KR100627828B1 - 소라렌 또는 그 유도체를 포함하는 부정맥의 예방 및치료용 조성물 - Google Patents

소라렌 또는 그 유도체를 포함하는 부정맥의 예방 및치료용 조성물 Download PDF

Info

Publication number
KR100627828B1
KR100627828B1 KR1020040093690A KR20040093690A KR100627828B1 KR 100627828 B1 KR100627828 B1 KR 100627828B1 KR 1020040093690 A KR1020040093690 A KR 1020040093690A KR 20040093690 A KR20040093690 A KR 20040093690A KR 100627828 B1 KR100627828 B1 KR 100627828B1
Authority
KR
South Korea
Prior art keywords
benzopyran
furo
compound
carbon atoms
mmol
Prior art date
Application number
KR1020040093690A
Other languages
English (en)
Other versions
KR20050047489A (ko
Inventor
은재순
곽용근
김대근
정영훈
유동진
Original Assignee
우석대학교 산학협력단
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 우석대학교 산학협력단 filed Critical 우석대학교 산학협력단
Publication of KR20050047489A publication Critical patent/KR20050047489A/ko
Application granted granted Critical
Publication of KR100627828B1 publication Critical patent/KR100627828B1/ko

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A61K31/366—Lactones having six-membered rings, e.g. delta-lactones
    • A61K31/37—Coumarins, e.g. psoralen
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/23—Apiaceae or Umbelliferae (Carrot family), e.g. dill, chervil, coriander or cumin

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)

Abstract

본 발명은 소라렌 또는 그 유도체와 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.
본 발명에 따른 조성물은 사람 심방에 주로 발현하는 hKv1.5통로를 선택적으로 차단하는데 우수한 효과를 나타내기 때문에 부정맥의 예방 및 치료에 이용할 수 있다.
소라렌, 부정맥, K 통로, hKv1.5통로

Description

소라렌 또는 그 유도체를 포함하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물 {Compositions for preventing and treating arrhythmia comprising Psoralen or derivatives thereof}
도 1a는 hKv1.5통로 유전자가 발현된 Ltk-세포에서 막전압을 -80 mV에서 +50 mV로 자극시 기록된 대조 K+전류를 나타낸 도이다.
도 1b는 hKv1.5통로 유전자가 발현된 Ltk-세포에서 막전압을 -80 mV에서 +50 mV로 자극시 기록된 K+전류에 대한 소라렌(화합물 1)의 효과를 나타낸 도이다.
도 1c는 hKv1.5통로 유전자가 발현된 Ltk-세포에서 막전압을 -80 mV에서 +50 mV로 자극시 각 막전압에서 대조전류에 대한 상대적 전류로 소라렌의 효과를 나타낸 도이다.
도 1d는 hKv1.5통로 유전자가 발현된 Ltk-세포에서 막전압을 -80 mV에서 +50 mV로 자극시 마지막에 기록된 안정전류에 대한 소라렌의 용량반응곡선을 나타낸 도이다.
도 2는 hKv1.5통로 유전자가 발현된 Ltk-세포에서 소라렌(화합물 1, 1mM)에 의한 hKv1.5통로억제의 막전압 의존성을 나타낸 도이다.
도 3은 hKv1.5통로 유전자가 발현된 Ltk-세포에서 소라렌(화합물 1, 1mM)에 의한 hKv1.5통로억제의 통로상태 의존성을 나타낸 도이다.
도 4a는 흰쥐 심방조직의 활동전위에 대한 소라렌의 용량에 따른 활동전위모양 변동을 나타낸 도이다.
도 4b는 흰쥐 심방조직에서 90% 재분극시의 활동전위기간 (APD90)에 미치는 소라렌의 용량별 평균효과를 나타낸 도이다.
본 발명은 소라렌 또는 그 유도체와 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.
부정맥이란, 다양한 원인에 의해 국소부위 심근의 전기/생화학적 특성이 변하여 심장의 비정상적 전기충동 형성 또는 전기충동의 전파(propagation) 장애가 일어나 심장의 비정상적인 리듬으로 심장의 펌프 기능에 이상이 나타나는 질환이다(www.americanheart.org/heart and stroke).
부작용이 없는 이상적인 항부정맥제란, 비정상적으로 흥분성을 나타내는 심근세포(또는 심장박동수가 비정상적인 세포)에만 작용하거나, 심장 내에서도 부정맥 발생원인 조직(즉 심방, 심실, 퍼킨제섬유 등)에만 작용하는 약물이여야 하지 만, 이러한 조건을 충족시키는 약물은 현재 개발되지 못했다. 부작용이 없거나 적은 새로운 항부정맥제를 개발하기 위해서는 항부정맥제의 작용부위 즉 이온통로에 대한 분자생물학적 수준의 새로운 이해가 뒤따라야 한다. 따라서, 분자생물학적 클로닝 기법과 전기생리학적 기법을 병용한다면 새로운 이상적인 항부정맥제를 효과적으로 개발할 수 있을 것이다.
한편, 활동전위 기간은 여러 K+통로에 의해 조절되며, 심장 각 부위별로 발현하는 K+통로의 여러 유전자가 알려져 있다.
심장에서 가장 다양한 이온 통로인 K+통로 전류는 크게 내향성 전류(IK1, inward rectifying current; IKAch, acetylcholine-activated current; IKATP, ATP-sensitive K+ channel 등)와 막전압 의존성(voltage-gated) K+(Kv) 전류로 분류되는데, 대체로 내향성 K+ 전류는 안정막 전압조절에 관여하고 Kv 전류는 활동전위기간을 조절한다.
