KR100928867B1 - 복분자 추출물을 포함하는 살충제 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트랜스퍼라제의 저해활성을 갖는 복분자 추출물을 포함하는 살충제에 관한 것으로, 상기 살충제는 해충, 구체적으로는 빨간 집모기의 유충의 살충에 사용될 수 있다.
복분자, 추출물, 살충제, 아실 코에이:콜레스테롤 아실

Description

복분자 추출물을 포함하는 살충제{An insecticide comprising Rubus coreanus Miquel}
본 발명은 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트랜스퍼라제의 저해활성을 갖는 복분자 추출물을 포함하는 살충제 및 그를 이용하여 해충을 살충하는 방법에 관한 것이다.
우리 생활에 영향을 주는 모기 종류에는 집모기, 작은 빨간집 모기, 중국 얼룩모기 및 금빛 숲 모기 등이 있지만 주택가 근처에서 발견되는 것은 대부분 집모기이다. 최근 모기 개체 수 증가의 원인으로는 모기가 서식하면서 월동하고, 온난화로 모기들은 흡혈-휴식-산란의 주기가 빨라져 모기 개체 수가 늘어나는 추세이기 때문이다. 그리고 난방시설의 확충으로 아파트 및 백화점 등 대형건축물 내에 겨울철에도 모기들이 서식하면서 직접 피해를 주고 있다. 그렇지만 겨울철 모기들은 제한된 공간에서 서식하고 활동하기 때문에, 효과적으로 모기방제가 이루어진다면 성충 및 유충의 동시 구제로 모기번식을 근본적으로 차단하는 효과를 얻을 수도 있 다. 겨울철 모기가 서식하기 좋은 대형 건축물의 지하시설 및 주택 밀집 지역 정화조와 집수조 등의 모기 성충 및 유충의 서식 여부를 조사하고 모기 유충과 성충의 서식이 확인된 시설을 중점적으로 구제하여 모기발생과 번식을 근본적으로 차단하는 것이 필요하다.
위생 곤충방제 및 농작물과 산림보호 차원에서 살충제의 살포는 증가하는 추세이다. 초기에는 살충제로서 1939년 스위스에서 DDT가 발명되었고, 이어서 영국에서는 BHC가 제조되었다.
DDT는 1874년에 자이들러(O. Zeidler)에 의해서 최초로 합성되었고, DDT가 강력한 살충 효과를 가진다는 것은 1939년 스위스의 과학자 뮐러(P. H. Muller)에 의해 밝혀지면서 뮐러는 이 공적으로 1948년에 생리 의학 부문 노벨상을 받았다. DDT의 실용화는 2차 세계대전 때문에 일본에서 수출하던 천연재료 공급이 끊기면서 미국에서 처음 살충제로 이루어졌다. DDT는 싼 가격에 대량생산할 수 있고 처음 실용화될 때는 인간에게는 무해한 것으로 알려졌기 때문에 급속히 보급되었다. 특히 이가 옮기는 티푸스나 모기가 옮기는 말라리아를 퇴치하는 데 매우 효과적이었기 때문에 1940년대부터 살충제로 널리 사용되었다. 또한 1945년 이후에는 살충용 농약으로서 농업에도 널리 사용되었다. 그러나 1957년부터 DDT의 유해성에 대한 의문이 제기되기 시작하였고, 1962년에 유해성이 확인되었으며, 특히 조류에 대한 유해성이 지적되면서 결국 1970년대에 대부분의 국가에서 DDT를 농약으로 사용하는 것을 금지하였다. DDT의 반감기는 2년에서 15년으로 잘 분해되지 않으며 체내의 지방 성분에 주로 쌓이고, 땅이나 물에 남아 있던 DDT는 식물에 흡수된 후 인간에게까지 영향을 미친다. 1970년대 미국에서 실시한 연구에 의하면 인간의 몸에서도 DDT가 검출되었으며 이물질이 밝혀졌다. 인간과 같은 생물에 있어서 피부로 접촉할 경우에는 특별한 문제를 일으키지 않지만 음식을 통해 섭취할 경우에는 암이 유발될 수 있다는 경고 때문에 현재는 대부분의 나라에서 농약으로 사용하는 것은 금지되었다.
