KR101166852B1 - 비타민나무잎 분말 또는 이의 추출물을 포함하는 체내 지질 개선 조성물 - Google Patents
비타민나무잎 분말 또는 이의 추출물을 포함하는 체내 지질 개선 조성물 Download PDFInfo
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Abstract
본 발명은 비타민나무잎 분말 또는 이의 추출물을 포함하는 지질 대사 이상 개선 조성물에 관한 것으로, 본 발명의 조성물은 혈중 또는 간의 중성지방 또는 총 콜레스테롤을 감소시켜 개체 내 지질 대사 이상, 특히 고지혈증 또는 비만을 효과적으로 예방 또는 개선할 수 있다.
Description
본 발명은 비타민나무잎 분말 또는 이의 추출물을 포함하는 고지혈증 또는 비만 등의 지질 대사 이상을 예방 또는 치료 혹은 개선용 조성물에 관한 것이다. 이러한 조성물은 고지혈증 또는 비만 등의 지질 대사 이상을 예방 또는 치료 혹은 개선을 위하여 의약품, 식품 또는 식품 소재로서 사용할 수 있다.
서구 식생활이 도입되면서 동물성 식품 및 가공식품 등을 통하여 열량의 섭취가 증가하고 있고, 성인병으로 비만, 당뇨병, 고혈압, 동맥경화 및 심혈관질환 등이 늘어나고 있다. 특히 동물성 지방의 과다한 섭취로 인한 혈액내의 고 콜레스테롤과 고 중성지방이 만성 성인병의 발병에 중요한 원인으로 여겨지고 있다.
혈중 콜레스테롤 농도는 콜레스테롤 섭취량에 따라 생합성이 조절되어 일정하게 유지되나 과량으로 섭취 시 여러 가지 대사성 질환을 유발한다. 고지방의 과도한 섭취는 가장 먼저 고지혈증으로 이어져 동맥경화를 유발하게 된다. 고지혈증(hyperlipedemia)은 혈액 중의 콜레스테롤, 중성지방(트리글리세라이드), 인지질 및 유리지방산 등의 농도가 비정상적으로 증가한 상태로서 가장 직접적으로 영향을 미치는 인자는 혈중 콜레스테롤과 저밀도지단백(LDL)-콜레스테롤을 들 수 있으며, 특히 고콜레스테롤혈증(hypercholesterolemia)은 죽상동맥경화증(atherosclerosis)을 유발하는 것으로 알려져 있다.
죽상동맥경화증은 혈관벽을 따라 지질이 두껍게 쌓여 혈류를 감소시켜 허혈성 심장질환과 협심증, 심근경색의 원인이 되므로 임상적으로 중요한 문제가 되고 있다. 동맥경화란 동맥내벽에 지방질 및 섬유조직이 쌓여 혈관벽이 좁아지거나 막히게 되는 것으로, 고혈압, 고지혈증 및 흡연은 동맥경화 발생을 촉진시키는 3대 위험 요소이며, 이외에도 운동부족, 당뇨병, 비만증, 스트레스 등에 의해 발생률이 높아진다. 동맥경화가 가벼우면 활동에 지장은 없으나 동맥경화로 관상조직이 50 내지 70% 이상 좁아지거나 막히면 동맥경화성 심장병이 야기된다. 동맥경화증은 심한 경우 동맥의 파열이 일어나는 것으로 여러 순환계 질환, 즉 고혈압, 협심증, 뇌혈관질환(뇌일혈) 등의 주요 원인이 되고 있다.
따라서 혈액내의 이들 지질 수준을 저하시키기 위한 치료 및 예방책의 일환으로 식생활에 대한 관심이 모아지고 있다. 식품에 대한 관심 역시 영양적인 측면이나 기호성을 고려한 1차적, 2차적 기능보다 질병의 치료 및 예방에 관계되는 3차적 기능에 더 관심이 많아지고 있다.
한편, 비타민나무(Hippophae rhamnoides L.)는 보리수과에 속하는 과목으로서 100여종 이상의 성분을 포함하고 있으며, 특히 비타민 A, B, C, E, F, K 등의 유용한 성분을 많이 함유하고 있다. 겨울철 추위 및 여름철 고온에서도 잘 자라며, 척박한 지대에서도 잘 자라는 강한 적응성을 지녔다. 이미 비타민나무를 이용한 식품 등의 개발이 이루어지고 있는데, 예를 들면, 대한민국 특허공개 제2009-0127615호는 비타민나무의 열매를 분말차로 제조하는 방법에 대하여 개시하고 있고, 대한민국 특허공개 제2010-0006459호는 비타민나무의 맛과 향미, 영양분이 포함된 된장을 제조하는 방법에 대하여 개시하고 있다.
최근 들어 이러한 비타민나무의 항산화 효과가 밝혀진 바 있으나, 혈중 콜레스테롤과 관련된 질환에 대한 효과에 대해서는 아직까지 밝혀진 바 없다.
따라서 본 발명자들은 상기와 같은 관점에서 예의 연구를 거듭하여 동물실험을 통해 고지방식이로 유도한 지질 대사 이상에 대해 비타민나무가 체중 및 혈중 지질 성분 변화에 미치는 영향을 조사하고, 그의 혈중지질 개선 효능을 검증함으로써 본 발명에 이르게 되었다.
따라서 본 발명의 목적은 혈중지질개선 및 체지방감소 효과를 갖는 비타민나무의 새로운 용도를 제공하는 것이다.
본 발명은 비타민나무잎 분말 또는 이의 추출물을 포함하는 지질 대사 이상 개선 조성물을 제공한다.
본 발명의 비타민나무잎 분말은 비타민나무의 잎을 채취하여 세척한 후 이를 잘게 세절하거나 비타민나무의 잎을 채취하여 세척한 후 이를 덖음하고 잘게 세절한 것을 말한다. 상기 세절은 믹서기 또는 분쇄기 등의 통상의 세절기를 이용하여 잘게 절단한 것으로 세절된 비타민나무잎 분말의 입도 크기는 하기에서 상술하는 적용 형태에 따라 상이할 수 있으나, 입도 크기가 40~60 메쉬(mesh)인 분말이 개체에 투여되거나 개체가 섭취하기에 용이하므로 상기 범위의 입도 크기를 가지는 것이 바람직하다.