Kv 통로들은 세포의 재분극에 기여하여 활동전위 기간을 조절할 수 있다. 임상적으로, 심실근에서 발생되는 부정맥들은 손상조직부위의 재분극 장애로 초래된다고 알려져 있기에, 부정맥치료의 중요한 표적으로 Kv 통로를 삼고 있다. 실제로, 퀴니딘, 베라파밀, 니페디핀, 소타롤, 아미오다론, 프레카니드, 크로피리움 등의 항부정맥제가 이러한 Kv 통로에 작용한다고 알려져 있다(Katz AM. Selectivity and toxicity of antiarrhythmic drugs: molecular interactions with ion channels. Am J Med 1998, 104:179-195). 그러나 이런 약물들은 이온통로 선택성이 결여되어 많은 부작용을 초래한다고 알려져 있기 때문에 이온 통로 선택성이 있는 새로운 약물개발이 필요하다.
Kv 통로는 8종류(Kv1.1-Kv1.8) 이상이 알려져 있으며(Grissner S. Potassium channels still hot. TiPS 1997, 18:347-350), 현재 심장조직에서 클로닝된 Kv 통로유전자는 Kv1.1, Kv1.2, Kv1.4, Kv1.5, Kv2.1, Kv4.2, Kv4.3 등 7종류이다(Deal등. Molecular physiology of cardiac potassium channels. Physiol Rev 1996, 76:49-67). 이들 유전자 중 사람심장에 발현하는 중요 Kv 통로유전자는 hKv1.4, hKv1.5, Kv4.3 및 HERG 유전자이다. 이런 유전자들은 주로 심방과 심실에 모두 발현하나, hKv1.5유전자는 사람 심방에 주도적으로 발현되며, 사람 심방에서 특징적으로 기록되는 IKur과 전기생리학적 및 약리학적 특성이 같다고 알려져 있다(Fedid등. The 1997 Stevenson Award Lecture. Cardiac K+ channel gating: cloned delayed rectifier mechanisms and drug modulation. Can J Physiol Pharmacol 1998, 76:77-89). 따라서, hKv1.5통로의 선택적인 차단제를 개발한다면 심방성 부정맥치료제가 될 것이다.
본 발명자들은, 사람 심방에 주도적으로 발현하는 hKv1.5통로에 대한 선택 적인 차단제를 개발하고자 연구한 결과, 소라렌 및 그 유도체가 hKv1.5통로 전류 및 사람 심방세포의 IKur전류를 억제하고, 심박수에 비례하여 그 효과가 증대됨을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.
따라서, 본 발명은 부정맥의 예방 및 치료 효과가 우수한 약제학적 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.
본 발명은 하기의 화학식 1로 표시되는 소라렌 또는 그 유도체와 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물에 관한 것이다.
Figure 112004053209535-pat00001
상기 식 중,
R1은 수소, 히드록시, 탄소수 1 내지 5의 저급알콕시, 탄소수 1 내지 5의 저급알케닐, 탄소수 1-5의 저급알케닐옥시, 탄소수 1 내지 5의 저급알킬카보닐옥시, 페닐아세톡시, 탄소수 1 내지 5의 히드록시알킬, 탄소수 1 내지 5의 알킬카보닐옥 시알킬, 트리플루오로메탄설폭시, 메톡시에톡시메톡시 및 메톡시에톡시메톡시알킬(알킬은 탄소수 1 내지 5임)로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있으며;
R2는 수소, 히드록시, 탄소수 1 내지 5의 저급알콕시, 탄소수 1-5의 저급알케닐옥시, 탄소수 1-5의 저급알콕시메틸, 탄소수 1 내지 5의 저급알킬카보닐옥시, 페닐아세톡시, 메톡시에톡시메톡시 및 말단에 아데닌이 치환된 탄소수 2 내지 9의 알콕시메틸기로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
상기의 화학식 1로 표시되는 소라렌 또는 그 유도체들 중에서 본 발명에 특히, 바람직하게 사용되는 화합물들은 하기에 나타낸 바와 같다
Figure 112004053209535-pat00002
.
Figure 112004053209535-pat00003
Figure 112004053209535-pat00004
본 발명의 유효성분인 화학식 1로 표시되는 소라렌은 식물에 존재하는 물질로, 인체에 안전하고 독성이 적으며 백반증, 곰팡이 억제작용이 있어 건선에 사용하는 것으로 알려졌다. 소라렌은 특히, 어수리 (Heracleum moellendorffii)에 다량으로 포함되어 있기 때문에 어수리 추출물을 이용하여 본 발명의 조성물을 제조할 수도 있다.
소라렌 및 그 유도체는 hKv1.5통로 전류 및 사람 심방세포의 IKur전류를 억제하고, 심박수에 비례하여 그 효과가 증대되기 때문에 부정맥의 예방 및 치료, 특히, K+ 통로 매개 질환 및 hKv1.5 통로 매개 질환의 예방 및 치료에 우수한 효과를 나타낸다.
상기에 기재된 것 처럼, 본 발명의 조성물에 포함되는 소라렌 유도체 중 화합물 3, 5, 6, 7, 8, 10, 12, 14 및 19-25는 신규한 물질이며, 이를 제외한 화합물들은 공지물질이다. 그러나, 이들 소라렌 유도체가 K+통로 차단작용 및 항부정맥 효과가 있다는 사실은 어떠한 문헌에도 기재되거나 암시된 적이 없다.
본 발명의 조성물에 포함되는 소라렌 또는 그 유도체는 공지의 방법들(Kwon, Y.S., Cho, H.Y. and Kim, C.M., The chemical constituents from Heracleum moellendorffii roots. Yakhak Hoeji 2000, 44(2):521-527)에 의해 제조하거나 시중에서 구입하여 사용할 수 있다.