DDT와 BHC는 그 원료가 염소 또는 벤젠 등인데, 원료가 풍부하고 값이 저렴하고 살충력이 강하며, 인축에는 해가 적기 때문에 전 세계의 관심을 끌어 미국에서 드린제를 개발하는 등, 잇따라 합성되면서 관심을 끌었다. 그러나 BHC 또한 인축에 대한 급성 독성은 없으나 잔류효과가 길기 때문에 사용량의 증가와 함께 최근에는 환경 오염 문제가 대두되어 서양 각국과 오스트레일리아 등 여러 나라에서는 엄격하게 농약사용을 제한하고 있다.
이와 같이 그동안 위생 곤충을 방제하기 위하여 유기 화학적 합성 살충제가 널리 사용되고 있으나 수십년에 걸친 연용과 남용으로 인하여, 해충군의 이상격발 또는 저항성 해충의 출현, 인간을 비롯한 비목적충에 대한 독성발현 및 환경 계의 오염 등의 많은 부작용을 야기하고 있다. 전 세계적으로 농약의 잔류 독성과 환경오염으로 인하여 여러 가지 문제점이 나타나자 더 이상 방치하지 않고 전 세계 국가는 인류의 건강을 지키기 위하여 우선 독성이 강한 유기합성 농약의 사용을 자제하기로 국제적으로 합의하였다. 국제적인 협의 중에서 특히 인축에 영향을 많이 미 치는 유기 합성된 농약의 생산과 사용을 점차 제한하자고 합의하였으며, 국제적인 협약에 의하여 전 세계는 2004년에 지난 10년 전에 사용하던 화학합성 유기인계, 유기염소계 살충제의 50%까지 생산이 감축되었고, 2010년까지 다시 유기인계, 유기염소계 살충제의 생산을 50% 감소시키기로 한 국제적 협의에 동의하여 실행단계에 있다. 그러나 독성농약 감축생산 협의 이후, 현재 전 세계적으로 많은 연구진이 환경 친화적 살충제를 개발하려고 많은 노력을 했음에도 불구하고, 이제까지 사용하였던 유기인계, 유기염소계 농약을 대체할 새로운 기작의 안전한 살충제를 개발하지 못하였기 때문에 전 세계적인 농약감축회의 의결내용이 지켜질지 여부를 놓고 걱정하고 있는 상태이며, 조만간에 안전한 살충제가 개발되어 생산되지 않으면 위생 해충방제용 살충제뿐만 아니라 식량생산에 관련된 농업용 살충제의 부족으로 국내외적으로 아주 큰 문제가 대두될 것으로 예상된다.
최근 전 세계의 농약관련 시장동향을 분석해 보면 2004년 통계에 의하면 전세계 농약시장은 280억$이고, 그 중에서 제초제가 46.6%, 살충제 27.7%, 살균제 20.8% 및 기타농약이 4.9% 차지하고 있다. 그리고 2006년 통계에 의하면 국내의 농약시장은 총 1조 600억원이고, 전 세계시장과는 점유율에서 많은 차이가 있다. 국내의 농약시장의 품종별 점유률로 보면 제초제가 낮은 편으로 23.9%이고, 살충제 37.0%, 살균제 35.5%로 높은 편이며 기타농약이 3.6%를 점유하고 있다. 국내 농약 중에서 살충제시장의 총 규모는 3760억원 시장이며 매년 점차적으로 증가 추세에 있다. 그동안 우수한 유기합성 살충제의 실용화로 식물성 살충제의 사용량이 한동 안 감소하였으나 최근에 독성, 환경오염 등과 같은 심각한 사회문제가 부각됨에 따라 식물성 살충제의 사용에 관심을 갖게 되어 점차 사용량이 증가하고 있다.
그동안 많은 연구자들에 의하여 곤충의 생리 관련연구가 분자생물학적 방법을 이용하여 시도되고 있으며 곤충 성장에 필요한 여러 가지 대사에 관련된 효소와 수용체에 대한 연구가 부분적으로 밝혀지고 있으나 아직 호르몬의 이송이나 스테롤의 저장에 관련된 연구는 많이 되어있지 않다.
