어진 농축액인 것을 특징으로 하는 고-유단백 우유 생성을 위한 비유 젖소용 사료 첨가제.3. The high-milk protein according to claim 2, wherein the liquid chlorella is a concentrate obtained by concentrating the chlorella culture stock so that 40 to 60 g of chlorella solids are contained on a wet weight basis per 100 g of the concentrate. Feed additive for lactating cows for milk production. 삭제delete 제2항에 있어서, 단계(b)가 단계(a)에서 얻어진 배양 혼합물을 35 ℃에서 72 시간 동안 공배양함으로써 수행되는 것을 특징으로 하는 고-유단백 우유 생성을 위한 비유 젖소용 사료 첨가제.3. The feed additive for lactating dairy cows according to claim 2, wherein step (b) is carried out by co-culturing the culture mixture obtained in step (a) at 35 ° C. for 72 hours. 제2항에 있어서, 단계(c)의 상기 건조가 잔류 수분함량이 12 중량% 이하가 되도록 수행되는 것을 특징으로 하는 고-유단백 우유 생성을 위한 비유 젖소용 사료 첨가제.3. The feed additive for lactating dairy cows according to claim 2, wherein the drying of step (c) is carried out such that the residual moisture content is 12% by weight or less. 제2항, 제3항, 제4항, 제6항 및 제7항 중 어느 한 항에 따른 고-유단백 우유 생성을 위한 비유 젖소용 사료 첨가제를 축우용 사료와 혼합하는 단계를 포함하는, 고-유단백 우유 생성을 위한 비유 젖소 사료의 제조방법.A method comprising the steps of mixing a dairy feed additive for dairy milk for the production of high-milk protein according to any one of claims 2, 3, 4, 6 and 7, with cattle feed. -Method of producing a non-dairy cow feed for the production of milk protein milk. 제8항에 있어서, 상기 혼합이 축우용 사료 1 톤에 대하여 1 ∼ 5 kg의 비율로 상기 사료 첨가제를 혼합함으로써 수행되는 것을 특징으로 하는 제조방법.The method according to claim 8, wherein the mixing is performed by mixing the feed additive at a ratio of 1 to 5 kg with respect to 1 ton of cattle feed.
KR1020120061261A 2012-06-08 2012-06-08 Feed additives for producing milk having high amount of milk proteins and process for the preparation of feed for lactating dairy cattle using the same KR101252132B1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020120061261A KR101252132B1 (en) 2012-06-08 2012-06-08 Feed additives for producing milk having high amount of milk proteins and process for the preparation of feed for lactating dairy cattle using the same

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020120061261A KR101252132B1 (en) 2012-06-08 2012-06-08 Feed additives for producing milk having high amount of milk proteins and process for the preparation of feed for lactating dairy cattle using the same

Publications (1)

Publication Number Publication Date
KR101252132B1 true KR101252132B1 (en) 2013-04-08

Family

ID=48442626

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020120061261A KR101252132B1 (en) 2012-06-08 2012-06-08 Feed additives for producing milk having high amount of milk proteins and process for the preparation of feed for lactating dairy cattle using the same

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR101252132B1 (en)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2893815A1 (en) 2014-01-09 2015-07-15 CJ Cheiljedang Corporation Assorted livestock feed with enhanced nutrients and method of preparing the same
CN109662201A (en) * 2019-02-26 2019-04-23 天津九州大地饲料有限公司 A kind of milking cow concentrated feed and preparation method thereof
CN110801413A (en) * 2019-12-12 2020-02-18 山东福瑞达生物科技有限公司 Chlorella fermented extract and preparation method thereof
KR102139718B1 (en) * 2020-02-25 2020-07-30 주식회사 항신바이탈 Animal feed additive composition containing beneficial bacteria and feed comprising the same

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004229590A (en) * 2003-01-31 2004-08-19 Idemitsu Technofine Co Ltd Liquid feed composition
KR20050061429A (en) * 2005-05-31 2005-06-22 노경남 The method of chlorella products development by using chlorella nature oriented forage, as well as through edible animal rearing, and the development of nature and organic forage by using chlorella and agricultural products.
KR101156940B1 (en) 2011-09-21 2012-06-20 대상 주식회사 Process for preparing feed additives comprising fermented chlorella and process for preparing feed for breeding chicken using the same