본 발명의 몇몇 화합물들은 하기 반응식 1~15의 합성과정으로 합성될 수 있다. 그러나, 이는 단지 예시를 들기 위한 것으로서, 본 발명이 이에 한정되는 것은 아니다.
Figure 112004053209535-pat00005
화합물 2를 요요드화마그네슘으로 처리하여 탈메틸화 반응을 행하여 화합물 26을 얻는다.
Figure 112004053209535-pat00006
화합물 26을 4-N,N-디메틸아미노피리딘 염기 존재하에서 무수 디시클로헥실카보디이미드 (dicyclohexylcarbodiimide)와 페닐초산으로 처리하여 대응하는 에스테르 화합물 3을 얻는다.
Figure 112004053209535-pat00007
화합물 26을 4-N,N-디메틸아미노피리딘 염기 존재하에서 무수 디시클로헥실 카보디이미드 (dicyclohexylcarbodiimide)와 부틸산으로 처리하여 대응하는 에스테르 화합물 5를 얻는다.
Figure 112004053209535-pat00008
화합물 26을 소디움하이드라이드 염기로 처리한 후 알릴브로마이드와 반응시켜 에테르 화합물 6을 얻는다.
Figure 112004053209535-pat00009
화합물 26를 소디움하이드라이드 염기로 처리한 후 메톡시에톡시메틸클로라이드와 반응시켜 에테르 화합물 7을 얻는다.
Figure 112004053209535-pat00010
화합물 26를 소디움하이드라이드 염기로 처리한 후 부틸브로마이드와 반응시켜 에테르 화합물 8을 얻는다.
Figure 112004053209535-pat00011
화합물 9를 요오드화마그네슘으로 처리하여 탈메틸화 반응을 행하여 화합물 27을 얻는다.
Figure 112004053209535-pat00012
화합물 27을 4-N,N-디메틸아미노피리딘 염기 존재하에서 무수 디시클로헥실 카보디이미드 (dicyclohexylcarbodiimide)와 페닐아세틱 산으로 처리하여 대응하는 에스테르 화합물 10을 얻는다.
Figure 112004053209535-pat00013
화합물 27을 4-N,N-디메틸아미노피리딘 염기 존재하에서 무수 디시클로헥실카보디이미드 (dicyclohexylcarbodiimide)와 부틸산으로 처리하여 대응하는 에스테르 화합물 12를 얻는다.
Figure 112004053209535-pat00014
화합물 27을 소디움하이드라이드 염기로 처리한 후 메톡시에톡시메틸클로라이드와 반응시켜 에테르 화합물 14를 얻는다.
Figure 112004053209535-pat00015
화합물 27을 트리에틸아민 염기존재 하에서 트리플루오로설포닐 클로라이드로 처리하여 트리플레이트 19를 얻은 후 이를 테트라키스트리페닐포스핀 팔라디움과 트리부틸비닐틴과 반응시켜 화합물 20을 얻는다.
Figure 112004053209535-pat00016
화합물 19를 테트라키스트리페닐포스핀 팔라디움과 트리부틸알릴틴으로 처리하여 화합물 21을 얻은 후 이를 9-BBN으로 하이드로보란화을 행하고 이어 소디움퍼보레이트로 산화시켜 알코올 22를 얻는다.
Figure 112004053209535-pat00017
화합물 22를 트리에틸아민 염기 존재하에서 무수 초산으로 처리하여 에스테르 화합물 23을 얻는다.
Figure 112004053209535-pat00018
화합물 22를 디이소프로필에틸아민 염기로 처리한 후 메톡시에톡시메틸클로라이드와 반응시켜 에테르 화합물 24를 얻는다.
Figure 112004053209535-pat00019
화합물 22를 4-N,N-디메틸아미노피리딘 염기 존재하에서 무수 디시클로헥실카보디이미드 (dicyclohexylcarbodiimide)와 부틸산으로 처리하여 에스테르 화합물 25을 얻는다.
본 발명에 따른 조성물에 포함되는 약제학적으로 허용가능한 담체로는, 부형제, 결합제, 활택제, 붕괴제, 피복제, 유화제, 현탁제, 용제, 안정화제, 흡수조제, 주사용수, 등장화제 등을 예시할 수 있으며, 본 발명에 따른 조성물은 이들 화합물들로부터 선택된 1종 이상의 성분을 포함할 수 있다.
본 발명의 조성물은 경구 또는 주사제 제제로써 제형화될 수 있으며, 경구 제제의 제형이 보다 바람직하다. 경구 제제로는, 과립제, 정제, 캅셀제, 액제 등을 예시할 수 있다.
또한, 본 발명의 조성물은 다양한 식품류에도 이용될 수 있다. 본 발명의 조성물이 첨가될 수 있는 식품으로는 예컨데, 차, 건강보조 식품류 등을 들 수 있 다.
본 발명의 조성물의 투여량은 환자의 나이, 성별, 체중에 따라 달라질 수 있으나, 소라렌 중량기준으로, 통상 10∼5000 mg/일이 바람직하고, 보다 바람직하게는 50∼1000 mg/일이다.
본 발명의 조성물은 K+통로 차단제 및 항부정맥제로 사용될 수 있으며, 쥐, 개, 토끼, 고양이, 닭 등의 온혈동물 치료에도 사용이 가능하다.
실시예
본 발명은 다음의 실시예에 의거하여 더욱 상세히 설명되나, 본 발명이 이들 실시예 의해 제한되지는 않는다.