본 발명에서 상기 덖음은 물을 가하지 않고 타지 않을 정도로 가열기에서 볶아 익힌 것을 말한다. 덖음을 위한 가열 온도는 40 내지 400℃, 바람직하게는 50 내지 360℃, 보다 바람직하게는 60 내지 350℃이며, 덖음의 회수는 1회 이상, 바람직하게는 2회 이상, 보다 바람직하게는 3회 이상, 보다 더 바람직하게는 3 내지 5회, 가장 바람직하게는 4회이다. 또한, 덖음 시간은 1 내지 15분, 바람직하게는 2분 내지 12분, 보다 바람직하게는 3분 내지 10분이다. 상기 덖음은 덖음의 회수에 따라 각기 가열 온도 및 시간을 상이하게 하여 이루어질 수 있으며, 이들 덖음 회수, 가열 온도 및 시간은 비타민나무잎의 채취 시기, 크기 및 잎의 강도 등에 따라 달리 선택하여 실시될 것이다. 하나의 구체적 실시에서, 상기 덖음은 350℃에서 3분간 살청하여 꺼낸 다음 5분간 비비고, 200℃에서 5분간 덖고 꺼내어 비빈 후 150℃에서 덖고 비빈 다음 100℃ 이하에서 10분간 덖음으로써 실시할 수 있다.
본 발명의 비타민나무잎 분말의 추출물은 상기의 비타민나무잎 분말을 통상의 방법에 의하여 추출하거나 이로부터 분리된 지질 대사 이상 개선의 효과를 가지는 물질을 말한다. 또한, 상기 추출물은 통상의 방법에 의하여 비타민나무잎 분말로부터 추출한 추출액뿐만 아니라 이의 건조 분말 또는 이를 이용하여 제형화된 모든 형태를 말한다.
본 발명에서 비타민나무잎 분말의 추출물은 물 (예, 정제수, 증류수, 수돗물 등) 또는 유기 용매를 사용하여 추출할 수 있는데, 추출한 액은 액체 형태로 사용하거나 또는 농축 및/또는 건조하여 사용할 수 있다. 상기 유기용매는 메탄올, 에탄올, 이소프로판올, 부탄올, 에틸렌, 아세톤, 헥산, 에테르, 클로로포름, 에틸아세테이트, 부틸아세테이트, 디클로로메탄, N, N-디메틸포름아미드(DMF), 디메틸설폭사이드(DMSO), 1,3-부틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 또는 이들의 혼합용매이며, 추출물의 유효 성분이 파괴되지 않거나 최소화된 조건에서 실온 또는 가온하여 추출할 수 있다. 추출하는 유기용매에 따라 추출물의 유효성분의 추출정도와 손실정도가 차이가 날 수 있으므로, 알맞은 유기용매를 선택하여 사용하도록 한다. 추출 방법은 특별히 제한되지 않고, 예를 들어 냉침 추출, 초음파 추출, 환류 냉각 추출 등이 있다.
여과는 추출액으로부터 부유하는 고체 입자를 제거하는 과정으로, 면, 나일론 등을 이용하여 입자를 걸러 내거나 한외여과, 냉동여과법, 원심분리법 등을 사용할 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 또한, 다양한 크로마토그래피(크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 크로마토그래피)에 의한 분리 과정을 추가로 포함할 수 있다.
여액을 건조하는 단계는 동결건조, 진공건조, 열풍건조, 분무건조, 감압건조, 포말건조, 고주파건조, 적외선건조 등을 포함하나 이에 제한되지 않는다. 경우에 따라, 최종 건조된 추출물을 분쇄하는 공정을 추가할 수 있다.
본 발명에 있어서, "지질 대사 이상"은 생체의 지질 성분의 밸런스에 이상이 인정되는 상태를 말해, 예를 들면 고지혈증, 또는 간장에 있어서의 콜레스테롤이나 중성 지방의 축적 등을 들 수 있다. 고지혈증은, 예를 들면 혈중의 총콜레스테롤, LDL(저비중 리포 단백)콜레스테롤, 중성 지방(TG) 등이 높은 수치를 나타내는 상태, 또는 혈중 HDL(고비중 리포 단백) 콜레스테롤이 낮은 수치를 나타내는 상태 등이 포함된다. 지질 대사 이상은, 상기 생체의 지질 밸런스에 이상이 인정되는 상태이면, 그 원인은 제한되지 않고, 예를 들면 고지방식에 의해 야기되는 경우, 혹은 통상의 식생활에 있어 연령이나 운동부족 등에 의해 야기 되는 경우를 포함한다. 상기 고지혈증은, 동맥경화증의 진전에 중대한 영향을 미칠 수 있다. 동맥경화증은 동맥벽 내강이 협착이나 폐색을 가져오고, 혈류 저하를 수반하고, 예를 들면 일과성 뇌허혈발작, 뇌경색, 심근경색, 협심증 등을 포함한 각종 병의 용태를 일으키는 원인이 될 수 있다. 또한, 지질 대사 이상은 비만과의 관련을 들 수 있다. 비만은 신체에 지방이 과잉 축적된 상태를 말하며, 이에는 내장 지방 축적형 비만이 포함된다.
또한, 상기 고지혈증 또는 비만 (특히 내장 지방 축적형 비만)은, 각각 단독으로도 상기한 각종 병의 용태를 일으킬 수 있지만, 이러한 병이 중복되는 병의 용태, 예를 들면 대사증후군에 있어서는, 동맥 경화를 촉진하고, 더 나아가 치명적인 심근경색이나 뇌경색 등을 일으키기 쉽다. 본 발명에 사용되는 비타민나무잎 분말 또는 이의 추출물을 함유하는 조성물은, 상기 고지혈증 또는 비만을 억제할 수 있으므로 대사증후군도 억제할 수 있다.
