KR100780666B1 - An extract from Dryopteris crassirhizoma for prevention and remedy of an acne and a composition of cosmetic including the extract - Google Patents

An extract from Dryopteris crassirhizoma for prevention and remedy of an acne and a composition of cosmetic including the extract Download PDF

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Abstract

본 발명은 관중(貫衆, Dryopteris crassirhizoma)에 물, 친수성 유기용매, 물과 친수성 유기용매의 혼합용매, 2종 이상의 친수성 유기용매의 혼합용매 중에서 선택된 어느 하나의 용매를 첨가하여 추출된 여드름 예방 및 치료용 관중 추출물과 상기 관중 추출물을 함유하는 여드름 피부용 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명에 의하면 천연 식물인 관중을 이용하여 여드름 증상을 악화시키는 주요 병원균인 프로피오니박테리움 아크네(Propionibacterium acnes)의 생육을 억제함으로써, 기존의 여드름 치료방법에 비하여 부작용이 없고, 지속적 사용이 가능하면서도 안전성이 우수한 여드름 피부용 화장료 조성물을 얻을 수 있다.The present invention is to prevent acne extracted by adding any one solvent selected from water, a hydrophilic organic solvent, a mixed solvent of water and a hydrophilic organic solvent, a mixed solvent of two or more hydrophilic organic solvents ( Dryopteris crassirhizoma ) and It relates to a therapeutic spectral extract and a cosmetic composition for acne skin containing the spectral extract. According to the present invention by inhibiting the growth of propionibacterium acnes , a major pathogen that aggravates acne symptoms using a spectator that is a natural plant, there is no side effect compared to the conventional acne treatment method, and it is possible to use continuously. A cosmetic composition for acne skin having excellent safety can be obtained.

관중, Dryopteris crassirhizoma, 여드름, 화장료 Spectators, Dryopteris crassirhizoma, Acne, Cosmetics

Description

여드름 예방 및 치료용 관중 추출물 및 이를 함유하는 여드름 피부용 화장료 조성물{An extract from Dryopteris crassirhizoma for prevention and remedy of an acne and a composition of cosmetic including the extract}An extract from dryopteris crassirhizoma for prevention and remedy of an acne and a composition of cosmetic including the extract}

본 발명은 관중(貫衆, Dryopteris crassirhizoma)에 물, 친수성 유기용매, 물과 친수성 유기용매의 혼합용매, 2종 이상의 친수성 유기용매의 혼합용매 중에서 선택된 어느 하나의 용매를 첨가하여 추출된 여드름 예방 및 치료용 관중 추출물과 상기 관중 추출물을 함유하는 여드름 피부용 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention is to prevent acne extracted by adding any one solvent selected from water, a hydrophilic organic solvent, a mixed solvent of water and a hydrophilic organic solvent, a mixed solvent of two or more hydrophilic organic solvents ( Dryopteris crassirhizoma ) and It relates to a therapeutic spectral extract and a cosmetic composition for acne skin containing the spectral extract.

여드름의 발병은 유전적, 환경적 요인 외에 체내 호르몬 분비의 변화로 인한 활발한 피지 생성, 모낭 피지선의 비정상적인 각질화(hyperkeratinization)로 인한 모공의 폐쇄, 여드름균의 활성화 및 여드름균에 의해 유발되는 피부 염증반응의 네 가지 주요 원인과 이들 간의 상호작용에 의한다.The development of acne, in addition to genetic and environmental factors, leads to active sebum production due to changes in hormone secretion in the body, pore closure due to abnormal hyperkeratinization of hair follicle sebaceous glands, activation of acne bacteria and skin inflammatory reactions caused by acne bacteria. Four major causes and their interactions.

따라서 피지 생성을 억제하는 항안드로겐제, 항염제로 작용하는 비스테로이드 소염제, 항균효과가 있는 레조시놀, 유황 및 벤조일 퍼옥사이드와 항생효과가 있는 테트라사이클린, 에리스로마이신, 클린다마이신 및 머크로라이드 등에 의한 여드름균 활성 억제 방법과 레티노익산 등의 비타민 A 유도체를 이용한 치료법 등 이 여드름 치료방법으로 이용되고 있다.Therefore, acne from anti-androgens that inhibit sebum production, non-steroidal anti-inflammatory drugs that act as anti-inflammatory agents, resorcinol, sulfur and benzoyl peroxides that have antibacterial effects, and tetracycline, erythromycin, clindamycin, and mercuride that have antibiotic effects Methods of inhibiting fungal activity and treatment using vitamin A derivatives such as retinoic acid are used as acne treatment methods.

그러나, 이러한 기존의 여드름 치료 방법은 효능이나 피부 안전성 측면에 있어서 여러 가지 문제점이 있어 왔다. 호르몬제의 사용은 표피의 생장억제나 호르몬 남용 등의 역효과를 유발할 수 있다고 보고된 바 있고, 레티노익산과 벤조일 퍼옥사이드 등은 기형아 출산, 피부 자극, 접촉성 피부염 발병 등의 우려가 있으며, 클린다마이신 등의 항생물질은 내성균의 출현, 알러지 반응, 광과민 반응 등의 부작용을 나타내는 것으로 보고되고 있다. However, these conventional acne treatment methods have a number of problems in terms of efficacy or skin safety. The use of hormonal agents has been reported to cause adverse effects such as growth inhibition of the epidermis and hormonal abuse. Retinoic acid and benzoyl peroxide may cause birth defects, skin irritation, contact dermatitis, and clindamycin. Antibiotic of has been reported to have side effects such as emergence of resistant bacteria, allergic reactions, photosensitivity reactions.

