KR101238585B1

KR101238585B1 - 단백질 키나제 억제제로서의 화합물 및 조성물

Info

Publication number: KR101238585B1
Application number: KR1020107024933A
Authority: KR
Inventors: 베이 첸; 타오 지앙; 토마스 에이치. 3세 마실제; 피에르-이브 미셀리; 트룩 응옥 응우엔; 웨이 페이; 바오젠 우; 자오보 가오; 용후이 제; 첸 후앙; 윤쳉 리; 쓰에펭 주
Original assignee: 노파르티스 아게; 아이알엠 엘엘씨
Priority date: 2008-04-07
Filing date: 2009-04-03
Publication date: 2013-02-28
Also published as: AU2009233964B2; CN102131788B; KR20110015414A; CN102131788A; BRPI0911228A2; CA2720946C; EP2271630B1; AU2009233964A1; CA2720946A1; WO2009126515A8; WO2009126515A1; US20110135668A1; EP2271630A1; MX2010010968A; JP5298187B2; EA018282B1; US8592432B2; ES2570127T3; EA201001597A1; JP2011516555A

Abstract

본 발명은 신규한 피리미딘 유도체 및 그의 제약 조성물, 및 상기 화합물을 사용하는 방법을 제공한다. 예를 들어, 본 발명의 피리미딘 유도체는 역형성 림프종 키나제 (ALK) 활성, c-ros 발암유전자 (ROS), 인슐린-유사 성장 인자 (IGF-1R), 및/또는 인슐린 수용체 (InsR) 또는 이들의 조합의 억제에 반응하는 병태를 치료, 개선 또는 예방하기 위해 사용될 수 있다.
<화학식 1>

Description

단백질 키나제 억제제로서의 화합물 및 조성물 {COMPOUNDS AND COMPOSITIONS AS PROTEIN KINASE INHIBITORS}

관련 출원에 대한 상호 참조

본 출원은 2008년 4월 7일에 출원된 미국 가출원 일련번호 제61/043,111호 및 2008년 11월 19일에 출원된 미국 가출원 일련번호 제61/116,023호에 대하여 우선권의 혜택을 주장하며, 이들은 각각 본 거명에 의해 그 전문이 본원에 포함된다.

기술 분야

본 발명은 단백질 키나제 억제제, 더욱 특히는 신규한 피리미딘 유도체 및 그의 제약 조성물, 및 그의 약제로서의 용도에 관한 것이다.

암은 조직의 비정상적 성장에 의해 생성되는 질환이다. 특정 암은 국소 조직에 침투하고 또한 원거리의 기관으로 전이할 잠재성이 있다. 이 질환은 매우 다양한 여러 기관, 조직 및 세포 유형에서 발달할 수 있다. 따라서, "암"이라는 용어는 1천가지 이상의 상이한 질환의 집합체를 지칭한다.

수용체 티로신 키나제의 인슐린 수용체 상위군의 일원인 역형성 림프종 키나제 (ALK)는 조혈 및 비-조혈 종양에서의 종양발생에 관련되어 왔다. 신경모세포종 및 교모세포종에서 전장 ALK 수용체 단백질의 비정상적 발현이 보고되었고; 역형성 대세포 림프종에서 ALK 융합 단백질이 나타났다. ALK 융합 단백질에 대한 연구는 또한, ALK-양성 악성종양을 갖는 환자에 대한 새로운 치료적 처치 가능성을 제시하였다 (문헌 [Pulford et al., Cell. Mol. Life Sci. 61:2939-2953 (2004)]).

인슐린-유사 성장 인자 (IGF-1) 신호전달은 암과 크게 관련되며, 여기서 IGF-1 수용체 (IGF-1R)이 지배적인 인자이다. IGF-1R은 종양 형질전환 및 악성 세포 생존에 있어 중요하나, 이는 정상 세포 성장에는 단지 부분적으로만 관여한다. IGF-1R의 표적화는 암 치료에 있어 유망한 선택사항인 것으로 제안되었다 (문헌 [Larsson et al., Br. J. Cancer 92:2097-2101 (2005)]).

V-ros 조류 UR2 육종 바이러스 발암유전자 동족체 1인 ROS1 (ROS로도 알려져 있음)은 다양한 종양 세포주에서 고도로 발현된다. ROS1은 현재 오판(orphan) 수용체 티로신 키나제로서, 그의 키나제 도메인은 대부분 ALK와 관련되어 있다. ROS1은 다양한 종양 세포주에서 고도로 발현된다. 폐암 및 일부 교모세포종 세포주에서는 유전자 이상에 의해 생성되는 ROS1 융합 단백질이 발견되었다(문헌 [Rikova K. et al Cell 131:1190 (2007)]; [Sharma S. Et al Oncogene Res. 5: 91 (1989)]). 신경교종에서 ROS1의 이상 발현이 보고된 적이 있다(문헌 [Watkins D. et al Cancer Genet Cytogenet. 1994 72:130 (1994)]). ROS1 키나제 억제제는 ROS1 융합 또는 이상 발현 또는 활성화에 의해 유발되는 종양의 성장을 차단할 수 있을 가능성이 있다.

당업계의 발전에도 불구하고, 암 치료법 및 항암 화합물에 대한 필요가 여전히 존재한다.

본 발명은 신규한 피리미딘 유도체 및 그의 제약 조성물, 및 그의 약제로서의 용도에 관한 것이다.

일 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 1 또는 2의 화합물 또는 그의 생리학상 허용되는 염을 제공한다.

<화학식 1>

<화학식 2>

여기서,

R¹ 및 R²는 독립적으로 H, C_1-6 알킬 또는 할로-치환된 C_1-6 알킬이고;

R³은 할로, C_1-6 알킬, 또는 할로-치환된 C_1-6 알킬이고;

R⁴는 H이고;

별법으로, R³ 및 R⁴는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, N, O 및 S로부터 선택되는 1 내지 3개의 헤테로원자를 함유하고 1 내지 2개의 R¹⁰ 기 (여기서, R¹⁰은 할로, C_1-6 알킬, C_2-6 알케닐, C_2-6 알키닐, 임의로 치환된 페닐 또는 NR₂임)로 임의로 치환된 5원 내지 6원 고리를 형성할 수 있고;

R⁵, R⁶ 및 R⁸은 독립적으로 C_1-6알킬, C_1-6알콕시, C_2-6알케닐 또는 C_2-6알키닐 (이들은 각각 할로, 아미노 또는 히드록실기로 임의로 치환될 수 있음); 할로, 니트로, 시아노, CR(OR¹⁷)R¹⁷, OR¹⁷, NR(R¹⁷), CR(R¹⁷)NRR¹⁷, (CR₂)_qY, C(O)O_0-1R¹⁷, C(O)NR(R¹⁷), C(O)CRR¹⁷-NR(R¹⁷), C(O)NR(CR₂)_pNR(R¹⁷), C(O)NR(CR₂)_pOR¹⁷,C(O)NR(CR₂)_pSR¹⁷, C(O)NR(CR₂)_pS(O)_1-2R¹⁸, S(O)_0-2R¹⁸, (CR₂)_1-6NR(CR₂)_pOR¹⁷, (CR₂)_1-6NR(CR₂)_qC(O)R¹⁸, S(O)₂NRR¹⁷, S(O)₂NR(CR₂)_pNR(R¹⁷), 또는 S(O)₂NR(CR₂)_pOR¹⁷이고; 여기서 R⁸은 융합 고리의 임의의 위치 상에 존재할 수 있고;

R⁷은 S(O)_0-2R¹⁹, S(O)₂NRR²⁰ 또는 C(O)NR(R²⁰)이고; 여기서 R¹⁹ 및 R²⁰은 독립적으로 C_1-6알킬, 할로-치환된 C_1-6 알킬 또는 C_3-7시클로알킬이거나; 또는 R²⁰은 H이고;

각각의 R⁹는 독립적으로 -L-CR(OR¹⁷)-C_tF_(2t+1) (여기서, t는 1 내지 3임); -L-C(O)-CR(R¹⁷)-NRR¹⁷, -L-C(O)-NR-(CR₂)_p-NRR¹⁷, -L-C(O)NR(CR₂)_pOR¹⁷,-L-C(O)-(CR₂)_q-NR-C(O)-R¹⁸, -L-C(O)NR(CR₂)_pSR¹⁷, -L-C(O)NR(CR₂)_pS(O)_1-2R¹⁸, (CR₂)_pNR(CR₂)_pOR¹⁷ 또는 (CR₂)_pNR-L-C(O)R¹⁸, -L-S(O)₂R¹⁸, -L-S(O)₂NRR¹⁷, -L-S(O)₂NR(CR₂)_pNR(R¹⁷), -L-S(O)₂NR(CR₂)_pOR¹⁷ 또는 하기 화학식 a, b, c 또는 d로부터 선택되는 라디칼이고

여기서, R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴, R¹⁵ 및 R¹⁶은 독립적으로 H, 또는 각각 할로, 아미노 또는 히드록실기로 임의로 치환될 수 있는 C_1-6알킬, C_1-6알콕시, C_2-6알케닐 또는 C_2-6알키닐로부터 선택되거나; 또는 R¹¹ 및 R¹², R¹² 및 R¹⁵, R¹⁵ 및 R¹⁶, R¹³ 및 R¹⁴, 또는 R¹³ 및 R¹⁵는 그들이 결합된 탄소 및/또는 질소 원자와 함께 C(O), N, O 및 S(O)_0-2로부터 선택되는 3개 이하의 원자 또는 기를 임의로 함유하는 3원 내지 7원 포화, 불포화 또는 부분 불포화 고리를 형성할 수 있고;

L은 (CR₂)_1-4 또는결합이고;

R¹⁷ 및 R¹⁸은 독립적으로 C_1-6알킬, 할로-치환된 C_1-6 알킬, C_2-6알케닐 또는 C_2-6알키닐이거나; 또는 R¹⁷은 H이고;

Y는 C_3-12 카르보시클릭 고리, C_6-10아릴; 또는 5원 내지 10원 헤테로아릴 또는 4원 내지 10원 헤테로시클릭 고리이고; 이들은 각각 1 내지 3개의 R⁶ 기로 임의로 치환되고;

각각의 R은 H 또는 C_1-6알킬이고;

p는 2 내지 4이고;

q는 0 내지 4이다.

일 실시양태에서, 본 발명은 하기 화학식 2A의 화합물을 제공한다.

<화학식 2A>

여기서, R³은 할로이고;

R⁷은 S(O)_0-2R¹⁹이고;

R⁸은 메톡시, 에톡시 또는 이소프로폭시이고;

R⁹는 -L-CR(OR¹⁷)-C_tF_(2t+1) (여기서, t는 1 내지 3임); -L-S(O)₂R¹⁸, -L-S(O)₂NRR¹⁷, -L-S(O)₂NR(CR₂)_pNR(R¹⁷), -L-S(O)₂NR(CR₂)_pOR¹⁷ 또는 하기 화학식 a, b, c 또는 d로부터 선택되는 라디칼이고

여기서, R¹, R², R⁴, R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷, R¹⁸, R¹⁹, L 및 p는 화학식 1 또는 2에 정의된 바와 같다.

일부 실시예에서, 본 발명은 하기 화학식 3의 화합물을 제공한다.

<화학식 3>

여기서, R³은 할로이고;

별법으로, R³ 및 R⁴는 이들이 결합된 탄소 원자와 함께, 1 내지 3개의 N 헤테로원자를 함유하고 1 내지 2개의 R¹⁰ 기로 임의로 치환되는 5원 내지 6원 고리를 형성할 수 있고;

R^5a 및 R^5b는 독립적으로 할로, 히드록실, C_1-6 알킬, C_1-6알콕시, 할로-치환된 C_1-6 알킬 또는 할로-치환된 C_1-6 알콕시이고;

R⁷은 S(O)_0-2R¹⁹이고;

R¹, R², R⁹, R¹⁰ 및 R¹⁹는 화학식 1 또는 2에 정의된 바와 같다.

특정 실시양태에서는 상기 화학식 3에서, R^5a가 메톡시 또는 이소프로폭시이고;

R^5b가 메틸이고;

R⁹가 -L-CR(OR¹⁷)-C_tF_(2t+1) (여기서, t는 1 내지 3임); -L-S(O)₂R¹⁸, -L-S(O)₂NRR¹⁷, -L-S(O)₂NR(CR₂)_pNR(R¹⁷), -L-S(O)₂NR(CR₂)_pOR¹⁷ 또는 하기 화학식 a, b, c 또는 d로부터 선택되는 라디칼이고

여기서, R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶, R¹⁷, R¹⁸, L 및 p는 화학식 1 또는 2에 정의된 바와 같다.

다른 특정 실시양태에서, 본 발명은 화학식 3A, 3B, 3C 또는 3D의 화합물을 제공한다.

여기서, R^5a는 메톡시 또는 이소프로폭시이고;

R^5b는 메틸이고;

R^10b, R^10e, R^10f 및 R^10h는 독립적으로 H 또는 C_1-6알킬이고;

R^10a, R^10c, R^10d 및 R^10g는 독립적으로 H, 할로, C_1-6알킬, NR₂, 또는 임의로 치환된 페닐이고;

R¹, R², R⁷, R⁹ 및 R은 화학식 1 또는 2에 정의된 바와 같다.

상기 화학식 3A, 3B, 3C 또는 3D 중 임의의 화학식에서, R⁹는 -L-CR(OR¹⁷)-C_tF_(2t+1) (여기서, t는 1 내지 3임); -L-S(O)₂R¹⁸, -L-S(O)₂NRR¹⁷, -L-S(O)₂NR(CR₂)_pNR(R¹⁷), -L-S(O)₂NR(CR₂)_pOR¹⁷ 또는 하기 화학식 a, b, c 또는 d로부터 선택되는 라디칼일 수 있다.

여기서 R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶, L 및 p는 상기 정의된 바와 같고;

R¹⁷ 및 R¹⁸은 독립적으로 C_1-6알킬 또는 할로-치환된 C_1-6 알킬이거나; 또는 R¹⁷은 H이다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 4 또는 5의 화합물 또는 그의 생리학상 허용되는 염을 제공한다.

여기서, Z는 NR^9a 또는 O이고;

R¹ 및 R²는 독립적으로 H, C_1-6알킬 또는 할로-치환된 C_1-6 알킬이고;

R³ 및 R⁴는 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 하기 군에서 선택되는 고리를 형성하고

;

R⁷은 S(O)_0-2R¹⁹, S(O)₂NRR²⁰ 또는 C(O)NR(R²⁰)이고; 여기서 R¹⁹ 및 R²⁰은 독립적으로 C_1-6알킬 또는 할로-치환된 C_1-6 알킬이거나; 또는 R²⁰은 H이고;

각각의 R^9a는 독립적으로 H, C_1-6알킬, C_2-6알케닐 또는 C_2-6알키닐; -(CR₂)_p-OR¹⁷, -L-C(O)-R¹⁷, -C(O)O-R¹⁷ 또는 -L-C(O)-NRR¹⁷이고; 여기서, R 및 R¹⁷은 NRR¹⁷ 중의 N과 함께 O 또는 S를 임의로 함유하는 5원 내지 6원 고리를 형성할 수 있고;

L은 (CR₂)_1-4 또는결합이고;

R¹⁷ 및 R¹⁸은 독립적으로 벤질, 할로로 임의로 치환되는 C_1-6알킬, 또는 C_1-6알킬 또는 할로로 임의로 치환되는 C_3-7시클로알킬이거나; 또는 R¹⁷은 H이고;

R²¹, R²², R²⁴, R²⁷ 및 R²⁹는 독립적으로 H 또는 C_1-6알킬이고;

R²³, R²⁵, R²⁶ 및 R²⁸은 독립적으로 H, C_1-6알킬, NR₂ 또는 할로이고;

각각의 R은 H 또는 C_1-6알킬이고;

p는 2 내지 4이고;

단, R²² 및 R²³이 모두 H는 아니고; R²⁴, R²⁵ 및 R²⁶이 전부 H는 아니고; R²⁷ 및 R²⁸이 모두 H는 아니다.

일부 실시예에서, 본 발명은, R^9a가 H, C_1-6알킬, C_2-6알케닐 또는 C_2-6알키닐인 화학식 4 또는 5의 화합물을 제공한다.

상기 화학식 1, 2, 2A, 3, 3A, 3B, 3C, 3D, 4 또는 5 중 임의의 화학식에서, R¹ 및 R²는 H일 수 있다.

또 다른 측면에서, 본 발명은,

a) 화학식 6c의 중간체를 형성하기에 충분한 조건 하에서 화학식 6a의 시약을 화학식 6b의 시약 또는 그의 제약상 허용되는 염과 접촉시키는 단계

;

b) 상기 화학식 6c의 중간체를 산화제와 접촉시켜, 화학식 6d의 중간체를 형성하는 단계

[여기서, X¹ 및 X²는 이탈기임]; 및

c) 화학식 6의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 형성하기에 충분한 조건 하에서 상기 화학식 6d의 중간체를 화학식 6e의 시약 또는 그의 제약상 허용되는 염과 접촉시키는 단계

를 포함하는, 화학식 6의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 합성하는 방법을 제공한다.

<화학식 6>

[여기서, W는 1 내지 3개의 질소 원자를 함유하는 5원 내지 6원 고리이고;

R⁵는 C_1-6알킬, C_1-6알콕시, C_2-6알케닐 또는 C_2-6알키닐 (이들은 각각 할로, 아미노 또는 히드록실기로 임의로 치환될 수 있음); 할로, 니트로, 시아노, CR(OR¹⁷)R¹⁷, OR¹⁷, NR(R¹⁷), CR(R¹⁷)NRR¹⁷, (CR₂)_qY, C(O)O_0-1R¹⁷, C(O)NR(R¹⁷), C(O)CRR¹⁷-NR(R¹⁷), C(O)NR(CR₂)_pNR(R¹⁷), C(O)NR(CR₂)_pOR¹⁷,C(O)NR(CR₂)_pSR¹⁷, C(O)NR(CR₂)_pS(O)_1-2R¹⁸, S(O)_0-2R¹⁸, (CR₂)_1-6NR(CR₂)_pOR¹⁷, (CR₂)_1-6NR(CR₂)_qC(O)R¹⁸, S(O)₂NRR¹⁷, S(O)₂NR(CR₂)_pNR(R¹⁷), 또는 S(O)₂NR(CR₂)_pOR¹⁷이고;

R¹⁷ 및 R¹⁸은 독립적으로, (CR₂)_qY 또는, 각각 할로, 아미노, 아미도, 히드록실, 알콕시, 시아노, 카르복실 또는 Y로 임의로 치환될 수 있는 C_1-6알킬, C_2-6알케닐 또는 C_2-6알키닐이거나; 또는 R¹⁷은 H이고;

R¹⁹는 C_1-6알킬이고;

Y는 C_3-12 카르보시클릭 고리, C_6-10아릴; 또는 5원 내지 10원 헤테로아릴 또는 4원 내지 10원 헤테로시클릭 고리이고; 이들은 각각 1 내지 3개의 R⁵ 기로 임의로 치환되고;

각각의 R은 H 또는 C_1-6알킬이고;

p는 2 내지 4이고;

q는 0 내지 4임].

일 실시양태에서, 본 발명은 화학식 6f, 6g, 6h 또는 6i의 화합물을 합성하는 방법을 제공한다.

여기서, R^5a는 메톡시 또는 이소프로폭시이고;

R^5b는 메틸이고;

R^10a, R^10b, R^10c, R^10d, R^10e, R^10f, R^10g 및 R^10h는 독립적으로 H, 할로, C_1-6알킬, NH₂, 할로, 또는 임의로 치환된 페닐이고;

각각의 R¹⁹는 상기 화학식 6에 정의된 바와 같다.

본 발명의 방법에서, 상기 화학식 6e의 시약은,

i) 화학식 7의 시약을 알킬화제와 접촉시켜, 화학식 8의 중간체를 형성하는 단계

[여기서, R⁵ 및 R¹⁹는 상기 화학식 6에서 정의된 바와 같음]; 및

ii) 상기 화학식 8의 중간체를 환원시켜 화학식 6e의 시약을 형성하는 단계

에 의해 합성할 수 있다.

일부 실시예에서, 상기 알킬화제는 메틸 p-톨루엔술포네이트이다. 다른 실시예에서는, 알킬화된 화학식 6의 화합물을 수소화로 환원시킨다.

또 다른 측면에서, 본 발명은, 화학식 1, 2, 2A, 3A, 3B, 3C, 3D, 4 또는 5의 화합물 및 생리학상 허용되는 담체를, 임의로는 제2의 치료제 (예컨대 과다증식 억제제)와 조합하여 포함하는 제약 조성물을 제공한다.

또 다른 측면에서, 본 발명은, 세포를 유효량의 화학식 1, 2, 2A, 3, 3A, 3B, 3C, 3D, 4 또는 5의 화합물 또는 그의 제약 조성물과 접촉시키는 것을 포함하는, 세포에서 Ros, IGF-1R, InsR 및 역형성 림프종 키나제로부터 선택되는 키나제를 억제하는 방법을 제공한다.

본 발명은 또한, Ros, IGF-1R, InsR 또는 ALK의 억제에 반응하는 병태를 앓고 있는 대상체에 유효량의 화학식 1, 2, 2A, 3A, 3B, 3C, 3D, 4 또는 5의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 제약 조성물을, 임의로는 제2의 치료제와 조합하여 투여함으로써, 상기 병태를 치료하는 것을 포함하는, Ros, IGF-1R, InsR 또는 ALK의 억제에 반응하는 병태를 앓고 있는 대상체에서 상기 병태를 치료, 개선 또는 예방하는 방법을 제공한다. 별법으로, 본 발명은 Ros, IGF-1R, InsR 또는 ALK에 의해 매개되는 병태를 치료하기 위한 의약의 제조에서의 화학식 1, 2, 2A, 3A, 3B, 3C, 3D, 4 또는 5의 화합물의 용도를 제공한다. 특정 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 Ros, IGF-1R, InsR 또는 ALK에 의해 매개되는 병태를 치료하기 위해 단독으로 또는 제2의 치료제와 조합하여 사용될 수 있으며, 이 때, 상기 병태는 자가면역성 질환, 이식 관련 질환, 감염성 질환 또는 세포 증식성 장애이다.

