KR100993135B1

KR100993135B1 - 수베로일아닐리드 하이드록삼산의 제형 및 이의 제조방법

Info

Publication number: KR100993135B1
Application number: KR1020087030074A
Authority: KR
Inventors: 지아니 차우 웡; 아론 에스 코테; 에릭 에이 디네만; 킴벌리 갤러허; 크레이그 이케다; 져스틴 모세르; 파볼 라즈니아크; 로버트 에이 리드; 신디 스타벅; 시엔-신 퉁; 칭시 왕; 벤자민 맥스 코헨; 빈센트 알 카포다노; 브라이언 셀; 토마스 에이 밀러
Original assignee: 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션
Priority date: 2005-05-20
Filing date: 2006-05-16
Publication date: 2010-11-10
Also published as: BRPI0605893A; US20100113829A1; US8288440B2; WO2006127319A3; TW201034660A; US20100112046A1; ECSP077263A; US20100119596A1; US20080132575A1; WO2006127319A2; NZ594669A; JP2011251985A; TWI365068B; MX2007002047A; DOP2006000113A; NZ553204A; CR8912A; TWI415603B; AU2010201359A1; JP5264174B2

Abstract

본 발명은 활성 성분으로서 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물을 포함하는, 특정한 용해 프로파일을 갖는 약제학적 조성물 또는 결정질 조성물을 제공한다. 본 발명은 상기 결정질 조성물 또는 약제학적 조성물의 제조방법을 제공한다. 본 발명은 또한 특정한 입자크기 분포를 갖는 조성물을 제공한다.

용해 프로파일, 용해율, 입자크기 분포, 수베로일아닐리드 하이드록삼산, X-선 회절 패턴

Description

수베로일아닐리드 하이드록삼산의 제형 및 이의 제조방법{Formulations of suberoylanilide hydroxamic acid and methods for producing same}

본 명세서 전반에 걸쳐서, 다양한 문헌이 괄호안의 아라비아 숫자로 언급된다. 이들 문헌의 완전한 인용은 청구의 범위 바로 앞에 본 명세서의 말미에서 찾아볼 수 있다.

암은 세포 집단이 증식 및 분화를 정상적으로 통제하는 조절 기작에 대해 다양한 정도로 비반응성이 되는 질환이다. 수년 동안 암의 화학치료적 처치를 위한 2가지 기본적 전략이 있었다: a) 성 호르몬의 생산 또는 말초 작용을 방해함에 의 한 호르몬-의존적 종양세포 증식의 차단; 및 b) 종양성신생세포(neoplastic cell) 및 정상 세포 집단 둘다를 손상시키는 세포독성 물질을 암 세포에 노출시킴에 의한 암 세포의 직접적 치사.

암 요법은 또한 종양성신생세포의 최종적 분화를 유도함으로써 시도되고 있다(1). 세포 배양 모델에서, 세포를 사이클릭 AMP 및 레티노산(2,3), 아클라루비신 및 기타 안트라사이클린(4)을 포함하는 각종 자극에 노출시킴에 의한 분화가 보고되었다.

종양학 분야의 많은 진보에도 불구하고, 대다수의 고형 종양은 진행기에서는 여전히 치유할 수 없다. 세포독성 요법은 대부분의 사례에서 사용되지만, 현저한 임상적 이득없이 환자에게 현저한 질병율을 종종 야기한다. 진행된 악성종양을 치료 및 조절하기 위한 독성이 덜하고 보다 특이적인 제제가 조사되고 있다.

신생물로의 형질전환(neoplastic transformation)이 암 세포의 분화 잠재성을 반드시 파괴하는 것은 아니라는 많은 증거들이 있다(1,5,6). 정상적 증식 조절인자에 반응하지 않고 이의 분화 프로그램의 발현이 차단된 것으로 보이지만 분화되도록 유도될 수 있고 복제가 중단될 수 있는 종양 세포의 많은 예가 있다. 몇몇 비교적 단순한 극성 화합물(5, 7 내지 9), 비타민 D의 유도체 및 레티노산(10 내지 12), 스테로이드 호르몬(13), 성장 인자(6, 14), 프로테아제(15, 16), 종양 촉진자(17, 18) 및 DNA 또는 RNA 합성 억제제(4, 19 내지 24)를 포함하는 다양한 제제들은 다양한 형질전환된 세포주 및 1차 사람 종양 외식물이 보다 분화된 특징을 발현하도록 유도할 수 있다.

수베로일아닐리드 하이드록삼산(suberoylanilide hydroxamide acid; SAHA)과 같은 히스톤 데아세틸라제 억제제는 종양세포 성장 정지, 분화 및/또는 아폽토시스(apoptosis)를 유도하는 능력을 갖는 상기한 제제 부류에 속한다(25). 이들 화합물이 동물에서 종양 성장의 억제에 효과적인 용량에서 독성을 갖는 것으로 나타나지 않음에 따라(26), 이들 화합물은 악성 종양이 되는 종양성신생세포의 능력 고유의 기전에 대해서 표적화된다. 히스톤 아세틸화 및 탈아세틸화가 세포에서의 전사적 조절이 달성되도록 하는 기전이라는 몇가지 일련의 증거가 있다(27). 이러한 효과는 뉴클레오좀내 코일링된 DNA의 히스톤 단백질의 친화성을 변경시킴으로써 염색질의 구조 변화를 통해서 일어나는 것으로 사료된다. 5가지 유형의 히스톤(H1, H2A, H2B, H3 및 H4로 명명됨)이 뉴클레오좀에서 동정되었다. 각각의 뉴클레오좀은 뉴클레오좀 구조의 외부에 단독으로 존재하는 H1을 제외한, 각각의 히스톤 유형 중 2가지를 이의 코어 내에 함유한다. 히스톤 단백질이 과아세틸화되는 경우 DNA 포스페이트 골격에 대한 친화성이 보다 큰 것으로 사료된다. 이러한 친화성은 DNA가 히스톤에 단단하게 결합되도록 하며 DNA가 전사적 조절 요소 및 기구에 접근하기 어렵게 만든다. 아세틸화 상태의 조절은 두 효소 복합체, 즉 히스톤 아세틸 트랜스퍼라제(HAT) 및 히스톤 데아세틸라제(HDAC) 간의 활성의 균형을 통해서 일어난다. 과아세틸화 상태는 관련 DNA의 전사를 억제하는 것으로 사료된다. 이러한 과아세틸화 상태는 HDAC 효소를 포함하는 거대 다중단백질 복합체에 의해 촉매된다. 특히 HDAC는 염색질 코어 히스톤으로부터의 아세틸 그룹의 제거를 촉매하는 것으로 제시되었다.

SAHA(ZOLINZA^TM(보리노스태트))는 종양을 치료하고, 종양성신생세포의 최종적 분화를 선택적으로 유도하고, 세포 성장 정지를 유도하고/하거나 아폽토시스를 유도하는데 유용한 것으로 제시되었다. SAHA에 의한 HDAC의 억제는 X-선 결정학 연구로 입증된 바에 따르면 효소의 촉매 부위와 직접 상호작용함으로써 일어나는 것으로 사료된다(28). HDAC 억제의 결과는 게놈에 전반적 효과를 미치지 않고, 오히려 게놈의 작은 서브세트에만 영향을 주는 것으로 사료된다(29). HDAC 억제제와 함께 배양된 악성종양 세포주를 사용한 DNA 마이크로어레이는 한정된(1 내지 2% ) 수의 유전자의 산물이 변경됨을 보여준다. 예를 들면, HDAC 억제제와의 배양물 중의 처리된 세포는 사이클린-의존적 키나제 억제제 p21의 일관된 억제를 나타낸다(30). 당해 단백질은 세포 주기 정지에서 중요한 역할을 한다. HDAC 억제제는 p21 유전자의 영역내에서 히스톤의 과아세틸화 상태를 증가시킴으로써 유전자가 전사 기구에 접근할 수 있게 만듦으로써, p21의 전사율을 증가시키는 것으로 간주된다. 발현이 HDAC 억제제에 의해 영향을 받지 않는 유전자는 영역 관련 히스톤의 아세틸화에 있어 변화를 나타내지 않는다(31).

발명의 요지

본 발명은 활성 성분으로서 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물을 포함하는, 특정한 용해 프로파일을 갖는 약제학적 조성물을 제공한다. 하나의 양태에서, 당해 약제학적 조성물의 활성 성분은 도 1에 도시된 참조 용해 프로파일과 비교하여 유사성 인자(similarity factor)(f2)가 50 이상 내지 100인 시험관내 용해 프로파일을 갖는다. 본 발명은 또한 경구 투여용 약제학적 조성물 및 이에 기초한 단위 투여량 형태를 제공한다.

본 발명은 또한, 활성 성분으로서 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물을 포함하고, 여기서 활성 성분 약 100mg이 도 2에 도시된 참조 용해 프로파일과 비교하여 유사성 인자(similarity factor)(f2)가 50 이상 내지 100인 시험관내 용해 프로파일을 갖는 결정질 조성물을 제공한다.

본 발명은 또한 당해 약제학적 조성물의 제조방법을 제공한다. 또한, 본 발명은 특정한 입자크기 분포를 갖는 조성물을 제공한다.

"약제학적으로 허용되는 담체"란 용어는 약제학적 조성물 중의 활성 성분의 명시된 용해율을 유지할 수 있는, 약제학적 투여와 상용성인 임의의 및 모든 용매, 분산 매질, 피복제, 항세균제 및 항진균제, 등장제 및 흡수 지연제 등을 포함한다. 적합한 담체는 당해 분야의 표준 참조 교과서인 문헌[참조: Remington's Pharmaceutical Sciences; 이는 본원에서 참조로 인용된다]의 가장 최신판에 기술되어 있다. 고정유와 같은 리포좀 및 비-수성 소포를 사용할 수도 있다. 약제학적 활성 물질에 대한 이러한 매질 및 제제의 사용은 당해 분야에 널리 공지되어 있다. 임의의 통상적 매질 또는 제제가 활성 성분과 상용성이 아닌 경우를 제외하고, 이들을 조성물에서 사용하는 것이 의도된다. 보충적 활성 화합물을 또한 조성물내로 도입시킬 수 있다.

"f2" 또는 "F2"란 용어는 참조 시험관내 용해 프로파일과 새로운 시험관내 용해 프로파일과의 포인트별 비교를 통해 측정된 유사성 인자를 의미하며, 하기 수학식 1로 제시된다.

R_t는 참조물에 대한 각 시점(t)에서 용해된 화합물의 백분율을 의미한다. T_t는 시험 샘플에 대한 각 시점(t)에서 용해된 화합물의 백분율을 의미한다. n은 계산을 위해 사용된 시점의 수를 의미한다. 50 이상의 f₂ 값은 유사한 시험관내 용해 프로파일을 반영하는 것으로 고려된다.

본 발명의 목적상, 약제학적 조성물의 전체 활성 성분의 시험관내 용해율 또는 용해 프로파일은 실시예 14의 단계 및 조건에 따라서 전체 약제학적 조성물로부터 측정된다. 하나의 양태에서, 시험관내 용해율 또는 용해 프로파일은, 37℃의 온도에서 900mL의 2.0% Tween(제조원: TCI America, Portland, Oregon) 중에서, 나선형 싱커 및 100rpm로 회전하는 패들을 갖는 USP 용해 장치 II(Quality Lab Accessories L.L.C., Manville, NJ)를 사용하여 측정한다. 전체 약제학적 조성물은 전체 활성 성분을 포함하고, 약제학적 조성물이 캡슐 외피, 담체, 부형제, 희석제, 붕해제, 윤활제, 결합제 또는 하기 약제학적 조성물 단락에 기술된 임의의 부가적 제제를 함유하는 경우, 이들 성분을 사용하여 측정을 수행한다.

본 발명의 목적상, "활성 성분 약 100mg을 포함하는 단일 경구 투여량 단위 형태의 부분"의 시험관내 용해율 또는 용해 프로파일은, 단일 경구 투여량 단위 형태로부터 활성 성분 약 100mg을 포함하는 조성물을 회수하고 37±0.5℃의 온도에서 900mL의 2.0% Tween(제조원: TCI America, Portland, Oregon) 중에서 나선형 싱커 및 100rpm로 회전하는 패들을 갖는 USP 용해 장치 II(Quality Lab Accessories L.L.C., Manville, NJ)를 사용하여 측정한다. 단일 경구 투여량 단위 형태가 캡슐 외피, 담체, 부형제, 희석제, 붕해제, 윤활제, 결합제 또는 하기 약제학적 조성물 단락에 기술된 임의의 부가적 제제를 함유하는 경우, 이들 성분을 사용하여 측정을 수행한다.

"약제학적 조성물의 활성 성분 약 100mg"의 시험관내 용해율 또는 용해 프로파일은 실시예 15의 단계 및 조건에 따라 측정한다. 하나의 양태에서, 이는 37±0.5℃의 온도에서 900mL의 2.0% Tween(제조원: TCI America, Portland, Oregon) 중에서 나선형 싱커 및 100rpm로 회전하는 패들을 갖는 USP 용해 장치 II(Quality Lab Accessories L.L.C., Manville, NJ)를 사용하여 측정한다.

본 발명의 목적상, 입자크기 분포(각 입자크기에서의 용적%)는 RODOS 분말 분산 시스템이 장착된 Sympatec 레이저 회절 분석기(HELOS H1006, Clausthal-Zellerfeld, Germany)를 통해 측정한다. 샘플을 0.1bar 기압을 사용하여 레이저 빔을 통해 분사하고, 입자크기 분포를 표적화된 엄폐 범위(obscuration range)가 5 내지 20%인 850 또는 1750-㎛의 초점 길이 렌즈를 사용하여 수집한다. 프라운호퍼 광학 모델을 사용하여 샘플 산란 패턴을 역승적(deconvolute)하여, 생성된 입자크기 분포를 산출하였다.

본 발명의 목적상, 활성 성분의 용적%는 약제학적 조성물로부터 입자 내용물(즉, 활성 성분 및 부형제)을 회수하고, 입자 내용물의 입자크기 분포(각 입자크기의 용적%)를 측정하고, 활성 성분이 아닌 입자의 입자크기 분포를 공제하고, 활성 성분의 용적%를 표준화하여 측정한다. 활성 성분의 용적%는 용적%에 100%/입자 내용물에 대한 활성 성분의 백분율을 곱하여 표준화한다.

"약"이란 용어는 양의 개념에서 사용되는 경우, 명시된 양의 ±10%를 의미한다.

본 발명의 목적상, x-선 회절 패턴에 있어, 보정, 샘플 또는 장치에 따라서, 2θ에서의 피크는 ±0.3°까지 이동할 수 있다(오차). 하나의 양태에서, X-선 회절 패턴의 모든 피크는 +0.3°까지 또는 -0.3°까지 이동한다. 오차 내의 X-선 회절 패턴 또는 피크는 동일하거나 실질적으로 유사한 것으로 고려된다.

특정한 용해율을 갖는 조성물

본 발명은 활성 성분으로서 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물을 포함하고, 당해 약제학적 조성물의 전체 활성 성분이 시험관내에서 10분에서 43 내지 63% 용해되고, 30분에서 66 내지 86% 용해되고, 60분에서 77 내지 97% 용해되는 약제학적 조성물을 제공한다. 하나의 양태에서, 약제학적 조성물의 전체 활성 성분은 시험관내에서 15분에서 52 내지 72% 용해되고 30분에서 66 내지 86% 용해되고 45분에서 73 내지 93% 용해된다. 다른 양태에서, 약제학적 조성물의 전체 활성 성분은 10분에서 43 내지 63% 용해되고 15분에서 52 내지 72% 용해되고 20분에서 58 내지 78% 용해되고 30분에서 66 내지 86% 용해되고, 45분에서 73 내지 93% 용해되고 60분에서 77 내지 97% 용해된다. 하나의 양태에서, 약제학적 조성물의 전체 활성 성분은 시험관내에서 10분에서 46 내지 60% 용해되고 15분에서 55 내지 69% 용해되고 20분에서 61 내지 75% 용해되고 30분에서 69 내지 83% 용해되고 45분에서 76 내지 90% 용해되고 60분에서 80 내지 94% 용해된다. 하나의 양태에서, 전체 활성 성분의 45% 이상 내지 75% 이하는 15분에서 용해되고 전체 활성 성분의 75% 이상은 60분내에 용해된다.

다른 양태에서, 본 발명은 활성 성분으로서 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물을 포함하고, 당해 약제학적 조성물의 전체 활성 성분이 도 1에 도시된 참조 용해 프로파일과 비교하여 유사성 인자(similarity factor)(f2)가 50 이상 내지 100인 시험관내 용해 프로파일을 갖는 약제학적 조성물을 제공한다. 하나의 양태에서, f2는 56 내지 100이다. 하나의 양태에서, f2는 60 내지 100이다. 하나의 양태에서, f2는 65 내지 100이다. 다른 양태에서, f2는 80 내지 100이다.

하나의 양태에서, 활성 성분은 결정질이다. 다른 양태에서, 활성 성분은 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산이다. 특정한 양태에서, 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산은 SAHA I형이고 도 7a에 도시한 바와 실질적으로 유사한 X-선 회절 패턴을 특징으로 한다. 하나의 양태에서, 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산은 9.0, 9.4, 17.5, 19.4, 20.0, 24.0, 24.4, 24.8, 25.0, 28.0°2θ에서의 특징적 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 한다.

하나의 양태에서, SAHA I형은 약 9.0, 9.4, 17.5, 19.4, 20.0, 24.0, 24.4, 24.8, 25.0, 28.0 및 43.3°2θ에서의 특징적 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 한다. 하나의 양태에서, 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산은 9.0, 9.4, 17.5, 19.4, 20.0, 24.0, 24.4, 24.8, 25.0, 28.0, 43.3°2θ에서의 특징적 피크를 포함하고 13.4-14.0 및 22.7-23.0°2θ에서의 피크가 결여된 X-선 회절 패턴을 특징으로 한다. 하나의 양태에서, 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산은 9.0, 9.4, 17.5, 19.4, 20.0, 24.0, 24.4, 24.8, 25.0, 28.0°2θ에서의 특징적 피크를 포함하고 13.4-14.0 및 22.7-23.0°2θ에서의 피크가 결여된 X-선 회절 패턴을 특징으로 한다. 하나의 양태에서, SAHA I형은 부가적으로 약 <8.7, 10.0-10.2, 13.4-14.0, 15.0-15.2, 17.5-19.0, 20.1-20.3, 21.1-21.3, 22.0-22.22, 22.7-23.0, 25.0-25.5, 26.0-26.2 및 27.4-27.6°2θ에서의 하나 이상의 피크가 결여되었음을 특징으로 한다. 다른 양태에서, SAHA I형은 추가로 Perkins Elmer 시차주사 열량 측정기(DSC) 6 장치. 5로 측정된 바에 따라 약 164.4±2.0에서 1개의 최대 값을 갖는 시차주사 열량측정(DSC) 열분석도를 특징으로 한다. 하나의 양태에서, 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산은 a= 10.9Å, b= 7.9Å, c= 16.4Å, α= 90°, β= 97.8°, γ=90°, 공간군 P2₁/n의 단위 셀 매개변수를 갖는다.

특정 양태에서, 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산은 SAHA IV형이고 약 8.8, 9.3, 11.0, 12.4, 17.4, 19.4, 19.9, 22.4, 22.9, 23.83, 24.2, 24.8, 25.8, 27.0, 27.8, 28.4°2θ에서의 특징적 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 한다.

하나의 양태에서, 본 발명은 활성 성분으로서 약 100mg 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물을 포함하고, 전체 활성 성분이 전체 활성 성분의 45% 이상 내지 75% 이하가 15분에 용해되고, 전체 활성 성분의 75% 이상이 60분내에 용해됨을 특징으로 하는 시험관내 용해 프로파일을 갖고, 여기서 상기 활성 성분이 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산이고 9.0, 9.4, 17.5, 19.4, 20.0, 24.0, 24.4, 24.8, 25.0, 28.0°2θ에서의 특징적 피크를 포함하고 13.4-14.0 및 22.7-23.0°2θ에서의 피크가 결여된 X-선 회절 패턴을 특징으로 하는 단일 캡슐을 제공한다.

