KR101233293B1

KR101233293B1 - 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물

Info

Publication number: KR101233293B1
Application number: KR1020100114510A
Authority: KR
Inventors: 임상현; 김희연; 이광재; 김경희; 권창주; 박유화; 함헌주
Original assignee: 강원도
Priority date: 2010-11-17
Filing date: 2010-11-17
Publication date: 2013-02-14
Also published as: KR20120053305A

Abstract

본 발명은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것으로서 보다 상세하게는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물에 있어서, 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물과 약학적으로 허용되는 부형제 및/또는 식품학적으로 허용되는 부형제를 포함하도록 하여 약학적 조성물 및/또는 건강기능식품 조성물로 사용할 수 있다.
본 발명의 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물의 주요 구성 성분인 털부처꽃 잎 에탄올 추출물은 탄수화물 저해효소 활성 억제, 지질대사관련 효소 활성 증가, 고지방식이와 동시 투여시 흰쥐의 체중 증가량 감소, 혈중 지질농도 감소, 복부지방 함량을 감소시키는 지질대사개선효과가 있어 당뇨 및/또는 비만에 대해 기능성을 갖는 의약품 및 건강기능식품 소재로서 산업화가 가능할 것으로 판단된다.

Description

털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물{Composition for Preventing and Treating of Diabetes and Obesity Comprising the ethanol extract of leaf from Lythrum salicaria L.}

본 발명은 털부처꽃(Lythrum salicaria L.) 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것으로서 보다 상세하게는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물에 있어서, 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물과 약학적으로 허용되는 부형제 및/또는 식품학적으로 허용되는 부형제를 포함하도록 하여 약학적 조성물 및/또는 건강기능식품 조성물로 사용할 수 있다.

현대 사회에서 전 세계적으로 확산이 되고 있는 비만현상은 고에너지 식품의 섭취, 유전적 감수성의 증가, 운동부족 등으로 발생하며 독립적으로 혹은 다른 질병과 연합하여 많은 건강상의 문제를 일으킨다(Ahn IS, Park KY and Do MS. (2007). Weight control mechanisms and anti-obesity functional agents. Journal of Korean Society Food Science Nutrition. 36:503-513.).

비만은 고혈압, 동맥경화증, 당뇨병 등 성인병의 위험을 증가시키고 심혈관계 질환과 같은 만성적, 대사적 질환을 유발시키는 중요한 문제가 되고 있다(Lee HJ, Chung MJ, Kim DJ and Choe M. (2009). Effects of Oenanthe javanica, Coicis lachryma-jobi L. var. and Plantaginis asiatica L. water extracts on activities of key enzyme on lipid metabolism. Journal of Korean Society Food Science Nutrition. 38:1516-1521.).

비만과 관련된 유전자들이 계속 밝혀지고 비만의 현상과 기작을 분자적인 수준에서 이해하게 되면서 비만치료를 위한 방법과 치료제 발견에 큰 발전을 보여주었다. 최근에는 식물에 함유된 유용한 성분인 식물성 화합물의 중요성의 인식과 더불어 부작용의 우려가 있는 비만치료제 보다는 전체적인 건강에 유익을 주면서 체중조절에도 효과가 있는 항비만 기능성 식품으로 활용 가능한 소재를 찾아내고 이들의 작용기전을 밝히는 연구가 활발히 진행되고 있으며, 당류 흡수저해, 체지방 합성 억제, 지방 흡수 억제, 식욕조절의 순으로 많은 연구가 이루어지고 있다(Lee S, So S, hwang E, Koo B, han G, Ko S and Kim N. (2008.) Effect of Ginseng and herbal plant mixture on anti-obesity in obese SD rat induced by high fat diet. Journal of Korean Society Food Science Nutrition. 37:437-444.).

부처꽃과(Lythraceae)는 전세계적으로 28속 600여종이 있으며 주로 열대지역에 분포하고 소수는 온대지역에 분포하며 하천, 논, 밭, 습지 등 수분이 많은 곳에서 자란다(Takhtajan A. (1967). Diversity and classification of flowering plants. Columbia University Press New York. p. 284. ;Yoo MH. (2008). A taxonomic study of the Korea Lythraceae. Sungkyunkwan University Press. Gyeonggi. Korea. p. 48.).

한국산 부처꽃과는 배롱나무(Lagerstroemia indica L.)를 제외한 대부분의 식물이 수생식물로 초본이며, 호수, 늪, 저수지, 하천, 습지 등에 서식한다.

털부처꽃은 현재 원예용으로 재배되고 있으나 조선시대 구황식품으로 사용하였다는 보고(Kim SM and Lee SW. (1992). The bibliographical study on the famine relief food of chosun-dynasty. Journal of the East Asian of Dietary Life. 2:35-55.)가 있으며, 어린잎은 현재 식품원재료로 등록되어있다.

털부처꽃(Purple loosestrife, Grass poly)은 다른 이름으로 털두렁꽃이라고 하며, 생약명으로는 천굴채(千屈菜)라고 한다(Lee TB. (2006). Coloured flora of Korea. Hyangmunsa. p 792.).

털부처꽃 전초에 탄닌질, 플라보노이드, 뿌리에 흔적의 사포닌이 있으며 탄닌질은 피로갈롤 계통으로 전초에 1.3∼12.2％, 뿌리에 1.5∼3％가 있다. 전초에는 엘라그산, p-쿠마르산, 0.9∼1.9％의 리트라닌 또는 살리카린, 리트린, 펙틴, 콜린, 시토스테롤 등이 있고, 민간에서 전초, 꽃, 뿌리로 달임약을 만들어 쓰인다(Choi OJ. (1999). Component and use of medicinal plants. Irwolseogak. p. 486. ).

