KR100890225B1 - 기능성 버섯 재배용 배지 및 그 제조방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 인체의 혈액을 활성화시키는 효과를 가지는 것으로 잘 알려진 징코플라본글리코사이드(GFG)를 함유하는 은행잎을 건조, 분쇄한 은행잎박을 함유하는 버섯재배용 배지 및 그 제조방법에 관한 것으로, 본 발명의 배지를 이용하여 버섯을 재배하면 GFG가 함유된 고기능성 버섯을 얻을 수 있을 뿐만 아니라, 버섯의 수량이 3~12% 증수되는 효과를 얻을 수 있고, 자실체의 경도도 높아 저장 및 유통에 유리한 조건을 가지게 되는 버섯을 얻을 수 있게 된다.

징코플라본글리코사이드(Ginkgoflavonglycosides), 컴페롤(Kaempferol), 이소르함네틴(Isorhamnetin), 퀘르세틴(Quercetin)

Description

기능성 버섯 재배용 배지 및 그 제조방법{Functional mushrooms cultivation medium and preparation thereof}

도 1 내지 도 3은 본 발명에 따르는 배지를 이용하여 재배된 큰느타리버섯(새송이)에 함유된 징코플라본글리코사이드의 함유량을 측정한 HPLC그래프.

도 4는 본 발명에 따르는 배지를 이용하여 재배된 팽이버섯에 함유된 징코플라본글리코사이드의 함유량을 측정한 HPLC그래프.

도 5는 본 발명에 사용되는 은행잎박에 함유된 징코플라본글리코사이드의 함유량을 측정한 HPLC그래프.

도 6은 본 발명에 사용되는 추출가공된 은행잎박에 함유된 징코플라본글리코사이드의 함유량을 측정한 HPLC그래프.

본 발명은 버섯 재배용 배지에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 인체의 혈액을 활성화시키는 효과를 가지는 것으로 잘 알려진 징코플라본글리코사이드를 함유하는 은행잎을 이용한 배지 및 그 제조방법에 관한 것이다.

담자균류에 속하는 버섯(mushroom)은 각종 유기물을 분해하여 성장 발육하는 자실체를 가지고 있으며 중요한 식품자원이면서 동시에 약용식물로 알려져 왔다. 최근에는 생활수준이 향상되어 국민보건에 관심이 고조되면서 청정농산물의 재배와 기능성 식품에 점점 관심이 집중되고 있다.

버섯은 그 종류에 따라 맛과 향이 독특하며 단백질, 비타민 기타 무기영양소를 많이 함유하고 있으며 특히 섬유소가 다량 함유되어 있어 미용, 건강용 식품이 됨은 물론 변비와 항암효과가 보고되고 있다.

종래의 버섯재배용 배지를 보면 원목을 이용하는 방법, 볏집을 주재료로 한 제품, 볏집과 왕겨를 주재료로 한 제품, 볏집이나 톱밥을 주재료로한 제품 등이 개발된 바 있다.

원목의 경우에 있어서 참나무 등의 원목은 그 습득이 용이하지 않고 원가상승의 요인이 되어 왔다. 그뿐만 아니라 많은 재배면적이 필요하고 많은 인력이 소요될 뿐만 아니라 인력을 적기에 구하기가 곤란하였다. 또한 재배기간도 봄, 가을에 제한되고 5~6년 장기간 소요된다. 이러한 단점을 개선하기 위하여 각종 식물성 섬유물질을 분쇄하거나 절단하여서 되는 톱밥배지, 볏집배지 및 왕겨배지 등 인공배지가 개발된 바 있다.

그러나, 이러한 배지들은 버섯균사의 활성화에 적잖은 문제점이 있으며, 이를 인공배지의 혼합, 살균, 접종단계에 있어 상당한 노동력이 소요되고 있는 단점이 있다.

또한, 대한민국 특허출원 제90-6943호에는 낙면을 주재료로 하고 볏집이나 왕겨, 활엽수 톱밥 또는 활엽수의 원목가지 등을 부재료로 하며, 미강, 석고, 소석회 등을 첨가물로 하는 느타리버섯을 재배하는 방법이 개시되어 있다.

대한민국 특허출원 제96-931호에는 산업폐자원인 목재소의 톱밥, 양계장의 닭똥, 두부공장에서 나오는 비지를 적절히 가공 배합하여 제조하는 버섯재배 배지의 제조방법이 개시되어 있다.