다른 양태에서, 본 발명은 활성 성분으로서 약 100mg 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물을 포함하고, 전체 활성 성분이 도 1에 도시된 참조 용해 프로파일과 비교하여 유사성 인자(f2)가 50 이상 내지 100인 시험관내 용해 프로파일을 갖고, 여기서 상기 활성 성분이 결정질 수베 로일아닐리드 하이드록삼산이며 9.0, 9.4, 17.5, 19.4, 20.0, 24.0, 24.4, 24.8, 25.0, 28.0°2θ에서의 특징적 피크를 포함하고 13.4-14.0 및 22.7-23.0°2θ에서의 피크가 결여된 X-선 회절 패턴을 특징으로 하는 단일 캡슐을 제공한다.

추가의 양태에서, 본 발명은 활성 성분으로서 약 100mg 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물을 포함하고, 전체 활성 성분이 10분에 43 내지 63% 용해되고 30분에 66 내지 86% 용해되고, 60분에 77 내지 97%가 용해됨을 특징으로 하는 시험관내 용해 프로파일을 갖고, 여기서 상기 활성 성분이 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산이며 9.0, 9.4, 17.5, 19.4, 20.0, 24.0, 24.4, 24.8, 25.0, 28.0°2θ에서의 특징적 피크를 포함하고 13.4-14.0 및 22.7-23.0°2θ에서의 피크가 결여된 X-선 회절 패턴을 특징으로 하는 단일 캡슐을 제공한다.

본 발명은 또한 활성 성분으로서 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물 약 120mg 내지 약 600mg을 포함하는 단일 경구 투여량 단위 형태로서, 활성 성분 약 100mg을 포함하는 당해 투여량 단위 형태의 부분이 도 1에 도시된 참조 용해 프로파일과 비교하여 유사성 인자(f2)가 50 이상 내지 100인 시험관내 용해 프로파일을 갖는 단일 경구 투여량 단위 형태를 제공한다. 하나의 양태에서, 시험관내 용해 프로파일은 도 1에 도시된 참조 용해 프로파일과 비교하여 70 이상 내지 100의 유사성 인자(f2)를 갖는다. 하나의 양태에서, 활성 성분은 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산이며 9.0, 9.4, 17.5, 19.4, 20.0, 24.0, 24.4, 24.8, 25.0, 28.0°2θ에서의 특징적 피크를 포함하고 13.4-14.0 및 22.7-23.0°2θ에서의 피크가 결여된 X-선 회절 패턴을 특징으로 한다.

본 발명은 또한 활성 성분으로서 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물을 포함하고, 활성 성분 약 100mg이 도 2에 도시된 참조 용해 프로파일과 비교하여 유사성 인자(f2)가 50 이상 내지 100인 시험관내 용해 프로파일을 갖는 결정질 조성물을 제공한다. 당해 결정질 조성물은 당해 약제학적 조성물에 대한 전구물질이다. 약제학적 조성물이 캡슐 형태인 경우, 결정질 조성물은 캡슐화(encapsulation) 전에 부형제를 함유하거나 함유하지 않는 활성 성분이다. 하나의 양태에서, 활성 성분은 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산이며 9.0, 9.4, 17.5, 19.4, 20.0, 24.0, 24.4, 24.8, 25.0, 28.0°2θ에서의 특징적 피크를 포함하고 13.4-14.0 및 22.7-23.0°2θ에서의 피크가 결여된 X-선 회절 패턴을 특징으로 한다.

활성 성분은 활성 성분 입자가 명시된 용해율을 나타내는 한 어떠한 결정형이라도 될 수 있다. 활성 성분은 또한 무정형일 수 있다. 활성 성분 입자는 미분될 수 있거나 응집된 미립자 과립, 분말, 오일, 유성 현탁액 또는 임의의 다른 고체 형태일 수 있다.

상기한 조성물의 특정 양태에서, 활성 성분은 수베로일아닐리드 하이드록삼산이다.

본 발명은 또한 무기 염기, 예를 들면, 나트륨, 칼륨, 암모늄, 칼슘 또는 수산화 제2철, 및 유기 염기, 예를 들면, 이소프로필아민, 트리에틸아민, 2-에틸아미 노 에탄올, 히스티딘, 프로카인 등과의 SAHA의 약제학적으로 허용되는 염을 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다.

본 발명은 또한 SAHA의 수화물을 포함하는 약제학적 조성물을 포함한다. "수화물"이란 용어는 반수화물, 1수화물, 2수화물, 3수화물 등을 포함한다.

특정한 입자크기 분포를 갖는 조성물

본 발명은 또한 활성 성분으로서 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물을 포함하고, 용적%가 약 90 내지 110㎛로부터 약 120 내지 250㎛까지의 입자크기에 대해 증가하며, 약 120 내지 250㎛에서 피크이며 피크 후에 감소하는 약제학적 조성물을 제공한다. 하나의 양태에서, 피크는 다른 입자크기의 용적%와 비교하여 가장 높은 용적%이다.

하나의 양태에서, 입자크기가 약 90 내지 110㎛인 활성 성분의 용적%는 약 2.0% 내지 약 10%의 범위이며, 입자크기가 약 120 내지 250㎛인 활성 성분의 용적%는 약 4.0% 내지 약 12%의 범위이다. 하나의 양태에서, 입자크기가 약 90 내지 110㎛인 활성 성분의 용적%는 약 3.0% 내지 약 9%의 범위이며, 입자크기가 약 120 내지 250㎛인 활성 성분의 용적%는 약 5.0% 내지 약 11.5%의 범위이다.

다른 양태에서, 입자크기가 약 90 내지 110㎛인 입자의 용적%는 약 5.5% 내지 약 8.0%의 범위이며, 입자크기가 약 120 내지 250㎛인 입자의 용적%는 약 6.5% 내지 약 9.0%의 범위이다. 하나의 양태에서, 입자크기가 약 90 내지 110㎛인 입자의 용적%는 약 6.0% 내지 약 7.5%의 범위이고, 입자크기가 약 120 내지 250㎛인 입자의 용적%는 약 7.0% 내지 약 8.5%의 범위이다.

하나의 양태에서, 입자크기가 약 105㎛ 미만인 활성 성분의 용적%는 약 45 내지 85%이며, 입자크기가 약 105㎛ 이상인 활성 성분의 용적%는 약 55 내지 15%이다.

하나의 양태에서, 활성 성분의 용적%는 약 20 내지 25㎛로부터 약 35 내지 40㎛까지의 특정 입자크기에 대해 증가하며, 약 35 내지 40㎛에서 피크이며, 피크 후에 감소한다. 하나의 양태에서, 입자크기가 약 20 내지 25㎛인 활성 성분의 용적%는 약 1.0% 내지 약 4%의 범위이며, 입자크기가 약 35 내지 40㎛인 활성 성분의 용적%는 약 3.0% 내지 약 7%의 범위이다.

하나의 양태에서, 활성 성분은 결정질이다. 다른 양태에서, 활성 성분은 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산이다. 특정 양태에서, 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산은 SAHA I형이며 도 7a에 도시한 바와 실질적으로 유사한 X-선 회절 패턴을 특징으로 한다. 하나의 양태에서, 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산은 9.0, 9.4, 17.5, 19.4, 20.0, 24.0, 24.4, 24.8, 25.0, 28.0°2θ에서의 특징적 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 한다.

하나의 양태에서, SAHA I형은 약 9.0, 9.4, 17.5, 19.4, 20.0, 24.0, 24.4, 24.8, 25.0, 28.0 및 43.3°2θ에서의 특징적 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 한다. 하나의 양태에서, 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산은 9.0, 9.4, 17.5, 19.4, 20.0, 24.0, 24.4, 24.8, 25.0, 28.0, 43.3°2θ에서의 특징적 피크를 포함하고 13.4-14.0 및 22.7-23.0°2θ에서의 피크가 결여된 X-선 회절 패 턴을 특징으로 한다. 하나의 양태에서, 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산은 9.0, 9.4, 17.5, 19.4, 20.0, 24.0, 24.4, 24.8, 25.0, 28.0°2θ에서의 특징적 피크를 포함하고 13.4-14.0 및 22.7-23.0°2θ에서의 피크가 결여된 X-선 회절 패턴을 특징으로 한다. 하나의 양태에서, SAHA I형은 부가적으로 약 <8.7, 10.0-10.2, 13.4-14.0, 15.0-15.2, 17.5-19.0, 20.1-20.3, 21.1-21.3, 22.0.- 22.22, 22.7-23.0, 25.0-25.5, 26.0-26.2 및 27.4-27.6°2θ에서의 하나 이상의 피크가 결여되었음을 특징으로 한다. 다른 양태에서, SAHA I형은 추가로 Perkins Elmer DSC 6 장치. 5로 측정된 바에 따라 약 164.4±2.0에서 1개의 최대 값을 갖는 시차주사 열량측정(DSC) 열분석도를 특징으로 한다. 하나의 양태에서, 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산은 a= 10.9Å, b= 7.9Å, c= 16.4Å, α= 90°, β= 97.8°, γ=90°, 공간군 P2₁/n의 단위 셀 매개변수를 갖는다.

약제학적 조성물

당해 활성 성분은 경구 투여에 적합한 약제학적 조성물 내로 혼입될 수 있다. 활성 성분은 임의로 약제학적으로 허용되는 담체 또는 부형제와 함께 혼입될 수 있다. 하나의 양태에서, 약제학적으로 허용되는 담체는 고체 입자 형태이다. 담체 또는 부형제로서 통상적으로 사용되는 임의의 불활성 부형제, 예를 들면, 검, 전분, 당, 셀룰로스성 물질, 아크릴레이트 또는 이들의 혼합물을 본 발명의 제형에서 사용할 수 있다. 하나의 양태에서, 희석제는 미정질 셀룰로스이다. 당해 조성물은 붕해제(예: 크로스카멜로스 나트륨) 및 윤활제(예: 마그네슘 스테아레이트)를 추가로 포함할 수 있으며, 또한 결합제, 완충제, 프로테아제 억제제, 계면활성제, 안정화제, 가소제, 유화제, 안정화제, 점도증가제, 감미제, 막 형성제 또는 이들의 임의의 배합물로부터 선택된 하나 이상의 첨가제를 포함할 수 있다. 또한, 본 발명의 조성물은 서방출 또는 속방출 제형의 형태일 수 있다.

하나의 양태에서, 본원에서 기술하는 약제학적 조성물은 추가로 미정질 셀룰로스, 크로스카멜로스 나트륨 및 마그네슘 스테아레이트로 구성될 수 있다. 제형 중 활성 성분 및 각종 부형제의 비율은 달라질 수 있다. 예를 들면, 조성물은 활성 성분 약 20 내지 90중량%, 약 50 내지 80중량% 또는 약 60 내지 70중량%를 포함할 수 있다. 또한, 조성물은 담체 또는 희석제로서 미정질 셀룰로스 약 10 내지 70%, 약 20 내지 40%, 약 25 내지 35중량%를 포함한다. 또한, 조성물은 붕해제로서 크로스카멜로스 나트륨 약 1 내지 30%, 약 1 내지 10%, 약 2 내지 5중량%를 포함할 수 있다. 또한, 조성물은 윤활제로서 마그네슘 스테아레이트 약 0.1 내지 5중량% 또는 약 0.5 내지 1.5중량%를 포함한다.

하나의 양태에서, 본 발명의 약제학적 조성물은 활성 성분 약 50 내지 80중량%; 미정질 셀룰로스 약 20 내지 40중량%; 크로스카멜로스 나트륨 약 1 내지 10중량%; 및 마그네슘 스테아레이트 약 0.1 내지 5중량%를 포함한다. 다른 양태에서, 본 발명의 약제학적 조성물은 활성 성분 약 60 내지 70중량%; 미정질 셀룰로스 약 25 내지 35중량%; 크로스카멜로스 나트륨 약 2 내지 5중량%; 및 마그네슘 스테아레이트 약 0.5 내지 1.5중량%를 포함한다. 하나의 양태에서, 약제학적 조성물은 SAHA I형 50 내지 200mg 또는 50 내지 600mg을 포함한다.

본 발명의 양태는 젤라틴 캡슐 내에 함유된 미정질 셀룰로스, NF(Avicel Ph 101), 크로스카멜로스 나트륨, NF(AC-Di-SoI) 및 마그네슘 스테아레이트, NF를 함유한 SAHA의 고체 제형이다. 추가의 양태는 활성 성분 약 100mg, 미정질 셀룰로스 약 44.3mg, 크로스카멜로스 나트륨 약 4.5mg, 마그네슘 스테아레이트 약 1.2mg를 포함하는 약제학적 조성물이다.

하나의 양태에서, 약제학적 조성물은 경구 투여되며, 따라서 경구 투여에 적합한 형태, 즉, 고체 또는 액체 형태로 제형화된다. 적합한 고체 경구 제형에는 예를 들면, 정제, 캡슐제, 환제, 입제, 펠렛 등이 포함된다. 적합한 액체 경구 제형에는 예를 들면, 에멀젼, 오일 등이 포함된다. 본 발명의 하나의 양태에서, 조성물은 캡슐로 제형화된다. 상기 양태에 따라서, 본 발명의 조성물은 활성 성분 및 불활성 담체 또는 희석제에 추가하여 경질 젤라틴 캡슐을 포함한다.

고체 담체/희석제로는 검, 전분(예: 옥수수 전분, 예비젤라틴화 전분), 당(예: 락토스, 만니톨, 슈크로스, 덱스트로스), 셀룰로스 물질(예: 미정질 셀룰로스), 아크릴레이트(예: 폴리메틸아크릴레이트), 탄산칼슘, 산화마그네슘, 탈크 또는 이들의 혼합물이 포함되나 이에 제한되지 않는다.

액체 제형의 경우, 약제학적으로 허용되는 담체는 비수성 용액, 현탁액, 에멀젼 또는 오일일 수 있다. 비수성 용매의 예로는 프로필렌 글리콜, 폴리에틸렌 글리콜 및 주사용 유기 에스테르, 예를 들면, 에틸 올레이트가 있다. 오일의 예로는 석유, 동물성, 식물성 또는 합성 기원의 오일, 예를 들면, 땅콩유, 대두유, 광유, 올리브유, 해바라기유 및 생선 간유가 있다. 현탁액은 또한 다음 성분들을 포함할 수 있다: 고정유, 폴리에틸렌 글리콜, 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 기타 합성 용매; 항세균제, 예를 들면, 벤질 알코올 또는 메틸 파라벤; 항산화제, 예를 들면, 아스코르브산 또는 중아황산나트륨; 킬레이트제, 예를 들면, 에틸렌디아민테트라아세트산(EDTA).

또한, 조성물은 결합제(예: 아카시아, 옥수수전분, 젤라틴, 카보머, 에틸 셀룰로스, 구아 검, 하이드록시프로필 셀룰로스, 하이드록시프로필 메틸 셀룰로스, 포비돈), 붕해제(예: 옥수수전분, 감자 전분, 알긴산, 이산화규소, 크로스카멜로스 나트륨, 크로스포비돈, 구아 검, 나트륨 전분 글리콜레이트, 프리모겔), 세제(예: Tween 20, Tween 80, Pluronic F68, 담즙산 염), 프로테아제 억제제, 계면활성제(예: 나트륨 라우릴 설페이트), 투과 증진제, 가용화제(예: 글리세롤, 폴리에틸렌 글리세롤), 활주제(예: 콜로이드성 이산화규소), 항산화제(예: 아스코르브산, 메타중아황산나트륨, 부틸화 하이드록시아니솔), 안정화제(예: 하이드록시프로필 셀룰로스, 하이드록시프로필메틸 셀룰로스), 점도 증가제(예: 카보머, 콜로이드성 이산화규소, 에틸 셀룰로스, 구아 검), 감미제(예: 슈크로스, 아스파르탐, 시트르산), 풍미제(예: 페퍼민트, 메틸 살리실레이트 또는 오렌지 풍미), 보존제(예: 티메로살, 벤질 알코올, 파라벤), 윤활제(예: 스테아르산, 마그네슘 스테아레이트, 폴리에틸렌 글리콜, 나트륨 라우릴 설페이트), 유동 보조제(예: 콜로이드성 이산화규 소), 가소제(예: 디에틸 프탈레이트, 트리에틸 시트레이트), 유화제(예: 카보머, 하이드록시프로필 셀룰로스, 나트륨 라우릴 설페이트), 중합체 피복제(예: 폴록사머 또는 폴록사민), 피복제 및 막 형성제(예: 에틸 셀룰로스, 아크릴레이트, 폴리메타크릴레이트) 및/또는 보조제를 추가로 포함할 수 있다.

하나의 양태에서, 활성 성분은 이식물 및 미세캡슐화 전달 시스템을 포함하여 서방출 제형과 같이, 화합물이 신체로부터 신속하게 제거되지 않도록 보호할 수 있는 담체와 함께 제조된다. 에틸렌 비닐 아세테이트, 폴리무수물, 폴리글리콜산, 콜라겐, 폴리오르토에스테르 및 폴리락트산과 같은 생체분해성, 생체적합성 중합체를 사용할 수 있다. 이러한 제형의 제조방법은 당해 분야의 숙련가에게 명백할 것이다. 이들 물질은 또한 제조원(Alza Corporation 및 Nova Pharmaceuticals, Inc.)으로부터 입수할 수 있다. 리포좀 현탁액(바이러스 항원에 대한 모노클로날 항체와 함께 감염된 세포로 표적화되는 리포좀을 포함)을 약제학적으로 허용되는 담체로서 사용할 수도 있다. 이는 당업자에게 공지된, 예를 들면, 미국 특허 제4,522,811호에 기술된 방법에 따라 제조할 수 있다.

예를 들면, 혼합, 과립화 또는 타정 공정에 의한 활성 성분을 함유하는 약제학적 조성물의 제조는 당해 분야에서 널리 이해되고 있다. 치료학적 활성 성분은 흔히, 약제학적으로 허용되고 활성 성분과 혼화성인 부형제와 혼합된다. 경구 투여의 경우, 활성제는 당해 목적에 통상적인 첨가제, 예를 들면, 비히클, 안정화제 또는 불활성 희석제와 혼합되고 통상적 방법에 의해 앞서 상세히 설명한 경구에 적합한 형태, 예를 들면, 정제, 제피정, 경질 또는 연질 젤라틴 캡슐, 수성, 알코올 성 또는 유성 용액 등으로 전환된다.

하나의 양태에서, 경구 조성물은 투여의 용이성 및 투여량의 균질성을 위한 투여량 단위 형태로 제형화된다. 본원에서 사용되는 투여량 단위 형태는 치료될 피험체에 대한 단일 투여량으로서 적합한 물리적으로 분리된 단위를 의미한다: 각각의 단위는 요구되는 약제학적 담체와 함께 목적하는 치료 효과를 발생시키도록 계산된 활성 성분의 예정된 양을 함유한다. 본 발명의 투여량 단위 형태에 관한 상세사항은 활성 성분의 고유한 특징 및 달성하고자 하는 특정 치료 효과, 및 이러한 활성 화합물을 개체의 치료를 위해 합성하는 당해 분야 고유의 제약에 의해 결정되며 이에 직접적으로 의존한다. 특정 양태에서, 투여량 단위는 활성 성분 약 600mg, 550mg, 500mg, 450mg, 400mg, 350mg, 300mg, 250mg, 200mg, 150mg, 110mg, 105mg, 100mg, 95mg, 90mg, 85mg, 80mg, 75mg, 70mg, 65mg, 60mg, 55mg, 50mg, 45mg 또는 40mg을 함유한다. 하나의 양태에서, 활성 성분의 양은 약 100mg이다.

약제학적 조성물은 투여 지침서와 함께 용기, 팩 또는 디스펜서에 포함될 수 있다. 하나의 양태에서, 약제학적 조성물은 활성 성분의 양이 약 100mg인 단일 캡슐이다. 하나의 양태에서, 약제학적 조성물은 각각의 캡슐내에 활성 성분 약 50mg을 함유하는 2개의 캡슐이다.

