KR100837856B1 - 동치미에서 분리한 내산성, 내담즙성 및 항암활성이 우수한 젖산균 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 동치미에서 분리한 내산, 내담즙성 및 항암활성이 우수한 젖산균에 관한 것이다. 보다 상세하게는 한국의 전통 발효식품인 동치미 김치에서 분리한 락토바실러스(Lactobacillus sp.)로 추정되는 젖산균(기탁번호 KCTC 11034BP, 한국생명공학연구원 유전자은행에 2006년 11월 23일 기탁)으로써 내산성, 내담즙성의 소화관내성을 가지고 있을 뿐 아니라 세포독성 (MTT assay) 및 QR 활성이 뛰어난 항암활성이 있는 것으로 밝혀졌다.
본 발명의 균주(KCTC DK250340BP)를 동치미 담글 때 첨가하면 기능 활성이 우수한 동치미 김치를 제공할 수 있을 뿐만 아니라, 다른 김치나 가공식품에도 사용하더라도 기능성이 우수한 식품을 제공할 수 있다.
Description
도 1은 본 발명의 젖산균을 분리하는 공정도를 나타낸다.
도 2는 CHO-K1 Cell line에 대한 1차 선별균주의 세포독성 결과를 나타낸 그래프이다.
도 3은 SNU-C4 Cell line에 대한 1차 선별균주의 세포독성 결과를 나타낸 그래프이다.
도 4는 선별균주의 Quinone reductase activity 분석결과를 나타낸 그래프이다.
본 발명은 동치미에서 분리한 내산, 내담즙성 및 항암활성이 우수한 젖산균에 관한 것이다. 보다 상세하게는 동치미 김치 발효과정 중 분리한 젖산균에서 소 화관 내성이 우수하고 항암활성이 있는 젖산균을 탐색하여 김치 제조에 활용하기 위하여 수행된 발명에 관한 것이다.
동치미란 국물을 많이 부어 담근 무김치로서 전통적으로 동치미를 담그는 방법은 중간 정도 크기의 미끈한 무를 골라 무청을 잘라내고 깨끗이 씻는다. 씻은 무는 소금에 굴려 2일 정도 절여 두었다 건져내고, 무를 절였던 소금에 물을 넣고 간을 맞추어 끓여서 식힌다. 절인 무를 항아리에 차곡차곡 넣고, 생강과 마늘을 썰어 거즈나 망사에 싸서 항아리 가운데 쯤에 넣는다. 삭힌 풋고추를 마늘 옆에 놓고, 그 위를 골파로 눌러 덮은 뒤 무를 더 넣고 대나무 가지를 가로지른다. 그 위에 돌을 얹어 누른 다음 삭힌 소금물을 붓는다. 동치미는 더운 지방보다 추운 지방일수록 맛이 좋고 신선하며, 냉면을 말아 먹는 등 여러 용도로 먹을 수 있다.
본 발명의 균주는 한국의 전통 발효식품인 동치미 김치에서 분리한 락토바실러스(Lactobacillus sp.)로 추정되는 젖산균(기탁번호 KCTC 11034BP, 한국생명공학연구원 유전자은행에 2006년 11월 23일 기탁)으로써 내산성, 내담즙성을 가지고 있을 뿐 아니라 세포독성 (MTT assay) 및 QR 활성이 뛰어나 항암활성이 있는 것으로 밝혀졌다.
본 발명은 동치미 김치 발효과정 중 분리한 젖산균에서 소화관 내성이 우수하고 항암활성이 있는 젖산균을 탐색하여 김치 제조에 활용하고자 하는 목적으로 이루어진 발명에 관한 것이다. 젖산균의 프로바이오틱 기능활성에 관한 많은 보고가 전 세계적으로 지금까지 이루어져 왔는데, 이들은 주로 유제품에 사용되는 젖산균에 대한 보고가 주류를 이루고, 아직까지 기능활성 젖산균주를 이용한 유제품 이 외의 다른 발효제품에 관한 연구보고는 거의 없는 실정이다.