한편, 여드름 치료는 단기간에 이루어지는 것이 아니라 꾸준하고 지속적인 치료가 요구되는 것이어서 상기 문제점을 지닌 여드름 치료 방법은 단기간의 사용이나 한정된 범위 내의 사용만 가능할 뿐이었다.On the other hand, acne treatment is not a short-term, but a steady and continuous treatment is required, so the acne treatment method with the above problems was only available for a short time or a limited use.

이에 대해, 최근에는 식물을 비롯한 천연자원으로부터 상기 부작용들을 줄이고 지속적으로 사용할 수 있으며 인체에 무해하면서도 강력한 항여드름균 효과를 갖는 유효성분들을 탐색하는 연구가 활발하게 진행되고 있다. 국내에서는 상황버섯, 녹차 및 황금, 버드나무, 삼백초, 감초 및 어성초 추출물을 여드름 치료에 관련된 기능성 화장품 및 비누의 원료로 사용하고 있고, 천연물 유래의 화학물질을 이용한 항여드름균 효능의 화장품 원료개발도 진행되고 있다. 그러나, 그 효과가 기존의 여드름 치료 물질에 비해 매우 약하거나, 여드름 치료에 관련된 유효물질의 대량 생산이 어려운 문제점이 있다. In recent years, researches actively searching for effective ingredients that reduce the side effects from natural resources including plants and can be continuously used, and have a strong anti-acne bacterium effect, are in progress. In Korea, extracts of situational mushrooms, green tea, and golden, willow, licorice and licorice are used as raw materials for functional cosmetics and soaps related to acne treatment. It's going on. However, the effect is very weak compared to the conventional acne treatment material, there is a problem that the mass production of active substances related to acne treatment is difficult.

특히 천연물은 다양한 성분이 복합적으로 구성되어 있어서 유효활성물질의 분리, 정제방법이 목적하는 활성물질의 물리화학적 성질에 따라 다르고, 또 여러 가지 서로 다른 원리에 근거한 분리, 정제 방법 중에서도 적절한 방법을 효과적으로 조합하여 사용하여야 하므로 천연물로부터 항여드름균 활성을 지니는 물질을 추출분리하는 데에는 많은 어려움이 있다.In particular, natural products are composed of various components, and the method of separating and purifying effective active substances depends on the physicochemical properties of the active substances, and among the methods of separation and purification based on several different principles, it is possible to effectively combine appropriate methods. There is a lot of difficulty in extracting and separating substances having anti acne activity from natural products.

한편, 관중(貫衆, Dryopteris crassirhizoma)은 고사리목 면마과의 여러해살이풀로서, 한국, 일본, 사할린, 쿠릴열도, 중국 동북부 등지에 분포하는 양치식물이다. 관중의 주요 성분으로는 17-α(H)-trisnorhopanone, 17-β(H)-trisnorhopanone, campesterol, diplopterol, dryocrassin, dryocrassin ABBA, dryocrassin ABBP, dryocrassol, dryocrassyl acetate, fernene, fern-9(11)-en-12-one, flavaspidic acid, hop-22(29)-ene, isoadiantone이 있다. 어린 잎을 식용으로 사용하고, 한방에서는 뿌리줄기를 약재로 사용한다. 관중은 구충작용, 해열, 해독작용, 감기바이러스 억제작용, 항균·항암작용을 나타내며, 관중을 달인 물은 피부 진균에 대해 억제작용을 나타내는 것으로 알려져 있다. 또한, 관중은 자궁흥분작용, 지혈작용, 진통작용, 소염작용을 나타낸다는 것이 보고되었다. Meanwhile, the crowd (Dry, Dryopteris) crassirhizoma ) is a perennial herb of ferns, and is a fern plant in Korea, Japan, Sakhalin, Kuril Islands, and northeastern China. The main components of the audience are 17-α (H) -trisnorhopanone, 17-β (H) -trisnorhopanone, campesterol, diplopterol, dryocrassin, dryocrassin ABBA, dryocrassin ABBP, dryocrassol, dryocrassyl acetate, fernene, fern-9 (11)- en-12-one, flavaspidic acid, hop-22 (29) -ene, and isoadiantone. Young leaves are used for edible, and oriental medicine uses root stem as a medicine. The spectators exhibit antiparasitic activity, antipyretic effect, detoxification effect, cold virus suppression effect, antibacterial and anticancer activity, and the water decoction is known to exhibit inhibitory action against skin fungi. It has also been reported that the spectators exhibit uterine excitability, hemostatic action, analgesic action and anti-inflammatory action.

그리고, 일본 공개특허 특개평 5-331041호에서는 관중을 비롯한 석류나무 껍질 등의 천연물로부터 미백작용에 유효한 성분을 추출하여 제조한 미백 화장료가 개시되어 있다. 여기서는 건조된 관중 10g에 메탄올 또는 50% 메탄올 수용액 300㎖를 첨가하여 교반하면서 5일간 방치하여 여과한 후, 동결건조하여 획득한 관중 추출물로부터 화장료 조성물을 제조하여 티로시나아제의 활성을 저해하는 정도를 측정함으로써, 관중 추출물의 티로시나아제 저해 효과를 미백 화장료에 이용하는 용도에 대해 개시하고 있다.In Japanese Patent Laid-Open No. 5-331041, a whitening cosmetic prepared by extracting an ingredient effective for whitening from natural products such as pomegranate bark and the like is disclosed. In this case, 300 g of methanol or 50% methanol aqueous solution was added to 10 g of the dried tube, the mixture was left to stir for 5 days, filtered, and then the cosmetic composition was prepared from the spectral extract obtained by freeze-drying to inhibit the activity of tyrosinase. By measuring, the use of the tyrosinase inhibitory effect of the spectral extract for whitening cosmetics is disclosed.

