KR100684188B1 - 솔잎과 생약재가 함유된 발효주 제조방법 - Google Patents

Abstract

본 발명은 솔잎과 생약재가 함유된 발효주의 제조방법에 관한 것이다.

본 발명의 발효주 제조방법은, 찹쌀을 물에 6 ~ 10 시간 동안 불리는 제 1공정; 물에 불리기 전 찹쌀의 중량 대비 8 ~ 12 중량 % 의 솔잎을 물에 불려진 찹쌀에 첨가한 후 용기에서 100 ℃ 로 찌는 제 2공정; 용기에서 찐 찹쌀과 솔잎의 혼합물에 느릅나무뿌리, 뽕나무뿌리, 우슬뿌리, 엉겅퀴뿌리, 쥐눈이콩으로 구성된 생약재와 누룩 및 엿기름을 첨가하는 제 3공정; 생약재와 누룩 및 엿기름이 첨가된 찐 찹쌀과 솔잎의 혼합물에, 물에 불리기 전 찹쌀의 중량 대비 200 ~ 400 중량 %의 물을 넣고 혼합한 후 9 ~ 25 ℃의 온도에서 발효시키는 제 4공정; 제 4공정에서 발효된 발효액을 여과하여 술을 제조하는 제 5공정; 으로 구성된다.

본 발명의 제조방법에 의해, 생약재가 함유된 발효주를 제조함으로써 생약재를 달여 먹어야 하는 불편함이 없어지고, 달여먹는 등의 처방과 비교해 약리효과가 떨어지지 않으며, 숙취해소가 빨라 장기간 복용이 가능해지고, 솔잎 향으로 인해 생약재의 역한 냄새가 나지 않게 되며, 항산화효과, 항암 효과, 미백효과, 관절염 예방 효과, 숙취 해소 효과를 갖는 발효주의 제조방법이 제공된다.

발효주, 솔잎, 느릅나무뿌리, 뽕나무뿌리, 우슬뿌리, 엉겅퀴뿌리, 쥐눈이콩

Description

솔잎과 생약재가 함유된 발효주 제조방법{THE PREPERATION METHOD OF FERMENTED LIQUOR INCLUDED PINE NEEDLES AND CRUDE DRUGS}

도 1은 본 발명의 솔잎과 생약재가 함유된 발효주의 제조공정도.

본 발명은 솔잎과 생약재가 함유된 발효주 제조방법에 관한 것이다.

솔잎은 침엽수인 소나무의 잎으로서, 주로 동북아시아가 원산지이며 한국, 중국, 일본에 널리 분포되어 있다.

이러한 솔잎은 향긋한 냄새를 갖고 있음과 동시에 살균효과를 갖고 있어 예전부터 송편이나 솔잎차 등의 방법으로 사용되어 왔다.

본 발명에 포함되는 생약재 중 느릅나무뿌리는 산당체가 많이 함유되어 있어 수종, 임질, 늑막염 및 위암 등에 소염, 진통을 위해 복용되고 있다.

또, 뽕나무 뿌리는 고혈압, 열압, 천식, 기침 등을 다스리는데 이용하며, 우슬은 가지 마디마디가 있어 구부러져 있어서 일명 쇠무릎지기라고 하는데 이 뿌 리를 달여 먹으면 혈액순환, 울혈개선, 관절동통, 요통, 냉증과 상기, 손발 저림에 효과가 있다고 하여 이용하고 있다.

또한, 본 발명의 생약재 중 엉겅퀴는 잎 줄기에 단백질, 탄수화물, 지방, 회분, 무기질, 비타민 등이 많이 함유되어 있는 영양가 높은 식품으로 그 뿌리는 건위, 강장, 소염, 해독, 이뇨제 및 신경통에 이용하고 있고,

쥐눈이콩은 단백질과 지방이 풍부한 식품으로도 우수하지만 이외에도 해독력이 특별히 뛰어나 만병을 예방해주고 파괴된 인체조직을 빠른 속도로 회복시켜주는 것으로 약콩으로 많이 이용되고 있다.

위의 기재된 본 발명의 솔잎은 '한국 공개특허 특2003-0028515'(솔잎 쌀 막걸리 양조법) 에서 쌀고두밥에 누룩과 솔잎을 첨가하여 발효시키는 방법이 안출되었으나, 이는 찐 쌀에 생 솔잎을 첨가하여 발효시키는 방법으로 본 발명과는 다른 구성이다.

특히, 생 솔잎을 쌀고두밥에 첨가하여 발효시킬 경우, 향균효과를 갖는 피톤사이드가 솔잎에서 발산되는 비율이 다른 나뭇잎보다 10배 정도로 강해 술을 발효시키는 유익한 미생물을 죽여 발효시간이 길어지는 문제점이 다르다.