곤충들은 대부분 체내에서 자체적으로는 스테롤 합성능력이 없으므로 스테롤은 외부로부터 먹이로 섭취해야하는 필수 영양분으로 요구된다. 대부분 많은 곤충들은 식물성스테롤을 식이로 섭취하여 콜레스테롤로 전환시켜 이용하고, 일부 육식성 곤충들은 타 곤충을 잡아먹어 스테롤을 충당하기도 한다. 콜레스테롤은 탈피호르몬을 합성하는 데 필수적이며 세포막을 형성하는 데도 인지질과 함께 필수적으로 관여하며 여러 가지 생리작용에 관여하고 있다.
본 발명에서는 유충의 스테롤 대사에서 저장형 스테롤 또는 각종 호르몬 생성에 중요한 역할을 하는 것으로 알려진 스테롤 아실화 효소를 새로운 개념의 목표 지향적인 탐색계로 사용하여 천연자원으로부터는 새로운 활성물질을 탐색하였고, 스테롤대사저해 활성물질을 분리 정제하여 그 활성을 규명하였다.
또한 본 발명에서는 환경친화적인 식물체 추출물들에서 효소저해활성을 확인 한 복분자 용매추출물을 모기의 유충에 처리한 결과 살충활성을 나타내었고, 효소저해활성이 있는 활성물질들은 모기의 유충에 대하여 생물 활성을 나타냄을 확인하여 환경 친화적인 살충제로 사용할 수 있음을 통해 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트랜스퍼라제의 저해활성을 갖는 복분자 추출물 포함하는 살충제를 제공하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 상기 살충제를 이용하여 해충을 살충하는 방법을 제공하는 것이다.
하나의 양태에서 본 발명은 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트랜스퍼라제의 저해활성을 갖는 복부자 추출물을 포함하는 살충제에 관한 것이다.
본 발명에서 사용되는 복분자(Rubus coreanus Miquel)는 장미과(Rosaceae)에 속하는 복분자 딸기의 미성숙한 과실로서 7월경에 과실이 충분히 커지고 아직 익지 않아 청색일 때 따서 줄기와 잎을 제거하고 사용한다. 복분자에는 카본(Carvone), 당류 및 소량의 비타민 C가 함유되어 있다. 청량(淸凉)·지갈(止渴)·강장약(强壯藥) 등으로 사용되며, 신기허약, 음위, 정력증진, 강장보호, 강정, 당뇨, 조갈 등에 효능이 있으며, 건조품은 정력감퇴, 신경쇠약, 이명 등에 생것은 여성의 피부미용, 시력장애 등에 효능이 있는 것으로 알려져 있다(정 보섭 및 신 민교, 향약대사전, 영림사, pp652-653, 1998). 특히 복분자는 당뇨병과 성기능 감퇴에 사용되는데(Moon, G.S., Constituents and Uses of Medicinal Herbs, Ilweolseogak, Seoul, pp310-311, 1991), 이 생약은 코레아노시드 F1(coreanoside F1), 수아비스시모시드(suavissimoside), 니가-이치고시드 F1 및 F2와 같은 트리테르페노이드 글리코시드를 함유하며, 탄닌(tannin), 디테르펜(diterpene), 카테킨(catechin) 성분도 분리되어서 보고된다(Kim S. W. et al., Arch. Pharm. Res., 24, pp412-415, 2001; Tanaka T. et al., Chem. Pharm. Bull., 41, pp1214-1220, 1993; Gao F et al., Chem. Pharm. Bull., 33, pp37-40, 1985).
본 발명의 살충제에 포함되는 복분자 추출물은 공지의 추출 방법에 의해 추출될 수 있으며 그 방법에 제한이 있는 것은 아니다.
바람직한 실시 양태에서 본 발명의 복분자 추출물은
i) 복분자를 물로 깨끗이 세척한 후 그늘에서 건조한 후, 분쇄기로 분말화 하는 단계;
ii) 분말화된 복분자에 용매를 가하여 추출하는 단계; 및
iii) 추출물을 여과 및 농축하는 단계를 포함하여 제조할 수 있다.
상기 ii) 단계에서 추출에 사용되는 용매는 물 및 유기용매인 것이 바람직하다. 상기 유기용매는 1 내지 4의 탄소 수를 갖는 알코올로 구성된 군에서 선택되는 것이 더 바람직하다. 추출에 사용되는 용매는 건조된 복분자 중량에 대해 3배의 용매를 사용하는 것이 바람직하며, 3일 동안 실온에서 추출하는 것이 바람직하다.