그러나, 관중이 여드름균에 대해 강한 활성을 나타낸다는 사실이나 여드름 예방 및 치료에 효과가 좋다는 사실은 여태까지 보고된 바 없고, 관중으로부터 여드름 예방 및 치료에 유효한 성분을 추출하여 이를 여드름 피부용 화장료로 사용하는 기술은 개시된 바 없었다.However, the fact that the spectators show strong activity against acne bacteria or that it is effective for the prevention and treatment of acne has not been reported so far, and extracts the ingredients that are effective for the prevention and treatment of acne from the audience and use them as cosmetics for acne skin. No technique has been disclosed.

이에 본 발명은 기존의 여드름 치료방법과 관련된 부작용을 최소화하고, 지속적 사용이 가능하면서도 안전성이 우수한 방법으로 여드름을 예방 및 치료하기 위한 관중의 새로운 용도를 제공함을 목적으로 한다.Accordingly, an object of the present invention is to minimize the side effects associated with existing acne treatment methods, and to provide a new use of the crowd for preventing and treating acne in a way that can be continuously used and has excellent safety.

특히, 본 발명은 프로피오니박테리움 아크네(Propionibacterium acnes)의 생장을 억제하는 관중 추출물의 용도를 제공함을 목적으로 한다.In particular, it is an object of the present invention to provide a use of the spectral extract to inhibit the growth of Propionibacterium acnes .

또한, 본 발명은 관중 추출물을 함유하는 여드름 피부용 화장료 조성물을 제공함을 본 발명의 목적으로 한다.It is also an object of the present invention to provide a cosmetic composition for acne skin containing the spectral extract.

본 발명의 관중 추출물은 관중으로부터 침출, 전출한 것, 또는 침출액을 다시 일부 또는 전부 농축한 것, 또는 그 농축물을 다시 건조하여 제조한 침제, 전제, 정기, 유동 엑기스 등과, 관중 그 자체에 함유되어 있고 주 효과를 발휘하는 화학 물질 그 자체도 포함하는 개념이다.The spectral extract of the present invention is contained in the spectator itself, leaching, elution from the spectral part, or re-condensation of some or all of the leachate, or acupuncture, premise, regular, flow extract, etc. prepared by drying the concentrate again. It is a concept that includes the chemical itself, which is used and has a major effect.

바람직한 본 발명의 관중 추출물은 관중에 소정의 추출용매를 가하여 관중으로부터 여드름 예방 및 치료효과를 나타내는 성분 또는 프로피오니박테리움 아크네(Propionibacterium acnes)의 생장을 억제하는 성분을 고-액추출(固液抽出, solid-liquid extraction)하여 얻어진 관중 1차 추출물이 될 수 있다.The preferred spectral extract of the present invention is a high-liquid extract of a component that inhibits the growth of propionibacterium acnes or a component that exhibits an acne prevention and treatment effect by adding a predetermined extraction solvent to the spectator. It can be the primary extract in the tubes obtained by solid-liquid extraction.

본 발명의 상기 관중은 완전히 건조한 후 분쇄하여 준비한 것이고, 본 발명의 관중 추출물은 상기 관중에 메탄올, 에탄올 등의 친수성 유기용매, 또는 친수성 유기용매와 물의 혼합 용액을 추출용매로 첨가하여 일정 시간 침적시키면서 적절한 시간 간격으로 교반한 후 얻어진 용액을 여과하여 회수하는 통상의 천연물 추출방법에 따라 얻을 수 있다.The spectral of the present invention is prepared by completely drying and then pulverizing, the spectral extract of the present invention is added to the hydrophilic organic solvent, such as methanol, ethanol, or a mixed solution of a hydrophilic organic solvent and water as an extraction solvent while being deposited for a predetermined time After stirring at appropriate time intervals, the obtained solution can be obtained according to the usual natural product extraction method by filtration.

바람직한 추출용매로는 탄소수 1 내지 4인 무수 또는 함수 메탄올, 에탄올, 프로필알코올, 부틸알코올, 글리세린, 프로필렌글라이콜 및 부틸렌글라이콜, 물을 포함한 용매군 중에서 선택된 하나의 순수용매 또는 둘 이상이 조합된 혼합용매가 이용될 수 있고, 식물 재료에 가해지는 추출용매의 양은 식물 재료 전체 부피 대비 1 내지 50배 정도로 할 수 있다.Preferred extraction solvents include one or more pure solvents selected from the group consisting of anhydrous or hydrous methanol having 1 to 4 carbon atoms, ethanol, propyl alcohol, butyl alcohol, glycerin, propylene glycol and butylene glycol, and water. Combined mixed solvents may be used, and the amount of extractant added to the plant material may be about 1 to 50 times the total volume of the plant material.

보다 바람직하게는, 본 발명의 관중 1차 추출물의 추출용매로는 무수 메탄올, 함수 메탄올, 무수 에탄올 및 함수 에탄올 중에서 선택된 하나의 순수용매 또는 상기 메탄올의 1종과 상기 에탄올의 1종의 혼합용매를 사용함이 바람직하다.More preferably, as the extraction solvent of the primary extract of the present invention, one pure solvent selected from anhydrous methanol, hydrous methanol, anhydrous ethanol and hydrous ethanol, or a mixed solvent of one of the methanol and one of the ethanol It is preferable to use.

이때, 상기 추출용매의 첨가량은 관중 건조 중량 1g당 5~20㎖로 함이 바람직하다. 1차 추출은 실온에서 1~7일간 침적 추출하거나 50~95℃의 가온 조건에서 1~5시간 정도 추출하는 방법 등 종래의 일반적인 용매추출방법으로 할 수 있다.At this time, the amount of the extraction solvent is preferably 5 to 20ml per 1g dry weight in the tube. Primary extraction may be performed by a conventional general solvent extraction method, such as extraction by immersion at room temperature for 1 to 7 days or extraction for about 1 to 5 hours at a heating condition of 50 ~ 95 ℃.