또, '한국 등록특허공보 제10-0365528호'(기능성 건강음료 및 그 제조방법)에서 뽕나무뿌리와 엉겅퀴를 원료로 하고 있으나 기타 포함되는 재료가 본 발명과 다르고, 제조방법과 효과가 다르다.

또한, '한국 등록특허공보 제10-0420217'(건강보조식품의 제조방법 및 그 조성물'에 우슬, 엉겅퀴, 느릅나무껍질이 원료의 일부로 기재되어 있으나, 역시 기타 첨가되는 재료가 본 발명과 다르고, 완성품과 제조방법이 다르며, 효과 역시 다르다.

특히, 본 발명의 발명자는 심혈관 이상과 관절 염증 때문에 위의 생약재를 주재료로 하여 한방치료를 하였는데, 상당 기간 동안 통원치료를 해야 하는 불편함과 함께 생약재를 달여 먹어야 하는 불편함이 있었다.

본 발명의 솔잎과 생약재가 함유된 발효주 제조방법은 심혈관 및 관절 염증 의 한방치료를 위해 주로 사용되는 느릅나무뿌리, 뽕나무뿌리, 우슬뿌리, 엉겅퀴뿌리, 쥐눈이콩을 솔잎과 찐쌀, 누룩으로 발효주를 제조함으로써 생약재를 달이는 등의 불편함이 없게 하려는 목적이 있다.

아울러, 각각의 생약재를 달여 먹는 등의 다른 처방으로 했을 때와 비교해 약리효과가 떨어지지 않게 하려는 목적도 있다.

또한, 숙취해소가 빨리 되는 발효주를 제조함으로써 지속적으로 복용함에 있어 숙취로 괴로워하지 않도록 하려는 목적도 있다.

또한, 솔잎을 찹쌀과 함께 쪄 솔잎 향기가 찹쌀에 베여 발효 과정을 거치면서 생약재의 역한 냄새가 나지 않게 하려는 목적도 있다.

본 발명은 솔잎과 생약재가 함유된 발효주의 제조방법에 관한 것이다.

본 발명의 발효주 제조방법은 생약재를 달여먹는 불편함 없이도 생약재를 달여먹는 효능을 얻을 수 있다.

또, 솔잎을 찹쌀과 함께 쪄 생약재의 역한 냄새가 나지 않는다.

또, 숙취해소가 빨라 지속적으로 음용할 수 있다.

본 발명의 발효주 제조방법은, 찹쌀을 물에 6 ~ 10 시간 동안 불리는 제 1공정; 물에 불리기 전 찹쌀의 중량 대비 8 ~ 12 중량 % 의 솔잎을 물에 불려진 찹쌀에 첨가한 후 용기에서 100 ℃ 로 찌는 제 2공정; 용기에서 찐 찹쌀과 솔잎의 혼합물에 느릅나무뿌리, 뽕나무뿌리, 우슬뿌리, 엉겅퀴뿌리, 쥐눈이콩으로 구성된 생약재와 누룩 및 엿기름을 첨가하는 제 3공정; 생약재와 누룩 및 엿기름이 첨가된 찐 찹쌀과 솔잎의 혼합물에, 물에 불리기 전 찹쌀의 중량 대비 200 ~ 400 중량 %의 물을 넣고 혼합한 후 9 ~ 25 ℃의 온도에서 발효시키는 제 4공정; 제 4공정에서 발효된 발효액을 여과하여 술을 제조하는 제 5공정; 으로 구성된다.

본 발명의 주재료 중 하나인 솔잎은 침엽수인 소나무의 잎으로, 솔잎에는 다량의 아스코르빈산과 비타민 A, B, K, 쓴맛을 내는 고미성 물질, 플라보노이드, 안토시안, 7~12%의 수지(송진), 5% 정도의 탄닌질, 탄수화물 등이 함유되어 있다.

또, '동의보감'에서 보면 위장병. 고혈압. 중풍. 신경통. 천식 등에 효과가 있으며 솔잎을 김에 쪄서 말렸다가 가루로 만들어 떡을 빚어 먹기도 했는데 이것은 고혈압, 동맥경화증 또는 중풍 예방, 특히 관절염 치료에 좋다고 나와 있다.

또한, '본초강목'에서는 악창을 치료하고 모발을 자라게 하여 오장(심장, 간 장, 신장 폐장, 비장)을 편안하게 한다고 나와 있다.

또한, 솔잎은 항산화작용이 우수해 인체에 유해한 활성산소를 제거하는 효과가 높다고 되어 있다.

본 발명의 주재료인 생약재 중 하나인 느릅나무는 쌍떡잎식물 쐐기풀목 느릅나무과의 낙엽활엽 교목으로 그 뿌리는 껍질에 플라보노이드, 사포닌, 타닌질, 많은 양의 점액질이 있다.