실시예 1. 4-페닐아세톡시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온 [4-Phenylacetoxy-7H-furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one] (화합물 3)의 제조
5-히드록시소라렌(4-메톡시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온, 화합물 19, 0.012g, 0.059mmol)를 무수 메틸렌디클로라이드(3ml)에 녹인 후, 디시클로헥실카보디이미드(0.029g, 0.143mmol), 4-N,N-디메틸아미노피리딘(0.004g, 0.030mmol), 페닐초산(0.019g, 0.143mmol)를 차례로 가한다. 실온에서 3.5시간동안 교반하고, 추출, 세척, 건조하여 컬럼 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=3:1)를 행하여 0.016g (84.7％)의 화합물 3을 얻었다.
Rf: 0.29 (헥산 : 에틸아세테이트 = 3 : 1 )
1H-NMR (500MHz, CDCl3) δ7.59 ( d, 1H, J=2Hz ), 7.54 ( d, 0.5H, J=0.5Hz ), 7.52( d, 0.5H, J=0.5Hz ), 7.46 ( t, 5H, J=7Hz), 7.38 ( d, 1H, J=1Hz ), 6.40-6.39 ( m, 1H ), 6.29 ( s, 0.5H ), 6.28 ( s, 0.5H ), 4.02 ( s, 2H )
IR ( neat ) 1733.7, 1633.4, 1125.3 ㎝-1
실시예 2. 4-(1-옥소부톡시)-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온 [4-(1-oxobutoxy)-7H-furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one] (화합물 5)의 제조
5-히드록시소라렌(화합물 19, 0.015g, 0.074mmol)를 무수 메틸렌디클로라이드(3ml)에 녹인 후, 디시클로헥실카보디이미드(0.025g, 0.119mmol), 4-N,N-디메틸아미노피리딘(0.005g, 0.037mmol), 부틸산(0.016ml, 0.178mmol)을 차례로 가한다. 실온에서 7시간동안 교반하고, 추출, 세척, 건조하여 컬럼 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=3:1)를 행하여 0.019g(94.1％)의 화합물 5를 얻었다.
Rf: 0.28 ( 헥산 : 에틸아세테이트= 3 : 1 )
1H-NMR (500MHz, CDCl3) δ7.83 ( s, 0.5H ), 7.81 ( s, 0.5H ) 7.65 ( d, 1H, J=2Hz ), 7.40( s, 1Hz ), 6.65 ( dd, 1H, J=1, 2Hz ), 6.40 ( s, 0.5H ), 6.38 ( s, 0.5H ), 2.74 ( t, 2H, J=7.5Hz ), 2.42-1.93 ( m, 2H ), 1.15-1.11 ( m, 3H )
IR ( neat ) 1733.5, 1639.8, 1142.1 ㎝-1
실시예 3. 4-(2-프로페닐옥시)-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온 [4-(2-Propenyloxy)-7H-furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one] (화합물 6)의 제조
5-히드록시소라렌(화합물 19, 0.015g, 0.074mmol)를 무수 디메틸포름아마이드(1ml)에 녹이고, 0℃에서 디메틸포름아마이드(2ml)에 녹인 소디움하이드라이드(광유에 60% 현탁)(0.005g, 0.119mmol)를 가한다. 실온에서 2시간동안 교반한 후, 0℃에서 알릴브로마이드(0.026ml, 0.297mmol)를 가한 다음, 실온에서 19시간동안 교반한다. 추출, 세척, 건조하여 컬럼 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=4:1)를 행하여 0.010g(56.1％)의 화합물 6을 얻었다.
Rf: 0.26 ( 헥산 : 에틸아세테이트 = 4 : 1 )
1H-NMR (500MHz, CDCl3) δ8.21-8.17 ( m, 1Hz ), 7.62-7.60 ( m, 1H ), 7.18 ( dd, 1H, J=0.5, 2.5Hz ), 6.96-6.94 ( m, 1H ), 6.32-6.29 ( m, 1H ), 6.17-6.09 ( m, 1H ), 5.51-5.49 ( m, 0.5H ), 5.46 ( dd, 0.5H, J=1.5, 3Hz ), 5.38 ( dd, 0.5H, J=1.5, 2.5Hz ), 5.37-5.35 ( m, 0.5H ), 4.96-4.93( m, 2H )
IR ( neat ) 2352.8, 1721.2, 1591.1 ㎝-1
실시예 4. 4-메톡시에톡시메톡시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온 [4-Methoxyethoxymethoxy-7H-furo[3,2-g][1]benzopyran- 7-one] (화합물 7)의 제조
5-히드록시소라렌(화합물 19, 0.015g, 0.074mmol)를 무수 디메틸포름아마이드(1ml)에 녹이고, 0℃에서 디메틸포름아마이드(2ml)에 녹인 소디움하이드라이드(광유에 60% 현탁)(0.004g, 0.089mmol)를 가한다. 실온에서 2시간동안 교반한 후, 0℃에서 메톡시에톡시메틸 클로라이드(0.017ml, 0.148mmol)를 가한 다음, 실온에서 16시간동안 교반한다. 추출, 세척, 건조하여 컬럼 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=2:1)를 행하여 0.017g(77.7％)의 화합물 7을 얻었다.