본 발명에 의하면, 관중으로부터 여드름 예방 및 치료와 관련된 유효 성분의 손실을 최소화하면서, 유효 성분의 효능을 최대화할 수 있다.According to the present invention, it is possible to maximize the efficacy of the active ingredient while minimizing the loss of the active ingredient associated with acne prevention and treatment from the crowd.

나아가, 본 발명의 관중 추출물은 상기 고-액추출에 의해 얻어진 관중 1차 추출물에 새로운 용매를 첨가하여 액-액추출(液液抽出, liquid-liquid extraction)법에 의해 여드름 예방 및 치료효과를 지니는 유효 성분을 추출하여 얻어진 2차 추출물이 될 수 있다.In addition, the spectral extract of the present invention has the effect of preventing and treating acne by the liquid-liquid extraction method by adding a new solvent to the spectral primary extract obtained by the solid-liquid extraction. It may be a secondary extract obtained by extracting the active ingredient.

액-액추출은 주로 유효성분물질의 활성도를 높이거나 그 성분만을 분리, 정제하기 위해 통상 각종 용매와의 분배평형의 성질을 이용하는데, 2차 추출용매로서 에틸아세테이트, 헥산, 클로로포름, 부탄올 등을 사용할 수 있다. 본 발명에서는 액-액추출을 위해 2차 추출용매로서 헥산을 이용함으로써 여드름 예방 및 치료효과를 지니는 유효 성분물질의 분리도 또는 활성도를 증가시킨 것을 특징으로 한다.Liquid-liquid extraction usually uses distribution equilibrium with various solvents in order to increase the activity of the active substance or to separate and purify only its components. As a secondary extraction solvent, ethyl acetate, hexane, chloroform, butanol, etc. Can be used. In the present invention, by using hexane as a secondary extraction solvent for liquid-liquid extraction, the separation or activity of the active ingredient having an acne prevention and treatment effect is increased.

즉, 본 발명에 의한 관중 1차 추출물로부터 여드름 예방 및 치료효과를 지니는 유효 성분의 활성도를 더 높이기 위해 본 발명의 관중 추출물은 상기 고-액추출에 의해 얻어진 관중 1차 추출물을 증류수에 완전히 용해시켜 수용액을 만들고, 상기 수용액에 헥산(hexane)을 첨가하여 상기 헥산층에 유효 성분물질이 용출되도록 하는 분배과정을 거친 다음, 상기 유효 성분물질이 용출된 헥산층을 회수하고, 이로부터 헥산을 제거하여 여드름 예방 및 치료효과를 나타내는 성분이 포함된 관중 2차 추출물이 될 수 있다.That is, in order to further increase the activity of the active ingredient having an acne prevention and treatment effect from the primary extract of the present invention, the spectral extract of the present invention completely dissolves the primary extract of the tube obtained by the solid-liquid extraction in distilled water. After making an aqueous solution, the hexane (hexane) is added to the aqueous solution and a distribution process for eluting the active ingredient material in the hexane layer, and then recovering the hexane layer eluting the active ingredient material, to remove the hexane from It can be a secondary extract of spectators containing ingredients that have an effect on preventing and treating acne.

본 발명의 여드름 피부용 화장료 조성물은 상기 관중 추출물로부터 유래하는 여드름 예방 및 치료효과가 있는 유효 성분물질을 포함하는 것을 특징으로 하고, 상기 관중 추출물의 함량은 0.001~20중량%인 것이 바람직하며, 0.5~10중량%인 것이 더욱 바람직하다. 이는 20중량% 이상의 고농도에서는 피부자극 및 독성 등의 부작용을 유발할 수 있으며, 0.001중량% 이하의 저농도에서는 효과가 약하기 때문이다.The cosmetic composition for acne skin of the present invention is characterized in that it comprises an active ingredient which has a preventive and therapeutic effect of acne derived from the spectral extract, the content of the tract extract is preferably 0.001 to 20% by weight, 0.5 ~ More preferably, it is 10 weight%. This may cause side effects such as skin irritation and toxicity at high concentrations of more than 20% by weight, because the effect is weak at low concentrations of less than 0.001% by weight.

본 발명의 화장료 조성물은 상기의 관중 추출물 이외에도 필요에 따라, 본 발명의 효과를 저하하지 않는 범위 내에서 화장료에 일반적으로 사용하는 각종 성분, 예를 들면, 수용성 성분, 분말 성분, 유분, 계면활성제, 보습제, 점도조절제, 방부제, 산화방지제, 향료, 색소 등을 배합하는 것이 가능하다.The cosmetic composition of the present invention, in addition to the above-mentioned extract in the spectators, if necessary, various components generally used in cosmetics, such as water-soluble components, powder components, oil, surfactants, It is possible to mix a moisturizer, a viscosity modifier, a preservative, an antioxidant, a fragrance, and a pigment.

본 발명의 상기 관중 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 화장품 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 더욱 상세하게는 유연 화장수, 수렴 화장수, 영양 화장수, 로션, 영양 크림, 마사지 크림, 유액상 화운데이션, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이, 비누 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.Cosmetic compositions containing the extracts of the present invention of the present invention may be prepared in any formulation commonly prepared in the cosmetic industry, for example, solutions, suspensions, pastes, gels, creams, lotions, powders, soaps, oils, Powder foundations, emulsion foundations, wax foundations and sprays and the like can be formulated, but is not limited thereto. More specifically, it is prepared in the form of a flexible lotion, astringent lotion, nourishing lotion, lotion, nourishing cream, massage cream, latex foundation, essence, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, spray, soap or powder Can be.

