KR101125718B1 - 양앵두 추출물을 포함하는 트롬빈 활성저해에 의한 혈전예방 및 치료용 식품조성물 - Google Patents
양앵두 추출물을 포함하는 트롬빈 활성저해에 의한 혈전예방 및 치료용 식품조성물 Download PDFInfo
- Publication number
- KR101125718B1 KR101125718B1 KR1020090094258A KR20090094258A KR101125718B1 KR 101125718 B1 KR101125718 B1 KR 101125718B1 KR 1020090094258 A KR1020090094258 A KR 1020090094258A KR 20090094258 A KR20090094258 A KR 20090094258A KR 101125718 B1 KR101125718 B1 KR 101125718B1
- Authority
- KR
- South Korea
- Prior art keywords
- fraction
- activity
- ethyl acetate
- showed
- butanol
- Prior art date
Links
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims abstract description 36
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 title abstract description 24
- 230000000694 effects Effects 0.000 title abstract description 20
- 108090000190 Thrombin Proteins 0.000 title abstract description 15
- 229960004072 thrombin Drugs 0.000 title abstract description 15
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 title abstract description 4
- 235000019693 cherries Nutrition 0.000 title description 11
- 241000167854 Bourreria succulenta Species 0.000 title 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 title 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 title 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 40
- 239000002038 ethyl acetate fraction Substances 0.000 claims abstract description 24
- 230000002785 anti-thrombosis Effects 0.000 claims abstract description 23
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 claims abstract description 11
- 235000015895 biscuits Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 claims abstract description 8
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 claims description 3
- 235000013376 functional food Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims 2
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical group CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 26
- 239000002034 butanolic fraction Chemical group 0.000 abstract description 23
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 abstract description 18
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 abstract description 16
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 abstract description 16
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 abstract description 16
- 244000018633 Prunus armeniaca Species 0.000 abstract description 14
- 235000009827 Prunus armeniaca Nutrition 0.000 abstract description 14
- 206010018910 Haemolysis Diseases 0.000 abstract description 12
- REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N Quercetin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2O)=O)C=1OC=2C1=CC=C(O)C(O)=C1 REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 12
- 230000008588 hemolysis Effects 0.000 abstract description 12
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 10
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 abstract description 10
- 235000013824 polyphenols Nutrition 0.000 abstract description 10
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 abstract description 9
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical group CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 9
- 150000008442 polyphenolic compounds Chemical class 0.000 abstract description 9
- 235000018185 Betula X alpestris Nutrition 0.000 abstract description 8
- 235000018212 Betula X uliginosa Nutrition 0.000 abstract description 8
- 239000002253 acid Substances 0.000 abstract description 8
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 abstract description 7
- 239000002044 hexane fraction Substances 0.000 abstract description 7
- MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N kaempferol Natural products OC1=C(C(=O)c2cc(O)cc(O)c2O1)c3ccc(O)cc3 MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 7
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 abstract description 6
- ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N Quercetagetin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C(O)=C(O)C=C2O1 ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N Rhynchosin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=CC(O)=C(O)C=C2O1 HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 6
- 235000005875 quercetin Nutrition 0.000 abstract description 6
- 229960001285 quercetin Drugs 0.000 abstract description 6
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 6
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 abstract description 5
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 abstract description 5
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 abstract description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 abstract description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 abstract description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 abstract description 2
- 206010020843 Hyperthermia Diseases 0.000 abstract 1
- HVQAJTFOCKOKIN-UHFFFAOYSA-N flavonol Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C(O)=C1C1=CC=CC=C1 HVQAJTFOCKOKIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 1
- 150000002216 flavonol derivatives Chemical class 0.000 abstract 1
- 235000011957 flavonols Nutrition 0.000 abstract 1
- 230000036031 hyperthermia Effects 0.000 abstract 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 22
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 17
- 241001290151 Prunus avium subsp. avium Species 0.000 description 11
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 10
- 229940093499 ethyl acetate Drugs 0.000 description 8
- 235000019439 ethyl acetate Nutrition 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- 235000019750 Crude protein Nutrition 0.000 description 5
- 239000000463 material Substances 0.000 description 5
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 5
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 5
- 229960003766 thrombin (human) Drugs 0.000 description 5
- JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N Bioquercetin Natural products CC1OC(OCC(O)C2OC(OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5)C(O)C2O)C(O)C(O)C1O JMGZEFIQIZZSBH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IKMDFBPHZNJCSN-UHFFFAOYSA-N Myricetin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2O)=O)C=1OC=2C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 IKMDFBPHZNJCSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N eriodictyol 7-O-rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(C)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C=C3C(C(C(O)=C(O3)C=3C=C(O)C(O)=CC=3)=O)=C(O)C=2)O1 IVTMALDHFAHOGL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 description 4