털부처꽃의 성분으로는 salicairine, 탄닌(뿌리 8.5％, 줄기 10.5％, 잎 123％, 꽃 13.7％), 기타 성분으로 콜린(choline), lythranine, lythranidine, lythramine, lythrancine Ⅰ-Ⅶ, lythrancepine Ⅰ-Ⅲ, 엘라그산(ellagic acid), 올레아놀릭산(oleanolic acid), 우르솔릭산(ursolic acid) 등이 있다고 알려져 있으며, 꽃에 함유된 물질로 비텍신(vitexin), 오리엔틴(orientin), 말빈(malvin), cyanidin-3-monogalactoside, 갈릭산(gallic acid), 엘라그산(ellgic acid), 소량의 클로로제닉산(chlorogenic acid) 등이 있다(Lee SE, Park CG, Ahn YS, Son YD, Cha SS and Seong NS. (2009). Antioxidative and hepatoprotective effects of Lythrum salicaria. Korean Journal of Medicinal Crop Science. 17:1-7.).

털부처꽃의 효능에 대한 연구보고를 살펴보면, 털부처꽃 잎에서 조제된 추출물의 항산화 효과와 동물실험에서 항염증 및 항통증 효과(Thnalier Z, Kosar M, Kupeli E, Calis I and Baser KHC. (2007). Antioxidant, anti-inflammatory, anti-nociceptive activities and composition of Lythrum salicaria L. extracts. Journal of Ethnopharmacology. 110:539-547.), 항미생물 효과(Becker H, Scher JM, Speakman JB and Zapp J. (2005). Bioactivity guided isolation of antimicrobial compounds from Lythrum salicaria. Fitoterapia. 7:580-584.), 털부처꽃 뿌리 추출물의 항산화 및 간장 보호활성(Lee SE, Park CG, Ahn YS, Son YD, Cha SS and Seong NS. (2009). Antioxidative and hepatoprotective effects of Lythrum salicaria. Korean Journal of Medicinal Crop Science. 17:1-7.), 사염화탄소로 섬유화가 유도된 흰쥐 간에서 털부처꽃 뿌리 추출물의 항산화 및 섬유화저해 활성(Lee SE, Ahn TJ, Kim GS, Kim YO, Han HS, Seo JS, Chung HY, Park CB, Cha SW, Park HK and Seong NS. (2009). Antioxidative and anti-fibrotic properties of root extracts of Lythrum salicaria L. in CCL₄-induced liver fibrosis rat model. Korean Journal of Medicinal Crop Science. 17:243-250.)에 관해 보고되었다.

이와 같이 털부처꽃의 연구내용을 살펴보았을 때, 본 발명과 같이 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 대상으로 당 흡수를 저해하는 항당뇨 관련 효소 저해활성을 나타내는 보고나 항비만 활성을 다룬 연구는 아직 이루어지지 않고 있다.

본 발명의 목적은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물을 제공하고자 한다.

본 발명은 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물에 있어서, 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 조성물 전체 중량 대비 0.01∼99.99중량％ 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물을 제공할 수 있다.

본 발명의 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물의 주요 구성 성분인 털부처꽃 잎 에탄올 추출물은 탄수화물 저해효소 활성 억제, 지질대사관련 효소 활성 증가, 고지방식이와 동시 투여시 흰쥐의 체중 증가량 감소, 혈중 지질농도 감소, 복부지방 함량을 감소시키는 지질대사개선효과가 있어 당뇨 및/또는 비만에 대해 기능성을 갖는 의약품 및 건강기능식품 소재로서 산업화가 가능할 것으로 판단된다.

도 1은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물의 급여로 인한 흰쥐의 혈액 중 지질성분의 감소효과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 털부처꽃 잎 에탄올 추출물의 급여로 인한 흰쥐의 장기중량의 변화를 나타낸 그래프이다.

본 발명은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물을 나타낸다.

본 발명은 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물에 있어서, 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물을 나타낸다.

본 발명의 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물에서 털부처꽃 잎 에탄올 추출물은 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물 전체 중량 대비 0.01∼99.99중량％ 포함될 수 있다.

본 발명의 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물에서 털부처꽃 잎 에탄올 추출물은 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물 전체 중량 대비 0.1∼99.9중량％ 포함될 수 있다.

본 발명의 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물에서 털부처꽃 잎 에탄올 추출물은 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물 전체 중량 대비 1∼50중량％ 포함될 수 있다.

본 발명의 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물에서 털부처꽃 잎 에탄올 추출물은 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물 전체 중량 대비 5∼25중량％ 포함될 수 있다.

본 발명의 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물에서 털부처꽃 잎 에탄올 추출물은 분말화한 털부처꽃 잎에 에탄올을 첨가하고 추출하여 얻은 것을 사용할 수 있다.

본 발명의 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물에서 털부처꽃 잎 에탄올 추출물은 털부처꽃 잎 분말 1kg에 대하여 에탄올 10∼15ℓ을 첨가하고 20∼25℃에서 100∼300rpm으로 10∼24시간 동안 1∼3회 추출하여 얻은 것을 사용할 수 있다.

본 발명의 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물에서 털부처꽃 잎 에탄올 추출물은 털부처꽃 잎 분말에 저주파 처리를 한 다음 저주파 처리를 한 털부처꽃 잎 분말에 에탄올을 첨가하고 추출하여 얻은 것을 사용할 수 있다.

본 발명의 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물에서 털부처꽃 잎 에탄올 추출물은 털부처꽃 잎 분말을 20∼25℃에서 5∼10kHz으로 10분∼1시간 동안 저주파 처리를 한 다음 저주파 처리를 한 털부처꽃 잎 분말 1kg에 대하여 에탄올 10∼15ℓ을 첨가하고 20∼25℃에서 100∼300rpm으로 10∼24시간 동안 1∼3회 추출하여 얻은 것을 사용할 수 있다.

본 발명의 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 이외에 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하도록 하여 약학적 용도로 사용할 수 있는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물을 나타낸다.