대한민국 특허출원 제96-43851호에는 통상의 버섯재배용 인공배지에 왕겨 등의 탄화숯 또는 활성탄을 5~10 첨가하여 느타리버섯, 표고버섯 등 버섯류를 재배하여 인공배지에 균사활착을 촉진하며, 영양분해 능력을 높이고 보수성을 좋게 할 뿐만 아니라 배지내 통기성을 향상시켜 버섯의 증수효과를 현저히 향상시키는 인공배지 조성물이 개시되어 있다.

또한, 대한민국 특허출원 제04-61230호에는 버섯재배용 배지조성물에 버섯에 이행시킬 목적으로 소정함량의 크롬공급원을 함유한 버섯재배용 배지조성물 및 버섯재배용 배지에 소정함량의 크롬공급원을 첨가하고, 버섯을 상기 배지에서 배양함으로써 크롬이 다량으로 함유된 버섯을 제조하는 방법이 개시되어 있다.

한편, 은행잎에 관해서 살펴보면, 대한민국특허공개 특1998-0008012(공개일 1998. 4. 30)에서는 콜레스테롤의 침착에 의한 동맥경화 등의 심장질환을 예방 또는 방지하기 위해서 임상에서 노인성 치매를 포함한 지적 능력의 저하, 평행장애, 말초 동맥의 폐쇄, 혈액 응고, 동맥경화증의 치료에 사용되고, 노화방지, 항암작용, 망막에 의한 작용, 발모 촉진작용 등이 있어 의약품으로 뿐만 아니라, 건강식 품, 화장품 등 다양한 형태로 개발되고 있는 은행잎의 특성을 이용하여, 은행잎 분말 사료로 조제하여 산란계에 급여하면 은행잎 속의 플라보노이드 등의 유효성분들이 계란에 이행되어 은행잎이 가지고 있는 상기한 효과를 얻을 수 있음을 보고한 바 있다. 국내에서는 몇몇 제약회사에서 은행잎 엑기스 개발에 대한 연구를 진행하고 있어 훌륭한 결과를 얻고 있는 실정이며, 독성, 약리 및 임상실험 등의 체계적인 연구가 활발하게 진행되고 있는 실정이다. 외국에서는 특히, 유럽지역에서는 현재 은행잎 엑기스제제(정제, 액제, 좌제, 주사제 등)의 단미제 및 복합제로 연간 5억불 이상의 매출고를 기록하고 있으며, 이에 대한 화학적, 약리학적, 임상학적인 연구가 전세계적으로 활발히 진행되고 있다. 우선 화학적인 연구 결과를 살펴보면 다음과 같다.

은행잎 엑기스의 주 유효성분인 GFG의 각 성분에 대한 분리 및 함량 분석연구와 은행잎 엑기스에도 소량함유되고 있으며 최근 들어 크게 각광을 받고 있는 징코라이드(ginkgolides) 및 빌로바라이드(bilobalide)에 대한 분리 및 특성에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다. 그리고 최근 항암효과가 있음이 밝혀진 세븐롱체인페놀(Seven Long Chain Phenols) 화합물인 아나카딕엑시드(Anacardic Acid), 빌로볼(Bilobol) 및 카다놀(Cardanol)을 1986년 일본의 Tokyo 약대 Itokawa 등에 의해 분리확인되었으며 그 밖의 특이 화합물인 빌로베틴(Bilobetin), 징크게틴(Ginkgetin), 이소징크게틴(Isoginkgetin), 시아도피티(Sciadopity) 등의 비플라본(Biflavones)이 검출되는 등 은행잎에 들어 있는 유효 생리활성 물질들에 대한 화학적 연구가 폭넓게 이루어지고 있다. 약리학적인 연구결과를 종합해보면 다음과 같다.

