KR101201921B1

KR101201921B1 - 쓴 메밀 새싹추출물을 함유하는 슬리밍 화장료 조성물 및 그 제조방법

Info

Publication number: KR101201921B1
Application number: KR1020100009534A
Authority: KR
Inventors: 천종우; 이유리; 최성규; 이현상; 김윤정
Original assignee: (주)에이씨티
Priority date: 2010-02-02
Filing date: 2010-02-02
Publication date: 2012-11-15
Also published as: KR20110089995A

Abstract

본 발명은 쓴 메밀 새싹추출물을 함유하는 슬리밍 화장료 조성물에 관한 것으로서, 구체적으로는 쓴 메밀 새싹추출물을 유효성분으로 함유하여 지방세포분화 저해활성이 우수하고, 피부탄력을 증진하는 슬리밍 화장료 조성물의 제조에 관한 것이다. 본 발명은 쓴 메밀 새싹추출물에 풍부하게 포함되어 있는 플라보노이드, 특히 지방합성을 저해하고, 지방세포의 분화를 위축시켜 성숙한 지방세포의 증식을 조절하는 퀘르세틴 성분을 피부에 직접 적용함으로써 국부비만을 해소하고 피부탄력을 개선하는 슬리밍 화장료 조성물의 제조에 유용하게 사용될 수 있다.

Description

쓴 메밀 새싹추출물을 함유하는 슬리밍 화장료 조성물 및 그 제조방법{SLIMMING COSMETIC COMPOSITIONS CONTAINING FAGOPYRUM TATARICYM SPROUT EXTRACTS AND PREPARING METHOD THEREOF}

본 발명은 쓴 메밀 새싹추출물을 함유하는 슬리밍 화장료 조성물에 관한 것으로서, 구체적으로는 쓴 메밀 새싹추출물을 유효성분으로 함유하여 지방세포분화 저해활성이 우수하고, 피부탄력을 증진하는 슬리밍 화장료 조성물의 제조에 관한 것이다.

생활수준의 향상으로 건강과 미용에 관한 관심이 높아지면서, 기본적인 화장기능 외에 체중조절, 피부탄력개선 및 체형관리에 도움을 주는 기능성 제품에 대한 관심이 높아지고 있다.

인체의 피부는 표피, 진피 및 피하지방층으로 이루어져 있다. 진피 아래에 존재하는 피하지방층은 주로 지방세포로 구성되어 있는데, 지방세포는 생체 내에서 에너지를 축적하거나 방출하는 역할을 담당한다. 에너지의 공급이 수요보다 많은 경우에는 에너지가 지방세포 내에 중성지방(triglycerides) 으로 저장되었다가, 필요할 때에는 다시 글리세롤(glycerol)과 지방산(fatty acids)으로 분해되어 혈액을 통해 공급된다. 비만은 이 과정의 불균형으로 인하여 과도한 에너지의 축적이 일어날 때 발생하는 것으로, 과잉 에너지가 지방질의 형태로 축적되어 지방세포가 커지거나 그 수가 증가하는 현상에 기인하는 것이다. 이러한 과도한 지방의 축적은 고혈압, 당뇨 등의 질병을 유발하여 건강상의 문제를 야기한다. 또한 이러한 지방의 축적은 주로 허벅지, 복부, 팔뚝과 같은 일부 신체부위에 이루어져 체형의 변화를 가져오며, 운동이나 식이요법에 의해서도 쉽게 분해되지 않으므로 미용상으로도 문제가 된다.