본 발명의 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 이외에 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하도록 하여 산제, 과립제, 정제(tablet), 환(丸), 캡슐제(capsule), 현탁액, 에멀젼, 시럽 중에서 선택된 어느 하나의 경구형 제제 또는 주사제와 같은 비경구형 제제의 형태로 제형화되어 약학적 용도로 사용할 수 있는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물을 나타낸다.

상기에서 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 이외에 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하도록 하여 제형화할 경우 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제에는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등이 포함되며, 이러한 고형제제는 상기 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제로서 예를 들면 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 덱스트린(dextrin), 수크로오스(sucrose), 락토오스(lactose), 젤라틴, 솔비톨(sorbitol), 자일리톨(xylitol), 만니톨(mannitol), 만티톨(mantitol), 람니톨(rhamnitol), 이노시톨(Inositol), 에리스리톨(Erythritol), 파라티노스(paratinose), 쿠에르시톨(quercitol) 중에서 선택된 어느 하나 이상을 사용할 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제에는 멸균된 수용액, 현탁액, 유제, 동결건조 제제가 포함된다.

본 발명의 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 이외에 식품학적으로 허용되는 부형제를 포함하도록 하여 건강기능식품 용도로 사용할 수 있는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물을 나타낸다.

본 발명의 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 이외에 식품학적으로 허용되는 부형제를 포함하도록 하여 산제, 과립제, 정제(tablet), 환(丸), 캡슐제(capsule), 현탁액, 에멀젼, 시럽 중에서 선택된 어느 하나의 경구형 제제의 형태로 제형화되어 식품학적 용도로 사용할 수 있는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물을 나타낸다.

상기에서 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 이외에 식품학적으로 허용되는 부형제를 포함하도록 하여 제형화할 경우 보통 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제의 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 이러한 정제, 환제, 산제, 과립제 및/또는 캡슐제의 경구를 위한 고상 제제의 부형제로서 예를 들면 전분, 칼슘카보네이트(calcium carbonate), 덱스트린(dextrin), 수크로오스(sucrose), 락토오스(lactose), 젤라틴, 말토올리고당, 이소말토올리고당, 셀로올리고당, 프락토올리고당, 이눌로올리고당, 갈락토올리고당, 키토올리고당, 자일로올리고당, 트레할로스(trehalos), 솔비톨(sorbitol), 자일리톨(xylitol), 만니톨(mannitol), 만티톨(mantitol), 람니톨(rhamnitol), 이노시톨(Inositol), 에리스리톨(Erythritol), 파라티노스(paratinose), 쿠에르시톨(quercitol) 중에서 선택된 어느 하나 이상을 사용할 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 마그네슘 스테아레이트, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등이 해당되는데, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등이 포함될 수 있다.

본 발명의 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물에 대해 다양한 조건으로 실시한바, 본 발명의 목적을 달성하기 위해서는 상기에서 언급한 조건에 의해 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 조성물을 제공하는 것이 바람직하다.

이하 본 발명의 내용을 실시예 및 시험예를 통하여 구체적으로 설명한다. 그러나, 이들은 본 발명을 보다 상세하게 설명하기 위한 것으로 본 발명의 권리범위가 이들에 의해 한정되는 것은 아니다.

<실시예 1> 털부처꽃 잎 에탄올 추출물의 제조(Ⅰ)

털부처꽃 잎 에탄올 추출물의 제조에 사용한 시료는 2009년 5월 말에서 6월 초 사이에 생식 생장 전인 털부처꽃의 잎을 강원도 양구 대암산에서 수집하여 동결건조기(PVTFD10R, ILSHIN, Daejeon, Korea)로 동결건조하고 마쇄하여 털부처꽃 잎을 200메쉬(mesh)가 되도록 분말화한 후 사용하였다.

상기에서 얻은 털부처꽃 잎 분말 시료 1kg을 20리터(ℓ) 쉐이킹 플라스크(shaking flask)에 넣은 후, 에탄올 10리터(ℓ)를 첨가하여 상온(23±1℃)에서 교반기(EUROSTAR digital, IKA, Staufen, Germany)로 200rpm으로 교반시키면서 12시간 동안 2회 추출하였다.

상기에서 얻은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 여과지(No. 2, Whatman, Maidstone, England)가 깔려있는 부흐너 깔때기(Buchner funnel)를 통과시켜 잔재물을 제거한 후 감압여과하여 회전 진공 농축기(rotary vacuum evaporator)(N-21NS, EYELA, Tokyo, Japan)로 완전농축하였다. 완전농축물에 증류수 500㎖를 첨가하여 용해시킨 후, 동결건조하여 분말상태로 조제 후 -20℃의 냉동고에서 보관하면서 사용하였다

<실시예 2> 털부처꽃 잎 에탄올 추출물의 항당뇨 활성 검정

1. α-glucosidase 저해 활성 측정

상기 실시예 1에서 얻은 분말 상태의 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 에탄올에 녹여 1mg/㎖, 10mg/㎖, 100mg/㎖의 농도별로 조제한 시료 200㎕, yeast baker 기원의 α-글루코시다아제(α-glucosidase)(Sigma-Aldrich, Wyoming, USA) 200㎕, 0.2M potassium phosphate buffer (pH 6.8) 1㎖를 24-well plate에 넣고 405nm에서 흡광도를 측정하였다(Bai G, Wang D, Cao X, Xiao H, Geng P, Liu Q and Yang W. (2004). Screening α-glucosidase inhibitors in traditional chinese medicines. Acta scientiarum Naturalium Universitatis Nankaiensis. 37:98-102. ; Wang Z, Cai SR, He YL, Zhan WH, Chen CQ, Cui J, Wu WH, Wu H, Song W, Watanabe J, Kawabata J and Kurihara H. (1997). Isolation and identification of α-glucosidase inhibitors from Tochu-cha. Biosci Biotechnol Biochem. 61:177-178.).

