KR100912138B1 - 펩타이드 디포밀라제 저해 및 항균 활성을 갖는 신규한 마크로락틴계 화합물 - Google Patents

펩타이드 디포밀라제 저해 및 항균 활성을 갖는 신규한 마크로락틴계 화합물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 신규한 바실러스 속 ＡＨ159-1 균주, 이로부터 분리된 마크로락틴계 화합물, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 항균용 약학 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 따른 마크로락틴계 화합물은 펩타이드 디포밀라제(Pepetide deformylase; PDF)에 대한 저해 활성이 우수하며, 황색포도상구균(Staphylococcus aureus) 및 고초균(Bacillus subtilis)과 같은 그람양성세균뿐 아니라 대장균 (Escherichia coli)과 같은 그람음성세균에 대하여도 강력한 항균활성을 나타냄으로써, 내성균 및 여러 병원 미생물의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.

Description

펩타이드 디포밀라제 저해 및 항균 활성을 갖는 신규한 마크로락틴계 화합물{A NOVEL MACROLACTIN COMPOUND HAVING PEPTIDE DEFORMYLASE INHIBITION AND ANTIBACTERIAL ACTIVITY}
본 발명은 신규한 바실러스 속 ＡＨ159-1 균주, 이로부터 분리된 마크로락틴계 화합물, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 항균용 약학 조성물에 관한 것이다.
1990년 중반부터 시작한 병원 미생물 유전체 연구 결과, 새로운 항생제 표적이 발굴되어 새로운 개념의 항생제 개발 가능성을 열어주고 있다. 미생물 유전체 정보를 활용하여 발굴 검증된 새로운 항생제 표적 중의 하나로서 단백질 생합성효소인 펩타이드 디포밀라제(Pepetide deformylase; PDF)가 있다. 세균이 단백질 합성을 위해 tRNA에 메티오닌이 결합된 후 트랜스포밀라제(transformylase)에 의해 포르밀화(formylation) 되고, 단백질 합성이 다 끝난 후 PDF에 의해 포르밀 (formyl) 기가 떨어지면서 활성 단백질이 된다. 이와 같이 PDF는 세균의 생육에 필수적인 효소이면서 대부분의 병원균에 존재하고, 항균 스펙트럼도 광범위한 스펙트럼(broad spectrum)을 나타내어 훌륭한 항생제 표적이다. 또한 사람에서는 미토콘 드리아에서 유사한 유전자가 존재하나 아무런 기능도 하지 않는 것으로 밝혀져 사람에 대한 독성도 낮을 것으로 알려져 있다(Drug Discovery Today 6(18) 954-961, 2001).
지금까지 알려진 PDF 저해제로는, 하이드록사메이트(hydroxamate) 작용기를 가진 펩타이드 화합물인 악티노인(actinonin)과 다국적 제약회사인 노바티스사가 개발하여 임상 1상 중에 있는 역-하이드록사메이트(reverse-hydroxamate) 작용기를 가진 악티논(actinone) 유도체 화합물인 LBM-415와 BB-83698 화합물 등이 알려져 있다(Curr. Med. Chem. 12: 1607-1621, 2005). 그러나 상기 화합물들은 in vitro 항균 활성은 좋지만, 펩타이드 화합물이기 때문에 인체 흡수와 인체 내에서의 안정성의 문제점을 가지고 있다.
따라서 비 펩타이드성의 새로운 PDF 저해제 개발이 요구되고 있다.
이에, 본 발명자들은 PDF 저해 활성이 우수한 물질에 대해 미생물의 대사산물로부터 탐색하던 중, 토양으로부터 PDF 저해 활성이 우수한 물질을 생산하는 세균을 선별하였고, 이로부터 새로운 구조의 마크로락틴계 화합물을 순수하게 분리·정제하였으며, 상기 마크로락틴계 화합물이 PDF 저해 활성이 우수하고, 황색포도상구균(Staphylococcus aureus) 및 고초균(Bacillus subtilis)과 같은 그람양성세균뿐 아니라 대장균(Escherichia coli)과 같은 그람음성세균에 대하여도 강력한 항균활성을 나타냄을 확인하고 본 발명을 완성하였다.