나아가, 본 발명은, 세포 증식성 장애를 앓고 있는 대상체에 유효량의 화학식 1, 2, 2A, 3A, 3B, 3C, 3D, 4 또는 5의 화합물, 또는 그의 제약상 허용되는 염 또는 제약 조성물을, 임의로는 제2의 치료제와 조합하여 투여함으로써, 상기 병태를 치료하는 것을 포함하는, 세포 증식성 장애를 앓고 있는 대상체에서 상기 장애를 치료하는 방법을 제공한다. 별법으로, 본 발명은 세포-증식성 장애를 치료하기 위한 의약의 제조에서의 화학식 1, 2, 2A, 3A, 3B, 3C, 3D, 4 또는 5의 화합물의 용도를 제공한다. 특정 실시예에서, 본 발명의 화합물은, 이들로 한정되지는 않지만, 다발성 골수종, 신경모세포종, 림프종, 백혈병, 흑색종, 육종, 골육종, 활막 육종, 유잉(Ewing) 육종, 간암, 위장관 간질 종양 또는 유방, 신장, 전립선, 결장직장, 갑상선, 난소, 췌장, 폐, 자궁, 호흡기, 뇌, 소화관, 요로, 눈, 간, 피부, 두경부, 갑상선 또는 부갑상선의 고형 종양을 비롯한 세포 증식성 장애를 치료하기 위해 단독으로 또는 화학요법제와 조합하여 사용될 수 있다.

정의

"알킬"은 하나의 잔기 및 다른 기 (예를 들어, 할로-치환된-알킬 및 알콕시)의 구조적 요소를 지칭하며, 이는 직쇄 또는 분지쇄일 수 있다. 본원에서 사용된 임의로 치환된 알킬, 알케닐 또는 알키닐은 임의로 할로겐화될 수 있거나 (예를 들어, CF₃), 또는 NR, O 또는 S와 같은 헤테로원자로 치환되거나 대체된 1개 이상의 탄소를 가질 수 있다 (예를 들어, -OCH₂CH₂O-, 알킬티올, 티오알콕시, 알킬아민 등).

"아릴"은 탄소 원자를 함유하는 모노시클릭 또는 융합 바이시클릭 방향족 고리를 지칭한다. "아릴렌"은 아릴기로부터 유도된 2가 라디칼을 의미한다. 예를 들어, 아릴기는 페닐, 인데닐, 인다닐, 나프틸, 또는 1,2,3,4-테트라히드로나프탈레닐 (임의로 오르토, 메타 또는 파라 위치에서 치환될 수 있음)일 수 있다.

본원에서 사용된 "헤테로아릴"은 1개 이상의 고리원이 헤테로원자인 상기 아릴에 대해 정의된 바와 같다. 헤테로아릴의 예로는, 피리딜, 피라지닐, 인돌릴, 인다졸릴, 퀴녹살리닐, 퀴놀리닐, 벤조푸라닐, 벤조피라닐, 벤조티오피라닐, 벤조[1,3]디옥솔, 이미다졸릴, 벤조-이미다졸릴, 피리미디닐, 푸라닐, 옥사졸릴, 이속사졸릴, 트리아졸릴, 벤조트리아졸릴, 테트라졸릴, 피라졸릴, 티에닐, 피롤릴, 이소퀴놀리닐, 퓨리닐, 티아졸릴, 테트라지닐, 벤조티아졸릴, 옥사디아졸릴, 벤족사디아졸릴 등이 포함되나, 이에 제한되지는 않는다.

본원에서 사용된 "카르보시클릭 고리"는 탄소 원자를 함유하며, 임의로는 예를 들어 =O로 치환될 수 있는, 포화 또는 부분 불포화, 모노시클릭, 융합 바이시클릭 또는 브릿징된 폴리시클릭 고리를 지칭한다. 카르보시클릭 고리의 예로는, 시클로프로필, 시클로부틸, 시클로펜틸, 시클로헥실, 시클로프로필렌, 시클로헥산온 등이 포함되나, 이에 제한되지는 않는다.

본원에서 사용된 "헤테로시클릭 고리"는 1개 이상의 고리 탄소가 헤테로원자인 상기 카르보시클릭 고리에 대해 정의된 바와 같다. 예를 들어, 헤테로시클릭 고리는 N, O, S, -N=, -S-, -S(O), -S(O)₂-, 또는 -NR- (여기서, R은 수소, C_1-4알킬 또는 보호기일 수 있음)을 함유할 수 있다. 헤테로시클릭 고리의 예로는, 모르폴리노, 피롤리디닐, 피롤리디닐-2-온, 피페라지닐, 피페리디닐, 피페리디닐온, 1,4-디옥사-8-아자-스피로[4.5]데스-8-일, 1,2,3,4-테트라히드로퀴놀리닐 등이 포함되나, 이에 제한되지는 않는다. 본원에서 사용된 헤테로시클릭 고리는 바이시클릭 아민 및 바이시클릭 디아민을 포함할 수 있다.

본원에서 사용된 바, 임의의 치환기 (예를 들어, CH₂)에서의 H 원자는 적합한 모든 동위원소 변형체, 예를 들어, H, ²H 및 ³H를 모두 포함한다.

본원에서 사용된 이탈기는 결합한 전자를 함께 가져가면서 안정한 화학종으로 대체되는 원자 (또는 원자군)이다. 전형적으로, 이탈기는 음이온 (예를 들어 Cl^-) 또는 중성 분자 (예를 들어 H₂O)이다. 적합한 이탈기로는, 이들로 한정되지는 않지만, 할로겐, 알콕시기, 알킬티오기, 아릴옥시기, 토실기 및 아릴티오기가 있다. 당업자는 본 발명에서 사용하기에 적합한 다른 이탈기를 알고 있을 것이다.

본원에서 사용된 바, 산화제는 산소 원자를 전달하는 화합물이다. 통상의 산화제로는, 이들로 한정되지는 않지만 퍼클로레이트, 클로레이트, 클로라이트, 하이포클로라이트, 요오드 및 기타 할로겐, 퍼옥시드, 술폭사이드, 과황산, 6가 크롬 화합물, 예컨대 크롬산 및 중크롬산 및 삼산화크롬, 피리디늄 클로로크로메이트 (PCC), 및 크로메이트/디크로메이트 화합물, 퍼보레이트, 등이 있다. 당업자는 본 발명에서 사용하기에 적합한 다른 산화제를 알고 있을 것이다.

본원에서 사용된 바, 알킬화제는 알킬기를 전달하는 화합물로서, 친핵성 알킬화제, 친전자성 알킬화제, 라디칼 알킬화제 또는 카르빈(carbine) 알킬화제를 모두 포함한다.

본원에서 사용된 바, 수소화란, 수소 첨가를 야기하는 화학적 반응을 지칭한다. 수소화는 보통 불포화 유기 화합물을 환원 또는 포화시키기 위해 이용된다. 이 반응은 전형적으로는 촉매 (예컨대 백금족 금속)의 존재하에 실시되며, 비-촉매 수소화는 고온에서 일어난다.

달리 언급하지 않는 한, 치환기가 "임의로 치환된" 것으로 간주되는 경우, 이것은, 상기 치환기가, 예를 들어, 임의로 할로겐화된 알킬, 알케닐, 알키닐, 알콕시, 알킬아민, 알킬티오, 알키닐, 아미드, 단일 및 이중 치환된 아미노기를 비롯한 아미노, 아릴, 아릴옥시, 아릴티오, 카르보닐, 카르보시클릭, 시아노, 시클로알킬, 할로겐, 헤테로알킬, 헤테로알케닐, 헤테로알키닐, 헤테로아릴, 헤테로시클릭, 히드록시, 이소시아네이토, 이소티오시아네이토, 머캅토, 니트로, O-카르바밀, N-카르바밀, O-티오카르바밀, N-티오카르바밀, C-아미도, N-아미도, S-술폰아미도, N-술폰아미도, C-카르복시, O-카르복시, 퍼할로알킬, 퍼플루오로알킬, 실릴, 술포닐, 티오카르보닐, 티오시아네이토, 트리할로메탄술포닐, 및 이들의 보호화된 화합물로부터 개별적으로 및 독립적으로 선택되는 하나 이상의 기(들)로 치환될 수 있는 기인 것을 의미한다.

본원에 사용된 용어 "병용-투여" 또는 "조합 투여" 등은 단일 환자에 선택된 치료제들을 투여하는 것을 포함하는 의미이며, 제제들을 반드시 동일한 투여 경로로 또는 동일한 시간에 투여하는 것은 아닌 치료 요법을 포함하는 것을 의도한다.

본원에 사용된 용어 "제약 조합물"은 활성 성분의 혼합 또는 배합으로 생성되는 생성물을 지칭하며, 상기 활성 성분의 고정 및 비(非)-고정 조합물을 모두 포함한다. 용어 "고정 조합물"이란, 활성 성분 (예컨대 화학식 1의 화합물) 및 조제(co-agent)가 모두 단일 실체 또는 투여물의 형태로 환자에게 동시에 투여되는 것을 의미한다. 용어 "비(非)-고정 조합물"이란, 활성 성분 (예컨대 화학식 1의 화합물) 및 조제가 환자에게 별개의 실체로서 일제히, 동시에 또는 명시적 시간 제한없이 순차적으로 투여되며, 이러한 투여가 환자의 체내에서 상기 활성 성분의 치료상 유효한 수준을 제공하는 것을 의미한다. 비(非)-고정 조합물은 또한 칵테일 요법, 예컨대 3가지 이상의 활성 성분의 투여에도 적용된다.

용어 "치료 유효량"은 연구자, 수의사, 의학 박사 또는 기타 임상의에 의해 조사되는 세포, 조직, 기관, 시스템, 동물 또는 인간에서의 생물학적 또는 의학적 반응을 도출해 내는 대상 화합물의 양을 의미한다.

대상 화합물의 "투여" 또는 "투여하는"이라는 용어는, 치료를 필요로 하는 대상체에게 본 발명의 화합물 또는 그의 전구약물을 제공하는 것을 의미한다.

"화학요법제"는 암 치료에 유용한 화학적 화합물이다. 화학요법제의 예로는, 알킬화제, 예컨대 티오테파 및 싸이톡산(CYTOXAN)(등록상표) 시클로포스파미드; 알킬 술포네이트, 예컨대 부설판, 임프로설판 및 피포설판; 아지리딘, 예컨대 벤조도파, 카르보쿠온, 메투레도파, 및 우레도파; 알트레타민, 트리에틸렌멜라민, 트리에틸렌포스포라미드, 트리에틸렌티오포스포라미드 및 트리메틸올로멜라민을 비롯한 에틸렌이민 및 메틸멜라민; 아세토게닌 (특히 불라타신 및 불라타시논); 델타-9-테트라히드로카나비놀 (드로나비놀, 마리놀(MARINOL)(등록상표)); 베타-라파콘; 라파콜; 콜히친; 베툴린산; 캄토테신 (합성 유사체인 토포테칸 (히캄틴(HYCAMTIN)(등록상표)), CPT-11 (이리노테칸, 캄프토사르(CAMPTOSAR)(등록상표)), 아세틸캄토테신, 스코폴렉틴, 및 9-아미노캄토테신 포함); 브리오스타틴; 칼리스타틴; CC-1065 (그의 아도젤레신, 카르젤레신 및 비젤레신 합성 유사체 포함); 포도필로톡신; 포도필린산; 테니포시드; 크립토피신 (특히 크립토피신 1 및 크립토피신 8); 돌라스타틴; 듀오카르마이신 (합성 유사체인 KW-2189 및 CB1-TM1 포함); 엘레우테로빈; 판크라티스타틴; 사르코딕틴; 스폰지스타틴; 질소 머스터드, 예컨대 클로람부실, 클로르나파진, 콜로포스파미드, 에스트라무스틴, 이포스파미드, 메클로레타민, 메클로레타민 옥사이드 히드로클로라이드, 멜팔란, 노벰비킨, 페네스테린, 프레드니무스틴, 트로포스파미드, 우라실 머스터드; 니트로소우레아, 예컨대 카르무스틴, 클로로조토신, 포테무스틴, 로무스틴, 니무스틴 및 라니무스틴; 항생제, 예컨대 엔다이인(enediyne)계 항생제 (예를 들어, 칼리케아미신, 특히 칼리케아미신 감마1I 및 칼리케아미신 오메가I1 (예를 들어, 문헌 [Agnew, Chem Intl. Ed. Engl., 33: 183-186 (1994)] 참조); 다이네미신(dynemicin) A를 비롯한 다이네미신; 에스페라미신; 뿐만 아니라, 네오카르지노스타틴 발색단 및 관련 색소단백질 엔다이인계 항생제 발색단), 아클라시노마이신, 악티노마이신, 안트라마이신, 아자세린, 블레오마이신, 칵티노마이신, 카라비신, 카미노마이신, 카르지노필린, 크로모마이신, 닥티노마이신, 다우노루비신, 데토루비신, 6-디아조-5-옥소-L-노르류신, 아드리아마이신(ADRIAMYCIN)(등록상표) 독소루비신 (모르폴리노-독소루비신, 시아노모르폴리노-독소루비신, 2-피롤리노-독소루비신 및 데옥시독소루비신), 에피루비신, 에소루비신, 이다루비신, 마르셀로마이신, 미토마이신, 예컨대 미토마이신 C, 미코페놀산, 노갈라마이신, 올리보마이신, 페플로마이신, 포르피로마이신, 퓨로마이신, 쿠엘라마이신, 로도루비신, 스트렙토니그린, 스트렙토조신, 투베르시딘, 우베니멕스, 지노스타틴, 조루비신; 대사길항물질, 예컨대 메토트렉세이트 및 5-플루오로우라실 (5-FU); 엽산 유사체, 예컨대 데노프테린, 메토트렉세이트, 프테로프테린, 트리메트렉세이트; 퓨린 유사체, 예컨대 플루다라빈, 6-머캅토퓨린, 티아미프린, 티오구아닌; 피리미딘 유사체, 예컨대 안시타빈, 아자시티딘, 6-아자우리딘, 카르모푸르, 시타라빈, 디데옥시우리딘, 독시플루리딘, 에노시타빈, 플록수리딘; 안드로겐, 예컨대 칼루스테론, 드로모스타놀론 프로피오네이트, 에피티오스타놀, 메피티오스탄, 테스토락톤; 항-부신제, 예컨대 아미노글루테티미드, 미토탄, 트릴로스탄; 엽산 보충제, 예컨대 폴린산; 아세글라톤; 알도포스파미드 글리코시드; 아미노레불린산; 에닐우라실; 암사크린; 베스트라부실; 비산트렌; 에다트렉세이트; 데포파민; 데메콜신; 디아지쿠온; 엘포미틴; 엘립티늄 아세테이트; 에포틸론; 에토글루시드; 갈륨 니트레이트; 히드록시우레아; 렌티난; 로니다민; 메이탄시노이드, 예컨대 메이탄신 및 안사미토신; 미토구아존; 미토잔트론; 모피다몰; 니트라크린; 펜토스타틴; 페나메트; 피라루비신; 록소잔트론; 2-에틸히드라지드; 프로카르바진; PSK(등록상표) 다당류 복합체 (제이에이치에스 내추럴 프로덕츠(JHS Natural Products), 미국 오레곤주 유진 소재); 라족산; 리족신; 시조푸란; 스피로게르마늄; 테누아존산; 트리아지쿠온; 2,2',2"-트리클로로트리에틸아민; 트리코테센 (특히 T-2 독소, 베라큐린 A, 로리딘 A 및 안귀딘); 우레탄; 빈데신 (엘디신(ELDISINE)(등록상표), 필데신(FILDESIN)(등록상표)); 다카르바진; 만노무스틴; 미토브로니톨; 미토락톨; 피포브로만; 가시토신; 아라비노시드 ("아라(Ara)-C"); 티오테파; 탁소이드, 예를 들어, 파클리탁셀인 탁솔(TAXOL)(등록상표) (브리스톨-마이어스 스퀴브 온콜로지(Bristol-Myers Squibb Oncology), 미국 뉴저지주 프린스톤 소재), 파클리탁셀의 크레모포르-무함유, 알부민-조작된 나노입자 제형인 아브락산(ABRAXANE)™ (아메리칸 파마슈티칼 파트너스(American Pharmaceutical Partners), 미국 일리노이주 샴버그 소재), 및 도세탁셀인 탁소테레(TAXOTERE)(등록상표) (롱-프랑 로러(Rhone-Poulenc Rorer), 프랑스 안토니 소재); 클로람부실; 젬시타빈 (젬자(GEMZAR)(등록상표)); 6-티오구아닌; 머캅토퓨린; 메토트렉세이트; 백금 유사체, 예컨대 시스플라틴 및 카르보플라틴; 빈블라스틴 (벨반(VELBAN)(등록상표)); 백금; 에토포시드 (VP-16); 이포스파미드; 미토잔트론; 빈크리스틴 (온코빈(ONCOVIN)(등록상표)); 옥살리플라틴; 류코보린; 비노렐빈 (나벨빈(NAVELBINE)(등록상표)); 노반트론; 에다트렉세이트; 다우노마이신; 아미노프테린; 이반드로네이트; 토포이소머라제 억제제 RFS 2000; 디플루오로메틸오르니틴 (DMFO); 레티노이드, 예컨대 레티노산; 카페시타빈 (젤로다(XELODA)(등록상표)); 상기 중 임의의 것의 제약상 허용되는 염, 산 또는 유도체; 뿐만 아니라 상기 중 둘 이상의 조합물, 예컨대 시클로포스파미드, 독소루비신, 빈크리스틴, 및 프레드니솔론의 조합 요법의 약어인 CHOP, 및 5-FU 및 류코보린과 조합된 옥살리플라틴 (엘로잔틴(ELOXATIN)™)을 이용한 치료 요법에 대한 약어인 FOLFOX가 있다.

나아가, "화학요법제"는, 암의 성장을 촉진시킬 수 있는 호르몬의 영향을 조절, 감소, 차단 또는 억제하도록 작용하는 항호르몬제를 포함할 수 있으며, 이는 흔히 전신성, 또는 전신 치료제의 형태로 존재한다. 이들은 그 자체가 호르몬일 수 있다. 그의 예로는, 예를 들어, 타목시펜 (타목시펜인 놀바덱스(NOLVADEX)(등록상표) 포함), 랄록시펜인 에비스타(EVISTA)(등록상표), 드롤록시펜, 4-히드록시타목시펜, 트리옥시펜, 케옥시펜, LY117018, 오나프리스톤, 및 토레미펜인 파레스톤(FARESTON)(등록상표)을 비롯한, 항에스트로겐제 및 선택적인 에스트로겐 수용체 조절제 (SERM); 항프로게스테론제; 에스트로겐 수용체 하향-조절제 (ERD); 난소를 억제하거나 또는 그의 기능을 정지시키는 기능을 하는 작용제, 예를 들어, 황체형성 호르몬-방출 호르몬 (LHRH) 효능제, 예컨대 류프롤리드 아세테이트인 루프론(LUPRON)(등록상표) 및 엘리가드(ELIGARD)(등록상표), 고세렐린 아세테이트, 부세렐린 아세테이트 및 트리프테렐린; 다른 항안드로겐제, 예컨대 플루타미드, 닐루타미드 및 비칼루타미드; 및 부신에서 에스트로겐 생성을 조절하는 아로마타제 효소를 억제하는 아로마타제 억제제, 예컨대, 예를 들어, 4(5)-이미다졸, 아미노글루테티미드, 메게스트롤 아세테이트인 메가스(MEGASE)(등록상표), 엑세메스탄인 아로마신(AROMASIN)(등록상표), 포르메스탄, 파드로졸, 보로졸인 리비소르(RIVISOR)(등록상표), 레트로졸인 페마라(FEMARA)(등록상표), 및 아나스트로졸인 아리미덱스(ARIMIDEX)(등록상표)가 있다. 또한, 상기와 같은 화학요법제의 정의에는, 비스포스폰산염, 예컨대 클로드로네이트 (예를 들어, 보네포스(BONEFOS)(등록상표) 또는 오스탁(OSTAC)(등록상표)), 에티드로네이트인 디드로칼(DIDROCAL)(등록상표), NE-58095, 졸레드론산/졸레드로네이트인 조메타(ZOMETA)(등록상표), 알렌드로네이트인 포사막스(FOSAMAX)(등록상표), 파미드로네이트인 아레디아(AREDIA)(등록상표), 틸루드로네이트인 스켈리드(SKELID)(등록상표), 또는 리세드로네이트인 악토넬(ACTONEL)(등록상표); 이뿐 아니라, 트록사시타빈 (1,3-디옥솔란 뉴클레오시드 사이토신 유사체); 안티센스 올리고뉴클레오티드, 특히 이상 세포 증식에 연루된 신호전달 경로 중의 유전자들의 발현을 억제하는 것, 예컨대, 예를 들어, PKC-알파, Raf, H-Ras, 및 표피성 성장 인자 수용체 (EGF-R); 백신, 예컨대 테라토프(THERATOPE)(등록상표) 백신 및 유전자요법 백신, 예를 들어, 알로벡틴(ALLOVECTIN)(등록상표) 백신, 류벡틴(LEUVECTIN)(등록상표) 백신, 및 박시드(VAXID)(등록상표) 백신; 토포이소머라제 1 억제제인 루르토테칸(LURTOTECAN)(등록상표); rmRH인 아바렐릭스(ABARELIX)(등록상표); 라파티닙 디토실레이트 (GW572016으로도 또한 알려져 있는, ErbB-2 및 EGFR 이중 티로신 키나제 소분자 억제제); 및 상기 중 임의의 것의 제약상 허용되는 염, 산 또는 유도체가 포함된다.