실온에서 10분간 배양한 후 5mM pNPG(4-nitrophenyl-α-D-glucopyranoside) 200㎕를 가하여 37℃에서 20분간 반응시킨 뒤, 동일한 파장에서 흡광도를 측정하였고, 흡광도의 변화로부터 효소저해활성을 계산하였다. 양성대조군으로 아카보즈(acarbose)를 100mg/㎖, 1000mg/㎖, 10000mg/㎖의 농도로 제조하여 측정하였다.

2. α-amylase 저해 활성 측정

1％중량의 아가(agar)와 1중량％의 가용성 전분(옥수수 전분)을 증류수에 완전히 녹여 끓인 후, 증류수 1ℓ로 표선하였다. 121℃에서 15분간 멸균하여 20㎖씩 페트리 디시(petri dish)에 부어 준비한 플레이트(plate)에 각 100mg/㎖, 1,000mg/㎖, 10,000mg/㎖의 농도별로 조제한 시료 16.8㎕와 porcine pancreas 기원의 α-아밀레이즈(α-amylase) 13.2㎕(300 U/㎖)를 섞어 플레이트(plate)에 놓인 디스크 페이퍼(disc paper) 위에 각각 분주하였다(Houghton PJ and Soumyanath A. (2006). α-Amylase inhibitory activity of some Malaysian plants used to treat diabetes with particular reference to Phyllanthus amarus. Journal of Ethnopharmacology. 107:449-455.). 대조구는 시료 대신 증류수를 넣어 37℃에서 3일간 배양하였으며, I₂/KI(5mM I₂in 3％ KI) 4㎖을 가하여 15분간 발색시킨 후 다음의 식으로 저해율을 계산하였고, 각 시료는 3회 반복하여 평균하였다. 양성대조군으로 아카보즈(acarbose)를 시료와 같은 농도로 제조하여 측정하였다.

저해율(％)={(대조구의 면적-반응구의 면적)/대조구의 면적} × 100

3. 분석 결과

털부처꽃 잎 에탄올 추출물의 항당뇨 활성의 결과는 다음 표 1과 2에 나타낸 바와 같다.

털부처꽃 잎 에탄올 추출물의 α-amylase 저해 활성(％)

항목	농도(mg/㎖)	α-amylase 저해 활성(％)	IC₅₀ (㎍/㎖)
털부처꽃 잎 에탄올 추출물	100	-	5,250
	1,000	11.55±3.54
	10,000	94.60±1.20
양성대조군 (Acarbose)	100	-	5,794
	1,000	23.60±1.05
	10,000	80.15±0.23

털부처꽃 잎 에탄올 추출물의 α-Glucosidase 저해 활성(％)

항목	농도 (mg/㎖)	α-Glucosidase 저해 활성(％)	IC₅₀ (㎍/㎖)
털부처꽃 잎 에탄올 추출물	1	-	7.96
	10	63.33±2.60
	100	96.14±0.80
양성대조군 (Acarbose)	100	11.53±2.73	5,540
	1,000	31.17±0.23
	10,000	80.24±3.81

α-Amylase는 탄수화물의 α-D-(1,4)-glucan 결합을 분해하는 효소이고, α-glucosidase 소장에서 음식물 중의 전분을 포도당과 같은 단당으로 분해하여 흡수시키는 효소로서(Lee BB, Park SR, Han CS, Han DY, Park E, Park HS and Lee SC. (2008). Antioxidant activity and inhibition activity against α-amylase and α-glucosidase of Viola mandshurica extracts. Journal of Korean Society Food Science Nutrition. 37:405-409.), 소장의 α-amylase와 α-glucosidase를 저해함으로써 포도당의 흡수를 지연시킬 수 있어 α-amylase와 α-glucosidase의 저해활성은 혈당수치 상승억제의 지표로 사용된다(Oh SJ, Hong SS, Kim YH and Koh SC. (2008). Screening of biological activities in fern plants native to Jeju island. Korean Journal of Plant Resources. 21:12-18.).

상기 표 1과 2에서 털부처꽃 잎 에탄올 추출물의 α-amylase와 α-glucosidase 저해활성을 측정한 결과, IC₅₀값은 각각 5,250㎍/㎖, 7.96㎍/㎖로, 대조구인 acarbose의 IC₅₀값 5,794㎍/㎖, 5,540㎍/㎖ 보다 낮게 나왔다. 이러한 결과는 아카보즈(acarbose) 보다 매우 높은 활성을 나타내고 있어 향후 기존 당뇨치료제를 대체할 수 있는 천연물 제제로서의 개발 가능성이 높다고 할 수 있겠다.

<실시예 3> 털부처꽃 잎 에탄올 추출물의 항비만 관련 효소 활성 검정

1. acyl-CoA synthetase(ACS) 활성 측정을 위한 실험동물의 간조직으로부터 효소액 조제 및 활성 측정

미국 Harlan Spragueb Dawely Inc. 사로부터 유전적으로 비만을 유도시킨 9주령 Zucker fatty 흰쥐(fa/fa) 7마리를 구입하여 일주일간 적응기간을 두었다. 동물 사육실 실험조건은 온도 21∼26℃, 상대습도 45∼55％로 유지 시켰으며, 조명은 12시간 간격으로 조절하였으며, 물과 사료는 자유롭게 먹도록 하였다.

일주일 후 상기 흰쥐에 Avertin(0.8mg/g)을 복강 투여하여 마취시킨 후 복부를 절개하여 간조직 3g을 적출하여 buffer A(0.25M sucrose, pH 7.4)를 이용하여 혈액 및 이물질을 씻어서 제거한 뒤 이물질을 제거한 간조직에 buffer B(150mM KCl, 5mM EDTA, 5mM MgCl₂, 10mM 2-mercaptoethanol)를 1:10(w/v) 비율로 첨가한 후, 균질기를 이용하여 900rpm에서 5분간 균질하였다.