약리 작용으로는 소장과 방광평활근의 운동을 강화시키며 기침멎이작용, 수렴작용, 항염증작용을 하는 것으로 알려져 있다.

동의보감에서는 뿌리껍질을 달여 위통, 허리통증에 먹고, 항염 효과가 좋아 고약을 만들어 곪은 상처에 바른다고 나와 있다.

본 발명의 주재료인 생약재 중 하나인 뽕나무는 쌍떡잎식물 쐐기풀목 뽕나무과 뽕나무속에 속한 낙엽교목 또는 관목으로, 그 뿌리는 '동의보감'에 이뇨작용, 혈압강화, 해소 등에 효력이 있는 것으로 기록되어 있으며, 최근 동맥경화 및 간질환에 효과가 있는 것으로 알려져 있다.

본 발명의 주재료인 생약재 중 하나인 우슬뿌리는 혈액이 잘 돌게 하고 어혈을 없애는 성질이 있어 월경불순, 난산, 산후복통, 산후자궁무력증, 타박상, 부스럼 등에 쓴다.

약리실험에서 이뇨작용, 자궁수축작용, 식균작용, 항알레르기 작용 등이 밝혀졌다.

본 발명의 주재료인 생약재 중 하나인 엉겅퀴는 가시나물이라고도 하는데, 산이나 들에서 자라며 줄기는 곧게 서고 높이 50∼100cm이고 전체에 흰 털과 더불어 거미줄 같은 털이 있다.

엉겅퀴는 혈액순환이 제대로 되지 못하고 굳어 버려 통증과 응어리를 일으킬 때 혈액이 원활히 순환될 수 있도록 돕고, 쌓인 응어리를 깨끗이 청소해 주는 역할을 하는 것으로 알려져 있다.

따라서 타박상이나 부스럼, 종기 등을 비롯한 악성종양에도 효과가 아주 좋은 것으로 알려져 있다.

또, 엉겅퀴를 뿌리채 짜 낸 냉즙은 고혈압 환자의 혈압을 낮춰 주며 타박상을 입었을 경우 통증을 가라앉히고 염증을 없애는 작용을 하는 것으로 알려져 있다.

본 발명의 주재료인 생약재 중 하나인 쥐눈이콩은 서목태(鼠目太)라고도 하는데, 콩과의 다년생 만초(蔓草)로 줄기와 잎은 갈색이다.

7월에 노란 꽃이 피어 타원형의 깍지 속에 지름 5∼7㎜ 정도의 검고 둥근 열매가 여물면 수확한다.

쥐눈이콩은 신장과 관련한 곡식으로 신장병이 있을 때 먹으면 좋다고 알려져 있으며, 광물성 약재의 독을 비롯한 모든 독을 풀며, 혈액순환을 활발하게 하는 것으로 알려져 있고, 술에 담갔다가 먹으면 풍증에 효과가 있는 것으로 알려져 있다.

위에서 설명한 생약재의 주요성분들은 아래 표 1에서 보는 바와 같다.

<표 1> 구성 생약재의 특수성분 함량(건물량, 중량 %)

시료	단백질	총당	산당체	사포닌	회분
느릅나무뿌리	12.85	4.10	1.04	3.80	4.78
뽕나무뿌리	10.23	3.58	0.49	9.46	4.09
우슬뿌리	9.84	20.65	2.28	41.52	7.63
엉겅퀴뿌리	8.69	33.16	5.34	9.24	4.94
쥐눈이콩	38.44	4.10	1.06	6.40	4.64

또, 위의 생약재들의 용매추출분획별 함량은 아래 표 2에서 보는 바와 같다.

<표 2> 구성 생약재들의 용매추출분획별 함량(건조시료 30 g 중)

시료	수용성 다당류	지방 및 왁스류	Terpenoid 및 Phenol류	알칼로이드류	극성알칼로이드류 및 질소화합물	수용성 잔유물
느릅나무뿌리	­	1.08	0.20	0.27	1.52	5.74
뽕나무뿌리	1.65	0.45	0.71	0.12	1.72	4.32
우슬뿌리	2.28	0.08	0.09	0.89	2.48	7.76
엉겅퀴뿌리	4.26	0.09	0.31	1.21	1.48	7.42
쥐눈이콩	1.47	3.39	0.66	0.01	1.58	7.82

이하, 본 발명의 제조공정에 대하여, 상세히 설명하면 다음과 같다.

제 1공정 : 재료 준비

찹쌀을 깨끗히 세척한 후 물 속에 넣고 6 ~ 10 시간 동안 불린 다음, 채 등으로 걸러 꺼낸다.

아울러, 물에 불리기 전 찹쌀의 중량 대비 8 ~ 12 중량 % 의 솔잎을 준비하여 깨끗히 세척한다.