본 발명을 수행하는 방식

본 발명은 신규한 피리미딘 유도체 및 그의 제약 조성물, 및 상기 화합물의 사용 방법을 제공한다.

<화학식 1>

<화학식 2>

여기서, R¹ 및 R²는 독립적으로 H, C_1-6알킬 또는 할로-치환된 C_1-6 알킬이고;

R³은 할로, C_1-6 알킬, 또는 할로-치환된 C_1-6 알킬이고;

R⁴는 H이고;

별법으로, R³ 및 R⁴는 이들이 결합된 탄소 원자와 함께, N, O 및 S로부터 선택되는 1 내지 3개의 헤테로원자를 함유하고 1 내지 2개의 R¹⁰ 기 (여기서, R¹⁰은 할로, C_1-6 알킬, C_2-6알케닐, C_2-6알키닐, 임의로 치환된 페닐 또는 NR₂임)로 임의로 치환되는 5원 내지 6원 고리를 형성할 수 있고;

R⁵, R⁶ 및 R⁸은 독립적으로 C_1-6알킬, C_1-6알콕시, C_2-6알케닐 또는 C_2-6알키닐 (각각 할로, 아미노 또는 히드록실기로 임의로 치환될 수 있음); 할로, 니트로, 시아노, CR(OR¹⁷)R¹⁷, OR¹⁷, NR(R¹⁷), CR(R¹⁷)NRR¹⁷, (CR₂)_qY, C(O)O_0-1R¹⁷, C(O)NR(R¹⁷), C(O)CRR¹⁷-NR(R¹⁷), C(O)NR(CR₂)_pNR(R¹⁷), C(O)NR(CR₂)_pOR¹⁷,C(O)NR(CR₂)_pSR¹⁷, C(O)NR(CR₂)_pS(O)_1-2R¹⁸, S(O)_0-2R¹⁸, (CR₂)_1-6NR(CR₂)_pOR¹⁷, (CR₂)_1-6NR(CR₂)_qC(O)R¹⁸, S(O)₂NRR¹⁷, S(O)₂NR(CR₂)_pNR(R¹⁷), 또는 S(O)₂NR(CR₂)_pOR¹⁷이고; 여기서, R⁸은 융합 고리의 임의의 위치 상에 존재할 수 있고;

R⁷은 S(O)_0-2R¹⁹, S(O)₂NRR²⁰ 또는 C(O)NR(R²⁰)이고; 여기서, R¹⁹ 및 R²⁰은 독립적으로 C_1-6알킬, 할로-치환된 C_1-6 알킬 또는 C_3-7시클로알킬이거나; 또는 R²⁰은 H이고;

L은 (CR₂)_1-4 또는 결합이고;

각각의 R은 H 또는 C_1-6알킬이고;

p는 2 내지 4이고;

q는 0 내지 4이다.

<화학식 2A>

여기서, R³은 할로이고;

R⁷은 S(O)_0-2R¹⁹이고;

R⁸은 메톡시, 에톡시 또는 이소프로폭시이고;

<화학식 3>

여기서, R³은 할로이고;

R⁷은 S(O)_0-2R¹⁹이고;

특정 실시양태에서는, 상기 화학식 3에서, R^5a가 메톡시 또는 이소프로폭시이고;

R^5b가 메틸이고;

다른 특정 실시양태에서, 본 발명은 하기 화학식 3A, 3B, 3C 또는 3D의 화합물을 제공한다.

여기서, R^5a는 메톡시 또는 이소프로폭시이고;

R^5b는 메틸이고;

R^10b, R^10e, R^10f 및 R^10h는 독립적으로 H 또는 C_1-6알킬이고;

R¹, R², R⁷, R⁹ 및 R은 화학식 1 또는 2에 정의된 바와 같다.

상기 화학식 3A, 3B, 3C 또는 3D 중 임의의 화학식에서, R⁹는 -L-CR(OR¹⁷)-C_tF_(2t+1) (여기서, t는 1 내지 3임); -L-S(O)₂R¹⁸, -L-S(O)₂NRR¹⁷, -L-S(O)₂NR(CR₂)_pNR(R¹⁷), -L-S(O)₂NR(CR₂)_pOR¹⁷ 또는 하기 화학식 a, b, c 또는 d로부터 선택되는 라디칼일 수 있고

여기서, R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴, R¹⁵, R¹⁶, L 및 p는 상기 정의된 바와 같고;

여기서, Z는 NR^9a 또는 O이고;

;

R⁷은 S(O)_0-2R¹⁹, S(O)₂NRR²⁰ 또는 C(O)NR(R²⁰)이고; 여기서, R¹⁹ 및 R²⁰은 독립적으로 C_1-6알킬 또는 할로-치환된 C_1-6 알킬이거나; 또는 R²⁰은 H이고;

L은 (CR₂)_1-4 또는 결합이고;

각각의 R은 H 또는 C_1-6알킬이고;

p는 2 내지 4이고;

또 다른 측면에서, 본 발명은,

;

[여기서, X¹ 및 X²는 이탈기임]; 및

를 포함하는, 하기 화학식 6의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 합성하는 방법을 제공한다.

<화학식 6>

여기서, W는 1 내지 3개의 질소 원자를 함유하는 5원 내지 6원 고리이고;

R¹⁷ 및 R¹⁸은 독립적으로 (CR₂)_qY 또는, 각각 할로, 아미노, 아미도, 히드록실, 알콕시, 시아노, 카르복실 또는 Y로 임의로 치환될 수 있는 C_1-6알킬, C_2-6알케닐 또는 C_2-6알키닐이거나; 또는 R¹⁷은 H이고;

R¹⁹는 C_1-6알킬이고;

각각의 R은 H 또는 C_1-6알킬이고;

p는 2 내지 4이고;

q는 0 내지 4이다.

일 실시양태에서, 본 발명은 하기 화학식 6f, 6g, 6h 또는 6i의 화합물을 합성하는 방법을 제공한다

여기서, R^5a는 메톡시 또는 이소프로폭시이고;

R^5b는 메틸이고;

각각의 R¹⁹는 상기 화학식 6에 정의된 바와 같다.

또 다른 측면에서, 본 발명은 하기 화학식 9 또는 10의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 제공한다.

여기서, B¹은 1 내지 3개의 R⁷ 기로 치환된 아릴 또는 1 내지 3개의 R⁷ 기로 임의로 치환되는 헤테로아릴이고;

B²는 아릴 또는 헤테로아릴이고;

고리 E는 임의로 이중 결합을 함유할 수 있고;

Z¹, Z² 및 Z³ 중 하나는 O, SO_0-2, NR⁸ 또는 NR⁹이고, 나머지는 CR₂이고;

Z⁴는 NR⁸ 또는 NR⁹이고;

R¹ 및 R²는 독립적으로 H, C(O)R¹⁰, C_1-6알킬 또는 할로-치환된 C_1-6 알킬이고;

R³ 및 R⁴는 독립적으로 할로, OR¹⁷, NR(R¹⁷), SR¹⁷; 각각 할로, 아미노 또는 히드록실기로 임의로 치환될 수 있는, C_1-6알킬, C_1-6알콕시, C_2-6알케닐 또는 C_2-6알키닐; C(O)R¹⁷, NC(O)R¹⁸, C(O)NRR¹⁷, S(O)₂NRR¹⁷, NS(O)₂R¹⁸, S(O)_0-2R¹⁸; 또는 임의로 치환된 C_3-12카르보시클릭 고리, C_6-10 아릴; 또는 N, O 및 S로부터 선택되는 1 내지 4개의 헤테로원자를 함유하는 5원 내지 10원 헤테로아릴 또는 헤테로시클릭 고리이고;

별법으로, R³ 및 R⁴ 중 하나는 H이거나, 또는 R³ 및 R⁴는 이들이 결합된 탄소 원자와 함께, 1 내지 2개의 R⁷ 기로 임의로 치환되고 N, O 및 S로부터 선택되는 1 내지 3개의 N 헤테로원자를 임의로 함유하는 9원 내지 12원 고리를 형성할 수 있고;

R⁵, R⁶ 및 R⁷은 독립적으로 C_1-6알킬, C_1-6알콕시, C_2-6알케닐 또는 C_2-6알키닐 (이들은 각각 할로, 아미노 또는 히드록실기로 임의로 치환될 수 있음); 할로, 니트로, 시아노, CR(OR¹⁷)R¹⁷, OR¹⁷, NR(R¹⁷), CR(R¹⁷)NRR¹⁷, (CR₂)_qY, C(O)O_0-1R¹⁷, C(O)NR(R¹⁷), C(O)CRR¹⁷-NR(R¹⁷), C(O)NR(CR₂)_pNR(R¹⁷), C(O)NR(CR₂)_pOR¹⁷,C(O)NR(CR₂)_pSR¹⁷, C(O)NR(CR₂)_pS(O)_1-2R¹⁸, S(O)_0-2R¹⁸, (CR₂)_1-6NR(CR₂)_pOR¹⁷, (CR₂)_1-6NR(CR₂)_qC(O)R¹⁸, S(O)₂NRR¹⁷, S(O)₂NR(CR₂)_pNR(R¹⁷), 또는 S(O)₂NR(CR₂)_pOR¹⁷이고; 여기서 R⁶은 융합 고리의 임의의 위치 상에 존재할 수 있고;

R⁸은 H, C_1-6알킬, C_2-6알케닐 또는 C_2-6알키닐 (이들은 각각 할로, 아미노 또는 히드록실기로 임의로 치환될 수 있음); 할로, 니트로 또는 시아노; -CR(OR¹⁷)R¹⁷, -(CR₂)_p-OR¹⁷, (CR₂)_p-NR(R¹⁷), -L-CR(R¹⁷)NRR¹⁷, -L-Y, -L-C(O)-R¹⁷, -(CR₂)_1-4-C(O)O-R¹⁷ 또는 -L-C(O)-NRR¹⁷이고;

R⁹는 -L-CR(OR¹⁷)-C_tF_(2t+1) (여기서, t는 1 내지 3임); -L-C(O)-CR(R¹⁷)-NRR¹⁷, -L-C(O)-NR-(CR₂)_p-NRR¹⁷, -L-C(O)NR(CR₂)_pOR¹⁷,-L-C(O)-(CR₂)_q-NR-C(O)-R¹⁸, -L-C(O)NR(CR₂)_pSR¹⁷, -L-C(O)NR(CR₂)_pS(O)_1-2R¹⁸, (CR₂)_pNR(CR₂)_pOR¹⁷ 또는 (CR₂)_pNR-L-C(O)R¹⁸, -L-S(O)₂R¹⁸, -L-S(O)₂NRR¹⁷, -L-S(O)₂NR(CR₂)_pNR(R¹⁷), -L-S(O)₂NR(CR₂)_pOR¹⁷ 또는 하기 화학식 a, b, c 또는 d로부터 선택되는 라디칼이고

;

여기서, R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴, R¹⁵ 및 R¹⁶은 독립적으로 H, 또는 각각 할로, 아미노 또는 히드록실기로 임의로 치환될 수 있는 C_1-6알킬, C_1-6알콕시, C_2-6알케닐 또는 C_2-6알키닐로부터 선택되거나; 또는 R¹¹ 및 R¹², R¹² 및 R¹⁵, R¹⁵ 및 R¹⁶, R¹³ 및 R¹⁴, 또는 R¹³ 및 R¹⁵는 그들이 결합된 탄소 및/또는 질소 원자와 함께, C(O), N, O 및 S(O)_0-2로부터 선택되는 3개 이하의 원자 또는 기를 임의로 함유하는 3원 내지 7원 포화, 불포화 또는 부분 불포화 고리를 형성할 수 있고;

L은 (CR₂)_1-4 또는 결합이고;

R¹⁰, R¹⁷ 및 R¹⁸은 독립적으로 (CR₂)_qY, 또는 각각 할로, 아미노, 아미도, 히드록실, 알콕시, 시아노, 카르복실 또는 Y로 임의로 치환될 수 있는 C_1-6알킬, C_2-6알케닐 또는 C_2-6알키닐이거나; 또는 R¹⁷는 H이고;

Y는 C_3-12 카르보시클릭 고리, C_6-10아릴; 또는 5원 내지 10원 헤테로아릴 또는 4원 내지 10원 헤테로시클릭 고리이고; 이들은 각각 1 내지 3개의 R⁷ 기로 임의로 치환되고;

각각의 R은 H 또는 C_1-6알킬이고;

p는 2 내지 4이고;

q는 0 내지 4이고;

단, R³ 및 R⁴ 중 하나가 할로, OR¹⁷, NR(R¹⁷), SR¹⁷; 각각 할로, 아미노 또는 히드록실기로 임의로 치환될 수 있는 C_1-6알킬, C_1-6알콕시, C_2-6알케닐 또는 C_2-6알키닐인 경우; 또는 R³ 및 R⁴가 함께 페닐, 피리딜, 피페리딜 또는

, 또는 이들의 호변이성질체인 경우, Z⁴와, Z¹, Z² 및 Z³ 중 하나는 NR⁹이고;

나아가, B¹이 헤테로아릴인 경우 R³ 및 R⁴가 이들이 결합된 탄소 원자와 함께 고리를 형성하는 것을 조건으로 한다.

상기 화학식 각각에서, 임의의 비대칭 탄소 원자는 (R)-, (S)- 또는 (R,S)-배열로 존재할 수 있다. 따라서, 화합물은 이성질체의 혼합물 또는 순수 이성질체, 예를 들어 순수 거울상이성질체 또는 부분입체이성질체로서 존재할 수 있다. 본 발명은 본 발명의 화합물의 가능한 호변이성질체를 추가로 포함한다.

본원에서 주어진 임의의 화학식은 또한 해당 화합물의 비(非)표지 형태뿐 아니라 동위원소 표지된 형태도 대표하는 것으로 의도되었다. 동위원소 표지된 화합물은, 본원에 주어진 화학식에 의해 도시된 구조를 갖되, 하나 이상의 원자가 선택된 원자 질량 또는 질량수를 갖는 원자로 대체되어 있다. 본 발명의 화합물 내로 편입될 수 있는 동위원소의 예로는 각각 ²H, ³H, ¹¹C, ¹³C, ¹⁴C, ¹⁵N, ¹⁸F, ³¹P, ³²P, ³⁵S, ³⁶Cl, ¹²⁵I와 같은, 수소, 탄소, 질소, 산소, 인, 불소, 및 염소의 동위원소가 있다.

본 발명에는, 예를 들어, ³H, ¹³C, 및 ¹⁴C와 같은 방사성 동위원소가 존재하는 화합물 등, 본원에서 정의된 바와 같은 각종 동위원소 표지된 화합물이 포함된다. 그러한 동위원소 표지된 화합물은 대사성 연구 (예를 들어, ¹⁴C 이용), 반응 속도 연구 (예를 들어 ²H 또는 ³H 이용), 검출 또는 영상 기법, 예컨대 약물 또는 기질 조직 분포 분석을 비롯한 양전자 방출 단층촬영 (PET) 또는 단일-광자 방출 전산화 단층촬영 (SPECT), 또는 환자에 대한 방사성 치료에서 유용하다. 다른 실시예에서는, ¹⁸F 또는 표지된 화합물이 PET 또는 SPECT 연구에 사용될 수 있다. 화합물의 동위원소 변형체는 화합물의 대사적 운명을 변화시키고/시키거나, 소수성과 같은 물리적 특성에 있어서 작은 변화를 일으키는 등의 잠재성을 갖는다. 동위원소 변형체는 또한 효능 및 안전성을 증진시키고/시키거나, 생체이용률 및 반감기를 증진시키고/시키거나, 단백질 결합을 변경하고/하거나, 생체분포를 변화시키고/시키거나, 활성 대사산물의 비율을 증가시키고/시키거나, 반응성 대사산물 또는 독성 대사산물의 형성을 감소시키는 잠재성을 갖는다. 동위원소 표지된 본 발명의 화합물 및 그의 전구약물은 일반적으로, 비-동위원소 표지된 시약을 용이하게 이용가능한 동위원소 표지된 시약으로 대체하여 이하에 기재된 반응식 또는 실시예 및 제조예에 개시된 절차를 실시함으로써 제조될 수 있다.

상기 화학식 각각에서, 각각의 임의로 치환된 잔기는, 각각 (예를 들어, 히드록실 C_1-8알킬, C_1-8알콕실 C_1-8알킬과 같이) 임의로 N, S, O 또는 이들의 조합으로 대체되거나 치환될 수 있는 탄소를 갖거나 임의로 할로겐화될 수 있는 C_1-6 알킬, C_2-6 알케닐 또는 C_3-6 알키닐; 할로, 아미노, 아미디노, C_1-6 알콕시; 히드록실, 메틸렌디옥시, 카르복시; C_1-8 알킬카르보닐; C_1-8 알콕시카르보닐, 카르바모일, C_1-8 알킬카르바모일, 술파모일, 시아노, 옥소, 니트로, 또는 상기한 바와 같은 임의로 치환된 카르보시클릭 고리, 헤테로시클릭 고리, 아릴 또는 헤테로아릴로 치환될 수 있다.

약리학 및 유용성

본 발명의 화합물 및 그의 제약상 허용되는 염은, 무세포 키나제 분석 및 세포 분석에서 시험관내 테스트시 가치있는 약리학적 특성을 나타내고, 따라서 약제로서 유용하다.

일 측면에서, 화학식 1, 2, 2A, 3A, 3B, 3C, 3D, 4 또는 5의 화합물은 역형성 림프종 키나제 (ALK) 및 NPM-ALK의 융합 단백질의 티로신 키나제 활성을 억제할 수 있다. 이 단백질 티로신 키나제는, ALK 리간드의 단백질 티로신 키나제 활성이 독립적이 되도록 하는 뉴클레오포스민 (NPM) 및 ALK의 유전자 융합으로부터 발생된다. NPM-ALK는, 혈액학적 및 종양성 질환을 초래하는 많은 조혈 및 기타 인간 세포의 신호 전달에서 (예를 들어, 역형성 대세포 림프종 (ALCL) 및 비-호지킨(Hodgkin) 림프종 (NHL), 특히 ALK+NHL 또는 Alkoma, 염증성 근육섬유모세포 종양 (IMT) 및 신경모세포종에서) 중요한 역할을 한다 (문헌 [Duyster et al. 2001 Oncogene 20, 5623-5637]). NPM-ALK 이외에도, 다른 유전자 융합, 예를 들어 TPM3-ALK (ALK와 비근육 트로포마이오신의 융합)이 인간의 혈액학적 및 종양성 질환에서 확인되었다.

ALK 티로신 키나제 활성의 억제는 공지된 방법을 이용하여, 예를 들어 문헌 [J. Wood et al. Cancer Res. 60, 2178-2189 (2000)]에 기재된 VEGF-R 키나제 분석과 유사하게 ALK의 재조합 키나제 도메인을 이용하여 입증할 수 있다. 일반적으로, GST-ALK 단백질 티로신 키나제를 이용한 시험관내 효소 분석은 20 mM 트리스(Tris) HCl, pH = 7.5, 3 mM MgCl₂, 10 mM MnCl₂, 1 mM DTT, 0.1 μCi/분석 (= 30 ㎕) [γ-³³P]-ATP, 2 μM ATP, 3 ㎍/mL 폴리(Glu, Tyr 4:1) 폴리-EY (시그마(Sigma) P-0275), 1% DMSO, 25 ng ALK 효소에서 필터 결합 분석으로서 96-웰 플레이트에서 수행한다. 분석물을 주변 온도에서 10분 동안 인큐베이션시킨다. 50 ㎕의 125 mM EDTA를 첨가함으로써 반응을 종결시키고, 반응 혼합물을 메탄올로 미리 습윤화시킨 MAIP 멀티스크린(Multiscreen) 플레이트 (밀리포어(Millipore, 미국 매사추세츠주 베드포드 소재))로 옮기고, H₂O로 5분 동안 재수화시킨다. 세척 (0.5% H₃PO₄) 후, 플레이트를 액체 섬광 계수기에서 카운팅한다. 억제율 (%)의 선형 회귀 분석에 의해 IC₅₀값을 계산한다.

화학식 1, 2, 2A, 3A, 3B, 3C, 3D, 4 또는 5의 화합물은 인간 NPM-ALK 과발현 마우스 BaF3 세포 (DSMZ(Deutsche Sammiung von Mikroorganismen und Zelikulturen GmbH, 독일 소재))의 성장을 강력히 억제할 수 있다. NPM-ALK의 발현은, BaF3 세포주의 NPM-ALK에 대해 코딩하는 발현 벡터 pClneo^TM (프로메가 코포레이션(Promega Corp., 미국 위스콘신주 매디슨 소재))에 의한 형질감염 및 후속되는 G418 저항성 세포의 선택에 의해 달성될 수 있다. 비-형질감염된 BaF3 세포는 세포 생존에 대해 IL-3에 의존한다. 반면, NPM-ALK 발현 BaF3 세포 (하기에서는, BaF3-NPM-ALK라 함)는 이들이 NPM-ALK 키나제를 통해 증식 신호를 얻기 때문에 IL-3의 부재 하에 증식될 수 있다. 따라서, NPM-ALK 키나제의 잠정적 억제제는 성장 신호를 파괴하여, 항증식 활성을 제공할 수 있다. 그러나, NPM-ALK 키나제의 잠정적 억제제의 항증식 활성은 NPM-ALK 비의존성 메카니즘을 통해 성장 신호를 제공하는 IL-3의 첨가에 의해 무기력화될 수 있다. FLT3 키나제를 사용하는 유사 세포 시스템 또한 기재되었다 (문헌 [E Weisberg et al. Cancer Cell; 1, 433-443 (2002)] 참조).