- PCOBUQBNVYZTBU-UHFFFAOYSA-N myricetin Natural products OC1=C(O)C(O)=CC(C=2OC3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C(=O)C=2)=C1 PCOBUQBNVYZTBU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000007743 myricetin Nutrition 0.000 description 4
- 229940116852 myricetin Drugs 0.000 description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 4
- FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N quercetin rutinoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 FDRQPMVGJOQVTL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000005493 rutin Nutrition 0.000 description 4
- ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N rutin Natural products CC1OC(OCC2OC(O)C(O)C(O)C2O)C(O)C(O)C1OC3=C(Oc4cc(O)cc(O)c4C3=O)c5ccc(O)c(O)c5 ALABRVAAKCSLSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N rutin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@@H]1OC[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](OC=2C(C3=C(O)C=C(O)C=C3OC=2C=2C=C(O)C(O)=CC=2)=O)O1 IKGXIBQEEMLURG-BKUODXTLSA-N 0.000 description 4
- 229960004555 rutoside Drugs 0.000 description 4
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 3
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 3
- 238000010306 acid treatment Methods 0.000 description 3
- MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N diethylene glycol Chemical compound OCCOCCO MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 3
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 3
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 3
- PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N (2S)-6-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-4-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-5-amino-2-[[(2S)-1-[(2S,3R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-1-[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-amino-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-sulfanylpropanoyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-(1H-imidazol-5-yl)propanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-hydroxybutanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-3-carboxypropanoyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-methylbutanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]-4-oxobutanoyl]amino]-5-carbamimidamidopentanoyl]amino]-3-(1H-indol-3-yl)propanoyl]amino]-4-carboxybutanoyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]hexanoic acid Chemical compound CSCC[C@H](N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](Cc1cnc[nH]1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](Cc1ccccc1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](Cc1c[nH]c2ccccc12)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(O)=O PGOHTUIFYSHAQG-LJSDBVFPSA-N 0.000 description 2
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- USNPULRDBDVJAO-YRBSALHSSA-O Cyanidin 3-rutinoside Natural products O(C[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](Oc2c(-c3cc(O)c(O)cc3)[o+]c3c(c(O)cc(O)c3)c2)O1)[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O1 USNPULRDBDVJAO-YRBSALHSSA-O 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 2
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 240000009164 Petroselinum crispum Species 0.000 description 2
- 244000007021 Prunus avium Species 0.000 description 2
- 235000010401 Prunus avium Nutrition 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 2
- 102000002262 Thromboplastin Human genes 0.000 description 2
- 235000010208 anthocyanin Nutrition 0.000 description 2
- 229930002877 anthocyanin Natural products 0.000 description 2
- 239000004410 anthocyanin Substances 0.000 description 2
- 150000004636 anthocyanins Chemical class 0.000 description 2
- 229940118589 aspirin 1.5 mg/ml Drugs 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 2
- USNPULRDBDVJAO-FXCAAIILSA-O cyanidin 3-O-rutinoside Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](OC=2C(=[O+]C3=CC(O)=CC(O)=C3C=2)C=2C=C(O)C(O)=CC=2)O1 USNPULRDBDVJAO-FXCAAIILSA-O 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- IYRMWMYZSQPJKC-UHFFFAOYSA-N kaempferol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 IYRMWMYZSQPJKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001331 keracyanin Drugs 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 235000011197 perejil Nutrition 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- -1 polyphenol compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 2
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 2
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 2
- PFTAWBLQPZVEMU-ZFWWWQNUSA-N (+)-epicatechin Natural products C1([C@@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-ZFWWWQNUSA-N 0.000 description 1
- PFTAWBLQPZVEMU-UKRRQHHQSA-N (-)-epicatechin Chemical compound C1([C@H]2OC3=CC(O)=CC(O)=C3C[C@H]2O)=CC=C(O)C(O)=C1 PFTAWBLQPZVEMU-UKRRQHHQSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 1-O-galloyl-3,6-(R)-HHDP-beta-D-glucose Natural products OC1C(O2)COC(=O)C3=CC(O)=C(O)C(O)=C3C3=C(O)C(O)=C(O)C=C3C(=O)OC1C(O)C2OC(=O)C1=CC(O)=C(O)C(O)=C1 TUSDEZXZIZRFGC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N Amphotericin-B Natural products O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1C=CC=CC=CC=CC=CC=CC=C[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-KKGHZKTASA-N 0.000 description 1
- 235000003840 Amygdalus nana Nutrition 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 238000009010 Bradford assay Methods 0.000 description 1
- 208000014644 Brain disease Diseases 0.000 description 1
- PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N Caffeoylquinic acid Natural products CC(CCC(=O)C(C)C1C(=O)CC2C3CC(O)C4CC(O)CCC4(C)C3CCC12C)C(=O)O PZIRUHCJZBGLDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 241001137251 Corvidae Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- UBSCDKPKWHYZNX-UHFFFAOYSA-N Demethoxycapillarisin Natural products C1=CC(O)=CC=C1OC1=CC(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 UBSCDKPKWHYZNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000783577 Dendroaspis angusticeps Thrombostatin Proteins 0.000 description 1
- 101000783578 Dendroaspis jamesoni kaimosae Dendroaspin Proteins 0.000 description 1
- 239000001263 FEMA 3042 Substances 0.000 description 1
- 102000001554 Hemoglobins Human genes 0.000 description 1
- 108010054147 Hemoglobins Proteins 0.000 description 1
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 1
- 238000008214 LDL Cholesterol Methods 0.000 description 1
- 240000007594 Oryza sativa Species 0.000 description 1
- 235000007164 Oryza sativa Nutrition 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N Penta-digallate-beta-D-glucose Natural products OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-PPKXGCFTSA-N 0.000 description 1
- 102100038277 Prostaglandin G/H synthase 1 Human genes 0.000 description 1