본 발명의 조성물은, 지질 대사 이상, 예를 들면 고지방식이나 연령 또는 운동 부족 등에 의해 야기되는 혈중이나 간의 중성지방 또는 총 콜레스테롤 또는 내장지방의 상승을 개선할 수 있다.
본 발명의 조성물은, 지질 대사 이상을 개선할 수 있는 것으로부터 고지혈증을 예방 또는 치료, 혹은 개선할 수 있다. 더욱이 상기 고지혈증의 예방 또는 치료, 혹은 개선은 고지혈증에 기인하는 심장이나 뇌에 있어서의 동맥 경화, 예를 들면 뇌경색과 같은 뇌동맥 질환이나 협심증, 심근 경색 등의 관동맥 질환 등을 방지할 수 있다.
또한, 본 발명의 조성물은, 비만, 특히 내장 지방이 축적되는 내장 지방 축적형 비만을 예방 또는 개선할 수 있다. 내장 지방 축적형 비만은 당뇨병이나 고혈압 등의 생활 습관병의 발단이 되므로, 내장 지방 축적형 비만의 예방 또는 개선은 생활 습관병의 예방 또는 치료, 혹은 개선으로 연결될 수 있다. 특히, 본 발명의 조성물은, 대변을 통한 지방의 배출량을 증가시키므로 음식의 장내 통과시간이 단축된다. 이러한 단축은 장내에서의 지질의 흡수를 억제하게 되어 비만의 예방에 도움이 된다.
본 발명에서 사용된 용어, "예방"이란 조성물의 투여로 지질 대사 이상, 예를 들어 고지혈증 및 비만의 발병을 억제 또는 지연시키는 모든 행위를 의미하며, "치료"란 조성물의 투여로 지질 대사 이상, 예를 들어 고지혈증 및 비만으로 인한 혈중 또는 간의 중성지방 또는 총 콜레스테롤을 정상 상태로 회복하는 모든 행위를 의미한다. 또한, 본 발명에서 사용된 용어, "개선"이란 조성물의 투여로 지질 대사 이상, 예를 들어 고지혈증 및 비만으로 인한 혈중 또는 간의 중성지방 또는 총 콜레스테롤의 감소시키는 모든 행위를 의미한다. 상기에서, "투여"는 개체의 경구 또는 비경구를 통한 개체 내 흡수 또는 섭취를 말한다. 또한, 상기“개체”는 지질 대사 이상의 직, 간접적 원인에 의해 유발된 질환, 예를 들어 고지혈증 또는 비만을 가지고 있으며, 본 발명의 상기 조성물을 투여하여 증상이 호전될 수 있는 질환을 가진 인간을 포함한 원숭이, 소, 말, 돼지, 양, 개, 고양이, 래트, 마우스, 침팬지 등의 포유동물을 의미한다.
본 발명의 조성물을 투여함으로써, 몸무게를 감량할 수 있고 혈중, 간조직, 심장조직 내 등의 콜레스테롤 및 중성지질 등의 함량을 감소시켜 지질 대사 이상을 예방, 치료 또는 개선할 수 있다. 하나의 구체적 실시에서, 고지방(열량의 37%를 지방으로 대체)을 급여한 마우스에게 비타민나무잎 분말 또는 차분말을 식이에 수준별(1%와 5%)로 첨가하여 6주간 급여한 결과 체중은 비타민나무잎 분말 또는 차분말 급여시 고지방대조군에 비하여 감소하였으며, 체중단위당 부고환 무게는 비타민나무잎 차분말 급여시 고지방대조군에 비하여 22 내지 30%의 유의적인 감소를 보였으며, 장간막무게 역시 감소경향을 보임으로써 총 내장지방 무게량이 유의적으로 감소되었다. 그러나 비타민나무잎 분말 또는 차분말은 식이섭취량에는 영향을 미치지 않았다. 비타민나무잎 분말 또는 차분말 급여시 고지방대조군에 비하여 혈장의 중성지질, 총 콜레스테롤 및 간조직 중의 콜레스테롤 함량을 유의적으로 낮추었으며, 간조직 중의 중성지질 함량은 5% 급여군에서만 유의적인 감소를 보였다. 반면, 변으로 지질 배설은 비타민나무잎 분말 또는 차분말 급여시 고지방대조군에 비하여 유의적으로 증가하였다. 간독성 지표 효소인 혈중 GPT 활성은 비타민나무잎 분말 또는 차분말 급여시 유의적으로 개선되었으며, 혈중 GOT 활성은 비타민나무잎 분말 급여시 유의적으로 개선되었다. 그리고 적혈구의 지질과산화물 함량 역시 유의적으로 낮았다. 이와 같이 비타민나무잎 분말 또는 차분말은 고지방식이로 인한 체내 내장지방 축적을 억제할 뿐만 아니라 지질개선에 효과적이다.
본 발명의 조성물은 비타민나무잎 분말 또는 이의 추출물을 배합하는 것에 의해 제조되어 의약품, 식품 또는 식품 소재로서 이용할 수 있다. 의약품으로서 이용하는 경우에는, 해당 비타민나무잎 분말 또는 이의 추출물과 약제학적으로 허용가능한 제재용 첨가물을 포함한 약제학적 조성물의 형태로 투여하는 것이 바람직하다. 약제학적 조성물은, 예를 들어, 캅셀제, 정제(당의정 또는 장용정 등의 코팅정 또는 다층정을 포함한다), 가루약 혹은 과립제 등의 경구 고형 제재의 형태를 취하고 있어도 좋고, 경구 액체 제재의 형태를 취하고 있어도 좋고, 주사제나 점적제, 좌제 등의 비경구 제재의 형태를 취하고 있어도 좋다.
