KR20110130184A - An extract of cudrania tricuspidata and a cosmetic composition containing the extract with anti-acne effect - Google Patents

An extract of cudrania tricuspidata and a cosmetic composition containing the extract with anti-acne effect Download PDF

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KR20110130184A
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Abstract

PURPOSE: A cosmetic composition containing Cudrania tricuspidata BUREAU extract is provided to suppress the growth of Propionibacterium acnes without side effects. CONSTITUTION: A Cudrania tricuspidata BUREAU extract for preventing and treating acne is prepared using water, hydrophilic organic solvent, or mixture solvent thereof, precipitating for a certain time, stirring, and filtering. The extraction solvent is anhydrous or hydrous methanol of 1-4 carbon atoms, ethanol, propyl alcohol, butyl alcohol, glycerin, propylene glycol, or butylenes glycol.

Description

항 여드름 효능을 갖는 꾸지뽕나무 추출물과 이를 함유하는 화장료 조성물 {An extract of Cudrania tricuspidata and a cosmetic composition containing the extract with anti-acne effect}An extract of Cudrania tricuspidata and a cosmetic composition containing the extract with anti-acne effect

본 발명은 꾸지뽕나무의 추출 방법 및 이를 함유하는 여드름 피부용 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 피부에 자극이 없고 안전하여 피부 질환 유발 문제가 없으며 여드름 유발균의 생육을 억제함으로써, 여드름 예방 및 개선/완화 효과를 포함하는 여드름 피부용 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a method for extracting Cucumber tree and a cosmetic composition for acne skin containing the same, and more particularly, there is no irritation and safety on the skin and there is no problem of causing skin diseases, and by preventing the growth of acne-inducing bacteria, acne prevention and improvement It relates to a cosmetic composition for acne skin comprising a / relaxing effect.

여드름의 발병은 유전적, 환경적 요인 외에 체내 호르몬 분비의 변화로 인한 활발한 피지 생성, 모낭 피지선의 비정상적인 각질화(hyperkeratinization)로 인한 모공의 폐쇄, 여드름 균의 활성화 및 여드름 균에 의해 유발되는 피부 염증반응의 네 가지 주요 원인과 이들 간의 상호작용에 의한다.The development of acne can lead to active sebum production due to changes in hormone secretion in the body, as well as genetic and environmental factors, closure of pores due to abnormal hyperkeratinization of hair follicle sebaceous glands, activation of acne bacteria and skin inflammatory reactions caused by acne bacteria. Four major causes and their interactions.

따라서 피지 생성을 억제하는 항안드로겐제, 항염제로 작용하는 비스테로이드 소염제, 항균효과가 있는 레조시놀, 유황 및 벤조일 퍼옥사이드와 항생효과가 있는 테트라사이클린, 에리스로마이신, 클린다마이신 및 머크로라이드 등에 의한 여드름균 활성 억제 방법과 레티노익산 등의 비타민 A 유도체를 이용한 치료법 등이 여드름 치료방법으로 이용되고 있다.Therefore, acne from anti-androgens that inhibit sebum production, non-steroidal anti-inflammatory drugs that act as anti-inflammatory agents, resorcinol, sulfur and benzoyl peroxides that have antibacterial effects, and tetracycline, erythromycin, clindamycin, and mercuride that have antibiotic effects Methods of inhibiting fungal activity and treatment using vitamin A derivatives such as retinoic acid are used as acne treatment methods.

그러나, 이러한 기존의 여드름 치료 방법은 효능이나 피부 안전성 측면에 있어서 여러 가지 문제점이 있어 왔다. 호르몬제의 사용은 표피의 생장억제나 호르몬 남용 등의 역효과를 유발할 수 있다고 보고된 바 있고, 레티노익산과 벤조일 퍼옥사이드 등은 기형아 출산, 피부 자극, 접촉성 피부염 발병 등의 우려가 있으며, 클린다마이신 등의 항생물질은 내성균의 출현, 알러지 반응, 광과민 반응 등의 부작용을 나타내는 것으로 보고되고 있다.However, these conventional acne treatment methods have a number of problems in terms of efficacy or skin safety. The use of hormonal agents has been reported to cause adverse effects such as growth inhibition of the epidermis and hormonal abuse. Retinoic acid and benzoyl peroxide may cause birth defects, skin irritation, contact dermatitis, and clindamycin. Antibiotic of has been reported to have side effects such as emergence of resistant bacteria, allergic reactions, photosensitivity reactions.

한편, 여드름 치료는 단기간에 이루어지는 것이 아니라 꾸준하고 지속적인 치료가 요구되는 것이어서 상기 문제점을 지닌 여드름 치료 방법은 단기간의 사용이나 한정된 범위 내의 사용만 가능할 뿐이었다.On the other hand, acne treatment is not a short-term, but a steady and continuous treatment is required, so the acne treatment method with the above problems was only available for a short time or a limited use.

