KR100943983B1 - 피리피로펜 유도체 및 이를 포함하는 살충제 조성물 - Google Patents

피리피로펜 유도체 및 이를 포함하는 살충제 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트란스퍼라제의 저해활성을 갖는 새로운 피리피로펜 유도체 또는 이의 염, 및 이를 유효성분으로 포함하는 살충제에 관한 것이며, 상기 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트란스퍼라제의 저해활성을 갖는 피리피로펜 유도체 또는 이의 염은 해충의 생체 내에서 스테롤 대사를 억제하여 살충 활성이 우수하며 또한 안전성이 우수하여 환경 친화적 살충제로 사용할 수 있다.
살충제, 피리피로펜 유도체, 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트란스퍼라제

Description

피리피로펜 유도체 및 이를 포함하는 살충제 조성물{Pyripyropene derivatives and insecticidal compositions comprising them}
도 1은 본 발명의 화학식 1의 화합물의 수소핵자기공명 스펙트럼이다.
도 2는 본 발명의 화학식 2의 화합물의 수소핵자기공명 스펙트럼이다.
도 3은 본 발명의 화학식 3의 화합물의 수소핵자기공명 스펙트럼이다.
도 4은 본 발명에 의한 화학식 1 내지 3의 화합물의 ACAT저해활성 나타낸 그래프이다.
본 발명은 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트란스퍼라제(Acyl CoA:cholesterol acyltransferase)의 저해활성을 갖는 신규한 피리피로펜(pyripyropene) 유도체와 그의 염, 및 그를 유효성분으로 포함하는 살충제 조성물에 관한 것이다.
전 세계적으로 농업생산물 및 가공물, 위생곤충방제와 산림보호를 위하여 살충제의 사용이 증가되어 왔었다. 그러나, 수십 년에 걸친 고독성농약의 연용과 남용으로 인하여 해충군의 이상격발 또는 저항성 해충의 출현, 인간을 비롯한 비목적충에 대한 독성발현 및 환경오염 등 많은 부작용을 야기하게 되었다. 이에 전 세계 국가들은 인류의 건강을 위하여 독성이 강한 유기합성 농약의 생산과 사용을 자제하기로 국제적으로 합의하였다. 국제적인 협의 내용 중에서 특히 인축에 영향을 많이 미치는 유기 합성된 농약의 사용을 점차 제한하는 합의가 있었다. 국내에서도 2004년에 지난 10년 전 사용한 화학합성된 유기인계, 유기염소계 농약의 50%까지 생산사용을 감축하는 것으로 합의 되었고, 2010년까지 다시 유기인계, 유기염소계 농약의 사용을 50% 감소시키기로 합의하였다. 그러나 독성농약 감축생산 협의 이후, 현재까지 전 세계적으로 많은 연구진의 노력에도 불구하고 새로운 기작의 안전한 살충제를 개발하지 못하였으며, 가까운 장래에 안전한 살충제가 출현하지 않으면 국외뿐 아니라 국내 농업도 살충제의 부족으로 아주 큰 문제가 대두될 것으로 예상되고 있으며, 고독성의 농약의 사용을 다시 허가해야할지 모르는 중대 상황이다.
살충제의 곤충체내 침입경로에는 입, 피부 및 기문이 있으며, 체조직 내에 침입한 살충제는 작용점에 도달할 때 어떤 것은 분해되어 무독화되고, 어떤 것은 반대로 활성화되어 보다 강력한 독성을 지닌 물질로 변하여 일부는 기관에 축적되고 일부는 배출된다. 그리고 곤충체내에 약제가 도달하더라도 그 전부가 살충작용 에 관여하는 것은 아니고, 침입할 때 곤충 조직 내에서 여러 가지 저항을 받기 때문에 그 일부만이 작용부위에 도달한 후 생리 및 생화학적 기능의 변화를 일으켜 치사작용을 나타낸다. 그러므로 살충제의 작용기작을 생각할 때 살충제의 작용 장소와 그 방법, 그리고 체내에서의 유효한 살충제의 양을 지배하는 대사작용 등이 주요한 의미를 지니고 있다.
현재 사용되는 살충제는 작용 기작면에서 신경 전달 저해제, 에너지 생성 저해제, 생장조절제 및 성 페르몬 유인제로 분류할 수 있으며, 상기 생장조절제는 유약호르몬 저해제 및 키틴 생합성 저해제로 구분할 수 있다.
상기 신경 전달 저해제는 신경계를 이상자극, 흥분 또는 억제하여 곤충을 살충하는 것이다.
뉴런은 신경계 구성의 최소단위로 세포체로부터 길게 뻗어 나온 축색 말단에서 다른 뉴런의 수상돌기와 연결되는데, 이 연결부위를 시냅스(synapse)라고 한다. 신경계에서 일어나는 자극은 축색을 거쳐서 그 말단인 시냅스 전막까지 전달되며, 그 즉시 시냅스 소포체에서 방출되는 화학전달물질인 아세틸-콜린(acetyl-choline, 이하 “ACh”라 칭함)이 시냅스로 이동하여 그 다음 뉴런 전달부인 시냅스후막에 있는 수용체에 결합되고, 그 뉴런을 자극시킨다. 이와 같은 방법으로 한 뉴런에서 다음 뉴런으로 계속 신경 자극을 전달하게 된다.