- 108050003243 Prostaglandin G/H synthase 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100038280 Prostaglandin G/H synthase 2 Human genes 0.000 description 1
- 108050003267 Prostaglandin G/H synthase 2 Proteins 0.000 description 1
- 235000011432 Prunus Nutrition 0.000 description 1
- 241000220299 Prunus Species 0.000 description 1
- 241000287530 Psittaciformes Species 0.000 description 1
- 241000220317 Rosa Species 0.000 description 1
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical class [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000011149 active material Substances 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N amphotericin B Chemical compound O[C@H]1[C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](C)O[C@H]1O[C@H]1/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/C=C/[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](C)OC(=O)C[C@H](O)C[C@H](O)CC[C@@H](O)[C@H](O)C[C@H](O)C[C@](O)(C[C@H](O)[C@H]2C(O)=O)O[C@H]2C1 APKFDSVGJQXUKY-INPOYWNPSA-N 0.000 description 1
- 229960003942 amphotericin b Drugs 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 229940127218 antiplatelet drug Drugs 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 230000002146 bilateral effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 1
- 239000012152 bradford reagent Substances 0.000 description 1
- 235000008429 bread Nutrition 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000009924 canning Methods 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- YTMNONATNXDQJF-UBNZBFALSA-N chrysanthemin Chemical compound [Cl-].O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC2=C(O)C=C(O)C=C2[O+]=C1C1=CC=C(O)C(O)=C1 YTMNONATNXDQJF-UBNZBFALSA-N 0.000 description 1
- BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N cis-3-O-p-coumaroylquinic acid Natural products O[C@H]1C[C@@](O)(C[C@@H](OC(=O)C=Cc2ccc(O)cc2)[C@@H]1O)C(=O)O BMRSEYFENKXDIS-KLZCAUPSSA-N 0.000 description 1
- 230000015271 coagulation Effects 0.000 description 1
- 238000005345 coagulation Methods 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- 230000006806 disease prevention Effects 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- LPTRNLNOHUVQMS-UHFFFAOYSA-N epicatechin Natural products Cc1cc(O)cc2OC(C(O)Cc12)c1ccc(O)c(O)c1 LPTRNLNOHUVQMS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012734 epicatechin Nutrition 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 1
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- JQOAQUXIUNVRQW-UHFFFAOYSA-N hexane Chemical compound CCCCCC.CCCCCC JQOAQUXIUNVRQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 1
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 1
- 235000008777 kaempferol Nutrition 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- UXOUKMQIEVGVLY-UHFFFAOYSA-N morin Natural products OC1=CC(O)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)=C1 UXOUKMQIEVGVLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002420 orchard Substances 0.000 description 1
- OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N phenol;sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O.OC1=CC=CC=C1 OQUKIQWCVTZJAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002989 phenols Chemical class 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 235000015108 pies Nutrition 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000000106 platelet aggregation inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 235000014774 prunus Nutrition 0.000 description 1
- GWTUHAXUUFROTF-UHFFFAOYSA-N pseudochlorogenic acid Natural products C1C(O)C(O)C(O)CC1(C(O)=O)OC(=O)C=CC1=CC=C(O)C(O)=C1 GWTUHAXUUFROTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010298 pulverizing process Methods 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- SIXLXDIJGIWWFU-UHFFFAOYSA-N pyritinol Chemical compound OCC1=C(O)C(C)=NC=C1CSSCC1=CN=C(C)C(O)=C1CO SIXLXDIJGIWWFU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001054 red pigment Substances 0.000 description 1
- 235000021067 refined food Nutrition 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 235000009566 rice Nutrition 0.000 description 1
- 235000015067 sauces Nutrition 0.000 description 1
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 238000013097 stability assessment Methods 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- LRBQNJMCXXYXIU-NRMVVENXSA-N tannic acid Chemical compound OC1=C(O)C(O)=CC(C(=O)OC=2C(=C(O)C=C(C=2)C(=O)OC[C@@H]2[C@H]([C@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)[C@@H](OC(=O)C=3C=C(OC(=O)C=4C=C(O)C(O)=C(O)C=4)C(O)=C(O)C=3)O2)OC(=O)C=2C=C(OC(=O)C=3C=C(O)C(O)=C(O)C=3)C(O)=C(O)C=2)O)=C1 LRBQNJMCXXYXIU-NRMVVENXSA-N 0.000 description 1
- 229940033123 tannic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000015523 tannic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229920002258 tannic acid Polymers 0.000 description 1
- 238000007395 thrombosis prophylaxis Methods 0.000 description 1
- CWVRJTMFETXNAD-NXLLHMKUSA-N trans-5-O-caffeoyl-D-quinic acid Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)C[C@](O)(C(O)=O)C[C@H]1OC(=O)\C=C\C1=CC=C(O)C(O)=C1 CWVRJTMFETXNAD-NXLLHMKUSA-N 0.000 description 1
- 238000010792 warming Methods 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/73—Rosaceae (Rose family), e.g. strawberry, chokeberry, blackberry, pear or firethorn
- A61K36/736—Prunus, e.g. plum, cherry, peach, apricot or almond
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2200/00—Function of food ingredients
- A23V2200/30—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health
- A23V2200/326—Foods, ingredients or supplements having a functional effect on health having effect on cardiovascular health
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2250/00—Food ingredients
- A23V2250/20—Natural extracts
- A23V2250/21—Plant extracts
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Botany (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Mycology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
본 발명은 양앵두 열수추출물의 항혈전활성을 개시한다. 양앵두 열수추출물의 40%는 당류 성분이며 그 헥산, 에틸아세테이트, 부탄올 분획물 및 물 잔류물의 분획효율은 각각 0.01%, 3.45%, 16.30% 및 80.24%로 나타났고, 지용성 성분은 매우 적었다. 폴리페놀 함량 분석의 경우 에틸아세테이트 분획>물 잔류물>부탄올 분획>헥산 분획 순으로 나타났으며, 총 플라보노이드 함량의 경우에는 에틸아세테이트 분획>헥산 분획>부탄올 분획 순으로 나타났고, 에틸아세테이트 분획물의 경우 1.25 mg/mL의 농도에서 316.6%의 현전저해활성을 보여 아스피린보다 강력한 항혈전효과를 나타내었으며, 부탄올 분획물의 경우 3.0 mg/mL의 농도에서 아스피린 1.5 mg/mL 처리 시의 활성과 유사한 저해활성을 나타내었고, aPTT 측정 결과는 에틸아세테이트 및 부탄올 분획물에서 아스피린과 비교할 만 하였다. 특히, 에틸아세테이트 분획물은 인간 적혈구에 대해 용혈현상을 나타내지 않았으며, 강산 처리시 트롬빈 저해 활성 소실이 나타났으나, 열처리시에는 활성을 유지하였고, 퀘르세틴(quercetin)과 같은 플라보놀(flavonol)을 함유하고 있었으며, 부탄올 분획물은 미약한 인간적혈구 용혈활성을 나타내었고, 내산성을 나타내었으나 고열 처리시 부분적인 활성소실이 나타났으므로 양앵두의 추출물은 항산화, 항염증, 항혈전 활성에 의한 심혈관계 질환 예방 및 치료에 유용하게 이용할 수 있는 뛰어난 효과가 있다.