캅셀제, 정제, 가루약 혹은 과립제 등의 고형 제재에 통상 사용되고 있는 제재용 첨가물로서는, 예를 들어, 부형제(예: 유당, 백당, 포도당, 전분, 결정 셀룰로오스 등), 결합제 [예: 전분호액, 히드록시 프로필 셀룰로오스액, 카르멜로스액(carmellose), 아라비아 고무액, 젤라틴액, 알긴산나트륨액 등], 붕괴제(예: 전분, 카르멜로스나트륨, 탄산칼슘 등), 활택제(예: 스테아린산 마그네슘, 탈크, 스테아린산, 스테아린산 칼슘 등), 계면활성제(예: 폴리소르베이트80, 폴리옥시 에틸렌 경화 피마자유 등), 증점제(예: 히드록시 에틸 셀룰로오스, 히드록시 프로필 셀룰로오스, 폴리비닐 알코올, 폴리에틸렌글리콜 등) 등을 들 수 있지만, 이들로 한정되지 않는다. 정제 또는 과립제는, 코팅제 [예: 젤라틴, 백당, 아라비아고무, 카나우바왁스(carnauba wax), 초산프탈산셀룰로오스, 메타크릴산 공중합체, 히드록시 프로필셀룰로오스프탈레이트, 카복시메틸에틸셀룰로오스, 히드록시 프로필 메틸 셀룰로오스 등] 등으로 제피를 해도 좋다. 캅셀제는, 하드 캅셀 외, 마이크로 캅셀 또는 소프트 캅셀 등도 좋다. 고형 제재는, 공지의 방법에 의해 제조할 수가 있다.
액체 제재에는, 예를 들어, 당류[예: 자당, 솔비톨, 과당 등], 글리콜 류(예: 폴리에틸렌글리콜, 프로필렌글리콜 등), 분산 또는 증점제(예: 젤라틴, 아라비아고무, 히드록시 에틸 셀룰로오스, 히드록시 프로필 셀룰로오스, 폴리비닐 알코올, 폴리에틸렌글리콜 등), 유화제(예: 글리세린 지방산 에스테르, 자당 지방산 에스테르 등), 용해 보조제(예: 아라비아고무, 폴리소르베이트 80 등), pH조정제(예: 시트르산, 시트르산삼나트륨 등), 방부제(예: 파라옥시 안식향산에스테르류 등) 등을 배합해도 좋다.
비경구 투여에 적절한 제재 중 주사제나 링겔제 등의 혈관 내 투여용 제재는, 바람직하게는 체액 등과 장의 수성 매체를 이용하여 조제할 수 있다. 예를 들면, 주사제는, 주사용 증류수, 소금 용액, 포도당 용액 또는 소금 용액과 포도당 용액의 혼합물로부터 선택되는 수성 매체를 이용하여 일반적인 방법에 따라 적당한 조제와 함께 용액, 현탁액 또는 분산액으로 조제할 수 있다. 장내 투여를 위한 좌제는, 예를 들면 카카오 지방, 수소화 지방 또는 수소첨가 카르복시산 등의 담체를 이용하여 조제할 수 있다.
또한, 식품에 비타민나무잎 분말 또는 이의 추출물을 사용할 수 있다. 상기 식품은 비타민나무잎 분말 또는 이의 추출물을 그대로 이용해도 좋지만, 일반적으로는, 해당 비타민나무잎 분말 또는 이의 추출물과 식품위생상 허용되는 첨가물, 혹은 통상의 식품 원료를 포함한 형태로 하는 것이 바람직하다. 식품 소재는, 비타민나무잎 분말 또는 이의 추출물을 그대로 사용하는 형태여도 되고, 혹은 식품위생상 허용되는 첨가제를 포함한 형태여도 좋다.
해당 식품이나 식품 소재는, 식품위생상 허용되는 첨가제와 함께, 예를 들면, 캅셀제, 정제(당의정 등의 코팅정 또는 다층정, 혹은 구강 붕괴제 등을 포함한다), 가루약 혹은 과립제 등의 고형 조성물의 형태를 취하고 있어도 좋고, 액체 조성물의 형태를 취하고 있어도 좋다. 해당 첨가제로서는, 예를 들면 부형제 (예: 유당, 덱스트린, 옥수수 전분, 결정 셀룰로오스 등), 활택제 (예: 스테아린산마그네슘, 자당 지방산 에스테르, 글리세린 지방산 에스테르 등), 붕괴제(예: 카르복시 메틸 셀룰로오스 칼슘, 무수인산수소칼슘, 탄산칼슘 등), 결합제(예: 전분호액, 히드록시 프로필 셀룰로오스액, 아라비아 고무액 등), 용해 보조제(예: 아라비아고무, 폴리소르베이트 80 등), 감미료[예: 설탕, 과당, 포도당액당, 벌꿀, 아스파르탐(aspartame)등], 착색료 (예: β-카로틴, 식용 타르 색소, 리보플라빈 등), 보존료(예: 소르빈산, 파라옥시 안식향산메틸, 아황산 나트륨 등), 증점제(예: 알긴산나트륨, 카르복시메틸 셀룰로오스 나트륨, 폴리 아크릴산 나트륨 등), 산화 방지제(예: 디부틸 히드록시 톨루엔, 부틸히드록시아니솔, 아스코르브산, 토코페롤 등), 향료(예: 박하, 딸기 향료 등), 산미료(예: 시트르산, 유당, DL-사과산 등), 조미료(예: DL-알라닌, 5'-이노신산나트륨, L-글루타민산 나트륨 등), 유화제(예: 글리세린 지방산 에스테르, 자당 지방산 에스테르 등), pH조정제(예: 시트르산, 시트르산삼나트륨 등), 비타민류, 미네랄류, 아미노산류, 색소 등을 들 수 있다. 고형 조성물은, 일반적인 방법에 따라 제조할 수가 있다. 또한, 액체 조성물은, 상기 경구투여에 적절한 액체 제재와 같게 해 제조할 수가 있다.