Rf: 0.17 ( 헥산 : 에틸아세테이트 = 2 : 1 )
1H-NMR (500MHz, CDCl3) δ8.20 ( d, 0.5H, J=0.5Hz ), 8.18 ( d, 0.5H, J=1Hz ), 7.59( t, 1H, J=1Hz ), 7.20 ( d, 1H, J=1Hz ), 7.11-7.09 ( m, 1H ), 6.31 ( s, 0.5H ), 6.29 ( s, 0.5H ), 5.52 ( s, 2H ), 3.97-3.94 ( m, 2H ), 3.62-3.59 ( m, 2H ), 3.40-3.38( m, 3H )
IR ( neat ) 2922.8, 1729.8, 1619.9, 1122.6, 1047.6 ㎝-1
실시예 5. 4-부톡시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온 [4-Butoxy-7H-furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one] (화합물 8)의 제조
5-히드록시소라렌(화합물 19, 0.015g, 0.074mmol)를 무수 디메틸포름아마이드 (1ml)에 녹이고, 0℃에서 디메틸포름아마이드(2ml)에 녹인 소디움하이드라이드(광유에 60% 현탁)(0.004g, 0.089mmol)를 가한다. 실온에서 2시간동안 교반한 후, 0℃에서 부틸 브로마이드(0.016ml, 0.148mmol)를 가한 다음, 실온에서 13시간동안 교반한다. 추출, 세척, 건조하여 컬럼 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=4:1)를 행하여 0.008g(41.1％)의 화합물 8을 얻었다.
Rf: 0.37 ( 헥산 : 에틸아세테이트 = 4 : 1 )
1H-NMR (500MHz, CDCl3) δ8.19 ( d, 0.5H, J=0.5Hz ), 8.17 ( d, 0.5H, J=0.5Hz ), 7.60( d, 1H, J=2.5Hz ), 7.15 ( t, 1H, J=0.75Hz ), 6.97 ( dd, 1H, J=1, 2.5Hz ), 6.30 ( s, 0.5H ), 6.28 ( s, 0.5H ), 4.47 ( t, 2H, J=6.5Hz ), 1.92-1.85 ( m, 2H ), 1.63-1.54 ( m, 2H ), 1.06-1.02( m, 3H )
IR ( neat ) 1725.5, 1622.1 ㎝-1
실시예 6. 9-페닐아세톡시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온 [9-Phenylacetoxy-7H- furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one] (화합물 10)의 제조
8-히드록시소라렌(9-메톡시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온, 화합물 20, 0.015g, 0.074mmol)를 무수 메틸렌클로라이드(3ml)에 녹인 후, 디시클로카보디이미드(0.037g, 0.178mmol), 4-N,N-디메틸아미노피리딘(0.005g, 0.037mmol), 페닐초산(0.024g, 0.178mmol)를 차례로 가한다. 실온에서 2.5시간동안 교반하고, 추출, 세척, 건조하여 컬럼 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=3:1)를 행하여 0.022g(94.1％)의 화합물 10을 얻었다.
Rf: 0.23 ( 헥산 : 에틸아세테이트 = 3 : 1 )
1H-NMR (500MHz, CDCl3) δ7.80 ( s, 0.5H ), 7.78 ( d, 0.5H, J=1Hz ), 7.67 ( d, 1H, J=2.5Hz ), 7.57 ( s, 1H ), 7.52 ( t, 0.8H, J=1.5Hz ), 7.50 ( t, 1.2H, 1.5Hz ), 7.44 ( d, 0.5H, 1.5Hz ), 7.42 ( d, 1H, J=1.5Hz ), 7.41 ( t, 0.5H, 1.5Hz ), 7.36 ( t, 0.3H, 1.25Hz ), 7.35( t, 0.5H, 2Hz ), 7.33 ( s, 0.2H ), 6.84 ( d, 1H, J=2.5Hz ), 6.40 ( s, 0.5H ), 6.38 ( s, 0.5H )
IR ( neat ) 1734.7, 1587.9, 1133.4 ㎝-1
실시예 7. 9-(1-옥소부톡시)-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온 [9-(1-oxobutoxy)-7H-furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one] (화합물 12)의 제조
8-히드록시소라렌(화합물 20, 0.015g, 0.074mmol)를 무수 메틸렌디클로라이드(3ml)에 녹인 후, 디시클로헥실카보디이미드(0.025g, 0.119mmol), 4-N,N-디메틸아미노피리딘(0.005g, 0.037mmol), 부틸산(0.011ml, 0.119mmol)을 차례로 가한다. 실온에서 6.5시간동안 교반하고, 추출, 세척, 건조하여 컬럼 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=2:1)를 행하여 0.017g(84.7％)의 화합물 12를 얻었다.
Rf: 0.30 ( 헥산 : 에틸아세테이트 = 2 : 1 )
1H-NMR (500MHz, CDCl3) δ7.79 ( s, 0.5H ), 7.77 ( s, 0.5H ), 7.68 ( d, 1H, J=2.5Hz ), 7.55 ( s, 1H ), 6.85 ( t, 1H, J=2Hz ), 6.38 ( s, 0.5H ), 6.36 ( s, 0.5H ), 2.79-2.76 ( m, 2H ), 1.95-1.87 ( m, 2H ), 1.14 ( t, 3H, 7.25Hz )
IR ( neat ) 1739.0, 1136.4 ㎝-1
실시예 8. 9-메톡시에톡시메톡시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온 [9-Methoxyethoxymethoxy-7H-furo[3,2-g][1]benzopyran-7- one] (화합물 14)의 제조
8-히드록시소라렌(화합물 20, 0.015g, 0.074mmol)를 무수 디메틸포름아마이드(1ml)에 녹이고, 0℃에서 디메틸포름아마이드(2ml)에 녹인 소디움하이드라이드(광유에 60% 현탁)(0.004g, 0.089mmol)를 가한다. 실온에서 2시간동안 교반한 후, 0℃에서 메톡시에톡시메틸 클로라이드(0.017ml, 0.148mmol)를 가한 다음, 실온에서 20시간동안 교반한다. 추출, 세척, 건조하여 컬럼 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=1:1)를 행하여 0.016g(74.4％)의 화합물 14를 얻었다.