시냅스 소포체에서 방출된 ACh는 시냅스 전막에서 후막으로 자극을 전달하는데 이 임무를 끝낸 즉시 ACh는 더 이상 필요하지 않으며, 이를 가수분해하는 효소 인 아세틸콜린에스테라제(acetylcholinesterase, 이하 “AChE”라 칭함)는 시냅스 후막에서 생산된다. 이 AChE는 두 가지의 활성작용을 하는데, 하나는 음이온과 에스테르 분해부위를 가지고 있고, 다른 하나는 ACh를 가수분해하는 역할을 한다.
따라서, 신경자극전달이 끝난 ACh가 시냅스 후막의 수용체에 결합이 누적되면 과격한 흥분과 경련을 일으켜서 역효과를 가져오기 때문에 ACh는 AChE에 의하여 콜린(choline)과 초산으로 분해되어 곧 시냅스 전막에 흡수된 후 시냅스 소포체에서 다시 ACh로 바뀌어 저장된다.
상기와 같은 이유로 인해, AChE의 저해작용을 나타내는 살충제는 주종인 유기인계와 카바메이트(carbamate)계가 신경화학전달물질인 ACh를 분해하는 효소인 AChE의 활성작용을 저해하고, 이로 인해 ACh가 시냅스에 축적되어 신경전달기능에 이상을 일으키게 되고 경련과 마비로 연결되어 곤충을 죽게 한다. 상기 유기인계와 카바메이트(carbamate)계 화합물은 주로 AChE의 활성부위에 작용하여 ACh의 분해작용을 저해한다고 알려져 있다.
한편, 많은 연구자들에 의하여 곤충의 생리 관련연구가 분자생물학적 방법을 통하여 대사 관련 효소나 수용체에 대한 연구가 부분적으로 밝혀지고 있으나 호르몬의 이송이나 스테롤의 저장에 관련된 연구는 많이 되어있지 않다.
곤충들은 스테롤 합성능력이 없으므로 스테롤은 필수 영양분으로 요구되며 많은 곤충들은 식물성스테롤을 콜레스테롤로 전환시켜 이용한다. 콜레스테롤은 탈피호르몬을 합성하는 데 필수적이고 세포막을 형성하는 데도 인지질과 함께 관여한 다.
한편, 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트란스퍼라제 저해제들은 인간의 고지혈증 예방과 치료에 효과가 있음이 알려져 있으며, 특히 동맥경화 발생기작에 관련되어 있는 새로운 작용기작을 갖는 고지혈증 치료제 개발의 일환으로 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트란스퍼라제 저해제의 개발이 활발히 진행되고 있다. 또한, 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트란스퍼라제는 콜레스테롤의 아실화에 관여하여 소장에서 콜레스테롤의 흡수, 간장에서 초저밀도 지단백질의 합성, 지방세포와 혈관내벽에 저장형인 아실화된 콜레스테롤의 축적에 관여하여 동맥경화 진전에도 관여하는 효소로 알려져 있어 새로운 대사기작의 고지혈증 예방치료제 개발 연구가 진행 중에 있다. 이러한 아실 코에이 콜레스테롤 아실 트란스퍼라제 저해제들은 화학합성된 우레아, 아미드, 페놀계의 합성화합물들이 주종을 이루고 있다. 그 중에서는 in vivo 활성시험을 마치고 동맥경화 예방치료제로 사용하기 위하여 전 임상 단계 시험중인 의약품 후보물질은 있으나, 아직까지 아실 코에이 콜레스테롤 아실 트란스퍼라제저해제로 임상에 사용되고 있는 것은 없다.
이에, 본 발명자는 곤충들이 스테롤을 필수적으로 요구하기 때문에 곤충들의 대사 기작 중 저장 또는 이동에 관여하는 스테롤 아실화효소를 저해함으로써 살충활성을 나타낼 수 있는 작용기작을 이용하고자, 유기화학적 방법으로 아실 코에이 콜레스테롤 아실 트란스퍼라제저해 활성물질을 합성하고 안전성이 확보된 살충활성 물질을 발명하고자 하였다.
본 발명에서는 곤충의 스테롤대사에서 저장형 스테롤 또는 각종 호르몬 생성에 중요한 역할을 하는 것으로 알려진 스테롤 아실화 효소를 새로운 개념의 목표 지향적인 탐색계로 사용하여 유기합성적인 방법으로 새로운 활성물질을 합성하였고, 본 발명의 검색계에서 활성을 평가하고, 효소저해활성을 확인한 물질들을 여러 종류의 유충에 처리한 결과 활성물질들은 유충에 대하여 생물 활성을 나타남을 확인하여 본 발명을 완성하였다.
이에 본 발명의 목적은 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트란스퍼라제의 저해활성을 갖는 피리피로펜 유도체 또는 그의 염, 및 이를 포함하는 살충제를 제공하는 것이다.
하나의 양태로서, 본 발명은 하기 화학식 1 내지 3으로 표시되는 피리피로펜 유도체 또는 그의 염에 관한 것이다.