이에 대해, 최근에는 식물을 비롯한 천연자원으로부터 상기 부작용들을 줄이고 지속적으로 사용할 수 있으며 인체에 무해하면서도 강력한 항 여드름 균 효과를 갖는 유효성분들을 탐색하는 연구가 활발하게 진행되고 있다. 국내에서는 상황버섯, 녹차 및 황금, 버드나무, 삼백초, 감초 및 어성초 추출물을 여드름 치료에 관련된 기능성화장품 및 비누의 원료로 사용하고 있고, 천연물 유래의 화학물질을 이용한 항 여드름 균 효능의 화장품 원료개발도 진행되고 있다. 그러나, 그 효과가 기존의 여드름 치료 물질에 비해 매우 약하거나, 여드름 치료에 관련된 유효물질의 대량 생산이 어려운 문제점이 있다.In recent years, researches are actively underway to search for effective ingredients that reduce the side effects from natural resources, including plants, and can be continuously used, and have a powerful anti-acne bactericidal effect. In Korea, extracts of situational mushrooms, green tea and golden, willow, licorice and licorice are used as raw materials for functional cosmetics and soaps related to acne treatment, and the development of cosmetic raw materials with anti-acne bactericidal efficacy using chemicals derived from natural products It's going on. However, the effect is very weak compared to the conventional acne treatment material, there is a problem that the mass production of active substances related to acne treatment is difficult.

특히 천연물은 다양한 성분이 복합적으로 구성되어 있어서 유효활성물질의 분리, 정제방법이 목적하는 활성물질의 물리화학적 성질에 따라 다르고, 또 여러 가지 서로 다른 원리에 근거한 분리, 정제 방법 중에서도 적절한 방법을 효과적으로 조합하여 사용하여야 하므로 천연물로부터 항 여드름 균 활성을 지니는 물질을 추출 분리하는 데에는 많은 어려움이 있다.In particular, natural products are composed of various components, and the method of separating and purifying effective active substances depends on the physicochemical properties of the active substances, and among the methods of separation and purification based on several different principles, it is possible to effectively combine appropriate methods. Since it has to be used, there are a lot of difficulties in extracting and separating substances having anti-acne activity from natural products.

꾸지뽕나무는 쌍떡잎식물 쐐기풀목 뽕나무과의 낙엽활엽 소교목으로 한국(전남·전북·경남·경북·충남·황해)·일본·중국 등지에 분포하며 산기슭의 양지쪽이나 마을 부근에 자생한다. 꾸지뽕나무의 주요 성분으로는 플라보노이드(flavonoid), 모린(morin), 루틴(rutin), 베타시토스테롤(β-sitosterol), 캠퍼롤-7-글루코시드(kaempferol - 7 - glucoside), 포푸르닌(populnin), 프로린(proline), 글루타민산(glutamin), 알기닌(arginine), 아스파라긴산(asparagin), 글루코시드(glucoside), 스타키드린 (stachydrine), 아토카페신(arthocarpesin), 노르아토카페틴(norarthocarpetin), 5-O-메틸제니스테인(5-O- methylgenistein), 칼보하이드레이트(Carbohydrate) [수크로오스(sucrose), 글루코오스(glucose), 올가닉 애시드(Organic acids)] 등이 있다. 잎과 열매는 식용 가능하며, 한방에서는 줄기와 잎을 약재로 사용한다. 꾸지뽕나무는 통증을 멎게 하고 염증을 없애며 근육과 뼈를 튼튼하게 하는 작용이 있어서 신경통과 관절염 ,종기, 종창, 피부염, 습진, 타박상 치료 및 호전에 효능을 나타내는 것으로 보고되었다. Cucumber tree is a deciduous broad-leaved small arborescent tree of the dicotyledonous plant, Nettle, Mulberry, and is distributed in Korea (Jeonnam, Jeonbuk, Gyeongnam, Gyeongbuk, Chungnam, Yellow Sea), Japan, China, etc., and grows on both sides of villages and near villages. The main components of Cucumber tree are flavonoids, morin, rutin, beta-sitosterol, kaempferol-7-glucoside and populnin. ), Proline, glutamic acid, arginine, arginine, asparaginic acid, glucoside, glucoside, statachydrine, atocafesin, norarthocarpetin, 5 5-O-methylgenistein, carbohydrate (sucrose, glucose, organic acids), and the like. Leaves and berries are edible, and in one shot, stems and leaves are used as medicinal herbs. It has been reported to be effective in relieving pain, eliminating inflammation, and strengthening muscles and bones, thereby treating neuralgia, arthritis, boils, swelling, dermatitis, eczema, and bruises.

그러나, 꾸지뽕나무가 여드름 균에 대해 강한 활성을 나타낸다는 사연구나 여드름 예방 및 치료에 사용되는 사례가 보고 된 바 없고, 꾸지뽕나무로부터 여드름 예방 및/또는 치료에 유효한 성분을 추출하여 이를 여드름 피부용 화장료로 사용하는 기술은 개시된 바 없었다.However, there have been no studies on the use of acne bacteria in acne bacteria, and there have been no reports on the use of acne prevention and / or treatment. The technique used has not been disclosed.

본 발명은 상기와 같은 종래기술의 문제점을 해결하여 저자극성이고 피부질환 유발에 문제가 없으며 여드름 유발균에 관하여 항균 효능이 우수하여 여드름 예방 및 개선/완화 효과를 나타내는 여드름 피부용 화장료 조성물로 제공하는 것을 목적으로 한다.The present invention solves the problems of the prior art as described above is hypoallergenic and has no problem in causing skin diseases and excellent antimicrobial efficacy with respect to acne-inducing bacteria to provide a cosmetic composition for acne skin showing an acne prevention and improvement / alleviation effect The purpose.