Rf: 0.31 ( 헥산 : 에틸아세테이트 = 1 : 1 )
1H-NMR (500MHz, CDCl3) δ7.79 ( s, 0.5H ), 7.77 ( s, 0.5H ), 7.69 ( d, 1H, J=2Hz ), 7.44 ( s, 1H ), 6.83 ( d, 1H, J=2Hz ), 6.38 ( s, 0.5H ), 6.37 ( s, 0.5H ), 5.58 ( s, 2H ), 4.16-4.13 ( m, 2H ), 3.60-3.57 ( m, 2H ), 3.35-3.33 ( m, 3H )
IR ( neat ) 1712.8, 1103.6 ㎝-1
실시예 9. 9-트리플루오로메탄설폭시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온 [9-trifluoromethanesulfoxy-7H-furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one] (화합물 19)의 제조
9-히드록시소라렌(9-히드록시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온, 화합물 27, 0.88 g, 4.353 mmol)을 무수 메틸렌디클로라이드(22 mL)에 녹인 후, 0oC로 냉각한다. 새로이 증류한 N,N-디이소프로필 에틸아민(0.83 mL, 4.788 mmol)를 점적하고 이어 트리플루오로메탄설포닐 클로라이드(0.8 mL, 4.788 mmol)를 가한다. 반응액을 0oC에서 0.5시간 교반한 후 포화 암모늄클로라이드 수용액을 가한다. 유기층을 분리하여 물, 포화식염수로 차례로 세척하고 무수 황산마그네슘으로 건조한 후, 감압 하 농축한다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=2:1)를 행하여 1.33g (91％)의 화합물 19를 백색 침상결정으로 얻었다.
Rf: 0.26 (헥산 : 에틸아세테이트 = 2 : 1 )
1H-NMR (500MHz, CDCl3) δ 6.59 (d, 1H, J = 9.5 Hz), 7.29 (d, 1H, J = 2 Hz), 8.17 (s, 1H), 8.27 (d, 1H, J = 9.5 Hz), 8.31 (d, 1H, J = 2 Hz)
실시예 10. 9-에테닐-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온 [9-ethenyl-7H-furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one] (화합물 20)의 제조
화합물 19 (0.9 g, 2.693 mmol)를 무수 테트라히드로퓨란(14 mL)에 녹인 후, 테트라키스트리페닐포스핀 팔라디움 (0) (0.3g, 0.269 mmol)과 비닐트리부틸틴(1.7 mL, 5.386 mmol)을 넣고 60oC에서 18시간 교반한 후 얼음물에 붓는다. 에틸아세테이트로 추출한 후 유기층을 물로 세척하고 무수 황산마그네슘으로 건조한 후, 감압 하 농축한다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=3:1)를 행하여 0.6 g (74％)의 화합물 20을 백색 결정으로 얻었다.
Rf: 0.28 (헥산 : 에틸아세테이트 = 3 : 1 )
1H-NMR (500MHz, CDCl3) δ 5.78 (dd, 1H, J = 1.5, 12 Hz), 6.38 (d, 1H, J = 9.5 Hz), 6.58 (s, 1H), 5.78 (dd, 1H, J = 1.5, 18 Hz), 6.84 (d, 1H, J = 2 Hz), 7.36 (dd, 1H, J = 12, 18 Hz), 7.58 (s, 1H), 7.75 (d, 1H, J = 2 Hz), 7.78 (d, 1H, J = 9.5 Hz)   
실시예 11. 9-(2-프로페닐)-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온 [9-(2-propenyl-7H-furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one] (화합물 21)의 제조
화합물 19 (1.27 g, 3.8 mmol)를 무수 테트라히드로퓨란(19 mL)에 녹인 후, 테트라키스트리페닐포스핀 팔라디움 (0) (0.44 g, 0.38 mmol)과 알릴트리부틸틴(2.22 mL, 7.6 mmol)을 넣고 60oC에서 18시간 교반한 후 얼음물에 붓는다. 에틸아세테이트로 추출한 후 유기층을 물로 세척하고 무수 황산마그네슘으로 건조한 후, 감압 하 농축한다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=3:1)를 행하여 0.4 g (66％)의 화합물 21을 백색 결정으로 얻었다.
Rf: 0.30 (헥산 : 에틸아세테이트 = 3 : 1 )
1H-NMR (500MHz, CDCl3) δ 3.90 (dt, 2H, J = 1.5, 1.5, 6.5 Hz), 5.08 (dd, 1H, J = 1.5, 10 Hz), 5.17 (dd, 1H, J = 1.5, 17 Hz), 6.11 (ddt, 1H, J = 6.5, 10, 17 Hz), 6.38 (d, 1H, J = 9.5 Hz), 6.83 (d, 1H, J = 2 Hz), 7.58 (s, 1H), 7.72 (d, 1H, J = 2 Hz), 7.80 (d, 1H, J = 9.5 Hz)
실시예 12. 9-(3-히드록시프로필)-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온 [9-(3-hydroxypropyl-7H-furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one] (화합물 22)의 제조
화합물 21 (0.2 g, 0.884 mmol)을 무수 테트라히드로퓨란(5.5 mL)에 녹인 후, 0oC에서 9-BBN (7.0 mL, 3.536 mmol, 0.5 M 테트라히드로퓨란 용액)을 가하고 4시간 교반한다. 반응액에 물 (2.3 mL)과 붕산나트륨 1수화물 (0.8 g, 5.304 mmol)을 넣은 후 실온에서 밤사이 교반한다. 에틸아세테이트로 추출한 후 유기층을 물로 세척하고 무수 황산마그네슘으로 건조한 후, 감압 하 농축한다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=1:2)를 행하여 0.13 g (64％)의 화합물 22를 백색 결정으로 얻었다.