Figure 112006054140059-pat00001
Figure 112006054140059-pat00002
Figure 112006054140059-pat00003
상기 화학식 1 내지 3의 화합물은 피리피로펜 유도체로서, 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트란스퍼라제에 저해제로 알려진 피리피로펜 A(pyripyropene A)보다 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트란스퍼라제의 저해 활성이 우수하다.
상기 화학식 1 내지 3으로 표시되는 화합물은 염의 형태로 존재할 수 있다. 상기 염은 염산 또는 황산과 같은 무기산, 또는 p-톨루엔술폰산과 같은 유기산의 농화학적으로 허용가능한 염을 포함할 수 있다.
하나의 구체적 양태로서, 상기 화학식 1 내지 3의 화합물은 하기 반응식 1과 같은 방법에 따라 제조될 수 있다.
그러나, 하기 반응식 1에 따른 방법은 화학식 1 내지 3의 피리피로펜 유도체의 제조방법의 일례에 해당하며, 예를 들어 반응용매, 염기, 반응물질의 사용량과 같은 반응 조건들이 하기에 설명된 것으로만 한정되는 것은 아니다. 하기 반응식 1의 방법 이외에도 당업계의 공지문헌에 개시된 여러 가지 합성방법을 임의로 조합함으로써 상기 화학식 1 내지 3의 피리피로펜 유도체를 제조할 수 있다.
Figure 112006054140059-pat00004
상기 각 반응 또는 모든 반응이 완결된 후의 생성물은 통상적인 후처리 방법, 예를 들면 크로마토그래피, 재결정화 등의 방법에 의해 분리 및 정제할 수 있다.
다른 하나의 양태로서, 본 발명은 상기 화학식 1 내지 3의 피리피로펜 유도체 또는 그의 염을 유효성분으로 포함하는 살충제에 관한 것이다.
구체적으로, 본 발명의 살충제는 곤충들이 생육하는데 스테롤을 필수적으로 요구하며, 이들의 대사 기작 중에 관련된 스테롤의 저장, 이동 및 호르몬 활성이나 소멸에 스테롤 아실화 효소를 필수적으로 이용하는 것에 착안하여, 상기 화합물들이 대사 기작 중에 저장형이나 이동에 관여하는 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트란스퍼라제를 저해하여 살충활성을 나타냄을 하기 실시예를 통하여 확인하였다.
본 발명의 살충제는 이에 한정되는 것은 아니나, 유해 절지동물류 (예 : 유해 곤충 및 유해 진드기) 및 유해 선충류를 포함한 해충들에 대한 방제 효력을 나타낼 수 있다. 특히, 상기 해충들의 유충에 효과적이다. 또한 본 발명의 살충제는 종래 살충제에 대한 저항성이 향상된 해충을 효과적으로 방제하는데 사용될 수 있다. 본 발명의 구체적 실시예에서, 온실가루이 유충 및 배추좀나방 유충에 본 발명의 화학식 1 내지 3의 피리피로펜 유도체를 포함하는 살충제를 사용하였을 때 농도 의존적 및 시간 의존적으로 지속적인 살충효과가 있었다.
본 발명의 화합물을 살충제의 유효 성분으로 사용할 경우, 그것은 임의의 기타 성분들의 첨가없이, 그 자체로서 또는 염의 형태로 사용될 수 있다. 그러나 본 발명의 화합물은 통상 고체 담체, 액체 담체, 기체 담체 또는 유인물 (bait)과 혼합하거나, 염기성 물질, 예로 다공질 세라믹 플레이트 또는 부직포에 흡수시킨 후, 계면활성제 및 필요한 경우, 기타 보조제들을 첨가하여, 이를 각종 형태들, 예로 오일 스프레이, 유화 가능한 농축물, 습윤성 분말, 유동물, 과립, 더스트, 에어로졸, 훈연제 (예 : 포깅), 증기화 가능한 제형물, 스모킹 제형물, 독성 유인물, 진드기방지용 시이트 또는 수지 제형물로 제형할 수 있다.
상기 각 제형물들은 통상 유효 성분으로서 하나 이상의 본 화합물을 0.01 내지 95 중량 % 함유할 수 있다.
제형물에 사용될 수 있는 고체 담체에는, 카올린 점토, 규조토, 합성 수화된 산화규소, 벤토나이트, 푸바사미 점토 및 산점토 등의 점토 물질의 미세 분말 또는 과립; 각종 탈크, 세라믹 및 기타 무기 물질, 예로 견운모, 석영, 황, 활성탄, 탄산칼슘 및 수화된 실리카; 및 화학적 비료, 예로 황산암모늄, 인산암모늄, 질산암모늄, 우레아 및 염화암모늄이 포함될 수 있다.