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2004229590A (en) * 2003-01-31 2004-08-19 Idemitsu Technofine Co Ltd Liquid feed composition
KR20050061429A (en) * 2005-05-31 2005-06-22 노경남 The method of chlorella products development by using chlorella nature oriented forage, as well as through edible animal rearing, and the development of nature and organic forage by using chlorella and agricultural products.
KR101156940B1 (en) 2011-09-21 2012-06-20 대상 주식회사 Process for preparing feed additives comprising fermented chlorella and process for preparing feed for breeding chicken using the same

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2893815A1 (en) 2014-01-09 2015-07-15 CJ Cheiljedang Corporation Assorted livestock feed with enhanced nutrients and method of preparing the same
CN109662201A (en) * 2019-02-26 2019-04-23 天津九州大地饲料有限公司 A kind of milking cow concentrated feed and preparation method thereof
CN110801413A (en) * 2019-12-12 2020-02-18 山东福瑞达生物科技有限公司 Chlorella fermented extract and preparation method thereof
KR102139718B1 (en) * 2020-02-25 2020-07-30 주식회사 항신바이탈 Animal feed additive composition containing beneficial bacteria and feed comprising the same

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN104054902B (en) A kind of mixed bacteria solid state fermentation produces the technique of fermented bean dregs
CN103911323B (en) Bacillus licheniformis, bacillus subtilis and lactobacillus plantarum preparation and preparation
CN102934736B (en) Method for preparing sweet potato skin/ sweet potato powder dreg fermented feed
CN103074284B (en) Zymophyte liquid, liquid spirit stillage fermented feed and fermentation method of liquid spirit stillage fermented feed
CN101215535A (en) Solid fermentation process for preparing bacillus natto microecological preparation
CN106119171A (en) The anti-microbial formulation of a kind of crop material feed fermentation and fermentation technology thereof
CN108541805A (en) The reuse method and fermentate of a kind of clostridium butyricum fermentation waste water and its application
CN103355472A (en) Microbial fermentation agent for cottonseed meal detoxification and preparation method and application thereof
CN103504123A (en) Fermented soybean meal with function of complex enzymes and preparation method for fermented soybean meal
CN104054903A (en) Production process of fermented cottonseed meal
CN103952336B (en) Bacillus licheniformis, bacillus subtilis and lactobacillus casei preparation and preparation
CN104585505A (en) Method for synergistic fermentation of soybean meal by employing bacillus subtilis and neutral protease
KR101252132B1 (en) Feed additives for producing milk having high amount of milk proteins and process for the preparation of feed for lactating dairy cattle using the same
CN103749943A (en) Method for producing biological feed by fermenting byproducts from deep processing of corns
CN103525724A (en) Microbial leavening agent of cottonseed meal as well as preparation method thereof
CN101642198A (en) Biological additive pre-mixed feed special for chicken and preparation method of biological additive substance carrier thereof
CN103355477A (en) Production method for feed through fermentation of soy sauce residues
CN106035990B (en) Method for preparing biological feed by solid-state enzymolysis fermentation of citrus pulp, product and application thereof
CN107853452A (en) A kind of production method of additive for microbe feedstuff
CN110301526A (en) Complex micro organism fungicide and its method for preparing bioactive feed
KR101252134B1 (en) Feed additives for promoting growth of cattle and process for the preparation of feed for breeding cattle using the same
CN104381587A (en) Biological processing method for probiotics cottonseed polypeptide
CN112544787A (en) Method for fermenting paper mulberry compound feed by bacteria and enzyme in synergy mode and compound feed thereof
CN106035988B (en) Production method of arginine active peptide powder for livestock and poultry
CN104872376A (en) Method for preparing probitics through two-step fermentation method by using degreased rice bran as raw material

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
A302 Request for accelerated examination
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20160316

Year of fee payment: 4

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20170328

Year of fee payment: 5

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20180323

Year of fee payment: 6

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20190325

Year of fee payment: 7

FPAY Annual fee payment

Payment date: 20200224

Year of fee payment: 8