Rf: 0.31 (헥산 : 에틸아세테이트 = 1:2 )
1H-NMR (500MHz, CDCl3) δ 1.61-1.63 (br, 1H), 2.04-2.08 (m, 2H), 3.26 (t, 2H, J = 7.5 Hz), 3.71 (t, 2H, J = 6.5 Hz), 6.39 (d, 1H, J = 9.5 Hz), 6.84 (d, 1H, J = 2.5 Hz), 7.57 (s, 1H), 7.72 (d, 1H, J = 2.5 Hz), 7.81 (d, 1H, J = 9.5 Hz)
실시예 13. 9-(3-아세톡시프로필)-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온 [9-(3-acetoxypropyl-7H-furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one] (화합물 23)의 제조
화합물 22 (7 mg, 0.030 mmol)을 무수 메틸렌디클로라이드(0.4 mL)에 녹인 후, 0oC로 냉각한다. 새로이 증류한 트리에틸아민(0.006 mL, 0.046 mmol)를 점적하고 이어 무수초산 (0.004 mL, 0.046 mmol)를 가한다. 반응액을 실온에서 12시간 교반한 후 메틸렌클로라이드로 추출한다. 유기층을 분리하여 물, 포화식염수로 차례로 세척하고 무수 황산마그네슘으로 건조한 후, 감압 하 농축한다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=2:1)를 행하여 7 mg (80％)의 화합물 23을 무색 시럽으로 얻었다.
Rf= 0.26 (헥산 : 에틸아세테이트=2:1)
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 2.06 (s, 3H), 2.06-2.17 (m, 2H), 3.24 (t, 2H, J = 7.5 Hz), 4.12 (t, 2H, J = 6.5 Hz), 6.38 (d, 1H, J = 9.5 Hz), 7.56 (s, 1H), 7.71 (d, 1H, J = 2 Hz), 7.80 (d, 1H, J = 9.5 Hz)  
실시예 14. 9-(3-메톡시에톡시메톡시프로필)-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온 [9-(3-methoxyethoxymethoxypropyl-7H-furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one] (화합물 24)의 제조
화합물 22 (9 mg, 0.039 mmol)을 무수 메틸렌디클로라이드(0.4 mL)에 녹인 후, 0oC로 냉각한다. 새로이 증류한 N,N-디이소프로필 에틸아민(0.068 mL, 0.391 mmol)를 점적하고 이어 메톡시에톡시메틸 클로라이드 (0.035 mL, 0.313 mmol)를 가한다. 반응액을 실온에서 12시간 교반한 후 포화 암모늄클로라이드 수용액으로 반응을 완결하고 에틸아세테이트로 추출한다. 유기층을 분리하여 물, 포화식염수로 차례로 세척하고 무수 황산마그네슘으로 건조한 후, 감압 하 농축한다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=1:1)를 행하여 9 mg (77％)의 화합물 24을 무색 시럽으로 얻었다.
Rf= 0.26 (헥산 : 에틸아세테이트=1:1)
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 2.07-2.11 (m, 2H), 3.23 (t, 2H, J = 7.5 Hz), 3.39 (s, 3H), 3.57 (dt, 2H, J = 3, 5 Hz), 3.65 (t, 2H, J = 5 Hz), 3.72 (dt, 2H, J = 3, 5 Hz), 4.75 (s, 2H), 6.38 (d, 1H, J = 9.5 Hz), 6.83 (d, 1H, J = 2 Hz), 7.56 (s, 1H), 7.71 (d, 1H, J = 2 Hz), 7.80 (d, 1H, J = 9.5 Hz)  
실시예 15. 9-{3-(1-옥소부톡시)프로필}-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온
[9-{3-(1-oxobuthoxy)propyl-7H-furo[3,2-g][1]benzopyran-7-one] (화합물 25)의 제조
    화합물 22 (5 mg, 0.022 mmol)를 무수 메틸렌디클로라이드(0.22 mL)에 녹인 후, 디시클로헥실카보디이미드(0.007g, 0.035mmol), 4-N,N-디메틸아미노피리딘(0.001g, 0.011mmol), 부틸산 (0.003 mL, 0.035 mmol)을 차례로 가한다. 반응액을 실온에서 12 시간 교반한 후, 에틸아세테이트로 추출한다. 유기층을 분리하여 물, 포화식염수로 차례로 세척하고 무수 황산마그네슘으로 건조한 후, 감압 하 농축한다. 잔사를 컬럼 크로마토그래피(헥산:에틸아세테이트=2:1)를 행하여 5 mg (73％)의 화합물 25을 무색 시럽으로 얻었다.