본 발명의 살충제에 포함되는 복분자 추출물은 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트랜스퍼라제의 저해활성을 나타내며, 이와 같이 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트랜스퍼라제의 저해활성을 갖는 물질은 유해 선충류를 포함하는 해충의 유충들에 대한 방제 효력을 나타낼 수 있다.
구체적으로, 곤충들이 생육하는데에는 스테롤을 필수적으로 요구되며, 이들의 대사 기작 중에 관련된 스테롤의 저장, 이동 및 호르몬 활성이나 소멸에 스테롤 아실화 효소를 필수적으로 이용하게 된다. 따라서, 상기 복분자 추출물을 사용하는 경우, 이들 물질이 해충의 대사 기작 중에 저장형이나 이동에 관여하는 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트랜스퍼라제를 저해하여 살충활성을 나타내게 되며, 본 발명자들은 이러한 살충 효과를 하기 실시예를 통하여 확인하였다.
복분자 추출물을 본 발명에 따른 살충제의 유효 성분으로 사용할 경우, 그것은 임의의 기타 성분들의 첨가 없이, 그 자체로 사용될 수 있다. 그러나 본 발명의 살충제는 상기 복분자 추출물을 통상 고체 담체, 액체 담체, 기체 담체 또는 유인물(bait)과 혼합하거나, 염기성 물질, 예컨대 다공질 세라믹 플레이트 또는 부직포에 흡수시킨 후, 계면활성제 및 필요한 경우, 기타 보조제들을 첨가하여, 이를 각종 형태들, 예컨대 오일 스프레이, 유화 가능한 농축물, 습윤성 분말, 유동물, 과립, 더스트, 에어로졸, 훈연제(예 : 포깅), 증기화 가능한 제형물, 스모킹 제형물, 독성 유인물, 진드기 방지용 시이트 또는 수지 제형물로 제형화 될 수 있다.
본 발명의 살충제는 통상 유효 성분으로서 복분자 추출물을 0.01 내지 95 중량% 함유할 수 있다.
본 발명의 살충제에 사용될 수 있는 고체 담체에는, 카올린 점토, 규조토, 합성 수화된 산화규소, 벤토나이트, 푸바사미 점토 및 산점토 등의 점토 물질의 미세 분말 또는 과립; 각종 탈크, 세라믹 및 기타 무기 물질, 이를테면 견운모, 석영, 황, 활성탄,탄산칼슘 및 수화된 실리카; 및 화학적 비료, 이를테면 황산암모늄, 인산암모늄, 질산암모늄, 우레아 및 염화암모늄이 포함될 수 있다.
액체 담체에는, 물; 알콜, 이를테면 메탄올 및 에탄올; 케톤, 이를테면 아세톤 및 메틸 에틸 케톤; 방향족 탄화수소, 이를테면 벤젠, 톨루엔, 자일렌, 에틸벤젠 및 메틸나프탈렌; 지방족 탄화수소, 이를테면 헥산, 시클로헥산, 케로신 및 라이트 오일;에스테르, 이를테면 에틸 아세테이트 및 부틸 아세테이트; 니트릴, 이를테면 아세토니트릴 및 이소부티르니트릴; 에테르, 이를테면 디이소프로필에테르 및 디옥산; 산 아미드, 이를테면 N,N-디메틸포름아미드 및 N,N-디메틸아세트아미드; 할로겐화 탄화수소, 이를테면 디클로로메탄, 트리클로로에탄 및 사염화탄소; 디메틸 술폭시드; 및 식물성 오일, 이를테면 대두유 및 면실유가 포함될 수 있다.
기체 담체 또는 추진제(propellant)에는, 프레온 가스, 부탄 가스, LPG(액화 석유 가스), 디메틸 에테르 및 이산화탄소가 포함될 수 있다.
독성 유인물에 사용되기 위한 염기 물질에는, 유인물 물질, 이를테면 그레인 분말, 식물성 오일, 슈거 및 결정성 셀룰로스; 산화방지제, 이를테면 디부틸히드록시톨루엔 및 노르디히드로구아이아레트산; 보존제, 이를테면 데히드로아세트산; 비식음 방지용 물질, 이를테면 고추 분말; 및 유인성 풍미, 이를테면 치즈 풍미 및 양파 풍미가 포함될 수 있다.