셀룰라이트(cellulite)란 여성의 허벅지, 엉덩이, 복부에 주로 발생하는 '오렌지 껍질 모양'의 피부 변화를 말한다. 눈으로 보거나 만져보았을 때 피부표면이 울퉁불퉁하며, 피부 깊숙이 결절이 만져지거나 피부가 탄력이 없고 다른 부위의 피부보다 차갑게 느껴지기도 한다. 모세혈관과 미세동맥의 변화에 의해 지방세포 사이의 삼출액과 부종이 발생하고, 부종에 의해 피부조직의 그물망구조가 불규칙적으로 과형성 및 비후되며, 콜라겐 섬유들이 주위의 지방세포 그룹에 같이 결합하여 미세결절을 만든 후에, 이런 미세결절들이 서로 합해짐으로써 거대결절을 생성하는 과정을 통해 셀룰라이트가 생긴다고 생각된다. 즉, 미세혈액순환이나 림프순환의 장애에 의해 과도한 체액과 지방이 피하 부위에 침투함으로써 지방과 결합조직이 치밀하게 변화한 것이 셀룰라이트이다. 셀룰라이트는 질환이라기보다는 정상적인 피부 태의 범주로 보기 때문에 특별히 치료할 필요는 없지만, 미용적인 목적으로 교정이 필요할 수 있다. 미용적인 목적으로 셀룰라이트를 치료하기 원할 때는 전리요법(iontophoresis, 전류를 통해 약물 이온을 피부나 조직으로 침투시키는 치료법), 초음파 치료, 온열 요법, 압박 요법, 마사지 요법, 지방분해전기침 등의 다양한 치료 방법들이 시도되고 있다. 또 지방분해 효과가 있는 메틸산틴계 약물이나 미세혈액순환을 도와주는 약물들을 복용하거나 도포하는 것이 어느 정도 셀룰라이트를 완화시켜 줄 수도 있다고 알려져 있다.

이에 따라 국소비만상태의 개선, 즉 지방세포내의 과도한 중성지방을 감소시키고, 셀룰라이트를 제거하고 피부를 탄력있게 바꾸어 주는 슬리밍화장품이 개발되어 왔다. 미국 특허 제 5,215,759호에서는 카페인, 테오필린, 젖산나트륨 등의 성분을 이용하여 슬리밍 효과를 부여한 제품이 개시되어 있으며, 한국 특허공개 제2006-0129890호에는 카페인을 포접하여 안정화시킨 나노리포좀을 포함하는 하이드로좀 제형의 슬리밍 화장료가 개시되어 있다. 그러나 카페인 및 그 유도체 등의 경우에도 비록 효과는 있으나 그 정도가 미미하여 슬리밍제로서 효과가 우수하면서 친자연적인 천연물 소재의 개발이 요구되어 왔다.

본 발명자들은 천연물 가운데 슬리밍효과가 우수한 천연물에 대한 연구 중에 쓴 메밀의 새싹추출물 또는 이의 효소반응물이 지방생성저해 및 피부탄력개선에 효과적임을 확인하여 본 발명을 완성하였다.

본 발명은 쓴 메밀 새싹추출물을 유효성분으로 함유하여 지방세포분화 저해활성이 우수하고, 피부탄력을 증진하는 슬리밍 화장료 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

또한, 본 발명은 상기 슬리밍 화장료 조성물의 제조방법을 제공하는 것을 다른 목적으로 한다.

상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명에 따르면, 쓴 메밀 새싹추출물을 화장료조성물 총중량에 대해서 0.005～50중량%, 바람직하게는 0.01～20중량% 함유하는 슬리밍 화장료조성물이 제공된다.

바람직하게는 상기 쓴 메밀 새싹추출물은 당결합분해 효소처리된 것 또는 유산균 발효된 것이다.

상기 다른 목적을 달성하기 위하여 본 발명에 따르면,

건조된 쓴 메밀 새싹을 물, 에탄올, 메탄올, 부탄올, 에테르, 에틸아세테이트 및 클로로포름으로 이루어지는 군으로부터 선택된 적어도 하나의 용매로 추출하는 쓴 메밀 새싹추출물 제조단계;

상기 쓴 메밀 새싹추출물을 용매에 용해시키고 당결합 분해효소를 첨가하는 효소첨가단계;

상기 효소가 첨가된 추출물을 교반하면서 효소반응시켜 효소반응에 의한 쓴 메밀 새싹추출물을 제조하는 단계; 및

상기 당결합 분해효소 처리된 쓴 메밀 새싹추출물을 화장료조성물 총중량에 대해서 0.005～50중량% 첨가하여 화장료 조성물을 제조하는 단계를 포함하는 쓴 메밀 새싹추출물 함유 슬리밍 화장료 조성물의 제조방법이 제공된다.

상기 효소반응은 반응pH 3.5 ～ 5.0, 반응온도 25 ～ 50℃ 및 반응시간 12 ～ 60시간의 조건하에서 수행되는 것이 바람직하다.

상기 당결합 분해 효소로는 글루코시다제(glucosidase), 자일로시아다제(xylosidase), 자일라나제(xylanase), 셀룰라제(cellulase), 갈락토시다제(galactosidase), 펙티나제(pectinase) 및 나린지나아제(naringinase)로 이루어지는 군으로부터 선택된 적어도 하나의 것이 사용될 수 있으며, 더욱 바람직하게는 펙티나제(pectinase)가 사용될 수 있다. 상기 효소반응을 통해 쓴 메밀 새싹추출물에 함유된 루틴 배당체의 당을 선택적으로 제거함으로써 퀘르세틴 성분이 강화된 쓴 메밀 새싹추출물이 제조된다.