또, 비타민나무잎 분말 또는 이의 추출물 혹은 이를 포함한 고형 조성물 및 액체 조성물을 음식에 배합하는 것에 의해 본 발명과 관련되는 식품을 제조할 수 있다. 그러한 식품으로서는, 예를 들면, 과자류[예: 껌, 캔디, 카라멜, 초콜릿, 쿠키, 스넥 과자, 젤리, 구미(과즙 등을 젤라틴으로 굳힌 과자의 일종), 정과 등], 면류(예: 국수, 우동, 라면 등), 유제품(예: 밀크, 아이스크림, 요구르트 등), 조미료(예: 된장, 간장 등), 스프류, 음료(예: 주스, 커피, 홍차, 차, 탄산음료, 스포츠 음료 등)를 비롯한 일반 식품이나 영양 보조 식품(예: 영양 드링크 등) 등을 들 수 있다. 덧붙여 식품에는, 식품 소재를 포함한 식품도 포함된다.
상기 비타민나무잎 분말 또는 이의 추출물을 배합한 식품을 섭취하는 것으로, 예를 들면 혈중이나 간장 내의 콜레스테롤 및 중성 지방을 저하시키는 등, 지질 대사 이상을 개선해 고지혈증, 비만을 개선할 수 있다.
본 발명의 조성물에서의 비타민나무잎 분말 또는 이의 추출물의 배합량은 조성물 전체에 대해서 통상 약 0.01~80 질량% 배합하는 것이 바람직하다.
본 발명의 조성물을 식품 또는 식품 소재로서 이용하는 경우, 지질 대사 이상 개선 효과, 혹은 고지혈증 또는 비만에 대해서 뛰어난 효과를 가진 비타민나무잎 분말 또는 이의 추출물을 함유하므로, 지질 대사 이상 개선 효과, 혹은 고지혈증 또는 비만 개선을 위해서 이용된다는 취지의 표시를 식품 또는 식품 소재의 포장 등에 붙이는 것이 바람직하다.
또한, 본 발명의 조성물은, 지질 대사 이상 개선 효과, 혹은 고지혈증 또는 비만 개선을 위해서 이용되는 보건 기능 식품, 바람직하게는 특정 보건용 식품이 될 수 있다.
본 발명의 조성물은, 지질 대사 이상 개선 효과, 혹은 고지혈증 또는 비만의 예방 또는 치료에 사용할 수 있어 본 발명의 의약품, 식품 또는 식품소재는 지질 대사 이상 개선 효과, 혹은 고지혈증 또는 비만의 억제, 개선 등에 사용할 수 있다. 게다가 본 발명의 조성물은, 지질 대사이상, 혹은 고지혈증 또는 비만에 부수하는 각종 질환, 예를 들면, 고혈압증 또는 동맥경화증(예를 들면, 뇌경색과 같은 뇌동맥 질환, 협심증, 심근경색 등의 관동맥 질환) 등의 예방 및 치료, 혹은 이러한 각종 질환의 발증을 억제해 이러한 각종 질환의 병의 용태 개선 등에 사용할 수 있다.
본 발명의 비타민나무잎 분말 또는 이의 추출물은 개체의 몸무게를 감량할 수 있고 혈중, 간조직 및 심장조직 내 등의 콜레스테롤 및 중성지질 등의 함량을 감소시켜 개체 내 지질 대사 이상, 예를 들면 고지혈증 또는 비만을 효과적으로 예방 또는 치료 혹은 개선할 수 있다.
도 1은 본 발명의 비타민나무잎분말이 고지방을 급여한 마우스의 식이섭취량에 미치는 영향을 나타낸 그림이다. 평균±표준오차, ab실험군간의 다른 문자는 유의적 차이가 있음(p < 0.05).
도 2는 본 발명의 비타민나무잎 차분말이 고지방을 급여한 마우스의 체중변화에 미치는 영향을 나타낸 그림이다. 평균±표준오차, ab실험군간의 다른 문자는 유의적 차이가 있음(p < 0.05).
도 3은 본 발명의 비타민나무잎 차분말이 고지방을 급여한 마우스의 식이섭취량에 미치는 영향을 나타낸 그림이다. 평균±표준오차, ab실험군간의 다른 문자는 유의적 차이가 있음(p < 0.05).
도 4는 본 발명의 비타민나무잎 차분말이 고지방을 급여한 마우스의 내장지방 무게에 미치는 영향을 나타낸 그림이다. 평균±표준오차, ab실험군간의 다른 문자는 유의적 차이가 있음(p < 0.05).
도 5는 본 발명의 비타민나무잎 차분말이 고지방을 급여한 마우스의 혈장의 지질 함량에 미치는 영향을 나타낸 그림이다. 평균±표준오차, ab실험군간의 다른 문자는 유의적 차이가 있음(p < 0.05).
도 6은 본 발명의 비타민나무잎 차분말이 고지방을 급여한 마우스의 간조직의 지질 함량에 미치는 영향을 나타낸 그림이다. 평균±표준오차, abc실험군간의 다른 문자는 유의적 차이가 있음(p < 0.05).
도 7은 본 발명의 비타민나무잎 차분말이 고지방을 급여한 마우스의 분변의 지질 함량에 미치는 영향을 나타낸 그림이다. 평균±표준오차, abcd실험군간의 다른 문자는 유의적 차이가 있음(p < 0.05).
도 8은 본 발명의 비타민나무잎 차분말이 고지방을 급여한 마우스의 혈장의 GOT와 GPT 활성에 미치는 영향을 나타낸 그림이다. 평균±표준오차, ab실험군간의 다른 문자는 유의적 차이가 있음(p < 0.05).
도 9는 본 발명의 비타민나무잎 차분말이 고지방을 급여한 마우스의 적혈구의 지질과산화물 함량에 미치는 영향을 나타낸 그림이다. 평균±표준오차, ab실험군간의 다른 문자는 유의적 차이가 있음(p < 0.05).