상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명에서는 꾸지뽕나무로부터 여드름 개선 유효성분물질의 추출 방법과 이로부터 얻어지는 유효성분물질을 포함하는 저자극성이고 피부질환 유발에 문제가 없으며 여드름 유발균에 관하여 항균 효능이 우수하여 여드름 예방 및 개선/완화 효과를 나타내는 여드름 피부용 화장료 조성물을 제공한다. In order to achieve the above object, the present invention is hypoallergenic, including the method of extracting the acne-improving active ingredient from Kudji mulberry tree and the active ingredient obtained therefrom, there is no problem in inducing skin diseases and has excellent antibacterial effect on acne-inducing bacteria. It provides a cosmetic composition for acne skin exhibiting an acne prevention and improvement / alleviation effect.

본 발명의 꾸지뽕나무 추출물은 꾸지뽕나무로부터 침출, 전출한 것, 또는 침출액을 다시 일부 또는 전부 농축한 것, 또는 그 농축물을 다시 건조하여 제조한 침제, 전제, 정기, 유동 엑기스 등과, 꾸지뽕나무 그 자체에 함유되어 있고 주 효과를 발휘하는 화학 물질 그 자체도 포함하는 개념이다.Extract of Cudrania japonica of the present invention is the leaching, elution from the Cudrania japonica, or some or all of the leaching liquor again, or prepared by drying the concentrate again, acupuncture, premises, regular, flow extract, etc. It is a concept that includes the chemicals that are contained in them and have a major effect.

바람직한 본 발명의 꾸지뽕나무 추출물은 꾸지뽕나무에 소정의 추출용매를 가하여 꾸지뽕나무로부터 여드름 예방 및/또는 치료효과를 나타내는 성분 또는 프로피오니박테리움 아크네(Propionibacterium acnes)의 생장을 억제하는 성분을 고액추출(固液抽出, solid-liquid extraction)하여 얻어진 꾸지뽕나무 1차 추출물이 될 수 있다.Preferred Cucumber extract of the present invention is to add a predetermined extraction solvent to Cucumber tree, extracting a component that inhibits the growth of or propionibacterium acnes (Propionibacterium acnes) that exhibits acne prevention and / or therapeutic effect from the Cucumber tree solid extract ( It can be the primary extract of Cudrania japonica obtained by solid-liquid extraction.

본 발명의 상기 꾸지뽕나무는 완전히 건조한 후 분쇄하여 준비한 것이고, 본 발명의 꾸지뽕나무 추출물은 상기 꾸지뽕나무에 메탄올, 에탄올 등의 친수성 유기용매, 또는 친수성 유기용매와 물의 혼합 용액을 추출용매로 첨가하여 일정 시간 침적시키면서 적절한 시간 간격으로 교반한 후 얻어진 용액을 여과하여 회수하는 통상의 천연물 추출방법에 따라 얻을 수 있다.The Cudrania tree of the present invention is prepared by completely drying after crushing, the Cudrania extract of the present invention by adding a hydrophilic organic solvent, such as methanol, ethanol, or a mixed solution of hydrophilic organic solvent and water to the Cudrania tree as an extraction solvent It can be obtained by the usual natural product extraction method of filtering and recovering the solution obtained after stirring at an appropriate time interval while depositing time.

바람직한 추출용매로는 탄소수 1 내지 4인 무수 또는 함수 메탄올, 에탄올, 프로필알코올, 부틸알코올, 글리세린, 프로필렌글리콜 및 부틸렌글리콜, 물을 포함한 용매군 중에서 선택된 하나의 순수용매 또는 둘 이상이 조합된 혼합용매가 이용될 수 있고, 식물 재료에 가해지는 추출용매의 양은 식물 재료 전체 부피 대비 1 내지 50배 정도로 할 수 있다.Preferred extraction solvents include anhydrous or hydrous methanol having 1 to 4 carbon atoms, ethanol, propyl alcohol, butyl alcohol, glycerin, propylene glycol and butylene glycol, a pure solvent selected from the group of solvents including water or a mixture of two or more thereof A solvent may be used and the amount of the extraction solvent added to the plant material may be about 1 to 50 times the total volume of the plant material.

보다 바람직하게는, 본 발명의 꾸지뽕나무 추출물의 추출용매로는 무수 메탄올, 함수 메탄올, 무수 에탄올 및 함수 에탄올 중에서 선택된 하나의 순수용매 또는 상기 메탄올의 1종과 상기 에탄올의 1종의 혼합용매를 사용함이 바람직하다.More preferably, as the extraction solvent of the extract of Cudrania japonica of the present invention, one pure solvent selected from anhydrous methanol, hydrous methanol, anhydrous ethanol and hydrous ethanol or a mixed solvent of one of the methanol and one of the ethanol is used. This is preferred.

이때, 상기 추출용매의 첨가량은 꾸지뽕나무 건조 중량 1g당 5~20㎖로 함이 바람직하다. 추출은 실온에서 1~7일간 침적 추출하거나 50~95℃의 가온 조건에서 1~5시간 정도 추출하는 방법 등 종래의 일반적인 용매추출방법으로 할 수 있다.At this time, the addition amount of the extraction solvent is preferably set to 5 ~ 20ml per 1g dry weight of Koji. Extraction may be carried out by a conventional general solvent extraction method such as extracting by immersion 1-7 days at room temperature or 1-5 hours at 50 ~ 95 ℃ heating conditions.