제 2공정 : 찜

제 1공정에서 준비된 찹쌀과 솔잎을 용기에서 100 ℃ 로 찐다.

찌는 방법은 일반 솥에 물을 붓고 솥 내부에 용기를 설치한 후 용기에 찹쌀과 솔잎을 담은 후 솥을 가열하여 수증기로 찹쌀과 솔잎을 찔 수 있다.

이밖에도 공지되어 있는 각종 찜용기를 이용해 불린 찹쌀과 솔잎을 찔 수 있다.

이때, 솔잎은 찹쌀 위에 배치하는 것이 바람직하다.

제 3공정 : 생약재와 누룩 및 엿기름 첨가

용기에서 찐 찹쌀과 솔잎의 혼합물을 발효용기에 넣은 후 발효용기에 느릅나무뿌리, 뽕나무뿌리, 우슬뿌리, 엉겅퀴뿌리, 쥐눈이콩으로 구성된 생약재와 누룩 및 엿기름을 첨가한다.

제 4공정 : 발효

생약재와 누룩 및 엿기름이 첨가된 찐 찹쌀과 솔잎의 혼합물을 발효용기에 넣은 후 발효용기에, 물에 불리기 전 찹쌀의 중량 대비 200 ~ 400 중량 %의 물을 넣고 혼합한 후 일정 기간동안 9 ~ 25 ℃의 온도에서 발효시킨다.

제 5공정 : 여과

제 4공정의 발효가 끝난 발효액을 여과한 후 여과액을 병이나 용기에 충진하여 포장하여 발효주를 제조한다.

이하, 본 발명의 발효주의 제조방법에 대하여 실시예와 실험예를 통하여 상세히 설명하나, 이들이 본 발명의 범위를 제한하는 것은 아니다.

<실시예 1> 발효주의 제조

부여군 초촌면에서 생산된 찹쌀 8 kg을 준비하여 잘 씻은 후 10시간 동안 물에 불린 후 채로 걸러냈다.

또, 공주군 탄천면에서 자생한 솔잎 1 kg을 준비하여 잘 씻어 냈다.

찹쌀과 솔잎을 찌기 위한 용기를 준비한 후 솔잎층이 상부에 위치하게 용기 내부에 찹쌀과 솔잎을 넣은 후 100 ℃ 증기로 1시간 동안 쪘다.

찐 찹쌀과 솔잎의 혼합물을 발효용기에 넣었다.

발효용기는 옹기독을 사용하였다.

부여군 초촌면에서 재배한 느릅나무 중 3년이상 재배한 느릅나무뿌리 600 g을 준비하여 잘게 썬 후 발효용기에 넣었다.

부여군 초촌면에서 재배한 뽕나무 뿌리 100 g 을 준비하여 잘게 썬 후 발효용기에 넣었다.

부여군 초촌면에서 재배한 우슬뿌리 400 g 을 준비하여 잘게 썬 후 발효용기에 넣었다.

강원도 홍천군 남면에서 재배한 엉겅퀴뿌리 300 g 을 준비하여 잘게 썬 후 발효용기에 넣었다.

부여군 초촌면에서 재배한 쥐눈이콩 200 g 을 준비하여 세척, 건조 후 발효용기에 넣었다.

주식회사 '세농'의 누룩을 1 ㎏ 준비하여 발효용기에 넣었다.

마지막으로 엿기름 40 g 을 준비하여 발효용기에 넣었다.

발효용기 내부의 혼합물을 잘 휘저은 후 9 ~ 25 ℃의 온도 범위를 유지하도록 발효용기를 그늘이 드는 지하에 묻고 10 개월간 발효 숙성 시켜 발효액을 제조하였다.

발효액을 여과한 후 병이나 용기에 담아 발효주를 제조하였다.

<실시예 2>

실시예 1과 같이 제조하되 발효기간을 실시예 1의 조건과 다르게 하여 발효주를 제조하였다.

제조된 각 발효주별로 알콜함량, 총산함량, pH, 탁도 및 총수율 등을 조사하고 그 결과를 표 3에 정리하였다.

<표 3> 발효기간에 따른 발효주의 주요성분 특성

발효개월수	알콜함량(%)	총산함량(%)	pH	탁도(OD,660nm)	총수율(㎖)
5	1.0	0.87	4.88	1.47	500
7	4.5	0.99	4.35	0.97	1200
9	12.5	1.32	4.20	0.40	1400
10	13.3	1.56	3.76	0.36	1600
12	13.3	1.54	3.77	0.35	1600

위 표에서 보는 바와 같이 알콜 생성량은 발효개월수의 증가에 따라 증가하는데, 발효 5개월시 1.0 %, 7개월시 4.5 %, 9개월시 12.5 %, 10개월시 13.3%로 증가한 후 그 이상의 기간에는 알콜함량이 증가하지 않았다.