명시된 용해율을 갖는 조성물의 제조방법

본 발명은

(a) 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또 는 수화물인 활성 성분의 2개 이상의 배치를 결정화시키는 단계; 및

(b) 결정질 활성 성분의 2개 이상의 배치를 블렌딩하여 결정질 조성물을 제조하는 단계를 포함하는, 활성 성분으로서 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물을 포함하고, 활성 성분 약 100mg이 도 2에 도시된 참조 용해 프로파일과 비교하여 유사성 인자(f2)가 50 이상 내지 100인 시험관내 용해 프로파일을 갖는 결정질 조성물의 제조방법을 제공한다.

대안적 방법에서, 당해 결정질 조성물은

(a) 결정질 활성 성분을 분쇄시키거나 습식-분쇄시켜 결정질 활성 성분의 하나 이상의 제1 배치를 제조하는 단계;

(b) 활성 성분을 결정화시켜, 상기 분쇄된 또는 습식-분쇄된 활성 성분보다 크기가 큰 결정질 활성 성분의 하나 이상의 제2 배치를 제조하는 단계; 및

(c) 결정질 활성 성분의 적어도 제1 배치를 결정질 활성 성분의 적어도 제2 배치와 블렌딩하여 결정질 조성물을 제조하는 단계를 포함한다.

당해 결정질 조성물을 추가로 후속적으로 가공하여, 활성 성분 약 100mg이 도 1에 도시된 참조 용해 프로파일과 비교하여 유사성 인자(f2)가 50 이상 내지 100인 시험관내 용해 프로파일을 갖는 약제학적 조성물을 제조할 수 있다. 이는 예를 들면, 결정질 조성물을 부형제와 함께 또는 부형제 없이 캡슐화함으로써 당해 결정질 조성물에 압력을 가하여 달성할 수 있다. 캡슐 패킹 공정 동안 발생하는 압력 때문에, 활성 성분의 입자에서 파괴가 일어나며, 이는 입자크기 분포에 영향을 주어 용해율에 영향을 미친다. 입자 파괴의 양은 탬핑 핀(tamping pin) 유형 및 캡슐 충전량에 의해 영향을 받는 캡슐 밀도에 의해 영향을 받을 수 있다.

따라서, 또 다른 양태에서, 본 발명은

(a) 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물인 활성 성분의 2개 이상의 배치를 결정화시키는 단계;

(b) 결정질 활성 성분의 2개 이상의 배치를 블렌딩하는 단계; 및

(c) 블렌딩된 배치로부터 약제학적 조성물을 제조하는 단계를 포함하는, 활성 성분으로서 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물을 포함하고, 전체 활성 성분이 도 1에 도시된 참조 용해 프로파일과 비교하여 유사성 인자(f2)가 50 이상 내지 100인 시험관내 용해 프로파일을 갖는 약제학적 조성물의 제조방법을 제공한다.

하나의 양태에서, 결정질 활성 성분은 유기 용매 또는 유기 용매와 물의 혼합물로부터 활성 성분 또는 조 활성 성분을 결정화시켜 제조한다. 하나의 양태에서, 유기 용매는 메탄올, 에탄올, 아세토니트릴, 이소프로판올 및 아세트산 중 하나 이상이다. 하나의 양태에서, 유기 용매는 에탄올이다. 하나의 양태에서, 혼합물은 약 40 내지 99% 에탄올을 포함한다. 하나의 양태에서, 혼합물은 약 40 내지 99% 에탄올 및 60 내지 1% 물을 포함한다. 하나의 양태에서, 단계(c)는 블렌딩된 결정질 활성 성분의 일부분을 캡슐화하여 수행한다.

대안적 방법에서, 약제학적 조성물은

(b) 활성 성분을 결정화시켜, 상기 분쇄된 또는 습식 분쇄된 결정질 활성 성분보다 크기가 큰 결정질 활성 성분의 하나 이상의 제2 배치를 제조하는 단계;

(c) 결정질 활성 성분의 하나 이상의 제1 배치를 결정질 활성 성분의 하나 이상의 제2 배치와 블렌딩하는 단계; 및

(d) 상기 블렌딩된 제1 및 제2 배치로부터 약제학적 조성물을 제조하는 단계에 의해 제조된다.

하나의 양태에서, 결정질 활성 성분의 제1 배치의 평균 입자크기는 약 50㎛이고, 결정질 활성 성분의 제2 배치의 평균 입자크기가 약 130㎛를 초과한다. 다른 양태에서, 결정질 활성 성분의 제1 배치의 평균 입자크기는 약 50㎛ 미만이며, 결정질 활성 성분의 제2 배치의 평균 입자크기는 약 120 내지 160㎛의 범위이다. 특정 양태에서, 결정질 활성 성분의 제1 배치의 95%는 평균 입자크기가 약 100㎛ 미만이다. 하나의 양태에서, 제2 배치 결정의 95%는 평균 입자크기가 약 300㎛ 미만이다. 하나의 양태에서, 단계(d)는 블렌딩된 결정질 활성 성분의 부분을 캡슐화시켜 달성한다.

하나의 양태에서, 결정질 성분의 제1 배치는 평균 입자크기가 약 60㎛ 미만이고, 결정질 활성 성분의 제2 배치는 평균 입자크기가 약 100 내지 250㎛이다. 다른 양태에서, 결정질 성분의 제1 배치는 평균 입자크기가 약 25 내지 45㎛의 범위이고, 결정질 활성 성분의 제2 배치는 평균 입자크기가 약 130 내지 180㎛의 범위이다.

하나의 양태에서, 결정질 활성 성분은 유기 용매 또는 유기 용매와 물의 혼 합물로부터 활성 성분 또는 조 활성 성분을 결정화시켜 제조한다. 하나의 양태에서, 유기 용매는 메탄올, 에탄올, 아세토니트릴, 이소프로판올 및 아세트산 중 하나 이상이다. 하나의 양태에서, 유기 용매는 에탄올이다. 하나의 양태에서, 혼합물은 약 40 내지 99% 에탄올을 포함한다. 하나의 양태에서, 혼합물은 약 40 내지 99% 에탄올 및 60 내지 1% 물을 포함한다.

다른 양태에서, 단계(c)에서, 약 40 내지 95%의 제2 배치 결정질 활성 성분을 약 60 내지 5%의 제1 배치 분쇄된 결정질 활성 성분과 블렌딩한다.

상기 방법의 하나의 양태에서, 결정화 단계는 씨딩(seeding)을 포함한다. 상기 방법의 다른 양태에서, 블렌딩 비는 캡슐화 파괴 모델을 사용하는 컴퓨터 모의실험 프로그램으로 측정한다. 하나의 양태에서, 도 1의 용해율 프로파일을 갖는 참조물과 유사한 SAHA 용해율 프로파일을 갖는 조성물이 수득되도록 블렌딩 비를 최적화한다.

본 발명은 또한

(a) 유기 용매, 물 또는 이들의 혼합물에 결정질 활성 성분을 제공하여 슬러리를 형성시키는 단계;

(b) 상기 슬러리를 가열하여 2 내지 30% 미용해된 결정질 활성 성분을 확립하는 단계; 및

(c) 상기 슬러리를 냉각시켜 재결정화된 활성 성분을 수득하는 단계를 포함하는, 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물의 재결정화된 활성 성분의 제조방법을 제공한다.

하나의 양태에서, 단계(a)의 결정질 활성 성분의 평균 입자크기는 약 60㎛ 미만이다.

다른 양태에서, 결정질 활성 성분은

(i) 유기 용매, 물 또는 이들의 혼합물에 결정질 활성 성분을 제공하여 씨드 슬러리를 형성시키는 단계; 및

(ii) 상기 슬러리를 습식-분쇄하여 습식-분쇄된 결정질 활성 성분을 달성하는 단계에 의해 제조된다.

다른 양태에서, 결정질 활성 성분은 결정질 활성 성분을 건식-분쇄하는 단계에 의해 제조된다. 추가의 양태에서, 결정질 활성 성분은 하이드록실아민의 존재하에 수득된다.

하나의 양태에서, 단계(a)에서, 40 내지 99% 에탄올과 60 내지 1% 물의 혼합물이 사용된다. 다른 양태에서, 단계(b)에서, 슬러리를 약 1 내지 3시간 동안 60 내지 75℃로 가열한다. 추가의 양태에서, 단계(c)는 약 15 내지 72시간 동안 60 내지 75℃로부터 25 내지 -5℃로 냉각시켜 수행한다.

다른 양태에서, 당해 방법은 약 40 내지 95%의 재결정화된 활성 성분을 평균 입자크기가 약 60㎛ 미만인 약 60 내지 5%의 결정질 활성 성분과 블렌딩함을 추가로 포함한다.

본 발명은 또한

(a) 40 내지 99% 에탄올과 60 내지 1% 물의 혼합물에 결정질 활성 성분을 제공하여 슬러리를 형성시키는 단계;

(b) 상기 슬러리를 가열하여 2 내지 30% 미용해된 결정질 활성 성분을 확립하는 단계;

(c) 슬러리를 냉각시켜 재결정화된 활성 성분을 수득하는 단계; 및

(d) 약 40 내지 95%의 재결정화된 활성 성분을 평균 입자크기가 약 60㎛ 미만인 약 60 내지 5%의 결정질 활성 성분과 블렌딩하는 단계를 포함하는, 수베로일아닐리드 하이드록삼산의 결정질 활성 성분의 제조방법을 제공한다.

본 발명은 또한,

(a) 유기 용매 또는 유기 용매와 물의 혼합물에 결정질 활성 성분을 부가하여 슬러리를 형성시키는 단계;

(b) 상기 슬러리를 습식-분쇄시켜 평균 입자크기가 약 50㎛ 미만인 결정질 활성 성분을 달성하는 단계;

(c) 상기 습식-분쇄된 슬러리를 가열하여 약 5 내지 30% 씨드층(seed bed)을 수득하는 단계; 및

(d) 슬러리를 25℃ 이하로 냉각시켜 재결정화된 활성 성분을 수득하는 단계를 포함하는, 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물의 재결정화된 활성 성분의 제조방법을 제공한다.

하나의 양태에서, 단계(a)에서, 혼합물은 에탄올과 물, 특히 약 40 내지 95% 에탄올을 함유한다. 특정 양태에서, 약 1:1 에탄올과 물의 혼합물이 사용된다. 다른 특정 양태에서, 약 9:1 에탄올과 물의 혼합물이 사용된다. 하나의 양태에서, 습식-분쇄 단계 후, 결정질 활성 성분의 80 내지 95% 이상 또는 다른 양태에서, 95%는 입자크기가 약 100㎛ 미만이다.

하나의 양태에서, 단계(c)는 약 10 내지 20% 씨드층을 확립한다. 특정 양태에서, 단계(c)는 약 15% 씨드층을 확립한다. 다른 양태에서, 단계(c)는 습식-분쇄된 슬러리를 60 내지 70℃에서 1 내지 3시간 동안 가열하여 달성한다. 다른 양태에서, 단계(c)는 습식-분쇄된 슬러리를 63 내지 66℃에서 약 1 내지 3시간 동안 가열하여 달성한다. 특정 양태에서, 단계(c)는 습식-분쇄된 슬러리를 64 내지 65℃에서 약 1 내지 3시간 동안 가열하여 달성한다.

하나의 양태에서, 단계(d)는 약 15 내지 30시간 내에 60 내지 70℃로부터 25 내지 5℃까지 냉각시켜 수행한다. 다른 양태에서, 단계(d)는 약 15 내지 30시간 내에 64 내지 65℃로부터 20 내지 50℃까지 냉각시켜 수행한다. 냉각 방법은 명시된 시간 내에 온도를 저하시키고 당해 온도를 명시된 시간 동안 유지시키는 것의 조합을 포함할 수 있다.

상기 방법은 재결정화된 활성 성분을 단계(a) 및 (b)와 동일한 단계에 의해 제조된 습식-분쇄된 결정질 활성 성분과 블렌딩하는 단계를 추가로 포함할 수 있다. 습식-분쇄된 결정질 활성 성분은 단계(b)의 습식-분쇄된 물질의 일부분으로부터 취해질 수 있다. 또는, 습식-분쇄된 결정질 활성 성분은 단계(a) 및 (b)에 따라 별도로 제조될 수 있다. 따라서, 습식-분쇄된 결정질 활성 성분은 재결정화된 활성 성분의 결정화 조건과 비교하여 동일하거나 상이한 용매 또는 혼합물 중에서 제조될 수 있다. 블렌딩 비는 컴퓨터 모의실험 소프트웨어에 의해 측정될 수 있다. 하나의 양태에서, 블렌딩 비는 60 내지 80%의 재결정화된 활성 성분 및 40 내지 20%의 습식-분쇄된 결정질 활성 성분이다. 특정 양태에서, 블렌딩 비는 약 70%의 재결정화된 활성 성분 및 약 30%의 습식-분쇄된 결정질 활성 성분이다. 다른 특정 양태에서, 단계(a)에서, 9:1 또는 1:1 에탄올과 물의 혼합물이 사용되고, 블렌딩 비는 70%의 재결정화된 활성 성분 및 30%의 습식-분쇄된 결정질 활성 성분이다.

본 발명은 또한

(a) 제1 용기 내의 유기 용매, 물 또는 이들의 혼합물에 결정질 활성 성분을 제공하여 슬러리를 형성시키는 단계;

(b) 상기 제1 용기 내의 슬러리를 가열하여 실질적으로 모든 결정질 활성 성분을 용해시키는 단계;

(c) 제1 용기내의 단계(b)의 내용물을 용액을 과포화시키는 온도로 냉각시키는 단계;

(d) 결정질 활성 성분의 씨드를 단계(c)의 내용물에 부가하는 단계;

(e) 단계(d)의 내용물을 단계(c)에서와 동일한 온도에서 숙성시키는 단계; 및

(f) 단계(e)의 내용물을 냉각시켜 재결정화된 활성 성분을 수득하는 단계를 포함하는, 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물의 재결정화된 활성 성분의 제조방법을 제공한다.

하나의 양태에서, 단계(d)는

(i) 유기 용매, 물 또는 이들의 혼합물 중의 결정질 활성 성분을 제공하여 씨드 슬러리를 형성시키는 단계;

(ii) 상기 씨드 슬러리를 가열하고 숙성시켜 씨드의 일부분을 용해시키는 단계;

(iii) 단계(ii)의 내용물을 단계(c)에서와 동일한 농도로 냉각시키는 단계; 및

(iv) 단계(iii)의 씨드 슬러리를 제1 용기로 옮기는 단계를 포함한다.

하나의 양태에서, 단계(i)의 결정질 활성 성분은 평균 입자크기가 약 60㎛ 미만이다. 다른 양태에서, 단계(i)는

(v) 결정질 활성 성분을 유기 용매, 물 또는 이들의 혼합물에 부가하여 씨드 슬러리를 형성시키는 단계; 및

(vi) 상기 슬러리를 습식-분쇄시켜 습식-분쇄된 결정질 활성 성분을 달성하는 단계에 의해 제조된다.

다른 양태에서, 단계(i)는

(v) 결정질 활성 성분을 건식-분쇄시키는 단계; 및

(vi) 건식-분쇄된 결정질 활성 성분을 유기 용매, 물 또는 이들의 혼합물에 부가하여 씨드 슬러리를 형성시키는 단계에 의해 제조된다.

추가의 양태에서, 단계(vi) 후에, 당해 방법은 습식-분쇄된 결정질 활성 성분을 단계(d) 전에 분리, 세척 및 건조시키는 단계를 추가로 포함한다.

하나의 양태에서, 단계(a)의 결정질 활성 성분은 하이드록실아민의 존재하에 수득된다. 다른 양태에서, 단계(a) 및 (i)에서 40 내지 99% 에탄올과 60 내지 1% 물의 혼합물이 사용된다. 추가의 양태에서, 에탄올 대 물의 비가 49:51 내지 51:49인 혼합물이 단계(a) 및 (i)에서 사용된다.

하나의 양태에서, 단계(b)에서, 슬러리는 최소 15 psig 압력하에 60 내지 75℃로 가열한다. 다른 양태에서, 단계(b)에서, 슬러리는 최소 15 psig 압력하에 67 내지 70℃로 가열한다.

하나의 양태에서, 단계(c)에서, 내용물은 내지 60 내지 65℃로 냉각시킨다. 다른 양태에서, 단계(c)에서, 내용물은 61 내지 63℃로 냉각시킨다.

하나의 양태에서, 단계(ii)에서, 씨드 슬러리는 62 내지 66℃로 가열한다. 다른 양태에서, 단계(ii)에서, 씨드 슬러리는 64 내지 65℃로 가열한다.

하나의 양태에서, 단계(f)는 약 15 내지 72시간 내에 60 내지 70℃로부터 25 내지 -5℃까지 냉각시켜 수행한다. 다른 양태에서, 단계(f)는 약 15 내지 72시간 내에 60 내지 64℃로부터 0 내지 10℃까지 냉각시켜 수행한다.

본 발명은 또한

(a) 결정질 활성 성분을 유기 용매 또는 유기 용매와 물의 혼합물에 부가하여 슬러리를 형성시키는 단계;

(c) 습식-분쇄된 슬러리를 60 내지 70℃로 가열하여 씨드 슬러리를 가열하는 단계;

(d) 유기 용매 또는 유기 용매와 물의 혼합물 중에 결정질 활성 성분을 제공 하는 단계;

(e) 단계(d)의 물질을 가열하여 결정질 활성 성분을 용해시키는 단계;

(f) 단계(e)의 물질을 냉각시켜, 핵생성 없이 과포화된 용액을 수득하는 단계;

(g) 단계(c)의 씨드 슬러리를 상기 과포화된 용액으로 옮기는 단계; 및

(h) 단계(g)의 물질을 25℃ 이하로 냉각시키는 단계를 포함하는, 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물의 재결정화된 활성 성분의 제조방법을 제공한다.

하나의 양태에서, 단계(a) 및 (d)에서, 에탄올과 물, 특히, 약 40-95% 에탄올을 함유하는 혼합물이 사용된다. 특정 양태에서, 약 1:1 에탄올과 물의 혼합물이 사용된다. 다른 특정 양태에서, 약 9:1 에탄올과 물의 혼합물이 사용된다. 단계(a) 또는 (d)에서 사용되는 유기 용매의 백분율은 동일하거나 상이할 수 있다. 예를 들면, 단계(a)에서 약 40 내지 100%의 에탄올이 사용될 수 있으며, 단계(d)에서는 약 1:1 또는 9:1 에탄올의 혼합물이 사용될 수 있다. 하나의 양태에서, 습식-분쇄 단계 후, 결정질 활성 성분의 적어도 80 내지 95% 또는 95%는 입자크기가 약 100㎛ 미만이다.

하나의 양태에서, 단계(c)는 약 10 내지 20% 씨드층을 확립한다. 특정 양태에서, 단계(c)는 약 15% 씨드층을 확립한다. 다른 양태에서, 습식-분쇄된 슬러리를 63 내지 67℃로 가열한다. 다른 양태에서, 습식-분쇄된 슬러리를 20 내지 25psig에서 62 내지 66℃로 가열하고, 61 내지 63℃로 냉각시킨다. 다른 양태에 서, 습식-분쇄된 슬러리를 가열하여 씨드 고체의 50%를 용해시킨다.

하나의 양태에서, 단계(e)에서, 65 내지 75℃에서 가열한다. 특정 양태에서, 단계(e)에서, 67 내지 70℃에서 가열한다. 하나의 양태에서, 단계(e)에서, 가열은 20 내지 25psig 압력하에 수행한다. 다른 양태에서, 단계(f)에서, 60 내지 65℃에서 냉각시킨다. 또 다른 양태에서, 단계(f)에서, 61 내지 63℃에서 냉각시킨다.