은행잎을 의약품으로 처음 연구 개발한 곳은 독일 Dr .Schwabe社로 Peter 등 연구원들이 1966년 최초의 주성분인 징코플라보노이드(Ginkgoflavonoids)를 분리 발표하면서 그들이 말초 및 뇌혈관 순환장애에 치료효과가 있음을 발견하였다. 그 후 계속적인 약리작용 및 기전을 연구한 결과 말초혈관 확장 및 혈액순환 촉진, 혈관의 저항감소 및 콜레스테롤 감소, 혈관 항경련 작용 등 혈액 및 혈관에 대한 약리작용을 알아냈으며 최근 프랑스 연구소에서 뇌혈류량 증가, 뇌대사 촉진 등의 뇌기능 순환개선 작용을 나타내고 있음을 보고하였다. 그리고 최근 새로운 혈소판 응집촉진물질(Platelet-Activating Factor)이 발견되면서 은행잎과 은행나무 뿌리에 소량함유되어있는 징코라이드(Ginkgolides)의 혈소판 응집저해작용에 대한 연구가 전세계적으로 유명한 생화학자, 약리학자들에 의해 깊이 연구되고 있고 그 결과 현재 혈소판 응집저해, 수술 및 저혈압 등에 의한 쇼크 방지, 항알레르기(천식치료효과 등), 면역기는 증가, 프로스타글란딘(Prostaglandin) 생성저해 등 PAF-Antagonist는 향후 알레르기, 암, 류마치스 등의 인간이 정복하지 못한 불치질환이나 그 영역에 획기적인 예방약물로 기대되고 있어 은행나무에 함유하고 있는 징코라이드(Ginkgolides)는 앞으로 인류에게는 없어서는 안 될 약물이 될 것이다.

또한 은행잎에서만 존재하는 빌로바라이드(Bilobalide) 화합물은 현재 독일에서 새로운 신경계 약물로서 깊이 연구하고 있는데 주로 뇌신경계, 척수신경계, 근신경계 및 신경전달물질(Neurotransmitter)에 대한 약효를 입증하여 향후 노인성치매, 노인성 천식, 심장질환 등과 같은 노인성 질환의 치료약물로써, 그리고 퇴행 성 뇌 및 척수신경계 질환의 치료제로써 개발하기 위한 노력이 집중적으로 진행되고 있다. 그밖에 은행나무에 특이하게 존재하는 유효생리활성물질에 대해서도 항암, 항바이러스(Anti-Viral), 저해제(Anti-Feedant) 등의 많은 약리학적 연구가 계속 진행되고 있어 머지않아 또 새로운 분야의 물질이 발견될 것을 의심치 않는다. 특히 징코플라본글리코사이드(Ginkgoflavonglycosides)를 주성분으로 함유하고 있는 은행잎 추출물에 대한 생체내 이용과정 및 약리학적 연구가 각국에서 많은 약리학자 ,생리학자들에 의해 1960년 말부터 깊이 진행되어 왔다.

본 발명의 목적은 성인병, 특히 노인성 치매, 뇌혈관 및 말초혈관장애 예방에 좋은 징코플라본글리코사이드(Ginkgoflavonglycosides, 이하, 'GFG'라 함)성분, 보다 구체적으로 컴페롤(Kaempferol), 이소르함네틴(Isorhamnetin) 및 퀘르세틴(Quercetin) 성분을 함유하는 버섯을 효과적으로 재배할 수 있는 배지와 이러한 배지를 제조하는 방법을 제공하는 데에 있다.

상기와 같은 목적을 달성한 본 발명은 배지 건조중량기준으로 통상의 버섯배지성분 40~90중량%와 입자크기 0.1~0.5mm의 건조된 은행잎 또는 은행잎박 10~40중량%를 함유하며, 고압 살균기에서 121℃(1.2㎏/㎠)에서 60~90분 멸균 후 pH가 6.4~6.7이고, 수분함량이 63~67중량% 인 것을 특징으로 하는 버섯 재배용 배지를 제공한다.

또한, 본 발명은 건조중량기준으로 통상의 버섯배지성분 40~90중량%와 입자크기 0.1~0.5mm의 건조된 은행잎 또는 은행잎박 10~40중량%를 혼합하고 물을 첨가하는 단계, 얻어진 혼합물을 내열용기에 충전하여 고압 살균기에 넣고 온도 121℃(1.2㎏/㎠)에서 60~90분 동안 멸균하여 pH 6.4~6.7, 수분함량 63~67중량%의 배지를 제조하는 단계로 이루어지는 것을 특징으로 하는 버섯 재배용 배지의 제조방법을 제공한다.

이하, 본 발명을 보다 상세하게 설명하기로 한다.