본 발명의 관중 추출물은 여드름 피부용 화장료 조성물 이외에도 여드름 피부용 외용제로도 이용될 수 있다.The spectral extract of the present invention can be used as an external preparation for acne skin in addition to the cosmetic composition for acne skin.

이하, 보다 구체적인 실시예를 들어 본 발명에 대해 상세히 설명하지만, 본 발명이 이하 실시예로만 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to more specific examples, but the present invention is not limited only to the following examples.

[[ 실시예Example 1] 관중 준비 및 관중 1차 추출물의 제조 1] Preparation of Spectators and Preparation of Spectrum Primary Extracts

관중은 시중에 판매되는 건조 상태의 전초를 구입하여 분쇄기를 이용하여 분말로 만들어 준비하였다.The crowd purchased dry outposts sold in the market and prepared the powder using a grinder.

준비된 관중 1㎏에 메탄올 10ℓ를 넣고, 실온에서 3시간 동안 300rpm으로 교반하면서 추출하였다. 그 다음 여과지를 이용하여 추출용액을 여과하여 회수한 후, 회수된 용액을 냉각콘덴서가 달린 증류장치를 이용하여 47℃에서 감압농축하여 관중 1차 추출물을 제조하였다.10 L of methanol was added to 1 kg of the prepared tube, followed by extraction with stirring at 300 rpm for 3 hours at room temperature. Then, the extraction solution was collected by filtration using filter paper, and the recovered solution was concentrated under reduced pressure at 47 ° C. using a distillation apparatus equipped with a cooling capacitor to prepare a primary extract in the tube.

그리고, 상기 메탄올 대신 에탄올을 첨가하여 동일한 방법에 의해 관중 2차 추출물을 제조하였다.Then, ethanol was added instead of methanol to prepare a secondary extract in the same manner by the same method.

[[ 실시예Example 2] 관중 2차 추출물의 제조 2] Preparation of Spectral Secondary Extracts

상기 용매를 완전히 제거한 상태의 관중 1차 추출물을 증류수에 완전히 용해시켜 수용액을 만든 다음, 이 용액을 분별깔때기에 넣고 동 부피의 헥산(n-Hexane)을 첨가하였다. 이때, 두 용매가 잘 섞이도록 분별깔때기를 충분히 흔들어 헥산층에 물질이 충분히 추출될 수 있도록 하였다. 충분히 흔들어준 분별깔때기를 거치대에 고정시켜서 두 층이 분리될 때까지 정치하여 둔 후, 각각을 회수한 다음, 증류수층을 다시 분별깔때기에 넣어 상기 과정을 반복수행하여 헥산층만을 회수하였다.회수된 헥산층은 회전 감압 농축기를 이용하여 용매를 완전히 제거함으로써 관중 2 차 추출물을 제조하였다.The primary extract of the tube in the state of completely removing the solvent was completely dissolved in distilled water to make an aqueous solution. The solution was then placed in a separatory funnel and the same volume of hexane (n-Hexane) was added. At this time, the separation funnel was shaken sufficiently so that the two solvents were well mixed so that the material could be sufficiently extracted in the hexane layer. After sufficiently shaking the separatory funnel fixed to the holder and allowed to stand until the two layers were separated, each of them was recovered, and the distilled water layer was placed in the separatory funnel again to repeat the above process to recover only the hexane layer. The hexane layer prepared a secondary extract in the tube by completely removing the solvent using a rotary vacuum concentrator.

[[ 시험예Test Example ] ]

1. One. 사용균주Use strain , 배지 및 배양조건, Medium and culture conditions

본 발명에 사용된 균주는 여드름의 원인균인 Propionibacterium acnes KCTC3314이고, 이들 균주는 한국유전자 은행에서 분양받아 사용하였다.The strain used in the present invention is Propionibacterium which is the cause of acne acnes KCTC3314, these strains were used by the Korea Gene Bank.

여드름균의 배양 배지는 Reinforced clostridial (RC) 배지(Merck, Germany)를 사용하였고, P. acnes는 4℃에서 보관하면서 실험 3일 전에 활성화했다. 균을 배양 배지에 접종한 후 anaerobic jar에서 Gaspack system (Merck AnaerocultGaspack system, Germany)을 이용하여 밀봉한 다음, 37℃의 인큐베이터에서 3일 동안 혐기성 배양하였다.Reinforced clostridial (RC) medium (Merck, Germany) was used as a culture medium for acne bacteria, and P. acnes was activated 3 days before the experiment while stored at 4 ° C. The bacteria were inoculated in the culture medium and sealed in an anaerobic jar using a Gaspack system (Merck AnaerocultGaspack system, Germany), followed by anaerobic culture for 3 days in an incubator at 37 ℃.

2. 여드름균에 대한 항균 활성 측정2. Determination of antimicrobial activity against acne

항균 활성 측정은 디스크 확산법(paper disk diffusion method)과 최소억제농도(Minimum inhibitory concentration : MIC)를 사용하여 평가하였다.Antimicrobial activity was measured using the paper disk diffusion method and the minimum inhibitory concentration (MIC).