액체 담체에는, 물; 알콜, 예로 메탄올 및 에탄올; 케톤, 예로 아세톤 및 메틸 에틸 케톤; 방향족 탄화수소, 예로 벤젠, 톨루엔, 자일렌, 에틸벤젠 및 메틸나프탈렌; 지방족 탄화수소, 예로 헥산, 시클로헥산, 케로신 및 라이트 오일; 에스테르, 예로 에틸 아세테이트 및 부틸 아세테이트; 니트릴, 예로 아세토니트릴 및 이 소부티르니트릴; 에테르, 예로 디이소프로필에테르 및 디옥산; 산 아미드, 예로 N,N-디메틸포름아미드 및 N,N-디메틸아세트아미드; 할로겐화 탄화수소, 예로 디클로로메탄, 트리클로로에탄 및 사염화탄소; 디메틸 술폭시드; 및 식물성 오일, 예로 대두유 및 면실유가 포함될 수 있다.
기체 담체 또는 추진제 (propellant)에는, 프레온 가스, 부탄 가스, LPG (액화 석유 가스), 디메틸 에테르 및 이산화탄소가 포함될 수 있다.
독성 유인물에 사용되기 위한 염기 물질에는, 유인물 물질, 예로 그레인 분말, 식물성 오일, 슈거 및 결정성 셀룰로스; 산화방지제, 예로 디부틸히드록시톨루엔 및 노르디히드로구아이아레트산; 보존제, 예로 데히드로아세트산; 비식음 방지용 물질, 예로 고추 분말; 및 유인성 풍미, 예로 치즈 풍미 및 양파 풍미가 포함될 수 있다.
계면활성제에는, 알킬 술페이트, 알킬 술포네이트, 알킬 아릴술포네이트, 알킬 아릴 에테르 및 그것의 폴리옥시에틸렌 유도체, 폴리에틸렌 글리콜 에테르, 다가 알콜 에스테르 및 당 알콜 유도체가 포함될 수 있다.
접착제 또는 분산제와 같은 보조제에는, 카세인, 젤라틴; 다당류, 예로 전분, 아라비아검, 셀룰로스 유도체 및 알긴산; 리그닌 유도체, 벤토나이트, 슈거 및 합성 수용성 중합체, 예로 폴리비닐 알콜, 폴리비닐 피롤리돈 및 폴리 아크릴산이 포함될 수 있다.
안정화제에는, PAT (이소프로필 산 포스페이트), BHT (2,6-디-tert-부틸-4-메틸페놀), BHA (2-tert-부틸-4-메톡시페놀 및3-tert-부틸-4-메톡시페놀의 혼합물 ), 식물성 오일, 미네랄 오일, 계면활성제, 지방산 및 그것의 에스테르가 포함될 수있다.
본 화합물이 농업용 살 곤충제, 살 진드기제 또는 살 선충제로 사용될 경우, 그것들의 적용량은 통상 10 에이커 당, 0.1 내지 100 g 이다. 물로 희석한 후 사용되는 유화 가능한 농축물, 습윤성 분말, 유동물 및 기타 유사 제형물들의 경우, 그 적용 농도는 통상 1 내지 1,000 ppm 의 범위이다. 과립, 더스트 또는 기타 유사 제형물의 적용은, 희석하지 않은 제형물로서 수행된다. 본 발명의 화합물을 유행병 예방을 위한 살 곤충제, 살 진드기제 또는 살 선충제로서 사용할 경우, 그것들은 유화 가능한 농축물, 습윤성 분말, 유동물 또는 기타 유사 제형물의 경우, 물로 농도 0.1 내지 500 ppm 으로 희석하거나, 그것들을 오일 스프레이, 에어로졸, 훈연제, 독성 유인물, 진드기방지용 시이트 또는 기타 유사 제형물의 경우에는, 그대로 적용된다. 이 적용 양 및 농도는, 제형물의 형태, 적용 시기, 장소 및 방법, 해충의 종류, 손해 정도 및기타 요인들에 따라 다를 수 있으므로, 상기 범위에 한정되지 않고, 증감 가능하다.
본 조성물을 소 및 돼지 등의 가축, 또는 고양이 및 개 등의 애완동물의 기생충 방제를 위한 살 곤충제 또는 살 진드기제로 사용할 경우, 그 조성물 또는 이의 염을 공지된 수의학적 방법들, 예로 계통적 방제를 위한 정제, 캡슐, 침액용 용액, 볼리 (boli), 먹이 혼입, 좌약 또는 주사제; 또는 유성 또는 수성 용액의 분무, 주입 (붓기 또는 점적) 처리로써, 또는 비계통적 방제를 위해 칼라 및 귀 태크 (꼬리표)와 같은 적절한 모양으로 만든 성형품을 이용하여 적용할 수 있다. 이 경 우, 본 화합물은 통상 숙주 체중 kg 당, 0.01 내지 100 mg 의 양으로 적용된다.
본 화합물은, 다른 살 곤충제, 살 선충제, 살 진드기제, 살 세균제, 살 진균제, 제초제, 식물 성장 조절제, 시너지스트, 비료,토양 컨디셔너 및/또는 동물 사료와 함께, 혹은 그것들과 별도로 하되 동시에 사용될 수 있다.
이하 본 발명을 하기 실시 예를 통하여 더욱 상세히 설명한다. 단, 하기 실시 예는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다.
< 실시예 1> 피리피로펜 에이의 생산방법
본 발명에 사용된 활성중간체인 피리피로펜 에이의 생산균주 페니실리움 그리세오풀범 F1959(Penicillium griseofulvum F1959)는 대한민국 경상북도 울산에서 채취한 토양에서 분리한 균으로 균학적 연구로 Penicillium griseofulvum으로 판명되어 본 발명자들은 생명공학연구소 한국종균협회에 Penicillium griseofulvum F1959로 기탁하여 기탁번호 KCTC 0387BP를 부여받았다.