본 발명은 신규한 바실러스 속 ＡＨ159-1 균주, 이로부터 분리된 마크로락틴계 화합물, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 항균용 약학 조성물을 제공하고자 한다.
본 발명은 신규한 바실러스 속(Bacillus sp .) ＡＨ159-1 균주(KCTC 11199BP)를 제공한다.
본 발명의 바실러스 속 ＡＨ159-1 균주는 토양으로부터 분리하였으며, 분리한 신균주 곰팡이는 막대기(rod) 모양이고, 내생포자가 관찰되어 전형적인 바실러스 형태를 나타낸다. 전체 유전체(whole genome)를 분리하여 16S 리보좀 (ribosomal) DNA를 PCR로 클로닝하여 전장(full sequence)을 분석한 결과, 바실러 스로 동정하였다. 따라서, 상기 토양으로부터 분리한 신균주를 바실러스 속 ＡＨ159-1 균주로 명명하였다(수탁번호 : KCTC 11199BP).
또한, 본 발명은 바실러스 속 ＡＨ159-1 균주로부터 분리된 하기 구조식으로 이루어진 군으로부터 선택된 마크로락틴계 화합물을 제공한다.
Figure 112007068833043-pat00001
본 발명에 따른 마크로락틴계 화합물은 약학적으로 허용가능한 염의 형태로 사용될 수 있으며, 통상의 방법에 의해 제조되는 모든 염, 수화물, 용매화물 및 이성질체를 포함한다.
본 발명에 따른 마크로락틴계 화합물은 통상적인 모든 방법에 의해 얻을 수 있고, 시판되는 시약을 사용할 수 있으며, 본 발명에서는 신규한 곰팡이 바실러스 속 ＡＨ159-1 균주로부터 분리·정제하여 사용한다.
또한, 본 발명은
1) 바실러스 속 ＡＨ159-1 균주(KCTC 11199BP)를 배양하는 단계,
2) 상기 1)단계에서 얻어진 균주의 배양액 및 균사체를 아세톤으로 추출한 후, 에틸아세테이트로 추출하는 단계, 및
3) 상기 2)단계에서 얻어진 에틸아세테이트 추출물을 실리카겔 컬럼 크로마토그래피로 분리하는 단계를 포함하는, 마크로락틴계 화합물의 제조방법을 제공한다.
본 발명의 마크로락틴계 화합물의 제조방법을 단계별로 상세히 설명하면 다음과 같다.
상기 1)단계는 곰팡이 바실러스 속 AH159-1 균주를 배양하는 단계로서, 균주 배양은 통상의 미생물이 사용할 수 있는 영양원을 함유하는 배지에서 배양한다. 영양원으로는 종래 곰팡이의 배양에 이용되고 있는 공지의 영양원을 사용한다. 예를 들어, 탄소원으로는 글루코오스, 물엿, 덱스트린, 전분, 당밀, 동물유, 식물유 등을 사용할 수 있으며, 질소원으로는 밀기울, 대두박, 소맥, 맥아, 면실박, 어박, 콘스팁리커, 육즙, 효모 추출물, 황산암모니움, 질산소다, 요소 등을 사용할 수 있다. 필요에 따라, 식염, 칼륨, 마그네슘, 코발트, 염소, 인산, 황산 및 기타 이온생성을 촉진하는 무기염류를 첨가하면 매우 효과적이다. 배양방법으로는 호기적 조건에서는 진탕배양 혹은 정치배양이 가능하다.
배양온도는 상기의 각 조건들에서 배양할 경우 조건에 따라 약간씩 상이하기는 하나, 보통 20~37℃에서 배양하는 것이 적당하며, 대부분의 경우에는 26~30℃에서 배양한다. 또한, 배양기간은 진탕배양, 정치배양의 경우 모두 통상 3일 내지 7일간 배양할 때 본 발명의 마크로락틴계 화합물의 생산이 최고에 달한다.