본 발명에 따르는 버섯 재배용 배지는 건조중량기준으로 통상의 버섯배지성분 40~90중량%와 입자크기 0.1~0.5mm의 건조된 은행잎 또는 은행잎박 10~40중량%를 함유한다.

본 발명에 있어서, 은행잎박은 은행잎을 수분함량 10%이하가 되도록 건조한 후 입자크기가 0.1~0.5mm가 되도록 분쇄한 것이다.

은행잎박은 통상 6월에서 10월초 사이에 채취되는 은행잎을 의약용 은행잎추출물을 얻기 위하여 분쇄하여 에탄올 등과 같은 추출용매에서 일부 GFG성분을 추출하고 남은 은행잎박에서 추출용매를 제거하고 건조한 것을 사용할 수도 있고, 추출가공되지 않은 은행잎을 분쇄, 건조한 것을 사용할 수도 있다. 은행잎에는 통상 3.45%의 GFG를 함유하고 있는 것으로 알려져 있으며, 상기 추출용매로 추출가공된 은행잎박에는 GFG함량이 1.70% 정도 잔류되어 있다.

본 발명의 배지중에 은행잎 또는 은행잎박의 함량은 배지 건조중량기준으로 10~40중량%, 보다 바람직하게 15~35중량%이다. 은행잎 또는 은행잎박의 함량이 10중량% 보다 적은 경우에는 버섯의 GFG성분의 흡수량이 적어 약리학적 기능을 갖는 고품질의 버섯을 재배하는 것이 어렵고, 또한 40중량% 보다 많은 경우에는 버섯이 흡수할 수 있는 GFG성분은 무한대로 흡수되지 않는 단점이 있어 경제성이 떨어지며, 또한 버섯 생육이 지연되고, 일부 사멸되는 현상이 발생할 수도 있다. 또한 은행잎 또는 은행잎박의 크기는 0.1~0.5mm가 적당한데, 그 이유는 크기가 상기한 범위에서 벗어나면 배지 제조시 혼합이 어렵고, 수분공급이 불균일하여 균사배양이 불균일하고, 양호한 수량으로 버섯을 재배하는 것이 어렵게 된다.

본 발명의 배지는 고압 살균기에서 121℃(1.2㎏/㎠)에서 60~90분 멸균 후 pH가 6.4~6.7이고, 수분함량이 63~67중량%이다. 만일 배지조성물의 멸균후 pH가 6.4 미만이거나 6.7을 초과할 경우에는 균사의 생장불량이나 수량 감소의 문제가 발생할 수 있다. pH는 패화석의 함량으로 조절하는 것이 바람직하다.

은행잎 또는 은행잎박 이외에 본 발명의 배지에 사용될 수 있는 버섯배지성분은 당분야에 잘 알려져 있으며, 그 바람직한 예로는 미송톱밥, 밀기울, 패화석, 미강, 소맥피, 콘코프 등이 있으며, 이러한 통상의 성분들은 재배하고자 하는 버섯의 종류에 따라 적의 선택될 수 있다. 예를 들어 큰느타리버섯 재배용 배지에는 미송톱밥, 밀기울, 패화석을 사용하는 것이 바람직하고, 팽이버섯의 경우에는 미강, 소맥피, 콘코프, 밀기울, 패화석을 사용하는 것이 바람직하다.

본 발명의 배지는 건조중량기준으로 통상의 버섯배지성분 40~90중량%와 입자크기 0.1~0.5mm의 건조된 은행잎 또는 은행잎박 10~40중량%를 혼합하고, 물을 첨가하여 내열용기에 충전하고 나서, 고압 살균기에 넣고 온도 121℃(1.2㎏/㎠)에서 60~90분 동안 멸균하여 pH 6.4~6.7, 수분함량 63~67중량%이 되도록 하는 것에 의해 제조될 수 있다.

이와 같이 제조되는 배지를 이용하여 버섯을 재배하는 방법을 예를 들어 설명하면, 도 7에 나타낸 바와 같이 에 대해서 설명하면, 우선 입병된 배지에 버섯종균을 접종하여 온도 15~16℃, 습도 85~95%에서 29 내지 31일간 배양하고, 상기 배양이 완료된 후 잡균을 선별하고 접종원을 제거하여 온도 16~18℃, 습도 90~95%에서 7 내지 8일간 발아시킨 다음, 발아된 자실체를 온도 14~15℃, 습도 85~90%에서 11일 내지 12일간 자실체를 생육하면 얻고자 하는 버섯을 수확하게 된다.