양앵두, 열수추출물, 유기용매 분획, 혈전억제, 항혈전, 트롬빈활성, aPTT
Description
본 발명은 양앵두 열수추출물의 유기용매 분획물의 항혈전효과에 관한 것이다.
본 발명은 국내산 양앵두의 유용 생리활성 검토를 위한 연구의 일환으로 국내에서 재배된 나폴레옹 품종의 양앵두의 추출물 및 이의 순차적 유기용매 분획물을 조제하여, 혈액내의 혈전 생성에 직접 관여하는 인간 트롬빈의 저해 활성 및 aPTT(activated partial thromboplastin time) 증가활성을 평가하였고, 활성물질의 특성을 검토하므로서 달성하였다. 따라서, 본 발명은 최근 레드(Red)식품으로 각광받고 있는 양앵두가 혈액 순환 장애, 혈전증 예방 및 치료효과를 가지는 건강 기능성 식품 소재로 개발 가능함을 제시하고 있다.
양앵두는 쌍떡잎식물 장미과 벚나무속 식물의 열매로 야앵두, 양앵두, 체리, 단체리, 단벚나무, 단버찌 등의 다양한 이름을 가지며, 원종의 자생지는 카스피해에서 발칸반도에 이르는 아시아 서부와 유럽 동부로 알려져 있다.
우리나라에서는 1920년대에 일본인에 의해 경주지역 등에 처음으로 과원이 조성되어 재배되기 시작했으며, 현재는 경주 지역에서 국내 양앵두의 70% 이상이 생산되고 있다. 그러나 과일 자체의 약한 물성, 30%에 가까운 열과 생성 및 저장성 문제 등으로 수익성이 높지 않아 재배면적의 확대가 이루어지지 않고 있다. 최근에는 소비자의 소득 수준향상에 따른 식품소비의 고급화로 양앵두 생산이 증가하고는 있으나, 국내 양앵두 재배면적은 60 ha, 생산량은 300 톤 정도로 전체 양앵두 수요량의 9.7% 정도를 생산하여 절대량이 수입에 의존하고 있는 실정이다(2007. Kor. J. Intl. Agri. 19:214-223). 양앵두는 전 세계 생산량의 60～80%가 생과로 이용되고 있으며, 일부가 통조림을 만들거나 소스와 파이의 반죽, 잼, 젤리, 쥬스 등의 가공용으로 이용된다. 당분 함량은 12.5～26.5%로 다양하며, 주로 포도당, 과당 등을 함유하며, 소량의 사과산 (0.37～0.87%)과 cyanidin-3-rutinoside, cyanidin-3-glucoside 등의 안토시아닌 색소를 함유하고 있다(1995. J. Agri. Food Chem. 43:343-346, 2009. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutri. 38:574-579, 2007. Food Chem. 107:185-192). 양앵두의 생리활성으로는 폴리페놀 화합물들에 의한 항산화 활성(2001. Phytomedicine 8:362-369, 2005. J. Agri. Food Chem. 53:2741-2745), 퇴행성 뇌질환 예방 활성(2005. J. Agri. Food Chem. 53:9921-9927), 항암 활성, LDL-콜레스테롤 경감 효과(2004. J. Sci. Food Agri. 84:1013-1020), 항염증활성 및 관절염 예방 효과(2006. Scand. J. Rheumatol. 35:356-358) 등의 효과가 보고되어 있으며, 이러한 양앵두의 기능성을 이용하여 다양한 종류의 빵, 떡 및 술 등의 가공식품 개발(2004. J. Food Science 69:67-72, 2009. J. Kor. Soc. Food Sci Nutr. 38:750-756, 2006. Food Chem. 99:6-14, 2001. European Food Res. Tech. 212:319-328), 및 천연 적색색소를 대체하기 위한 소재 개발 연구(1999. J. Kor. Soc. Agric. Chem. Biotech. 42:134-139)도 진행되고 있다.
그러나 현재까지 양앵두의 인간 트롬빈 효소의 저해를 통한 혈전 생성 저해 효과는 보고된 바 없다.
따라서, 본 발명의 목적은 양앵두 열수추출물을 용매분획하여 분획별 수율, 항혈전 활성, 인간 적혈구 용혈 평가. 총 플라보노이드, 총 폴리페놀, 환원당 함량, 총당 함량, 조단백질 함량을 분석하여 양앵두가 열수추출물 나아가 그 유기용매 분획물이 항산화, 항혈전 활성에 의한 심혈관계 질환 예방에 매우 효과적임을 확인하는 데 있다.
본 발명의 상기 목적은 국내에서 재배된 양앵두 추출물 및 이의 순차적 유기 용매 분획물이 혈액내 혈전 생성에 관여하는 인간 트롬빈 저해활성 및 aPPT(activated partial thromboplastin time) 증가활성을 평가하고 나아가 혈관투과성 증대 및 심혈관계 질환의 예방에 효과가 알려진 quercetin, rutin, myricetin, keampferol이 분획물내에 존재함을 확인평가하여 이들의 상승작용에 의해 인간의 혈액순환 장애, 혈전증 예방 및 치료 효과를 가지는 건강 기능성 식품 조성물을 제공함으로써 달성하였다.