본 발명의 다른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에 따르면 건조된 쓴 메밀 새싹을 물, 에탄올, 메탄올, 부탄올, 에테르, 에틸아세테이트 및 클로로포름으로 이루어지는 군으로부터 선택된 적어도 하나의 용매로 추출하는 쓴 메밀 새싹추출물 제조단계;

상기 쓴 메밀 새싹추출물에 유산균을 접종하고 배양하여 발효시키는 유산균발효 쓴 메밀 새싹추출물 제조단계; 및

상기 유산균 발효 쓴 메밀 새싹추출물을 화장료조성물 총중량에 대해서 0.005～50중량% 첨가하여 화장료 조성물을 제조하는 단계를 포함하는 쓴 메밀 새싹추출물 함유 슬리밍 화장료 조성물의 제조방법이 제공된다.

상기 유산균발효는 약 37℃에서 12～72시간 진행하여 이루어진다. 상기 유산균은 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophillus), 락토바실러스 불가리쿠스(L. bulgaricus), 락토바실러스 컨푸수스(L. confusus), 락토바실러스 루테리(L. luteri), 락토바실러스 카제이(L. casei), 비피도박테리움 브레이브(B. breve), 비피도박테리움 인판티스(B. infantis), 비피도박테리움 비피덤(B. bifidum), 비피도박테리움 써모필럼(B. thermophyllum), 스트렙토코코스 페이스칼리스(Str.facecalis) 및 스트렙토코코스 써모필러스(Str. thermophillus)로 이루어지는 군에서 선택된 적어도 하나이다.

본 발명에 따른 쓴 메밀 새싹추출물을 유효성분으로 함유하는 슬리밍 화장료 조성물은 지방세포분화 저해활성, 셀룰라이트제거 및 피부탄력개선에 우수한 효과를 나타내므로 허벅지, 복부 등의 부분비만을 개선하는 슬리밍 화장료로 유용하게 사용될 수 있다.

본 발명은 쓴 메밀 새싹추출물에 풍부하게 포함되어 있는 플라보노이드, 특히 지방합성을 저해하고, 지방세포의 분화를 위축시켜 성숙한 지방세포의 증식을 조절하는 퀘르세틴 성분을 피부에 직접 적용하여 국부비만을 해소하는 것에 특징이 있다.

종래 메밀을 차나 식품으로 섭취함으로써 체중감소효과를 얻으려는 시도가 있었으나, 경구투여를 하는 경우에는 간초회 통과효과(first pass effect)로 인해 생체이용률이 나빠지는 문제가 있다. 쓴 메밀 새싹추출물을 피부외용제 형태로 적용하는 경우에는 적은 투여용량과 빈도로서 원하는 부위의 지방분해 및 탄력개선의 효과를 얻을 수 있으며, 대사와 관련된 사람간의 편차를 최소화할 수 있다는 장점이 있다.

메밀은 일반적으로 단메밀(Fagopyrum escylentum), 쓴메밀(Fagopyrum tataricym)로 분류된다. 메밀에는 생리활성 물질인 루틴(rutin)을 비롯하여 퀘르세틴(quercetin), 퀘르세트린(quercetrin), 미리세틴(myricetin)이 다량 함유되어 있으며, 쓴 메밀에는 이러한 루틴을 비롯한 생리활성물질이 더 많이 함유되어 있다. 하기의 화학식으로 표시되는 루틴(2-phenyl-3,5,7,3',4'-pentahydroxy benzopyrone)은 황색 또는 담황색의 폴리페놀 화합물인 플라보노이드의 일종으로 퀘르세틴(5,7,3',4'-tetrahydroxy flavone)에 루티노사이드(rutinoside)가 결합된 물질이다.

하기의 화학식으로 표시되는 퀘르세틴(Quercetin)은 플라보노이드의 일종으로서 플라보노이드류 중에서 가장 생리활성이 높은 성분 중의 하나이다.

퀘르세틴은 강력한 항산화제로서 세포의 산화적 손상 및 지방의 산패를 막아주며 이를 통해 고혈압의 예방효과도 인정되고 있다. 또한 퀘르세틴(quercetin)은 지방합성을 저해하고, 지방세포의 분화를 위축시켜 성숙한 지방세포의 증식을 조절하는 효과가 있다.