상기의 균질액을 원심분리기(MF600, Hanil, Incheon, Korea)로 600g에서 10분간 1차 원심분리 하여 1차 상등액을 얻은 뒤 상기 1차 상등액에 상기의 buffer B를 1차 상등액 중량 대비 1배 만큼 넣고 원심분리기(JA-20, Beckman Coulter, Fullerton, USA)로 8,000g에서 10분간 2차 원심분리 하여 침전물을 제거하여 2차 상등액을 얻은 다음 이 2차 상등액을 원심분리기(70Ti, Beckman Coulter, Fullerton, USA)로 105,000g에서 70분간 3차 원심분리 하여 3차 상등액을 취하여 cytosol 분획물로 사용하였다.

2. Acyl-CoA synthetase(ACS) 활성 측정

Acyl-CoA synthetase(ACS)의 활성측정은 Shimizu et al.(Shimizu S, Inoue K, Tani Y and Yamada H. (1979). Enzymatic microdetermination of serum free fatty acids. Analytical Biochemistry. 98:341-345.)의 방법으로 측정하였다.

즉, E-tube에 Reagent A(200mM Tris Buffer with 20mM Magnesium Chloride, 2mM Ethlenediaminetetraactic acid(EDTA), 0.25％(w/v) triton X-100(pH 8.1 at 25℃) 900㎕, 실시예 1에서 얻은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 분말을 에탄올에 용해하여 얻은 1mg/㎖, 10mg/㎖ 농도의 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 시료(sample) 10㎕, Reagent C(14.5mM Adenosine 5'-Triphosphate solution(ATP)) 25㎕, Reagent D(42.7mM Phosphoenol Pyruvate solution(PEP) in Reagent B(100mM Tris buffer)) 25㎕, Reagent E(72units/㎖ Myokinase Enzyme solution(MK) in Reagent B) 25㎕, Reagent F(120units/㎖ of PK/LDH Mixed Enzymes in Reagent B) 25㎕, Reagent G(49 mM Coenzyme A(CoA) in Reagent B) 50㎕, Reagent H(5.3mM β-Nicotinamide Adenine Dinucleotide, Reduced From Solution(β-NADH)) 50㎕를 넣고 섞은 후 상기 1에서 얻은 cytosol 분획물 100㎕와 Reagent J(0.98mM sodium oleic solution in Reagent I(0.25％ triton X-100)) 100㎕를 넣고 섞은 후 큐벳에 옮겨 340nm에서 15분 동안 NADH의 산화를 통하여 Acyl-CoA synthetase의 활성을 측정하였다.

3. Lipoprotein lipase(LPL) 활성 측정

Lipoprotein lipase(LPL)는 Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA)에서 enzyme solution을 구입하여 사용하였다. 활성측정은 Quinn et al.(Quinn DM, Shirai K, Jackson RL and Harmony JK. (1982). Lipoprotein lipase-catalyzed hydrolysis of water-soluble p-nitrophenyl esters. Inhibition by apolipoprotein C-Ⅱ. Biochemistry. 21:6872-6879.)의 방법으로 Reagent K(100mM sodium phosphate buffer with 150mM Sodium chloride and 0.5％(v/v) Triton X-100, pH 7.2 at 37℃) 800㎕에 실시예 1에서 얻은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 분말을 에탄올에 용해하여 얻은 1mg/㎖, 10mg/㎖ 농도의 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 시료(sample) 100㎕을 넣고, lipoprotein lipase enzyme solution 100㎕와 Reagent M[50mM p-Mitrophenyl Butyrate(PNPB) in Reagent L(Acetonitrile)] 10㎕로 발색시켜 570 nm에서 비색 정량하여 lipoprotein lipase의 활성을 측정하였다.

4. Carnitine acyltransferase(CAT) 활성 측정

Carnitine acyltransferase(CAT)는 Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA)에서 enzyme solution을 구입하여 사용하였다. 활성측정은 Bergmyer et al.(Bergmeyer HU, Gawehn K and Grassl M. (1974). Enzymes as biochemical reagents. In Methods of Enzymatic Analysis. Bergmeyer HU, ed. Academic Press, New York, USA. Vol Ⅰ, p 438-444.)의 방법으로 E-tube에 Reagent N(100mM Tris-HCl Buffer pH 8.0 at 25℃), Reagent O(11mM Coenzyme A), Reagent P(83.4mM Acetyl-DL-Carnitine)를 Reagent N:Reagent O:Reagent P=53:1:4(v/v)가 되도록 혼합한 후 이 혼합물 650㎕을 큐벳에 넣고 실시예 1에서 얻은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 분말을 에탄올에 용해하여 얻은 1mg/㎖, 10mg/㎖ 농도의 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 시료(sample) 10㎕와 Carnitine acetyl transferase Enzyme solution(0.6units/㎖) 50㎕을 넣은 후 233nm에서 5분간 흡광도를 측정하면서 Carnitine acetyl transferase의 활성을 측정하였다.

5. 실험결과

털부처꽃 에탄올 추출물이 항비만과 관련된 주요 효소들인 acyl coenzyme A synthetase(ACS), lipoprotein lipase(LPL) 및 carnitine-acetyl transferase(CAT)에 미치는 영향을 알아보았다(표 3 참조).

ACS는 세포내로 유입된 지방산을 acyl-CoA로 전환시키며 이때 형성된 acyl-CoA는 다시 미토콘드리아로 유입되어 catabolic pathway를 거쳐 β-oxidation 되어서 분해된다(Ryu MH, Daily JW and Cha YS. (2005). Effect of starvation on hepatic acyl-CoA synthetase, carnitine palmitoyltransferase-Ⅰ and acetyl-CoA carboxylase mRNA levels in rats. Nutrition. 21:537-542.; Chiu KM, Schmidt MJ, Shug AL, Binkley N and Gravenstein S. (1997). Effect of dehydroepiandrosterone sulfate on carnitine acetyl transferase activity and L-carnitine levels in oophorectomized rats. Lipids and lipid metabolism. Biochimica et Biophysica Acta. 1344:201-209.; Lee HJ, Chung MJ, Kim DJ and Choe M. (2009). Effects of Oenanthe javanica, Coicis lachryma-jobi L. var. and Plantaginis asiatica L. water extracts on activities of key enzyme on lipid metabolism. Journal of Korean Society Food Science Nutrition. 38:1516-1521.). 비만 모델군인 Zucker fatty 흰쥐(fa/fa)에서 ACS 활성은 대조군과 비교하여 유의적으로 증가하였다. 대조군을 100％로 보았을 때 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 10mg/㎖에서 206％의 높은 ACS활성을 나타내었다. 이러한 결과는 털부처꽃 잎 에탄올 추출물이 ACS 활성을 증가시킴으로 지방산이 미토콘드리아 내막으로 이동하는 것을 촉진 시켜 더욱 많은 에너지원으로 사용하게 하여 비만 개선에 효과를 줄 것으로 사료된다.