이하, 본 발명의 구체적인 구성을 구체적으로 설명한다.
본 발명의 양앵두 열수추출물을 유기용매 분획하여 분획별 수율, 항혈전 활성, 인간 적혈구 용혈 평가, 총 플라보노이드, 총 폴리페놀, 환원당 함량, 총당 함량, 조단백질 함량을 분석평가한 결과, 항산화, 항혈전 활성에 의한 심혈관계 질환 예방 및 치료에 매우 뛰어난 효과가 있다.
본 발명은 양앵두 열수추출물 및 순차적 유기용매 분획물 조제단계, 물 및 유기용매 분획물들을 분말화하는 단계, 분말화 분획물에 함유된 총 폴리페놀과 총 플라보노이드와 총당과 조단백질을 정량하는 단계, 물분획 분말은 물로 희석하고 유기용매분획 분말을 DMSO에 희석하여 TT(Thrombin time)를 이용한 항혈전 활성을 평가하는 단계, 항혈전 활성이 있는 에틸아세테이트, 부탄올 분획을 대상으로 aPTT 측정하는 단계, 인간 적혈구을 대상으로 용혈현상을 분석하는 단계, 에틸아세테이트와 부탄올 분획물의 열 및 산 안정성을 평가하는 단계, 박층크로마토그래피를 이용한 열수추출물 및 분획물들의 플라보노이드 함유 여부를 분석하는 단계로 구성된다.
본 발명에서는 국내산 양앵두의 유용 생리활성 검토를 목적으로 양앵두의 열수추출물 및 순차적 유기용매 분획물을 조제하였다(실시예 1). 양앵두 추출물의 40%는 당류 성분이었으며, 이의 헥산, 에틸아세테이트, 부탄올 분획물 및 물 잔류물의 분획효율은 각각 0.01%, 3.45%, 16.30% 및 80.24%로 나타나, 양앵두 열수추출물의 대부분이 부탄올 분획 및 물 잔류물로 이행되었으며, 지용성 성분은 매우 적었다(실시예 2). 폴리페놀 함량 분석의 경우 에틸아세테이트 분획>물 잔류물>부탄올 분획>헥산 분획 순으로 나타났으며, 총 플라보노이드 함량의 경우에는 에틸아세테이트 분획>헥산 분획>부탄올 분획 순으로 나타났다(실험 1). 조제된 열수추출물과 유기용매 분획물의 항혈전 활성을 평가한 결과, 에틸아세테이트 분획물의 경우 1.25 mg/mL의 농도에서 316.6%의 저해활성을 보여 아스피린보다 강력한 혈전생성 억제활성을 나타내었으며, 부탄올 분획물의 경우 3.0 mg/mL의 농도에서 아스피린 1.5 mg/mL 처리 시의 활성과 유사한 저해활성을 나타내었다(실험 2). aPTT 측정 결과 에틸아세테이트 및 부탄올 분획물은 아스피린과 비교할 만 하였다(실험 3). 에틸아세테이트 분획물은 인간 적혈구에 대해 용혈현상을 나타내지 않았으며(실험 4), 강산 처리시 트롬빈 저해 활성 소실이 나타났으나, 열처리시에는 활성을 유지하였고(실험 5), 퀘르세틴(quercetin)과 같은 플라보놀(flavonol)을 함유하고 있었 다(실험 6). 한편 부탄올 분획은 미약한 용혈활성을 나타내었고(실험 4), 내산성을 나타내었으나 고열 처리시 부분적인 활성소실이 나타났다(실험 5). 본 발명은 양앵두가 항산화, 항염증, 항혈전 활성에 의한 심혈관계 질환 예방에 유용한 식품소재로 이용될 수 있음을 확인하였다.
이하, 본 발명의 구체적인 내용을 실시예를 들어 상세히 설명하고자 하지만 본 발명의 권리범위는 이들 실시예에만 한정되는 것은 아니고 용매의 변경, 추출방법의 변경 등에 의하여 당 업자가 얼마든지 모방할 수 있으며 이와같은 정도의 기술구성의 변경은 본 발명의 권리범위에 포함된다 할 것이다.
실시예 1: 양앵두 열수추출물 및 순차적 유기용매 분획물 조제
양앵두를 수세한 후 건조하고 물기를 제거하였으며, 이를 열수추출물 조제에 사용하였다. 양앵두 5 kg 을 흐르는 물에 수세 후, 정제수 1 리터를 첨가하여 1시간 동안 100℃에서 추출하여 최종적으로 추출액 1리터를 회수하였으며, 사용 전까지 4℃에서 밀봉 보관하였다. 열수추출물은 헥산(n-hexane), 에틸아세테이트(ethylacetate), 부탄올(butanol)을 이용하여 순차적으로 분획하고, 물 잔류물을 회수하였다.
실시예 2: 물 및 유기용매 분획물 분말화
양앵두 물 및 유기용매 분획물을 filter paper (Whatsman No. 2)로 여과한 후 감압건조하여 분말화하였다. 열수추출물의 헥산, 에틸아세테이트, 부탄올 분획물 및 물 잔류물의 분획효율은 각각 0.01%, 3.45%, 16.30% 및 80.24%로 나타나, 양앵두 열수추출물의 대부분이 부탄올 분획 및 물 잔류물로 이행되었으며, 지용성 성분은 매우 적음을 알 수 있었다(표 1).