이들 메밀의 생리활성물질들의 종류와 양은 메밀의 종에 따라, 그리고 추출부위에 따라 차이가 있다. 특히 메밀 종자의 생리활성물질과 발아 메밀 즉, 메밀의 새싹추출물의 생리활성물질에는 차이가 있다. 식물 종자는 발아가 진행됨에 따라 생리 활성이 증대되고 성분의 변화가 일어난다. 즉, 식물은 다음 생명을 탄생시키기 위해 에너지를 종자 내에 저장하고 있어, 발아하여 새로운 싹을 생성할 때 각종 영양소가 최대한 갖추어지게 한다. 결국은 새싹의 단계가 종자 및 성숙 채소보다도 훨씬 많은 비타민, 무기질, 아미노산 등을 함유하게 된다. 식물 종자는 발아가 진행됨에 따라 생리적 활성이 증대되고 성분의 변화가 일어나기 때문에 생리 활성 측면에서 발아에 의하여 높은 생리 활성이 나타나기 시작하는 것이다.

본 발명은 메밀에 포함되어 있는 생리활성물질을 고효율로 추출하기 위하여 쓴 메밀 새싹을 이용하였으며, 또한 특정 생리활성물질을 강화하고 경피흡수를 촉진하기 위하여 쓴 메밀 새싹추출물을 당결합분해 효소처리 또는 유산균 발효시킨 쓴 메밀 새싹추출물을 슬리밍 화장료 조성물에 적용하는 것에 특징이 있다.

본 발명에 사용되는 쓴 메밀 새싹추출물은 다음과 같이 제조될 수 있다. 건조된 쓴 메밀 새싹을 5～10배의 추출용매, 바람직하게는 물, 에탄올, 메탄올, 부탄올, 에테르, 에틸아세테이트 또는 클로로포름, 더욱 바람직하게는 70% 에탄올로 약 50℃에서 3시간 정도 추출하여 추출원액을 얻었다. 이를 감압, 농축하여 분말로 만들어 슬리밍 화장료 조성물에 이용하였으며, 쓴 메밀 새싹추출물을 함유하는 슬리밍 화장료는 우수한 슬리밍효과를 나타내었다.

천연물에 존재하는 플라보노이드는 대부분 당(sugar) 한 분자 이상이 결합된 배당체(glycosides)로서 존재하여 분자량이 상대적으로 크기 때문에 피부 외용제로 적용하는 경우에 피부 각질층을 쉽게 통과하지 못하고 이에 따라 피하지방층으로의 유입이 어렵게 되어 생체이용률이 낮다는 문제점이 있다. 본 발명에서는 특정 생리활성성분을 강화하고 경피흡수를 촉진하기 위하여 상기 쓴 메밀 새싹추출물을 당결합분해 효소처리 또는 유산균 발효처리하여 슬리밍 화장료 조성물에 이용하였다.

상기 당결합분해 효소반응은 당결합 분해작용을 하는 효소, 바람직하게는 글루코시다제(glucosidase), 자일로시아다제(xylosidase), 자일라나제(xylanase), 셀룰라제(cellulose), 갈락토시다제(galactosidase), 펙티나제(pectinase) 및 나린지나아제(naringinase)로 이루어지는 군으로부터 선택된 하나 이상의 효소, 더욱 바람직하게는 펙티나제(pectinase)로 처리하여 이루어진다. 상기 효소반응은 반응pH 3.5～5.0, 반응온도 25～50℃ 및 반응시간 12～60시간의 조건하에서 수행되는 것이 바람직하다.

상기 당결합 분해효소에 의하여 쓴 메밀 새싹추출물에 함유된 루틴 배당체의 당은 선택적으로 분해되어 분자량이 저하되고 추출물내의 퀘르세틴 성분의 함량이 증대된다. 상기 효소들은 아스퍼질러스(aspergillus)속, 바실러스(basillus)속, 페니실리움(penicillium)속, 리조푸스(rhizopus)속, 리조무코르(rhizomucor)속, 탈라로마이세스(talaromyces)속, 비피도박테리움(bifidobactertium)속, 모르티엘렐라(mortierella)속의 미생물로부터 얻을 수 있다.