한국의 발효식품의 기능활성과 관련하여 또한 최근 많은 연구가 이루어지고 있는데, 이들 대부분의 연구는 식품성분의 기능활성에 대한 것이고, 발효미생물의 기능활성에 관한 연구결과는 바실러스균을 이용한 청국장과 같은 몇 제품에 국한되고 있다. 따라서 한국의 발효식품으로부터 기능활성 균주를 분리하여 발효식품에 활용을 함으로써 한국의 발효식품의 가치를 증진시킬 수 있는 가능성 모색은 그 의미가 크다 할 수 있으며, 또한 식생활 차이로 인하여 한국인과 외국인의 장내균총의 분포도는 같지 않기 때문에, 한국인에게는 외국에서 수입한 젖산균을 이용하는 것보다 한국의 전통 발효식품에서 분리한 젖산균을 이용하여야 함을 많은 연구자들이 주장하고 있는 실정이다. 본 발명의 목적은 이러한 기능활성을 가지고 있는 젖산균을 동치미 김치 시료로부터 탐색한 후 김치제조에 활용하고자 함에 있다. 특별하게 본 발명과 관련된 종래기술은 없는 실정이다.
본 발명은 동치미 김치 발효과정 중 분리한 젖산균에서 소화관 내성이 우수하고 항암활성이 있는 젖산균을 탐색하여 김치 제조에 활용하는 데 있다.
본 발명은 동치미김치로부터 분리한 신규한 Lactobacillus sp. DK250340 균주를 나타낸다.
본 발명의 신규한 Lactobacillus sp. DK250340 균주는 동치미로부터 분리할 수 있다(도 1 참조).
본 발명의 젖산균은 동치미로부터 일반세균수 측정에 사용된 SPC 배지에 형성된 25-50개의 집락을 모두 분리하는 방법으로 분리하였으며, 기능활성의 측정 후 선발된 미생물이다. 동 미생물의 동정을 위하여 16S rDNA 염기서열 분석방법을 이용 하였으며, 락토바실러스 속(Lactobacillus sp.) DK250340으로 명명하여, 상기 젖산균을 2006년 11월 23일 한국생명공학연구원 유전자은행에 KCTC 11034BP 기탁하였다.
본 발명의 상기 젖산균인 락토바실러스 속(Lactobacillus sp.) DK250340은 소화관 내성 및 항암활성이 우수하다.
본 발명의 상기 젖산균인 락토바실러스 속(Lactobacillus sp.) DK250340은 내산성 및 내담즙성의 소화관 내성이 우수하다.
본 발명의 상기 젖산균인 락토바실러스 속(Lactobacillus sp.) DK250340은 세포독성 및 QR 활성의 항암활성이 우수하다.
본 발명은 Lactobacillus sp. DK250340(KCTC 11034BP) 균주를 함유한 동치미를 포함한다.
본 발명은 Lactobacillus sp. DK250340(KCTC 11034BP) 균주를 식품학적으로 허용하는 범위내에서 식품으로 사용하는 것을 포함한다.
본 발명은 Lactobacillus sp. DK250340(KCTC 11034BP) 균주를 약제학적으로 허용하는 범위내에서 의약품으로 사용하는 것을 포함한다.
이하 본 발명의 내용을 실시예 및 시험예를 통하여 구체적으로 설명한다. 그러나, 이들은 본 발명을 보다 상세하게 설명하기 위한 것으로 본 발명의 권리범위가 이들에 의해 한정되는 것은 아니다.
<실시예 1>
본 발명의 균주를 분리하기 위하여 국내 전통식품 인증업체에서 제조된 동치미를 시료로 정하고, 동치미김치 50리터를 구입하여 한국식품연구원의 실험실로 이송하여 25℃와 5℃에서 각각 발효시키면서 무균적으로 시료를 채취하였다.
채취된 시료는 펩톤액(peptone dilution fluid)을 이용하여 멸균봉투에 넣고 균질(stomacher)화 시킨 후 10배 희석법을 이용하여 식품공전 방법으로 미생물 수 분석과 이화학적 분석을 하였다. 미생물의 분리는 일반세균수 측정에 사용된 표준한천배지(Standard Plate Count agar)로부터 25-50개 정도의 집락을 형성한 plate를 선정, 시료 당 50개 정도의 미생물을 순수 분리하였고, 1차적인 미생물 분류와 균동정을 위하여 집락 및 세포의 형태학적인 성질조사와 Gram staining, Catalase test, Oxidase test를 실시하였다. 동치미 발효과정 중의 미생물 균총 변화와 이화학적 성분변화를 조사한 결과는 표 1에서 볼 수 있는 것과 같다. 25℃ 발효에서는 일반세균수와 유산균수가 3일째에 각각 2.24x108 CFU/ml과 1.18x108 CFU/ml이였고, 5℃ 발효에서는 일반세균 수와 유산균 수가 30일 째에 각각 1.2x107 CFU/ml과 1.3x107 CFU/ml으로 일반세균수와 유산균 수가 최고의 정점을 이루었으며, 유산균 수와 일반세균수가 비슷해지는 양상을 보였다. 대장균은 모든 시료에서 검출되지 않았다(표 1 참조). 적정산도와 pH 값의 변화는 25℃ 발효 중 3일 동안에 가장 크게 변화 하였는데, pH 값은 6.66에서 3.48로 적정산도는 0.01에서 0.46으로 변화하였고, 5℃ 발효에서는 7일 동안에 pH는 발효 전 6.66에서 4.70으로 감소하였고, 적정산도는 0.05 이었다.