상기 2)단계는 바실러스 속 ＡＨ159-1 균주의 배양액 및 균사체를 추출하는 단계로, 마크로락틴계 화합물은 균주의 배양액뿐만 아니라 균사체 부분에도 존재한다. 따라서, 균주의 배양액 및 균사체에 아세톤 등의 유기용매를 가하여 배양액 및 균사체로부터 유효성분을 추출한 후 감압하에 아세톤을 증발시키고, 에틸아세테이트로 용매추출한다. 에틸아세테이트 용매층을 감압농축하여 에틸아세테이트를 제거한다.
상기 3)단계는 본 발명의 화합물을 분리하는 단계로, 상기 2)단계에서 얻은 에틸아세테이트 농축액을 클로로포름:메탄올을 20:1 내지 1:1로 하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 실시한다. 이렇게 얻어진 활성분획을 메탄올을 용매로 하여 세파덱스 LH-20 컬럼 크로마토그래피에서 정제한다. 최종적으로 메탄올:물 = 70:30인 용매조건에서 ODS HPLC를 실시하여 4개의 순수한 화합물을 얻는다. 상기 4개의 순수한 화합물은 마크로락틴 O, P, Q, R로 동정하였다.
또한, 본 발명은 마크로락틴계 화합물을 포함하는 항균용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명에 따른 마크로락틴계 화합물은 펩타이드 디포밀라제(Pepetide deformylase; PDF)에 대한 저해 활성이 우수하며, 황색포도상구균(Staphylococcus aureus) 및 고초균(Bacillus subtilis)과 같은 그람양성세균뿐 아니라 대장균 (Escherichia coli)과 같은 그람음성세균에 대하여도 강력한 항균활성을 나타낸다.
기존의 마크로락틴계 화합물로는 마크로락틴 A~M, 7-O-석시노일마크로락틴 A (7-O-succinoylmacrolactin A), 7-O-석시노일마크로락틴 F(7-O-succinoylmacromactin F) 등 15개의 화합물이 알려져 있으며, 배당체 화합물로는 마크로락틴 B가 알려져 있다(J. Antibiotics 54: 333-339, 2001; J. Nat. Prod. 63: 984-986, 2000). 본 발명의 마크로락틴계 화합물은 D-글루코오스 당이 결합한 배당체 물질이다. 생물활성에서의 큰 차이점은 기존의 마크로락틴계 화합물은 주로 황색포도상구균 및 고초균 등과 같은 그람양성세균에 대해 항균활성을 나타내고, 대장균 등과 같은 그람음성세균에는 항균활성을 나타내지 않는다. 그러나, 본 발명의 마크로락틴계 화합물은 대장균에도 항균활성을 나타낸다.
따라서, 본 발명에 따른 마크로락틴계 화합물은 기존의 항생제와는 전혀 다른 새로운 작용기전의 항생물질로서, 내성균 및 여러 병원 미생물의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 마크로락틴계 화합물과 함께 내성균 및 병원성 세균에 대해 항균활성을 갖는 공지의 유효성분을 1종 이상 함유할 수 있다.
본 발명의 조성물은, 투여를 위해서 상기 기재한 유효성분 이외에 약학적으로 허용가능한 담체, 부형제 또는 희석제를 더 포함할 수 있다. 상기 담체, 부형제 및 희석제로는 락토오스, 덱스트로오스, 수크로오스, 소르비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로오스, 메틸 셀룰로오스, 미정질 셀룰로오스, 폴리비닐 피롤리돈, 물, 메틸히드록시벤조에이트, 프로필히드록시벤조에이트, 탈크, 스테아린산 마그네슘 및 광물유를 들 수 있다.