LPL은 혈중 지방산을 세포내로 전달하는 효소로써 조직의 세포에서 합성되어져 내피세포 표면에 존재하고 chylomicron과 very low density lipoprotein(VLDL)의 triglyceride를 가수분해한다(Lee SK and Kim OS. (2007). Lipoprotein lipase hind 3 polymorphism, blood lipid levels and obesity in korean women. Journal of the Korean Society for Endocrinology 34:133.). LPL에 의해 유리지방산이 지방조직내로 유입되고 중성지방의 형태로 저장된다(Eckel RH. (1989). Lipoprotein lipase: A multifunctional enzyme relevant to common metabolic discases. New England Journal of Medicine. 320:1060-1067.). Lee et al.(Lee JJ, Choi MS, Chung CS and Choi BD. (2003). Effect of food restriction on rat adipose tissue lipoprotein lipase activity and lipogenesis. Korean Journal of Exercise Nutrition. 7:135-141.)은 LPL이 지방의 분해대사에 직접 관련되지는 않지만 LPL 활성이 저하됨으로써 지방분해에 영향을 미치고 체중 감소도 일어난다고 보고하였다. LPL의 활성을 측정한 결과 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 처리군에서 대조군과 비교하여 유의적인 차이가 없었다.

CAT는 acyl-CoA를 미토콘드리아 막 내부로 전달하는 효소로 지방산을 mitochondria 내부로 유입시키는 역할을 한다. ACS에 의해 형성된 acyl-CoA는 아실카르니틴으로 변환되고 이 유도체는 CAT에 의해 내막으로 이동하게 되고 미토콘드리아 세포질에서 다시 acyl-CoA로 변환되어 지방산 산화에 사용된다(Lee HJ, Chung MJ, Kim DJ and Choe M. (2009). Effects of Oenanthe javanica, Coicis lachryma-jobi L. var. and Plantaginis asiatica L. water extracts on activities of key enzyme on lipid metabolism. Journal of Korean Society Food Science Nutrition. 38:1516-1521.). CAT 활성에 미치는 영향을 알아본 결과, 털부처꽃 에탄올 잎 추출물 1 mg/㎖ 처리군에서 대조군과 비교하여 17.1％ 유의적으로 증가함을 알 수 있었다.

털부처꽃 잎 에탄올 추출물의 지질대사에 관여하는 효소활성

실험군	LPL (Unit/mg protein)	ACS (Unit/mg protein)	CAT (Unit/mg protein)
대조군	5.26±0.24^‡aㄷ	6.24±0.46^a	35.16±2.51^b
털부처꽃 잎 에탄올 추출물(1mg/㎖)	6.50±0.08^b	7.49±2.12^ab	11.52±4.44^a
털부처꽃 잎 에탄올 추출물(10mg/㎖)	5.53±0.14^a	12.86±2.09^b	41.16±0.43^b

<실시예 4> 털부처꽃 잎 에탄올 추출물의 흰쥐에서의 항비만 활성 검정

1. 실험동물 및 사육 환경

실험동물은 Sprague Dawley(SD)계 3주령 웅성 흰쥐 40마리를 (주)오리엔트바이오(대한민국)에서 구입하여 1주일간 rat용 일반사료(5L79 PMI Inc., St. Louis, USA)로 적응시킨 후 실험에 사용하였다. 실험기간 동안 실험동물은 습도 50±5％, 온도 24±2℃ 유지되는 동물실험실에서 사육하였으며, 물과 사료는 자유로이 섭취할 수 있도록 공급하였다.

2. 실험군 분리 및 식이

1주일간 실험실에서 적응된 실험동물의 평균 체중이 105g∼203g이 되도록 각 군당 10마리씩 정상군(Normal), 대조군(Control), 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 처리군(Treatment), 양성대조군(Positive control)의 총 4군으로 나누어 실험에 사용하였고 군 분리, 투여물질, 투여물질의 용량은 표 4와 같다.

4군 분리 후 대조군과 실시예 1에서 얻은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 처리군, 양성대조군(가르시니아 투여군, 중외제약)에는 고콜레스테롤 식이를 위하여 AIN 76 사료 시험 개시일부터 시험 종료시점인 6주간 자유 급이 방법으로 공급하였으며, 정상군은 5L79 사료를 시험 개시일부터 시험 종료시점인 6주간 자유 급이 방법으로 공급하였다.

실시예 1에서 얻은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 처리군과 양성대조군은 사료 급이와 동일한 기간동안 표 4의 용량으로 경구 투여하였다.

실험군 분리 및 식이.

실험군	식이	처리물질	(mg/kg, oral)
정상군(Normal)	5L79	-	-
대조군(Control)	AIN-76	-	-
털부처꽃 잎 에탄올 추출물 처리군(Treatment)	AIN-76	Lythrum salicaria L.	250
양성대조군 (Positive control)	AIN-76	Garcinia Cambogia extracts	166

3. 체중 및 식이섭취량의 변화

체중, 음수섭취량 및 사료섭취량은 시험 개시일과 개시 후 매주 1회 간격으로 측정하였다.