(1) 디스크 확산법(paper disk diffusion method)(1) paper disk diffusion method

균주를 Reinforced clostridial(RC) 액체배지에서 3일간 배양한 다음, 균 현탁액을 일정한 농도(optical density 620 nm에서 흡광값 0.5)로 조절한 것을 멸균된 면봉을 이용하여 RC 한천플레이트(agar plate)에 균일하게 도말하였다. 플레이 트를 건조시킨 후, paper disk(Φ 8mm, Adventec. USA)를 균주를 접종한 플레이트 표면 위에 올려놓고 관중 1차 또는 2차 추출물을 DMSO에 희석하여 250~500㎍/50㎕/disk씩 흡수시켰다. 시료가 처리된 플레이트를 anaerobic jar에서 Gaspack system을 이용하여 3일간 배양한 후 디스크 주위의 생육 억제환(inhibition zone)의 크기로 항균 활성을 측정하였다.The strain was incubated in a Reinforced clostridial (RC) liquid medium for 3 days, and then the bacterial suspension was adjusted to a constant concentration (absorption value at 0.5 at an optical density of 620 nm) to agar plate using a sterile swab. She said. After drying the plate, paper disk (Φ 8mm, Adventec. USA) was placed on the plate surface inoculated with the strain, and the primary or secondary extract of the tube was diluted in DMSO and absorbed by 250 ~ 500㎍ / 50μl / disk. I was. The plate treated with the sample was incubated in an anaerobic jar using a Gaspack system for 3 days, and then the antimicrobial activity was measured by the size of the inhibition zone around the disc.

이때 대조군으로는 화장료 조성물의 항균제로 많이 사용되고 있는 트리클로산(triclosan)을 사용하였다.At this time, triclosan (triclosan), which is widely used as an antimicrobial agent of the cosmetic composition, was used.

<표 1> 관중 1차 추출물의 여드름균 생육억제환의 크기<Table 1> Size of acne bacteria growth inhibitory ring of primary extract

시료명Sample Name 처리농도 (㎍/50㎕/disk)Treatment concentration (㎍ / 50µl / disk) 억제환(mm)Restraining ring (mm) 1One 트리클로산Triclosan 500500 3535 22 실시예 1의 관중 1차 추출물 - 추출용매:메탄올Primary extract of Example 1-Extraction solvent: methanol 500500 2828 33 실시예 1의 관중 1차 추출물 - 추출용매:에탄올Primary extract of Example 1-Extraction solvent: Ethanol 500500 3434 44 실시예 2의 관중 2차 추출물 - 1차 추출용매:에탄올, 2차 추출용매:헥산Secondary extract of Example 2-primary extraction solvent: ethanol, secondary extraction solvent: hexane 250250 4040

상기 표 1의 결과로부터 관중 1차 추출물(추출용매:에탄올) 및 관중 2차 추출물에서 강한 항여드름균 활성이 있음을 알 수 있다. 특히, 추출용매를 에탄올로 한 관중 1차 추출물의 항여드름균 활성은 대조군으로 사용한 트리클로산의 활성과 유사한 것으로 나타났다. 추출용매로 메탄올을 사용한 경우에도 생장억제환의 크기가 28mm인 것으로 나타나, 프로피오니박테리움 아크네의 생장 억제능력이 뛰어남을 알 수 있었다. 또한, 관중 2차 추출물은 관중 1차 추출물 농도보다 훨씬 낮은 수준에서도 강력한 항여드름균 활성이 있음을 알 수 있다.From the results of Table 1, it can be seen that there is a strong anti-acne bacterium activity in the primary extract (extract solvent: ethanol) and the secondary extract in the tube. In particular, the anti acne activity of the primary extract in the ethanol extract was found to be similar to the activity of triclosan used as a control. Even when methanol was used as the extraction solvent, the size of the growth inhibitory ring was found to be 28 mm, indicating that propionibacterium acne had excellent growth inhibition ability. In addition, it can be seen that the secondary extract of the spectral has a strong anti-acne bacterium activity even at a much lower level than the concentration of the primary extract of the spectral.

(2) 최소억제농도(Minimum inhibitory concentration : MIC)(2) Minimum inhibitory concentration (MIC)

MIC 평가는 96-well plate를 이용한 broth-dilution법을 일부 변형하여 수행하였다(K. Yasunaka et al., Antibacterial activity of crude extracts from mexican medicinal plants and purified coumarins and xanthones, J. Ethnopharmacol., 97, 293 (2005)). 72시간 배양한 여드름균을 McFarland standard 0.5의 값으로 조절하여 1.5x108 cells/ml로 희석된 균주를 배지 160㎕가 들어 있는 각 well에 20㎕씩 접종해 주었다. 관중 1차 또는 2차 추출물을 DMSO에 용해시켜 RC 액체 배지를 이용하여 균주와 배지가 들어있는 96-well plate에 20㎕씩 넣어 주고 잘 섞어 주었다. 대조군으로는 10% DMSO를 사용하였다. 균 희석액 및 시료를 접종한 96-well plate를 anaerocult Gaspack system을 이용하여 3일간 배양한 후 균의 생육이 나타나지 않는 최소 농도를 MIC로 결정하였다. 이때 대조군으로 트리클로산을 사용하였다.MIC evaluation was performed with some modifications of the broth-dilution method using 96-well plates (K. Yasunaka et al ., Antibacterial activity of crude extracts from mexican medicinal plants and purified coumarins and xanthones, J. Ethnopharmacol. , 97 , 293 (2005)). The acne bacteria cultured for 72 hours were adjusted to the value of McFarland standard 0.5, and 20 µl of each strain containing 160 µl of the medium diluted to 1.5x10 8 cells / ml was inoculated. Primary or secondary extracts in the tube were dissolved in DMSO, and 20 µl each was added to the 96-well plate containing the strain and the medium using RC liquid medium and mixed well. 10% DMSO was used as a control. After incubating 96-well plates inoculated with bacterial dilutions and samples using an anaerocult gaspack system for 3 days, the minimum concentration at which bacterial growth was not determined was determined by MIC. Triclosan was used as a control.