냉동 보관된 상기 균주(10 % 글리세롤, -80℃)를 차폐장치(baffle)가 있는 1 L 삼각플라스크에 100 ml 종균배지(포도당 0.5%, 이스트 추출물 0.2%, 폴리펩톤 0.5%, 인산칼륨 0.1%, 황산마그네슘 칠배 결정수 0.05%, pH 5.8로 조정 후 멸균)에 접종하여 29℃에서 18시간 동안 진탕 배양하였다. 상기 배양된 종균 20 ml를 차폐장치가 1자로 달려 있는 5 L 삼각플라스크에 활성물질 생산배지 1L(가용성 전분 2%, 소이톤 0.4%, 파마미디아 0.3%, 인산칼륨 0.1%, 황산마그네슘 칠배결정수 0.05%, 탄산칼슘0.3%, 나트륨클로리드 0.2%, pH 5.8로 조정 후 멸균)에 접종하여 26℃에서 120시간 동안 원운동으로 진탕 배양하였다.
상기에서 배양이 끝난 발효액에 동량의 에틸 아세테이트(EtOAc)로 교반추출한 후 감압 농축하고 갈색 유상의 추출물을 얻었다.
상기 추출물을 실리카겔(Merck사, 9385) 컬럼 크로마토그라피(클로로포름-메탄올=99:1, 98:2, 97:3, 95:5, 90:10 V/V %, 실리카겔의 4배량)를 수행하고,분액을 박막 크로마토그라피로 물질의 분포도를 확인하고 같은 물질군들을 모아 in vitro ACAT 저해 활성을 측정한 후 저해활성 부분을 모았는데 저해활성물질은 클로로포름-메탄올 95:5~ 90:10 V/V %에서 용출되었고 유기 용매층을 감압 농축하여 유상의 황갈색 추출물을 얻었다.
상기방법에 의하여 얻어진 황갈색 추출물을 고속 액체크로마토그라피를 사용하여 본 발명의 활성물질 중간체인 피리피로펜 에이를 분리하였다. 구체적으로, 고속 액체크로마토그라피 칼럼은 와이엠씨(YMC)사의 ODS(20 x 250 mm)를 사용하였으며, 검출기는 자외선검출기를 사용하였으며, 322 nm에서 상기 피리페로펜 에이를 검출하였다.
상기 정제된 활성물질을 아세토나이트릴/물(45/55, 부피비)을 용매로 하여 용출하였고, 11 분에 피리피로펜 A(pyripyropene A, 화학식 1)를 용출하였다.
상기 얻어진 용출액을 감압농축하여 한 번 더 정제하여 무색의 결정인 피리피로펜 A를 얻었다. 화합합성 출발물질인 피리피로펜 A의 생산량은 120시간 배양 한 발효액 1 L당 30 mg 얻었다.
< 실시예 2> 피리피로펜 유도체의 합성
Figure 112006054140059-pat00005
본 발명은 Pyripyropene A (75 mg, 0.129 mmol)의 MeOH (5 mL)용액에 NaOMe (50%, 110 ml, 8eq.)를 가하고 상온에서 12시간동안 교반하였다. 반응이 완결된 것은 TLC로 출발물질을 확인하였다. 모든 화합물이 화합물 1이 된 것을 확인한 후에 NH4Cl 수용액 (1 mL)을 넣은 후, 감압농축하고 얻은 잔사를 과량의 EtOAc로 희석하고, 여과하여 테트라올(화합물 1) (54mg, 92%)을 노란색 고체로 얻었다.
Figure 112006054140059-pat00006
테트라올(화합물 1) (10 mg, 0.022 mmol)의 DMF (1.0 mL) 용액에 dimethoxypropane (28 ml, 10 eq) , PPTS (5.5 mg, 1 eq)를 넣고 20시간동안 상온에서 교반하였다. 반응혼합물을 감압농축하여 DMF를 제거하고, 컬럼 크로마토그래피 (EtOAc:MeOH = 12: 1)하여 아세토니드(acetonide) (화합물 2) (11mg, 100%)를 고체로 얻었다.
Figure 112006054140059-pat00007
아세토니드(화합물 2) (8.5 mg, 0.017 mmol), Et3N (23 mL, 10eq.), 4-DMAP (2 mg)의 CH2Cl2(1 mL) 용액을 넣고 얼음물수조에서 빙냉시킨 후 valeryl chloride (4.2 mg, 2 eq.)를 넣고 3시간동안 교반하였다. 반응혼합물을 EtOAc (10 mL)로 희석한 후, 물 및 brine으로 세척하고, MgSO4로 건조한 후, 여과하고 감압농축 하였다. 얻어진 잔사를 실리카겔 컬럼크로마토그래피 (EtOAc:Hex = 2:1)하여 물질을 분리하고 건조시켜 화합물 3a (9.3 mg, 94%)를 고체로 얻었다.