다른 양태에서, 단계(g) 후 및 단계(h) 전에, 혼합물을 61 내지 63℃에서 2시간 동안 숙성시킨다. 하나의 양태에서, 단계(h)에서, 냉각은 26시간 내에 3회의 선형 단계를 통해 달성한다.

본 발명은 또한,

(a) 제1 용기내의 40 내지 99% 에탄올과 60 내지 1% 물의 혼합물에 결정질 활성 성분을 제공하여 슬러리를 형성시키는 단계;

(b) 제1 용기내의 슬러리를 가열하여 실질적으로 모든 결정질 활성 성분을 용해시키는 단계;

(c) 제1 용기내의 단계(b)의 내용물을 냉각시켜 용액을 과포화시키는 단계,

(d) 단계(c)의 내용물에 결정질 활성 성분을 부가하는 단계;

(e) 단계(d)의 내용물을 단계(c)와 동일한 온도에서 숙성시키는 단계; 및

(f) 단계(e)의 내용물을 냉각시켜 재결정화된 활성 성분을 수득하는 단계를 포함하는, 수베로일아닐리드 하이드록삼산의 재결정화된 활성 성분의 제조방법을 제공한다.

상기 방법의 특정 양태에서, 활성 성분은 수베로일아닐리드 하이드록삼산이다. 하나의 양태에서, 결정질 활성 성분은 SAHA I형이다.

유기 용매를 사용한 결정화

하나의 특정 양태에서, 결정질 활성 성분 또는 재결정화된 활성 성분은 유기 용매 또는 물과 유기 용매의 혼합물로부터 결정화된다. 유기 용매는 메탄올, 에탄올 또는 이소프로판올과 같은 알코올일 수 있다. 하나의 양태에서, 유기 용매는 메탄올, 에탄올, 아세토니트릴, 이소프로판올 및 아세트산 중 하나 이상이다. 하나의 양태에서, 유기 용매는 에탄올이다.

다른 양태에서, 유기 용매와 물의 혼합물은 약 1 내지 99% 유기 용매 및 약 99 내지 1%의 물을 포함한다. 다른 양태에서, 혼합물은 40 내지 99% 에탄올 및 60% 내지 1%의 물을 포함한다. 하나의 양태에서, 혼합물은 약 15 내지 85% 유기 용매 및 약 1 내지 15% 물을 포함한다. 특정 양태에서, 혼합물은 약 85% 유기 용매 및 약 15% 물을 포함한다. 다른 특정한 양태에서, 혼합물은 1:1 에탄올과 물을 포함한다. 또 다른 특정한 양태에서, 혼합물은 9:1 에탄올과 물을 포함한다. 본원에서 기술하는 유기 용매 대 물의 비 또는 백분율은 용적을 기준으로 한다.

하나의 특정 양태에서, 유기 용매와 물의 혼합물은 알코올과 물의 혼합물(예를 들면, 메탄올/물, 에탄올/물, 이소프로판올/물 등)이다. 그러나, 본원에서 기술하는 방법의 결정화가 유기 합성 분야의 숙련가에 의해 용이하게 선택될 수 있는 어떠한 적합한 용매 또는 용매 혼합물 중에서도 수행될 수 있음이 당해 분야의 숙 련가에게 명백할 것이다. 본원에서 사용되는 이러한 적합한 유기 용매로는 예를 들면 이로써 제한되지 않고, 염소화 용매, 탄화수소 용매, 에테르 용매, 극성 양성자성 용매 및 극성 비양성자성 용매가 포함된다. 적합한 할로겐화 용매로는 사염화탄소, 브로모디클로로메탄, 디브로모클로로메탄, 브로모포름, 클로로포름, 브로모클로로메탄, 디브로모메탄, 부틸 클로라이드, 디클로로메탄, 테트라클로로에틸렌, 트리클로로에틸렌, 1,1,1-트리클로로에탄, 1,1,2-트리클로로에탄, 1,1-디클로로에탄, 1,2-디클로로에탄, 2-클로로프로판, 헥사플루오로벤젠, 1,2,4-트리클로로벤젠, o-디클로로벤젠, 클로로벤젠, 플루오로벤젠, 플루오로트리클로로메탄, 클로로트리플루오로메탄, 브로모트리플루오로메탄, 사불화탄소, 디클로로플루오로메탄, 클로로디플루오로메탄, 트리플루오로메탄, 1,2-디클로로테트라플루오르에탄 및 헥사플루오로에탄이 포함되나 이에 제한되지 않는다. 적합한 탄화수소 용매로는 벤젠, 사이클로헥산, 펜탄, 헥산, 톨루엔, 사이클로헵탄, 메틸사이클로헥산, 헵탄, 에틸벤젠, m-, o- 또는 p-크실렌, 옥탄, 인단, 노난이 포함되나 이에 제한되지 않는다. 적합한 에테르 용매로는 디메톡시메탄, 테트라하테트라하이드로푸란, 1,3-디옥산, 1,4-디옥산, 푸란, 디에틸 에테르, 에틸렌 글리콜 디메틸 에테르, 에틸렌 글리콜 디에틸 에테르, 디에틸렌 글리콜 디메틸 에테르, 디에틸렌 글리콜 디에틸 에테르, 트리에틸렌 글리콜 디이소프로필 에테르, 아니솔 또는 t-부틸 메틸 에테르가 포함되나 이에 제한되지 않는다.

적합한 극성 양성자성 용매로는 메탄올, 에탄올, 2-니트로에탄올, 2-플루오로에탄올, 2,2,2-트리플루오로에탄올, 에틸렌 글리콜, 1-프로판올, 2-프로판올, 2- 메톡시에탄올, 1-부탄올, 2-부탄올, i-부틸 알코올, t-부틸 알코올, 2-에톡시에탄올, 디에틸렌 글리콜, 1-, 2- 또는 3- 펜탄올, 네오-펜틸 알코올, t-펜틸 알코올, 디에틸렌 글리콜 모노메틸 에테르, 디에틸렌 글리콜 모노에틸 에테르, 사이클로헥산올, 벤질 알코올, 페놀 및 글리세롤이 포함되나 이에 제한되지 않는다. 적합한 극성 비양성자성 용매로는 디메틸포름아미드(DMF), 디메틸아세트아미드(DMAC), 1,3-디메틸-3,4,5,6-테트라하이드로-2(1H)-피리미디논(DMPU), 1,3-디메틸-2-이미다졸리디논(DMI), N-메틸피롤리디논(NMP), 포름아미드, N-메틸아세트아미드, N-메틸포름아미드, 아세토니트릴(ACN), 디메틸설폭사이드, 프로피오니트릴, 에틸 포르메이트, 메틸 아세테이트, 헥사클로로아세톤, 아세톤, 에틸 메틸 케톤, 에틸 아세테이트, 이소프로필 아세테이트, t-부틸 아세테이트, 설폴란, N,N-디메틸프로피온아미드, 니트로메탄, 니트로벤젠, 헥사메틸포스포르아미드가 포함되나 이에 제한되지 않는다.

투여 방법

본원에서 기술하는 모든 방법에서, 약제학적 조성물은 젤라틴 캡슐로 경구 투여될 수 있다. 당해 조성물은 본원에서 기술하는 방법에 따라서 단위 투여량으로 1일 1회, 1일 2회 또는 1일 3회 투여될 수 있다.

이어서, 1일 투여는 수일 내지 수년 동안 지속적으로 반복된다. 경구 치료는 1주 내지 환자의 일생 동안 계속될 수 있다. 하나의 양태에서, 투여는 5일 동안 연속해서 지속되고, 후에 환자는 추가의 투여가 요구되는지를 평가할 수 있다. 투여는 연속적이거나 간헐적일 수 있으며, 즉 수일 동안 연속적으로 치료한 다음, 휴지기가 있을 수 있다.

본 발명의 약제학적 조성물은 25 내지 4000mg/m², 예를 들면, 약 25 내지 1000mg, 50 내지 1000mg, 100mg, 200mg, 300mg, 400mg, 600mg, 800mg, 1000mg 등의 총 1일 투여량으로 경구 투여될 수 있다. 전형적으로, 화합물은 환자에게 400mg 이하로 투여되는 경우 1일 투여량으로서 투여된다. 보다 높은 총 투여량(즉, 400mg 초과)의 경우, 전체는 하루 동안 동일한 시간에 걸쳐서 다중 투여량, 예를 들면, 1일 2회, 1일 3회 등으로 분할된다. 예를 들면, 2회 투여량, 예를 들면, 각각 500mg을 12시간 간격으로 투여하여 하루 동안 1000mg의 총 투여량을 달성할 수 있다.

하나의 양태에서, SAHA는 환자에게 200mg의 총 1일 투여량으로 투여된다. 다른 양태에서, SAHA는 400mg의 총 1일 투여량으로 투여된다. 또 다른 양태에서, SAHA는 600mg의 총 1일 투여량으로 투여된다.

하나의 양태에서, 환자에게 투여되는 활성 성분의 양은 환자에서 독성을 유발할 수 있는 양 미만이다. 특정한 양태에서, 환자에게 투여되는 활성 성분의 양은 환자의 혈장중 화합물의 농도가 화합물의 독성 수준과 동등하거나 이를 초과하도록 하는 양 미만이다. 하나의 양태에서, 환자의 혈장중 활성 성분의 농도는 약 10 nM 내지 약 5000 nM로 유지된다. 본 발명의 실시에 있어, 환자에게 투여되는 활성 성분의 최적의 양은 사용되는 특정 화합물 및 치료될 암의 종류에 따라 좌우될 것이다.

병용 요법

본 발명의 방법은 또한, 초기에 피험체에게 항종양제를 투여하여 피험체에서 종양성신생세포가 항종양제에 대해 내성이 되도록하고 이어서 이러한 세포의 최종적 분화, 세포 성장 및/또는 아폽토시스를 선택적으로 유도하는데 효과적인, 본 발명의 임의의 조성물의 유효량을 투여함을 포함할 수 있다.

항종양제는 알킬화제, 항대사물, 호르몬제, 항생제, 콜히친, 빈카 알칼로이드, L-아스파라기나제, 프로카바진, 하이드록시우레아, 미토탄, 니트로소우레아 또는 이미다졸 카복스아미드와 같은 수많은 화학요법제 중 하나일 수 있다. 적합한 제제는 튜불린의 탈분극을 촉진하는 제제이다. 하나의 양태에서, 항종양제는 콜히친 또는 빈카 알칼로이드; 빈블라스틴 또는 빈크리스틴이다. 항종양제가 빈크리스틴인 양태에서, 세포는 바람직하게는 약 5mg/ml의 농도에서 빈크리스틴에 대해 내성이 되도록 처리된다. 세포를 항종양제에 대해 내성이 되도록 처리하는 것은 당해 세포를 3 내지 5일 이상의 기간 동안 당해 제제와 접촉시킴으로써 성취할 수 있다. 수득된 세포와 상기한 임의의 화합물과의 접촉은 앞서 기술한 바와 같이 수행한다. 상기한 치료요법제 이외에, 당해 화합물을 방사선 요법과 함께 투여할 수도 있다.

알킬화제

알킬화제는 DNA 생산을 위한 뉴클레오타이드 전구체상의 화학적 실재물과 같은 친핵성 잔기와 반응한다. 알킬화제는 이러한 뉴클레오타이드를 알킬화시키고 이의 DNA로의 어셈블리를 방지함으로써 세포 분열의 과정에 영향을 준다.

알킬화제의 예로는 비스클로로에틸아민(질소 머스타드, 예를 들면, 클로람부 실, 사이클로포스파미드, 이포스파미드, 메클로르에타민, 멜팔란, 우라실 머스타드), 아지리딘(예: 티오테파), 알킬 알콘 설포네이트(예: 부술판), 니트로소우레아(예: 카르무스틴, 로무스틴, 스트렙토조신), 비통상적 알킬화제(알트레타민, 데카바진 및 프로카바진), 백금 화합물(카보플라스틴 및 시스플라틴)이 포함되나 이에 제한되지 않는다. 이들 화합물은 포스페이트, 아미노, 하이드록실, 설피드릴, 카복실 및 이미다졸 그룹과 반응한다.

생리학적 조건하에, 이들 약물은 이온화되고, 민감성 핵산 및 단백질에 부착하는 양 하전된 이온을 생성하여 세포 주기 정지 및/또는 세포 사멸을 유도한다. 알킬화제는 세포 주기의 특정 시기와 독립적으로 이의 활성을 발휘하기 때문에 세포 주기 시기-비특이적 제제이다. 질소 머스타드 및 알킬 알콘 설포네이트는 G1기 및 M기의 세포에 대해 가장 효과적이다. 니트로소우레아, 질소 머스타드 및 아지리딘은 G1기 및 S기로부터 M기로의 진행을 손상시킨다[참조; Chabner and Collins eds. (1990) "Cancer Chemotherapy: Principles and Practice", Philadelphia: JB Lippincott].

알킬화제는 광범위한 신생물성 질환에 대해 활성적이며, 백혈병 및 림프종 뿐만 아니라 고형 종양의 치료에서 현저한 활성을 갖는다. 임상적으로 이러한 약물 그룹은 급성 및 만성 백혈병, 호지킨 질환, 비-호지킨 림프종, 다발성 골수종; 원발성 뇌 종양; 유방, 난소, 고환, 폐, 방광, 자궁경부 및 두경부의 암종 및 악성 흑색종의 치료에서 통상적으로 사용된다.

모든 알킬화제에서 공통된 대다수의 독성은 골수억제이다. 또한, 다양한 중 증도의 위장관 부작용이 통상적으로 일어나며 다양한 기관 독성이 특이적 화합물과 관련된다[참조: Black and Livingston (1990) Drugs 39: 489-501; and 39: 652-673].

항생제

항생제(예: 세포독성 항생제)는 DNA 또는 RNA 합성을 직접적으로 억제함으로써 작용하고 세포 주기 전반에 걸쳐 효과적이다. 항생제의 예로는 안트라사이클린(예: 독소루비신, 다우노루비신, 에피루비신, 이다루비신 및 안트라센디온), 미토마이신 C, 블레오마이신, 닥티노마이신, 플리카토마이신이 포함된다. 이들 항생제는 상이한 세포성 성분을 표적화하여 세포 성장을 방해한다. 예를 들면, 안트라사이클린은 일반적으로 전사적 활성 DNA의 영역내에서 DNA 토포이소머라제 II의 작용을 방해하여 DNA 쇄 절단을 유도하는 것으로 사료된다.

블레오마이신은 일반적으로 철을 킬레이트화시켜 활성화된 복합체를 형성하고, 이어서 DNA의 염기에 결합하여 쇄 절단 및 세포 사멸을 유발하는 것으로 사료된다.

항생제는 유방, 폐, 위 및 갑상선의 암종, 림프종, 골수성 백혈병, 골수종 및 육종을 포함하는 광범위한 신생물성 질환에 걸쳐서 치료제로서 사용되어 왔다. 상기 그룹 내의 안트라사이클린의 1차 독성은 골수억제, 특히 과립구감소증이다. 점막염은 흔히 과립구감소증을 동반하며 중증도는 골수억제 정도와 상관관계가 있다. 안트라사이클린의 고 투여량 투여와 관련된 심각한 심장 독성도 있다.

항대사제

항대사제(즉, 항대사물)은 암세포의 생리 및 분화에 중요한 대사과정을 방해하는 약물 그룹이다. 활발히 증식하는 암 세포는 다량의 핵산, 단백질, 지질 및 기타 생명중추 세포 성분의 지속적 합성을 필요로 한다.

많은 항대사물은 푸린 또는 피리미딘 뉴클레오시드의 합성을 억제하거나 DNA 복제의 효소를 억제한다. 일부 항대사물은 또한 리보뉴클레오시드 및 RNA의 합성 및/또는 아미노산 대사작용 및 단백질 합성을 방해한다. 생명중추 세포 성분의 합성을 방해함으로써 항대사물은 암 세포의 성장을 지연시키거나 중단시킬 수 있다. 항대사제의 예로는 플루오로우라실(5-FU), 플록수리딘(5-FUdR), 메토트렉세이트, 류코보린, 하이드록시우레아, 티오구아닌(6-TG), 머캅토푸린(6-MP), 시타라빈, 펜토스타틴, 플루다라빈 포스페이트, 클라드리빈(2-CDA), 아스파라기나제 및 젬시타빈이 포함되나 이에 제한되지 않는다.

항대사제는 결장, 직장, 유방, 간, 위 및 췌장의 암종, 악성 흑색종, 급성 및 만성 백혈병 및 유모세포 백혈병을 포함하는 암의 몇가지 통상적 형태를 치료하는데 널리 사용되어 왔다. 항대사물 치료의 많은 부작용은 골수 또는 위장관 점막과 같은 유사분열이 활발한 조직에서의 세포 분화의 억제로부터 초래된다. 이러한 제제로 치료된 환자는 통상적으로 골수 억제, 구내염, 설사 및 모발 손실을 경함한다[참조: Chen and Grem (1992) Curr. Opin. Oncol. 4: 1089-1098].

호르몬제

호르몬제는 이의 표적 기관의 성장 및 발달을 조절하는 약물 그룹이다. 대부분의 호르몬제는 성 스테로이드 및 이의 유도체 및 유사체, 예를 들면, 에스트로 겐, 프로게스토젠, 항-에스트로겐, 안드로겐, 항-안드로겐 및 프로게스틴이다. 이들 호르몬제는 성 스테로이드에 대한 수용체 길항제로서 작용하여 수용체 발현 및 생명중추 유전자의 전사를 하향 조절할 수 있다. 이러한 호르몬제의 예로는 합성 에스트로겐(예: 디에틸스티베스트롤), 항에스트로겐(예: 타목시펜, 토레미펜, 플루옥시메스테롤 및 랄록시펜), 항안드로겐(비칼루타미드, 닐루타미드, 플루타미드), 아로마타제 억제제(예: 아미노글루테티미드, 아나스트로졸 및 테트라졸), 황체형성 호르몬 방출 호르몬(LHRH) 유사체, 케토코나졸, 고세렐린 아세테이트, 류프롤라이드, 메게스트롤 아세테이트 및 미페프리스톤이 있다.

호르몬제는 유방암, 전립선암, 흑색종 및 수막종을 치료하는데 사용된다. 호르몬의 주요 작용이 스테로이드 수용체를 통해 매개되기 때문에, 60%의 수용체-양성 유방암은 1차 호르몬 요법에 반응하며, 10% 미만의 수용체-음성 종양이 반응한다. 호르몬제와 관련된 주요 부작용은 발적이다. 흔한 증상은 골 통증의 급격한 증가, 피부 병변 주변의 홍반 및 고칼슘혈증 유도이다.

구체적으로, 프로게스토겐은 내피 암을 치료하는데 사용되며, 이는 내피 암이 프로게스토겐에 의해 방해받지 않는 고수준의 에스트로겐에 노출된 여성에서 발생하기 때문이다.

항안드로겐은 호르몬 의존적인 전립선암의 치료를 위해 주로 사용된다. 항안드로겐은 테스토스테론의 수준을 감소시킴으로써 종양의 성장을 억제하는데 사용된다.

유방암의 호르몬 치료는 신생물성 유방 세포내 에스트로겐 수용체의 에스트 로겐-의존적 활성화의 수준을 감소시킴을 수반한다. 항-에스트로겐은 에스트로겐 수용체에 결합함으로써 작용하고 공활성화인자의 동원을 방지하여 에스트로겐 시그날을 억제한다.

LHRH 유사체는 전립선암의 치료에서 사용되어 테스토스테론의 수준을 감소시키고 이에 따라 종양의 성장을 감소시킨다.

아로마타제 억제제는 호르몬 합성을 위해 요구되는 효소를 억제함으로써 작용한다. 폐경기 여성에서 에스트로겐의 주요 공급원은 아로마타제에 의한 안드로스텐디온의 전환을 통한 것이다.

식물 유래의 제제

식물 유래의 제제는 식물로부터 유래되거나 당해 제제의 분자 구조에 기초하여 변형된 약물 그룹이다. 식물 유래의 제제는 세포 분열에 필수적인 세포의 성분의 어셈블리(assembly)를 방해하여 세포 복제를 억제한다.