또한, 상기 유산균 발효반응은 쓴 메밀 새싹추출물에 유산균을 접종하여 약 37℃에서 12～72시간 배양하여 이루어진다. 상기 유산균으로는 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophillus), 락토바실러스 불가리쿠스(L. bulgaricus), 락토바실러스 컨푸수스(L. confusus), 락토바실러스 루테리(L. luteri), 락토바실러스 카제이(L. casei), 비피도박테리움 브레이브(B. breve), 비피도박테리움 인판티스(B. infantis), 비피도박테리움 비피덤(B. bifidum), 비피도박테리움 써모필럼(B. thermophyllum), 스트렙토코코스 페이스칼리스(Str.facecalis) 및 스트렙토코코스 써모필러스(Str. thermophillus)로 이루어지는 군에서 선택된 적어도 하나를 사용할 수 있다.

상기 효소반응에 의하여 제조된 쓴 메밀 새싹추출물 또는 유산균 발효처리된 쓴 메밀 새싹추출물은 상기 발아 메밀추출물과 비교하여 볼 때, 분자량이 저하되어 경피흡수가 우수하며, 퀘르세틴 성분이 강화되어 적은 사용량으로도 더욱 우수한 슬리밍효과를 나타냄이 확인되었다.

상기 쓴 메밀 새싹추출물은 슬리밍 화장료 조성물 총중량에 대해서 0.005～50중량%, 바람직하게는 0.01～20중량% 함유된다. 쓴 메밀 새싹추출물을 유효성분으로 함유하는 상기 화장료 조성물은 스킨로션, 스킨 소프너, 스킨토너, 아스트린젠트, 로션, 밀크로션, 모이스처 로션, 영양로션, 맛사지 크림, 영양크림, 모이스처 크림, 핸드크림, 에센스, 팩, 비누, 샴푸, 클렌징 폼, 클렌징로션, 클렌징크림, 바디로션, 바디클렌저, 유액, 프레스파우더, 루스파우더 및 아이섀도로 구성된 그룹에서 선택된 어느 하나의 제형으로 적용되어질 수 있다.

이하, 하기의 실시예와 시험예들을 통하여 본 발명을 상세하게 설명하지만, 본 발명이 이 예들에 의하여 한정되는 것은 아니다.

제조예 1: 쓴 메밀 새싹추출물의 제조

건조된 쓴메밀 새싹 100g을 70% 에탄올 600g에서 50℃로 3시간 추출하여 쓴 메밀 새싹추출액을 얻은 후, 이를 감압 농축하고 동결 건조하여 쓴 메밀 새싹추출물 4.95g을 제조하였다.

제조예 2～4: 당결합 분해 효소 처리 쓴 메밀 새싹추출물의 제조

상기 제조예 1에서 제조된 쓴 메밀 새싹추출물을 농축한 농축액(100g당 고형분 함량 1.47g) 50g에 정제수 400ml와 하기 표 1의 효소액 50ml를 혼합하여 pH 4.5, 45℃조건에서 48시간 교반하면서 효소반응을 진행시켰다. 효소를 실활시킨 후, 여과하여 여과물을 약 10배의 45℃로 가온한 에탄올에 용해한 후 재여과하고 감압 농축하여 효소반응에 의한 쓴 메밀 새싹 추출물 파우더 2.17g을 제조하였다.

	효소(Enzyme)	출처(Origin)
제조예 2	셀룰라제-A	Aspergillus niger
제조예 3	베타-갈락토시다제	Aspergillus oryzae
제조예 4	펙티나제	Rhizopus sp

제조예 5～6: 유산균 발효 쓴 메밀 새싹추출물의 제조

상기 제조예 1에서 제조된 쓴 메밀 새싹추출물을 농축한 농축액(100g당 고형분 함량 1.47g) 50g을 정제수 400ml에 넣은 후, 80℃에서 3시간 가열하였다. 37℃로 냉각 후 하기 표 2의 유산균 현탁액 10ml를 접종하여 37℃의 인큐베이터에서 72시간 배양한 후, 80℃에서 10분간 실활시켰다. 이를 여과하여 여과물을 약 10배의 45℃로 가온한 에탄올에 용해한 후 재여과하여 감압농축하고 건조하여 유산균 발효 쓴 메밀 새싹추출물 분말 3.19g을 제조하였다.