본 발명의 여드름 피부용 화장료 조성물은 상기 꾸지뽕나무 추출물로부터 유래하는 여드름 예방 및/또는 치료효과가 있는 유효 성분물질을 포함하는 것을 특징으로 하고, 상기 꾸지뽕나무 추출물의 함량은 0.001~0.1중량%인 것이 바람직하다. 이는 0.1중량% 이상의 고농도에서는 피부자극 및 독성 등의 부작용을 유발할 수 있으며, 0.001중량% 이하의 저농도에서는 효과가 약하기 때문이다.The cosmetic composition for acne skin of the present invention is characterized in that it comprises an active ingredient which has a prophylactic and / or therapeutic effect derived from the extract of Cudrania japonica, and the content of the Cudrania japonica extract is preferably 0.001 to 0.1% by weight. Do. This may cause side effects such as skin irritation and toxicity at high concentrations of more than 0.1% by weight, because the effect is weak at low concentrations of less than 0.001% by weight.

본 발명의 화장료 조성물은 상기의 꾸지뽕나무 추출물 이외에도 필요에 따라, 본 발명의 효과를 저하하지 않는 범위내에서 화장료에 일반적으로 사용하는 각종 성분, 예를 들면, 수용성 성분, 분말 성분, 유분, 계면활성제, 보습제, 점도조절제, 방부제, 산화방지제, 향료, 색소 등을 배합하는 것이 가능하다.The cosmetic composition of the present invention is, in addition to the extract of Cucumber japonica, if necessary, various components generally used in cosmetics within the range of not deteriorating the effect of the present invention, for example, water-soluble components, powder components, oil, surfactants. , A moisturizer, a viscosity modifier, a preservative, an antioxidant, a flavoring agent, and a pigment can be added.

본 발명의 상기 꾸지뽕나무 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 화장품 업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이에 한정되는 것은 아니다. 더욱 상세하게는 유연 화장수, 수렴 화장수, 영양 화장수, 로션, 영양 크림, 마사지 크림, 유액상 화운데이션, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 폼, 클렌징 워터, 팩, 스프레이, 비누 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.The cosmetic composition containing the extract of the Quercus japonica extract of the present invention may be prepared in any formulation commonly prepared in the cosmetic industry, for example, solutions, suspensions, pastes, gels, creams, lotions, powders, soaps, oils. It may be formulated as powder foundation, emulsion foundation, wax foundation, spray, and the like, but is not limited thereto. More specifically, it is prepared in the form of a flexible lotion, astringent lotion, nourishing lotion, lotion, nourishing cream, massage cream, latex foundation, essence, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, spray, soap or powder Can be.

본 발명의 꾸지뽕나무 추출물은 여드름 피부용 화장료 조성물 이외에도 여드름 피부용 외용제로도 이용될 수 있다. 이하, 보다 구체적인 실시예를 들어 본 발명에 대해 상세히 설명하지만, 본 발명이 이하 실시예로만 한정되는 것은 아니다.Cudrania japonica extract of the present invention can be used as an external preparation for acne skin in addition to the cosmetic composition for acne skin. Hereinafter, the present invention will be described in detail with reference to more specific examples, but the present invention is not limited only to the following examples.

본 발명은 상기와 같은 종래기술의 문제점을 해결하여 저자극성이고 피부질환 유발에 문제가 없으며, 여드름 유발균에 관하여 항균 효능이 우수하여 여드름 예방 및 개선/완화 효과를 나타내는 여드름 피부용 화장료 조성물로 제형상의 안정성이 확보된 하장품의 모든 형태로 첨가하여 사용할 수 있다.The present invention solves the problems of the prior art as described above is hypoallergenic and there is no problem in inducing skin diseases, and excellent in antibacterial effects on acne-inducing bacteria to form a cosmetic composition for acne skin to show acne prevention and improvement / alleviation effect It can be used by adding to all forms of the stowage ensured the stability of.

이하, 실시예를 통해 본 발명을 더욱 구체적으로 설명하고자 한다. 단 , 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니며, 이와 등가의 기술적 사상의 변형까지를 포함한다. Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. However, the scope of the present invention is not limited only to the following examples, and includes modifications of equivalent technical ideas.

1. 사용균주, 배지 및 배양조건1. Use strain, medium and culture conditions

(1) 균 주(1) strain

본 발명에 사용된 균주는 여드름의 원인균인 Propionibacterium acnes KCTC 3314 이고, 이들 균주는 한국유전자은행에서 분양받아 사용하였다.
The strain used in the present invention is Propionibacterium which is the cause of acne acnes KCTC 3314, these strains were used by the Korea Gene Bank.

(2) 배지 및 배양조건(2) medium and culture conditions

여드름균의 배양 배지는 Reinforced clostridial (RC) 배지(Merck, Germany)를 사용하였고, P. acnes는 4℃에서 보관하면서 실험 3일 전에 활성화했다. 균을 배양 배지에 접종한 후 anaerobic jar에서 Gaspack system (Merck AnaerocultGaspack system, Germany)을 이용하여 밀봉한 다음, 37℃의 인큐베이터에서 3일 동안 혐기성 배양하였다.
Reinforced clostridial (RC) medium (Merck, Germany) was used as a culture medium for acne bacteria, and P. acnes was activated 3 days before the experiment while stored at 4 ° C. The bacteria were inoculated in the culture medium and sealed in an anaerobic jar using a Gaspack system (Merck AnaerocultGaspack system, Germany), followed by anaerobic culture for 3 days in an incubator at 37 ℃.