식물 유래의 제제의 예로는 빈카 알칼로이드(예: 빈크리스틴, 빈블라스틴, 빈데신, 빈졸리딘 및 비노렐빈), 포도필로톡신(예: 에토포시드(VP-16) 및 테니포시드(VM-26)), 탁산(예: 파클리탁셀 및 도세탁셀)이 포함된다. 이들 식물 유래의 제제는 일반적으로 튜블린에 결합하여 유사분열을 억제하는 항유사분열제로서 작용한다. 에토포시드와 같은 포도필로톡신은 토포이소머라제 II를 간섭하여 DNA 합성을 간섭함으로써 DNA 쇄 절단을 유도하는 것으로 사료된다.

식물 유래의 제제는 많은 암 형태를 치료하는데 사용된다. 예를 들면, 빈크 리스틴은 백혈병, 호지킨 및 비-호지킨 림프종 및 소아 종양 신경모세포종, 횡문근육종 및 윌름스 종양의 치료에서 사용된다. 빈블라스틴은 림프종, 고환암, 신장암 암종, 균상식육종 및 카포시 육종에 대해 사용된다. 도세탁셀은 진행된 유방암, 비소세포 폐암(NSCLC) 및 난소암에 대한 전도유망한 활성을 나타냈다.

에토포시드는 광범위한 신생물에 대해 활성이며, 이중에는 소세포 폐암, 고환암이 있으며 NSCLC가 가장 반응성이다.

식물 유래의 제제는 치료될 환자에 대해 심각한 부작용을 유발한다. 빈카 알칼로이드는 상이한 임상적 독성 스펙트럼을 나타낸다. 빈카 알칼로이드의 부작용에는 신경독성, 변경된 혈소판 기능, 골수억제 및 백혈구감소증이 포함된다. 파클리탁셀은 용량-제한적 호중구감소증을 유발하며, 다른 조혈세포주에서는 비교적 유발하지 않는다. 에피필로톡신의 주요 부작용은 혈액학적 독성(호중구감소증 및 혈소판감소증)이다.

다른 부작용에는 일시적 간 효소 이상, 탈모증, 알레르기 반응 및 말초 신경병증이 포함된다.

생물학적 제제

생물학적 제제는 단독으로 또는 화학요법 및/또는 방사선요법과 병용하여 사용되는 경우 암/종양 퇴행을 유도하는 생체분자 그룹이다. 생물학적 제제의 예로는 사이토킨, 종양 항원에 대한 모노클로날 항체, 종양 억제 유전자 및 암 백신과 같은 면역조절성 단백질이 포함된다.

사이토킨은 상당한 면역조절 활성을 지닌다. 인터류킨-2(IL-2, 알데스류킨) 및 인터페론-α(IFN-α)와 같은 일부 사이토킨은 항종양 활성을 나타내고 전이성 신장 세포 암종 및 전이성 악성 흑색종 환자의 치료용으로 승인되었다. IL-2은 T-세포 매개성 면역반응에 중심적인 T-세포 성장 인자이다. 일부 환자에 대한 IL-2의 선택적 항종양 효과는 자기와 비자기를 구별하는 세포 매개성 면역반응의 결과인 것으로 사료된다.

인터페론-α에는 중복되는 활성을 갖는 23가지 초과의 관련 아유형이 포함된다. IFN-α는 많은 고형 및 조혈 악성종양에 대해 활성을 나타냈으며, 조혈 악성종양이 특히 민감한 것으로 보인다.

인터페론의 예에는 인터페론-α, 인터페론-β(섬유모세포 인터페론) 및 인터페론-γ가 포함된다. 다른 사이토킨의 예에는 에리트로포이에틴(에포이에틴-α), 과립구-CSF(필그라스틴) 및 과립구, 대식세포-CSF(사르그라모스팀)이 포함된다. 사이토킨 이외의 다른 면역조절제에는 바실러스 칼메트 게렝(bacillus Calmette-Guerin), 레바미솔 및 옥트레오타이드, 천연발생 호르몬 소마토스타틴의 효과를 모사하는 지효성 옥타펩타이드가 포함된다.

게다가, 항암 치료는 종양 백신접종 접근법에서 사용되는 항체 및 시약을 이용한 면역요법 치료를 포함할 수 있다. 상기 요법 부류에서의 1차 약물은 단독의 또는 예를 들면, 암세포에 대한 독소 또는 화학치료제/세포독성제를 보유한 항체이다. 종양 항원에 대한 모노클로날 항체는 종양에 의해 발현되는 항원, 바람직하게는 종양-특이적 항원에 대해 유도된 항원이다. 예를 들면, 모노클로날 항체 HERCEPTIN^R(트라스추주마브)는 전이성 유방암을 포함하는 몇몇 유방 종양에서 과발현되는 사람 상피 성장인자 수용체2(HER2)에 대해 발생된다. HER2 단백질의 과발현은 보다 공격적인 질환 및 임상에서의 불량한 예후와 관련된다. HERCEPTIN^R은 종양이 HER2 단백질을 과발현하는 전이성 유방암 환자의 치료를 위한 단일 제제로서 사용된다.

종양 항원에 대한 모노클로날 항체의 다른 예는 RITUXAN^R(리툭시마브)는 림프종 세포상의 CD20에 대해 발생하며 정상 및 악성 CD20+ 전-B 및 성숙한 B 세포를 선택적으로 고갈시킨다.

RITUXAN은 재발된 또는 불응성 저등급 또는 낭포성, CD20+, B 세포 비-호지킨 림프종 환자의 치료를 위한 단일 제제로서 사용된다. MYELOTARG^R(젬투주마브 오조가마이신) 및 CAMPATH^R(알렘투주마브)는 사용될 수 있는 종양 항원에 대한 모노클로날 항체의 추가 예이다.

종양 억제인자 유전자는 세포 성장 및 분열 주기를 억제하는 작용을 하여 신생물의 발달을 방지하는 유전자이다. 종양 억제인자 유전자의 돌연변이는 세포가 억제 시그날의 네트워크의 성분 중 하나 이상을 무시하여 세포 주기 체크포인트를 극복하고 고등급의 제어된 세포 성장-암을 야기하도록 한다. 종양 억제인자 유전자의 예로는 Duc-4, NF-1, NF-2, RB, p53, WTl, BRCA1 및 BRCA2가 포함된다.

DPC4는 췌장암에 관여하고 세포 분열을 억제하는 세포질 경로에 참여한다. NF-1은 세포질의 억제성 단백질인 Ras를 억제하는 단백질을 암호화한다. NF-1은 신경계의 신경섬유종과 크롬친화세포종 및 골수성 백혈병에 관여하는 핵 단백질을 암호화한다. NF-2는 신경계의 수막종, 슈반종 및 뇌실막세포종에 관여하는 핵 단백질을 암호화한다. RB는 세포주기의 주요 억제인자인 핵 단백질인 pRB 단백질을 암호화한다. RB는 망막모세포종 뿐만 아니라 골암, 방광암, 소세포 폐암 및 유방암에 관여한다. P53은 세포 분열을 조절하고 아폽토시스를 유도할 수 있는 p53 단백질을 암호화한다. p53의 돌연변이 및/또는 불활성화는 광범위한 암에서 발견된다. WTI는 신장의 윌름스 종양에 관여한다. BRCA1은 유방암 및 난소암에 관여하고 BRCA2는 유방암에 관여한다. 종양 억제인자 유전자는 종양 세포로 전달되고, 여기서 이의 종양 억제 작용을 발휘한다.

암 백신은 종양에 대한 신체의 특이적 면역반응을 유도하는 제제의 그룹이다. 조사 개발 및 임상 시험중에 있는 대부분의 암 백신은 종양-관련 항원(TAA)이다. TAA는 종양 세포에 존재하고 상대적으로 정상 세포에는 부재이거나 감소된 구조(즉, 단백질, 효소 또는 탄수화물)이다. 명백히 종양 고유의 것이기 때문에, TAA는 이를 인식하여 파괴를 유발하는 면역계에 대한 표적을 제공한다. TAA의 예로는 강글리사이드(GM2), 전립선 특이적 항원(PSA), α-태아단백(AFP), 암배아 항원(CEA)(결장 암 및 기타 선암종, 예를 들면, 유방, 폐, 위 및 췌장 암에 의해 생성됨), 흑색종 관련 항원(MART-I, gaplOO, MAGE 1,3 티로시나제), 파필로마바이러스 E6 및 E7 단편, 자가 종양 세포 및 동종 종양 세포의 전세포 또는 일부분/용해물이 포함된다.

다른 요법

암을 치료하는데 사용되는 종래의 세포독성 및 호르몬 요법 이외에, 암 치료를 위한 부가적 요법들이 최근에 개발되었다. 예를 들면, 많은 유전자 요법 형태들이 전임상 또는 임상 시험 중에 있다.

또한, 종양 혈관형성(혈관신생)의 억제에 기초하는 접근법이 최근에 개발중에 있다. 이러한 개념의 목적은 새로이 구축된 종양 혈관계에 의해 제공되는 영양 및 산소 공급으로부터 종양을 차단하는 것이다.

또한, 종양성신생세포의 최종적 분화를 유도함에 의한 암 요법도 시도 중이다. 적합한 분화제는 다음 참조문헌의 중 하나 이상에 개시된 화합물이 포함된다:

a) 극성 화합물[참조: Marks et al (1987); Friend, C, Scher, W., Holland, J. W., and Sato, T. (1971) Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 68: 378-382; Tanaka, M., Levy, J., Terada, M., Breslow, R., Rifkind, R. A., and Marks, P. A. (1975) Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 72: 1003-1006; Reuben, R. C, Wife, R. L., Breslow, R., Rifkind, R. A., and Marks, P. A. (1976) Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 73: 862-866];

b) 비타민 D의 유도체 및 레티노산[참조: Abe, E., Miyaura, C, Sakagami, H., Takeda, M., Konno, K., Yamazaki, T., Yoshika, S., and Suda, T. (1981) Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 78: 4990-4994; Schwartz, E. L., Snoddy, J. R., Kreutter, D., Rasmussen, H., and Sartorelli, A. C. (1983) Proc. Am. Assoc. Cancer Res. 24: 18; Tanenaga, K., Hozumi, M., and Sakagami, Y. (1980) Cancer Res. 40: 914- 919];

c) 스테로이드 호르몬[참조: Lotem, J. and Sachs, L. (1975) Int. J. Cancer 15: 731-740];

d) 성장 인자[참조: Sachs, L. (1978) Nature (Lond.) 274: 535, Metcalf, D. (1985) Science, 229: 16-22];

e) 프로테아제[참조: Scher, W., Scher, B. M., and Waxman, S. (1983) Exp. Hematol. 11: 490-498; Scher, W., Scher, B. M., and Waxman, S. (1982) Biochem. & Biophys. Res. Comm. 109: 348-354];

f) 종양 촉진자[참조: Huberman, E. and Callaham, M. F. (1979) Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 76: 1293-1297; Lottem, J. and Sachs, L. (1979) Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 76: 5158-5162]; 및

g) DNA 또는 RNA 합성 억제제[참조: Schwartz, E. L. and Sartorelli, A. C. (1982) Cancer Res. 42: 2651-2655, Terada, M., Epner, E., Nudel, U., Salmon, J., Fibach, E., Rifkind, R. A., and Marks, P. A. (1978) Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 75: 2795-2799; Morin, M. J. and Sartorelli, A. C. (1984) Cancer Res. 44: 2807-2812; Schwartz, E. L., Brown, B. J., Nierenberg, M., Marsh, J. C, and Sartorelli, A. C. (1983) Cancer Res. 43: 2725-2730; Sugano, H., Furusawa, M., Kawaguchi, T., and Ikawa, Y. (1973) Bibl. Hematol. 39: 943-954; Ebert, P. S., Wars, L, and Buell, D. N. (1976) Cancer Res. 36: 1809-1813; Hayashi, M., Okabe, J., and Hozumi, M. (1979) Gann 70: 235-238],

본 발명의 약제학적 조성물 및 상기에서 기술하는 임의의 항암제의 배합 및 이들의 사용은 본 발명의 범주 내에 있다.

치료방법

본 발명은 또한 종양성신생세포의 최종적 분화를 선택적으로 유도함으로써 이의 증식을 억제하는데 효과적인, 상기한 본 발명의 임의의 조성물의 유효량을 환자에게 투여함을 포함하는, 종양성신생세포의 분화를 특징으로 하는 종양을 갖는 환자의 치료방법을 제공한다.

본 발명의 방법은 사람 암 환자의 치료를 위함이다. 그러나, 본 발명은 다른 포유동물의 치료에서도 효과적일 수 있다. 암에는 종양성신생세포의 증식에 의해 유발되는 임의의 암, 예를 들면, 폐암, 급성 림프구성 골수종, 호지킨 림프종, 비호지킨 림프종, 방광 흑색종, 신장 암종, 유방 암종, 전립선 암종, 난소 암종 또는 직장결장 암종이 포함되나 이에 제한되지 않는다.

본 발명은 하기 실시예에서 예시로서 설명된다. 본 단락은 본 발명의 이해를 돕기 위해 제시되며 이를 제한하기 위함이 아니며, 이후에 기술되는 청구의 범위에 제시된 본 발명을 어떠한 방식으로도 제한하는 것으로 해석되지 않아야 한다.

실시예 1

SAHA I형의 합성

SAHA I형은 하기 개요된 방법 또는 이의 임의의 개질 및 변형 방법에 따라서 합성할 수 있다.

SAHA의 합성

단계 1 - 수베르아닐산의 합성

22L 플라스크에 수베르산 3,500g(20.09몰)을 넣고 가열하여 용융시켰다. 온도를 175℃로 승온시킨 다음, 아닐린 2,040g(21.92몰)을 부가하였다. 온도를 19O℃로 승온시키고 상기 온도에서 20분 동안 유지시켰다. 용융물을 물 50L에 용해된 수산화칼륨 4,017g을 함유하는 Nalgene 탱크에 부었다. 용융물을 부가한 후 혼합물을 20분 동안 교반하였다. 반응을 동일한 규모에서 반복하고, 두번째 용융물을 동일한 수산화칼륨 용액에 부었다. 혼합물을 철저히 교반한 후, 교반기를 끄고, 혼합물을 침강시켰다. 이어서, 혼합물을 셀라이트(Celite) 패드(4,200g)를 통해 여과하였다(생성물을 여과하여 중성 부산물을 제거하였다(수베르산의 양쪽 말단에 대한 아닐린의 공격으로부터)). 여액은 생성물의 염 및 또한 미반응된 수베르산의 염을 함유하였다. 여과가 매우 느려 수일이 소요되었기 때문에 혼합물을 침강시켰다. 여액을 진한 염산 5L를 사용하여 산성화시켰다; 혼합물을 1시간 동안 교반한 다음, 밤새 침강시켰다. 생성물을 여과하여 수거하고, 깔때기상에서 탈이온수(4 x 5 L)로 세척하였다. 습윤한 필터 케이크를 탈이온수 44L와 함께 72L 플라스크에 넣고, 혼합물을 50℃로 가열하고, 고온 여과하여 고체를 분리시켰다(목적하는 생성물은 고온수에서 용해도가 훨씬 더 큰 수베르산으로 오염되었다. 수차례 고온 분쇄를 수행하여 수베르산을 제거하였다. 생성물을 NMR[D₆DMSO]로 조사하여 수베르산의 제거를 모니터하였다). 고온 분쇄를 5O℃에서 물 4L로 반복하였다. 생성물을 다시 여과하여 분리시키고, 고온수 4L로 세정하였다. 이를 진공원으로서 Nash 펌프를 사용하여 65℃에서 진공 오븐에서 수일에 걸쳐 건조시켰다(Nash 펌프는 액체 환 펌프(물)이며 약 29인치의 수은의 진공을 가한다. 간헐적 아르곤 퍼지를 사용하여 물의 방출(carryoff)을 보조하였다); 수베르아닐산 4,182.8g이 수득되었다.

생성물은 여전히 소량의 수베르산을 함유하였고, 따라서 고온 분쇄를 한번에 생성물 약 300g씩 사용하여 65℃에서 분획으로서 수행하였다. 각 분획을 여과하고 추가의 고온수(전체 약 6L)로 철저히 세정하였다. 이를 반복하여 전체 배치를 정제하였다. 이로써 생성물로부터 수베르산을 완전히 제거하였다. 고체 생성물을 플라스크 내에서 배합하고 6L의 메탄올/물(1:2)과 함께 교반한 다음, 여과하여 분리시키고 주말에 걸쳐서 필터상에서 공기 건조시켰다. 이를 트레이에 넣고 Nash 펌프 및 아르곤 배출(argon bleed)을 사용하여 65℃에서 진공 오븐에서 45시간 동안 건조시켰다. 최종 생성물의 중량은 3,278.4g이었다(32.7% 수율).

단계 2 - 메틸 수베르아닐레이트의 합성

기계적 교반기 및 콘덴서가 장착된 50L 플라크스에, 이전 단계에서 수득된 수베르아닐산 3,229g, 메탄올 20L 및 Dowex 50WX2-400 수지 398.7g을 넣는다. 혼합물을 가열 환류하고 18시간 동안 환류하에 유지시킨다. 혼합물을 여과하여 수지 비이드를 제거하고, 여액을 회전 증발기상의 잔사로 전달시켰다.

회전 증발기로부터의 잔사를 콘덴서 및 기계적 교반기가 장착된 50L 플라스크로 옮겼다. 상기 플라스크에 메탄올 6L을 부가하고, 혼합물을 가열하여 용액을 수득하였다. 이어서, 탈이온수 2L를 부가하고, 가열을 중단하였다. 교반된 혼합물을 냉각시킨 다음, 플라스크를 빙욕에 위치시키고, 혼합물을 냉각시켰다. 고체 생성물을 여과하여 분리시키고, 필터 케이크를 차가운 메탄올/물 (1:1) 4L로 세정하였다. 생성물을 총 64시간 동안 Nash 펌프를 사용하여 진공 오븐에서 45℃로 건조시켜, 메틸 수베르아닐레이트 2,850.2g(84% 수율), CSL 롯트 # 98-794-92-3 1를 수득하였다.

단계 3 - 조 SAHA의 합성

기계적 교반기, 열전쌍 및 불활성 대기용 입구가 장착된 50L 플라스크에 하이드록실아민 하이드로클로라이드 1,451.9g, 무수 메탄올 19L 및 메탄올 중의 30% 나트륨 메톡사이드 용액 3.93L를 부가한다. 이어서, 상기 플라스크를 메틸 수베르아닐레이트 2,748.0g에 이어서 메탄올 중의 30% 나트륨 메톡사이드 1.9L로 충전시켰다. 혼합물을 16시간 10분 동안 교반하였다. 반응 혼합물의 약 1/2를 반응 플라스크(플라스크 1)로부터 기계적 교반기가 장착된 50L 플라스크(플라스크 2)로 옮 겼다. 이어서, 탈이온수 27L를 플라스크 1에 부가하고, 혼합물을 10분 동안 교반하였다. pH를 pH 메터를 사용하여 측정한 결과, pH는 11.56였다. 혼합물의 pH를 메탄올 중의 30% 나트륨 메톡사이드 100ml를 부가하여 12.02로 조정하였다; 이로써 청정한 용액이 수득되었다(이 시점에서의 반응 혼합물은 소량의 고체를 함유하였다. pH를 조정하여 청정한 용액을 수득하였으며, 이로부터 생성물이 침전되었다). 플라크스 2 내의 반응 혼합물을 동일한 방식으로 희석시켰다; 탈이온수 27L를 부가하고 30% 나트륨 메톡사이드 용액 100ml를 혼합물에 부가하여 pH를 조정하여 12.01의 pH를 수득하였다(청정한 용액).