	유산균
제조예 5	락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophillus)
제조예 6	락토바실러스 불가리쿠스(L. bulgaricus)

시험예 1: 퀘르세틴 생성율 측정

HPLC를 이용하여 상기 제조예 2～6에서 제조된 효소반응 추출물의 48시간 경과 후 퀘르세틴 생성율을 측정하였다. 퀘르세틴의 생성율은 상기 제조예 1의 추출물을 대조군으로 하였을 때의 퀘르세틴 함량의 증가율을 나타내며, 하기의 식과 같이 계산하였다.

생성율(%)=퀘르세틴 Standard 시료량(㎎) × 실시예의 peak 면적값 ÷ 퀘르세틴 Standard peak 면적값 ÷ 실시예의 시료량(㎎)

그 결과를 하기 표 3에 나타내었다.

	생성율(%)
제조예 2	59
제조예 3	56
제조예 4	79
제조예 5	64
제조예 6	71

상기 표 3에서 확인되는 바와 같이 당결합분해 효소처리한 추출물과 유산균 발효처리한 추출물의 경우 퀘르세틴 생성율이 높게 나타남을 확인할 수 있었다. 특히 펙티나제 효소에 의한 제조예 4의 경우 반응 pH 4.5, 반응온도 45℃ 및 반응시간 48시간의 상기 반응조건 하에서 가장 우수한 퀘르세틴 증가율을 나타내었다.

시험예 2: 지방세포분화 저해율 측정

쓴 메밀 새싹추출물을 이용하여, 미분화 상태의 3T3-L1 세포주(Korean Cell Line Bank , KCLB 10092.1)의 지방세포(adipocyte)로의 분화 저해 효과를 검증하기 위하여 하기와 같은 실험을 수행하였다.

미분화된 3T3-L1 세포주는 10% 우아혈청(bovine calf serum)이 포함된 DMEM 배지에서 유지하였다. 미분화 3T3-L1 세포주를 밀도가 90% 정도될 때까지 배양한 다음, 분화를 유도하기 위해 10% 우태혈청(fetal bovine serum)과 덱사메타손, IBMAX, 인슐린이 포함된 DMEM 배지를 교체해주었는데, 이때부터 실험군의 경우 배지를 교체할 때마다 상기 제조예 4와 제조예 6의 쓴 메밀 새싹추출물을 디메틸설폭사이드(DMSO)에 녹여 지속적으로 처리해 주였다.

이틀간 배양한 다음, 10% 우태혈청, 인슐린이 포함된 DMEM 배지로 교체해주었다. 이어서 이틀 간격으로 10% 우태혈청 만이 포함된 DMEM 배지로 교체해 주었다. 재분화를 유도한 시점부터 8일 후에 지방세포로의 재분화는 완결되었다. 이때 대조군은 실험군과 완전히 동일한 간격으로 배지를 교체하되, 동일한 농도의 DMSO만을 처리하였다. 재분화가 완결된 다음, 지질 성분만을 선택적으로 빨간색으로 염색시키는 오일레드오로 염색한 후, 오일 레드 오 염색약을 세포로부터 추출한 다음, 이 용액의 흡광도(500 nm)를 분광광도계로 측정하여 지방세포로의 분화 정도를 비교하였다. 지방세포분화 저해율은 하기의 식으로 계산하였다.

지방세포분화저해율(%)=(시료무처리구 흡광도-시료처리 흡광도)/시료무처리 흡광도

그 실험결과는 하기의 표 4에 나타내었다.

		분화 저해율(%)
제조예 4 추출물	0.05%	19.70
	0.1%	22.94
	0.5%	32.14
	1%	33.16
제조예 6 추출물	0.05%	17.40
	0.1%	21.83
	0.5%	29.75
	1%	31.01

상기 표 4에서 확인되는 바와 같이 본 발명에 따른 당결합분해효소 처리 쓴 메밀 새싹추출물 및 유산균발효 쓴 메밀 새싹추출물은 높은 지방세포분화 저해활성을 가지므로 슬리밍 효과가 우수함을 알 수 있다.

실시예 1～3: 슬리밍 화장료조성물 제조(마사지 젤)

하기 표 5에 기재된 조성으로 본 발명에 따른 쓴 메밀 새싹추출물을 함유하는 슬리밍 화장료 조성물을 통상의 방법으로 제조하였다.