상기와 같은 방법으로 재배된 버섯은 징코플라본글리코사이드의 함유량이 생육버섯의 종류에 따라 0.170 ~ 0.296의 범위내로 함유되게 된다.

이하, 본 발명을 바람직한 실시예를 들어 설명하면 다음과 같으며, 하기의 실시예로 본 발명을 한정하는 것은 아니다.

하기의 실시예에서는 큰느타리버섯(새송이)과 팽이버섯 재배용으로 배지를 제조하여 실시하였다. 또한, 사용된 은행잎박은 은행잎을 건조후 분쇄하고 추출용매로 GFG성분을 추출한 후 폐기되는 은행잎박으로부터 추출용매를 전부 제거하고 건조한 것을 사용하였다. 추출전과 추출후의 은행잎에 잔류하는 GFG함량은 다음과 같은 방법으로 측정하였다.

1) 추출 전 은행잎

- 은행잎박: 80g

- 70% 메탄올: 720㎖

- 추출액: 612㎖(85%)

- 수율: 20%

- GFG 함량: 3.45%(Q=1.174, K=1.736, I=0.539) (도 5 참조)

2) 추출후 은행잎박

- 은행잎박: 80g

- 70%메탄올: 720㎖

- 추출액: 634㎖(88.2%)

- 수율: 6.19%

- GFG함량: 1.70%(Q=0.59, K=0.84, I=0.27) (도 6 참조)

* 본 발명에 따라 생산된 버섯에서 은행잎 성분을 추출하기 위한 방법

건조 버섯 50g과 70% 메탄올 450ml을 둥근 플라스크(1000ml)에 넣어 물 온도 36도에서 회전시키며 12시간 정도 중탕시켜 추출한 후, 여과하여 여과액을 얻고, 얻어진 여과액을 둥근 플라스크에 넣어 50ml이 되도록 감압 농축한다. 이때 배스(Bath)의 물 온도를 68℃로 세팅한다. 분액 깔떼기에 농축액과 농축액의 80% 양으로 N-butanol을 첨가하여 (이때 사용한 N-butanl은 P.W와 혼합시 상층액을 사용) 흔들어 혼합 후 스탠드에 고정하여 20-30분 후 층분리가 되면 상층a은 보관하고, 하층a은 다시 위와 같은 방법을 1회 더 반복하여 상층b와 하층을 분리한다.(상층a:37-38ml, 하층a: 51-54ml, 상층b: 40-41ml, 하층b:50-54ml)

상층A(상층a와 상층b을 혼합(77-79ml))를 P.W로 세척한다. 이때 사용되는 P.W는 상층 A의 33%의 양으로 한다. 상층 A와 P.W를 분액깔떼기에 넣어 혼합 후 20-30분 후 층이 분리되면 상층B(75-78ml)를 둥근 플라스크에 넣어 감압 농축하여 건조 시킨다. 이때 2-3번 메탄올을 첨가하면서 농축 건조한다.

* 생산된 버섯의 GFG 함량을 측정하기 위한 HPLC 의 측정조건

1. 조건- 온도 25도

용매-메탄올: 물: 빙초산 = 30: 40 :2

유속(Flow): 1 ml/min

UV: 365nm

2. 1.5N Hcl 제조

35wt%Hcl:water=1:6

3. 샘플 제조

상기 농축건조물에 methanol 30ml과 1.5N Hcl 20ml을 첨가 혼합하여 바이알(10ml)에 2/3정도 채운 후 완전 밀봉하여 25분 동안 가수분해시킨 다음, 얼음물에 급냉각시켜 여과한다. (0.45㎛ 필터를 사용)

4. Column

C₁₈ 4㎛ 사용

5. 표준시료 제조

50ml 플라스크(Volumetric Flask)에 Quercetin Dihydrat, Kampferol, Isorhamnetin을 5mg, 5mg, 3mg을 넣은 후 methanol을 첨가하여 눈금에 맞춘 후 마개로 막고 3-5분 정도 초음파로 디게스드(Degased)하여 냉장 보관한다.

6. 실험

용매를 2-3시간 정도 흘려 안정화를 찾은 후 표준 시료를 3번 정도 인젝션(injection) 후 그래프 면적중 가운데 값을 정한다.