항균 활성 측정은 디스크 확산법(paper disk diffusion method)과 액체배지희석법(Broth dilution assay)를 사용하여 평가하였다.
Antimicrobial activity was measured using paper disk diffusion method and Broth dilution assay.

실시예 1. 꾸지뽕나무 추출물 제조Example 1. Preparation of Cudrania extract

꾸지뽕나무는 시중에 판매되는 건조 상태의 전초를 구입하여 분쇄기를 이용하여 분말로 만들어 준비한 후, 꾸지뽕나무 분말 500g에 95% 에탄올 10kg을 넣고, 실온에서 3시간 동안 교반하면서 추출하였다. 그 다음 여과지를 이용하여 추출용액을 여과하여 회수한 후, 회수된 용액을 냉각콘덴서가 달린 증류장치를 이용하여 47℃에서 감압농축을 수행하였으며, 용매를 완전히 제거함으로써 꾸지뽕나무 추출물을 수득하였다.
Cuji mulberry was purchased from commercially available dried outpost to prepare a powder using a grinder, and then put into 500g Cuji mulberry powder 10% 95% ethanol, and extracted with stirring at room temperature for 3 hours. Then, the extract solution was collected by filtration using a filter paper, and the recovered solution was concentrated under reduced pressure at 47 ° C. using a distillation apparatus equipped with a cooling capacitor.

시험예 1. 디스크 확산법(paper disk diffusion assay)Test Example 1 paper disk diffusion assay

균주를 Reinforced clostridial(RC) 액체배지에서 3일간 배양한 다음, 균 현탁액을 일정한 농도로 조절한 것을 멸균된 면봉을 이용하여 RC 한천플레이트(agar plate)에 균일하게 도말하였다. 플레이트를 건조시킨 후, paper disk(Φ 8mm, Adventec. USA)를 균주를 접종한 플레이트 표면 위에 올려놓고 꾸지뽕나무 추출물을 DMSO에 농도별로 희석하여 paper disk에 50㎕/disk씩 흡수시켰다. 시료가 처리된 플레이트를 anaerobic jar에서 Gaspack system을 이용하여 3일간 배양한 후 디스크 주위의 생육 억제환(inhibition zone)의 크기로 항균 활성을 측정하였다.After culturing the strain in a Reinforced clostridial (RC) liquid medium for 3 days, the bacteria suspension was adjusted to a constant concentration and evenly spread on a RC agar plate using a sterile swab. After the plate was dried, paper disk (Φ 8 mm, Adventec. USA) was placed on the plate surface inoculated with the strain, and the Cudrania extract was diluted in DMSO by concentration to absorb 50 μl / disk on the paper disk. The plate treated with the sample was incubated in an anaerobic jar using a Gaspack system for 3 days, and then the antimicrobial activity was measured by the size of the inhibition zone around the disc.

이때 대조군으로는 화장료 조성물 중, 항균 소재로 많이 사용되고 있는 트리클로산(triclosan)을 사용하였다.
At this time, as a control, triclosan (triclosan), which is widely used as an antibacterial material, was used in the cosmetic composition.

꾸지뽕나무 추출물의 여드름균 생육억제환의 크기Size of Acne Bacteria Growth Inhibitory Ring of Cucumber Mulberry Extract 시료명Sample Name 처리농도Treatment concentration 억제환(mm)Restraining ring (mm) 트리클로산Triclosan 156 ㎍/ml156 μg / ml 25±225 ± 2 313 ㎍/ml313 ㎍ / ml 30±230 ± 2 625 ㎍/ml625 μg / ml 36±236 ± 2 1250 ㎍/ml1250 μg / ml 38±238 ± 2 2500 ㎍/ml2500 μg / ml 46±246 ± 2 5000 ㎍/ml5000 μg / ml 48±248 ± 2 10000 ㎍/ml10000 μg / ml 50±250 ± 2 실시예 1Example 1 1250 ㎍/ml1250 μg / ml 13±213 ± 2 2500 ㎍/ml2500 μg / ml 16±216 ± 2 5000 ㎍/ml5000 μg / ml 18±218 ± 2 10000 ㎍/ml10000 μg / ml 19±219 ± 2 50000㎍/ml50000µg / ml 22±222 ± 2

상기 표 1의 결과로부터 트리클로산은 10000 ㎍/ml 농도에서 생장억제환의 크기가 약 50±2mm로, 꾸지뽕나무 95% 에탄올 추출물은 동일농도인 10000㎍/ml에서 생장억제환의 크기가 약 19±2mm로 확인되었다. 그러나 이는 단일 성분인 트리클로산에 비해 효능 농도는 높지만, 꾸지뽕 95% 에탄올 추출물이 원추출물 (crude extract)임을 감안한다면 우수한 항 여드름 균 효능성분을 함유하는 것이다.
From the results of Table 1, the triclosan has a growth inhibitory ring size of about 50 ± 2 mm at a concentration of 10000 ㎍ / ml, and the 95% ethanol extract of Cudrania japonica is about 19 ± 2 mm at a concentration of 10000 μg / ml. Confirmed. However, this is a high potency concentration compared to triclosan as a single component, but considering that the zigzag 95% ethanol extract is a crude extract (crude extract) contains an excellent anti-acne fungal efficacy component.