Figure 112006054140059-pat00008
상기와 동일한 방법을 사용하여 화합물 3b (92%)를 얻었다.
Figure 112006054140059-pat00009
화합물 3a (12 mg, 0.0206 mmol)에 60% AcOH (1 mL)를 가하고, 상온에서 20시간 동안 교반하였다. 반응 종료 후에 NaHCO3 수용액을 가하여 AcOH를 중화하고, 반응혼합물을 감압농축하였다. 얻어진 잔사를 EtOAc로 희석한 후 물 및 brine으로 세척하고, MgSO4로 건조한 후, 여과 및 감압농축 하였다. 얻어진 잔사를 컬럼크로마토그래피(EtOAc:MeOH = 12:1)하여 트리올 화합물(화합물 4a) (10.5 mg, 95%)를 고체로 얻었다.
Figure 112006054140059-pat00010
상기와 동일한 방법을 사용하여 화합물 4b (93%)를 얻었다.
Figure 112006054140059-pat00011
트리올(Triol) (화합물 4a) (13 mg, 0.024 mmol), Et3N (33 mL, 10eq.), 4-DMAP (2 mg)의 Pyridine/CH2Cl2 (1/2, 1 mL) 용액에, 0℃에서 MsCl (4.2 mg, 1.5 eq.)를 넣고 4시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 감압농축한 후, PTLC (EtOAc:Hex:MeOH = 20:20:1) 하여 메실레이트(mesylate) (화합물 5a) (6.7 mg, 45%)를 고체로 얻었다.
Figure 112006054140059-pat00012
상기와 동일한 방법을 사용하여 화합물 5b (51%)를 얻었다.
Figure 112006054140059-pat00013
메실레이트 화합물 (화합물 5a) (6.6 mg, 0.011 mmol), Et3N (16 mL, 10eq.), 4-DMAP (2 mg)의 CH2Cl2 (1 mL) 용액에, 0℃에서 Ac2O (1.6 mg, 1.5 eq.)를 넣고 4시간 동안 교반하였다. 반응혼합물을 감압농축한 후, 컬럼크로마토그래피(EtOAc:Hex:MeOH = 20:20:1) 하여 화학식 1의 화합물(6.0 mg, 85%)과 화학식 3의 화합물(0.9mg, 15%)을 고체로 얻었다.
Figure 112006054140059-pat00014
상기와 동일한 방법을 사용하여 화학식 2의 화합물(89 %)을 얻었다.
< 실험예 3> 본 발명의 합성화합물의 ACAT 활성 실험
아실 코에이:콜레스테롤 아실 트란스퍼라제 활성저해(이하 "ACAT“라 함)물질의 활성측정은 브리쳐(Brecher)방법을 약간 수정하여 사용하였다[Brecher.P and C. Chen; Biochimica Biophysica Acat 617:458~471, 1980]. 상기 방법은 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트란스퍼라제 활성 효소원으로는 간으로부터 부분 정제한 마이크로좀을 사용하였으며, 기질로는 콜레스테롤과 방사능으로 표식된 올레오일(oleoyl) 코에이(Co-A)를 반응시키는 것으로, 반응생성물인 콜레스테롤 에스테르(cholesterol ester)에 포함된 방사능의 양으로 반응정도를 측정하였다. 구체적으로, 아세톤에 용해시킨 콜레스테롤과 아세톤에 용해시킨 Triton WR-1339를 물에 현탁시켜 아세톤은 질소가스로 제거한 후 K-포스페이트 완충용액(pH 7.4, 최종농도 0.1 M)을 첨가하였다. 효소반응을 안정화 시키기 위하여 bovine serum albumin을 최종농도로 30 μM을 넣고, DMSO 또는 MeOH로 녹인 시료를 적량넣어 37 ℃에서 30 분간 예비반응시켰다. 상기 예비반응 후 본 반응은 기질인 [1- 14C]oleoyl-Coenzyme A를 0.04 μCi가 되게 넣고 37 ℃에서 30분간 반응시켰다. 반응 완결 후 이소프로판올-헵탄 1 ㎖를 넣어 반응을 정지시킨 후 n-헵탄 0.6 ㎖와 KPB bufferf 0.4 ㎖ 를 넣고 잘 섞은 후 2분간 방치하였다. 분액이 되면 상등액 200 μl를 취하여 scintillation vial에 넣었다. 상기 용액에 scintillation cocktail(Lipoluma, Lumac Co.) 4 ㎖를 넣어 scintillation counter(Packard Delta-200)에서 생성된 cholesteryl oleate의 양을 측정하였으며 저해활성은 하기 수학식 1에 따라 계산하였다.
Figure 112006054140059-pat00015
상기의 방법으로 활성물질들의 ACAT 저해율을 측정 한 결과, 피리피로펜 A는 효소의 활성을 50 % 저해하는 농도 즉 IC50는 35 ng/ml로 분자량이 583이므로 60 nM로 계산되었다.