샘플을 인젝션하여 각각의 성분 Quercetin Dihydrat, Kampferol, Isorhamnetin의 양을 알고 표준시료와 대비하여 성분들의 양을 알 수 있다.

* GFG 함량 계산방법

샘플 면적의 값/표준시료 면적의 값× 분자량× 표준품량

1)분자량

Quercetin Dihydrat: 2.504

Kampferol: 2.588

Isorhamnetin: 2.437

2)표준품량

-표준시료 제조시 첨가된 Quercetin Dihydrat, Kampferol, Isorhamnetin 각각의 양

3)GFG값

GFG = Quercetin Dihydrat값 + Kampferol값 + Isorhamnetin값

[실시예 1 내지 실시예 3]

표 1에 나타낸 바와 같은 양으로 입자크기 0.1~0.5mm의 건조 은행잎박, 미송 톱밥 및 밀기울 및 패화석을 혼합하고, 물을 첨가하여 850cc의 폴리프로필렌 병에 담아 121℃(1.2㎏/㎠)에서 60분 내지 90분동안 살균하고 20℃ 이하로 냉각시켜 배지를 제조하였다.

크린벤치(class 1000)에서 제조된 배지가 건조중량기준 181g 충전된 850cc PP병에 큰느타리버섯종균을 5~8g의 양으로 접종하고, 온도 15~16℃, 습도 85~95%의 환경에서 29 내지 31일간 배양한 후, 잡균을 선별하고 접종원을 제거하여 온도 16~18℃, 습도 90~95%의 환경에서 7 내지 8일간 발아시켜 발아된 자실체를 온도 14~15℃, 습도 85~90%환경에서 11일 내지 12일간 생육하였다. 생육된 버섯의 GFG성분함량을 측정하였고, 배지의 특성 및 버섯의 생육과정별 특성(버섯 재배시 버섯 균사 생장, 산도, 생육특성, 자실체특성)을 관찰하였다. 그 결과는 표2 내지 6에 제시된다.

균사 생장: 직경 30㎜ 시험관에서 측정

자실체 특성의 경도조건: 거리 10㎜, 속도 1.0㎜/sec, Φ 5㎜

[비교예 1]

은행잎박을 첨가하지 않고 표 1에 제시되는 양으로 조성된 배지를 이용하여 상기 실시예과 같은 방법으로 버섯을 생육하였고, 생육된 버섯을 본 발명의 실험방법에 따라 GFG성분함량을 측정하였고, 배지의 특성 및 버섯의 생육과정별 특성을 관찰하였다, 그 결과는 표 2 내지 6에 제시된다.

처리번호	미송톱밥 (중량%)	밀기울 (중량%)	은행잎박 (중량%)	패화석 (중량%)
실시예1	50	33.2	15	1.8
실시예2	40	33.2	25	1.8
싱실예3	30	33.2	35	1.8
비교예1	65	33.2	0	1.8

처리번호	산도(pH)		수분함량(%)
	멸균 전	멸균 후	멸균 전	멸균 후
실시예1	7.0	6.5	68	67
실시예2	6.9	6.4	69	66
싱실예3	6.9	6.5	64	63
비교예1	7.2	6.7	69	67

처리번호	균사생장(㎜)
	7일	14일	28일
실시예1	11	37	101
실시예2	11	35	98
실시예3	6	27	86
비교예1	13	39	102

은행잎박이 첨가된 실시예의 경우 은행잎박이 첨가되지 않은 비교예 1에 비해 균사생장이 느린 경향이 있었다.

처리번호	균배양일수	초발이소요일수	생육일수	수량(g/병)
실시예1	29	7	11	95.6
실시예2	29	7	11	90.2
실시예3	31	8	12	88.7
비교예1	29	7	11	85.8

실시예 1 내지 실시예 2의 경우 균배양일수는 29~31일로 비교예와 비슷하였지만 실시예 3의 경우 2일정도 지연되었으며, 초발이일수는 7~8일, 생육일수는 11~12일로 비교예 1과 비슷한 경향이었지만, 병당 수량은 비교예에 비해 실시예의 경우 3~12% 증수되었다.