시험예 2. 액체배지희석법(Broth dilution assay)Test Example 2 Broth dilution assay

액체배지희석법은 96-well plate를 이용한 broth-dilution법을 일부 변형하여 수행하였다(K. Yasunaka et al.,Antibacterial activity of crude extracts from mexican medicinal plants and purified coumarins and xanthones, J. Ethnopharmacol., 97, 293 (2005)). 72시간 배양한 여드름균을 McFarland standard 0.5의 값으로 조절하여 1x106CFU/ml로 희석된 균주를 배지 100㎕가 들어 있는 각 well에 100㎕씩 접종해 주었다. 꾸지뽕나무95% 에탄올 추출물을 DMSO에 용해시켜 RC 액체 배지를 이용하여 균주와 배지가 들어있는 96-well plate에 100㎕씩 넣어 주고 잘 섞어 주었다. 균 희석액 및 시료를 접종한 96-well plate를 anaerocult Gaspack system을 이용하여 3일간 배양한 후 균의 생육이 나타나지 않는 최소 농도를 MIC(Minimum inhibitory concentration )로 결정하였다. 이때 대조군으로 트리클로산을 사용하였다.
Liquid medium dilution was performed by partially modifying broth-dilution using 96-well plates (K. Yasunaka et al., Antibacterial activity of crude extracts from mexican medicinal plants and purified coumarins and xanthones, J. Ethnopharmacol., 97, 293 (2005)). The acne bacteria cultured for 72 hours were adjusted to the value of McFarland standard 0.5, and 100 µl of the strain diluted to 1 × 10 6 CFU / ml was inoculated into each well containing 100 µl of the medium. The 95% ethanol extract of Cucumis japonica was dissolved in DMSO, and 100 μl each was added to the 96-well plate containing the strain and the medium using RC liquid medium and mixed well. After incubating 96-well plates inoculated with bacterial dilutions and samples for 3 days using an anaerocult gaspack system, the minimum concentration at which bacterial growth was not determined was determined as MIC (Minimum inhibitory concentration). Triclosan was used as a control.

꾸지뽕나무 추출물의 여드름균 최소억제농도(MIC)Minimum Inhibitory Concentration of Acne Bacteria (CIC) 시료명Sample Name 최소억제농도(MIC)Minimum Inhibition Concentration (MIC) 트리클로산Triclosan 0.449 ± 0.2 ㎍/ml0.449 ± 0.2 μg / ml 실시예 1Example 1 12.73 ± 2.5 ㎍/ml12.73 ± 2.5 μg / ml

이상의 결과에서 보는 바와 같이 트리클로산과 꾸지뽕나무 95% 에탄올 추출물의 최소억제농도는 각각 0.449 ± 0.2 ㎍/ml, 12.73 ± 2.5 ㎍/ml로 확인 되었다. 이는 단일 성분인 트리클로산에 비해 효능 농도는 높지만, 꾸지뽕 95% 에탄올 추출물이 원추출물 (crude extract)임을 감안 한다면, 우수한 항 여드름 균 효능성분을 함유하는 것이다.As can be seen from the above results, the minimum inhibitory concentrations of 95% ethanol extracts of triclosan and cooji mulberry tree were 0.449 ± 0.2 ㎍ / ml and 12.73 ± 2.5 ㎍ / ml, respectively. It has a higher efficacy concentration than Triclosan, which is a single component, but considering that Cudrania 95% ethanol extract is a crude extract, it contains an excellent anti-acne bacterium efficacy component.

본 발명의 꾸지뽕나무 95% 에탄올 추출물로부터 유래하는 여드름 예방 및 개선/완화 유효 성분물질을 포함하는 것을 특징으로 하는 화장료 조성물은 꾸지뽕나무 95% 에탄올추출물의 함량을 0.001~0.1중량%으로 할 수 있다. 이때 꾸지뽕나무 추출물의 함량을 0.002~0.05중량%로 할 경우 더욱 바람직하다.
Cosmetic composition characterized in that it comprises acne prevention and improvement / alleviation of active ingredients derived from kkujippong 95% ethanol extract of the present invention can be content of 0.001 ~ 0.1% by weight of kkujippong 95% ethanol extract. At this time, if the content of Koji mulberry extract to 0.002 ~ 0.05% by weight is more preferable.

시험예 3.피부 자극 유발 여부 평가 Test Example 3 Evaluation of Skin Irritation

실시예 1에서 제조한 꾸지뽕나무 추출물의 피부 자극 유발 여부를 평가하기 위하여 인체 첩포 시험 (Human patch test)을 통하여 인체에 대한 1차 자극 시험 및 누적 자극 시험을 수행하였다.In order to evaluate the skin irritation induced by the Koji mulberry extract prepared in Example 1, a primary stimulation test and a cumulative stimulation test were performed on a human body through a human patch test.