각 플라스크 내의 반응 혼합물을 빙초산을 부가하여 산성화시켜, 생성물을 침전시켰다. 플라스크 1은 최종 pH가 8.98이었으며, 플라스크 2는 최종 pH가 8.70이었다. 두 플라크스로부터의 생성물을 부흐너 깔때기 및 여과천을 사용하여 분리시켰다. 필터 케이크를 탈이온수 15L로 세척하고, 깔때기를 덮고, 생성물을 15.5시간 동안 진공하에 깔때기상에서 부분적으로 건조시켰다. 생성물을 취하여 5개의 유리 트레이에 위치시켰다. 상기 트레이들을 진공 오븐에 위치시키고, 생성물을 일정한 중량이 되도록 건조시켰다. 제1 건조를 아르곤 배출과 진공원으로서 Nash펌프를 사용하여 60℃에서 22시간 동안 실시하였다. 트레이를 진공 오븐으로부터 꺼내어 칭량하였다. 트레이를 상기 오븐으로 복귀시키고, 생성물을 아르곤 배출 없이 진공원으로서 오일 펌프을 사용하여 추가로 4시간 10분 동안 건조시켰다. 물질을 이중 4-밀 폴리에틸렌 백에 충전하고 플라스틱 외부 용기 내에 위치시켰다. 샘플링 후 최종 중량은 2633.4g(95.6%)이었다.

단계 4 - 조 SAHA의 재결정화에 의한 SAHA I형의 제조

조 SAHA를 메탄올/물로부터 재결정화시켰다. 기계적 교반기, 열전쌍 및 대기용 입구가 장착된 50L 플라스크를 결정화시킬 조 SAHA(2,525.7g)에 이어서 탈이온수 2,625ml 및 메탄올 15,755ml로 충전시켰다. 물질을 가열 환류시켜 용액을 수득하였다. 이어서, 탈이온수 5,250ml를 당해 반응 혼합물에 부가하였다. 가열을 중단하고, 혼합물을 냉각시켰다. 혼합물이 플라스크를 안전하게 취급할 수 있을 정도로 충분히 냉각되었을 때(28℃), 플라스크를 가열 맨틀로부터 꺼내어 냉각욕으로서 사용하기 위한 욕조내에 위치시켰다. 빙수를 상기 욕조에 부가하여 혼합물을 -5℃로 냉각시켰다. 혼합물을 2시간 동안 상기 온도 이하로 유지시켰다. 생성물을 여과하여 분리시키고, 필터 케이크를 차가운 메탄올/물(2:1) 1.5L로 세척하였다. 깔때기를 덮고, 생성물을 진공하에 1.75시간 동안 부분적으로 건조시켰다. 생성물을 깔때기로부터 취하여 6개의 유리 트레이에 위치시켰다. 트레이를 진공 오븐내에 위치시키고, 생성물을 진공원으로서 Nash 펌프를 사용하여 아르곤 배출을 사용하여 6O℃에서 64.75시간 동안 건조시켰다. 트레이를 칭량을 위해서 오븐에서 꺼낸 다음, 다시 오븐으로 복귀시키고 6O℃에서 추가로 4시간 동안 건조시켜 일정한 중량을 수득하였다. 제2 건조 기간을 위한 진공원은 오일 펌프였으며, 아르곤 배출을 사용하지 않았다. 물질을 이중 4-밀 폴리에틸렌 백에 충전시키고 플라스틱 외부 용기 내에 위치시켰다. 샘플링 후 최종 중량은 2,540.9g(92.5%)이었다.

다른 실험에서, 조 SAHA를 다음 조건을 사용하여 결정화시켰다:

SAHA 결정화 조건
용매	물	교반	시간(시간)
메탄올	-	실시하지 않음	2
메탄올	-	실시	72
에탄올	-	실시	72
이소프로판올	-	실시하지 않음	72
에탄올	15%	실시	2
메탄올	15%	실시하지 않음	72
에탄올	15%	실시하지 않음	72
에탄올	15%	실시	72
메탄올	15%	실시	72

모든 상기 반응 조건들은 SAHA 다형체 I을 생성시켰다.

실시예 IA

SAHA I형의 제조

단계 1 8-아닐리노-8-옥소옥탄산; 수베르아닐산("화합물 3)

수베르산(화합물 1,174.2g, 1.0몰), 아닐린(화합물 2, 85.8 내지 94.9 g) 및 톨루엔(0.1 내지 0.2L)를 배합하고, 60시간 동안 가열 환류시켰다. 10% 수산화나트륨 용액으로 pH를 11 이하로 조정하여 반응을 환류하에 퀀칭(quenching)시켰다. 수성 상을 분리시켰다. 유기 상을 톨루엔(0.11 내지 0.13L) 및 물(0.3 내지 0.4L)과 배합하고, 수성 상을 분리시켰다. 추출로부터 수성 상과 톨루엔(0.11 내지 0.13L)을 배합하고, 침강시킨 다음, 분리시켰다. 수성 상을 60 내지 70℃에서 톨루엔(0.2 내지 0.3 L)으로 2회 추출하였다. 수성 상을 필요에 따라 염산 및 10% 수산화나트륨 용액을 사용하여 20 내지 30℃에서 5.8 내지 6.2의 pH로 조정하였다. 배치를 여과하고, 냉각수(0.2 내지 0.3 L)로 세척한 다음, 급냉 이소프로판올로 세척하였다. 습윤한 케이크를 진공하에 최대 65℃에서 건조시켜 수베르아닐산을 수득하였다.

단계 2 메틸 8-아닐리노-8-옥소옥타노에이트; 메틸 수베르아닐레이트 (화합물 4)

수베르아닐산(화합물 3, 249.3g, 1.0mole) 및 메탄올(0.4 내지 0.5L)을 배합하고 45 내지 55℃로 가열하였다. pH를 염산을 사용하여 2 이하로 조정하고, 배치 온도를 반응이 완료될 때까지 45 내지 55℃에서 유지시켰다. 반응을 탈이온수(0.1 내지 0.2L)로 퀀칭시켰다. 배치를 25 내지 30℃로 냉각시키고 씨딩하여 결정화를 유도한 다음, 0-10℃로 냉각시켰다. 배치를 여과하고, 케이크를 0 내지 10℃에서 50:50(v/v) 메탄올/물 용액(0.28 내지 0.34L)으로 세척하였다. 습윤한 케이크를 진공하에 최대 46℃에서 건조시켜 메틸 수베르아닐레이트를 수득하였다.

단계 3 N-하이드록시-N'-페닐옥탄디아미드; 보리노스태트(화합물 5)

메틸 수베르아닐레이트 (화합물 4, 263.3g, 1.0몰) 및 2M 하이드록실아민 유리 염기 용액(0.8 내지 1.0L)을 배합하였다. 배치를 최대 20℃에서 유지시키면서, 외견적(apparent) pH를 필요에 따라 메탄올 중의 나트륨 메톡사이드를 사용하여 10.5 이상으로 조정하고, 배치를 숙성시켰다. 숙성 동안, 하이드록실아민 유리염기 용액(0.5 내지 0.6 L)을 부가하고, 반응이 완료될 때까지 배치를 최대 20℃ 및 10.5 이상의 외견적 pH에서 유지시켰다. 배치를 20 내지 35℃에서 유지시키면서 물(0.9 내지 1.1 L)에 부가하여 반응을 퀀칭시키고, 배치의 물 함량을 35 내지 45%로 조정하였다. pH를 필요에 따라 빙초산 및 탄산나트륨을 사용하여 8.8 내지 9.2로 조정하였다. 배치를 5 내지 10시간에 걸쳐 0 내지 10℃로 냉각시켰다. 배치를 여과하고, 케이크를 0 내지 10℃에서 55:45(v/v) 메탄올/물(0.45 내지 0.6L)로 세척하였다. 습윤한 케이크를 물 함량이 35% 이하가 될 때까지 진공 조건하에 두었다.

보리노스태트 조(264.32g, 1.0mole) 습윤 케이크를 변성 에탄올(1308 내지 1599g) 및 물(167 내지 204g)와 배합한다. 하이드록실아민 하이드로클로라이드(> 9mEquiv) 및 메탄올 중의 나트륨 메톡사이드(> 9 mEquiv)를 슬러리에 부가하고, 배치를 70 내지 80℃로 가열하였다. 용액을 여과한 다음, 0 내지 10℃로 서서히 냉각시켜 결정화시켰다. 배치를 여과하고, 케이크를 차가운 4:1(v/v) 변성 에탄올/물로 세척하였다. 습윤한 케이크를 진공하에 최대 45℃에서 건조시켰다.

단계 4 N-하이드록시-N'-페닐옥탄디아미드 - 보리노스태트-미세(화합물 6)

보리노스태트(화합물 5, 264.3g, 1.0몰)를 50:50(v/v) 에탄올/물 용액 (최소 2.8 L) 중에 슬러리화시켰다. 보리노스태트 슬러리를 배치 온도를 7 내지 30℃에서 유시키면서 25 내지 45㎛의 평균 크기로 습식-분쇄시켰다. 최종 슬러리를 여과하고, 습윤한 케이크를 0 내지 40℃ 물(최소 0.8 L)로 세척하였다. 습윤한 케이크를 진공하에 최대 물 함량이 0.2%(w/w)가 되도록 최대 55℃에서 건조시켜 보리노스태트-미세 약물 물질을 수득하였다.

단계 5 N-하이드록시-N' -페닐옥탄디아미드 - 보리노스태트-조립(coarse)(화합물 7)

보리노스태트(화합물 5, 264.3g, 1.0몰)를 50:50(v/v) 에탄올/물 용액 (4.9 내지 5.5 L) 중에 슬러리화시켰다. 최소 15 psig 압력하에, 상기 슬러리를 65 내지 70℃로 가열하여 용해시킨 다음, 60 내지 64℃로 냉각시켰다. 씨드 슬러리를 배치 온도를 유지시키면서 배치로 옮겼다. 배치를 최소 2시간 동안 61 내지 63℃에서 숙성시켰다. 재킷 온도를 제어하여, 배치를 다음의 3단계로 냉각시켰다: (1) 0.35-0.78℃/시간으로 55℃까지, (2) 0.83-2.00℃/시간으로 45℃까지, 및 (3) 2.00-4.44℃/시간으로 -5 내지 25℃까지. 최종 슬러리를 -5 내지 25℃에서 약 1시간 동안 숙성시킨 다음, 여과하였다. 습윤한 케이크를 물(최소 0.8 L)로 세척하였다. 습윤한 케이크를 진공하에 최대 55℃에서 건조시켜 보리노스태트-미세 약물 물질을 수득하였다.

보리노스태트-미세 건조 케이크(97.8 내지 116.3g, 0.37 내지 0.44mol) 및 50:50(v/v) 에탄올/물 용액(1.0 내지 1.2 L)을 배합하여 씨드 슬러리를 제조하였다. 최소 15 psig 압력하에, 상기 씨드 슬러리를 62 내지 66℃로 가열하고, 약 0.5시간 동안 숙성시킨 다음, 60 내지 64℃로 냉각시켰다.

실시예 2

1:1 에탄올/물 중에서 습식-분쇄된 소입자의 제조

SAHA 다형체 I 결정을 50mg/g 내지 150mg/g(결정/용매 혼합물) 범위의 슬러리 농도에서 1:1(용적 기준) EtOH/물 용매 혼합물에 현탁시켰다. SAHA의 평균 입자크기가 50㎛ 미만이 되고 95%의 평균 입자크기가 100㎛ 미만이 될 때까지, 온도를 실온으로 유지시키면서 슬러리를 초미세 블레이드를 갖는 IKA-Works Rotor-Stator 고전단 균질화기 모델 T50을 20 내지 30m/s로 사용하여 분쇄시켰다. 습식-분쇄된 슬러리를 여과하고 실온에서 1:1 EtOH/물 용매 혼합물로 세척하였다. 이어서, 습윤한 케이크를 40℃에서 건조시켰다. 습식-분쇄된 물질의 최종 평균 입자크기는 하기 Microtrac 방법으로 측정한 바에 따르면 50㎛ 미만이었다.

입자크기를 SRA-150 레이저 회절 입자크기 분석기(제조원: Microtrac Inc)를 사용하여 분석하였다. 당해 분석기에는 ASVR(Automatic Small Volume Recirculator)가 장착되어 있다. ISOPAR G 중의 0.25중량% 레시틴을 분산 유체로서 사용하였다. 각 샘플마다 3회 실시하여 기록하고, 평균 분포를 계산하였다. 입자크기 분포(PSD)를 용적 분포로서 분석하였다. 평균 입자크기 및 95% 초과의 값(용적 기준)이 보고되었다.

실시예 2A

1:1 에탄올/물 중에서 습식-분쇄된 소입자의 대규모 제조

56.4kg SAHA 다형체 I 결정을 20 내지 25℃에서 200프루프 펀키틸러스(punctilious) 에탄올 및 물 ("50/50 EtOH/물")의 50% 용적/용적 용액 610kg(SAHA kg당 10.8 kg 용매)에 부가하였다. 슬러리(약 700L)를 항정상태 입자크기 분포에 도달할 때까지 초미세 발생기를 갖는 IKA Works 습식-분쇄 세트를 통해 재순환시켰다. 당해 조건은 다음과 같았다: DR3-6, 23m/s 로터 팁 속력, 30-35 Lpm, 3개 발생기, 약 70 전환율(전환율은 1개의 발생기를 통해 통과하는 1개의 배치 용적이다).

습윤한 케이크를 여과하고, 물(총 3 kg/kg, 약 170 kg)로 세척하고 40 내지 45℃에서 진공 건조시켰다. 이어서, 건조된 케이크를 체질하고(595㎛ 스크린) "미세 API"로서 패킹하였다.

실시예 3

1:1 에탄올/물 중에서 평균 입자크기 150㎛의 거대 결정의 성장

SAHA 다형체 I 결정 25g 및 1:1 에탄올/물 용매 혼합물 388g을 유리 교반기가 장착된 500ml 재킷 수지 케틀(resin kettle)에 충전시켰다. 슬러리를 실시예 2의 단계 후에 입자크기가 50㎛ 미만이 되도록 실온에서 습식 분쇄시켰다. 상기 습식-분쇄된 슬러리를 65℃로 가열하여 고체의 약 85%를 용해시켰다. 가열된 슬러리를 65℃에서 1 내지 3시간 동안 숙성시켜 약 15% 씨드층을 확립하였다. 슬러리를 수지 케틀내에서 20psig 압력하에 400 내지 700 rpm 범위의 교반기 속력으로 혼합하였다.

이어서, 배치를 다음과 같이 5℃로 서서히 냉각시켰다: 10시간 내에 65℃에서 55℃로, 10시간 내에 55℃에서 45℃로, 8시간 내에 45℃에서 50℃로. 냉각된 배치를 5℃에서 1시간 동안 숙성시켜 5mg/g 미만, 특히 3mg/g의 표적 과포화 농도에 도달하게 하였다. 배치 슬러리를 여과하고 5℃에서 1:1 EtOH/물 용매 혼합물로 세척하였다. 습윤한 케이크를 40℃에서 진공하에 건조시켰다. 건조된 케이크의 최종 입자크기는 Microtrac 방법에 따르면 약 150㎛이며, 95%의 입자크기는 300㎛ 미만이었다.

실시예 3A

1:1 에탄올/물 중에서 거대 결정의 성장

보리노스태트 13.4kg 및 에탄올과 물의 1:1(v/v) 용액 134kg을 배합하였다. 수득된 슬러리를 95%의 평균 입자크기가 100㎛ 미만이 되도록 습식-분쇄하였다. 추가로 1:1 용액 20kg을 부가하고, 배치를 20psig 질소 압력하에 69 내지 71℃로 가열하고 2시간 동안 숙성시켜 씨드층을 확립하였다. 20psig 압력을 유지시키면서 배치를 8시간에 걸쳐 64 내지 66℃로; 4시간에 걸쳐 59 내지 61℃로; 4시간에 걸쳐 49 내지 51℃로; 이어서 6시간에 걸쳐 14 내지 16℃로 냉각시켰다. 배치를 여과하고, 케이크를 총 약 80kg의 물로 세척하였다. 배치를 최대 55℃에서 진공 건조시켰다.

실시예 4

1:1 에탄올/물 중에서 평균 입자크기가 140㎛인 거대 결정의 성장

SAHA 다형체 I 결정 7.5g 및 1:1 EtOH/물 용매 혼합물 70.7g을 씨드 제조 용기(500ml 재킷 수지 케틀)에 충전시켰다. 씨드 슬러리를 상기 실시예 2의 단계 후에 실온에서 평균 입자크기가 50㎛ 미만이 되도록 습식 분쇄시켰다. 씨드 슬러리를 63 내지 67℃로 가열하고, 30분 내지 2시간에 걸쳐 숙성시켰다.

별도의 결정화기(1L 재킷 수지 케틀)에, SAHA 다형체 I 결정 17.5g 및 1:1 EtOH/물 용매 혼합물 317.3g을 충전시켰다. 상기 결정화기를 먼저 67 내지 70℃로 가열하여 모든 고체 SAHA 결정을 용해시킨 다음, 60 내지 65℃로 냉각시켜 다소 과포화된 용액을 유지시켰다.

상기 씨드 제조 용기로부터의 씨드 슬러리를 결정화기로 옮겼다. 슬러리를 20psig 압력하에 수지 케틀내에서 실시예 3에서와 유사한 교반기 속력 범위로 혼합하였다. 배치 슬러리를 실시예 3에서의 냉각 프로파일에 따라서 50℃로 서서히 냉각시켰다. 배치 슬러리를 여과하고 50℃에서 1:1 EtOH/물 용매 혼합물로 세척하였다. 습윤한 케이크를 진공하에 40℃에서 건조시켰다. 건조된 케이크의 최종 입자크기는 약 140㎛이였으며, 95%의 입자크기는 280㎛ 미만이었다.

실시예 4A

1:1 에탄올/물 중에서 거대 결정의 성장

실시예 2A로부터의 "미세 API" 건조 케이크 21.7kg(전체의 28.6%, 0.40당량, w.r.t 기준) 및 50/50 EtOH/물 용액 213kg(3.93kg 용액/kg SAHA 기준)을 용기 #1 - 씨드 제조 탱크에 충전시켰다. SAHA 다형체 I 결정 54.2kg(전체의 71.4%, 1.00당량, 기준) 및 50/50 EtOH/물 990kg(18.24 kg 용액/kg SAHA 기준)을 용기 #2 - 결정화기에 충전시켰다. 상기 결정화기를 20 내지 25psig로 가압하고, 이 압력을 유지시키면서 내용물을 67 내지 70℃로 가열하여 결정질 SAHA를 충분히 용해시켰다. 이어서, 내용물을 61 내지 63℃로 냉각시켜 용액을 과포화시켰다. 결정화기에서의 숙성 공정 동안, 씨드 제조 탱크를 20 내지 25psig로 가압하고, 이 압력을 유지시키면서 씨드 슬러리를 64℃로 가열하고 30분 동안 숙성시켜, 고체의 약 1/2를 용해시킨 다음, 61 내지 63℃로 냉각시켰다.

고온의 씨드 슬러리를 씨드 제조 탱크로부터 결정화기(플러싱 없음)로 신속하게 옮기면서 두 용기 모두의 온도를 유지시켰다. 결정화기 내의 질소압을 20 내지 25psig로 재설정하고, 배치를 61 내지 63℃에서 2시간 동안 숙성시켰다. 배치를 26시간에 걸쳐서 5℃까지 다음 3단계로 냉각시켰다: (1) 10시간에 걸쳐서 62℃에서 55℃로; (2) 6시간에 걸쳐서 55℃에서 45℃로; 및 (3) 10시간에 걸쳐서 45℃에서 50℃로. 배치를 1시간 동안 숙성시킨 다음, 습윤한 케이크를 여과하고 물(총 3 kg/kg SAHA, 약 163kg)로 세척하고 40 내지 45℃에서 진공 건조시켰다. 당해 재결정화 공정으로부터의 건조 케이크를 "조립 API"으로서 패킹하였다. 조립 API 및 미세 API를 70/30 비로 블렌딩하였다.