본 발명의 화합물의 억제 활성은 하기와 같이 측정할 수 있다. 일반적으로, BaF3-NPM-ALK 세포 (15,000개/마이크로타이터 플레이트 웰)를 96-웰 마이크로타이터 플레이트로 옮긴다. 디메틸 술폭시드 (DMSO)에 용해시킨 테스트 화합물을 DMSO의 최종 농도가 1% (v/v)를 초과하지 않도록 일련의 농도 (일련의 희석물)로 첨가한다. 첨가 후, 플레이트를 2일 동안 인큐베이션시키고, 그 동안 테스트 화합물이 없는 대조군 배양물이 2회의 세포분열 사이클을 지날 수 있다. BaF3-NPM-ALK 세포의 성장은 YOPRO^TM 염색에 의해 측정된다 (문헌 [T Idziorek et al. J. Immunol. Methods; 185: 249-258 (1995)]: 20 mM 시트르산나트륨 (pH 4.0), 26.8 mM 염화나트륨, 0.4% NP40, 20 mM EDTA 및 20 mM을 포함하는 25 ㎕의 용해 완충제를 각각의 웰에 첨가한다. 세포 용해는 실온에서 60분 내에 완료되고, DNA에 결합된 YOPRO^TM의 총량은, 여기 (nm) 485/20 및 발광 (nm) 530/25로 설정된 시토플루어(Cytofluor) II 96-웰 판독기 (퍼셉티브 바이오시스템즈(PerSeptive Biosystems))를 사용하여 측정함으로써 결정된다.

IC₅₀값은 하기 수학식을 이용하여 컴퓨터-보조 시스템에 의해 측정될 수 있다.

IC₅₀ = [(ABS_테스트-ABS_개시)/(ABS_대조군-ABS_개시)] x 100. (ABS = 흡수)

이들 실험에서의 IC₅₀값은, 억제제가 없는 대조군을 사용하여 얻어진 것보다 50% 낮은 세포 총수를 제공하는 해당 테스트 화합물의 농도로서 주어진다. 유리 형태 또는 제약상 허용되는 염 형태의 본 발명의 화합물은, 예를 들어 본원에 기재된 시험관내 테스트에 의해 확인되는 바와 같이, 가치있는 약리학적 특성을 나타낼 수 있다. 일반적으로, 본 발명의 화합물은 1 nM 내지 10 μM의 IC₅₀값을 갖는다. 일부 예에서, 본 발명의 화합물은 1 nM 내지 5 μM의 IC₅₀값을 갖거나, 또는 보다 특별하게는 1 nM 내지 1 μM의 IC₅₀값을 갖는다. 또 다른 예에서, 본 발명의 화합물은 1 nM 미만 또는 10 μM 초과의 IC₅₀값을 갖는다. 본 발명의 화합물은 10 μM에서 ALK에 대해 50% 초과의 억제율 (%)을 나타낼 수 있거나, 또는 다른 실시양태에서는 약 70% 초과의 억제율 (%)을 나타낼 수 있다.

본 발명의 화합물의 항증식 작용은 또한, BaF3-NPM-ALK 세포주에 대해 상기한 것과 동일한 방법을 이용하여 문헌 [WG Dirks et al. Int. J. Cancer 100, 49-56 (2002)]에 기재된 인간 KARPAS-299 림프종 세포주 (DSMZ(Deutsche Sammiung von Mikroorganismen und Zelikulturen GmbH, 독일 브라운슈바이크 소재))에서 측정할 수 있다. 일부 실시양태에서, 본 발명의 화합물은 대략 0.01 내지 1 μM 범위의 IC₅₀으로 억제 활성을 나타낼 수 있다. 본 발명의 화합물의 ALK의 자가인산화에 대한 작용은 문헌 [WG Dirks et al. Int. J. Cancer 100, 49-56 (2002)]에 기재된 바와 같은 면역탁본법에 의해 인간 KARPAS-299 림프종 세포주에서 측정할 수 있다.

또 다른 측면에서, 본 발명의 화합물은 국소 부착 키나제 (FAK)를 억제할 수 있고, 특정 종양의 치료에서와 같이, FAK와 연관된 신호 캐스캐이드의 기능장애에 의해 유발되는 병태의 치료를 위한 약제로서 유용할 수 있다. 내인 FAK 신호전달의 억제는 운동성 감소를 초래하고, 일부 경우에는 세포 사망을 유도한다. 한편, 외인 발현에 의한 FAK 신호전달의 상승은 세포 운동성을 증가시킨다. 또한, FAK는 침습성 및 전이성 상피, 중간엽, 갑상선 및 전립선암에서 과발현된다. 결과적으로, FAK의 억제제는 종양 성장 및 전이 억제를 위한 약물이 될 가능성이 있다. 따라서, 본 발명의 화합물은 종양성 질환, 특히 유방 종양, 장암 (결장 및 직장암), 위암 및 난소 및 전립선암, 비소세포 폐암, 소세포 폐암, 간암, 흑색종, 방광 종양 및 두경부의 암에 의해 침범되는 척추동물, 보다 특별하게는 포유동물의 예방 및/또는 치료에 유용할 수 있다.

FAK 억제와 면역계 사이의 관련성은, 예를 들어 문헌 [G.A. van Seventer et al., Eur. J. Immunol. 2001, 31, 1417-1427]에 기재되어 있다. 따라서, 본 발명의 화합물은, 예를 들어, 면역계 장애, 또는 T 림프구, B 림프구, 비만 세포 및/또는 호산구에 의해 매개되는 질환 또는 장애, 예를 들어 기관 또는 조직 동종이식물 또는 이종이식물에 대한 급성 또는 만성 거부, 죽상경화증, 혈관성형술과 같은 혈관 손상으로 인한 혈관 폐쇄, 재협착, 고혈압, 심장 부전, 만성 폐쇄성 폐질환, CNS 질환, 예컨대 알츠하이머병(Alzheimer disease) 또는 근위축성 측삭 경화증; 암; 감염성 질환, 예컨대 AIDS; 패혈성 쇼크 또는 성인성 호흡 곤란 증후군, 허혈/재관류 손상, 예를 들어 심근 경색증, 뇌졸중, 창자 허혈, 신부전 또는 출혈성 쇼크, 또는 외상성 쇼크에 의해 침범되는 척추동물, 보다 특별하게는 포유동물의 예방 및/또는 치료에 유용하다.

또 다른 측면에서, 본 발명의 화합물은 제타 사슬-연관 단백질 70 (ZAP-70)을 억제할 수 있다. 본 발명의 제제의 ZAP-70 단백질 티로신 키나제 상호작용은, 예를 들어 수용액 중에서의 인간 ZAP-70 단백질 티로신 키나제에 의한 LAT-11 (T 세포 활성화를 위한 링커)의 인산화를 막는 이들의 능력에 의해 입증될 수 있다. 따라서, 본 발명의 화합물은 ZAP-70의 억제가 역할을 하는 장애 또는 질환의 예방 또는 치료에 유용할 수 있다.

본 발명의 화합물은 또한 인슐린-유사 성장 인자 수용체 1 (IGF-1R)을 억제할 수 있고, IGF-1R 매개 질환의 치료에 유용할 수 있다. IGF-1R 매개 질환의 예로는, 증식성 질환, 예컨대 종양, 예를 들어 유방, 신장, 전립선, 직장결장, 갑상선, 난소, 췌장, 신경세포, 폐, 자궁 및 위장 종양, 뿐만 아니라 골육종 및 흑색종이 포함되나, 이에 제한되지는 않는다. 본 발명의 화합물의 IGF-1R 티로신 키나제 활성 억제제로서의 효능은 세포 포획 ELISA를 이용하여 입증할 수 있다. 이 분석법에서는, IGF-1R의 (IGF-1)-유도된 자가인산화에 대한 본 발명의 화합물의 활성이 측정된다.

본 발명의 화합물은 또한, 급성 또는 만성 염증성 질환 또는 장애, 또는 자가면역 질환, 예를 들어 류마티스 관절염, 골관절염, 전신 홍반 루푸스, 하시모토(Hashimoto) 갑상선염, 다발성 경화증, 중증근무력증, 당뇨병 (I형 및 II형) 및 이와 관련된 장애, 호흡기 질환, 예컨대 천식 또는 염증성 간 손상, 염증성 사구체 손상, 면역 매개 장애 또는 질병의 피부 증상, 염증성 및 과다증식성 피부병 (예컨대, 건선, 아토피 피부염, 알레르기성 접촉 피부염, 자극성 접촉 피부염 및 추가의 습진성 피부염, 지루성 피부염), s 염증성 눈 장애, 예를 들어 쇼그렌 증후군(Sjoegren's syndrome), 각결막염 또는 포도막염, 염증성 장 질환, 크론병(Crohn's disease) 또는 궤양성 대장염의 치료 및/또는 예방에 유용할 수 있다.

상기 내용에 따르면, 본 발명은,

(1) 약제로서 사용하기 위한 본 발명의 화합물;

(2) ALK 억제제, FAK 억제제, ZAP-70 억제제 및/또는 IGF-1R 억제제로서 사용하기 위한, 예를 들어 상기에 기재된 특정 징후 중 임의의 것에 사용하기 위한 본 발명의 화합물;

(3) 예를 들어 상기에 기재된 징후 중 임의의 것에 사용하기 위한, 1종 이상의 제약상 허용되는 희석제 또는 담체와 함께 활성 성분으로서의 본 발명의 화합물을 포함하는 제약 조성물;

(4) 유효량의 본 발명의 화합물 또는 이를 포함하는 제약 조성물을 투여하는 것을 포함하는, 상기에 기재된 임의의 특정 징후의 치료를 필요로 하는 대상체에서의 상기 징후의 치료 방법;

(5) 본 발명의 화합물의, ALK, FAK, ZAP-70 및/또는 IGF-1R 활성화가 역할을 하거나 관여되는 질환 또는 병태의 치료 또는 예방을 위한 의약 제조에서의 용도;

(6) 치료 유효량의 본 발명의 화합물 및 상기에 기재된 특정 징후 중 임의의 것에 유용한 1종 이상의 추가의 약물 물질을, 예를 들어 동시에 또는 순차적으로 병용 투여하는 것을 포함하는, 상기 (4)에 정의된 바와 같은 방법;

(7) 치료 유효량의 본 발명의 화합물 및 상기에 기재된 특정 징후 중 임의의 것에 유용한 1종 이상의 추가의 약물 물질을 포함하는 조합물;

(8) 본 발명의 화합물의, 역형성 림프종 키나제의 억제에 반응하는 질환의 치료 또는 예방을 위한 의약 제조에서의 용도;

(9) 치료되는 질환이 역형성 대세포 림프종, 비-호지킨 림프종, 염증성 근육섬유모세포 종양, 신경모세포종 및 종양성 질환으로부터 선택되는, (8)에 따른 용도;

(10) 화합물이 임의의 하나의 예시 화합물의 제약상 허용되는 염인, (8) 또는 (9)에 따른 용도;

(11) 유효량의 본 발명의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 투여하는 것을 포함하는, 역형성 림프종 키나제의 억제에 반응하는 질환, 특히 역형성 대세포 림프종, 비-호지킨 림프종, 염증성 근육섬유모세포 종양, 신경모세포종 및 종양성 질환으로부터 선택된 질환의 치료 방법

을 제공한다.

투여 및 제약 조성물

일반적으로, 본 발명의 화합물은 당업계에 공지된 임의의 통상적인 허용가능한 방식으로 단독으로 또는 1종 이상의 치료제와 조합하여 치료 유효량으로 투여된다. 치료 유효량은 질환의 중증도, 대상체의 연령 및 상대적인 건강상태, 사용되는 화합물의 효능 및 당업자에게 공지된 기타 요인에 따라 폭넓게 달라질 수 있다. 예를 들어, 종양성 질환 및 면역계 장애의 치료에서, 요구되는 투여량은 또한 투여 방식, 치료되는 특정 질환 및 요망되는 효과에 따라 달라진다.

일반적으로, 만족스런 결과는 전신에서 체중 1 kg 당 약 0.01 내지 약 100 mg, 또는 특히 체중 1 kg 당 약 0.03 내지 2.5 mg의 1일 투여량에서 얻어지는 것으로 나타난다. 대형 포유동물, 예를 들어 인간에서 권고되는 1일 투여량은 약 0.5 mg 내지 약 2000 mg, 또는 보다 특별하게는 약 0.5 mg 내지 약 100 mg 범위로, 예를 들어 1일 4회까지 분할 투여로 또는 지연 형태로 편리하게 투여될 수 있다. 경구 투여에 적합한 단위 제형은 약 1 내지 50 mg의 활성 성분을 포함한다.

본 발명의 화합물은 임의의 통상의 방식으로; 예를 들어 소화관내로, 예를 들어 경구로, 예를 들어 정제 또는 캡슐 형태로; 비경구로, 예를 들어 주사용 용액 또는 현탁액 형태로; 또는 국소적으로, 예를 들어, 로션, 겔, 연고 또는 크림 형태로, 또는 비내로 또는 좌약 형태로 제약 조성물로서 투여될 수 있다.

1종 이상의 제약상 허용되는 담체 또는 희석제와 함께, 유리 형태 또는 제약상 허용되는 염 형태의 본 발명의 화합물을 포함하는 제약 조성물은, 혼합, 과립화, 코팅, 용해 또는 동결건조 방법에 의해 통상의 방식으로 제조할 수 있다. 예를 들어, 1종 이상의 제약상 허용되는 담체 또는 희석제와 함께 본 발명의 화합물을 포함하는 제약 조성물은, 제약상 허용되는 담체 또는 희석제와의 혼합에 의해 통상의 방식으로 제조할 수 있다. 경구 투여를 위한 단위 제형은, 예를 들어 약 0.1 mg 내지 약 500 mg의 활성 물질을 함유한다.

일 실시양태에서, 제약 조성물은 현탁액 또는 분산액을 비롯한 활성 성분의 용액, 예컨대 등장성 수용액이다. 활성 성분을 단독으로 또는 만니톨 등의 담체와 함께 포함하는 동결건조된 조성물의 경우, 사용 전에 분산액 또는 현탁액을 구성할 수 있다. 제약 조성물은 멸균되고/거나 보조제, 예컨대 보존제, 안정화제, 습윤제 또는 유화제, 가용화 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/또는 완충제를 함유할 수 있다. 적합한 보존제로는, 산화방지제, 예컨대 아스코르브산, 또는 살균제, 예컨대 소르브산 또는 벤조산이 포함되나, 이에 제한되지는 않는다. 용액 또는 현탁액은 나트륨 카르복시메틸셀룰로스, 카르복시메틸셀룰로스, 덱스트란, 폴리비닐피롤리돈, 젤라틴을 포함하나 이에 제한되지는 않는 점도 증가제, 또는 가용화제, 예를 들어 트윈(Tween) 80 (폴리옥시에틸렌(20)소르비탄 모노올레에이트)을 추가로 포함할 수 있다.

오일 중의 현탁액은 오일 성분으로서 주사 목적으로 통상적인 식물성유, 합성유 또는 반-합성유를 포함할 수 있다. 그 예로는, 산 성분으로서 8개 내지 22개, 일부 실시양태에서는 12개 내지 22개의 탄소 원자를 갖는 장쇄 지방산을 함유하는 액체 지방산 에스테르가 포함된다. 적합한 액체 지방산 에스테르로는, 라우르산, 트리데실산, 미리스트산, 펜타데실산, 팔미트산, 마르가르산, 스테아르산, 아라키드산, 베헨산 또는 상응하는 불포화산, 예를 들어 올레산, 엘라이드산, 에루스산, 브라시드산 및 리놀레산이 포함되나, 이에 제한되지는 않고, 또한 필요한 경우 산화방지제, 예를 들어 비타민 E, 3-카로틴 또는 3,5-디-tert-부틸-히드록시톨루엔을 함유할 수 있다. 이들 지방산 에스테르의 알콜 성분은 6개의 탄소 원자를 가질 수 있고, 1가 또는 다가, 예를 들어 1가, 2가 또는 3가 알콜일 수 있다. 적합한 알콜 성분으로는, 메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 또는 펜탄올 또는 이들의 이성질체; 글리콜 및 글리세롤이 포함되나, 이에 제한되지는 않는다.

다른 적합한 지방산 에스테르로는, 에틸-올레에이트, 이소프로필 미리스테이트, 이소프로필 팔미테이트, 라브라필(LABRAFIL)(등록상표) M 2375 (폴리옥시에틸렌 글리세롤), 라브라필(등록상표) M 1944 CS (글리세리드 및 폴리에틸렌 글리콜 에스테르를 포함하는, 살구씨 오일의 가알콜분해에 의해 제조된 불포화 폴리글리콜화(polyglycolized) 글리세리드), 라브라솔(LABRASOL)^TM (글리세리드 및 폴리에틸렌 글리콜 에스테르를 포함하는, TCM의 가알콜분해에 의해 제조된 포화 폴리글리콜화 글리세리드; 모두 가케포세(GaKefosse, 프랑스 소재)로부터 입수가능함), 및/또는 미글리올(MIGLYOL)(등록상표) 812 (휠스 아게(Huels AG, 독일 소재)로부터의, C₈ 내지 C₁₂의 쇄 길이를 갖는 포화 지방산의 트리글리세리드), 및 식물성유, 예컨대 면실유, 아몬드유, 올리브유, 피마자유, 참깨유, 대두유 또는 땅콩유가 포함되나, 이에 제한되지는 않는다.

경구 투여용 제약 조성물은, 예를 들어 활성 성분을 1종 이상의 고체 담체와 조합하고, 필요한 경우 생성된 혼합물을 과립화하고, 혼합물 또는 과립을 추가의 부형제 혼입에 의해 처리하여 정제 또는 정제 코어를 형성함으로써 얻어질 수 있다.

적합한 담체로는, 충전제, 예컨대 당, 예를 들어 락토스, 사카로스, 만니톨 또는 소르비톨, 셀룰로스 제제, 및/또는 인산칼슘, 예를 들어 인산삼칼슘 또는 인산수소칼슘, 또한 결합제, 예컨대 전분, 예를 들어 옥수수, 밀, 쌀 또는 감자 전분, 메틸셀룰로스, 히드록시프로필 메틸셀룰로스, 나트륨 카르복시메틸셀룰로스, 및/또는 폴리비닐피롤리돈, 및/또는 필요한 경우 붕해제, 예컨대 상기한 전분, 카르복시메틸 전분, 가교 폴리비닐피롤리돈, 알긴산 또는 그의 염, 예컨대 알킨산나트륨이 포함되나, 이에 제한되지는 않는다. 추가의 부형제로는, 유동 조절제 및 윤활제, 예를 들어 규산, 활석, 스테아르산 또는 그의 염, 예컨대 스테아르산마그네슘 또는 스테아르산칼슘, 및/또는 폴리에틸렌 글리콜, 또는 그의 유도체가 포함된다.

정제 코어는, 특히, 검(gum arable), 활석, 폴리비닐피롤리돈, 폴리에틸렌 글리콜 및/또는 이산화티타늄을 포함할 수 있는 농축 당 용액, 또는 적합한 유기 용매 또는 용매 혼합물 중의 코팅 용액, 또는 장용 코팅 제제의 경우, 적합한 셀룰로스 제제, 예컨대 아세틸셀룰로스 프탈레이트 또는 히드록시프로필메틸셀룰로스 프탈레이트의 용액의 사용에 의한 적합한 (임의로는 장용) 코팅과 함께 제공될 수 있다. 예를 들어 확인 목적을 위해, 또는 상이한 투여량의 활성 성분의 지시를 위해 염료 또는 안료를 정제 또는 정제 코팅에 첨가할 수 있다.

경구 투여용 제약 조성물은 또한, 젤라틴을 포함하는 경질 캡슐 또는 젤라틴 및 가소제, 예컨대 글리세롤 또는 소르비톨을 포함하는 연질 밀봉 캡슐을 포함할 수 있다. 경질 캡슐은 활성 성분을 과립 형태로, 예를 들어 충전제, 예컨대 옥수수 전분, 결합제, 및/또는 유동화제(glidant), 예컨대 활석 또는 스테아르산마그네슘, 또한 임의로는 안정화제와 부가혼합하여 함유할 수 있다. 연질 캡슐에서, 활성 성분은 적합한 액체 부형제, 예컨대 지방 오일, 파라핀유 또는 액체 폴리에틸렌 글리콜 또는 에틸렌 또는 프로필렌 글리콜의 지방산 에스테르 중에 용해되거나 현탁될 수 있고, 여기에 안정화제 및 계면활성제 (예를 들어 폴리옥시에틸렌 소르비탄 지방산 에스테르류)가 첨가될 수도 있다.

직장 투여에 적합한 제약 조성물은, 예를 들어 활성 성분과 좌약 기제의 조합을 포함하는 좌약이다. 적합한 좌약 기제는, 예를 들어, 천연 또는 합성 트리글리세리드, 파라핀 탄화수소, 폴리에틸렌 글리콜 또는 고급 알칸올이다.

비경구 투여에 적합한 제약 조성물은, 수용성 형태, 예를 들어 수용성 염의 활성 성분의 수용액, 또는 점도 증가 물질, 예를 들어 나트륨 카르복시메틸셀룰로스, 소르비톨 및/또는 덱스트란, 또한 필요한 경우 안정화제를 함유하는 수성 주사용 현탁액을 포함할 수 있다. 활성 성분은, 임의로는 부형제와 함께, 동결건조물 형태로 존재할 수 있고, 이는 적합한 용매 첨가에 의해 비경구 투여 전에 용액으로 제조될 수 있다. 이와 같이, 예를 들어 비경구 투여를 위해 사용되는 용액은, 주입 용액으로서 사용될 수도 있다. 주사용 제제의 제조는 통상적으로, 예를 들어 앰풀 또는 바이알로의 충전 및 용기의 밀봉과 마찬가지로 멸균 조건 하에 수행된다.