4. 혈액 체취 및 혈액생화학적 검사

혈액 채취는 시험 물질 투여 3주 후에 ether 흡입 마취 후 안와 정맥에서 1.2∼1.5㎖을 채취하였으며, 시험종료일에는 Zoletil : Rumpun(4:1, v/v)으로 마취 후 복대정맥에서 2㎖ 채혈하여 3,000rpm에서 10분간 원심분리하여 혈청 및 혈장을 분리하였다. 분리한 혈청 중 총 콜레스테롤(total cholesterol), 트리글리세라이드(triglyceride), HDL(high density lipoprotein-cholesterol, LDL(low density lipoprotein-cholesterol)를 자동혈청분석기(BT1000, Biotechnical Instrument, Rome, Italy)를 이용하여 분석하였다.

5. 장기중량 및 지방조직 무게 측정

시험 종료일 복대정맥 채혈 후 방혈을 실시하였으며 간 중량, 신장 중량, 복강 내의 지방세포 조직의 중량을 측정하기 위해 적출하였으며 흡수지에 체액 및 혈액을 제거 후 각각의 중량을 측정하였다.

6. 실험결과

(1) 체중증가량, 십이섭취량 및 식이효율의 변화

고지방식이와 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 6주간 급여를 실시한 이후 각 실험군의 체중증가량(Body weight gain), 식이섭취량(Food intake) 및 식이효율(체중증가량/식이섭취량, FER)을 비교한 결과는 표 5와 같다.

시험종료시 증체량이 가장 증가한 군은 고지방식이만을 실시한 대조군으로 7.66g/day이었고, 정상군은 6.40g/day이었다. 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 처리군의 체중증가량은 7.00g/day으로 정상군(Normal)에 비해 유의적으로 높았으나, 대조군(Control)에 비해 유의적으로 낮았다.

식이효율(FER)은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 처리군(Treatment)이 0.33으로 정상군(Normal), 대조군(Control), 양성대조군(Positive control) 등의 모든 실험군에서 유의적으로 가장 높게 나타났다.

실험군의 체중증가량, 십이섭취량 및 식이효율

실험군	Body weight gain (g/day)	Food intake (g/day)	FER^†
정상군(Normal)	6.40±0.53^‡aㄷ	28.28±4.97^b	0.23±0.02^a
대조군(Control)	7.66±0.57^c	26.43±4.24^b	0.29±0.02^b
털부처꽃 잎 에탄올 추출물 처리군(Treatment)	7.00±0.28^b	20.95±2.33	0.33±0.01^d
양성대조군 (Positive control)	6.61±0.43^ab	21.46±3.08^a	0.31±0.02^c

(2) 혈액생화학적 검사

털부처꽃 잎 에탄올 추출물의 급여로 인한 흰쥐의 혈액 중 지질성분의 변화는 도 1과 같다.

총콜레스테롤(total cholesterol)의 변화는 고지방식이 급여가 이루어진 후에는 군간에 다소 차이를 보이지만 유의수준(p<0.05) 이하의 변화였다. 그러나 6주후의 변화는 명확하게 나타나 정상군 57.75mg/dl에 비하여 대조군(Control)의 혈중지질농도는 74.13mg/dl로 증가하였다. 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 처리군(Treatment)은 48.88mg/dl로 양성대조군(Positive control) 54.00mg/dl 보다 유의적으로 낮은 수치로 정상군과 같은 수준이었다.

6주 후의 혈청 중성지방(triglyceride)의 농도는 정상군의 경우 72.20mg/dl이었다. 고지방식이군인 대조군은 97.50mg/dl으로 증가하였고, 대조군과 유의적으로 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 처리군은 55.20mg/dl으로 감소하였다.

HDL-CHO의 경우 3주째의 결과는 개체간의 큰 차이를 보이지 않고 대조군과의 유의적인 차이를 보이지는 않았다. 시험 종료시 고지방식이를 실시한 실험군인 대조군에서 HDL-CHO은 정상군에 비하여 다소 증가하는 경향을 보이고 있으나 유의적인 변화는 관찰되지 않았다.

LDL-CHO의 변화는 고지방식이 6주의 결과는 정상군이나 대조군에 비하여 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 처리군에서 다소 증가하는 경향이 나타나는데 통계적인 변화는 관찰되지 않았다.

(3) 장기중량 및 복부지방의 중량 변화

털부처꽃 잎 에탄올 추출물의 급여로 인한 흰쥐의 간(liver), 신장(kidney), 복강내 지방 조직(adipose tissue)의 무게를 조사한 결과는 도 2와 같다.

간 중량의 경우 고지방식이만을 실시한 대조군(Control)에서 18.27g으로 정상군(Normal) 11.8g에 비하여 약 1.5배 가량 증가하여 식이에 따른 중량의 차이를 보였다. 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 처리군(Treatment)은 이와는 달리 대부분의 경우에서 9.54g로 정상군과 유사하거나 오히려 무게가 낮게 나타나는 경향을 보였다.

신장의 중량 또한 간 중량의 군간 차이가 거의 유사하게 나타났다. 복부지방의 군간 차이를 본 결과, 간의 중량변화와 일치하는 결과를 얻었다. 고지방식이만을 실시한 대조군의 경우 총 복부지방의 중량은 20.67g으로 정상군 11.96g에 비하여 약 1.8배 가량 증가하여 고지방식이에 의한 복부지방조직의 형성이 촉진됨을 알 수 있었다. 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 처리군(Treatment)은 14.63g으로 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 투여에 의한 지방조직 감소를 관찰할 수 있었다.

<적용예 1> 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 약학적 조성물 제조(Ⅰ)

상기 실시예 1에서 얻은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 5중량％ 및 약품학적으로 사용하는 부형제로서 옥수수 전분 70중량％, 칼슘카보네이트(calcium carbonate) 5중량％, 락토오스(lactose) 10중량％, 수크로오스(sucrose) 10중량％를 혼합한 다음 과립화하여 과립제 제형의 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제조하였다.