성분	실시예 1 (중량%)	실시예 2 (중량%)	실시예 3 (중량%)	비교예 1 (중량%)
쓴 메밀 새싹추출물(제조예 1)	3.0	-	-	-
쓴 메밀 새싹추출물(제조예 4)	-	3.0	-	-
쓴 메밀 새싹추출물(제조예 6)	-	-	3.0	-
카보폴 1342	0.35	0.35	0.35	0.35
글리세린	5	5	5	5
에탄올	20	20	20	20
디메치콘	2	2	2	2
디이소듐 이디테에이	0.05	0.05	0.05	0.05
메틸 파라벤	0.1	0.1	0.1	0.1
방부제, 향, 색소	미량	미량	미량	미량
증류수	잔량	잔량	잔량	잔량
합계	100	100	100	100

시험예 3: 슬리밍효과 임상시험 평가

1. 허벅지에 대한 슬리밍 효과

국소 비만이나 셀룰라이트가 있는 여성 중 BMI(Body Mass Index)가 21～27인 20세 이상의 성인 여성 100명을 20명씩 5개 그룹으로 나누어, 8주 동안 아침과 저녁에 각 1회, 1회당 5분씩 실시예 1 내지 3 또는 비교예 1의 맛사지 젤을 사용하게 하였다. 각 그룹 20명중 10명은 왼쪽 허벅지에, 다른 10명은 오른쪽 허벅지에 상기 표 5의 조성을 갖는 실시예 1 내지 3의 맛사지 젤을 적용하도록 하였고, 그 반대 허벅지는 비교예 1의 맛사지 젤을 적용하도록 하였다.

맛사지 젤 사용 8주 후, 사용 전과 후의 허벅지 중간의 둘레를 줄자(mm)를 이용하여 측정하고 허벅지 둘레의 차이를 계산하여 슬리밍 효과를 평가하였다. 허벅지 둘레길이의 차이는 하기 표 6에 나타내었다.

	실시예 1	실시예 2	실시예 3	비교예 1
평균 길이 변화	20mm	25mm	25mm	10mm

상기 표 6에서 알 수 있는 바와 같이, 실시예 1 내지 3의 마사지젤을 사용한 평가자 집단의 허벅지 둘레의 길이변화가, 비교예 1의 마사지젤을 사용한 집단의 길이변화보다 훨씬 큼을 알 수 있으며, 특히 실시예 2, 3의 길이변화가 더 크게 나타났다. 이를 통해 본 발명 쓴 메밀 새싹추출물을 유효성분으로 함유하는 슬리밍 화장료 조성물의 슬리밍 효과가 우수함을 알 수 있다.

2. 복부에 대한 슬리밍 효과

국소 비만이나 셀룰라이트가 있는 여성 중 BMI(Body Mass Index)가 21～27인 20세 이상의 성인 여성 50명을 대상으로 5주 동안 아침과 저녁에 각 1회, 10분씩 실시예 1 내지 3과 비교예 1의 마사지 젤을 마사지하도록 했다. 5주 후, 적용 전과 후의 복부 지방율과 신체 지방율을 체성분 측정기를 이용하여 평가하였다. 복부 지방율은 배꼽선에서의 최대 허리둘레 측정값을 엉덩이 둘레 길이로 나누어 계산하였다.

결과는 하기의 표 7에 나타내었다.

		적용 전	적용 후
실시예 1	체지방율(%)	28.7	25.7
실시예 1	복부지방율	0.85	0.77
실시예 2	체지방율(%)	28.0	23.5
실시예 2	복부지방율	0.82	0.73
실시예 3	체지방율(%)	28.1	23.6
실시예 3	복부지방율	0.80	0.70
비교예 1	체지방율(%)	28.2	27.0
비교예 1	복부지방율	0.79	0.76

상기 표 7에서 알 수 있는 바와 같이, 실시예 1 내지 3의 마사지젤을 사용한 경우, 비교예 1의 마사지젤을 사용한 경우보다 체지방율 또는 복부지방율이 크게 감소하였음을 확인할 수 있다.

3. 피부탄력증진 효과

상기 허벅지 슬리밍 효과 시험 참가자에 대해 탄력증진효과에 대한 설문 평가를 실시하였다. 탄력증진정도를 아래와 같이 5등급으로 분류하여 평가하였으며, 그 결과를 하기의 표 8에 나타내었다.

-2: 탄력매우감소 -1: 탄력약간감소 0: 탄력변화없음

1: 탄력약간증진 2: 탄력매우증진

	실시예 1	실시예 2	실시예 3	비교예 1
탄력증진정도	1	2	2	0

상기 표 8의 결과로부터 실시예 1 내지 3의 마사지젤을 사용한 경우, 비교예 1의 마사지젤을 사용한 경우보다 탄력이 크게 증진하였음을 확인할 수 있다.