합성된 화학식 1 내지 3으로 표시되는 화합물의 효소 활성을 50 % 저해하는 농도는 4.9 ng/ml, 5.3 ng/ml, 7.8 ng/ml로 나타났으며(도 4), 화학식 1 내지 3의 화합물의 분자량이 719, 707, 815이므로 50 % 저해농도를 계산하면 IC50는 각각 6.8 nM, 7.5 nM, 9.6 nM로 계산되었다. 즉 피리피로펜 A를 유기합성적 방법으로 구조 변환하여 제조된 화학식 1 내지 3의 피리피로펜 A 유도체는 피리피로펜 A에 비해 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트란스퍼라제 저해활성이 8.8배, 8배, 6.3배 증가하였다.
< 실험예 4> Greenhouse whitefly 의 유충에 대한 살충시험
활성물질의 생물활성평가에 사용된 시험곤충은 온실가루이로 학명이 Trialeurodes vaporariorum이고 일반명은 Greenhouse whitefly이며 살충실험은 2006년 5월 충청북도 청주시 충북대학교 농업생물환경대학 농생물과에서 살충실험을 평가 하였다. 본 발명의 ACAT 저해활성을 가진 화합물은 정확하게 무게를 측정하여 아세톤에 적정량을 녹인 후 triton X-100 100ppm 수용액 9배와 혼합하여 순차적으로 희석하고 처리할 활성검색물질 용액을 조제하였다.
시험 살충제를 각 농도로 희석하여 알과 약충이 혼재되어 있는 토마토 잎을 30초간 침지한 후 음건시켜 부화율과 약충에 대한 살충수를 9일동안 매일 조사하였으며, 실험은 2반복으로 수행하였다.
증류수로 적신 여과지가 깔린 페트리디쉬(55×20mm)에 활성검색물질이 처리된 잎을 올려놓고 활성검색물질이 처리된 유충은 항온실(25 ± 1℃, 상대습도 40- 45%, 16L:8D)에서 사육하며 9일간 살충율을 조사하였다. 무처리구는 처리된 추출물을 제외한 아세톤 10 % 용액에 triton X-100 100ppm 수용액 9배를 처리하여 활성검색물질 처리방법과 같은 방법으로 처리하였다. 활성검색실험은 3회 반복하여 실시하였고 Finney(1982)의 probit 계산법에 의해 반수치사농도(LC50)을 산출하였다.
본 발명의 화학식 1 내지 3의 피리피로펜 A 유도체의 살충 효과를 표 1에 나타내었다.
화합물 농도 반복 n 살충수 9D 살충률(%)
4D 5D 6D 7D 8D 9D
pyripyropene 6a 화학식 1 100 1 86 14 15 15 16 18 18 21.2
2 102 22 22 22 22 22 22
10 1 156 2 3 3 3 6 6 4.9
2 136 5 5 6 8 8 8
1 1 73 4 4 4 4 4 6 24.8
2 29 5 9 10 11 11 12
pyripyropene 6b 화학식 2 100 1 203 100 103 107 108 108 108 59.6
2 174 41 59 71 100 105 115
10 1 31 2 3 5 5 5 5 15.1
2 128 1 11 16 16 18 18
1 1 78 3 3 3 3 3 3 11.9
2 10 2 2 2 2 2 2
pyripyropene 6a1 화학식 3 100 1 29 0 0 0 0 0 0 10.4
2 144 18 21 25 26 29 30
10 1 53 16 16 17 17 17 17 29.4
2 15 2 2 3 4 4 4
1 1 32 7 7 7 7 7 7 17.9
2 108 7 9 13 14 15 15
control 1 72 1 1 1 1 1 1 1.9
2 167 3 3 4 4 4 4
상기 표 1에서 나타난 바와 같이, 화학식 1 내지 3의 피리피로펜 A 유도체를 1ppm, 10ppm, 100 ppm씩 온실 가루이에 처리하고 1일 간격으로 살충정도를 측정하였을 때 대조구와 비교하여 지속적인 살충현상이 나타났으며 농도 의존적으로 시간 의존적으로 살충효과가 나타났다.
또한 화학식 1 내지 3의 피리피로펜 A 유도체의 in vitro ACAT 효소 저해활성은 화학식 1, 2 및 3의 순으로 나타났으며, in vivo 살충활성은 화학식 2, 1 및 3의 순으로 나타났다.
< 실험예 5> 배추좀나방 ( Plutella xylostella L.) 유충에 대한 활성시험
본 발명에 사용된 시험곤충으로 배추좀나방(Plutella xylostella L.) 유충은 2006년 5월 충청북도 청주시 충북대학교 농업생물환경대학 농생물과에서 살충활성을 평가 하였다. 본 발명의 ACAT 저해활성을 가진 화합식 1의 피리피로펜 A 유도체는 정확하게 무게를 측정하여 아세톤에 적정량을 녹인 후 triton X-100 100ppm 수용액 9배와 혼합하여 순차적으로 희석하고 처리할 활성검색물질 용액을 조제하였다. 배추좀나방 유충의 먹이는 균일한 발육상태의 양배추잎을 잎 디스크(지름 3.0㎝)로 잘라 준비된 활성검색물질 용액에 30초간 충분히 잠길 정도로 침적한 후 꺼내 후드 내에서 60분간 건조하였다. 증류수로 적신 여과지가 깔린 페트리디쉬(55×20mm)에 활성검색물질이 처리된 잎을 올려놓고, 배추 좀나방 2령 유충을 충체가 상하지 않도록 부드러운 붓으로 유충을 이동시켜 10마리씩 3반복으로 접종하였다. 활성검색물질이 처리된 배추좀나방 유충은 항온실(25±1℃, 상대습도 40-45%, 16L:8D)에서 사육하며 24 및 48시간의 살충율을 조사하였다. 무처리구는 처리된 추출물을 제외한 아세톤 10 % 용액에 triton X-100 100ppm 수용액 9배를 처리하여 활성검색물질 처리방법과 같은 방법으로 처리하였다. 활성검색실험은 3반복으로 실시하였고 Finney(1982)의 probit계산법에 의해 반수치사농도(LC50)을 산출하였다.