계면활성제에는, 알킬 술페이트, 알킬 술포네이트, 알킬 아릴술포네이트, 알킬 아릴 에테르 및 그것의 폴리옥시에틸렌 유도체, 폴리에틸렌 글리콜 에테르, 다가 알콜 에스테르 및 당 알콜 유도체가 포함될 수 있다.
접착제 또는 분산제와 같은 보조제에는, 카세인, 젤라틴; 다당류, 이를테면 전분, 아라비아검, 셀룰로스 유도체 및 알긴산; 리그닌 유도체, 벤토나이트, 슈거 및 합성 수용성 중합체, 이를테면 폴리비닐 알콜, 폴리비닐 피롤리돈 및 폴리아크릴 산이 포함될 수 있다.
안정화제에는, PAT(이소프로필 산 포스페이트), BHT(2,6-디-tert-부틸-4-메틸페놀), BHA(2-tert-부틸-4-메톡시페놀 및 3-tert-부틸-4-메톡시페놀의 혼합물), 식물성 오일, 미네랄 오일, 계면활성제, 지방산 및 그것의 에스테르가 포함될 수 있다.
본 발명의 살충제가 농업용 살충제, 살진드기제 또는 살선충제로 사용될 경우, 그것들의 적용량은 통상 10 에이커 당, 0.1 내지 100 g 이다. 물로 희석한 후 사용되는 유화가능한 농축물, 습윤성 분말, 유동물 및 기타 유사 제형물들의 경우,그 적용 농도는 통상 1 내지 100,000 ppm의 범위이다. 과립, 더스트 또는 기타 유사 제형물의 적용은, 희석하지 않은 제형물로서 수행된다. 본 발명의 살충제를 유행병 예방을 위한 살곤충제, 살진드기제 또는 살선충제로서 사용할 경우, 그것들은 유화가능한 농축물, 습윤성 분말, 유동물 또는 기타 유사 제형물의 경우, 물로 농도 0.1 내지 500 ppm으로 희석하거나, 그것들을 오일 스프레이, 에어로졸, 훈연제, 독성 유인물, 진드기방지용 시이트 또는 기타 유사 제형물의 경우에는, 그대로 적용된다. 이러한 적용 양 및 농도는, 제형물의 형태, 적용 시기, 장소 및 방법, 해충의 종류, 손해 정도 및 기타 요인들에 따라 다를 수 있으므로, 상기 범위에 한정되지 않고, 증감 가능하다.
본 발명의 살충제를 소 및 돼지 등의 가축, 또는 고양이 및 개 등의 애완동물의 기생충 방제를 위한 살곤충제 또는 살진드기제로 사용할 경우, 그 조성물 또는 이의 염을 공지된 수의학적 방법들, 예컨대 계통적 방제를 위한 정제, 캡슐, 침액용 용액, 볼리(boli), 먹이 혼입, 좌약 또는 주사제; 또는 유성 또는 수성 용액의 분무, 주입(붓기 또는 점적) 처리로써, 또는 비계통적 방제를 위해 칼라 및 귀 태크(꼬리표)와 같은 적절한 모양으로 만든 성형품을 이용하여 적용할 수 있다. 이 경우, 본 화합물은 통상 숙주 체중 kg 당, 1 내지 100 mg의 양으로 적용된다.
본 발명의 살충제는, 다른 살곤충제, 살선충제, 살진드기제, 살세균제, 살진균제, 제초제, 식물 성장 조절제, 시너지스트, 비료, 토양 컨디셔너 및/또는 동물 사료와 함께, 혹은 그것들과 별도로 하되 동시에 사용될 수 있다.
본 발명의 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트랜스퍼라제에 저해활성을 갖는 복분자 추출물을 포함하는 살충제는 유해 선충류를 포함한 해충의 유충들, 바람직하게는 모기에 대한 방제 효력을 나타낼 수 있다. 그리고 종래 유기인계, 유기염소계 살충제에 대한 저항성을 갖는 해충의 유충을 효과적으로 방제하는데 사용될 수 있다.