<적용예 2> 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 약학적 조성물 제조(Ⅱ)

상기 실시예 1에서 얻은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 10중량％ 및 약품학적으로 사용하는 부형제로서 옥수수 전분 50중량％, 칼슘카보네이트(calcium carbonate) 5중량％, 락토오스(lactose) 10중량％, 수크로오스(sucrose) 10중량％, 마그네슘 스테아레이트 2.5중량％, 탈크 2.5중량％를 혼합한 다음 정제기로 정제하여 정제 제형의 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제조하였다.

<적용예 3> 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 식품학적 조성물 제조(Ⅰ)

상기 실시예 1에서 얻은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 5중량％ 및 약품학적으로 사용하는 부형제로서 옥수수 전분 70중량％, 락토오스(lactose) 10중량％, 수크로오스(sucrose) 10중량％, 솔비톨 5중량％를 혼합한 다음 산제화하여 산제 제형의 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 식품학적 조성물을 제조하였다.

<적용예 4> 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 식품학적 조성물 제조(Ⅱ)

상기 실시예 1에서 얻은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 10중량％ 및 약품학적으로 사용하는 부형제로서 옥수수 전분 65중량％, 락토오스(lactose) 10중량％, 수크로오스(sucrose) 10중량％, 젤라틴 5중량％를 혼합한 다음 연질 캡슐제로 캡슐화하여 캡슐제 제형의 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 식품학적 조성물을 제조하였다.

<실시예 5> 털부처꽃 잎 에탄올 추출물의 제조(Ⅱ)

상기에서 얻은 털부처꽃 잎 분말을 23±1℃에서 7.5kHz으로 1시간 동안 저주파 처리를 한 다음 상기의 저주파 처리를 한 털부처꽃 잎 분말 시료 1kg을 20리터(ℓ) 쉐이킹 플라스크(shaking flask)에 넣은 후 에탄올 10리터(ℓ)를 첨가하고 상온(23±1℃)에서 교반기(EUROSTAR digital, IKA, Staufen, Germany)로 200rpm으로 교반시키면서 12시간 동안 2회 추출하였다.

상기에서 얻은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 여과지(No. 2, Whatman, Maidstone, England)가 깔려있는 부흐너 깔때기(Buchner funnel)를 통과시켜 잔재물을 제거한 후 감압여과하여 회전 진공 농축기(rotary vacuum evaporator)(N-21NS, EYELA, Tokyo, Japan)로 농축하여 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 얻었다.

<적용예 6> 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 약학적 조성물 제조(Ⅲ)

상기 실시예 5에서 얻은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 5중량％ 및 약품학적으로 사용하는 부형제로서 옥수수 전분 70중량％, 칼슘카보네이트(calcium carbonate) 5중량％, 락토오스(lactose) 10중량％, 수크로오스(sucrose) 10중량％를 혼합한 다음 과립화하여 과립제 제형의 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제조하였다.

<적용예 7> 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 약학적 조성물 제조(Ⅳ)

상기 실시예 5에서 얻은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 10중량％ 및 약품학적으로 사용하는 부형제로서 옥수수 전분 50중량％, 칼슘카보네이트(calcium carbonate) 5중량％, 락토오스(lactose) 10중량％, 수크로오스(sucrose) 10중량％, 마그네슘 스테아레이트 2.5중량％, 탈크 2.5중량％를 혼합한 다음 정제기로 정제하여 정제 제형의 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 약학적 조성물을 제조하였다.

<적용예 8> 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 식품학적 조성물 제조(Ⅲ)

상기 실시예 5에서 얻은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 5중량％ 및 약품학적으로 사용하는 부형제로서 옥수수 전분 70중량％, 락토오스(lactose) 10중량％, 수크로오스(sucrose) 10중량％, 솔비톨 5중량％를 혼합한 다음 산제화하여 산제 제형의 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 식품학적 조성물을 제조하였다.

<적용예 9> 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 식품학적 조성물 제조(Ⅳ)

상기 실시예 5에서 얻은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 10중량％ 및 약품학적으로 사용하는 부형제로서 옥수수 전분 65중량％, 락토오스(lactose) 10중량％, 수크로오스(sucrose) 10중량％, 젤라틴 5중량％를 혼합한 다음 연질 캡슐제로 캡슐화하여 캡슐제 제형의 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 당뇨, 비만의 예방 및 치료용 식품학적 조성물을 제조하였다.

상술한 바와 같이, 본 발명의 바람직한 실시예, 적용예를 참조하여 설명하였지만 해당 기술 분야의 숙련된 당업자라면 하기의 특허청구범위에 기재된 본 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있음을 이해할 수 있을 것이다.

Claims

비만의 예방 및 치료용 조성물에 있어서,
털부처꽃의 줄기에 있는 잎을 분말화한 털부처꽃 잎 분말을 20∼25℃에서 5∼10kHz으로 10분∼1시간 동안 저주파 처리를 한 다음 저주파 처리를 한 털부처꽃 잎 분말 1kg에 대하여 에탄올 1∼5ℓ을 첨가하고 20∼25℃에서 100∼300rpm으로 10∼24시간 동안 1∼3회 추출하여 얻은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물을 포함하는 것을 특징으로 하는 비만의 예방 및 치료용 조성물.
제1항에 있어서,
털부처꽃 잎 에탄올 추출물은 비만의 예방 및 치료용 조성물 전체 중량 대비 0.01∼99.99중량％ 포함되는 것을 특징으로 하는 비만의 예방 및 치료용 조성물.
삭제
삭제
제1항에 있어서,
조성물은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 이외에 약학적으로 허용되는 부형제를 포함하도록 하여 약학적 용도로 사용할 수 있는 비만의 예방 및 치료용 조성물.
제1항에 있어서,
조성물은 털부처꽃 잎 에탄올 추출물 이외에 식품학적으로 허용되는 부형제를 포함하도록 하여 건강기능식품 용도로 사용할 수 있는 비만의 예방 및 개선용 조성물.