본 발명의 조성물은 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 정제, 캡슐제, 현탁액, 에멀젼, 시럽, 에어로졸 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 또는 멸균 주사용액의 형태로 제형화하여 사용할 수 있다. 상세하게는, 제형화할 경우 통상 사용하는 충진제, 증량제, 결합제, 습윤제, 붕해제, 계면활성제 등의 희석제 또는 부형제를 사용하여 조제될 수 있다. 경구투여를 위한 고형제제로는 정제, 환제, 산제, 과립제, 캡슐제 등을 포함하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 이러한 고형제제는 상기 마크로락틴계 화합물에 적어도 하나 이상의 부형제, 예를 들면, 전분, 칼슘 카보네이트, 수크로오스, 락토오스, 젤라틴 등을 섞어 조제될 수 있다. 또한, 단순한 부형제 이외에 스테아린산 마그네슘, 탈크 같은 윤활제들도 사용될 수 있다. 경구를 위한 액상 제제로는 현탁제, 내용액제, 유제, 시럽제 등을 포함하나, 이에 한정되지 않으며, 흔히 사용되는 단순 희석제인 물, 리퀴드 파라핀 이외에 여러 가지 부형제, 예를 들면 습윤제, 감미제, 방향제, 보존제 등을 첨가하여 조제될 수 있다. 비경구 투여를 위한 제제는 멸균된 수용액, 비수성 용제, 현탁제, 유제, 동결건조 제제 및 좌제를 포함한다. 비수성 용제 및 현탁제로는 프로필렌글리콜, 폴리에틸렌 글리콜, 올리브 오일과 같은 식물성 오일, 에틸올레이트와 같은 주사가능한 에스테르 등이 사용될 수 있다. 좌제의 기제로는 위텝솔, 마크로골, 트윈 61, 카카 오지, 라우린지, 글리세로젤라틴 등이 사용될 수 있다.
본 발명의 조성물은 목적하는 방법에 따라 경구 투여하거나 비경구 투여(예를 들어, 정맥 내, 피하, 복강 내 또는 국소에 적용)할 수 있으며, 투여량은 환자의 상태 및 체중, 질병의 정도, 약물형태, 투여경로 및 기간에 따라 다르지만, 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있다. 상기 마크로락틴계 화합물의 일일 투여량은 1~100㎎/㎏, 바람직하게는 5~20㎎/㎏이며, 필요에 따라 일일 1회 내지 수회로 나누어 투여할 수 있다.
본 발명의 조성물은 내성균 및 병원성 세균에 대한 예방 또는 치료를 위하여 단독으로, 또는 수술, 호르몬 치료, 약물 치료 및 생물학적 반응 조절제를 사용하는 방법들과 병용하여 사용할 수 있다.
이하, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 바람직한 실시예를 제시한다. 그러나 하기의 실시예는 본 발명을 보다 쉽게 이해하기 위하여 제공되는 것일 뿐, 실시예에 의해 본 발명의 내용이 한정되는 것은 아니다. 본 발명의 화합물은 배지의 종류, 배양조건, 추출정제 방법 등을 대폭적으로 바꾸어도 얻을 수 있다.
실시예 1 : 바실러스 속( Bacillus sp . ) ＡＨ159-1 균주의 분리
본 발명의 펩타이드 디포밀라제(Pepetide deformylase; PDF) 저해 활성을 갖는 물질을 생산하는 균주를 스크리닝하기 위하여, 전국 토양으로부터 세균, 곰팡이, 방선균을 분리하였다. 즉, 멸균 생리 식염수 10㎖에 풍건한 토양시료 1g을 넣고 30분간 교반한 다음 10-2 ~ 10－4 배로 희석한 후, 희석액 0.1㎖를 포테이토 덱스 트로스 아가(potato dextrose agar) 배지에 도말하고 25℃에서 7~10일간 배양하여 나타난 집락을 순수 분리하였다. 상기 분리한 신균주 곰팡이를 여러 가지 고체배지 (V-8 주스, 와이엠, 차이펙, 몰트 배지, 포테이토 덱스트로오스)에서 배양하여 포자를 생성시킨 후 포자를 현미경으로 관찰하였다.