결정화기 내의 SAHA 다형체 I 결정은 SAHA 8.7kg를 에탄올과 물의 9:1(v/v) 용액 72kg에 부가하여 제조할 수 있다. 하이드록실아민 하이드로클로라이드 25g를 충전시킨 다음, 수산화나트륨의 1N 수용액 350g을 충전시켰다. 수득된 슬러리를 69.5 내지 71.5℃로 가열하고 45분 동안 숙성시켜 배치를 용해시키고 O-수베르아닐산 SAHA 불순물의 수준을 감소시킨다. 배치를 2시간에 걸쳐서 4℃로 냉각시키고 0 내지 10℃에서 2시간 동안 숙성시킨다. 배치를 여과하고, 케이크를 총 약 60kg 물로 세척한다. 배치를 최대 55℃에서 건조시켜 보리노스태트 8.0kg을 제조한다.

실시예 5

습식-분쇄된 소입자 배치 288의 제조

SAHA 다형체 I 결정을 에탄올 수용액(물 중의 100% 에탄올 내지 50% 에탄올, 용적 기준) 중에 50mg/g 내지 150mg/g(결정/용매 혼합물) 범위의 슬러리 농도로 현탁시켰다. SAHA의 평균 입자크기가 50㎛이고 및 95%의 입자크기가 100㎛ 미만이 될 때까지, 온도를 실온으로 유지시키면서 슬러리를 초미세 블레이드를 갖는 IKA-Works Rotor-Stator 고전단 균질화기 모델 T50을 20 내지 35m/s로 사용하여 분쇄시켰다. 습식-분쇄된 슬러리를 여과하고 실온에서 EtOH/물 용매 혼합물로 세척하였다. 이어서, 습윤한 케이크를 40℃에서 건조시켰다. 습식-분쇄된 물질의 최종 평균 입자크기는 하기하는 Microtrac 방법으로 측정한 바에 따르면 50㎛ 미만이었다.

실시예 6

거대 결정 배치 283의 성장

SAHA 다형체 I 결정 24g 및 9:1 에탄올/물 용매 혼합물 205g을 유리 교반기가 장착된 500ml 재킷 수지 케틀에 충전시켰다. 슬러리를 실시예 1의 단계 후에 입자크기가 50㎛ 미만이 되도록 실온에서 습식 분쇄시켰다. 상기 습식-분쇄된 슬러리를 65℃로 가여하여 고체의 약 85%를 용해시켰다. 가열된 슬러리를 64 내지 65℃에서 1 내지 3시간 동안 숙성시켜 약 15% 씨드층을 확립하였다. 슬러리를 100 내지 300 rpm 범위의 교반기 속력으로 혼합하였다.

이어서, 배치를 다음의 1회 가열-냉각 사이클로 20℃까지 냉각시켰다: 2시간 내에 65℃로부터 55℃까지, 1시간 동안 55℃, 약 30분에 걸쳐서 55℃로부터 65℃까지, 65℃에서 1시간 동안 숙성, 5시간 내에 65℃로부터 40℃까지, 4시간 내에 40℃로부터 30℃까지, 6시간에 걸쳐서 30℃로부터 20℃까지. 냉각된 배치를 20℃에서 1시간 동안 숙성시켰다. 배치 슬러리를 여과하고 20℃에서 9:1 EtOH/물 용매 혼합물로 세척하였다. 습윤한 케이크를 진공하에 40℃에서 건조시켰다. 건조 케이크의 최종 입자크기는 Microtrac 방법에 따라 약 150㎛였으며, 95%의 입자크기는 300㎛ 미만이었다.

실시예 7

X-선 분말 회절 분석

X-선 분말 회절 분석을 실시예 1 내지 6에 따라 수득된 SAHA I형 및 하기 표 2에 상세히 기술한 방법으로 제조한 SAHA II형 내지 V형에 대해 수행하였다.

X-선 분말 회절
SAHA 샘플	참조문헌	방법
SAHA I형	-	실시예 1 내지 6
SAHA II형	미국 특허 제5,369,108호 컬럼 25 내지 26 공정 A, C, D	SAHA를 EtOAc/THF(3/1)에 용해시켰다. 용액을 EtOAc/THF(3/1)을 사용하여 실리카 겔의 플러그를 통해서 통과시켰다. 분획을 수거하고 농축시켰다. 고체는 핑크색으로 나타났다.
SAHA III형	미국 특허 제5,369,108호 컬럼 25 내지 26 공정 B	SAHA를 메탄올에 용해시키고, 셀라이트를 통해 여과하고 회전 증발기상에서 농축 건조시켰다. 잔사를 헥산으로 슬러리화시키고 여과하였다. 고체는 핑크색으로 나타났다.
SAHA IV형	Mai et al OPPI Briefs (2001)Vol 33(4), 391-394	SAHA를 아세토니트릴로부터 재결정화시켰다.
SAHA V형	Stowell et al J. Med. Chem. (1995), 38(8), 1411-1413	무수 메탄올(15ml) 중의 SAHA(4.0g)의 혼합물에 NaOMe(10.7mL, 4.37M, 47mmol)을 부가하였다. 용액은 균질해졌지만, 약 5분 후에 고체가 형성되었다. 혼합물을 15분 동안 교반한 다음, 물 100ml을 부가한 다음, 빙초산(3.77mL, 4.0g)을 서서히 부가하였다. 결정질 고체를 수거하고 물(2×75mL)로 세척하였다. 고체를 고진공하에 밤새 건조시켜 회백색 고체 3.85g(96% 회수율)을 수득하였다.

X-선 회절 분석:

샘플을 제조업자의 지침에 따라서 문헌[Standard Operating Procedure EQ-27, Rev. 12]에 따라 작동하는 Siemens D500 자동화 분말 회절기(장치 번호 LD-301-4)에서 분석하였다. 회절기에는 5OkV, 40mA에서 작동하는 흑연 단색화장치 및 Cu(λ=1.54A) X-선원이 장착되어 있다. NBS mica 표준(SRM675)을 사용하여 2θ보정을 실시한다. 샘플을 다음의 장치 매개변수를 사용하여 분석하였다:

측정범위: 4 내지 40 2θ

단계 폭: 0.05Å

단계당 측정 시간: 1.2초

샘플 제조를 제조업자의 지침에 따라서 문헌[Standard Operating Procedure EQ-27, Rev. 12(Section 3.1.2)]에 따라 0 배경값 샘플 플레이트(#1)를 사용하여 수행하였다. 샘플을 광 몰타르에 따라 가공하고 막자로 분쇄하여 균질성을 보장하였다.

도 7a 내지 7E에는 SAHA I형 내지 V형에 대한 X-선 회절패턴이 도시되어 있다. X-선 회절패턴에 대한 상응하는 데이타는 하기 표 3 내지 7에 제시되어 있다:

SAHA I형의 X-선 분말 회절 패턴을 또한 구리 Kα방사선(파장 1.542Å)과 X'PERT Pro Phillips X-선 회절기를 이용하여 수집하였다. 우세한 2θ 위치와 함께 d-면간거리(d-spacing)가 표 3a에 요약되어 있다.

실시예 8

융점 분석

융점 분석을 SAHA I형 내지 V형에 대해 수행하였다.

실시예 9

시차주사 열량측정 분석

시차주사 열량측정(DSC) 분석을 SAHA I형 내지 V형에 대해 수행하였다.

장비:

사용되는 표준 알루미늄 DSC 샘플 팬 및 커버는 Perkin Elmer(Part #0219-0041 또는 등가물)이었다.

사용되는 샘플 팬 크림퍼 부속(Sample Pan Crimper Accessory)은 Perkin Elmer 표준 알루미늄 팬 크림퍼 또는 등가물이었다.

사용되는 시차주사 열량측정기는 Perkin Elmer DSC 6 또는 등가물이었다.

사용되는 미량천칭(Micro Balance)은 Perkin Elmer AD-4 Autobalance 또는 등가물이었다.

소프트웨어 - Pyris 또는 기타 적합한 열 분석 소프트웨어.

시차주사 열량측정 조건:

퍼징 가스: 질소(약 20mL/분)

냉각제: 수돗물

오븐 온도 프로그램: 50℃로부터 관찰된 융점보다 30℃ 이상 높은 온도까지 10.0℃/분으로 가열

데이타 해석:

피크 온도 및 용융 개시 온도를 측정하였다. 피크 모양을 하나 이상의 용융 온도가 발생하는 모든 경우마다 관찰하였다.

다수의 샘플의 결과는 표 9에 요약되어 있다.

가열 속도, 즉 DSC 분석이 실시되는 주사 속도에 따라서, 사용되는 보정 표준, 장치 보정법, 상대습도가 달라질 수 있으며, 화학적 순도에 따라서, 분석된 각각의 SAHA의 흡열반응이 달라질 수 있다. 어떠한 소정의 샘플의 경우라도, 관찰된 흡열반응은 장치마다 상이할 수 있지만, 장치가 유사하게 보정되는 한 이는 일반적으로 본원에서 정의되는 범위 내에 있을 것이다.

실시예 10

컴퓨터 모의실험 모델의 개발

모델 개발 과정

캡슐화 동안, SAHA 결정은 탬핑 핀의 압력으로 인해 파괴된다. SAHA 용해 및 파괴 모델링의 제1 부분은 용해 및 파괴 모델의 개발이었다. 두 모델 모두를 파괴 및 파괴된 결정의 후속적 용해의 보정, 및 상이한 배치에 대한 모델 매개변수의 평가 및 최적화를 위해 조합하였다.

개발 과정은 하기와 같이 요약될 수 있다. 먼저, 캡슐화 전의 SAHA I형 결정의 입자크기 분포(PSD) 및 용해 프로파일을 측정하였다. 다분산 분말의 용해에 대한 모델을, 다분산 분말 및 결정에 대한 고유 용해 저항[32, 33] 및 막저항[34]을 조합하여 개발하였다. 용해 모델 매개변수에는 고유 용해 상수 및 비-구면 결정의 형상 인자가 포함된다. 모델 용액을 SAHA I형 결정의 실험적 용해 프로파일에 핏팅(fitting)시켜 용해 모델의 매개변수를 평가하였다.

SAHA 결정과 부형제의 캡슐화를 수행하였다. 당해 캡슐 내용물의 밀도를 각 실험 조건마다 평가하였다. 캡슐로부터 SAHA의 용해 프로파일을 측정하였다. 캡슐화 전의 SAHA 결정의 용해와 비교하여 용해의 가속화가 관찰되었다. 용해의 가속화는 캡슐화 동안 당해 결정의 파괴를 확인시켜 준다.

캡슐화 동안의 SAHA 결정의 파괴 모델을 개발하였다[35, 36]. 파괴 모델 매개변수에는 파괴율 상수 및 파괴율 지수가 포함된다. 파괴 모델을, 파괴율 상수와 파괴율 지수의 조합을 가정하여 캡슐화 동안 파괴 후의 PSD의 계산을 위해 사용하였다. 용해 모델을 사용하여 계산된 PSD를 갖는 파괴된 결정의 용해 프로파일을 계산하였다. 컴퓨터화된 SAHA 용해 프로파일을 캡슐마다 실험적 SAHA 용해 프로파일과 비교하였다. 최적의 핏이 발견될 때까지, 본 단락의 과정을 파괴율 상수와 파괴율 지수의 상이한 조합마다 반복하였다. 상이한 PSD를 갖는 SAHA의 상이한 배치와 상이한 캡슐화 조건에 대해서도 당해 과정을 반복하였다.

상이한 PSD를 갖는 모든 배치의 용해를 만족스럽게 기술할 수 있는 최적의 용해 모델 매개변수가 발견되었다. 당해 매개변수를 캡슐화 전과 후의 SAHA 결정 모두의 용해 예측을 위해 사용하였다. 최적의 파괴율 지수가 발견되었으며 이는 모든 배치의 파괴 모델에서 사용될 수 있었다.

각 배치 및 각 캡슐화 조건에 대한 최적의 파괴율 상수는 소정의 캡슐화 조건에서의 캡슐화 밀도와 상관관계가 있었다. 도 11에 예시한 모든 해당 캡슐화 조건 및 배치에 있어, 증가하는 캡슐화 밀도 및 파괴율 상수 간에 거의 선형의 의존성이 발견되었다.

예측 과정

파괴 및 용해 모델 개발 및 당해 모델 매개변수 최적화 후에, 조합된 파괴 및 용해 모델을 신규 SAHA 배치 및 캡슐화 조건의 최적화를 위해 사용할 수 있었다. 필요한 정보는 오직 신규 배치의 PSD이다.

예측 과정은 다음과 같이 요약될 수 있다. 먼저, 캡슐화 전의 신규 배치의 PSD를 측정하고, 캡슐 밀도를 가정하였다. 캡슐 밀도와 파괴율 상수 간의 상관관계를 파괴율 상수의 계산을 위해 사용하였다.

컴퓨터화된 파괴율 상수와 함께 최적의 파괴율 지수를 파괴 모델에 도입시켜, 캡슐화 동안의 파괴를 모사하고, 캡슐화 후의 파괴된 결정의 신규 PSD를 컴퓨터화하였다.

신규 PSD를 용해 모델에 도입시키고, 캡슐로부터의 SAHA 용해 프로파일을 모사하였다. 모사된 용해 프로파일을 표적 참조 프로파일과 비교하였다. 모사된 프로파일과 표적 간의 최상의 핏이 발견될 때까지 당해 과정을 신규 캡슐 밀도에 대해 반복하였다. 최적의 캡슐 밀도는 직접적으로 최적의 캡슐화 조건을 결정한다.

실시예 11

SAHA 결정의 블렌딩

상기한 예측 과정은 상이한 결정화 배치의 블렌딩 비를 측정하여 참조물의 용해 프로파일과 유사한 용해 프로파일을 수득하기 위해 사용될 수 있다.

거대 결정 배치 283과 습식-분쇄된 결정 배치 288의 블렌딩 비의 최적화

수학적 모델을 거대 결정 배치 283과 습식-분쇄된 결정 배치 288의 최적의 블렌드의 예측을 위해 사용하였다. 먼저, 목표는 소정의 조건(캡슐 밀도)에서 제조된 캡슐에 대한 최적의 블렌드를 찾아낸 다음, 상이한 캡슐화 조건에 대한 가장 확실한(robust) 블렌드를 찾아내는 것이다. 최적화의 예는 캡슐 밀도 =0.8에 대해 도 8에 도시되어 있다. 상이한 캡슐 밀도에 대해 예측된 F2 값의 의존성은 도 9에 도시되어 있다. 도 9는 예측된 F2 시험값이 캡슐 밀도가 감소함에 따라 증가함을 보여준다(캡슐 밀도의 감소는 파괴 정도를 감소시킨다). 습식-분쇄된 결정은 캡슐화 과정 동안 거의 파괴되지 않는 것으로 나타났다. 가장 확실한 블렌드 조성(상이한 조건에서 제조된 캡슐들 간의 최저 F2 변화)은 30%의 배치 288 결정과 70%의 배치 283 결정을 함유하였다.

30%의 배치 288 결정과 70%의 배치 283 결정을 함유하는 블렌드로부터 제조된 캡슐에 대한 실험적 용해 곡선은 도 10에 제시되어 있다.

결정화 배치의 블렌딩

유사한 컴퓨터 모의 과정을 상이한 결정화 배치로부터의 SAHA 결정의 블렌딩을 위해 사용할 수 있다. 상이한 배치 결정의 입자크기에 따라서 각 배치의 파괴 상수를 고려할 수 있다. 상기한 컴퓨터 모의 과정을 사용하여, 21.2%의 배치 1002DRW, 18.0%의 배치 1008D, 34.4%의 배치 1002E, 10.0%의 배치 1004E 및 16.4%의 배치 1006D를 블렌딩하여 캡슐 롯트 0683_007A001을 제조하였다.

배치 1001E 및 배치 1003E SAHA 다형체 I 결정을 컴퓨터 모의 과정의 도움없이 블렌딩하고, 2:1의 비로 블렌딩하여 캡슐 롯트 6001.004를 제조하였다.

실시예 12

SAHA 결정의 분말 블렌딩

분말 블렌딩

블렌딩된 SAHA 다형체 I 결정 25.0kg을 먼저 30 메쉬 스크린(600㎛)을 통해 체질하였다. 이어서, 수득된 SAHA, 11.1kg의 미정질 셀룰로스(Avicel PH-101) 및 1.13kg의 크로스카멜로스 나트륨을 141.6L V-블렌더, 113L 토트 블렌더(Tote blender) 또는 다른 유사한 크기 및 유형의 블렌더에 부하하였다. V-블렌더의 경우, 수득된 물질을 균질해질 때까지 약 8분 동안 약 25rpm으로 혼합하였다. 토트 블렌더의 경우, 수득된 물질을 균질해질 때까지 약 17분 동안 약 12rpm으로 혼합하였다.

분말 블렌드 윤활

마그네슘 스테아레이트(식물용 등급) 293.0g을 30 메쉬 스크린(600㎛)을 통해 체질하고, 블렌딩된 분말 혼합물과 함께 V-블렌더에 부하하였다. 수득된 혼합물을 균질해질 때까지 약 8분 동안 약 25rpm으로 혼합하였다. 또한, 마그네슘 스테아레이트(식물용 등급) 293.0g을 60 메쉬 스크린(250㎛)을 통해 체질하고, 블렌딩된 분말 혼합물과 함께 토트 블렌더에 부하하였다. 수득된 혼합물을 균질해질 때까지 약 17분 동안 약 12rpm으로 혼합하였다.

표 10은 캡슐내 원료의 물리적 특성을 요약한 것이다.

원료의 물리적 및 화학적 특성
원료	물리적 특성	값
수베로일아닐리드 하이드록삼산(SAHA)- 분쇄된 결정 및 거대 결정	융점(DSC) 용해도: 물중 메탄올중 에탄올중 2% CIP 100 수용액 2% SD-20 수용액	161 내지 163℃ <0.1mg/ml 42mg/ml 0.1mg/ml 11.3mg/ml 0.085mg/ml
미정질 셀룰로스(Avicel PH-101) NF, Ph. Eur., JP(FMC BioPolymer)	명목 평균 입자크기 함수량 벌크 밀도	50㎛ ≤5% 0.26 내지 0.31g/cc
크로스카멜로스 나트륨 NF, Ph. Eur., JP(FMC BioPolymer)	벌크 밀도 충진밀도 입자크기 분포	0.48g/cc 0.67g/cc 메쉬 번호 200(75㎛)상에 보유된 ≤2중량% 메쉬 번호 325(45㎛)상에 보유된 ≤10중량%
마그네슘 스테아레이트(식물용 등급)NF, Ph. Eur., JP	벌크 밀도 입자크기 분포 비표면적	0.16g/cc 메쉬 번호 200(75㎛)상에 보유된 ≤2중량% 4.2±0.04m²/g

실시예 13

SAHA 캡슐의 캡슐화

캡슐화/중량 분류

윤활된 분말 혼합물을 H&K 캡슐화기, 연마된 탬핑 핀 또는 질화크롬 피복된 탬핑 핀 및 크기 "3" 캡슐을 사용하여 목적하는 캡슐 중량으로 캡슐화시켰다. 충전된 캡슐을 캡슐 연마기를 사용하여 연마하고 이어서 중량 분류기를 사용하여 적절한 중량 한계 범위로 중량 분류하였다. 표 11은 캡슐화기 설정치를 요약한 것이다.

캡슐화기 조작 설정치의 요약
용량투입 디스크	10.0 내지 12.7mm
탬핑 핀/스테이션	3 또는 12
탬핑 핀 유형	연마된 비피복된 또는 질화크롬 피복된
진공	실시
캡슐화기 속력	150 내지 270개 캡슐/분 또는 750 내지 1000개 캡슐/분

최종 SAHA 캡슐 조성은 표 12에 예시한다. 캡슐은 ±10% 표적 캡슐 중량의 캡슐 중량 편차에 대한 허용 한계치를 사용하여 중량 분류한다. 전형적 배치에서의 캡슐 중량 편차는 표적 캡슐 중량의 ±4%이다.