또한, 총산함량 및 pH도 발효 개월수가 증가함에 따라 소량씩 증가하였으며 탁도는 발효개월수가 증가함에 따라 낮아져 발효 10개월 이상에서는 큰 변화가 일어나지 않았다.

또한, 총수율은 발효 10 개월부터는 증가하지 않아 사용한 모든 생약재의 성분이 알콜발효시 추출분해된 것으로 보였다.

<실험예> 제조된 발효주의 기능성 효과 실험

생약재의 약효성분이 발효분해가 만료 되었다고 판단되는 실시예 1의 발효주(발효기간 10개월)를 시료로 하고, 사용된 생약재 30 g을 각각의 용매추출별 분획구를 80% 메탄올 15 ㎖로 용해시킨 시료들과 비교하여 생리기능성 효과 비교 실험을 하였다.

생리기능성 측정용 시약으로는 미국의 시그마(sigma)사 제품 또는 분석용 특급 시약을 사용하였다.

(1) 실험예1(전자공여능측정에 의한 항산화력 측정 실험)

DPPH(2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl)용액 9.5 ㎖에 실시예 1에서 제조한 발효주를 0.5 ㎖, 0.3 ㎖ 및 0.1 ㎖ 씩 첨가 혼합하여 20분 방치한 후 525 nm에서 흡 광도 측정하여 시료 무첨가구에 대한 흡광도를 백분율로 나타내었다.

또한 각 생약재의 항산화력과 비교하기 위하여 각각 용매분획별 추출액을 0.3 ㎖, 0.2 ㎖ 및 0.1 ㎖ 로 첨가 혼합하여 시료 무첨가구에 대한 흡광도를 백분율로 나타내었다.

위와 같이 실험한 결과를 표 4에 정리하여 나타냈다.

<표 4> DPPH용액에 대한 추출물의 첨가량별 항산화효과

시료		지방 및 왁스류			터페노이드 및 페놀류			알칼로이드류			극성알칼로이드류 및 질소화합물
		0.3*	0.2	0.1	0.3	0.2	0.1	0.3	0.2	0.1	0.3	0.2	.01
느릅나무뿌리		90.4	72.6	54.0	­	­	­	­	­	­	100	100	100
뽕나무뿌리		­	­	­	86.5	80.5	68.1	­	­	­	100	100	89.5
우슬뿌리		­	­	­	­	­	­	­	­	­	74.5	53.5	23.4
엉겅퀴뿌리		­	­	­	­	­	­	100	100	91.9	100	94.0	80.7
쥐눈이콩		­	­	­	­	­	­	­	­	­	70.5	60.8	51.1
발효주	0.5	100
	0.3	65
	0.1	20

＊: DPPH용액 9.5mL에 각 용매분획별 추출액을 0.3 ㎖, 0.2 ㎖ 및 0.1 ㎖ 로 첨가 혼합하여 20분 방치한 후 525nm에서 흡광도 측정하여 시료무첨가구에 대한 흡광도를 백분율로 나타낸 것이다.

각 생약재들 공히 극성알칼로이드류 및 질소 화합물에서 강한 항산화력이 나타났으며 특히 엉겅퀴뿌리는 알칼로이드류 분획별에서 더 강한 항산화효과를 갖고 있음이 나타났다.

또한, 이들 생약재가 함유된 실시예 1의 발효주에서도 항산화력이 높게 나타나 약리효과가 유지됨을 알 수 있다.

(2) 실험예2(아질산염 소거능 측정 실험)

실시예 1에서 제조한 발효주를 시료로 사용하였다.

발효주 0.3 ㎖에 1 mM NaNO2 1 ㎖ 용액을 가한 후 pH를 1.2, 3.0, 6.0으로 버퍼를 조정하여 10 ㎖ 로 정용한 후 37 ℃ 에서 1시간 항온시켰다.

상기 용액 중 1 ㎖ 를 취하여 25% 초산 5 ㎖, 그리스(Griess) 시약 0.4 ㎖를 취한 다음 15분간 방치하여 파장 520 nm 에서 흡광도를 측정하여 아질산염용액만이 가지는 흡광도에 대하여 발효주 첨가구에 대한 아질산염 용액의 흡광도의 비를 구한 후 소거율을 백분율로 나타내었다.

또, 각각의 생약재가 가지는 아질산염소거능을 측정하기 위해 용매분획별 추출액도 0.3 ㎖ 를 첨가하여 비교 측정하였다.