본 발명의 화합물은 단독 활성 성분으로서, 또는 종양성 질환에 대해 유용한 또는 면역조절 요법에 유용한 기타 약물과 함께 투여할 수 있다. 예를 들어, 본 발명의 화합물은 상기한 바와 같은 다양한 질환에 있어 효과적인 제약 조성물과, 예를 들어 시클로포스파미드, 5-플루오로우라실, 플루다라빈, 젬시타빈, 시스플라티눔, 카르보플라틴, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 에토포시드, 이리노테칸, 파클리탁셀, 도세탁셀, 리툭산, 독소루비신, 제피티닙, 또는 이마티닙과; 또는 또한 시클로스포린, 라파마이신, 아스코마이신 또는 이들의 면역억제 유사물질, 예를 들어 시클로스포린 A, 시클로스포린 G, FK-506, 시롤리무스 또는 에베롤리무스, 코르티코스테로이드, 예를 들어 프레드니손, 시클로포스파미드, 아자티오프렌, 메토트렉세이트, 금 염, 술파살라진, 항말라리아제, 브레퀴나르, 레플루노미드, 미조리빈, 미코페놀산, 미코페놀레이트, 모페틸, 15-데옥시스페르구알린, 면역억제 단일클론 항체, 예를 들어 백혈구 수용체, 예를 들어 MHC, CD2, CD3, CD4, CD7, CD25, CD28, I CD40, CD45, CD58, CD80, CD86, CD152, CD137, CD154, ICOS, LFA-1, VLA-4 또는 이들의 리간드에 대한 단일클론 항체, 또는 기타 면역조절 화합물, 예를 들어 CTLA41g와 조합하여 본 발명에 따라 사용될 수 있다.

본 발명은 또한, a) 유리 형태 또는 제약상 허용되는 염 형태의, 본원에 개시된 바와 같은 본 발명의 화합물인 제1 제제, 및 b) 1종 이상의 조제를 포함하는 제약 조합물, 예를 들어 키트를 제공한다. 키트는 그의 투여를 위한 지시서를 포함할 수 있다.

본 발명의 화합물의 제조 방법

본 발명의 화합물의 일반 제조 절차가 하기 실시예에 기재되어 있다. 기재된 반응에서, 반응성 관능기, 예를 들어, 히드록시, 아미노, 이미노, 티오 또는 카르복시기가 최종 생성물에 필요한 경우, 이들의 원치않는 반응참여를 피하기 위해 이들을 보호화할 수 있다. 통상의 보호기가 표준 실무에 따라 사용될 수 있다(예컨대, 문헌 [T.W. Greene and P. G. M. Wuts in "Protective Groups in Organic Chemistry", John Wiley and Sons, 1991] 참조).

일부 실시예에서, 화학식 1의 화합물은 하기 반응식 1에 기재된 합성 절차를 따라 제조될 수 있다.

화학식 6의 화합물은 또한 반응식 2에 기술된 합성 절차를 따라 제조될 수 있다.

본 발명의 화합물 (이들의 염 포함)은 또한 수화물 형태로 수득가능하거나, 또는 이들의 결정은 예를 들어 결정화에 사용된 용매를 포함할 수 있다 (용매화물로서 존재함). 염은 통상적으로, 적합한 염기성 제제, 예를 들어 알칼리 금속 탄산염, 알칼리 금속 탄산수소염, 또는 알칼리 금속 수산화물, 예컨대 탄산칼륨 또는 수산화나트륨으로 처리함으로써 유리 형태의 화합물로 전환될 수 있다. 염기 부가염 형태의 본 발명의 화합물은 적합한 산 (예를 들어, 염산, 등)으로 처리함으로써 상응하는 유리 산으로 전환될 수 있다. 유리 형태의 신규 화합물과 이들의 염 (예를 들어 신규 화합물의 정제 또는 확인에서 중간체로서 사용될 수 있는 염 포함) 형태의 신규 화합물 사이의 밀접한 관련성을 고려하여, 임의의 유리 화합물에 대한 언급은, 또한 적절한 경우 상응하는 염에 대한 언급으로서 이해되어야 한다.

염 형성 기를 갖는 본 발명의 화합물의 염은 자체 공지된 방식으로 제조할 수 있다. 따라서, 화학식 1, 2, 2A, 3A, 3B, 3C, 3D, 4 또는 5의 화합물의 산 부가염은 산 또는 적합한 음이온 교환 시약으로 처리함으로써 얻어질 수 있다. 본 발명의 화합물의 제약상 허용되는 염은, 예를 들어, 염기성 질소 원자를 갖는 화학식 1, 2, 2A, 3A, 3B, 3C, 3D, 4 또는 5의 화합물로부터 유기 또는 무기산과의 산 부가염으로서 형성될 수 있다.

적합한 무기산으로는, 할로겐산, 예컨대 염산, 황산 또는 인산이 포함되나, 이에 제한되지는 않는다. 적합한 유기산으로는, 카르복실산, 인산, 술폰산 또는 술팜산, 예를 들어 아세트산, 프로피온산, 옥탄산, 데칸산, 도데칸산, 글리콜산, 락트산, 푸마르산, 숙신산, 아디프산, 피멜산, 수베르산, 아젤라산, 말산, 타르타르산, 시트르산, 아미노산, 예컨대 글루탐산 또는 아스파르트산, 말레산, 히드록시말레산, 메틸말레산, 시클로헥산카르복실산, 아다만탄카르복실산, 벤조산, 살리실산, 4-아미노살리실산, 프탈산, 페닐아세트산, 만델산, 신남산, 메탄- 또는 에탄-술폰산, 2-히드록시에탄술폰산, 에탄-1,2-디술폰산, 벤젠술폰산, 2-나프탈렌술폰산, 1,5-나프탈렌-디술폰산, 2-, 3- 또는 4-메틸벤젠술폰산, 메틸황산, 에틸황산, 도데실황산, N-시클로헥실술팜산, N-메틸-, N-에틸- 또는 N-프로필-술팜산, 또는 기타 유기 양성자성 산, 예컨대 아스코르브산이 포함되나, 이에 제한되지는 않는다. 단리 또는 정제를 위해, 제약상 허용되지 않는 염, 예를 들어 피크레이트 또는 퍼클로레이트를 사용할 수도 있다. 치료 용도를 위해서는, 단지 제약상 허용되는 염 또는 유리 화합물을 사용한다 (제약 제제 형태로 적용가능한 경우).

비-산화된 형태의 본 발명의 화합물은, 0 내지 80℃에서 적합한 불활성 유기 용매 (예를 들어 아세토니트릴, 에탄올, 수성 디옥산 등) 중에서 환원제 (예를 들어, 황, 이산화황, 트리페닐 포스핀, 수소화붕소리튬, 수소화붕소나트륨, 삼염화인, 삼브롬화인 등)로 처리함으로써 본 발명의 화합물의 N-옥사이드로부터 제조할 수 있다.

본 발명의 화합물의 전구약물 유도체는 당업자에게 공지된 방법에 의해 제조할 수 있다 (예를 들어, 추가의 상세한 설명은 문헌 [Saulnier et al., (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, p. 1985] 참조). 예를 들어, 적절한 전구약물은 비-유도체화된 본 발명의 화합물을 적합한 카르바밀화제 (예를 들어, 1,1-아실옥시알킬카르바노클로리데이트, 파라-니트로페닐 카르보네이트 등)와 반응시킴으로써 제조할 수 있다.

본 발명의 화합물의 보호된 유도체는 당업자에게 공지된 수단에 의해 제조할 수 있다. 보호기의 생성 및 그의 제거에 적용가능한 기술에 대한 상세한 설명은 문헌 [T. W. Greene, "Protecting Groups in Organic Chemistry", 3^rd edition, John Wiley and Sons, Inc., 1999]에서 찾아볼 수 있다.

본 발명의 화합물은, 화합물의 라세미 혼합물을 광학 활성 분리제와 반응시켜 한 쌍의 부분입체이성질체 화합물을 형성하고, 부분입체이성질체를 분리하고, 광학적으로 순수한 거울상이성질체를 회수함으로써 이들의 개별 입체이성질체로서 제조할 수 있다. 거울상이성질체의 분리는, 본 발명의 화합물의 공유결합 부분입체이성질체 유도체를 사용하여, 또는 해리성 착물 (예를 들어, 결정성 부분입체이성질체 염)을 사용하여 수행할 수 있다. 부분입체이성질체는 독특한 물성 (예를 들어, 융점, 비점, 용해도, 반응성 등)을 갖고, 이는 이들 차이점을 이용하여 용이하게 분리할 수 있다. 부분입체이성질체는 분별 결정, 크로마토그래피, 또는 용해도 차이에 기초한 분리/분해 기술에 의해 분리할 수 있다. 따라서, 광학적으로 순수한 거울상이성질체는, 라세미화를 일으키지 않는 임의의 관용적 수단에 의해, 분리제와 함께 회수된다. 화합물의 입체이성질체를 그의 라세미 혼합물로부터 분리하는 데 적용가능한 기술에 대한 추가의 상세한 설명은 문헌 [Jean Jacques, Andre Collet, Samuel H. Wilen, "Enantiomers, Racemates and Resolutions", John Wiley And Sons, Inc., 1981]에서 찾아볼 수 있다.

요약하면, 본 발명의 화합물은, 실시예에서 기재된 방법; 및

(a) 임의로는 본 발명의 화합물에서 제약상 허용되는 염으로의 전환;

(b) 임의로는 본 발명의 화합물의 염 형태에서 비-염 형태로의 전환;

(c) 임의로는 본 발명의 화합물의 비-산화된 형태에서 제약상 허용되는 N-옥사이드로의 전환;

(d) 임의로는 본 발명의 화합물의 N-옥사이드 형태에서 그의 비-산화된 형태로의 전환;

(e) 임의로는 본 발명의 화합물의 이성질체 혼합물로부터의 그의 개별 이성질체의 분리;

(f) 임의로는 비-유도체화된 본 발명의 화합물에서 제약상 허용되는 전구약물 유도체로의 전환; 및

(g) 임의로는 본 발명의 화합물의 전구약물 유도체에서 그의 비-유도체화된 형태로의 전환

을 포함하는 방법에 의해 제조할 수 있다.

출발 물질의 제조가 특별히 기재되지 않는 한, 화합물은 공지된 것이고, 이는 당업계에 공지된 방법과 유사하게 또는 하기 실시예에 개시된 바와 같이 제조할 수 있다. 당업자는 상기 전환이 단지 본 발명의 화합물의 제조 방법을 대표하는 것이고, 다른 익히 공지된 방법을 유사하게 이용할 수 있음을 인지할 것이다. 본 발명은 본 발명의 화합물의 제조를 예시하는 하기 기재 및 실시예에 의해 추가로 예시되지만, 이에 제한되는 것은 아니다.

중간체의 제조

중간체 1

2,4,6-트리클로로피리미딘-5-카르브알데히드

바르비투르산 (5.0 g, 39.1 mmol)을, POCl₃ (23.5 ㎖, 252 mmol)과 DMF (3 ㎖, 38.8 mmol)의 교반된 용액에 실온에서 질소 대기 하에 첨가하였다. 혼합물을 15시간 동안 환류시키고, 이어서 실온으로 냉각되도록 하였다. 잉여량의 POCl₃을 진공에서 제거하고, 생성된 점성의 물질을 분쇄된 얼음 (150 g) 위에 조심스럽게 부었다. 담갈색 침전물을 여과하고, 진공 하에 건조시켜, 2,4,6-트리클로로피리미딘-5-카르브알데히드를 수득하였다.

중간체 2

2,4-디클로로-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-카르브알데히드

DCM (50 ㎖) 중 2,4,6-트리클로로피리미딘-5-카르브알데히드 (5.0 g, 23.8 mmol)의 교반된 용액에, 2-(이소프로필술포닐)아닐린 (9.5 g, 47.6 mmol)을 0℃에서 질소 대기 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 점차 가온하고, 밤새 교반하였다. 고체를 여과하여 제거하고, 여액을 진공에서 농축하고, 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 (DCM/EtOAC/헥산 : 15/15/70), 2,4-디클로로-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-카르브알데히드를 수득하였다. MS (ES+): 374.0 (MH+).

중간체 3

1-(2,4-디클로로-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-일)에탄올

THF (10 ㎖) 중 2,4-디클로로-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-카르브알데히드 (797 mg, 2.14 mmol)의 용액에, 메틸 마그네슘 브로마이드 (디에틸 에테르 중 3.0 M, 6.4 ㎖, 19.3 mmol)를 -78℃에서 질소 대기 하에 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 점차 가온하고, 밤새 교반하였다. 0℃에서 반응 혼합물을 20 ㎖의 포화 수성 NH₄Cl에 붓고, EtOAc (30 ㎖ x 2)와 염수 (10 ㎖ x 2) 사이에 분배시켰다. 수집된 유기 추출물을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축하고, 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 (EtOAc/헥산: 30/70), 1-(2,4-디클로로-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-일)에탄올을 수득하였다. MS (ES+): 390.0 (MH+).

중간체 4

1-(2,4-디클로로-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-일)에탄온

DCM (30 ㎖) 중 1-(2,4-디클로로-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-일)에탄올 (580 mg, 1.49 mmol)의 용액에 PDC (561 mg, 1.49 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 실리카 겔 패드를 통해 여과하고, 패드를 1 ℓ의 DCM으로 세척하였다. 여액을 진공에서 농축하여, 1-(2,4-디클로로-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-일)에탄온을 담황색 고체로서 수득하였다. MS (ES+): 388.0 (MH+).

중간체 5

Tert-부틸 4-(4-(5-아세틸-4-클로로-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-2-일아미노)-5-이소프로폭시-2-메틸페닐)피페리딘-1-카르복실레이트

EtOH (2 ㎖) 중 1-(2,4-디클로로-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-일)에탄온 (113 mg, 0.29 mmol)의 용액에 tert-부틸-4-(4-아미노-5-이소프로폭시-2-메틸페닐)피페리딘-1-카르복실레이트 (203 mg, 0.58 mmol)를 첨가하고, 반응 혼합물을 130℃에서 30분간 가열하였다. 반응물을 진공에서 농축하고, 이어서 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 (EtOAC / 헥산: 3 / 7), Tert-부틸 4-(4-(5-아세틸-4-클로로-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-2-일아미노)-5-이소프로폭시-2-메틸페닐)피페리딘-1-카르복실레이트를 수득하였다. MS (ES+): 700.3 (MH+).

최종 화합물의 제조

실시예 1

1-(4-(4-(5-클로로-4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-2-일아미노)-5-이소프로폭시-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)-2-(디메틸아미노)에탄온 (1)

4-(5-이소프로폭시-2-메틸-4-니트로-페닐)-피리딘

4-피리딘보론산 (147 mg, 1.20 mmol, 1.1 당량)을 디옥산과 H₂O의 2:1 용적/용적 혼합물 (15 ㎖)에 용해시키고, N₂로 5분간 버블링시켰다. 트리스(디벤질리덴 아세톤)디팔라듐 (0) (100 mg, 0.109 mmol, 0.1 당량), 2-디시클로헥실포스핀-2'-6'-디메톡시 비페닐 (112 mg, 0.272 mmol, 0.25 당량), 1-클로로-5-이소프로폭시-2-메틸-4-니트로-벤젠 (250 mg, 1.09 mmol, 1.0 당량) 및 K₃PO₄ (462 mg, 2.18 mmol, 2.0 당량)를 N₂ 블랭킷 하에 첨가하였다. 반응 용기를 밀봉하고, 마이크로파를 조사하여 150℃로 20분간 가열하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 1 N 수성 NaOH로 2회 세척하였다. 이어서, 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하였다. 농축한 후, 조질의 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 (헥산 - 헥산 중 30％ 에틸 아세테이트 구배), 4-(5-이소프로폭시-2-메틸-4-니트로-페닐)-피리딘을 갈색 고체로서 수득하였다: ESMS m/z 273.1 (M + H⁺).

4-(4-아미노-5-이소프로폭시-2-메틸-페닐)-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르

아세트산 (30 ㎖)에 용해된 이전 단계로부터의 4-(5-이소프로폭시-2-메틸-4-니트로-페닐)-피리딘 (438 mg, 1.61 mmol)을, TFA (0.24 ㎖, 3.22 mmol) 및 PtO₂ (176 mg, 40 중량/중량％)로 처리하였다. 반응 혼합물을 1 기압 H₂ 하에서 36시간 동안 강하게 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 여액을 진공 하에 농축하였다. 생성된 잔류물을 에틸 아세테이트로 희석하고, 1 N 수성 NaOH로 2회 세척하였다. 이어서, 유기층을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 여과하였다. 농축한 후, 조질의 생성물 (391 mg)을 무수 CH₂Cl₂ (30 ㎖)에 용해시켰다. TEA (0.44 ㎖, 3.15, 2 당량), 이어서 Boc₂O (344 mg, 1.57 당량, 1 당량)를 첨가하였다. 반응물을 실온에서 30분간 교반하였다. 반응물을 진공 하에 농축하였다. 생성된 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 (헥산 - 헥산 중 30％ 에틸 아세테이트 구배), 4-(4-아미노-5-이소프로폭시-2-메틸-페닐)-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르를 점착성 포움으로서 수득하였다: ESMS m/z 293.1 (M-tBu+H)⁺.

단계 4 및 5: 이전 단계로부터의 4-(4-아미노-5-이소프로폭시-2-메틸-페닐)-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (170 mg, 0.488 mmol), (2,5-디클로로-피리미딘-4-일)-[2-(프로판-2-술포닐)-페닐]-아민 (169 mg, 0.488 mmol, 1 당량), 잔트포스(xantphos) (28 mg, 0.049 mmol, 0.1 당량), 팔라듐 아세테이트 (5.5 mg, 0.024 mmol, 0.05 당량) 및 Cs₂CO₃ (477 mg, 1.46 mmol, 3 당량)을 무수 THF (6 ㎖)에 용해시켰다. 반응 혼합물을 N₂로 5분간 버블링시키고, 반응 용기를 밀봉하고, 마이크로파를 조사하여 150℃로 20분간 가열하였다. 반응물을 여과하고, 여액을 진공 하에 농축하였다. 농축 후, 조질의 생성물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 (헥산 - 헥산 중 30％ 에틸 아세테이트 구배), 4-(4-{5-클로로-4-[2-(프로판-2-술포닐)-페닐아미노]-피리미딘-2-일아미노}-5-이소프로폭시-2-메틸-페닐)-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르를 황색 필름으로서 수득하였다: ESMS m/z 658.3 (M + H⁺). 상기 생성물 (105 mg, 0.160 mmol)을 CH₂Cl₂ (3 ㎖)에 용해시키고, TFA (3 ㎖)로 처리하였다. 45분 후, 반응물을 진공 하에 농축하였다. Et₂O 중 1 N HCl (5 ㎖ x 2)을 첨가하여, 생성물인 HCl 염을 침전시켰다. 용매를 데칸테이션하여 제거하였다. 생성된 5-클로로-N²-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-피페리딘-4-일-페닐)-N⁴-[2-(프로판-2-술포닐)-페닐]-피리미딘-2,4-디아민을 고진공 하에 건조시켜, 회백색 분말을 수득하였다.

1-(4-(4-(5-클로로-4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-2-일아미노)-5-이소프로폭시-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)-2-(디메틸아미노)에탄온

N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민을 5-클로로-N2-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)피리미딘-2,4-디아민으로 대체하여 상기 방법에 따라 제조하였다. 생성물을 수득하였다. MS (ES⁺): 643.28 (M+1)⁺.

실시예 2

(S)-(4-(4-(5-클로로-4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-2-일아미노)-5-이소프로폭시-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)(피롤리딘-2-일)메탄온 (7)

N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민을 5-클로로-N2-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)피리미딘-2,4-디아민으로 대체하고, 2-(디메틸아미노)아세틸 클로라이드 히드로클로라이드를 (S)-피롤리딘-2-카르보닐 클로라이드 히드로클로라이드로 대체하여 실시예 1의 방법에 따라 제조하였다. 생성물을 수득하였다. MS (ES⁺): 655.28 (M+1).

실시예 3

(S)-(4-(4-(5-클로로-4-(2-(디플루오로메틸술포닐)페닐아미노)피리미딘-2-일아미노)-5-이소프로폭시-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)(피롤리딘-2-일)메탄온 (8)

2,5-디클로로-N-(2-(디플루오로메틸술포닐)페닐)-피리미딘-4-아민

10 ㎖의 DMF 중 2,4,5-트리클로로피리미딘 (1 mmol)과 2-(디플루오로메틸술포닐)아닐린 (1 mmol)의 용액에, 나트륨 히드라이드 (2 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 그 후, 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 50℃에서 1시간 동안 교반하였다. 후처리 및 플래시 크로마토그래피 (CH₂Cl₂/MeOH 9:1) 한 후, 생성물을 수득하였다. MS (ES⁺): 353.96 (M+1)⁺.

5-클로로-N4-(2-(디플루오로메틸술포닐)페닐)-N2-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민

1 ㎖의 이소프로판올 중 2,5-디클로로-N-(2-(디플루오로메틸술포닐)페닐)-피리미딘-4-아민 (0.5 mmol)의 현탁액에, 2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)아닐린 (0.5 mmol) 및 4-메틸벤젠술폰산 (0.5 mmol)을 첨가하였다. 현탁액을 150℃에서 3시간 동안 교반하였다. 후처리 및 분취용(prep)-HPLC한 후, 생성물을 수득하였다. MS (ES⁺): 566.17 (M+1)⁺.

(S)-(4-(4-(5-클로로-4-(2-(디플루오로메틸술포닐)-페닐아미노)-피리미딘-2-일아미노)-5-이소프로폭시-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)(피롤리딘-2-일)메탄온

N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민을 5-클로로-N4-(2-(디플루오로메틸술포닐)페닐)-N2-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민으로 대체하고, 2-(디메틸아미노)아세틸 클로라이드 히드로클로라이드를 (S)-피롤리딘-2-카르보닐 클로라이드 히드로클로라이드로 대체하여 실시예 1의 방법에 따라 제조하고, 생성물을 수득하였다. MS (ES⁺): 663.23 (M+1)⁺.