본 발명에 사용한 ACAT 저해제 중에 화학식 1의 화합물을 0.1 내지 10 ppm 씩 배추좀나방에 처리하고 24 시간 간격으로 살충정도를 측정하고, 이 결과를 표 2에 나타내었다. 화학식 1의 화합물은 대조구와 비교하여 지속적인 살충현상이 나타났으며, 농도 의존적으로 배추좀나방에 살충효과가 있음을 알 수 있었다.
화합물 농도 (ppm) 반복 n 살충수 4D 살충률(%)±SD
1D 2D 3D 4D
pyripyropene 6a 화학식 1 10 1 8 0 1 5 7 89.2 ±10.1
2 9 0 2 7 9
3 10 2 2 5 8
pyripyropene 6a 화학식 1 1 1 10 1 1 3 6 56.7 ±5.8
2 10 1 1 5 5
3 10 0 1 4 6
pyripyropene 6a 화학식 1 0.1 1 10 0 1 4 4 46.7 ±11.5
2 10 0 2 5 6
3 10 0 1 4 4
Control - 1 10 0 0 0 0 3.3 ±5.8
2 10 0 1 1 1
3 10 0 0 0 0
상술한 바와 같이, 본 발명은 코에이:콜레스테롤 아실 트란스퍼라제의 저해활성을 갖는 화합물을 페니실리움 그리세오플범 F1959(Penicillium griseofulcum F1959)로부터 추출하여 유기 화학적 방법으로 구조를 변형하여 보다 활성이 우수한 화합물들을 유효성분으로 하는 살충제에 관한 것으로, 상기 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트란스퍼라제의 저해활성을 더 증강시킨 화합물을 제조할 수 있으며, 실제적으로 곤충 유충의 스테롤 대사를 억제하여 더욱 강력한 살충효과를 나타내는 것으로, 기존에 알려진 피리피로펜 에이보다 살충활성이 우수하며 또한 안정성이 우수한 살충제로 사용할 수 있다.

Claims (6)

  1. 하기 화학식 1 내지 화학식 3으로 이루어진 군에서 선택되는 화합물 또는 그의 염.
    화학식 1
    Figure 112006054140059-pat00016
    화학식 2
    Figure 112006054140059-pat00017
    화학식 3
    Figure 112006054140059-pat00018
  2. 제1항의 화합물 또는 그의 염을 유효성분으로 포함하는 살충제 조성물.
  3. 제2항에 있어서, 화합물 또는 그의 염이 전체 조성물에서 0.01 내지 95중량%인 조성물.
  4. 제2항에 있어서, 상기 살충제는 절지동물류 또는 선충류를 대상으로 하는 조성물.
  5. 제4항에 있어서, 상기 살충제는 절지동물류의 유충 또는 선충류의 유충을 대상으로 하는 조성물.
  6. 제2항에 있어서, 살충제에 통상적인 담체를 포함하는 조성물.
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Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2696039C (en) 2007-08-13 2015-11-24 Meiji Seika Kaisha, Ltd. Process for producing pyripyropene derivatives and intermediates for the production thereof
US9434739B2 (en) * 2007-12-21 2016-09-06 Meiji Seika Pharma Co., Ltd. Systemic insecticide
WO2010150739A1 (ja) * 2009-06-23 2010-12-29 学校法人北里研究所 Ａｃａｔ２阻害活性を示す水酸基含有ピリピロペン誘導体
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ES2566910T3 (es) 2012-03-12 2016-04-18 Basf Se Formulación de concentrado líquido que contiene un insecticida de piripiropeno II
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WO2014111398A1 (en) * 2013-01-16 2014-07-24 Basf Se Method for preparing a pyripyropene compound

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0522446A (ja) * 1991-07-09 1993-01-29 Nec Commun Syst Ltd Ｐｂｘ対向・代表群における短縮コード登録方式
JPH08259569A (ja) * 1995-03-27 1996-10-08 Kitasato Inst:The ピリピロペン誘導体

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* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100522446B1 (ko) * 2003-01-07 2005-10-18 한국생명공학연구원 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트란스퍼라제의 저해활성을갖는 화합물 또는 그 염을 유효성분으로 하는 살충제

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH0522446A (ja) * 1991-07-09 1993-01-29 Nec Commun Syst Ltd Ｐｂｘ対向・代表群における短縮コード登録方式
JPH08259569A (ja) * 1995-03-27 1996-10-08 Kitasato Inst:The ピリピロペン誘導体

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
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