관찰 결과, 상기 분리한 신균주 곰팡이는 막대기(rod) 모양이고, 내생포자가 관찰되어 전형적인 바실러스 형태를 나타내었다. 전체 유전체(whole genome)를 분리하여 16S 리보좀(ribosomal) DNA를 PCR로 클로닝하여 전장(full sequence)을 분석한 결과, 바실러스로 동정하였고, 이를 바실러스 속(Bacillus sp .) AH159-1로 명명하였다. 본 발명자들은 상기 균주를 2007년 9월 13일자로 한국생명공학연구원 유전자원센터에 기탁하여 수탁번호(KCTC 11199BP)를 부여받았다.
실시예 2 : 바실러스 속( Bacillus sp . ) ＡＨ159-1 균주로부터 마크로락틴계 화합물의 분리 및 정제
1. 바실러스 속 ＡＨ159-1 균주의 배양
바실러스 속 AH159-1 균주를 배양하기 위하여, 종 배지로는 1% 가용성 전분, 2% 글루코오스, 2.5% 대두박(soybean meal), 0.1% 소고기 추출액(beef extract), 0.4% 효모 추출액(yeast extract), 0.2% NaCl, 0.025% K2HPO4, 0.2% CaCO3을 함유한 배지를 멸균 전에 pH 7.2로 조절한 후 사용하였다.
상기 종배지 20㎖가 담긴 100㎖ 용량의 삼각 플라스크를 121℃에서 20분간 멸균한 후, 바실러스 속 AH159-1 균주의 사면배양 시험관으로부터 1 백금이를 접종하여 28℃에서 3일간 진탕배양하고, 이것을 1차 종배양액으로 사용하였다. 그 다음, 상기 멸균된 배지가 들어 있는 500㎖ 용량의 삼각플라스크(48개)에 종배양액을 접종하여 28℃에서 7일간 진탕배양 하였다.
2. 바실러스 속 ＡＨ159-1 균주로부터 마크로락틴계 화합물의 분리 및 정제
상기 1에서 배양한 바실러스 속 AH159-1 균주의 배양액 및 균사체에 아세톤 4.8ℓ를 가하여 추출한 후 감압건조기를 이용하여 아세톤을 증발시켰다. 상기 아세톤 추출액에 동량의 에틸아세테이트를 가한 후 용매 추출하였다(3회 반복). 상기 에틸아세테이트 용매층을 감압농축하여 에틸아세테이트를 제거한 후 클로로포름:메탄올을 20:1인 용매로 하여 실리카겔 컬럼 크로마토그래피를 실시하였다. 이렇게 얻어진 활성분획을 감압농축하여 오일성 조유효성분을 얻은 뒤, 메탄올을 용매로 하여 세파덱스 LH-20 컬럼 크로마토그래피에서 정제하였다. 최종적으로 메탄올:물 = 70:30인 용매조건에서 ODS HPLC를 실시하여 4개의 화합물을 분리하였다.
상기 바실러스 속 AH159-1 균주로부터 분리한 4개의 화합물의 이화학적 특성은 다음과 같으며, 이들 화합물의 1H NMR 및 13C NMR 데이타는 각각 표 1 및 표 2에 나타내었다.
화합물 1 : 마크로락틴 O
Figure 112007068833043-pat00002
1) 물성 : 흰색 분말;
2) [α]D -56.8 (c 0.1, MeOH);
3) UV (MeOH) λmax (logε) 231 (4.67), 262 (4.27)nm;
4) IR (KBr) νmax 3423 (OH), 2927, 1704 (CO), 1193, 1076 cm-1;
5) HRESIMS [M+Na]++ m/z 587.2842 (calcd for C30H44O10 + Na, 587.2826).
화합물 2 : 마크로락틴 P
Figure 112007068833043-pat00003
1) 물성 : 흰색 분말;
2) [α]D -38.4 (c 0.1, MeOH);
3) UV (MeOH) λmax (logε) 233 (4.52), 262 (4.30)nm;
4) IR (KBr) νmax 3412 (OH), 2928, 1703 (CO), 1191, 1075 cm-1;
5) HRESIMS [M+Na]+ m/z 601.2965 (calcd for C31H46O10 + Na, 601.2983).