1-(4-(4-(5-클로로-4-(2-(디플루오로메틸술포닐)페닐아미노)-피리미딘-2-일아미노)-5-이소프로폭시-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)-2-(디메틸아미노)에탄온

N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민을 5-클로로-N4-(2-(디플루오로메틸술포닐)페닐)-N2-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)피리미딘-2,4-디아민으로 대체하여 실시예 1의 방법에 따라 제조하고, 생성물을 수득하였다. MS (ES⁺): 651.23 (M+1)⁺.

실시예 4

6-(5-클로로-4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-2-일아미노)-2-(1-(2-(디메틸아미노)아세틸)피페리딘-4-일)-5-이소프로폭시이소인돌린-1-온 (9)

2-클로로-4-이소프로폭시-5-니트로-벤조산:

2-프로판올 (100 ㎖) 중 2-클로로-4-플루오로-5-니트로-벤조산 (5.0 g, 22.8 mmol)과 세슘 카르보네이트 (29.7 g, 91.1 mmol)의 혼합물을 50℃에서 밤새 가열하였다. 용매를 진공에서 제거하고, 100 ㎖의 물을 첨가하였다. 0℃에서 농축 수성 HCl을 pH가 2가 될 때까지 상기 용액에 적가하였다. 형성된 침전 생성물을 여과하여 단리하고, 물로 세척하고, 진공 하에 건조시켜, 2-클로로-4-이소프로폭시-5-니트로-벤조산을 수득하였다.

4-(2-클로로-4-이소프로폭시-5-니트로-벤조일아미노)-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르

DCM (200 ㎖)과 DMF (1 ㎖) 중 2-클로로-4-이소프로폭시-5-니트로-벤조산 (10 g, 38.5 mmol)의 용액에, 티오닐 클로라이드 (9.17 g, 77 mmol)를 주사기를 통해 서서히 첨가하였다. 혼합물을 3시간 동안 교반하고, 농축 건조시켰다. 얻은 백색 고체인 2-클로로-4-이소프로폭시-5-니트로-벤조일 클로라이드를 진공 하에 건조시켰다. DCM (100 ㎖) 중 4-아미노-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (1.44 g, 7.2 mmol)와 트리에틸아민 (3 ㎖, 21.6 mmol)의 혼합물에, DCM (10 ㎖)에 용해된 2-클로로-4-이소프로폭시-5-니트로-벤조일 클로라이드 (2 g, 7.2 mmol)를 주사기를 통해 서서히 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 3시간 동안 교반하고, 농축하였다. 얻은 고체를 에틸 아세테이트에 용해시키고, 물 및 염수로 각각 세척하였다. 용매를 증발시킨 후, 표제 화합물을 연황색 고체로서 수득하였고, 이를 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다.

4-(4-이소프로폭시-5-니트로-2-비닐-벤조일아미노)-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르

THF/H₂O (100/25 ㎖) 중 이전 단계에서 얻은 4-(2-클로로-4-이소프로폭시-5-니트로-벤조일아미노)-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (7.2 mmol), 비닐보론산 디부틸 에스테르 (1.72 g, 9.4 mmol) 및 탄산나트륨 (5.34 g, 50.4 mmol)의 혼합물에, 디클로로비스(트리페닐포스핀) 팔라듐 (II) (442 mg, 5％ mmol)을 첨가하였다. 혼합물을 N₂로 3분간 퍼징하고, 콘덴서를 구비한 둥근 바닥 플라스크에서 N₂ 하에 90℃에서 밤새 가열하였다. 혼합물을 실온으로 냉각하고, 포화 수성 염화암모니아 용액에 부었다. 혼합물을 에틸 아세테이트 (100 ㎖)로 3회 추출하였다. 유기 추출물을 합하고, 염수로 세척하고, 농축하였다. 조질의 생성물을 실리카 겔 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (헥산 중 40％ 에틸 아세테이트), 4-(4-이소프로폭시-5-니트로-2-비닐-벤조일아미노)-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르를 백색 고체로서 수득하였다.

4-(5-이소프로폭시-6-니트로-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일)-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르

이전 단계로부터 얻은 4-(4-이소프로폭시-5-니트로-2-비닐-벤조일아미노)-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (1.9 g, 4.38 mmol)를 DCM (100 ㎖)에 용해시키고, -78℃로 냉각하였다. O₃ (기체)을 용액의 색이 청/회색으로 변할 때까지 용액 내로 버블링하였다. 이어서, 용액을 N₂ (기체)로 청색이 사라질 때까지 퍼징하였다. 용액을 실온으로 가온하고, DCM (100 ㎖) 중에서 미리 팽창시킨 트리페닐 포스핀 수지 (5 g)로 처리하였다. 30분 후, 혼합물을 여과하고, 여액을 농축하고, 생성된 잔류물을 DCM/TFA (100 ㎖ / 25 ㎖)에 용해시켰다. 상기 혼합물에 트리에틸 실란 (4.6 ㎖, 17.5 mmol)을 첨가하였다. 생성된 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 반응 혼합물을 농축하고, DCM에 재용해시키고, DCM 용액을 1 N 수성 HCl (20 ㎖)로 3회 세척하였다. 합한 수성 층을 pH =12가 될 때까지 농축 수성 NaOH로 처리하였다. 수성 층을 에틸 아세테이트 (30 ㎖)로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 유기 용매를 증발시킨 후, 연황색 고체를 얻었다.

고체를 메탄올과 트리에틸아민의 혼합물 (100 ㎖, 9:1 (용적/용적))에 용해시켰다. 상기 혼합물에 디-tert-부틸 디카르보네이트 (680 mg, 3.1 mmol)를 첨가하였다. 50℃에서 30분간 교반한 후, 혼합물을 농축하고, 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (용리액: 헥산 중 40~50％ 에틸 아세테이트), 4-(5-이소프로폭시-6-니트로-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일)-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르를 백색 고체로서 수득하였다.

6-(5-클로로-4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)-피리미딘-2-일아미노)-5-이소프로폭시-2-(피페리딘-4-일)이소인돌린-1-온

메탄올 중 이전 단계로부터의 4-(5-이소프로폭시-6-니트로-1-옥소-1,3-디히드로-이소인돌-2-일)-피페리딘-1-카르복실산 tert-부틸 에스테르 (850 mg, 2 mmol)의 용액에 Pd/C (탄소 상 10％, 100 mg)를 첨가하였다. 혼합물을 1 기압의 수소 기체 하에서 수소화시켰다. 4시간 후, 혼합물을 여과하고, 농축하였다. 황색 고체로서 얻은 아닐린을 추가의 정제 없이 다음 단계에 사용하였다. THF (20 ㎖) 중 이전 단계로부터의 조질의 생성물 (2 mmol), (2,5-디클로로-피리미딘-4-일)-[2-(프로판-2-술포닐)-페닐]-아민 (770 mg, 2.2 mmol), 세슘 카르보네이트 (1.3 g, 4 mmol)와 잔트포스 (115 mg, 0.2 mmol)의 혼합물에, 팔라듐 아세테이트 (22 mg, 5％ mmol)를 마이크로파 튜브에서 첨가하였다. 혼합물을 N₂로 3분간 퍼징하였다. 밀봉된 튜브를 마이크로파 조사 하에 150℃에서 20분간 가열하였다. 혼합물을 냉각하고, 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 실리카 겔 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여 (용리액: 헥산 중 65％ 에틸 아세테이트), 황색 고체를 얻었다. 고체를 DCM/TFA (1/1, 10 ㎖)로 1시간 동안 처리하고, 이어서 진공 하에 농축하였다. 분취용 RP LC-MS를 이용하여 최종적으로 정제하여, 6-{5-클로로-4-[2-(프로판-2-술포닐)-페닐아미노]-피리미딘-2-일아미노}-5-이소프로폭시-2-피페리딘-4-일-2,3-디히드로-이소인돌-1-온을 백색 고체로서 수득하였다.

6-(5-클로로-4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-2-일아미노)-2-(1-(2-(디메틸아미노)아세틸)피페리딘-4-일)-5-이소프로폭시이소인돌린-1-온

DMF (1.0 ㎖) 중 6-(5-클로로-4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)-피리미딘-2-일아미노)-5-이소프로폭시-2-(피페리딘-4-일)이소인돌린-1-온 (20 mg, 0.03 mmol)의 용액에, 2-(디메틸아미노)아세틸 클로라이드 히드로클로라이드 (0.17 mmol, 26 mg) 및 트리에틸 아민 (0.18 mmol, 18 mg)을 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 1시간 동안 교반하고, 고체 부산물을 여과하여 제거하였다. 남은 여액을 분취용 RP-HPLC로 정제하여, 6-(5-클로로-4-(2-(이소프로필술포닐)-페닐아미노)피리미딘-2-일아미노)-2-(1-(2-(디메틸아미노)아세틸)피페리딘-4-일)-5-이소프로폭시이소인돌린-1-온을 수득하였다.

실시예 5

(S)-6-(5-클로로-4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-2-일아미노)-5-이소프로폭시-2-(1-(1-메틸피롤리딘-2-카르보닐)피페리딘-4-일)이소인돌린-1-온 (15)

DMF (1.0 ㎖) 중 6-(5-클로로-4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)-피리미딘-2-일아미노)-5-이소프로폭시-2-(피페리딘-4-일)이소인돌린-1-온 (52 mg, 0.09 mmol)의 용액에 (S)-1-(tert-부톡시카르보닐)피롤리딘-2-카르복실산 (19 mg, 0.09 mmol), HATU (50 mg, 0.130 mmol) 및 DIEA (0.174 mmol, 30 ㎕)를 순차적으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 이어서 EtOAc와 물 사이에 분배시켰다. 유기 추출물을 건조시키고 (Na₂SO₄), 진공에서 농축하였다. 조질의 생성물을 DCM (1 ㎖)과 TFA (1 ㎖)의 용액 중에서 1시간 동안 교반하고, 이어서 진공에서 농축하였다. 1 ㎖의 MeOH와 1 ㎖의 THF 중 생성된 조질의 생성물 용액에, 3방울의 AcOH, 포름알데히드 (물 중 37 중량％ 용액, 0.09 mmol, 7 mg)를 첨가하였다. 1시간 동안 교반한 후, 나트륨 시아노보로히드라이드 (0.18 mmol, 11 mg)를 첨가하고, 반응 혼합물을 추가의 30분간 교반하였다. 반응 혼합물을 여과하고, 생성된 여액을 분취용 RP-HPLC로 정제하여, (S)-6-(5-클로로-4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)-피리미딘-2-일아미노)-5-이소프로폭시-2-(1-(1-메틸피롤리딘-2-카르보닐)피페리딘-4-일)이소인돌린-1-온을 수득하였다.

실시예 6

2-(1-(아제티딘-3-카르보닐)피페리딘-4-일)-6-(5-클로로-4-(2-(이소프로필술포닐) 페닐아미노)피리미딘-2-일아미노)-5-이소프로폭시이소인돌린-1-온 (16)

DMF (1.0 ㎖) 중 6-(5-클로로-4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)-피리미딘-2-일아미노)-5-이소프로폭시-2-(피페리딘-4-일)이소인돌린-1-온 C (41 mg, 0.07 mmol)의 용액에, 1-(tert-부톡시카르보닐)아제티딘-3-카르복실산 (14 mg, 0.07 mmol), HATU (39 mg, 0.104 mmol) 및 DIEA (0.138 mmol, 24 ㎕)를 순차적으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 1시간 동안 교반하고, 이어서 EtOAc와 물 사이에 분배시켰다. 유기 추출물을 건조시키고 (Na₂SO₄), 진공에서 농축하였다. 조질의 생성물을 DCM (1 ㎖)과 TFA (1 ㎖)의 용액 중, 실온에서 1시간 동안 교반하였다. 생성된 용액을 농축하고, 이어서 분취용 RP-HPLC로 정제하여, 2-(1-(아제티딘-3-카르보닐)피페리딘-4-일)-6-(5-클로로-4-(2-(이소프로필술포닐)페닐-아미노)피리미딘-2-일아미노)-5-이소프로폭시이소인돌린-1-온을 수득하였다.

실시예 7

2-(디메틸아미노)-1-(4-(5-이소프로폭시-4-(4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)에탄온 (21)

4-히드록실-6-메틸메르캅토피라졸로[3,4-d]피리미딘

4-히드록시-6-메르캅토-피라졸로[3,4-d]피리미딘 (14 g)을 물 (300 ㎖) 중 수산화나트륨 (10 g)의 용액에 용해시켰다. 용액을 5℃로 냉각하고, 요오드화메틸 (12 g)과 함께 진탕시켰다. 15 내지 20분 후, 용액을 활성탄으로 처리하고, 여과하고, 아세트산으로 산성화시켜 조질의 생성물을 얻었다. 산 중에서 재결정화시켜 원하는 생성물을 수득하였다 MS (ES⁺): 183.0 (M+1)⁺.

4-클로로-6-메틸메르캅토피라졸로[3,4-d]피리미딘

40 ㎖의 옥시염화인 및 디메틸아닐린 (3 ㎖)에 조질의 4-히드록시-메틸메르캅토피라졸로[3,4-d]피리미딘 2.2 g을 첨가하였다. 고체가 모두 용해될 때까지 용액을 30 내지 60분간 환류시켰다. 잉여량의 인을 감압 하에 제거하였다. 시럽성 잔류물을 빙수의 혼합물 위에 강하게 교반하면서 부었다. 10분 후, 수성 용액을 에테르로 추출하였다. 에테르 용액을 냉수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 반응물을 여과하고, 에테르를 압력 하에 제거하여, 생성물을 수득하였다. 211.0 (M+1)⁺.

N-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-6-(메틸티오)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민

100 ㎖의 이소프로판올 중 4-클로로-6-메틸메르캅토피라졸로[3,4-d]피리미딘 (10 mmol)과 2-(N,N-디메틸술포닐)아닐린 (10 mmol)의 용액을, 환류 상태에서 1시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 트리에틸아민 (12 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하고, 이어서 용액을 환류 하에 반 시간 동안 가열하였다. 후처리 및 플래시 크로마토그래피 (헥산/EtOAc 4:1) 한 후, 생성물을 수득하였다. 364.08 (M+1)+.

N-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-6-(메틸술포닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민

10 ㎖의 1,2-디클로로에탄 중 N-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-6-(메틸티오)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 (1 mmol)의 용액에, MCPBA (3 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고 1시간 동안 교반한 후, 생성물을 플래시 크로마토그래피 (CH₂Cl₂/MeOH 9:1)로 수득하였다. MS (ES+): 396.07 (M+1)+.

N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민

1 ㎖의 이소프로판올 중 N-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-6-(메틸술포닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 (0.5 mmol)의 현탁액에, 2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)아닐린 (0.5 mmol) 및 4-메틸벤젠술폰산 (0.5 mmol)을 첨가하였다. 현탁액을 150℃에서 3시간 동안 교반하였다. 분취용-HPLC한 후, 최종 생성물을 수득하였다.

2-(디메틸아미노)-1-(4-(5-이소프로폭시-4-(4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)에탄온

N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민 (56 mg)을 3 ㎖의 디클로로메탄에 용해시켰다. 용액을 5℃로 냉각하고, 2-(디메틸아미노)아세틸 클로라이드 히드로클로라이드 (24 mg), 이어서 트리에틸아민 (15 mg)을 용액에 첨가하였다. 용액을 실온에서 대략 30분간 교반하였다. 분취용-LC-MS한 후, 최종 생성물을 수득하였다. MS (ES+): 649.32 (M+1)+.

적절한 출발 물질을 사용하여 상기 실시예 (중간체 및 최종 화합물)에 기재된 절차를 반복함으로써, 하기 표 1에서 확인된 바와 같은 화학식 I의 화합물을 수득하였다.

<표 1>

실시예 8

2-브로모-1-(4-(5-이소프로폭시-4-(4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)에탄온 (24)

CH₂Cl₂ (3 ㎖) 중 N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민 (50 mg, 0.087 mmol)의 혼합물에, 브로모아세틸 클로라이드 (10 ㎕, 0.095 mmol)를 0℃에서 적가하였다. 용매를 감압 하에 제거하고, 잔류물을 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 (EtOAc/헥산 (0-100％)의 구배로 용리함), 표제 화합물 (2-브로모-1-(4-(5-이소프로폭시-4-(4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)에탄온)을 연황색 고체로서 수득하였다. MS: m/z = 698.2 (M + 1).

실시예 9

1-(4-(5-이소프로폭시-4-(4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)-2-(피페리딘-1-일)에탄온 (29)

DMF 중 실시예 8로부터의 2-브로모-1-(4-(5-이소프로폭시-4-(4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)에탄온 (10 mg, 0.014 mmol)과 피페리딘 (3 ㎕, 0.031 mmol)의 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 조질의 혼합물을 역상 HPLC로 직접 정제하여, 1-(4-(5-이소프로폭시-4-(4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)-2-(피페리딘-1-일)에탄온을 수득하였다. MS: m/z = 703.4 (M + 1), 352.2 (M/2 + 1).

실시예 10

N ⁶ -(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N ⁴ -(2-(이소프로필술포닐)페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민 (33)

EtOH (2 ㎖) 중 tert-부틸 4-(4-(5-아세틸-4-클로로-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-2-일아미노)-5-이소프로폭시-2-메틸페닐)피페리딘-1-카르복실레이트 (81 mg, 0.12 mmol)의 용액에, 히드라진 디클로라이드 (36 mg, 0.34 mmol) 및 나트륨 아세테이트 (47 mg, 0.57 mmol)를 순차적으로 첨가하고, 반응 혼합물을 80℃에서 밤새 가열하였다. 반응물을 실온으로 냉각하고, 진공에서 농축하였다. 조질의 물질을 DCM (2 ㎖) 중 TFA (2 ㎖)의 용액에 용해시키고, 반응물을 30분간 교반한 후, 농축하고, RP-HPLC로 정제하여, N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민을 수득하였다. MS (ES+): 578.3 (MH+).

실시예 11

N ⁶ -(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(1-메틸피페리딘-4-일)페닐)-N ⁴ -(2-(이소프로필술포닐)페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민 (34)

5.0 ㎖의 MeOH와 5.0 ㎖의 THF 중 N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민 (39 mg, 0.067 mmol)의 용액에, 몇 방울의 AcOH 및 HCHO [MeOH와 THF (용적/용적: 1/1) 중 1 N, 0.12 mmol, 120 ㎕]를 순차적으로 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 30분간 교반하고, 이어서 NaB(CN)H₃ (6.6 mg, 0.12 mmol)을 첨가하고, 반응 혼합물을 추가의 1시간 동안 교반하였다. 포화 수성 NH₄Cl을 반응물에 첨가하고, 반응 혼합물을 진공에서 농축하였다. 조질의 물질을 EtOAc와 염수 사이에 분배시켰다. 유기 추출물을 농축하고, RP-HPLC로 정제하여, N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(1-메틸피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민을 수득하였다. MS (ES+): 592.3 (MH+).

실시예 12

2-(4-(5-이소프로폭시-4-(4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)아세트아미드 (35)

N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민 (20 mg, 0.035 mmol), 2-브로모아세트아미드 (DMF 중 0.1 N, 0.035 mmol, 0.35 ㎖)와 트리에틸아민 (DMF 중 1 N, 0.105 mmol, 1.05 ㎖)의 혼합물을 100℃에서 10분간 가열하였다. 생성된 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여, 2-(4-(5-이소프로폭시-4-(4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)아세트아미드를 수득하였다. MS (ES+): 635.3 (MH+).

실시예 13

2-(4-(5-이소프로폭시-4-(4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)-N-메틸아세트아미드 (36)

N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민 (20 mg, 0.035 mmol), 2-브로모아세트아미드 (DMF 중 0.1 N, 0.070 mmol, 0.70 ㎖)와 트리에틸아민 (DMF 중 1.0 N, 0.105 mmol, 0.105 ㎖)의 혼합물을 100℃에서 10분간 가열하였다. 생성된 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여, 2-(4-(5-이소프로폭시-4-(4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)-N-메틸아세트아미드를 수득하였다. MS (ES+): 649.3 (MH+).

실시예 14

2-(4-(5-이소프로폭시-4-(4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)에탄올 (37)

N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민 (20 mg, 0.035 mmol), 2-브로모에탄올 (DMF 중 0.1 N, 0.070 mmol, 0.70 ㎖)과 트리에틸아민 (DMF 중 0.1 N, 0.18 mmol, 1.75 ㎖)의 혼합물을 100℃에서 10분간 가열하였다. 생성된 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여, 2-(4-(5-이소프로폭시-4-(4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)에탄올을 수득하였다. MS (ES+): 622.3 (MH+).

실시예 15

N ⁶ -(2-이소프로폭시-4-(1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)-5-메틸페닐)-N ⁴ -(2-(이소프로필술포닐)페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민 (38)

N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민 (26.6 mg, 0.046 mmol), 1-브로모-2-메톡시에탄 (DMF 중 1.0 N, 0.46 mmol, 0.46 ㎖)과 트리에틸아민 (DMF 중 1.0 N, 0.46 mmol, 0.46 ㎖)의 혼합물을 100℃에서 10분간 가열하였다. 생성된 반응 혼합물을 RP-HPLC로 정제하여, N6-(2-이소프로폭시-4-(1-메톡시에틸)피페리딘-4-일)-5-메틸페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민을 수득하였다. MS (ES+): 636.3 (MH+).

실시예 16

2-(6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(1-메틸피페리딘-4-일)페닐아미노)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-일아미노)-N,N-디메틸벤젠술폰아미드 (39)

4-히드록시-3-메틸-6-메르캅토피라졸로[3,4-d]피리미딘

상기 시약을 문헌 [J. med. Chem. 33:2174-8 (1990)]에 기재된 방법에 따라 제조하였다.