처리번호	대길이(㎜)	대두께(㎜)	갓크기(㎜)	경도(g/㎠)
실시예1	98	45	54	35,062
실시예2	89	50	55	37,601
실시예3	90	48	57	41,065
비교예1	91	45	65	32,156

* 실시예 1 내지 실시예 3은 비교예 1에 비해 갓의 크기는 작은 경향이 있었지만, 실시예 1의 경우 대의 길이가 98㎜로 무처리 91㎜에 비해 길었다. 대의 두께는 비교예 1에 비해 실시예 1 내지 실시예 3은 45~48㎜두꺼운 경향이었다. 대의 경도도 비교예 1의 32,156(g/㎠)에 비해 실시예 1~3의 경우 35,062(g/㎠)~41,065(g/㎠)로 높아 저장 및 유통에 유리한 것으로 조사되었다.

처리번호	컴페롤(%)	퀘르세틴(%)	이소르함네틴(%)	GFG(%)
실시예1	0.116	0.154	0.010	0.280
실시예2	0.117	0.166	0.013	0.296
실시예3	0.064	0.097	0.009	0.170
비교예1	0	0	0	0

* GFG함량(%)=컴페롤+궤르세틴+이소르함네틴(건조버섯 100g 기준)

* 미송 톱밥 단용으로 재배시 버섯에서 GFG은 전혀 검출되지 않았지만, 은행잎박을 첨가한 실시예의 경우 GFG 0.170~0.296%를 함유한 것으로 조사되었다. 건조된 은행잎 100g 추출시 GFG의 함량이 3.45 %임을 감안 할 때 실시예의 배지를 이용하여 재배한 버섯에서 검출된 GFG의 함량은 대단히 높은 것으로, 고 기능성 버섯을 생산할 수 있음을 알 수 있다.

[실시예 4]

입자크기 0.1~0.5mm의 건조 은행잎박, 콘코프, 미강, 소맥피, 밀기울, 패화석을 표 7에 나타난 바와 같은 비율로 혼합하고, 수분함량이 65%가 되도록 물을 첨가하여 배지를 제조하고, 이 배지를 1,100cc병에 담아 121℃에서 60분 내지 90분에서 살균하여 20℃로 냉각시켜 팽이버섯 재배용 배지 조성물을 제조하였다. 상기 배지 조성물에 팽이버섯종균을 접종하고, 온도 15~16℃, 습도 85~95%의 환경에서 29 내지 31일간 배양한 후, 잡균을 선별하고 접종원을 제거하여 온도 16~18℃, 습도 90~95%의 환경에서 7 내지 8일간 발아시켜 발아된 자실체를 온도 14~15℃, 습도 85~90%환경에서 11일 내지 12일간 생육하였다. 생육된 버섯을 본 발명의 실험방법에 따라 GFG성분함량을 측정하였고, 배지의 특성 및 버섯의 생육과정별 특성을 관찰하였다. 그 결과는 표 8 내지 표 10에 제시된다.

[비교예 2]

은행잎박을 첨가하지 않고 표 7에 나타낸 바와 같은 비율로 배지를 제조하여 상기 실시예 4와 같은 방법으로 버섯을 생육하였고, 생육된 버섯을 본 발명의 실험방법에 따라 GFG성분함량을 측정하였고, 배지의 특성 및 버섯의 생육과정별 특성을 관찰하였다, 그 결과는 표 8 내지 표 10에 제시된다.

처리번호	콘코프 (중량%)	미강 (중량%)	밀기울 (중량%)	소맥피 (중량%)	패화석 (중량%)	은행잎박 (중량%)
실시예4	35.7	23.9	5.1	4.6	0.7	30
비교예2	51.0	34.2	7.3	6.5	1.0	0

구 분	비교예 2	실시예 4
초발이소요일수	8～9	10
억제기간	7～10	9～10
생육일수	9～10	12
총 재배일수	24～29	31～32

* 은행잎박 30% 첨가시 무첨가에 비해 초발이 소요일수가 1~2일 더 소요되고, 억제 기간도 2일정도 더 소요되며, 생육일수도 2~3일 더 소요되었다.