실험 1 : 총 폴리페놀, 총 플라보노이드, 총당, 조단백질 정량
총 flavonoid의 함량 측정은 Davis 방법의 변법(2007. Kor. J. Life Sci. 17:535-539, 2006. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 34:132-138)에 따라 측정하였으며, 각각의 시료를 18시간 메탄올 교반 추출하고 여과한 추출검액 400 ㎕에 90% diethylene glycol 4 mL를 첨가하고 다시 1 N NaOH 40 ㎕를 넣고 37℃에서 1시간 반응 후 420 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 rutin을 사용하였다. 총 polyphenol 함량은 Singleton 등의 방법(1999. Methods Enzymol. 299:152-178)에 따라 추출검액 400 ㎕에 50 ㎕의 Folin-ciocalteau, 100 ㎕의 Na2CO3 포화용액을 넣고 실온에서 1시간 방치한 후 725 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 tannic acid를 사용하였다. 총당 정량의 경우에는 phenol-sulfuric acid법을, 환원당 정량의 경우에는 DNS 변법을 이용하였다(2007. Kor. J. Life Sci. 17:535-539). 조단백질 정량은 Bradford법을 수정하여 측정하였으며, 96-well plate에 각각의 시료 20 ㎕ 와 40 ㎕의 Bradford reagent (Bio-Rad Inc. USA)를 반응 시킨 후 3차 멸균수로 최종 부피가 200 ㎕ 되도록 조정 후, 595 nm에서 흡광도를 측정하였다. 표준시약으로는 bovine serum albumin을 사용하였다.
각 분획물의 총 폴리페놀 및 총 플라보노이드의 함량을 분석한 결과, 폴리페놀 함량의 경우 에틸아세테이트 분획>물 잔류물>부탄올 분획>헥산 분획 순으로 나타났으며, 총 플라보노이드 함량의 경우에는 에틸아세테이트 분획>헥산 분획>부탄올 분획 순으로 나타났다(표 1). 양앵두 열수추출물의 대부분을 차지하는 물 잔류물의 경우 플라보노이드는 검출되지 않았으며, 약 90%가 당 성분으로 확인되었다. 이는 양앵두 대부분의 성분이 glucose, fructose, sucrose 및 sorbitol이라는 보고(2005. J. Agri. Food Chem. 53:2741-2745, 2007. Food Chem. 107:185-192)와 일치하는 결과이다. 양앵두 열수추출물의 다양한 분획들은 neochlorogenic acid, ρ-coumaroylquinic acid, hydroxycinamic acids, 및 epicatechin 등의 페놀 화합물(2005. J. Agri. Food Chem. 53:9921-9927, 2007. Food Chem. 107:185-192)과 quercetin, rutin 및 myricetin 등의 플라보노이드가 보고(2005. J. Am. Soc. Hort. Sci. 130:527-5330)되어 있어 항산화력이 우수하다(2006. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutri. 35:132-138, 2005. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutri. 34:593-598).
실험 2 : TT(Thrombin time)를 이용한 항혈전 활성 평가
트롬빈 저해 활성은 기존의 보고한 Amelung coagulometer KC-1A (Japan)를 이용하여 혈액 응고시간을 측정하여 평가하였다(2004. J. Life Sci. 14:509-513, 2008. Kor. J. Life Sci. 18:363-368). 37℃에서 0.5 U 트롬빈 (Sigma Co., USA) 50 ㎕와 20 mM CaCl₂50 ㎕, 다양한 농도의 시료 추출액 10 ㎕를 coagulometer의 튜브에 혼합하여 2분간 반응시킨 후, 혈장 100 ㎕를 첨가한 후 혈장이 응고될 때까지의 시간을 측정하였으며, 시료 대조군으로는 아스피린(국산화학, Japan)을, 용매 대조군으로는 DMSO를 사용하였다. 트롬빈 저해 활성은 3회 이상 반복한 TT 실험의 평균치를 용매 대조구인 DMSO의 TT 평균치의 백분율 비로 나타내었다(2008. Kor. J. Life Sci. 18:363-368, 2005. J. Kor. Soc. Food Sci. Nutr. 34:593-598).
인간 트롬빈에 대한 저해활성은 TT를 측정하여 평가하기 위하여 대조구로는 혈소판 응집 저해제로 널리 이용되고 있는 아스피린을 사용하였으며, 아스피린은 1.5 mg/mL 농도에서 273.7%의 트롬빈 저해활성을 나타내었다. 양앵두 열수추출물 및 물 잔류물의 경우, 5.0 mg/mL 농도까지 트롬빈 저해 활성이 나타나지 않았으며, 헥산 분획물에서는 미미한 저해활성이 나타났다. 그러나, 에틸아세테이트 분획물의 경우 1.25 mg/mL의 농도에서 316.6%의 저해활성을 나타내었으며, 1.5 mg/mL에서는 1,000% 이상의 높은 트롬빈 저해활성을 보여, 대조구인 아스피린보다 강력한 혈전생성 억제활성을 나타내었다. 또한 부탄올 분획물의 경우 3.0 mg/mL의 농도에서 아 스피린 1.5 mg/mL 처리시의 활성과 유사한 저해활성을 나타내었으며, 4.0 mg/mL에서는 1,000% 이상의 활성을 나타내었다. 이러한 결과는 양앵두의 에틸아세테이트 분획이 강력한 인간 트롬빈 저해활성 물질을 가지고 있음을 나타내며, 양앵두의 항혈전 활성을 추측할 수 있게 한다(표 2).
실험 3 : aPTT 연장 활성 측정
TT 측정 결과 항혈전 활성이 인정되는 경우 aPTT를 측정하였으며, aPTT 측정의 경우에는, 혈장 100 ㎕와 다양한 농도의 시료액 10 ㎕를 Amelung coagulometer KC-1A (Japan)의 튜브에 첨가하여 37 ℃에서 3분간 가온한 후, 50 ㎕의 aPTT reagent (Sigma, ALEXINTM)를 첨가하고 다시 37 ℃에서 3 분간 반응하였다. 이후 50 ㎕ CaCl2 (35 mM)을 첨가한 후 혈장이 응고될 때까지의 시간을 3회 반복한 실험의 평균치로 나타내었다. aPTT 연장 활성은 3회 이상 반복한 aPTT 실험의 평균치를 용매 대조구인 DMSO의 aPTT 평균치의 백분율 비로 나타내었다(2004, J. Life Sci. 14:509-513, 2008. Kor. J. Life Sci. 18:363-368).