도 2는 본 발명의 비타민나무잎 차분말이 고지방을 급여한 마우스의 체중변화에 미치는 영향을 나타낸 그림이다. 평균±표준오차, ab실험군간의 다른 문자는 유의적 차이가 있음(p < 0.05).
도 3은 본 발명의 비타민나무잎 차분말이 고지방을 급여한 마우스의 식이섭취량에 미치는 영향을 나타낸 그림이다. 평균±표준오차, ab실험군간의 다른 문자는 유의적 차이가 있음(p < 0.05).
도 4는 본 발명의 비타민나무잎 차분말이 고지방을 급여한 마우스의 내장지방 무게에 미치는 영향을 나타낸 그림이다. 평균±표준오차, ab실험군간의 다른 문자는 유의적 차이가 있음(p < 0.05).
도 5는 본 발명의 비타민나무잎 차분말이 고지방을 급여한 마우스의 혈장의 지질 함량에 미치는 영향을 나타낸 그림이다. 평균±표준오차, ab실험군간의 다른 문자는 유의적 차이가 있음(p < 0.05).
도 6은 본 발명의 비타민나무잎 차분말이 고지방을 급여한 마우스의 간조직의 지질 함량에 미치는 영향을 나타낸 그림이다. 평균±표준오차, abc실험군간의 다른 문자는 유의적 차이가 있음(p < 0.05).
도 7은 본 발명의 비타민나무잎 차분말이 고지방을 급여한 마우스의 분변의 지질 함량에 미치는 영향을 나타낸 그림이다. 평균±표준오차, abcd실험군간의 다른 문자는 유의적 차이가 있음(p < 0.05).
도 8은 본 발명의 비타민나무잎 차분말이 고지방을 급여한 마우스의 혈장의 GOT와 GPT 활성에 미치는 영향을 나타낸 그림이다. 평균±표준오차, ab실험군간의 다른 문자는 유의적 차이가 있음(p < 0.05).
도 9는 본 발명의 비타민나무잎 차분말이 고지방을 급여한 마우스의 적혈구의 지질과산화물 함량에 미치는 영향을 나타낸 그림이다. 평균±표준오차, ab실험군간의 다른 문자는 유의적 차이가 있음(p < 0.05).
본 발명은 이하 실시예를 통하여 좀더 구체적으로 설명될 것이다. 이러한 실시예는 단지 본 발명이 좀 더 이해될 수 있도록 예시적으로 제시되는 것이므로, 이들 실시예로서 본 발명의 범위를 한정해서는 안 될 것이다.
실시예 1: 시료의 준비 및 실험 방법
1-1. 비타민나무잎분말 시료의 준비
순천시 승주읍의 순천시농업기술센터에서 자생하는 비타민나무의 어린 잎(3~5 cm)을 3월에 채취를 한 후 깨끗하게 세척하고 건조한 다음, 이를 믹서기에 넣고 입자 크기가 40~60 메쉬(mesh)가 되도록 분쇄하여 비타민나무잎분말을 제조하였다.
1-2. 비타민나무잎 차분말 시료의 준비
상기 실시예 1-1에서 채취한 비타민나무의 어린 잎을 덖음차로 빚은 다음, 이를 믹서기에 넣고 입자 크기가 40~60 메쉬(mesh)가 되도록 분쇄하여 비타민나무잎 차분말로 사용하였다. 덖음차는 비타민나무잎을 350℃의 가마솥에서 3분간 살청하여 꺼낸 다음 5분간 비비고 그 다음 200℃ 가마솥에서 5분간 덖고 꺼내어 비빈 후 150℃에서 다시 덖고 비빈 다음 100℃ 이하에서 천천히 10분간 덖은 다음 건조기에서 수분을 제거하는 과정을 통하여 제조하였다.
1-3. 실험동물 사육
실험동물은 4주령의 수컷 ICR 마우스 24마리를 바이오제노믹스(Biogenomics, Seoul, Korea)로부터 구입하였다. 마우스는 1주간 고형식이로 적응시킨 후 난괴법에 의하여 정상군, 고지방대조군, 고지방-비타민나무잎분말군, 고지방-1% 비타민나무잎 차분말군(HF-1%VT)과 고지방-5% 비타민나무잎 차분말군(HF-5%VT)으로 나누어 6주간 사육하였다. 동물 사육실의 환경은 항온(22±2℃), 항습(50±4%), 12시간 간격(08:00~20:00)의 광주기로 일정한 조건을 유지하고 동물들은 폴리카보네이트 사육상자(polycarbonate cage)에 두 마리씩 분리하여 사육하였다.
본 실험에 사용한 기본식이는 AIN-76의 식이조성에 준하였으며 단백질 급원으로는 카제인(Murray, UK)을 공급하고, 탄수화물 급원은 옥수수 전분(신동방), 지방 급원으로는 옥수수 기름(제일제당)을 사용하였다. 고지방 식이군들은 총 열량의 37%(3% corn oil + 18% lard)를 지방으로 공급하였다. 라드(Lard)는 롯데삼강으로부터 구입하였다. 비타민나무잎분말은 식이에 1%가 되도록 조제(표 1 참조)하여 급여하였으며 식이와 식수는 자유롭게 섭취(ad libitum)하도록 하였고, 모든 실험식이는 사육기간 동안 냉장 보관하였다. 사육기간 마지막 5일 동안 분변을 수집하여 건조시킨 후 지질측정에 사용하였다.
1-4. 실험동물의 혈장 및 장기 채취
사육이 끝난 실험동물은 희생 전 12시간 동안 절식시킨 후 에테르를 흡입시켜 마취시킨 다음 복부 하대정맥(inferior vena cava)으로부터 공복혈액을 채취하였다. 헤파린 처리된 혈액은 3,000 rpm(4℃)에서 15분간 원심분리하여 혈장을 분리하였다. 실험동물의 장기조직은 혈액 채취 후 즉시 적출하여 PBS(phosphate buffered saline) 용액으로 수차례 헹군 후 표면의 수분을 제거하였으며, 즉시 액체질소로 급냉시켜 -70℃에 보관하였다.