또 다른 하나의 양태로서 본 발명은 상기 살충제를 이용하여 해충을 살충하는 방법에 관한 것이다. 구체적인 일 양태에서, 본 발명의 살충방법은 살충제의 제형, 살충하고자하는 해충의 종류, 살충 대상 개체, 장소 및 방법 등의 다양한 요인을 감안하여 본 발명의 살충제를 적용시키는 것을 포함한다.
하기 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하고자 한다. 이들 실시예는 본 발명을 설명하기 위한 것일 뿐, 본 발명의 범위가 하기 실시예에 한정되는 것은 아니다.
제조예 1 : 아실코에이:콜레스테롤 아실트랜스퍼라제 저해물질의 제조
살충활성을 나타내는 복분자 추출물 제조는 복분자를 대전 약전 시장에서 구입 후 물로 깨끗이 세척한 후 그늘에서 건조한 후, 분쇄기로 분말화 시켰다. 분말화된 복분자 100g에 3배의 물(건조된 복분자 중량에 대해)을 가하여 3일간 실온에서 추출한 후 여과하였다. 상기 여과액을 감압 농축하여 복분자 조추출물을 얻었다.
그리고 복분자 1 내지 4의 탄소 수를 갖는 알코올 추출물은 분말화된 복분자에 1 내지 4의 탄소 수를 갖는 알코올을 건조된 복분자 중량에 3배의 가하여 3일간 실온에서 추출한 후 여과하여 여과액을 감압 농축하여 복분자 1 내지 4의 탄소 수를 갖는 알코올 조추출물을 얻었다.
실시예 1 : 본 발명의 추출물의 ACAT활성 실험
아실 코에이:콜레스테롤 아실 트랜스퍼라제 활성저해(이하 "ACAT“라 칭한다)물질의 활성측정은 브리쳐(Brecher)방법을 약간 수정하여 사용하였다[Brecher.P and C. Chen; Biochimica Biophysica Acat 617:458~471, 1980].
상기 방법은 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트랜스퍼라제 활성 효소원으로는 간으로부터 부분 정제한 마이크로좀을 사용하였으며, 기질로는 콜레스테롤과 방사능으로 표식된 올레오일(oleoyl) 코에이(Co-A)를 반응시키는 것으로, 반응생성물인 콜레스테롤 에스테르(cholesterol ester)에 포함된 방사능의 양으로 반응 정도를 측정하였다.
구체적으로 아세톤에 용해시킨 콜레스테롤과 아세톤에 용해시킨 Triton WR-1339를 물에 현탁시키고 아세톤을 질소가스로 제거한 후, K-포스페이트 완충용액(pH 7.4, 최종농도 0.1 M)을 첨가하였다. 효소반응을 안정화시키기 위하여 소혈청 알부민(bovine serum albumin)을 최종농도로 30 μM을 넣고, 디메틸술폭시드 또는 메탄올로 녹인 시료를 적량 넣어 37 ℃에서 30 분간 예비반응시켰다. 상기 예비반응 후 본 반응은 기질인 [1-14C]oleoyl-Coenzyme A를 0.04 μCi가 되게 넣고 37 ℃에서 30분간 반응시켰다. 반응 완결 후 이소프로판올-헵탄 1 ㎖를 넣어 반응을 정지시킨 후 n-헵탄 0.6 ㎖와 KPB buffer 0.4 ㎖ 를 넣고 잘 섞은 후 2분간 방치하였다. 분액되면 상등액 200 μl를 취하여 scintillation vial에 넣었다. 상기 용액에 scintillation cocktail(Lipoluma, Lumac Co.) 4 ㎖를 넣어 scintillation counter(Packard Delta-200)에서 생성된 cholesteryl oleate의 양을 측정하였으며 저해활성은 하기 수학식 1에 따라 계산되었다.
수학식 1
저해활성(％) = 〔 1 - (T-B/C-B) 〕＊100
상기 식에서,
T : 효소반응액에 시료를 넣어 시험구의 cpm값,
C : 효소반응액에 시료를 넣지 않은 대조구의 cpm값,
B : 효소원을 넣지 않고 시료를 넣은 대조구의 cpm값
이때, 공시험은 효소원을 넣지 않은 시험 값과 시료를 넣지 않은 시험 값을 보정하여 저해활성을 계산하였다. 그리고 실험의 양성 대조군으로는 obovatol을 사용하여 ACAT 저해활성을 측정한 결과 IC50값은 44 μM로 나타났다.