표 1 동치미 발효과정중의 미생물 균수 및 이화학적 성분의 변화
ND: not detected
동치미 발효 중 미생물 균총의 변화를 조사한 결과는 표 2에 보여주는 것과 같다. 5℃와 25℃ 두 발효온도 모두에서 발효 전에 나타났던 Gram 음성균은 25℃ 발효에서는 1일 이후 그리고 5℃ 발효에서는 7일 이후에 검출되지 않았고, 25℃ 발효에서는 일주일 이후에 Lactobacillus로 추정되는 Gram 양성, Oxidase 음성, Catalase 음성 간균이 주점종을 이루고 있었으나, 5℃ 발효에서는 한 달간의 발효기간 중 젖산균으로 추정되는 구균과 간균이 계속적으로 같은 비율로 존재하고 있었다(표 2 참조).
표 2. 동치미 발효과정 중의 미생물 균총의 변화 (%)
동치미 발효 중 분리한 250여 젖산균을 이용하여 프로바이오틱 기능 중 내산성 및 내담즙성을 측정하였다. 내산성의 측정은 MRS broth를 이용하여 HCl로 pH를 각각 2, 3으로 조정하여 멸균한 후, 균을 접종하여 생육 유무를 측정하는 방법으로 실시하였고, 내담즙성의 측정은 bile salt를 0.8% 농도까지 첨가한 MRS broth에 균을 접종하여 생육 유무를 측정하였다. 측정결과 pH 2에서 성장하는 균주는 없었으며, pH 3에서 내성을 지닌 균주가 144주, 0.8% bile salt에서 생존하는 균주가 12주가 있었으며, 이들 균주 중 pH 3에서 자라고, 08%의 bile salt에서 생육하는 4주를 (DK50710, DK51406, DK250324, DK250340) 선별하였다.
<실시예 2>
선별된 젖산균의 in vitro 항암능을 조사하기 위하여 암세포 치사 활성 효과는 MTT assay로 발암물질 억제능은 QR(Quinone reductase)assay를 통해 확인하였다. 병리학적 소견상 정상세포주 인 CHO-K1 세포와 사람에서 분리한 대장암 세포주인 SNU-C4 세포에 분리 젖산균 DK50710, DK51405, DK250324, DK250340룰 처리하여 단기세포 독성을 평가하는 MTT assay를 수행한 결과는 도 2와 도 3에서 보여주는 것과 같이 CHO-K1세포에 대해서는 DK250340 균주가 가장 높은 세포독성을 나타냈으나, 모든 균주가 25% 이하의 세포 독성을 나타냈으며, SNU-C4 세포에 대해서는 DK50710를 제외한 DK51405, DK250324, DK250340, DK51405이 세가지 균주가 50 mg/ml로 처리시 모두 30% 이상의 세포 독성을 나타내는 것으로 확인되었다.
많은 암 예방 또는 항암 물질이 제 2상계 효소계를 활성화 시킨다는 사실에 근거하여 젖산균 시료에 대한 제 2상계효소 인 Quinone reductase (QR) 효소활성 변화를 측정하였다. QR 활성의 측정은 각각의 시료를 처리하여 배양한 간세포로부터 cytosol 분획을 얻어 측정하는 방법으로 실시하였다. Intact cell에서의 QR 활성 측정을 위하여 Hepa1c1c7 세포를 3 X 104 ml 로 분주 한 후 24시간 배양하였고, MTT assay에 사용한 시료를 1mg/ml로 첨가하여 48시간 동안 배양하였다. 이 시료를 찬 PBS buffer로 2회 세척하고, PBS buffer를 1 ml 첨가하여 세포를 긁어 E-tube에 수집한 후, sonication하였고, 원심 분리하여 상등액을 취하여 -70℃에 보관하면서 단백질 정량 (Lowry method)하였다. QR 활성의 측정은 25℃에서 250mM Tris HCl (pH 7.4), BSA (70mg/30ml), 0.1% (V/V) tween 20, 500uM FAD, 2mM NADH 용액에 세 포추출액 0.2 ml를 첨가한 후, 400 uM DCPIP (즉시 제조 사용) 0.3ml을 cuvette에 넣고 1초 간격으로 2분간 600nM에서 흡광도를 측정하였다 (37℃유지). QR 활성을 측정한 결과는 도 4에 나타 낸 것과 같다. DK 250340 균주는 102 unit으로 무처리군 62 unit보다 2배 정도 높은 활성을 보임을 알 수 있다.