화합물 3 : 마크로락틴 Q
Figure 112007068833043-pat00004
1) 물성 : 흰색 분말;
2) [α]D -56.2 (c 0.1, MeOH);
3) UV (MeOH) λmax (logε) 232 (4.72), 263 (4.27)nm;
4) IR (KBr) νmax 3411 (OH), 2927, 1697 (CO), 1191, 1075 cm-1;
5) HRESIMS [M+Na]+ m/z 587.2805 (calcd for C30H44O10 + Na, 587.2826).
화합물 4 : 마크로락틴 R
Figure 112007068833043-pat00005
1) 물성 : 흰색 분말;
2) [α]D -60.4 (c 0.1, MeOH);
3) UV (MeOH) λmax (logε) 235 (4.53), 265 (4.24) nm;
4) IR (KBr) νmax 3427 (OH), 2927, 1706 (CO), 1195, 1076 cm-1;
5) HRESIMS [M+Na]+ m/z 587.2830 (calcd for C30H44O10 + Na, 587.2826).
[표 1]
본 발명의 마크로락틴계 화합물의 1H NMR 데이타
Figure 112007068833043-pat00006
[표 2]
본 발명의 마크로락틴계 화합물의 13C NMR 데이타
Figure 112007068833043-pat00007
실험예 1 : 본 발명의 마크로락틴계 화합물의 펩타이드 디포밀라제( Pepetide deformylase; PDF ) 저해 활성 측정
본 발명에 따른 마크로락틴계 화합물의 PDF 저해 활성을 확인하기 위하여, 하기와 같은 효소 역가 측정 실험을 수행하였다.
효소 역가 측정을 위해서 PDF-FDH(formate dehydrogenase) coupled assay를 구축하였다. 유전자 재조합 기술에 의해 제조된 E. coli PDF를 사용하였다. 역가 측정은 50mM HEPES 완충용액(pH 7.5) 중에서 수행하였으며, 기질로는 f-MAS(N-formylmethionine-alanine-serine) 4 mM, NAD 2mM, BSA 1㎎/㎖를 사용하였고, PDF를 30-50nM 사용하였으며, FDH는 0.05 Unit를 사용하였다. 효소를 첨가하고 상온에서 60분 반응시킨 후 UV-분광분석기를 이용하여 340㎚에서 NADH(nicotinamide adenine dinucleotide)의 흡광도 증가를 측정하였다. 저해능을 평가한 화합물은 디메틸설폭사이드(DMSO) 용매에 용해시켜 전체 반응액의 5% 이내로 첨가하여 효소 저해능을 평가하였다. 효소 저해능은 시험 화합물이 없는 상태에서의 NADH 증가 정도에 대한 시험 화합물의 NADH 증가 정도를 백분율로 표시하였으며, 50%의 효소 활성을 저해하는 각 시험 화합물의 농도를 IC50로 결정하였다.
결과는 표 3에 나타내었다.
화합물 IC50 (μM)
마크로락틴 O 53.5
마크로락틴 P 57.5
마크로락틴 Q 12.1
마크로락틴 R 61.5
표 3에 나타난 바와 같이, 본 발명의 마크로락틴계 화합물은 PDF 저해 활성이 우수함을 알 수 있다.
실험예 2 : 본 발명의 마크로락틴계 화합물의 항균활성 측정
본 발명에 따른 마크로락틴계 화합물의 항균활성을 확인하기 위하여, 하기와 같은 실험을 수행하였다.
시험 균주는 TSB(tryptic soy broth)에서 배양하였으며, MIC(Minimun inhibitory concentartion) 시험은 MHA(Mueller Hinton Agar)를 사용하였다. 균액을 만들어서 multi spot을 이용하여 접종하였으며, 약 105 ~ 106 cfu가 되도록 접종하였다. 상기 실시예 2에서 분리한 마크로락틴계 화합물은 DMSO에 희석하였고, DMSO의 농도는 1/100 정도로 맞추어서 실험을 실시하였다.