SAHA 캡슐 조성
성분	단위 중량(mg)	중량(%)
수베로일아닐리드 하이드록삼산(SAHA)- 분쇄됨	X	Y
수베로일아닐리드 하이드록삼산(SAHA)- 거대	100.0-x	66.67-y
미정질 셀룰로스(Avicel PH-101) NF, Ph. Eur., JP	44.33	29.80
크로스카멜로스 나트륨 NF, Ph. Eur., JP	4.500	3.00
마그네슘 스테아레이트(식물용 등급)NF, Ph. Eur., JP	1.170	0.78
경질 젤라틴 캡슐, 크기 "3" 코니스냅(Conisnap), 백색 불투명/백색 불투명^*	49.00	N/A
전체^**	150.0	100.00
* 시판 캡슐 잉크 제형은 Colorcon S-1-17762이다. TSE-비함유 젤라틴 캡슐. ** 전체 중량은 경질 젤라틴 캡슐 외피를 포함하지 않는다.

실시예 14

SAHA 캡슐의 용해 측정

경질 젤라틴 캡슐로부터 SAHA의 용해율을 USP 용해 장치 II(VK 7000, Varian Inc., Gary, NC)을 사용하여 평가하였다. 각 캡슐을 나선형 싱커(Quality Lab Accessories L.L.C., Manville, NJ)에 위치시키고 37±0.5℃의 온도에서 900mL의 2.0% Tween(TCI America, Portland, Oregon)을 함유하는 용기로 전달시켰다. 패들을 100rpm으로 회전시키고, 샘플을 35㎛ 전류식 필터(Varian Inc., Gary, NC)가 장착된 자동시료주입기(VK 8000, Varian Inc., Cary, NC)를 통해서 명시된 시간 간격으로 잡아당겼다.

이어서, 샘플을 고성능 액체 크로마토그래피(Agilent 1100 시리즈, Agilent Technologies Inc., Wilmington, DE)를 사용하여 SAHA에 대해 검정하였다. 크로마토그래피 분석은 Phenomenex Luna C8(2)(100 x 4.6mm) 5㎛ 입자크기 컬럼, 1:1 메탄올/0.1% 트리플루오로아세트산(Reagent Grade, Fisher)의 이동상 및 242nm의 검출파장을 사용하여 수행하였다.

부형제, 캡슐 외피 및 수분은 SAHA 캡슐 내용물의 용해에 거의 효과를 미치지 않는 것으로 나타났다. 그러나, SAHA의 입자크기 분포는 용해율에 영향을 주었다.

캡슐 내용물로부터 SAHA의 용해율 프로파일은 표 13 및 14 및 도 5에 예시한다. 참조용 캡슐 롯트 0683_004A001로부터의 SAHA의 용해율 프로파일은 도 1에 예시한다. 다양한 캡슐 배치로부터의 SAHA의 F2 인자는 참조로서 캡슐 롯트 0683_004A001을 사용하여 계산하였다.

실시예 15

SAHA API의 용해율의 측정

캡슐화 전의 SAHA API 100mg의 용해율을 USP 용해 장치 II(VK 7000, Varian Inc., Gary, NC)를 사용하여 평가하였다. SAHA 약 100mg을 37±0.5℃의 온도에서 900mL의 2.0% Tween (TCI America, Portland, Oregon)을 함유하는 용기로 전달하였다. 패들을 100rpm으로 회전시키고, 샘플을 35㎛ 전류식 필터(Varian Inc., Gary, NC)가 장착된 자동시료주입기(VK 8000, Varian Inc., Cary, NC)를 통해서 명시된 시간 간격으로 잡아당겼다.

SAHA API 배치의 용해율 프로파일은 표 15 및 도 6에 예시한다.

실시예 16

입자크기 분포의 측정

블렌딩된 SAHA 결정(Active Pharmaceutical Ingredient: API), 윤활된 제형 블렌드 및 캡슐 내용물의 입자크기를 RODOS 분말 분산 시스템이 장착된 Sympatec 레이저 회절 분석기(HELOS H 1006, Clausthal-Zellerfeld, Germany)을 통해 측정하였다.

샘플 약 150mg을 상기 시스템으로 수동으로 전달시키고 0.1bar 기압을 사용하여 레이저 빔을 통해 분사하였다. 표적화된 엄폐 범위가 5 내지 20%인 850 또는 1750-㎛의 초점 길이 렌즈를 사용하여 데이타를 수집하였다. 프라운호퍼 광학 모델을 사용하여 샘플 산란 패턴을 역승적하여, 생성된 입자크기 분포를 산출하였다.

SAHA 캡슐 내용물의 입자크기 분포는 표 16 및 도 3에 예시한다. 캡슐화 전의 SAHA API 배치의 입자크기 분포는 표 17 및 도 4에 예시한다. API 288(30% 습식-분쇄된) 및 API 283(70% 거대 결정)의 블렌드를 사용하여 제조한 SAHA 캡슐의 입자크기 분포는 표 18에 예시한다. 습식-분쇄된 결정과 거대 결정의 상이한 블렌드를 사용하여 제조한 캡슐로부터의 SAHA의 표준화된 입자크기 분포는 표 19 및 도 12에 예시한다. 30% 습식-분쇄된 결정과 70% 거대 결정을 사용하여 제조한 롯트 C0666001 SAHA 캡슐의 입자크기 분포는 표 20 및 도 13에 예시한다. 30% 습식-분쇄된 결정과 70% 거대 결정을 사용하여 제조한 롯트 C0667001 SAHA 캡슐의 입자크기 분포는 표 21 및 도 14에 예시한다.

실시예 17

환자 연구

진행기 암 환자에서 수행된 당해 I기 연구로, 400mg으로 매일 투여된 경구 보리노스태트의 안정성 및 허용성, 단일 투여량 및 다중 투여량 보리노스태트의 혈청 약동학(PK), 및 단일-투여량 보리노스태트 PK에 대한 표준 고지방식의 효과를 평가하였다. 환자에게 1일째(절식) 및 5일째(표준 고지방식 후)에 400mg 보리노스태트의 단일 투여량을 투여하였으며, 여기서 두 날 모두에서 투여후 PK 샘플링을 48시간 동안 수행하였다. 이어서, 환자에게 7일째부터 28일째까지(22일간 투여) 1일 1회 400mg 보리노스태트를 투여하였다. 28일째에, 보리노스태트는 표준 고지방식 후에 투여하였으며 투여 후 24시간 동안 PK 샘플링을 수행하였다. 참여한 23명의 환자 중 23명을 1일째 PK에 대해 평가하고, 20명을 5일째 PK에 대해 평가하고, 14명을 28일째 PK에 대해 평가하였다. 보리노스태트의 외견적 t_1/2는 짧았다. 고지방식은 흡수 정도의 소폭 증가 및 보리노스태트 흡수율의 중간정도 감소와 관련되었다. 보리노스태트의 검출가능한 수준이 대부분의 피험체의 식후 상태에서 혈청 중에서 관찰되기 전에 15분 이상의 지체시간(lag time)이 관찰되었으며, T_max는 지연되었다. 보리노스태트의 다중 투여량 투여 후의 혈청 농도 시간 프로파일은 단일 투여량 투여 후의 것과 유사하였다. 다중 투여량 투여 후의 전반적 농도는 일반적으로 정량 한계치 이하였으며, 이는 짧은 외견적 최종 t_1/2와 부합된다. 결론지으면, 진행기 암 환자에 대한 보리노스태트의 단시간 투여는 일반적으로 잘 허용되었다. 보리노스태트는 고지방식과 함께 투여된 경우에 단일 투여량 및 다중 투여량 투여 간에 유사한 짧은 t_1/2 혈청 농도 시간 프로파일 및 다소 감소된 흡수율을 나타냈다.

본 발명을 이의 양태를 참조로 하여 상세히 제시하고 기술하였지만, 당업자라면 기술한 본 발명의 의미로부터 벗어남이 없이 형태 및 상세사항의 변화가 이루어질 수 있음을 이해할 것이다. 게다가, 본 발명의 범주는 하기의 청구의 범위로 정의된다.

참조문헌

도 1은 참조 캡슐 롯트 0683_004A001로부터의 SAHA의 용해 프로파일을 도시한 것이다. 당해 캡슐은 약 100mg의 활성 성분 SAHA 및 부형제를 함유한다.

도 2는 캡슐화 전의 참조 SAHA API 배치(batch) 1007D(블렌딩된 SAHA 결정)의 용해 프로파일을 도시한 것이다. 용해 프로파일은 SAHA 약 100mg에 기초하여 측정되었다.

도 3은 본 발명의 약제학적 캡슐의 캡슐 내용물의 입자크기 분포를 도시한 것이다. 당해 캡슐은 약 100mg의 활성 성분 SAHA 및 부형제를 함유한다.

도 4는 캡슐화 전의 상이한 배치(API)로부터의 활성 성분 SAHA의 입자크기 분포를 도시한 것이다.

도 5는 본 발명의 약제학적 캡슐로부터의 SAHA의 용해 프로파일을 도시한 것이다. 당해 캡슐은 활성 성분 SAHA 약 100mg 및 부형제를 함유한다.

도 6은 캡슐화 전의 SAHA API 배치(블렌딩된 SAHA 결정)의 용해 프로파일을 도시한 것이다. 용해 프로파일은 SAHA 약 100mg에 기초하여 측정되었다.

도 7은 SAHA의 x-선 회절패턴을 도시한 것이다. 도 7a 내지 7E는 SAHA I형 내지 V형의 x-선 회절패턴을 도시한 것이다.

도 8은 참조 샘플(표적), 캡슐 288 및 캡슐 283에 대한 컴퓨터 모델로 예측된 용해 프로파일(곡선) 및 실험적 용해 프로파일(점, 삼각형 및 사각형으로 표시)을 도시한 것이다.

도 9는 상이한 캡슐 밀도에 대한 API 283과의 블렌드 중의 API 288의 분율과 관련된 f2 값을 도시한 것이다.

도 10은 30% 습식-분쇄된 API 288 및 70% 비분쇄된 API 283을 블렌딩하여 제조한 캡슐에서의 SAHA 용해에 대한 캡슐화 조건의 영향을 도시한 것이다.

도 11은 파괴율 상수와 캡슐 내용물의 밀도 간의 상관관계를 도시한 것이다.

도 12는 SAHA 캡슐의 상이한 배치로부터의 활성 성분(API)의 표준화된 입자크기 분포를 도시한 것이다.

도 13은 롯트 C0666001로부터의 캡슐 내용물의 입자크기 분포를 도시한 것이다.

도 14는 롯트 C0667001로부터의 캡슐 내용물의 입자크기 분포를 도시한 것이다.

도 15는 절식 상태에서 단일 경구 투여량을 투여한 후와, 고지방식 후 단일 경구 투여량을 투여한 후의 보리노스태트의 평균 혈청 농도를 도시한 것이다.

도 16은 고지방식 후의 400mg 단일 또는 다중 경구 투여량을 투여한 후에 보리노스태트의 평균 혈청 농도를 도시한 것이다.

Claims

고형의 활성 성분으로서 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물을 포함하고, 입자 크기가 105㎛ 미만인 활성 성분의 용적%가 45 내지 85%이며 입자 크기가 105㎛ 이상인 활성 성분의 용적%가 55 내지 15%인, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
고형의 활성 성분으로서 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물을 포함하고, 입자크기가 105㎛ 미만인 활성 성분의 용적%가 45 내지 85%이고 입자크기가 105㎛ 이상인 활성 성분의 용적%가 55 내지 15%이며, 활성 성분 90 내지 110mg이, 시험관내에서 10분에 52.7% 용해되고, 15분에 61.7% 용해되고, 20분에 67.7% 용해되고, 30분에 75.5% 용해되고, 45분에 82.6% 용해되고, 60분에 87.0% 용해되는 참조 용해 프로파일과 비교하여, 유사성 인자(similarity factor)(f2)가 적어도 56 내지 100인 시험관내 용해 프로파일을 가지며, 당해 용해 프로파일은 37±0.5℃의 온도에서 2.0% 트윈(Tween) 900ml 속에서 측정되고, 참조물은 수베로일아닐리드 하이드록삼산 100mg, 미정질 셀룰로스 44.33mg, 크로스카멜로스 나트륨 4.5mg 및 마그네슘 스테아레이트 1.17mg을 포함하고 하기 표에 기재한 바와 같은 입자 크기 분포를 갖는 젤라틴 캡슐인, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
고형의 활성 성분으로서 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물을 포함하고, 입자크기가 105㎛ 미만인 활성 성분의 용적%가 45 내지 85%이고 입자크기가 105㎛ 이상인 활성 성분의 용적%가 55 내지 15%이며, 활성 성분 90 내지 110mg이 시험관내에서 10분에 46 내지 60% 용해되고, 15분에 55 내지 69% 용해되고, 20분에 61 내지 75% 용해되고, 30분에 69 내지 83% 용해되고, 45분에 76 내지 90% 용해되고, 60분에 80 내지 94% 용해됨을 특징으로 하는 시험관내 용해 프로파일을 가지며, 당해 용해 프로파일은 37±0.5℃의 온도에서 2.0% 트윈 900ml 속에서 측정되는, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
고형의 활성 성분으로서 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물을 포함하고, 입자크기가 105㎛ 미만인 활성 성분의 용적%가 45 내지 85%이고 입자크기가 105㎛ 이상인 활성 성분의 용적%가 55 내지 15%이며, 활성 성분 90 내지 110mg이 시험관내에서 10분에 46 내지 60% 용해되고, 15분에 55 내지 69% 용해되고, 20분에 61 내지 75% 용해되고, 30분에 69 내지 83% 용해되고, 45분에 76 내지 90% 용해되고, 60분에 80 내지 94% 용해됨을 특징으로 하는 시험관내 용해 프로파일을 갖고, 당해 용해 프로파일은 37±0.5℃의 온도에서 2.0% 트윈 900ml 속에서 측정되고, 활성 성분은 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산을 포함하고 구리 X선 공급원을 사용하여 9.4, 17.5, 19.4, 20.0, 24.0 및 28.0°2θ에서의 특징적 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 하는, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
고형의 활성 성분으로서 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물을 포함하고, 입자 크기가 20 내지 25㎛인 활성 성분의 용적%가 1.0 내지 4%이며 입자 크기가 35 내지 40㎛인 활성 성분의 용적%가 3.0 내지 7%인, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
고형의 활성 성분으로서 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물을 포함하고, 입자 크기가 20 내지 25㎛인 활성 성분의 용적%가 1.0 내지 4%이고 입자 크기가 35 내지 40㎛인 활성 성분의 용적%가 3.0 내지 7%인 입자 크기 분포 곡선을 포함하며, 활성 성분 90 내지 110mg이, 시험관내에서 10분에 52.7% 용해되고, 15분에 61.7% 용해되고, 20분에 67.7% 용해되고, 30분에 75.5% 용해되고, 45분에 82.6% 용해되고, 60분에 87.0% 용해되는 참조 용해 프로파일과 비교하여, 유사성 인자(similarity factor)(f2)가 적어도 56 내지 100인 시험관내 용해 프로파일을 가지며, 당해 용해 프로파일은 37±0.5℃의 온도에서 2.0% 트윈(Tween) 900ml 속에서 측정되고, 참조물은 수베로일아닐리드 하이드록삼산 100mg, 미정질 셀룰로스 44.33mg, 크로스카멜로스 나트륨 4.5mg 및 마그네슘 스테아레이트 1.17mg을 포함하고 하기 표에 기재한 바와 같은 입자 크기 분포를 갖는 젤라틴 캡슐인, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
고형의 활성 성분으로서 수베로일아닐리드 하이드록삼산 또는 약제학적으로 허용되는 이의 염 또는 수화물을 포함하고, 입자 크기가 20 내지 25㎛인 활성 성분의 용적%가 1.0 내지 4%이고 입자 크기가 35 내지 40㎛인 활성 성분의 용적%가 3.0 내지 7%인 입자 크기 분포 곡선을 포함하며, 활성 성분 90 내지 110mg이 시험관내에서 10분에 46 내지 60% 용해되고, 15분에 55 내지 69% 용해되고, 20분에 61 내지 75% 용해되고, 30분에 69 내지 83% 용해되고, 45분에 76 내지 90% 용해되고, 60분에 80 내지 94% 용해되는 시험관내 용해 프로파일을 갖고, 당해 용해 프로파일은 37±0.5℃의 온도에서 2.0% 트윈(Tween) 900ml 속에서 측정되는, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
제1항 내지 제7항 중의 어느 한 항에 있어서, 활성 성분의 양이 90 내지 110mg인 단일 캡슐인, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
제1항 내지 제7항 중의 어느 한 항에 있어서, 각각의 캡슐내 활성 성분의 양이 45 내지 55mg인 2개의 캡슐인, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
제2항 또는 제6항에 있어서, f2가 60 내지 100인, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
제2항 또는 제6항에 있어서, f2가 70 내지 100인, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
제1항 또는 제5항에 있어서, 활성 성분이 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산인, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
제1항 또는 제5항에 있어서, 활성 성분이 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산이고, 구리 X선 공급원을 사용하여 9.4, 17.5, 19.4, 20.0, 24.0 및 28.0°2θ에서의 특징적 피크를 포함하고 13.4-14.0 및 22.7-23.0°2θ에서의 피크가 결여된 X-선 회절 패턴을 특징으로 하는, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
제1항 또는 제5항에 있어서, 활성 성분이 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산이고, 구리 X선 공급원을 사용하여 9.0, 9.4, 17.5, 19.4, 20.0, 24.0, 24.4, 24.8, 25.0 및 28.0°2θ에서의 특징적 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 하는, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
제1항 또는 제5항에 있어서, 활성 성분이 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산이고, 구리 X선 공급원을 사용하여 9.4, 17.5, 19.4, 20.0, 24.0 및 28.0°2θ에서의 특징적 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 하는, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
제1항 또는 제5항에 있어서, 활성 성분이 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산이고, 구리 X선 공급원을 사용하여 9.1, 10.8, 12.3, 17.2, 19.2, 19.8, 23.7, 24.1, 25.7, 26.8 및 27.7°2θ에서의 특징적 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 하는, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
제1항 또는 제5항에 있어서, 활성 성분이 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산이고, 구리 X선 공급원을 사용하여 9.1, 17.2, 19.2, 19.8, 23.7 및 27.7°2θ에서의 특징적 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 하는, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
제1항 또는 제5항에 있어서, 활성 성분이 I형 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산인, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
제15항에 있어서, X선 회절 패턴이 Siemans D500 자동화 분말 회절기(장치 번호 LD-301-4)로 측정되는, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
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제2항, 제3항, 제4항, 제6항 및 제7항 중의 어느 한 항에 있어서, 활성 성분이 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산인, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
제2항, 제3항, 제4항, 제6항 및 제7항 중의 어느 한 항에 있어서, 활성 성분이 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산이고, 구리 X선 공급원을 사용하여 9.4, 17.5, 19.4, 20.0, 24.0 및 28.0°2θ에서의 특징적 피크를 포함하고 13.4-14.0 및 22.7-23.0°2θ에서의 피크가 결여된 X-선 회절 패턴을 특징으로 하는, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
제2항, 제3항, 제4항, 제6항 및 제7항 중의 어느 한 항에 있어서, 활성 성분이 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산이고, 구리 X선 공급원을 사용하여 9.0, 9.4, 17.5, 19.4, 20.0, 24.0, 24.4, 24.8, 25.0 및 28.0°2θ에서의 특징적 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 하는, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
제2항, 제3항, 제4항, 제6항 및 제7항 중의 어느 한 항에 있어서, 활성 성분이 결정질 수베로일아닐리드 하이드록삼산이고, 구리 X선 공급원을 사용하여 9.4, 17.5, 19.4, 20.0, 24.0 및 28.0°2θ에서의 특징적 피크를 포함하는 X-선 회절 패턴을 특징으로 하는, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.
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제2항, 제3항, 제4항, 제6항 및 제7항 중의 어느 한 항에 있어서, 활성 성분이 분말 형태인, 경구 투여용 캡슐 형태의 고형 약제학적 조성물.