건강한 성인 남녀 20명을 대상으로 CTFA 가이드라인 (The Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association. Inc. Washington, D.C., 20036, 1991)에 따라 실시하였다. 핀 쳄버 (Finn chamber)에 시료 20㎕를 적하시킨 후, 이를 시험 부위인 인체의 팔 한쪽에 첩포하고 테이프로 고정시켰다.Twenty healthy men and women were tested according to CTFA guidelines (The Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association. Inc. Washington, D.C., 20036, 1991). 20 μl of the sample was added dropwise to a Fin chamber, which was then patched on one side of the arm of the human body, which was the test site, and fixed with tape.

1차 피부 자극시험은 24시간 동안 첩포한 후, 첩포를 제거하고 다시 4시간, 24시간 경과 한 후의 시험부위의 피부 반응을 하기 표 1의 기준에 따라 판정하였으며, 그 결과를 표4에 나타내었다.In the first skin irritation test, the patch was removed for 24 hours, and then the skin reaction of the test site after 4 hours and 24 hours after removing the patch was determined according to the criteria of Table 1 below, and the results are shown in Table 4 below. .

피부 누적 자극 시험(Repeated Insult Patch Test, RIPT)은 3주간 정기적인 피부에 시료 노출을 수행한 다음 2주 후 새로운 부위에 2차 폐쇄 첩포 (challenge test)를 행하여 피부에 나타난 자극 및 알러지 유발 유무를 관찰하는 시험으로 피부 질환 병력이 없는 성인 10명을 대상으로 하여 Finn Chamber에 실시예 1을 10mg/ml의 농도로 20㎕를 적하시킨 후, 이것을 시험 부위인 양쪽 팔 안쪽에 Scanpor tape로 고정시켰다. 24시간 적용 후 patch를 제거시키고, 24시간 동안의 간격을 두고 같은 일정으로 동일한 부위에 동일한 방법으로 총 9번의 반복적인 적용을 수행하였다. 피부자극 정도는 1차 피부자극 평가기준에 의거하여 육안으로 평가하여 scoring scale list를 작성하였다.The Repeated Insult Patch Test (RIPT) is a three-week routine skin exposure followed by a second closed challenge test on new areas two weeks later to detect irritation and allergens on the skin. As a test to observe, 10 μl of a patient without a history of skin disease was added dropwise to the Finn Chamber in Example 1 at a concentration of 10 mg / ml, and then fixed with Scanpor tape inside both arms as test sites. After 24 hours of application, the patch was removed, and a total of 9 repetitive applications were performed on the same site at the same schedule at 24 hour intervals. The degree of skin irritation was evaluated visually based on the primary skin irritation evaluation criteria, and a scoring scale list was prepared.

1차 피부 자극 시험Primary skin irritation test 시료sample 피시험자수Number of test subjects 판정결과Judgment result 자극도Irritation degree ++++ ++ ±± -- 시험군Test group 2020 -- -- -- 2020 00 대조군Control group 2020 -- -- -- 2020 00 (판정기준)
- : 홍반이나 특이한 현상 없음
±: 주위보다 약간 붉어짐
+: 주위보다 현저히 붉어짐
++: 주위보다 심하게 붉어지고 부풀어 오름
(자극도 계산식)
자극도 = [{(±) 수 × 1}+{(+)수 × 2}+{(++)수 × 3}]/피시험자 수
(Criteria)
-: No erythema or unusual phenomenon
±: slightly reddish
+: Significantly redder than the surroundings
++: reddens and swells more heavily than the surroundings
(Stimulus calculation formula)
Stimulus = [{(±) Number × 1} + {(+) Number × 2} + {(++) Number × 3}] / Number of Subjects

피부 누적 자극 시험Skin cumulative stimulation test 시료sample 피시험자수Number of test subjects 유도단계Induction stage 도전단계Challenge stage 자극도Irritation degree 2020 1One 22 33 44 55 66 77 88 99 24h24h 48h48h 72h72h 시험군Test group 2020 -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- 00 대조군Control group 2020 -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- -- 00 (계산식)
자극도 = [{(±)수 × 1}+{(+)수 × 2}+ {(++)수 × 3}]/피시험자 수
(formula)
Stimulus = [{(±) Number × 1} + {(+) Number × 2} + {(++) Number × 3}] / Number of Subjects

상기 표 3과 표 4의 결과에서 알 수 있듯이, 인체에 대한 피부 자극 시험을 평가한 결과, 단회 및 누적 첩포 시, 본 발명의 실시예 1에서 제조한 꾸지뽕나무 추출물은 자극을 유발하지 않으며 피부에 적용하기에 안전한 소재임을 확인할 수 있었다.
As can be seen from the results of Table 3 and Table 4, as a result of evaluating the skin irritation test on the human body, the single and cumulative patch, Cucumber mulberry extract prepared in Example 1 of the present invention does not cause irritation to the skin It was confirmed that the material is safe to apply.

본 발명의 꾸지뽕나무 추출물을 함유하는 화장료 조성물은 여드름 피부를 위한 화장품 및 세안제 등에 다양하게 이용될 수 있으며, 제형은 임의로 선택할 수 있다. 본 조성물을 첨가할 수 있는 제품으로는 각종 피부에 바르는 외용제인 크림, 밀크로션, 파운데이션, 스킨 등과 같은 화장품류와 클린징, 세안제, 비누, 트리트먼트, 미용액 등을 포함한다.Cosmetic composition containing kkujippong extract of the present invention can be used in a variety of cosmetics and cleansing agents for acne skin, the dosage form can be arbitrarily selected. Products to which the present composition may be added include cosmetics such as creams, milk lotions, foundations, skins, and the like, which are applied to various skins, and cleansing, face washes, soaps, treatments, and essences.