실험 결과, 본 발명의 마크로락틴계 화합물은 황색포도상구균 (Staphylococcus aureus RN4220), 고초균(Bacillus subtilis KCTC 1021) 및 대장균 (Escherichia coli KCTC 1924)에 대하여 100 ㎍/㎖의 MIC를 나타내었다.
따라서, 본 발명의 마크로락틴계 화합물은 항균활성이 우수함을 알 수 있다.
하기에 본 발명의 조성물을 위한 제제예를 예시한다.
제제예 1 : 산제의 제조
본 발명의 마크로락틴계 화합물 0.1 g
유당 1.5 g
탈크 0.5 g
상기의 성분들을 혼합하고 기밀포에 충진하여 산제를 제조하였다.
제제예 2 : 정제의 제조
마크로락틴계 화합물 0.1 g
본 발명의 마크로락틴계 화합물 0.1 g
결정성 셀룰로오스 1.5 g
스테아린산 마그네슘 0.5 g
상기의 성분들을 혼합한 후 직타법(direct tableting method)으로 정제를 제조하였다.
제제예 3 : 캡슐제의 제조
본 발명의 마크로락틴계 화합물 0.1 g
옥수수전분 5 g
카르복시 셀룰로오스 4.9 g
상기의 성분들을 혼합하여 분말을 제조한 후, 상기 분말을 통상의 캡슐제의 제조방법에 따라 경질 캡슐에 충전하여 캡슐제를 제조하였다.
제제예 4 : 주사제의 제조
본 발명의 마크로락틴계 화합물 0.1 g
주사용 멸균 증류수 적량
pH 조절제 적량
통상의 주사제의 제조방법에 따라 1 앰플 당(2㎖) 상기의 성분 함량으로 제조하였다.
제제예 5 : 액제의 제조
본 발명의 마크로락틴계 화합물 0.1 g
이성화당 10 g
만니톨 5 g
정제수 적량
통상의 액제의 제조방법에 따라 정제수에 각각의 성분을 가하여 용해시키고, 레몬향을 적량 가한 다음 상기의 성분을 혼합하였다. 그 다음 정제수를 가하여 전체 100 ㎖로 조절한 후 갈색병에 충진하여 멸균시켜 액제를 제조하였다.
본 발명에 따른 바실러스 속 ＡＨ159-1 균주로부터 분리된 마크로락틴계 화합물은 펩타이드 디포밀라제(Pepetide deformylase; PDF)에 대한 저해 활성이 우수하며, 황색포도상구균(Staphylococcus aureus) 및 고초균(Bacillus subtilis)과 같은 그람양성세균뿐 아니라 대장균(Escherichia coli)과 같은 그람음성세균에 대하여도 강력한 항균활성을 나타냄으로써, 내성균 및 여러 병원 미생물의 예방 또는 치료에 유용하게 사용될 수 있다.

Claims (7)

  1. 삭제
  2. 펩타이드 디포밀라제(Pepetide deformylase; PDF) 저해 활성을 갖는 하기 구조식으로 이루어진 군으로부터 선택된 마크로락틴계 화합물.
    Figure 112007068833043-pat00008
  3. 삭제
  4. 삭제
  5. 제2항의 마크로락틴계 화합물을 유효성분으로 포함하는 항균용 약학 조성물.
  6. 제5항에 있어서, 상기 마크로락틴계 화합물은 황색포도상구균 (Staphylococcus aureus), 고초균 (Bacillus subtilis) 및 대장균(Escherichia coli)으로 구성된 군으로부터 선택된 세균에 대하여 항균활성을 나타내는 것을 특징으로 하는 항균용 약학 조성물.
  7. 제2항의 화합물을 생산하는 수탁번호 KCTC 11199BP인 바실러스 속 (Bacillus subtilis) AH159-1 균주.
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Biochemistry, Vol. 39, No. 15, pp.4543~4551 (2000)
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J. Nat. Prod., Vol. 63, No. 7, pp. 984~986 (2000)

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