<표 5> 아질산염 소거능(%)

시료	지방및 왁스류			터페노이드 및 페놀류			알칼로이드류			극성알칼로이드류및질소화합물			발효주
pH	1.2	3.0	6.0	1.2	3.0	6.0	1.2	3.0	6.0	1.2	3.0	6.0	1.2	3.0	6.0
느릅나무뿌리	59.2	46.2	10.1	63.3	49.7	22.0	58.2	52.3	27.9	99.5	67.8	28.8	99.1	69.5	14.2
뽕나무뿌리	66.3	55.6	22.0	82.2	46.6	13.5	69.3	61.3	33.4	95.5	87.5	44.8
우슬뿌리	42.2	29.0	9.9	49.9	32.4	1.7	63.1	53.3	14.4	76.3	52.8	12.3
엉겅퀴뿌리	48.0	44.8	7.5	55.1	37.4	5.7	98.3	68.3	21.1	93.1	61.4	16.3
쥐눈이콩	40.3	36.2	9.9	47.2	40.5	11.1	40.5	26.9	­	91.3	52.7	15.3

아질산염 소거능도 각 생약재 공히 극성알칼로이드류에서 pH 1.2 조건하에서 강한 효과를 보였으며 발효주에서도 높은 아질산염 소거능을 보여주었다.

아질산염은 육가공식품에 착색제로 쓰이는 시약으로 이것이 체내에 흡수되어 니트로소기를 발생시키는데, 이는 발암을 유발시키는 원인물질로써 이의 발생을 저지시킬 필요가 있다.

따라서, 발효주도 강한 아질산염 소거능을 갖고 있어 각각의 생약재가 갖고 있는 함암 효과가 유지됨을 알수 있다.

(3) 실험예3(SOD유사활성효과 측정 실험)

실시예 1에서 제조한 발효주를 시료로 사용하였다.

발효주 0.3 ㎖ 에 0.1 M Tris-HCl, 버퍼 pH 8.5, 3 ㎖ 와 72mM 피로갈롤(Pyrogallol) 0.3 ㎖ 를 넣고 25 ℃ 에서 20분간 처리한 후 1N HCl용액으로 반응정지시킨 다음 파장 420 nm에서 흡광도를 측정하였다.

시료무첨가구의 흡광도에 대한 시료첨가구의 흡광도의 비를 백분율로 나타내었다.

또, 각각의 생약재가 가지는 SOD유사활성효과를 측정하기 위해 용매분획별 추출액도 0.3 ㎖ 을 첨가하여 비교 측정하였다.

<표 6> SOD 유사활성효과(%)

시 료	지방 및 왁스류	터페노이드 및 페놀류	알칼로이드류	극성알칼로이드류 및 질소화합물	발효주
느릅나무뿌리	22.4	29.3	33.0	50.8	51.4
뽕나무뿌리	-	82.3	2.3	13.2
우슬뿌리	25.3	23.3	23.4	26.8
엉겅퀴뿌리	34.6	3.3	41.3	49.5
쥐눈이콩	31.3	14.2	29.7	39.8

SOD유사활성효과는 대사과정 중 체내에 생기는 유해한 산소를 제거시키는 중요한 기능을 보는 것으로 뽕나무 추출액 중 터페노이드 및 페놀류에서 강한 SOD유사활성을 나타낸 것을 제외하고는 각 생약재 추출액이 가지는 효과보다 발효주가 가지는 효과가 더 크게 나타났다.

(4) 실험예4(티로시나제 저해활성효과 분석 실험)

실시예 1에서 제조한 발효주를 시료로 사용하였다.

발효주 0.5 ㎖ 에 5mM L-DOPA(Dihydroxy phenylalanine) 0.2 ㎖ 와 0.1M 소듐 포스페이트(sodium phosphate) 버퍼 pH 6.0, 0.2 ㎖ 를 가하여 혼합한 후 티로시나제(tyrosinase) 11U 첨가하여 35 ℃ 에서 5분간 방치한 다음 파장 475nm 에서 흡광도를 측정하였다.

시료무첨가구에 대한 흡광도에 시료첨가구의 흡광도의 차를 백분율로 나타내었다.

또, 각각의 생약재가 가지는 티로시나제(tyrosinase) 저해활성효과를 측정하기 위해 용매분획별 추출액도 0.3 ㎖ 을 첨가하여 비교 측정하였다.

티로시나제 효소는 갈색색소를 형성시키는 갈변화효소로서 티로시나제의 활성을 저지시키는 효과가 크게되면 피부미백효과가 좋다고 알려져 있다.

<표 7> 티로시나제 저해활성효과(%)

시 료	지방 및 왁스류	터페노이드 및 페놀류	알칼로이드류	극성알칼로이드류 및 질소화합물	발효주
느릅나무뿌리	66.6	55.8	65.5	74.9	95.4
뽕나무뿌리	100	100	100	97.0
우슬뿌리	79.3	76.5	63.8	39.8
엉겅퀴뿌리	68.4	66.4	44.3	51.9
쥐눈이콩	64.1	68.5	72.6	73.7

위 실험결과 뽕나무의 티로시나제 저해활성효과가 가장 높게 나타났으며 발효주 역시 저해활성효과가 높게 나타났다.