4-히드록시-3-메틸-6-메틸메르캅토피라졸로[3,4-d]피리미딘

4-히드록시-6-메르캅토-3-메틸피라졸로[3,4-d]피리미딘 (14 g)을 300 ㎖의 물 중 10 g의 수산화나트륨 용액에 용해시켰다. 용액을 5℃로 냉각하고, 12 g의 요오드화메틸과 함께 진탕시켰다. 15 내지 20분 후, 용액을 활성탄으로 처리하고, 여과하고, 아세트산으로 산성화시켜, 조질의 생성물 12 g을 얻었다. 산성 산 중에서 재결정화시켜 생성물을 수득하였다. MS (ES+): 197.0 (M+1)+.

4-클로로-3-메틸-6-메틸메르캅토피라졸로[3,4-d]피리미딘

40 ㎖의 옥시염화인 및 3 ㎖의 디메틸아닐린에 조질의 4-히드록시-3-메틸-6-메틸메르캅토피라졸로[3,4-d]피리미딘 2.2 g을 첨가하였다. 고체가 모두 용해되었을 때, 용액을 30 내지 60분간 환류시켰다. 잉여량의 인을 감압 하에 제거하였다. 잔류물을 빙수의 혼합물 위에 강하게 교반하면서 부었다. 10분 후, 수성 용액을 에테르로 추출하였다. 에테르 용액을 냉수로 세척하고, 무수 황산나트륨으로 건조시켰다. 여과하고, 에테르를 감압 하에 제거한 후, 생성물을 수득하였다. 215.0 (M+1)⁺.

N,N-디메틸-2-(3-메틸-6-(메틸티오)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-일아미노)벤젠술폰아미드

100 ㎖의 이소프로판올 중 4-클로로-3-메틸-6-메틸메르캅토피라졸로[3,4-d]피리미딘 (10 mmol)과 2-(N,N-디메틸술포닐)아닐린 (10 mmol)의 용액을 환류 상태에서 1시간 동안 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 트리에틸아민 (12 mmol)을 반응 혼합물에 첨가하고, 이어서 용액을 환류 하에 반 시간 동안 가열하였다. 후처리 및 플래시 크로마토그래피 (헥산/EtOAc 4:1) 한 후, 생성물을 수득하였다. 379.08 (M+1)+.

N,N-디메틸-2-(3-메틸-6-(메틸술포닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-일아미노)벤젠술폰아미드

10 ㎖의 1,2-디클로로에탄 중 N-(2-(N,N-디메틸술포닐)페닐)-3-메틸-6-(메틸티오)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 (1 mmol)의 용액에, MCPBA (3 mmol)를 0℃에서 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 1시간 동안 교반하였다. 후처리 및 플래시 크로마토그래피 (CH₂Cl₂/MeOH 9:1) 한 후, 생성물을 수득하였다. MS (ES+): 411.10 (M+1)+.

2-(6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(1-메틸피페리딘-4-일)페닐아미노)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-일아미노)-N,N-디메틸벤젠술폰아미드

1 ㎖의 이소프로판올 중 N-(2-(N,N-디메틸술포닐)페닐)-3-메틸-6-(메틸술포닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4-아민 (0.5 mmol)의 현탁액에, 2-이소프로폭시-5-메틸-4-(1-메틸피페리딘-4-일)아닐린 (0.5 mmol) 및 4-메틸벤젠술폰산 (0.5 mmol)을 첨가하였다. 현탁액을 150℃에서 3시간 동안 교반하였다. 후처리 및 분취용-HPLC한 후, 생성물을 수득하였다.

실시예 17

N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(1-메틸피페리딘-4-일)페닐)-3-메틸-N4-(2-(메틸술포닐)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민 (40)

상기 화합물을, 2-(N,N-디메틸술포닐)아닐린을 2-(메틸술포닐)아닐린으로 대체하여 실시예 15의 방법에 따라 제조하였다.

실시예 18

2-(디메틸아미노)-1-(4-(5-이소프로폭시-4-(4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)-3-메틸-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-6-일아미노)-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)에탄온 (41)

상기 화합물을, 2-(N,N-디메틸술포닐)아닐린을 2-(이소프로필술포닐)아닐린으로 대체하고, 2-이소프로폭시-5-메틸-4-(1-메틸피페리딘-4-일)아닐린을 1-(4-(4-아미노-5-이소프로폭시-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)-2-(디메틸아미노)에탄온으로 대체하여 실시예 15의 방법에 따라 제조하였다.

실시예 19

N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(1-메틸피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3,4,6-트리아민 (42)

2,4-디클로로-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-카르보니트릴

5 ㎖의 DMF 중 2,4,6-트리클로로피리미딘-5-카르보니트릴 (1.0 mmol)과 2-(이소프로필술포닐)아닐린 (1.0 mmol)의 용액에, 나트륨 히드라이드 (24 mg)를 첨가하였다. 현탁액을 30℃에서 2시간 동안 교반하였다. 후처리 및 컬럼 크로마토그래피 (9:1 헥산:EtOAc) 한 후, 생성물을 수득하였다. MS (ES+): 371.01 (M+1)+.

4-클로로-2-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(1-메틸피페리딘-4-일)페닐아미노)-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-카르보니트릴

3 ㎖의 이소프로판올 중 2,4-디클로로-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-카르보니트릴 (0.5 mmol)과 2-이소프로폭시-5-메틸-4-(1-메틸피페리딘-4-일)아닐린 (0.5 mmol)의 용액에, 4-메틸벤젠술폰산 (0.5 mmol)을 첨가하였다. 현탁액을 120℃에서 2시간 동안 교반하였다. 후처리 및 분취용-HPLC한 후, 생성물을 수득하였다. MS (ES+): 597.23 (M+1)+.

N6-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(1-메틸피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-3,4,6-트리아민 (20)

5 ㎖의 이소프로판올 중 4-클로로-2-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(1-메틸피페리딘-4-일)페닐아미노)-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-카르보니트릴 (0.1 mmol)의 용액에, 무수 히드라진 (0.3 mmol)을 첨가하였다. 용액을 120℃에서 3시간 동안 가열하였다. 후처리 및 분취용-HPLC한 후, 생성물을 수득하였다. MS (ES+): 593.29 (M+1)+.

실시예 20

N6-(2-이소프로폭시-4-(1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)-5-메틸페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-3-페닐-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민 (43)

(2,4-디클로로-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-일)(페닐)메탄온

THF (1.0 ㎖) 중 2,4-디클로로-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-카르브알데히드 (112.3 mg, 0.3 mmol)의 용액에, 페닐마그네슘브로마이드 (디에틸 에테르 중 3.0 M, 1.0 ㎖, 3.0 mmol)를 0℃에서 아르곤 대기 하에 첨가하였다. 첨가 후, 반응 혼합물을 실온으로 서서히 가온하고, 추가로 밤새 교반하였다. 이어서, 0℃에서 반응 혼합물에 2.0 ㎖의 포화 수성 NH₄Cl을 첨가하고, EtOAc (50 ㎖)에 용해시키고, H₂O (10 ㎖) 및 염수 (10 ㎖)로 세척하였다. 유기상을 Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 진공에서 농축하고, 실리카 겔 크로마토그래피로 정제하여 (용리액: 헥산 중 EtOAc: 0 - 33％), (2,4-디클로로-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-일)(페닐)메탄올을 무색 오일로서 수득하였다. MS (ES+): 452.0 (MH+).

DCM (10 ㎖) 중 (2,4-디클로로-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-일)(페닐)메탄올 (113.4 mg, 0.25 mmol)의 용액에 PDC (236 mg, 0.63 mmol)를 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온에서 밤새 교반하였다. 이어서, 생성된 혼합물을 실리카 겔 패드를 통해 여과하고, 패드를 DCM 중 5％ EtOAc (200 ㎖)로 세척하였다. 여액을 진공에서 농축하여, (2,4-디클로로-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-일)(페닐)메탄온을 무색 오일로서 수득하였다. MS (ES+): 450.0 (MH+).

(4-클로로-2-(2-이소프로폭시-4-(1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)-5-메틸페닐아미노)-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-일)(페닐)메탄온

10 ㎖ 마이크로파 반응 튜브에 (2,4-디클로로-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-일)(페닐)메탄온 (24.1 mg, 0.0548 mmol), 2-이소프로폭시-4-(1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)-5-메틸아닐린 (16.8 mg, 0.0548 mmol), 2-프로판올 (4 ㎖) 및 후니그 염기(Hunig's Base) (3 방울)를 연속적으로 첨가하였다. 생성된 혼합물을 마이크로파 기기를 사용하여 150℃에서 2시간 동안 교반하였다. 반응 용액을 진공에서 농축하여, 조질의 (4-클로로-2-(2-이소프로폭시-4-(1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)-5-메틸페닐아미노)-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-일)(페닐)메탄온을 약간 황색의 점착성 오일로서 수득하였다. MS (ES+): 720.30 (MH+).

N6-(2-이소프로폭시-4-(1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)-5-메틸페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-3-페닐-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민

10 ㎖ 마이크로파 반응 튜브에 (4-클로로-2-(2-이소프로폭시-4-(1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)-5-메틸페닐아미노)-6-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)피리미딘-5-일)(페닐)메탄온 (0.0548 mmol), THF (4 ㎖) 및 H₂NNH₂ (0.4 ㎖)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 마이크로파 기기를 사용하여 120℃에서 30분간 교반하였다. 반응 용액을 진공에서 농축하고, 잔류물을 역상 HPLC로 정제하여, N6-(2-이소프로폭시-4-(1-(2-메톡시에틸)피페리딘-4-일)-5-메틸페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-3-페닐-1H-피라졸로[3,4-d]피리미딘-4,6-디아민을 약간 황색의 고체로서 수득하였다. MS (ES+): 698.30 (MH+).

하기 표 2는 상기 실시예에 기재된 방법에 따라 제조할 수 있는 화합물을 나타낸다.

<표 2>

실시예 21

N2-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-5-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2,4-디아민 (68)

7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2,4-디올

1.0 ℓ의 물 중 40 g 6-아미노피리미딘-2,4-디올 (1) (315 mmol)에, 54.3 g NaOAc (662 mmol) 및 48 ㎖의 2-클로로아세트알데히드 (H₂O 중 50 중량％, 378 mmol)를 첨가하였다. 생성된 혼합물을 환류 가열하고, 3시간 동안 교반하였다. 반응 혼합물을 실온으로 냉각하고, 이어서 300 ㎖의 H₂O 중 2 N HCl을 서서히 첨가하였다. 침전물을 여과하고, H₂O로 세척하고, 50℃에서 진공 하에 건조시켜, 표제 화합물을 수득하였다.

2,4-디클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘

11.5 g (76 mmol) 7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2,4-디올 (2a)을 40 ㎖의 톨루엔에 용해시키고, 21.3 ㎖의 POCl₃ (229 mmol)을 실온에서 서서히 첨가하였다. 반응 혼합물을 70℃로 가열하고, 26.5 ㎖의 DIPEA (153 mmol)를 N₂ 하에서 2시간에 걸쳐 적가하였다. 반응 온도를 106℃로 상승시키고, 혼합물을 밤새 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 반응 혼합물을 200 ㎖ EtOAc와 300 ㎖ 물의 혼합물에 붓고, 이어서 셀라이트를 통해 여과하였다. 수성 층을 3x200 ㎖의 EtOAc로 추출하고, 합한 유기층을 염수로 세척하고, 활성 탄소로 표백하고, 셀라이트를 통해 여과하고, 농축하여, 표제 화합물을 수득하였다.

5-브로모-2,4-디클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘

100 ㎖의 1,4-디옥산 중 935 mg 2,4-디클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (3a) (5.0 mmol)에, 256 ㎕의 Br₂ (5.0 mmol)를 0℃에서 10분에 걸쳐 서서히 첨가하였다. 0℃에서 30분간 교반한 후, 반응 혼합물을 150 ㎖의 EtOAc와 150 ㎖의 포화 수성 Na₂SO₃의 혼합물에 붓고, 이어서 셀라이트를 통해 여과하였다. 수성 상을 EtOAc (100 ㎖)로 3회 추출하고, 합한 유기층을 염수로 세척하고, 농축하고, 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다.

2,4-디클로로-5-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘

1.4 g 5-브로모-2,4-디클로로-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (4) (5.2 mmol)을 200 ㎖의 THF에 용해시켰다. -78℃로 냉각한 후, 9.75 ㎖의 BuLi (헥산 중 1.6 M 용액, 15.6 mmol)를 30분에 걸쳐 서서히 첨가하고, 이어서 -78℃에서 30분간 교반한 후, 396 ㎕의 MeI (6.24 mmol)를 반응 혼합물에 1시간에 걸쳐 적가하였다. 반응 혼합물을 -78℃에서 1시간 더 교반하고, 상기 온도에서 20 ㎖의 포화 수성 NH₄Cl 용액을 첨가하여 켄칭하였다. 이어서, 반응 혼합물을 100 ㎖의 포화 NaHCO₃과 100 ㎖의 EtOAc 사이에 분배시켰다. 유기층을 분리하고, 수성 층을 EtOAc (100 ㎖)로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축하여 조질의 표제 화합물을 수득하였고, 이를 추가의 정제 없이 사용하였다.

2,4-디클로로-5-메틸-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘

503 mg 2,4-디클로로-5-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (5) (2.5 mmol) 및 523 mg TsCl (2.75 mmol)을 20 ㎖의 DMF에 용해시켰다. 0℃로 냉각한 후, 200 mg NaH (2.75 mmol)를 N₂ 하에서 서서히 첨가하였다. 반응 혼합물을 0℃에서 30분간 교반하고, 상기 온도에서 10 ㎖의 10％ 수성 NH₄Cl을 첨가하여 켄칭하고, 이어서 EtOAc (50 ㎖)로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 연황색 고체로서 수득하였다.

2-(이소프로필티오)아닐린

EtOH 중 19.9 g 2-아미노벤젠티올 (7) (159 mmol)과 17.4 ㎖의 2-요오도프로판 (175 mmol)의 200 ㎖ 용액에, 23.2 g KOBu-t (207 mmol)를 0℃에서 N₂ 하에 서서히 첨가하였다. 반응 혼합물을 실온으로 가온하고, 2시간 동안 교반하고, 이어서 셀라이트를 통해 여과하고, 농축하였다. 잔류물을 300 ㎖의 EtOAc에 재용해시키고, 물 및 이어서 염수로 세척하고, 농축하고, 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 연황색 오일로서 수득하였다.

2-클로로-N-(2-(이소프로필티오)페닐)-5-메틸-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민

350 mg 2,4-디클로로-5-메틸-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘 (6) (1.0 mmol) 및 255 mg 2-(이소프로필티오)아닐린 (8) (1.5 mmol)을 15 ㎖의 DMF에 용해시켰다. 이어서, 336 mg KOBu-t (3.0 mmol)를 N₂ 하에 서서히 첨가하였다. 주위 온도에서 1시간 동안 교반한 후, 반응 혼합물을 100 ㎖의 물에 붓고, EtOAc (100 ㎖)로 3회 추출하였다. 합한 유기층을 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 플래시 컬럼 크로마토그래피로 정제하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다.

2-클로로-N-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-5-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민

86 mg mCPBA (0.38 mmol)를 10 ㎖의 CHCl₃ 중 94 mg 2-클로로-N-(2-(이소프로필티오)페닐)-5-메틸-7-토실-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-4-아민 (9) (0.19 mmol)의 용액에 실온에서 서서히 첨가하였다. 주위 온도에서 2시간 동안 교반한 후, 5 ㎖의 포화 수성 Na₂SO₃ 용액을 첨가하여 반응을 켄칭하고, 생성된 2개의 층을 분리하였다. 수성 층을 CH₂Cl₂ (10 ㎖)로 3회 추출하고, 합한 유기층을 염수로 세척하고, 농축하였다. 잔류물을 5 ㎖의 MeOH에 재용해시키고, 상기 용액에 1.1 ㎖의 NaOMe (MeOH 중 0.5 M 용액, 0.55 mmol)를 첨가하였다. 혼합물을 50℃로 가열하고, 30분간 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 용매를 진공 하에 제거하고, 잔류물을 20 ㎖의 EtOAc에 재용해시키고, 포화 수성 NaHCO₃ 용액 및 염수로 세척하고, Na₂SO₄ 상에서 건조시키고, 농축하여, 표제 화합물을 백색 고체로서 수득하였다.

N2-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-5-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2,4-디아민

32 mg TsOH (0.165 mmol)를, 0.2 ㎖의 2-프로판올 중 20 mg N2-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-5-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2,4-디아민 (0.055 mmol)과 31.3 mg 2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)아닐린 HCl 염 (0.11 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 170℃로 가열하고, 마이크로파 조사 하에 40분간 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 용매를 진공 하에 제거하고, 잔류물을 1 ㎖의 DMSO에 재용해시키고, 질량에 의한 HPLC로 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다.

실시예 22

2-(4-(5-이소프로폭시-4-(4-(2-(이소프로필술포닐)페닐아미노)-5-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2-일아미노)-2-메틸페닐)피페리딘-1-일)아세트아미드 (69)

82 ㎕의 Et₃N (0.69 mmol)을, 1 ㎖의 DMF 중 40 mg N₂-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N4-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-5-메틸-7H-피롤로[2,3-d]피리미딘-2,4-디아민 (11) (0.069 mmol)과 28.5 mg 2-브로모아세트아미드 (0.207 mmol)의 용액에 첨가하였다. 반응 혼합물을 100℃로 가열하고, 마이크로파 조사 하에 10분간 교반하였다. 실온으로 냉각한 후, 용매를 진공 하에 제거하고, 잔류물을 1 ㎖의 DMSO에 재용해시키고, 질량에 의한 HPLC로 정제하여, 표제 화합물을 수득하였다.

하기 표 3은, 적절한 출발 물질을 사용하여 상기 실시예에 기재된 절차를 반복함으로써 수득할 수 있는 화합물을 나타낸다.

<표 3>

실시예 23

N5-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N7-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘-5,7-디아민 (실시예 82)

5-아미노-1-(4-메톡시벤질)-1H-1,2,3-트리아졸-4-카르복스아미드.

1-(아지도메틸)-4-메톡시벤젠 (5 g)과 2-시아노아세트아미드 (5 g)의 혼합물을, 나트륨 에톡시드의 용액 (100 ㎖의 에탄올 중 1.6 g의 나트륨으로 제조됨)에 첨가하였다. 생성된 혼합물을 20시간 동안 환류시켰다. 이를 실온으로 냉각하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 남은 고체를 물 (20 ㎖)에 용해시키고, 에틸 아세테이트 (50 ㎖)로 3회 추출하였다. 추출물을 합하고, 염수로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 용매를 제거하고, 잔류물을 뜨거운 물로부터 결정화시켜, 원하는 생성물 5-아미노-1-(4-메톡시벤질)-1H-1,2,3-트리아졸-4-카르복스아미드를 수득하였다. C₁₁H₁₃N₅O₂에 대해 계산된 ESMS (m/z): 247.1; 측정치 (M + H⁺): 248.1

3-(4-메톡시벤질)-3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘-5,7-디올.

THF (30 ㎖) 중 5-아미노-1-(4-메톡시벤질)-1H-1,2,3-트리아졸-4-카르복스아미드 (0.9 g)와 디에틸 카르보네이트 (1.2 ㎖)의 용액에 칼륨 tert-부톡시드 (1.2 g)를 첨가하였다. 혼합물을 질소 하에 6시간 동안 환류시켰다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하였다. 물 (20 ㎖)을 첨가하고, 반응 혼합물을 약 20 ㎖까지 농축하였다. 이를 1 N HCl로 pH 6까지 중화시키고, 여과하였다. 고체를 수집하고, 물로 세척하고, 공기 건조시켜, 원하는 생성물을 수득하였다.

C₁₂H₁₁N₅O₃에 대해 계산된 ESMS (m/z): 273.0, 측정치 (M + H⁺): 274.0.

5,7-디클로로-3-(4-메톡시벤질)-3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘.

3-(4-메톡시벤질)-3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘-5,7-디올 (0.8 g), 옥시염화인 (3 ㎖)과 콜리딘 (2.1 ㎖)의 혼합물을 120℃에서 3시간 동안 가열하고, 실온으로 냉각하였다. 빙수를 첨가하고, 혼합물을 에틸 아세테이트 (15 ㎖)로 3회 추출하였다. 유기물을 합하고, 물로 세척하고, 황산마그네슘 상에서 건조시켰다. 용매를 감압 하에 제거하고, 조질의 5,7-디클로로-3-(4-메톡시벤질)-3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘을 추가의 정제 없이 다음 단계에 직접 사용하였다.

5-클로로-N-(2-(이소프로필티오)페닐)-3-(4-메톡시벤질)-3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘-7-아민.

디옥산 (10 ㎖) 중 5,7-디클로로-3-(4-메톡시벤질)-3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘 (0.03 g)과 2-(이소프로필티오)아닐린 (0.1 g)의 용액을 100℃에서 10시간 동안 가열하였다. 이어서, 이를 실온으로 냉각하고, 에틸 아세테이트 (20 ㎖)를 첨가하였다. 혼합물을 포화 중탄산나트륨 (10 ㎖)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 용매를 감압 하에 제거하고, 남은 잔류물을 실리카 겔 컬럼 상에서 정제하여 (에틸 아세테이트 : 헥산 = 1 : 10), 원하는 생성물을 수득하였다. C₂₁H₂₁ClN₆OS에 대해 계산된 ESMS (m/z): 440.1; 측정치 (M + H⁺): 441.1.

5-클로로-N-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-3-(4-메톡시벤질)-3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘-7-아민.