<표 2>TABLE 2

시 료 명Sample Name 최소억제농도Minimum inhibitory concentration 1One 트리클로산Triclosan 0.004mg/ml0.004mg / ml 22 실시예 1의 관중 1차 추출물(추출용매:에탄올)Primary extract of Example 1 (extraction solvent: ethanol) 0.0016mg/ml0.0016mg / ml

이상의 결과에서 보는 바와 같이 관중 1차 추출물은 대조군인 트리클로산보다 최소억제농도가 훨씬 더 낮게 나타나, 본 발명의 관중 추출물 및 이를 함유하는 화장료 조성물은 여드름 예방 및 치료와, 프로피오니박테리움 아크네의 생육을 억제하는 효과가 매우 우수함을 알 수 있다.As can be seen from the above results, the primary extract of the spectral extract has a much lower minimum inhibitory concentration than the control triclosan, and the spectral extract of the present invention and the cosmetic composition containing the same prevent and treat acne and grow propionibacterium acne. It can be seen that the inhibitory effect is very excellent.

본 발명의 관중 추출물로부터 유래하는 여드름 예방 및 치료용 유효 성분물질을 포함하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물은 관중 추출물의 함량을 0.001~20중량%으로 할 수 있다. 이때 관중 추출물의 함량을 0.5~10중량%로 할 경우 더욱 바람직하다.Cosmetic composition comprising an active ingredient for preventing and treating acne derived from the spectral extract of the present invention may be the content of the spectral extract to 0.001 to 20% by weight. At this time, the content of the spectral extract is more preferably 0.5 to 10% by weight.

본 발명의 관중 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 여드름 피부를 위한 화장품 및 세안제 등에 다양하게 이용될 수 있으며, 제형은 임의로 선택할 수 있다. 본 조성물을 첨가할 수 있는 제품으로는 각종 피부에 바르는 외용제인 크림, 밀크로션, 파운데이션, 스킨 등과 같은 화장품류와 클린징, 세안제, 비누, 트리트먼트, 미용액 등을 포함한다.Cosmetic composition containing the spectral extract of the present invention can be used in a variety of cosmetics and cleansing agents for acne skin, the dosage form can be arbitrarily selected. Products to which the present composition may be added include cosmetics such as creams, milk lotions, foundations, skins, and the like, which are applied to various skins, and cleansing, face washes, soaps, treatments, and essences.

이하는 본 발명의 관중 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 구체적인 제형예를 나타낸 것으로, 본 발명의 화장료 조성물을 포함하는 제형은 이에 한정되는 것이 아니다.The following shows an example of the specific formulation of the cosmetic composition containing the spectral extract of the present invention, the formulation comprising the cosmetic composition of the present invention is not limited thereto.

<제형예 1> 유연 화장수(skin toner)Formulation Example 1 Skin Toner

성분명Ingredient Name 함량(중량%)Content (% by weight) 관중 2차 추출물Spectral secondary extract 2.52.5 글리세린glycerin 5.05.0 1,3-부틸렌글리콜1,3-butylene glycol 3.03.0 에탄올ethanol 5.05.0 폴리옥시에틸렌노닐페닐에테르Polyoxyethylene nonylphenyl ether 0.50.5 향료Spices 0.20.2 방부제antiseptic 적당량A reasonable amount 정제수Purified water to 100to 100

<제형예 2> 수렴 화장수(astringent)<Formulation Example 2> Converging Lotion (astringent)

성분명Ingredient Name 함량(중량%)Content (% by weight) 관중 2차 추출물Spectral secondary extract 5.05.0 글리세린glycerin 3.03.0 구연산Citric acid 0.10.1 에탄올ethanol 10.010.0 폴리옥시에틸렌올레일에테르Polyoxyethylene oleyl ether 1.01.0 향료Spices 0.10.1 소르비톨Sorbitol 2.02.0 방부제antiseptic 적당량A reasonable amount 정제수Purified water to 100to 100

<제형예 3> 로션(에멀젼)Formulation Example 3 Lotion (Emulsion)

성분명Ingredient Name 함량(중량%)Content (% by weight) 관중 2차 추출물Spectral secondary extract 4.04.0 글리세린glycerin 5.05.0 1,3-부틸렌글리콜1,3-butylene glycol 8.08.0 스쿠알란Squalane 10.010.0 모노올레인산폴리옥시에틸렌소르비탄(6E.0)Monooleic acid polyoxyethylene sorbitan (6E.0) 2.02.0 트리에탄올아민Triethanolamine 1.51.5 글리세릴스테아레이트Glyceryl Stearate 0.50.5 스테아릴글리시레티네이트Stearyl glycyrrhetinate 0.20.2 카르복시비닐폴리머Carboxy Vinyl Polymer 0.10.1 아르기닌Arginine 0.10.1 향료Spices 0.20.2 방부제antiseptic 적당량A reasonable amount 정제수Purified water to 100to 100

<제형예 4> 크림(cream)<Formulation Example 4> Cream

성분명Ingredient Name 함량(중량%)Content (% by weight) 관중 2차 추출물Spectral secondary extract 1.01.0 글리세린glycerin 5.05.0 스테아린산Stearic acid 8.08.0 스쿠알란Squalane 5.05.0 자기유화형 모노스테아린산 글리세린Self-emulsifying glycerin monostearate 2.52.5 모노스테아린산 폴리옥시에틸렌 소르비탄Monostearic acid polyoxyethylene sorbitan 1.51.5 프로필렌글리콜Propylene glycol 4.04.0 스테아릴글리시레티네이트Stearyl glycyrrhetinate 0.20.2 바셀린vaseline 2.02.0 산화방지제Antioxidant 적당량A reasonable amount 향료Spices 0.20.2 방부제antiseptic 적당량A reasonable amount 정제수Purified water to 100to 100