1-5. 실험동물의 혈장, 간조직 및 변 중의 지질 함량 측정
혈장 중의 중성지질 함량은 Mㆌller의 방법(Mㆌller PH. 1977. A fully enzymatic triglyceride determination. J Clin Chem Clin Biochem 15: 457-464.)으로 조제된 키트(아산제약, 한국)를 사용하여 측정하였다. 총 콜레스테롤 함량과 HDL-콜레스테롤 함량은 Richmond의 방법(Richmond V. 1976. Use of cholesterol oxidase for assay of total and free cholesterol in serum continuous flow analysis. Clin Chem 22: 1579-1588.)으로 조제된 키트(아산제약, 한국)를 사용하였다. 한편, 간조직과 변의 지질 함량은 Folch 등의 방법(Folch J, Mee L, Stanley GSH. 1975. A simple method for the isolation and purification of total lipid from animal tissues. J Biol Chem 226: 497-509.)에 준하여 클로로포름:메탄올(2:1,v/v) 혼합액으로 지질을 추출한 후 혈액과 동일한 방법으로 측정하여 농도를 구하였다.
1-6. 혈장의 GOT와 GPT 활성 측정
간독성의 생화학적 지표로 널리 알려져 있는 혈장의 glutamic-oxaloacetic transaminase(GOT)와 glutamic-pyruvic transaminase(GPT) 활성도는 생화학분석기(FUJI FILM DRI-CHEM, 3500I)를 이용하여 측정하였다.
1-7. 실험동물의 적혈구 분리 및 지질과산화물 측정
실험동물의 혈액으로부터 혈장과 연막(buffy coat)을 완전히 제거한 후 McCord와 Fridovich의 방법(McCord JM, Fridovich I. 1969. Superoxide dismutase: An enzymatic function for erythrocuprein (Hemocuprein). J Biol Chem 244: 6049-6055.)에 준하여 적혈구를 분리하였다. 즉 분리한 적혈구는 0.9% 생리식염수로 3회 세척한 후 증류수로 용해한 다음 효소원으로 사용하였다. 적혈구의 헤모글로빈 함량은 키트(아산제약, 한국)로 측정하였다.
적혈구 중의 지질과산화물 함량은 Tarladgis 등의 방법(Tarladgis BG, Pearson AM, Dugan LR. 1964. Chemistry of the 2-thiobarbituric acid test for determination of oxidative rancidity in foods. J Sci Food Agri 15: 602-607.)에 준하여 측정하였다. 지질과산화물의 지표물질인 MDA(malondialdehyde) 함량은 테트라메톡시프로판(tetramethoxypropane) 표준검량선에 준하여 나타내었다.
1-8. 통계처리
실험결과는 SPSS package 프로그램을 이용하여 실험군당 평균±표준오차로 표시하였고 각 군간의 평균치의 통계적 유의성 검정은 one-way ANOVA를 실시하고 다군간의 차이는 p<0.05 수준에서 던칸의 다검정 테스트(Duncan's multiple test)로 사후 검정하였다.
실시예 2: 비타민나무잎의 섭취에 따른 실험동물의 체중, 식이섭취량 및 내장지방 무게의 변화 측정
상기 실시예 1에 기재된 방법에 따라 실시예 1-1의 비타민나무잎분말이 고지방식이를 급여한 마우스의 체중에 미치는 영향을 하기 표 2에 나타내었으며, 일일 식이섭취량과 내장지방 무게를 각각 도 1과 표 3에 나타내었다. 또한, 상기 실시예 1-2의 비타민나무잎 차분말이 고지방식이를 급여한 마우스의 체중에 미치는 영향을 도 2에 나타내었으며, 일일 식이섭취량과 내장지방 무게를 각각 도 3 및 도 4에 나타내었다.
비타민나무잎분말이 고지방식이를 급여한 마우스의 체중에 미치는 영향을 살펴보면, 실험 개시 때의 마우스 체중은 실험군간 유사하였으나, 실험 3주때부터 열량의 37%를 지방으로 급여한 고지방대조군이 정상군에 비하여 유의적인 체중증가를 보였다. 그러나 비티민나무잎분말 급여군의 경우 6주동안 고지방대조군에 비하여 유의적인 체중감소를 보였다(표 1 참조). 이러한 결과는 도 1에서 보는 바와 같이 비타민나무잎분말 급여시 1주에서 2주까지 식이섭취량이 고지방대조군에 비하여 유의적으로 낮았으며, 3주경에 식이섭취량이 회복된 것은 마우스가 비타민나무잎분말 식이에 적응한 것으로 사료된다. 따라서 실험 종료시 비타민나무잎분말군의 식이섭취량이 고지방대조군과 유사하였으나 체중증가는 효과적으로 억제되었다.
또한, 내장지방량 측정을 위하여 부고환지방, 신장주변 및 장간막의 흰색지방 무게를 측정한 결과 신장주변 지방무게는 실험군간에 차이가 없었으나 부고환 지방무게는 고지방대조군이 정상군에 비하여 1.6배 높았다. 그러나 비타민나무잎분말 급여는 고지방으로 인해 증가된 부고환 지방무게를 유의적으로 낮추었으며 총 내장지방 무게는 약 30% 유의적인 감소를 보였다(표 3 참조).
한편, 비타민나무잎 차분말이 고지방식이를 급여한 마우스의 체중에 미치는 영향을 살펴보면, 실험 종료 6주에는 고지방대조군의 체중이 정상군에 비하여 약 18% 증가하였으나 비타민나무잎 차분말 급여군은 유의적이지 않으나 체중이 고지방대조군에 비하여 감소하는 경향이었다(도 2 참조). 그리고 고지방군들이 정상식이군보다 일일 식이섭취량은 낮았으며, 비타민나무잎 차분말은 식이섭취량에는 영향을 미치지 않았다(도 3 참조). 체중단위당 부고환지방 무게는 비타민나무잎 차분말을 1%와 5% 급여시 고지방대조군에 비하여 각각 22%와 28%의 유의적인 감소를 보였고, 장간막 지방무게 역시 감소경향을 보임으로써 총 내장지방 무게가 유의적으로 감소되었다(도 4 참조).