TT 활성이 우수한 에틸아세테이트 분획물의 aPTT를 측정한 결과, 2.0 mg/mL 농도에서 138.3%의 aPTT 연장효과를, 2.5 mg/mL 농도에서는 600% 이상의 활성을 나타내었다. 부탄올 분획물의 경우에는 2.5 mg/mL 농도에서 161.2%, 3.0 mg/mL 농도에서 324.8%, 4.0 mg/mL의 농도에서 600% 이상의 활성을 나타내어 대조구로 이용된 아스피린과 비교할 만하였다(표 2). 이러한 결과들은, 양앵두 열수추출물의 에틸아세테이트 분획 및 부탄올 분획이 다양한 항혈전 활성물질을 함유하며, 특히 에틸아세테이트 분획물이 주요 활성물질을 포함하고 있음을 제시한다. 양앵두의 cyanidin-3-rutinoside 및 cyanidin-3-glucosylruinoside와 같은 안토시아닌 물질의 보고와, 이들이 강력한 항산화 활성과 COX-1, COX-2 효소 저해활성을 나타내다는 보고(2001. Phytomedicine 8:362-369, 1999. J. Nat. Prod. 6:294-296)를 고려할 때, 양앵두는 항산화, 항염증, 항혈전 활성에 의한 심혈관계 질환 예방에 유용 한 식품소재로 이용될 수 있음을 확인하였다.
실험 4 : 인간 적혈구 대상 용혈현상 분석
체리 열수추출물 및 이의 순차적 유기용매 분획물의 용혈 활성은 인간 적혈구(4%)를 이용하여 평가하였다(2007. Biochem. Biophys. Res. Comm. 363:806-810). Phosphate-buffered saline (PBS; Welgene Inc, Korea)으로 3회 수세한 인간 적혈구 100 ㎕를 96-well microtiter plate에 첨가하고 다양한 농도의 시료용액 100 ㎕를 가한 다음, 37℃에서 30분간 반응시켰다. 이후, 반응액을 10분간 원심분리(1,500 rpm)하여 상등액 100 ㎕를 새로운 microtiter plate로 옮긴 후, 용혈에 따른 헤모글로빈 유출 정도를 414 nm에서 측정하였다. 시료의 용매 대조구로는 DMSO (2%)를 사용하였으며, 대조구로는 triton X-100 (0.1%)을 사용하였다. 용혈활성은 다음의 수식을 이용하여 계산하였다.
(%) hemolysis = [(Abs S - Abs C)/(Abs T - Abs C)] × 100.
Abs S: 시료 첨가구의 흡광도, Abs C: DMSO 첨가구의 흡광도,
Abs T: triton X-100 첨가구의 흡광도
대조구로 사용한 triton X-100은 0.1% 농도에서 100% 용혈현상이 나타났으며, amphotericin B의 경우에는 125 ㎍/mL 농도에서 75.3%, 250㎍/mL 농도에서 85.3%, 500 ㎍/mL 농도에서 89.5%의 용혈을 나타내었다. 반면 양앵두의 추출물 및 분획물들은 미미한 용혈활성을 나타내었다. 부탄올 분획물의 경우 500 ㎍/mL 농도 에서 12.66%의 미미한 용혈 현상이 나타났으며, 다른 시료의 경우 동일농도에서 1.43%～4.76%의 용혈이 나타나 심각한 문제를 야기하지는 않을 것으로 판단되었다(표 3).
실험 5 : 열 및 산 안정성 평가
양앵두 추출물의 항혈전 활성물질의 열 안정성 평가의 경우에는, 에틸아세테이트 분획물 1.5 ㎎/㎖, 부탄올 분획물 3.3 ㎎/㎖을 100 ℃에서 30분 동안 각각 열처리한 후 상온에서 방냉하여 잔존활성을 측정하였다. 산 안정성 평가를 위해서 0.2 N HCl 용액에 일정시간 동안 실온에서 반응시킨 후, 0.2 N NaOH 용액으로 pH 7로 보정하여 잔존 활성을 측정하였다. 잔존 트롬빈 저해 활성은 3회 이상 반복한 실험의 평균치로 나타내었다.
에틸아세테이트 분획물의 경우 100℃, 30분 열처리시 활성소실이 나타나지 않았으나, 0.2 N HCl, 30분 처리의 경우 급격한 활성 소실이 나타나 강산 처리시 활성이 소실됨을 알 수 있었다. 한편 부탄올 분획물의 경우, 동일한 산 처리시 활성감소는 나타나지 않았으나 열처리에 의해서 일부 트롬빈 저해 활성의 감소가 나타남을 알 수 있었다(표 4). 따라서, 양앵두의 항혈전 활성이 우수한 에틸아세테이트 분획물의 가공을 위해서는 산 처리 공정을 제외시켜야 함을 알 수 있었다.
실험 6 : 박층크로마토그래피 이용 플라보노이드 함유 여부 분석
silica gel plate (Silica gel 60F254, Merck, Darmstadt. Germany)를 사용하여 박층크로마토그래피를 수행였으며, 클로로포름:메탄올:물(52:28:8 v/v/v)을 전개용매로 하여 전개 후, 10% 황산용액을 분무하여 확인하였다.