구 분	비교예 2	실시예 4
수 량(g/병)	262.8	294.9
대의길이(㎝)	14.5	15.0
갓의크기(㎝)	1.2	1.0
수분함량(%)	86.0	83.7

* 은행잎박 30% 첨가시 무첨가에 비해 대의 길이가 0.5㎝ 더 길어졌고, 갓의 개산은 0.2㎝가 적어지고, 수분함량도 2.3%가 적어 저장에 유리하였고, 수량도 병당 32.1g 증가되었다. 은행잎박 무첨가시 버섯의 색택은 백색에 가까우나, 은행잎박 30%을 첨가할때 미백색을 띠며 윤택이 났다. 또한 수확 후 외부에 3시간 노출시킨 결과 은행잎박 무첨가 배지에서 생산된 팽이버섯의 갓은 주름이 지고, 변형이 왔으나 은행잎박 30% 첨가시 버섯의 갓이 원형을 유지하였다. 성장 과정에서 은행잎박을 30% 첨가한 배지는 은행잎박 무첨가 배지에 비해 기중 균사가 전혀 발생하지 않아 작업 능률을 향상시킬 수 있었다. 생버섯 시식에서도 은행잎박 무첨가 배지에서 생산된 팽이버섯은 곰팡이 냄새가 나고, 씹는 맛이 푸석거렸지만, 은행잎박을 30% 첨가 배지에서 생산된 팽이버섯은 냄새가 없으며, 쫄깃하고 당도가 높고 고소한 맛이 있었다.

버섯종류	컴페롤(%)	퀘르세틴(%)	이소르함네틴(%)	GFG(%)
팽이버섯	0.046	0.062	-	0.108

* GFG함량(%)=컴페롤+퀘르세틴+이소르함네틴(건조버섯 100g 기준)

* 실시예 4의 배지에서 제조한 버섯에서는 높은 GFG 함량( 0.108 %)이 검출되었다.

본 발명에 따르는 배지에 버섯종균을 배양하여 버섯을 생산할 경우 종래의 은행잎박이 첨가되지 않은 배지에서 재배된 일반 버섯보다 GFG함유 버섯의 수량이 3~12% 증수되는 효과를 가지며, 자실체의 경도도 높아 저장 및 유통에 유리한 조건을 가지게 되는 효과를 가진다. 또한, 은행잎에 함유되어 있는 컴페롤, 이소르함메틴 및 퀘르세틴 성분을 포함하는 GFG를 함유하는 버섯이 생산됨으로서 향후 간접적인 약리학적 효과를 기대할 수 있는 기능성 버섯을 제공하는 효과를 가지는 것이다. 또한 추출후 폐자원으로 버려지는 은행잎박을 이용할 수 있는 장점도 있다.

Claims (6)

1. 버섯재배용 고체 배지에 있어서, 배지 성분으로 입자크기 0.1~0.5mm의 건조된 은행잎 또는 은행잎박을 배지 건조중량기준으로 10~40중량%를 함유하고, 고압 살균기에서 121℃에서 60~90분 멸균 후 pH가 6.4~6.7이고, 수분함량이 63~67중량%이며, 생산되는 버섯의 경도를 증가시키는 것을 특징으로 하는 GFG(ginkoflavonglycoside)함유 기능성 버섯 재배용 고체 배지.
2. 제 1항에 있어서, 상기 은행잎 또는 은행잎박의 함량이 15~35중량% 인 것을 특징으로 하는 GFG함유 기능성 버섯 재배용 고체 배지.
3. 제 1항에 있어서 상기 GFG는 컴페롤, 이소르함메틴, 퀘르세틴 또는 이들의 혼합물인 것을 특징으로 하는 GFG함유 기능성 버섯 재배용 고체 배지.
4. 제 1항에 있어서, 상기 은행잎 박은 GFG성분의 추출가공이 행해진 후의 것 임을 특징으로 하는 GFG함유 기능성 버섯 재배용 고체배지.
5. 1) 입자크기 0.1~0.5mm의 건조 은행잎 또는 은행잎박을 배지 건조중량기준 10~40중량% 함유하는 배지 성분을 혼합하고 물을 첨가하는 단계(단계 1), 및

   2) 상기 단계 1로부터 얻어진 혼합물을 내열용기에 충전하여 고압 살균기에 넣고 온도 121℃에서 60~90분 동안 멸균하여 pH 6.4~6.7, 수분함량 63~67중량%의 배지를 제조하는 단계(단계 2)를 포함하는 것을 특징으로 하는 경도가 증가 된 GFG함유 기능성 버섯 재배용 고체 배지의 제조방법.
6. 상기 제 1항의 배지에 의해 생산된 GFG함유 기능성 버섯.

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