이하는 본 발명의 꾸지뽕나무 추출물을 함유하는 화장료 조성물의 구체적인 제형예를 나타낸 것으로, 본 발명의 화장료 조성물을 포함하는 제형은 이에 한정되는 것이 아니다.
The following shows a specific formulation example of the cosmetic composition containing the kkujippung tree extract of the present invention, the formulation containing the cosmetic composition of the present invention is not limited thereto.

제형예 1 스킨Formulation Example 1 Skin 배합성분Compounding ingredient 함량 (중량 %)Content (% by weight) 실시예Example 22 카르복시비닐 폴리머Carboxyvinyl Polymer 33 부틸렌글리콜Butylene glycol 44 프로필렌글리콜Propylene glycol 33 메틸페닐폴리실록산Methylphenylpolysiloxane 0.10.1 메틸파라벤Methyl paraben 0.10.1 에틸 알코올ethyl alcohol 22 트리에탄올아민Triethanolamine 0.040.04 EDTA-2NaEDTA-2Na 0.020.02 정제수Purified water to 100to 100

제형예 2 로션Formulation Example 2 Lotion 배합성분Compounding ingredient 함량 (중량 %)Content (% by weight) 실시예Example 22 카르복시비닐 폴리머Carboxyvinyl Polymer 44 에틸 하이드로벤조에이트Ethyl hydrobenzoate 0.10.1 유동 파라핀Liquid paraffin 33 비타민 E 아세테이트Vitamin E Acetate 0.10.1 실리콘silicon 0.80.8 케틸 알코올Ketyl Alcohol 0.50.5 솔비탄 모노스테아레이트Sorbitan monostearate 1One 폴리솔베이트60Polysorbate 60 0.30.3 메틸설포닐페탄Methylsulfonylfetan 0.20.2 프로필렌글리콜Propylene glycol 22 부틸렌글리콜Butylene glycol 55 메틸파라벤Methyl paraben 0.20.2 트리에탄올아민Triethanolamine 0.10.1 EDTA-2NaEDTA-2Na 0.030.03 정제수Purified water to 100to 100

제형예 3 에센스Formulation Example 3 Essence 배합성분Compounding ingredient 함량 (중량 %)Content (% by weight) 실시예Example 22 카르복시비닐 폴리머Carboxyvinyl Polymer 1515 글리세린glycerin 66 프로필렌글리콜Propylene glycol 33 마카다미아 오일Macadamia oil 0.50.5 메틸파라벤Methyl paraben 0.10.1 에틸 알코올ethyl alcohol 22 트리에탄올아민Triethanolamine 0.150.15 EDTA-2NaEDTA-2Na 0.020.02 정제수Purified water to 100to 100

본 발명에 의하면 꾸지뽕나무를 이용하여 여드름 예방 및 개선/완화 효과를 볼 수 있으며, 여드름 예방 및 개선/완화 효과를 나타내는 유효 성분물질의 활성을 최대화할 수 있는 추출분리가 가능하고, 본 발명에 의한 꾸지뽕나무 추출물을 포함하는 여드름 피부용 화장료 조성물은 프로피오니박테리움 아크네의 생장, 증식을 효과적으로 억제하여 여드름을 여드름 예방 및 개선/완화 할 수 있다. 그리고, 꾸지뽕나무는 오랜 시간에 식용되어왔던 안전한 식물이므로, 본 발명에 의하면 기존의 여드름 치료방법에 비하여 부작용이 없고, 지속적 사용이 가능하면서도 안전성이 우수한 여드름 피부용 화장료 조성물을 얻을 수 있다.According to the present invention can be seen using the kkujippung tree to prevent acne and improve / alleviate the effect, it is possible to extract separation to maximize the activity of the active ingredient exhibiting acne prevention and improvement / alleviation effect, according to the present invention Cosmetic composition for acne skin containing Cucumber extract can effectively prevent and improve / alleviate acne by inhibiting the growth and proliferation of propionibacterium acne. In addition, since the custard tree is a safe plant that has been edible for a long time, according to the present invention, there is no side effect compared to the conventional acne treatment method, and it is possible to obtain a cosmetic composition for acne skin having excellent safety while still being used continuously.

Claims (2)

꾸지뽕나무에 물, 친수성 유기용매 또는 이들의 혼합 용매를 첨가하여 추출된 여드름 예방 및 개선용 꾸지뽕나무 추출물Cucumber extract for preventing and improving acne extracted by adding water, hydrophilic organic solvent or mixed solvent thereof 청구항 1에 있어서
프로피오니박테리움 아크네의 생장을 억제하는 것을 특징으로 하는 구지뽕나무 추출물
Claim 1
Koji mulberry extract, characterized in that it inhibits the growth of propionibacterium acne
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KR20180048539A (en) 2018-04-30 2018-05-10 유씨엘 주식회사 Anti-acne composition comprising extracts of rubus coreanus, and willow or propolis
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