양앵두는 혈관 투과성 증대 및 심혈관계 질환의 예방 효과가 알려진 quercetin, rutin 및 myricetin 등의 플라보노이드 물질을 포함하는 것으로 알려져 있다(2005. J. Am. Soc. Hort. Sci. 130:527-5330). 따라서 본 발명에서 양앵두 열 수추출물 또는 그 유기용매 분획물을 대상으로 이들 플라보노이드 물질들의 함유 여부를 박층크로마토그래피로 분석한 결과 에틸아세테이트 분획물에서 quercetin, myricetin, rutin 및 kaempferol에 상응하는 물질이 확인 되었다(도 1). 비록 이들은 트롬빈 저해 활성이 나타나지는 않았지만(2006. J. Kor Soc. Food Sci. Nutr. 35:132-138) 우수한 항산화 활성을 나타내었다.
본 발명의 양앵두 열수추출물의 유기용매 분획물은 항산화, 항혈전활성에 뛰어난 효과가 있으므로 건강기능성 식품산업에 매우 유용한 발명인 것이다.
도 1은 양앵두 유기용매 분획의 박층크로마토그래피로 플라보노이드 물질의 함유 여부를 확인한 사진도이다.
Claims (4)
- 양앵두 열수추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유함을 특징으로 하는 항혈전 활성 조성물.
- 삭제
- 삭제
- 양앵두 열수추출물의 에틸아세테이트 분획물을 유효성분으로 함유함을 특징으로하는 항산화기능성 식품 조성물.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020090094258A KR101125718B1 (ko) | 2009-10-05 | 2009-10-05 | 양앵두 추출물을 포함하는 트롬빈 활성저해에 의한 혈전예방 및 치료용 식품조성물 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1020090094258A KR101125718B1 (ko) | 2009-10-05 | 2009-10-05 | 양앵두 추출물을 포함하는 트롬빈 활성저해에 의한 혈전예방 및 치료용 식품조성물 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20110037023A KR20110037023A (ko) | 2011-04-13 |
| KR101125718B1 true KR101125718B1 (ko) | 2012-03-27 |
Family
ID=44044560
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1020090094258A KR101125718B1 (ko) | 2009-10-05 | 2009-10-05 | 양앵두 추출물을 포함하는 트롬빈 활성저해에 의한 혈전예방 및 치료용 식품조성물 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| KR (1) | KR101125718B1 (ko) |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999055350A1 (en) * | 1998-04-24 | 1999-11-04 | Rowett Research Services Limited | Antithrombotic agents |
-
2009
- 2009-10-05 KR KR1020090094258A patent/KR101125718B1/ko not_active IP Right Cessation
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1999055350A1 (en) * | 1998-04-24 | 1999-11-04 | Rowett Research Services Limited | Antithrombotic agents |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 논문1:FOOD CHEMISTRY* |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20110037023A (ko) | 2011-04-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5324084B2 (ja) | コケモモ抽出物並びにその製造方法及び使用 | |
| Hogervorst et al. | Extraction of bioactive compounds from grape processing by-products | |
| JP4782104B2 (ja) | アセロラ果実由来ペクチンおよびその用途 | |
| JP2009013159A6 (ja) | コケモモ抽出物並びにその製造方法及び使用 | |
| KR102398484B1 (ko) | 히비스커스 추출물을 함유하는 식품 조성물 및 히비스커스 추출물의 제조방법 | |
| KR101874161B1 (ko) | 나무딸기 잎 및 줄기 추출물을 주성분으로 하는 항비만 조성물 및 그 제조방법 | |
| KR20200145897A (ko) | 항산화 활성이 증진된 고구마 추출물 제조방법 및 이를 통해 제조된 고구마 추출물 | |
| KR101259791B1 (ko) | 감귤류를 함유한 건강보조식품의 제조방법 및 이를 이용한 건강보조식품 | |
| KR101812319B1 (ko) | 아이리린 ｂ를 포함하는 혈전증 예방 및 치료용 조성물 | |
| Venskutonis | Natural antioxidants in food systems | |
| Khatib et al. | Mesocarp and Exocarp of Laffan and Wonderful Pomegranate Cultivars: by products as a Source of Ellagitannins | |
| KR101125718B1 (ko) | 양앵두 추출물을 포함하는 트롬빈 활성저해에 의한 혈전예방 및 치료용 식품조성물 | |
| JP2011178730A (ja) | メイラード反応阻害剤およびＡＧＥｓ生成抑制剤 | |
| KR20100088851A (ko) | 단호박 식혜의 제조방법 | |
| KR102216222B1 (ko) | 연잎 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품 | |
| KR101716342B1 (ko) | 수수로부터 안토시아니딘의 추출방법 | |
| KR101813200B1 (ko) | 솔잎이 첨가된 고함량 s-아릴시스테인을 함유하는 흑마늘 타블렛의 제조방법 | |
| JP6201598B2 (ja) | メイラード反応阻害剤 | |
| KR101629102B1 (ko) | 여주 주스의 제조방법 및 그로부터 제조된 여주 주스 | |
| KR20190090097A (ko) | 안동참마식혜 및 이의 제조방법 | |
| KR102313083B1 (ko) | 등수국 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는 항산화용 조성물 | |
| RU2553521C2 (ru) | Способ приготовления белково-углеводных продуктов | |
| SG194004A1 (en) | Protein-containing composition and method for producing same | |
| KR101209369B1 (ko) | 모시대 추출물의 분획물 제조방법 및 모시대 추출물의 분획물을 포함하는 미용기능식품 | |
| KR102216218B1 (ko) | 연자방 에탄올 추출물을 유효성분으로 함유하는 혈전증의 예방 또는 치료용 약학적 조성물 및 건강 기능 식품 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A201 | Request for examination | ||
| E902 | Notification of reason for refusal | ||
| E701 | Decision to grant or registration of patent right | ||
| GRNT | Written decision to grant | ||
| FPAY | Annual fee payment |
Payment date: 20150303 Year of fee payment: 4 |
|
| LAPS | Lapse due to unpaid annual fee |