이상과 같이 동치미에서 분리한 젖산균들을 이용하여 건강기능 활성 능력에 대한 조사 결과 DK250340 균주는 내산성, 내담즙성을 가지고 있을 뿐 아니라 세포독성 (MTT assay) 및 QR 활성이 뛰어나 항암활성이 있는 것으로 밝혀졌다. 따라서 DK250340 균주를 동치미에 첨가하였을 경우 기능활성 동치미의 제조가 가능하리라 본다. 16S rDNA 염기서열 분석방법에 의하여 Lactobacillus sp.로 동정된 DK250340 균주는 한국생명공학 연구원 유전자은행에 2006년 11월 23일, 기탁번호 KCTC 11034BP로 동 균주에 대한 특허균주 기탁이 완료되었다.
<적용예>
10∼15cm 크기의 무를 골라 무청을 잘라내고 깨끗이 세척한다. 소금과 정제수를 1 : 20의 비율로 만든 식염수를 끓인 후 냉각시켜 식염수를 얻는다. 무를 용기에 순차적으로 쌓고, 잘게 자른 생강과 마늘을 망사에 싸서 용기의 가운데에 넣는다. 숙성시킨 고추와 대파를 넣고 대나무 가지를 가로지른 후, 그 위에 돌을 얹어 누른 다음 식염수를 붓고 노지에서 3개월 정도 숙성시켜 동치미를 얻는다.
상술한 바와 같이, 본 발명의 바람직한 실시예를 참조하여 설명하였지만 해당 기술 분야의 숙련된 당업자라면 하기의 특허청구범위에 기재된 본 발명의 사상 및 영역으로부터 벗어나지 않는 범위 내에서 본 발명을 다양하게 수정 및 변경시킬 수 있음을 이해할 수 있을 것이다.
동치미 김치의 발효과정 중에 분리한 젖산균은 소화관 내성과 항암활성이 우수하여 김치 제조에 활용될 뿐만 아니라, 식품 또는 의약품에 제공될 수 있다.
Claims (6)
- 동치미김치로부터 분리한 신규한 Lactobacillus sp. DK250340 균주 (KCTC 11034BP).
- 제1항에 있어서, 소화관 내성 및 항암활성이 우수한 것을 특징으로 하는 Lactobacillus sp. DK250340 균주 (KCTC 11034BP).
- 제 2항에 있어서, 소화관 내성은 내산성 및 내담즙성인 것을 특징으로 하는 Lactobacillus sp. DK250340 균주 (KCTC 11034BP).
- 제 2항에 있어서, 항암활성은 세포독성 및 QR 활성이 우수한 것을 특징으로 하는 Lactobacillus sp. DK250340 균주 (KCTC 11034BP).
- Lactobacillus sp. DK250340 균주 (KCTC 11034BP)를 포함하는 동치미.
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|---|---|---|---|---|
| KR101145432B1 (ko) * | 2009-11-10 | 2012-05-15 | 한국식품연구원 | 젖산발효용 터키형 물김치 조성물 및 이의 제조 방법 |
Citations (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR970019917A (ko) * | 1995-10-12 | 1997-05-28 | 김광희 | 동치미 맛이 나는 발효음료의 제조방법 |
| KR20010100315A (ko) * | 2000-04-17 | 2001-11-14 | 정기련 | 자일로스와 자일리톨을 이용한 김치의 저장기간 연장 방법 |
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Patent Citations (2)
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| KR970019917A (ko) * | 1995-10-12 | 1997-05-28 | 김광희 | 동치미 맛이 나는 발효음료의 제조방법 |
| KR20010100315A (ko) * | 2000-04-17 | 2001-11-14 | 정기련 | 자일로스와 자일리톨을 이용한 김치의 저장기간 연장 방법 |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR101145432B1 (ko) * | 2009-11-10 | 2012-05-15 | 한국식품연구원 | 젖산발효용 터키형 물김치 조성물 및 이의 제조 방법 |
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