(5) 실험예5(발효주의 카텝신 B (Cathepsin B) 활성저해효과(%) 측정 실험)

실시예 1에서 제조한 발효주를 시료로 사용하였다.

카텝신 B의 저해물질의 활성도 측정은, 분광광도계 4 mL 큐빗내에 25 mM 소듐 아세테이트 (sodium acetate) 버퍼 pH 5.2 에 1 mM 이디티에이(EDTA; 에틸렌디아민테트라아세트산)를 녹인 인큐베이션 (incubation) 버퍼 3.2 ㎖ 를 넣고 기질로 CLN는 5.22 mM을 디메틸술폭시화물(dimethylsulfoxide) 에 녹여 사용하였으며, BANA는 171 mM 농도를 N,N-디메틸포름아미드(dimethylformamide)에 녹여 각 100 uL를 반응시켰으며 저해물질용액은 100 uL를 취하여 반응시켰다.

CLN 기질의 경우는 326 nm에서, BANA 기질인 경우는 340 nm에서 25 ℃ 에 각 반응시간에 따라 반응시킨 후 저해활성의 기울기 값을 이용하여 저해활성도를 측정하였다.

저해물질이 첨가되지 않은 기질과 효소의 반응을 A, 기질과 효소 및 저해물질이 첨가된 반응을 B, 효소가 첨가되지 않은 기질과 저해물질의 반응을 C 라고 할때 저해활성도를 다음 식으로 계산하였다.

저해활성(%) = (B-C/A-C)×100

<표 8> 카텝신 B의 저해활성효과(%)

기질	CLN	BANA
발효주	60.8	61.1

CLN(N α-CBZ-l-Lysine p-nitrophenyl ester HCl,5.22mM):326nm에서 OD측정

BANA(N α-benzoyl-DL-arginine β-naphthylamide,171mM):340nm에서 OD측정

카텝신 B 효소는 류머티스 관절염, 암 발병과 전이, 염증 및 노인성치매 등의 여러 질병에 관여하고 있는 효소이다.

따라서 관절염 치료 및 예방에 대한 효과를 본 것으로 CLN과 BANA를 기질로 이용하였을 경우 둘다 카텝신 B 의 저해력이 60%이상이 나타남을 확인할 수 있었다.

(6) 실험예6 (발효주의 알콜대사 활성에 미치는 효과 분석 실험)

실시예 1에서 제조한 발효주를 시료로 사용하였다.

발효주의 알콜 대사활성에 미치는 효과는 알콜 분해효소의 활성과 알콜 분해 시 발생되는 아세트알데히드생성물을 분해시키는 아세트알데히드분해효소의 활성을 측정하였다.

즉 알콜 분해효소의 활성에 미치는 영향을 검토하기 위해서는 다음과 같은 실험조작을 하였다.

기질로 알콜 0.2 ㎖ 에 NAD(nicotinamide adenine dinucleotide) 수용액 (2mg/㎖) 1.0 ㎖, ADH(Alcohol Dehydrogenase) 활성촉진제로 발효주를 0.2 ㎖ 혼합 한 후 0.01M glycine-NaOH 버퍼 pH 8.8로 총 부피가 3.6 ㎖ 이 되게 첨가한 후 25 ℃ 인큐베이터에서 10분간 반응시킨 후 알콜 분해효소인 ADH (18 unit/㎖) 를 0.5 ㎖ 가하여 340 nm 에서 흡광도의 변화를 측정하였다.

대조구는 ADH (18 unit/mL) 0.5 ㎖ 대신에 0.01 M glycine-NaOH 버퍼 pH 8.8로 0.5 ㎖ 를 넣어 반응종료시의 최대흡광도에 대한 비율로 나타내었다.

또, 알콜분해산물인 알데히드류의 분해를 촉진시키는 ALDH (아세트 알데히드) 효소의 활성에 미치는 영향을 검토하기 위해서는 다음과 같은 실험조작을 하였다.

즉, 기질로 25 mM 아세트알데히드 0.2 mL 에 NAD 수용액 (2mg/mL) 2.0 ㎖, 10 mM 피라졸(pyrazole) 0.2 ㎖, ALDH(1 uinit/mL) 0.2㎖, 50 mM Sodium pyrophosphate(소듐 피로포스페이트)·HCl 버퍼 3 ㎖ 를 혼합한 후 ALDH 활성촉진제인 발효주를 0.2mL 가하여 25 ℃ 에서 반응시킨 후 흡광도를 측정하여 반응 종료 시의 최대흡광도에 대한 비율로 나타내었다.