디클로로메탄 (25 ㎖) 중 5-클로로-N-(2-(이소프로필티오)페닐)-3-(4-메톡시벤질)-3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘-7-아민 (0.1 g)의 용액에 3-클로로퍼옥시벤조산 (77％, 230 mg)을 첨가하였다. 혼합물을 실온에서 4시간 동안 교반하였다. 디클로로메탄 (20 ㎖)을 첨가하고, 혼합물을 포화 중탄산나트륨 (10 ㎖)으로 세척하고, 황산나트륨 상에서 건조시켰다. 용매를 감압 하에 제거하고, 남은 잔류물을 실리카 겔 컬럼 상에서 정제하여 (에틸 아세테이트 : 헥산 = 1 : 3), 순수한 원하는 생성물을 수득하였다.

C₂₁H₂₁ClN₆O₃S에 대해 계산된 ESMS (m/z): 472.1, 측정치 (M + H⁺): 472.2.

N5-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)페닐)-N7-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘-5,7-디아민 (실시예 87)

2 M HCl/디옥산 (2 ㎖) 중 5-클로로-N-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-3-(4-메톡시벤질)-3H-[1,2,3]트리아졸로[4,5-d]피리미딘-7-아민 (10 mg)과 2-이소프로폭시-5-메틸-4-(피페리딘-4-일)아닐린 (7 mg)의 용액을 압력 튜브 내에 밀봉하고, 110℃에서 2일 동안 가열하였다. 이를 실온으로 냉각하고, 용매를 감압 하에 제거하였다. 남은 잔류물을 트리플루오로아세트산 (2 ㎖)에 용해시키고, 80℃로 2시간 동안 가열하였다. 트리플루오로아세트산을 제거하고, 남은 생성물을 분취용 LC-MS로 정제하여, 원하는 생성물을 수득하였다.

C₂₈H₃₆N₈O₃S에 대해 계산된 ESMS (m/z): 564.2 (M + H⁺), 측정치: 565.2.

실시예 24

N2-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(1-메틸피페리딘-4-일)페닐)-N6-(2-(이소프로필술포닐) 페닐)-7-메틸-7H-퓨린-2,6-디아민 (실시예 89)

2-클로로-N-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-7-메틸-7H-퓨린-6-아민

MCPBA (2.2 당량)의 슬러리를 CHCl₃ (2 ㎖/mmol) 중 2-클로로-N-(2-(이소프로필티오)페닐)-7-메틸-7H-퓨린-6-아민 (1 당량)의 용액에 실온에서 첨가하였다. 주위 온도에서 2시간 동안 교반한 후, 5 ㎖의 포화 수성 Na₂SO₃ 용액을 첨가하여 반응을 켄칭하고, 생성된 2개의 층을 분리하였다. 수성 층을 CH₂Cl₂로 추출하고, 합한 유기층을 염수로 세척하고, 농축하였다. 생성된 잔류물을 플래시 컬럼 크로마토그래피를 이용하여 정제하여, 원하는 생성물을 백색 고체로서 수득하였다.

N2-(2-이소프로폭시-5-메틸-4-(1-메틸피페리딘-4-일)페닐)-N6-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-7-메틸-7H-퓨린-2,6-디아민

이소프로판올 중 2-클로로-N-(2-(이소프로필술포닐)페닐)-7-메틸-7H-퓨린-6-아민 (1 당량)의 현탁액에, 2-이소프로폭시-5-메틸-4-(1-메틸피페리딘-4-일)아닐린 (1 당량) 및 4-메틸벤젠술폰산 (1 당량)을 첨가하였다. 현탁액을 150℃에서 3시간 동안 교반하고, 실온으로 냉각하고, 용매를 증발시켰다. 잔류물을 분취용 HPLC를 이용하여 정제하여, 원하는 생성물을 고무질(gummy) 고체로서 수득하였다.

하기 표 4는, 적절한 출발 물질을 사용하여 상기 실시예에 기재된 절차를 반복함으로써 수득할 수 있는 화합물을 나타낸다.

<표 4>

분석

하기 기재된 분석법 및 당업계에 공지된 기타 분석법을 이용하여, 본 발명의 화합물을 그의 ALK 억제 능력에 대해 평가할 수 있었다.

Ba/F3 세포주 패널 및 시약

Ba/F3은 쥣과 IL-3-의존성 pro-B 림프종 세포주이다. 부모 Ba/F3 세포를 사용하여, TEL의 아미노-말단 부분 (아미노산 1-375) 또는 BCR과 융합시켜 활성화시킨 개별 티로신 키나제에 의한 안정한 형질도입에 의해, 증식 및 생존이 IL-3-비의존성이 된 아세포주(subline) 패널을 생성하였다. Tel-티로신 키나제 (TK) 융합체에 의해 형질전환된 Ba/F3 세포주를 생성하기 위해, 부모 Ba/F3 세포를 각각의 키나제 도메인을 내포한 레트로바이러스로 감염시키고, 퓨로마이신 선별 및 IL-3 박탈(withdrawal)을 적용하여, IL-3-비의존성의 형질전환된 Ba/F3 세포를 얻었다.

각각의 형질전환된 Ba/F3 세포를, 10％ FBS (하이클론(Hyclone) 카탈로그 #SV30014.03; 미국 유타주 로건 소재), 4.5 g/ℓ 글루코스 (시그마(Sigma) #G5400; 미국 미주리주 세인트루이스 소재), 1.5 g/ℓ 중탄산나트륨 (바이오위태커(Biowhittaker) #17-613E; 미국 메릴랜드주 워커스빌 소재) 및 페니실린/스트렙토마이신(Pen/Strep) (기브코(Gibco) #10378-016; 미국 캘리포니아주 칼스바드 소재)으로 보충된 RPMI-1640 배지 (기브코 카탈로그 #11875093; 미국 캘리포니아주 칼스바드 소재)에서 배양하였다. 세포는 매주 2회 분할하였다.

Ba/F3 세포 생존능 억제 분석

하기와 같이 각종 Tel-TK 형질전환된 Ba/F3 세포주에 대한 시험 화합물의 효능을 측정하였다. 지수 성장하는 BaF3 Tel-TK 세포를 새로운 배지에 75,000개 세포/㎖로 희석하고, 마이크로필(μFill) 액체 분배기 (바이오텍(BioTek); 미국 버몬트주 위누스키 소재)를 사용하여 384-웰 플레이트에 50 ㎕/웰로 시딩 (3750개 세포/웰)하였다. 각각의 세포주에 대해 이중 플레이트로 수행하였다. 시험 화합물 및 대조군 화합물을 DMSO로 연속적으로 희석하고, 폴리프로필렌 384-웰 플레이트에 배치하였다. 50 nℓ의 화합물을 핀-전달 장치를 사용하여 분석 플레이트로 이동시키고, 플레이트를 37℃ (5％ CO₂)에서 48시간 동안 인큐베이션하였다. 25 ㎕ 브라이트-글로(Bright-Glo) (프로메가(Promega); 미국 위스콘신주 매디슨 소재)를 첨가하고, 아날리스트(Analyst) GT (퍼킨 엘머(Perkin Elmer); 미국 매사추세츠주 웰슬리 소재)를 사용하여 발광을 정량하였다. 맞춤형 곡선-작도 소프트웨어를 사용하여, 억제제 농도의 대수 함수로서의 세포 생존율 (％)의 로지스틱 핏(logistic fit)을 생성하였다. 세포 생존율을 DMSO 대조군의 50%로 감소시키는 데 필요한 화합물의 농도로서 IC₅₀을 내삽하였다. IL-3 (최종 1 ng/㎖)의 존재 하에 유지되고 배양된 부모 Ba/F3 세포를, IL-3 (최종 1 ng/㎖)을 함유하는 새로운 배지에 75,000개 세포/㎖로 상기 기재된 바와 같은 동일한 절차에 따라 희석하였다.

카르파스(Karpas) 299 세포 분석

루시퍼화된(luciferized) 카르파스 299 (카르파스299-Luc)를, 루시퍼라제 유전자를 코딩하는 레트로바이러스로 감염시켜 생성하고, 10％ FBS, 1％ P/S/L-Glu로 보충된 RPMI-1649 배지에서 배양하였다. 제1일에, 150,000개 세포/㎖ (세포수는 바이셀(ViCell, BD)을 이용하여 측정됨)의 밀도에서 세포를 수집하고, 재현탁시켰다. 마이크로필 (바이오텍)을 사용하여, 세포를 희석된 현탁액으로부터 50 ㎕ 용적으로 384-웰 분석 플레이트에 분배하였다. 일련의 희석된 화합물 (DMSO 중)을 50 nℓ 핀헤드를 사용하여 플레이트로 이동시켰다. 분석 플레이트를 37℃에서 48시간 동안 인큐베이션하였다. 제4일에, 25 ㎕/웰의 브라이트-글로 시약 (프로메가)을 마이크로필 (바이오텍)을 사용하여 첨가하였다. 30분 내로, 발광 검출을 위해 아날리스트 GT를 기본 세팅으로 사용하여 루시퍼라제 신호를 측정하였다.

효소 HTRF 분석

IGF-1R 및 INSR (인슐린 수용체)을 업스테이트(Upstate)로부터 구입하였다. 하기 시약을 자체 제조하였다; 10 x 키나제 완충액 (KB) (200 mM 트리스 (pH 7.0), 100 mM MgCl₂, 30 mM MnCl₂, 50 nM NaVO₄), 10 mM ATP, 100 mg/㎖ BSA, 0.5 M EDTA, 4 M KF. 퍼킨-엘머로부터의 프록시플레이트(Proxiplate)-384를 셋업 분석에 사용하였다. 기질을 포함한 모든 HTRF 시약 (바이오틴(Biotin)-폴리-GT (61GT0BLB), Mab PT66-K (61T66KLB), 스트렙타비딘(Streptavidin)-XL^ent (611SAXLB))을 시스-유에스, 인코퍼레이티드(CIS-US, Inc.)로부터 구입하였다.

ATP (최종 농도, 3 μM) 및 비오티닐화된 폴리-GT (최종 농도, 10 ng/㎕)를 1x KB에 첨가하여 기질/ATP 혼합물을 제조하고, 이를 마이크로필 (바이오텍)을 사용하여 프록시플레이트-384에 5 ㎕/웰로 분배하였다. 일련의 희석된 화합물 (DMSO 중)을 50 nℓ 핀헤드를 사용하여 플레이트로 이동시켰다. 마이크로필 (바이오텍)을 사용하여, 5 ㎕의 제조된 효소 혼합물 (1x KB 중 BSA 및 DTT와 혼합된 효소 (최종 농도, 5 ng/㎕))을 첨가하여 키나제 반응을 개시하였다. 분석 플레이트를 실온에서 2시간 동안 인큐베이션하였다. Mab PT66-K 및 스트렙타비딘-XL^ent 둘 모두를 KF (최종 농도, 125 mM), EDTA (최종 농도, 50 mM) 및 BSA (최종 농도, 100 ㎍/㎖)를 함유하는 0.5 x KB 용액에 첨가하여 검출 혼합물을 제조하였다. 반응 종료시에, 10 ㎕의 검출 혼합물을 첨가하고, 실온에서 30분간 인큐베이션한 후 측정하였다. 아날리스트-GT (분자 동역학)를 사용하여 HTRF 신호를 검출하였다.

RE1-pGL3을 사용하는, IGF1-S3-5 또는 INSR-S3-5에 대한 U2OS 세포에서의 리포터 분석

T175 플라스크 당 10M의 세포를 맥코이(Mc-Coy) 10％ FBS 중에 시딩하고, 4일 후에 배지를 흡인 제거하고, 새로운 배지를 첨가하였다. 다음날 (시딩 후 제5일), 세포를 트립신처리하고, PBS로 1회 세척하고, 이어서 맥코이 배지 4％ 탈지 혈청 (P/S/G 함유) 중에 재현탁시켰다. 세포를 계수하고, 400,000개 세포/㎖로 희석하였다.

95 ㎖의 세포 (400000개 세포/㎖ (40M))에 대해, 하기 DNA/퓨젠6(Fugene6) 혼합물 (5 ㎖ 혈청 무함유 맥코이 배지; 120 ㎍ DNA 혼합물 (20 ㎍ IGF1R-S3-5 또는 INSR-S3-5 + 100 ㎍ RE1-pGL3); 및 240 ㎕ 퓨젠6 시약)을 제조하였다. DNA/ 퓨젠6 혼합물을 15분간 인큐베이션한 후, 이를 4％ 탈지 혈청 중 세포에 첨가하였다. 384 웰 플레이트에 50 ㎕ / 웰로 분배하였다. 22 내지 24시간 후, 일련의 희석된 화합물 50 nℓ를 핀헤드를 사용하여 첨가하였다. 30분 후, 맥코이 4％ 탈지 혈청에 희석된 2 ㎕의 26X IGF1 (또는 100X 인슐린) 투여량을 마이크로-필을 사용하여 첨가하였다. 30시간 후, 발광 측정을 위해 25 ㎕ 100％ 브라이트-글로를 첨가하고, 아날리스트-GT 상에서 판독하였다.

본원에 기재된 실시예 및 실시양태가 단지 예시적 목적을 위한 것이며, 이를 고려하여 다양한 변형 또는 변화가 당업자에게 시사될 것이며, 이들은 본원의 사상 및 범주 내에, 그리고 첨부된 청구범위의 범위 내에 포함될 것임은 물론이다. 본원에 인용된 모든 공개, 특허 및 특허 출원은 모든 목적상 본 거명에 의해 본원에 포함된다.

Claims

하기 화학식 1의 화합물 또는 그의 생리학상 허용되는 염.
<화학식 1>

여기서,
R¹ 및 R²는 H이고;
R³은 할로이고;
R⁴는 H이고;
별법으로, R³ 및 R⁴는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, 1 내지 3개의 질소 헤테로원자를 함유하고 1 내지 2개의 R¹⁰ 기 (여기서, R¹⁰은 할로, C_1-6 알킬, 페닐 또는 NR₂임)로 치환되거나 비치환된 5원 내지 6원 고리를 형성할 수 있고;
R⁵는 C_1-6알킬 또는 C_1-6알콕시이고;
R⁷은 S(O)_0-2R¹⁹ 또는 S(O)₂NRR²⁰이고; 여기서 R¹⁹ 및 R²⁰은 독립적으로 C_1-6알킬 또는 할로-치환된 C_1-6 알킬이거나; 또는 R²⁰은 H이고;
R⁹는 -L-CR(OR¹⁷)-C_tF_(2t+1) (여기서, t는 1 내지 3임); -L-S(O)₂R¹⁸, -L-S(O)₂NRR¹⁷, -L-S(O)₂NR(CR₂)_pNR(R¹⁷), -L-S(O)₂NR(CR₂)_pOR¹⁷ 또는 하기 화학식 a, b, c 또는 d로부터 선택되는 라디칼이고

;
여기서, R¹¹, R¹², R¹³, R¹⁴, R¹⁵ 및 R¹⁶은 독립적으로 H 또는 C_1-6알킬로부터 선택되거나; 또는 R¹¹ 및 R¹², R¹² 및 R¹⁵, R¹⁵ 및 R¹⁶, R¹³ 및 R¹⁴, 또는 R¹³ 및 R¹⁵는 그들이 부착된 탄소 원자, 질소 원자 또는 둘 다와 함께, N 및 O로부터 선택되는 1 또는 2개의 헤테로원자를 함유할 수 있는 3원 내지 7원 포화, 불포화 또는 부분 불포화 고리를 형성할 수 있고;
L은 (CR₂)_1-4 또는결합이고;
각각의 R 및 R¹⁷은 독립적으로 H 또는 C_1-6알킬이고;
R¹⁸은 C_1-6알킬이고;
p는 2 내지 4이다.
제1항에 있어서, 하기 화학식 3의 화합물인 화합물.
<화학식 3>

여기서, R³은 할로이고;
별법으로, R³ 및 R⁴는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께, 1 내지 3개의 질소 헤테로원자를 함유하고 1 내지 2개의 R¹⁰ 기로 치환되거나 비치환된 5원 내지 6원 고리를 형성할 수 있고;
R^5a 및 R^5b는 독립적으로 C_1-6 알킬 또는 C_1-6알콕시이고;
R⁷은 S(O)_0-2R¹⁹이고;
R¹, R², R⁹, R¹⁰ 및 R¹⁹는 제1항에 정의된 바와 같다.
제2항에 있어서, R^5a가 메톡시 또는 이소프로폭시이고; R^5b가 메틸인 화합물.
제1항에 있어서, 하기 화학식 3A, 3B, 3C 또는 3D의 화합물인 화합물.

여기서, R^5a는 메톡시 또는 이소프로폭시이고;
R^5b는 메틸이고;
R^10b, R^10e, R^10f 및 R^10h는 독립적으로 H 또는 C_1-6알킬이고;
R^10a, R^10c, R^10d 및 R^10g는 독립적으로 H, 할로, C_1-6알킬, NR₂, 또는 페닐이고;
R¹, R², R⁷, R⁹ 및 R은 제1항에 정의된 바와 같다.
제1항에 있어서,

로 이루어진 군에서 선택되는 화합물.
하기 화학식 4 또는 5의 화합물 또는 그의 생리학상 허용되는 염.

여기서, Z는 NR^9a 또는 O이고;
R¹ 및 R²는 H이고;
R³ 및 R⁴는 이들이 부착된 탄소 원자와 함께 하기 군에서 선택되는 고리를 형성하고

;
R^5a 및 R^5b는 독립적으로 C_1-6 알킬 또는 C_1-6알콕시이고;
R⁷은 S(O)_0-2R¹⁹ 또는 S(O)₂NRR²⁰이고; 여기서 R¹⁹ 및 R²⁰은 독립적으로 C_1-6알킬 또는 할로-치환된 C_1-6 알킬이거나; 또는 R²⁰은 H이고;
각각의 R^9a는 독립적으로 H, C_1-6알킬, -(CR₂)_p-OR¹⁷, -L-C(O)-R¹⁷, -C(O)O-R¹⁷ 또는 -L-C(O)-NRR¹⁷이고; 여기서, R 및 R¹⁷은 NRR¹⁷ 중의 N과 함께 O 또는 S를 함유할 수 있는 5원 내지 6원 고리를 형성할 수 있고;
L은 (CR₂)_1-4 또는결합이고;
R¹⁷은 수소, 벤질, 할로로 치환되거나 비치환된 C_1-6알킬, 또는 C_1-6알킬 또는 할로로 치환되거나 비치환된 C_3-7시클로알킬이고;
R²¹, R²², R²⁴, R²⁷ 및 R²⁹는 독립적으로 H 또는 C_1-6알킬이고;
R²³, R²⁵, R²⁶ 및 R²⁸은 독립적으로 H, C_1-6알킬, NR₂ 또는 할로이고;
각각의 R은 H 또는 C_1-6알킬이고;
단, R²² 및 R²³이 모두 H는 아니고; R²⁴, R²⁵ 및 R²⁶이 전부 H는 아니고; R²⁷ 및 R²⁸이 모두 H는 아니다.
제6항에 있어서, 화학식 4의 화합물이며,

로 이루어진 군에서 선택되는 화합물.
제6항에 있어서, 화학식 5의 화합물이고, R^9a가 H 또는 C_1-6알킬인 화합물.
제1항 내지 제8항 중 어느 한 항의 화합물을 포함하는, 다발성 골수종, 신경모세포종, 림프종, 백혈병, 흑색종, 육종, 골육종, 활막 육종, 유잉 육종, 간암, 위장관 간질 종양, 또는 유방, 신장, 전립선, 결장직장, 갑상선, 난소, 췌장, 폐, 자궁, 호흡기, 뇌, 소화관, 요로, 눈, 간, 피부, 두경부 또는 부갑상선의 고형 종양인 세포 증식성 장애를 치료하기 위한 제약 조성물.
a) 화학식 6c의 중간체를 형성하기에 충분한 조건 하에서 화학식 6a의 시약을 화학식 6b의 시약 또는 그의 제약상 허용되는 염과 접촉시키는 단계

;
b) 상기 화학식 6c의 중간체를 산화제와 접촉시켜, 화학식 6d의 중간체를 형성하는 단계

[여기서, X¹ 및 X²는 이탈기임]; 및
c) 화학식 6의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 형성하기에 충분한 조건 하에서 상기 화학식 6d의 중간체를 화학식 6e의 시약 또는 그의 제약상 허용되는 염과 접촉시키는 단계

를 포함하는, 하기 화학식 6의 화합물 또는 그의 제약상 허용되는 염을 합성하는 방법.
<화학식 6>

여기서, W는 1 내지 3개의 질소 원자를 함유하는 5원 내지 6원 고리이고;
R⁵는 C_1-6알킬 또는 C_1-6알콕시이고;
R¹⁹는 C_1-6알킬이다.
제10항에 있어서, 상기 화학식 6의 화합물이 하기 화학식 6f, 6g, 6h 또는 6i의 화합물인 방법.
<화학식 6f>

<화학식 6g>

여기서, R^5a는 메톡시 또는 이소프로폭시이고;
R^5b는 메틸이고;
R^10a, R^10b, R^10c, R^10d, R^10e, R^10f, R^10g 및 R^10h는 독립적으로 H, 할로, C_1-6알킬, NH₂, 할로, 또는 페닐이고;
각각의 R¹⁹는 제10항에 정의된 바와 같다.
제10항에 있어서, 상기 화학식 6e의 시약이
i) 화학식 7의 시약을 알킬화제와 접촉시켜, 화학식 8의 중간체를 형성하는 단계

[여기서, R⁵ 및 R¹⁹는 제10항에 정의된 바와 같음]; 및
ii) 상기 화학식 8의 중간체를 환원시켜 화학식 6e의 시약을 형성하는 단계
에 의해 합성되는 것인 방법.
제12항에 있어서, 상기 알킬화제가 메틸 p-톨루엔술포네이트인 방법.
제12항에 있어서, 상기 화학식 8의 중간체가 수소화로 환원되는 것인 방법.
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