<제형예 5> 유액상 화운데이션(liquid foundation)Formulation Example 5 Latex Liquid Foundation

성분명Ingredient Name 함량(중량%)Content (% by weight) 관중 2차 추출물Spectral secondary extract 0.50.5 세토스테아릴알코올Cetostearyl alcohol 0.50.5 액상 라놀린Liquid lanolin 2.02.0 유동파라핀Liquid paraffin 3.03.0 미리스틴산 이소프로필Myristic acid isopropyl 5.05.0 카르복시메틸셀룰로오스나트륨Carboxymethyl Cellulose Sodium 0.20.2 벤토나이트Bentonite 0.50.5 글리세린glycerin 3.03.0 이산화티탄Titanium dioxide 8.08.0 탈크Talc 4.04.0 착색안료Pigmentation Pigment 적당량A reasonable amount 트리에탄올아민Triethanolamine 1.01.0 스테아린산Stearic acid 2.02.0 산화방지제Antioxidant 적당량A reasonable amount 향료Spices 0.20.2 방부제antiseptic 적당량A reasonable amount 정제수Purified water to 100to 100

<제형예 6> 비누(soap)<Formulation Example 6> Soap

성분명Ingredient Name 함량(중량%)Content (% by weight) 관중 2차 추출물Spectral secondary extract 1.01.0 야자유 지방산Palm oil fatty acid 1.01.0 이산화티탄Titanium dioxide 0.30.3 에틸렌아민 테트라초산나트륨Sodium Ethyleneamine Tetraacetate 0.10.1 향료Spices 0.50.5 색소Pigment 적당량A reasonable amount 글리세린glycerin 1.01.0 산화방지제Antioxidant 적당량A reasonable amount 비누칩(베이스)Soap Chips (Base) to 100to 100

본 발명에 의하면 관중을 이용하여 여드름 예방 및 치료효과를 볼 수 있으며, 여드름 예방 및 치료효과를 나타내는 유효 성분물질의 활성을 최대화할 수 있는 추출분리가 가능하고, 본 발명에 의한 관중 추출물을 포함하는 여드름 피부용 화장료 조성물은 프로피오니박테리움 아크네의 생장, 증식을 효과적으로 억제하여 여드름을 예방 및 치료할 수 있다. 그리고, 관중은 오랜 시간에 식용되어왔던 안전한 식물이므로, 본 발명에 의하면 기존의 여드름 치료방법에 비하여 부작용이 없고, 지속적 사용이 가능하면서도 안전성이 우수한 여드름 피부용 화장료 조성물을 얻을 수 있다.According to the present invention, it is possible to see the effect of acne prevention and treatment by using the spectators, and extractable separation that can maximize the activity of the active ingredient exhibiting acne prevention and treatment effect is possible, comprising the spectral extract according to the present invention The cosmetic composition for acne skin can effectively prevent and treat acne by effectively inhibiting the growth and proliferation of propionibacterium acne. And, because the crowd is a safe plant that has been edible for a long time, according to the present invention has no side effects compared to the conventional acne treatment method, it is possible to obtain a cosmetic composition for acne skin with excellent safety and excellent use.

Claims (7)

관중(貫衆, Dryopteris crassirhizoma)에 물, 친수성 유기용매, 물과 친수성 유기용매의 혼합용매, 2종 이상의 친수성 유기용매의 혼합용매 중에서 선택된 어느 하나의 용매를 첨가하여 추출된 여드름 예방 및 치료용 관중 추출물.A spectator for preventing and treating acne extracted by adding any one selected from water, a hydrophilic organic solvent, a mixed solvent of water and a hydrophilic organic solvent, and a mixed solvent of two or more hydrophilic organic solvents to a dryopteris crassirhizoma extract. 제 1 항에 있어서,The method of claim 1, 상기 관중 추출물은 프로피오니박테리움 아크네(Propionibacterium acnes)의 생장을 억제하는 것을 특징으로 하는 관중 추출물.The spectral extract is spectral extract, characterized in that to inhibit the growth of Propionibacterium acne ( Propionibacterium acnes ). 제 2 항에 있어서,The method of claim 2, 상기 친수성 유기용매는 메탄올 또는 에탄올인 것을 특징으로 하는 관중 추출물.The hydrophilic organic solvent is a spectral extract, characterized in that methanol or ethanol. 제 3 항에 있어서,The method of claim 3, wherein 상기 관중 추출물에 헥산(hexane)을 2차 추출용매로 이용하여 여드름 예방 및 치료효과를 나타내는 유효 성분을 2차 추출한 것을 특징으로 하는 관중 추출물.The spectral extract, characterized in that the second extract the active ingredient showing the acne prevention and treatment effect by using hexane (hexane) as a secondary extraction solvent in the spectral extract. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 하나의 관중 추출물을 함유하는 여드름 피부용 화장료 조성물.Cosmetic composition for acne skin containing the spectral extract of any one of claims 1 to 4. 제 5 항에 있어서,The method of claim 5, 상기 관중 추출물의 함량은 0.001~20.0중량%인 것을 특징으로 하는 여드름 피부용 화장료 조성물.The content of the extract in the tube is a cosmetic composition for acne skin, characterized in that 0.001 ~ 20.0% by weight. 제 6 항에 있어서,The method of claim 6, 상기 여드름 피부용 화장료 조성물의 제형은 유연 화장수, 수렴 화장수, 로션, 크림, 유액상 화운데이션, 비누 중에서 선택된 어느 하나인 것을 특징으로 하는 여드름 피부용 화장료 조성물.The formulation of the cosmetic composition for acne skin is a cosmetic composition for acne skin, characterized in that any one selected from flexible lotion, astringent lotion, lotion, cream, emulsion foundation, soap.
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