도 1에서 보는 바와 같이, 복분자의 물 추출물을 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트랜스퍼라제에 100, 50, 25, 12.5, 6.25 μg/㎖ 처리하였을 때, 효소 활성을 85.9, 75.5, 55.1, 45.4, 33.7% 저해하여 농도 의존적인 저해활성을 보였다. 복분자의 알코올 추출물도 효소저해활성을 나타냈다.
실시예 2 : 빨간 집모기 유충의 살충실험
본 발명에 사용된 시험곤충으로 빨간 집모기(Culex pipiens pallens)유충을 2006년 9월 충청북도 청주시 충북대학교 농업생물환경대학 농생물과에서 살충실험을 하였다.
본 발명의 ACAT 저해활성을 가진 복분자 추출물은 정밀하게 무게를 측정하여 물에 적정량을 녹인 후, triton X-100 100ppm 수용액 9배와 혼합하여 순차적으로 희석하고 처리할 활성검색물질 용액을 조제하였다. 빨간 집모기의 실내 사육조건은 25-28℃, 14L:10D, RH 90%이었다. 유충의 살충실험은 사육조건과 동일한 조건에서 수행하였다. 빨간 집모기 유충의 살충시험은 100㎖ 물이 담긴 플라스틱컵(원통형컵 : 8×5㎝)에 시험하고자하는 시료를 각 농도로 처리한 후 4령 유충을 10마리씩 넣 고, 24시간, 48시간 후 유충이 살충된 수를 조사하였다.
도 2에서 보는 바와 같이, 본 발명에 사용한 ACAT저해제는 농도 0.001 내지 1000 ppm에서 빨간집모기 유충에 처리하고 24 시간 간격으로 살충 정도를 측정하였을 때, 비교구와 비교하여 지속적인 살충현상이 나타났으며 농도 의존적으로 살충 효과가 나타났다.
또한 도 2에서 보는 바와 같이, 본 발명에 사용한 ACAT저해제를 0.1ppm에서도 24시간 간격으로 살충 정도를 측정하였을 때 비교구와 비교하여 지속적인 살충현상이 나타났으며, in vitro ACAT저해활성과 살충력과 상관성이 있는 것으로 나타났다.
본 발명에 따른 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트랜스퍼라제의 저해활성을 갖는 복분자 추출물을 포함하는 살충제는 해충의 생체 내에서 스테롤 대사를 억제하여 유충의 살충활성이 우수하며 또한 안정성이 우수한 양질의 살충제로 사용할 수 있다.
도 1은 복분자의 물 추출물에 의한 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트랜스퍼라제의 저해효과를 나타낸 그래프이다.
도 2는 복분자의 물 추출물에 의한 빨간 집모기 유충의 살충효과를 나타낸 그래프이다.

Claims (4)

  1. 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트랜스퍼라제 저해 활성을 가지는 복분자 추출물을 포함하는 살충제.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 복분자 추출물은 복분자를 물 및 유기용매를 이용하여 추출한 것인 살충제.
  3. 제 2항에 있어서, 상기 유기용매는 1 내지 4의 탄소 수를 갖는 알코올로 구성된 군에서 선택되는 것인 살충제.
  4. 제 1항 내지 제 3항 중 어느 한 항의 살충제를 이용하는 살충방법.
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* Cited by examiner, † Cited by third party
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KR20030045230A (ko) * 2001-12-01 2003-06-11 한국생명공학연구원 아실 코에이:디아실글리세롤 아실트랜스퍼라제활성저해제인 신규 폴리아세틸렌계 화합물 및 이의 제조방법
KR20040063416A (ko) * 2003-01-07 2004-07-14 한국생명공학연구원 아실 코에이:콜레스테롤 아실 트란스퍼라제의 저해활성을갖는 화합물 또는 그 염을 유효성분으로 하는 살충제
KR20070006621A (ko) * 2005-07-08 2007-01-11 한국생명공학연구원 아실-코에이:콜레스테롤 아실 트랜스퍼라제 저해 활성을가지는 조성물

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