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쓴 메밀 새싹추출물을 조성물 총중량에 대해서 0.005～50중량% 함유하는 셀룰라이트(cellulite) 개선용 화장료 조성물에 있어서, 상기 쓴 메밀 새싹추출물은 당결합분해 효소 처리된 것임을 특징으로 하는 셀룰라이트(cellulite) 개선용 화장료 조성물.
쓴 메밀 새싹추출물을 조성물 총중량에 대해서 0.005～50중량% 함유하는 셀룰라이트(cellulite) 개선용 화장료 조성물에 있어서, 상기 쓴 메밀 새싹추출물은 유산균 발효 처리된 것임을 특징으로 하는 셀룰라이트(cellulite) 개선용 화장료 조성물.
제2항에 있어서, 상기 당결합 분해 효소는 글루코시다제(glucosidase), 자일로시아다제(xylosidase), 자일라나제(xylanase), 셀룰라제(cellulase), 갈락토시다제(galactosidase), 펙티나제(pectinase) 및 나린지나아제(naringinase)로 이루어지는 군으로부터 선택된 적어도 하나의 것임을 특징으로 하는 셀룰라이트(cellulite) 개선용 화장료 조성물.
제3항에 있어서, 상기 유산균은 락토바실러스 애시도필러스(Lactobacillus acidophillus), 락토바실러스 불가리쿠스(L. bulgaricus), 락토바실러스 컨푸수스(L. confusus), 락토바실러스 루테리(L. luteri), 락토바실러스 카제이(L. casei), 비피도박테리움 브레이브(B. breve), 비피도박테리움 인판티스(B. infantis), 비피도박테리움 비피덤(B. bifidum), 비피도박테리움 써모필럼(B. thermophyllum), 스트렙토코코스 페이스칼리스(Str.facecalis) 및 스트렙토코코스 써모필러스(Str. thermophillus)로 이루어지는 군에서 선택된 적어도 하나인 것임을 특징으로 하는 셀룰라이트(cellulite) 개선용 화장료 조성물.
건조된 쓴 메밀 새싹을 물, 에탄올, 메탄올, 부탄올, 에테르, 에틸아세테이트 및 클로로포름으로 이루어지는 군으로부터 선택된 적어도 하나의 용매로 추출하는 쓴 메밀 새싹추출물 제조단계;
상기 쓴 메밀 새싹추출물을 용매에 용해시키고 당결합 분해효소를 첨가하는 효소첨가단계;
상기 효소가 첨가된 추출물을 교반하면서 효소반응시켜 효소반응에 의한 쓴 메밀 새싹추출물을 제조하는 단계; 및
상기 당결합 분해효소 처리된 쓴 메밀 새싹추출물을 화장료조성물 총중량에 대해서 0.005～50중량% 첨가하여 화장료 조성물을 제조하는 단계를 포함하는 쓴 메밀 새싹추출물 함유 셀룰라이트(cellulite) 개선용 화장료 조성물의 제조방법.
제6항에 있어서, 상기 효소반응은 반응 pH 3.5～5.0, 반응온도 25～50℃ 및 반응시간 12～60시간의 조건하에서 수행되는 것임을 특징으로 하는 쓴 메밀 새싹추출물 함유 셀룰라이트(cellulite) 개선용 화장료 조성물의 제조방법.
건조된 쓴 메밀 새싹을 물, 에탄올, 메탄올, 부탄올, 에테르, 에틸아세테이트 및 클로로포름으로 이루어지는 군으로부터 선택된 적어도 하나의 용매로 추출하는 쓴 메밀 새싹추출물 제조단계;
상기 쓴 메밀 새싹추출물에 유산균을 접종하고 배양하여 발효시키는 유산균발효 쓴 메밀 새싹추출물 제조단계; 및
상기 유산균 발효 쓴 메밀 새싹추출물을 화장료조성물 총중량에 대해서 0.005～50중량% 첨가하여 화장료 조성물을 제조하는 단계를 포함하는 쓴 메밀 새싹추출물 함유 셀룰라이트(cellulite) 개선용 화장료 조성물의 제조방법.
제8항에 있어서, 상기 유산균발효는 약 37℃에서 12～72시간 이루어지는 것임을 특징으로 하는 쓴 메밀 새싹추출물 함유 셀룰라이트(cellulite) 개선용 화장료 조성물의 제조방법.