실시예 3: 비타민나무잎의 섭취에 따른 실험동물의 혈장, 간조직 및 분변 중의 지질 함량에 미치는 영향
비타민나무잎분말의 섭취에 따른 실험동물의 혈장, 간조직 및 분변 중의 지질함량을 표 4에 나타내었으며, 비타민나무잎 차분말의 섭취에 따른 실험동물의 혈장, 간조직 및 분변 중의 지질함량을 각각 도 5 내지 7에 나타내었다.
상기 표 4에서 볼 수 있는 바와 같이, 고지방식이는 혈장과 간조직의 지질 함량을 유의적으로 증가시키는데(Ghasi S, Nwobodo E, Ofili JO. 2000. Hypocholesterolemic effects of crude extract of leaf of Moringa oleifera Lam in high-fat diet fed wistar rats. Journal of Ethnopharmacology 69: 21-25.), 본 실험에서도 6주간의 고열량 섭취는 정상군에 비해 혈장 중의 중성지질과 총 콜레스테롤을 유의적으로 증가시켰다. 그러나 혈장의 중성지질과 총 콜레스테롤 함량은 비타민나무잎분말 급여시 고지방대조군에 비해 유의적인 감소를 보임으로써 비타민나무잎분말은 고지방을 급여한 마우스 혈장의 지질을 개선하는데 우수하였다.
6주간의 고지방식이 급여는 간조직의 중성지질과 콜레스테롤 함량을 정상군에 비하여 유의적으로 높였다. 그러나 비타민나무잎분말 급여는 간조직의 중성지질 함량과 콜레스테롤 함량을 고지방대조군에 비하여 유의적으로 낮추었다.
그리고 비타민나무잎분말이 고지방을 섭취한 마우스의 지질 흡수 또는 배설에 미치는 영향을 살펴보기 위하여 변 중의 지질 함량을 측정하였다. 그 결과 콜레스테롤 함량은 고지방대조군이 정상군에 비하여 낮은 반면, 중성지질은 약 2.6배 높았다. 그러나 비타민나무잎분말 급여는 고지방대조군에 비하여 변으로의 중성지질 배설과 콜레스테롤 함량을 각각 1.7배와 1.4배 유의적으로 증가시켰다. 이는 비타민나무잎분말이 지방의 흡수를 저해하거나 배설을 촉진시킴으로써 혈중 지질 개선과 조직 중의 지질 축적을 억제하는데 기여하는 것으로 사료되었다.
한편, 도 5 내지 도 7에서 볼 수 있는 바와 같이, 비타민나무잎 차분말 급여시 고지방대조군에 비하여 혈장의 중성지질은 19% ~ 24% 유의적으로 낮추었으며, 총 콜레스테롤 함량은 18% ~ 29% 유의적으로 낮추었다. 5% 비타민나무잎 차분말 급여가 1% 비타민나무잎 차분말 급여시보다 유의적이지는 않았으나 효과적이었다. HDL-콜레스테롤 함량은 군간의 차이가 없었다. 간조직 중의 콜레스테롤 함량은 비타민나무잎 차분말 급여시 고지방대조군에 비하여 유의적으로 낮았으며, 중성지질 함량은 고지방대조군에 비하여 5% 급여수준에서만 37% 유의적인 감소 효과를 나타내었다. 변으로 중성지질 배설은 비타민나무잎 차분말 급여시 고지방대조군에 비하여 급여수준이 높을수록 유의적으로 증가하였다.
실시예 4: 비타민나무잎의 섭취에 따른 실험동물의 간독성 지표에 미치는 영향
비타민나무잎분말의 섭취에 따른 실험동물의 간독성 지표인 혈장의 GOT와 GPT 활성을 표 5에 나타내었으며, 비타민나무잎 차분말의 섭취에 따른 실험동물의 간독성 지표인 혈장의 GOT와 GPT 활성을 도 8에 나타내었다.
고지방식이는 간독성 지표인 혈장의 GOT와 GPT 활성을 유의적으로 높이는 것으로 나타났으나, 상기 표 5 및 도 8에서 볼 수 있는 바와 같이, 비타민나무잎분말 급여시 이들 GOT 및 GPT 활성이 고지방대조군에 비하여 유의적으로 개선되었으며, 비타민나무잎 차분말 급여시 GPT 활성이 유의적으로 고지방대조군에 비하여 유의적으로 개선된 것을 확인할 수 있었다. 다만, 비타민나무잎 차분말 급여시 GOT 활성은 실험군간의 차이가 나타나지 않았다.
실시예 5: 비타민나무잎의 섭취에 따른 실험동물의 적혈구 중의 지질과한화물 생성에 미치는 영향
비타민나무잎분말의 섭취에 따른 실험동물의 적혈구 중의 지질과산화물 함량을 표 6에 나타내었으며, 비타민나무잎 차분말의 섭취에 따른 실험동물의 적혈구 중의 지질과산화물 함량을 도 9에 나타내었다.
상기 표 6 및 도 9에서 볼 수 있는 바와 같이, 고지방식이는 적혈구의 지질과산화물 함량을 유의적으로 증가시켰으나 비타민나무잎분말 급여시 고지방대조군에 비하여 유의적으로 개선되었으며, 비타민나무잎 차분말 급여시 적혈구 과산화물 생성이 각각 약 15%와 17% 유의적으로 억제되었다.
Claims (7)
- 비타민나무의 잎을 40 내지 400℃에서 1 내지 15분간 덖음하여 차로 제조한 후 잘게 세절한 분말을 포함하는 고지혈증 또는 비만에 기인하는 지질 대사 이상 개선을 위한 식품용 조성물.
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