이때, 알콜 대사를 촉진시키는 1.0 % 아스파르트산을 비교 실험하여 그 효과를 비교분석하였다.

<표 9> 알콜대사 효소의 활성에 미치는 효과(%)

기질	ADH활성효과	ALDH활성효과
대조구	100	100
발효주	127.5	211.3
아스파르트산(1.0%)	150.0	172.5

일반적으로 술을 마쉬게 되면 체내에서 알콜은 알콜분해효소에 의해 아세트알데히드가 되고 이는 다시 아세트알데히드분해효소에 의해 아세트산으로 되어 뇨나 이산화탄소로 배설된다.

따라서, 알콜 섭취량이 많게 되면 알콜 분해중간산물로 생성되는 아세트알데히드가 뇌로 전해져 많은 유해화합물로 바뀌어 맥박의 증가나 발한, 홍조, 오심 , 구토 등의 증상을 초래하게 되는데 이때 아세트알데히드산물의 분해를 촉진하는 효소인 ALDH의 활성을 높이는 물질이 있게 되면 숙취해소에 효과가 있게 된다.

바로 이 발효주를 마시게 되면 술을 마신 후 깨는 과정에서 머리가 아픈 현상이 없어다는 점이 발견되어 in vitro 실험으로 이를 검토한 결과 알콜 분해효과는 비록 크지 않지만 아세트알데히드성분을 분해하는 ALDH의 효소활성을 촉진하는 효과가 상당히 높으므로서 숙취해소에도 좋은 효과를 보여주었다.

본 발명의 제조방법에 의해 심혈관 및 관절 염증 의 한방치료를 위해 주로 사용되는 느릅나무뿌리, 뽕나무뿌리, 우슬뿌리, 엉겅퀴뿌리, 쥐눈이콩을 솔잎과 찐 찹쌀, 누룩으로 발효주를 제조함으로써 생약재를 달여 먹어야 하는 불편함이 없게 된다.

아울러, 각각의 생약재를 달여 먹는 등의 다른 처방으로 했을 때와 비교해 약리효과가 떨어지지 않게 된다.

또한, 숙취해소가 빨리 되는 발효주를 제조함으로써 지속적으로 복용함에 있어 숙취로 괴로워하지 않게 된다.

또한, 솔잎을 찹쌀과 함께 쪄 솔잎 향기가 찹쌀에 베여 발효 과정을 거치면서 생약재의 역한 냄새가 나지 않게 된다.

또한, 항산화효과와 발암 억제 효과, 미백효과, 관절염 예방 및 치료 효과, 숙취 해소 효과를 갖는 발효주가 제공된다.

Claims (4)

1. 술의 제조방법에 있어서,

   찹쌀을 물에 6 ~ 10 시간 동안 불리는 제 1공정;

   물에 불리기 전 찹쌀의 중량 대비 8 ~ 12 중량 % 의 솔잎을 물에 불려진 찹쌀에 첨가한 후 용기에서 100 ℃ 로 찌는 제 2공정;

   용기에서 찐 찹쌀과 솔잎의 혼합물에 느릅나무뿌리, 뽕나무뿌리, 우슬뿌리, 엉겅퀴뿌리, 쥐눈이콩으로 구성된 생약재와 누룩 및 엿기름을 첨가하는 제 3공정;

   생약재와 누룩 및 엿기름이 첨가된 찐 찹쌀과 솔잎의 혼합물에, 물에 불리기 전 찹쌀의 중량 대비 200 ~ 400 중량 %의 물을 넣고 혼합한 후 9 ~ 25 ℃의 온도에서 발효시키는 제 4공정;

   상기 제 4공정에서 발효된 발효액을 여과하여 아질산염 소거능을 갖는 술을 제조하는 제 5공정;으로 구성된,

   솔잎과 생약재가 함유된 발효주의 제조방법
2. 제 1항에 있어서,

   제 3공정의 생약재와 누룩은, 물에 불리기 전 찹쌀의 중량에 대비하여 느릅나무뿌리 7.5 중량 %, 뽕나무뿌리 1.25 중량 %, 우슬뿌리 5 중량 %, 엉겅퀴뿌리 3.75 중량 %, 쥐눈이콩 2.5 중량 %, 누룩 12.5 중량 % 첨가하는 것을 특징으로 하는,

   솔잎과 생약재가 함유된 발효주의 제조방법
3. 제 1항 또는 제 2항에 있어서,

   제 4 공정에서, 9 개월 내지 10 개월 동안 발효시키는 것을 특징으로 하는,

   솔잎과 생약재가 함유된 발효주의 제조방법
4. 발효주에 있어서,

   제 1항 내지 제 2항 중 어느 한 항의 제조방법에 의해 제조된,

   솔잎과 생약재가 함유된 발효주.

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