Rf= 0.28 (헥산 : 에틸아세테이트=2:1)
1H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 0.97 (t, 3H, J = 7.5 Hz), 1.64-1.69 (m, 2H), 2.13-2.17 (m, 2H), 2.29 (t, 2H, J = 7.5 Hz), 3.24 (t, 2H, J = 7 Hz), 4.14 (t, 2H, J = 6.5 Hz), 6.38 (d, 1H, J = 9.5 Hz), 6.83 (d, 1H, J = 2 Hz), 7.57 (s, 1H), 7.70 (d, 1H, J = 2 Hz), 7.80 (d, 1H, J = 9.5 Hz)  
실험예 1: 소라렌 및 그 유도체들의 hKv1.5통로 전류에 미치는 영향
1) 선택적 이온통로 발현 세포주(cell line)의 제조
심장에 발현하는 K+통로 유전자를 각각 선택적으로 하나씩만 발현하는 세포주를, 논문(Yang, et al., Inhibition of cardiac potassium currents by the vesnarinone analog OPC-18790: comparison with quinidine and dofetilide. J Pharmacol Exp Ther 1997, 280:1170-1175; Kwak, et al., Phosphorylation is required for alteration of Kv1.5 K+ channel function by the Kvbeta 1.3 subunit. J Biol Chem 1999, 274:25355-25361)에 기재된 방법을 사용하여 제작하였다. 즉, 덱사메타손(dexamethasone)에 의해 유도되는 마우스 유암 바이러스 프로모터(murine mammary tumor virus promotor)를 갖고 있는 pMSVneo에 hKv1.5 및 HERG를 끼워 넣어 마우스 Ltk-세포(mouse Ltk-cell)에 리포펙타민(lipofectamine)으로 감염시킨 후, 24 시간 후 G418 0.5 ㎍/㎖을 함유한 DMEM 배지에 단일 콜로니(colony)를 형성할 때까지 2주간 세포를 배양하였다. 개개의 콜로니를 분리하여 G418 0.25 ㎍/㎖를 함유한 배지에 배양하여 노던(northern)블롯 및 홀-셀 전압고정(whole-cell voltage clamp) 방법으로 각 이온통로 발현수준을 검토하여 다음 실험에 사용하였다. 이렇게 선택된 세포주는 G418 0.25 ㎍/㎖를 함유한 배지에서 실험에 사용할 때까지 배양하였다. 안정 세포주(stable cell line)가 아닌 일시 유전자발현(transient transfection)용 세포들은 DMEM 배지에서 배양하였다.
2) 전류기록
사람 심방세포 및 세포주에서 전류는 막전압고정(gigaohm-seal patch clamp) 방법 중 홀-셀(whole cell) 방법으로 기록하는데(Kwak, et al., Phosphorylation is required for alteration of Kv1.5 K+ channel function by the Kvbeta 1.3 subunit. J Biol Chem 1999, 274:25355-25361), 전기적인 신호를 패취 고정(patch clamp) 증폭기(Axon Instruments, Axopatch-1D, Foster, USA)로 증폭 후, 전류의 신호를 신호변환기(Digidata 1200, Axon Instruments)로 디지털신호로 변환하여 컴퓨터에 저장하였다. 그리고, 전류기록에 사용한 미세전극(Kimax-51, 1.5-1.8 x 100 mm)은 2-단계 미세전극 제조기(2-stage pipette puller: Narishige, PP-83)로 뽑아서 미세전극 말단을 열처리하여 사용하는데, 이때 저항이 1-2 MΩ정도되는 피펫을 사용하였다. 한편, 홀 셀 모드(whole cell mode)의 미세전극 내 용액은 100 mM KCl, 10mM HEPES, 5 mM K4BAPTA, 5 mM K2ATP 및 1 mM MgCl2 (pH 7.2)을 함유하고, 세포외용액은 130 mM NaCl, 4 mM KCl, 1.8 mM CaCl2, 1 mM MgCl2, 10 mM HEPES 및 10 mM 글루코스(pH 7.35)를 함유하였다.
상기에서 제조한 세포주(Ltk-cell)에, 세포막 전압을 -80 ㎷로 고정하고 +50 ㎷로 250 ms 동안 탈분극 자극을 가한 후 -50 ㎷로 재분극하면서 전류를 기록하였다. 각 화합물의 용량-의존적 hKv1.5통로 전류 억제효과는 화합물이 존재하지 않을 때의 +50 mV로 탈분극 자극 말기에 측정된 안정전류에 대한 상대적 크기로 표시하여 비교하였다.
도 1a 내지 도 1b는 Ltk-세포에 발현시킨 hKv1.5통로 전류에 대한 소라렌(화합물 1)의 효과를 나타낸다. 도 1c는 각 막전압에서 소라렌의 통로억제효과를 평균적으로 나타낸 도이고, 도 1d는 탈분극 자극의 마지막에 기록된 안정전류와 소라렌의 용량반응곡선을 나타낸 도이다.
도 1로부터, 소라렌은 Ltk-세포에 발현시킨 hKv1.5통로 전류를 농도-의존적으로 억제하는 것을 확인할 수 있었다. 또한, 소라렌(화합물 1)은 열려진 이온통로를 우선적으로 차단하는 양상을 보였다.
50 mV로 탈분극시 소라렌의 hKv1.5통로억제작용에 대한 IC50은 180 ± 21 nM (n=6)이었다. 더불어 용량반응곡선을 힐(Hill) 방정식으로 피팅(fitting)시 소라렌의 힐(Hill) 상수값은 1.39 이었다.
상기 화합물들, 즉 화합물 1 ~ 25의 hKv1.5통로 전류 억제작용에 대한 효능을 비교한 결과는 표 1에 나타난 바와 같다.
소라렌유도체 (10 μM)의 hKv1.5통로 전류 억제작용에 대한 효능 비교
시료 차단율(%) 시료 차단율(%)
화합물 1 72.8±9.7 화합물 14 95.9±8.9
화합물 2 62.0±7.5 화합물 15 90.9±7.7
화합물 3 50.5±6.8 화합물 16 61.5±7.2
화합물 4 10.3±2.1 화합물 17 11.6±3.2
화합물 5 35.5±5.1 화합물 18 97.6±9.5
화합물 6 95.3±8.7 화합물 19 85.3±6.8
화합물 7 45.5±6.5 화합물 20 95.5±3.5
화합물 8 85.8±8.9 화합물 21 75.2±4.7
화합물 9 17.1±4.3 화합물 22 70.8±6.5
화합물 10 18.3±3.5 화합물 23 90.4±6.9
화합물 11 15.5±3.8 화합물 24 70.6±5.5
화합물 12 50.6±6.8 화합물 25 80.9±7.3
화합물 13 45.5±6.2
실험예 2: 소라렌에 의한 hKv1.5통로 전류억제의 막전압 의존성
이온 통로에 작용하는 많은 약물들의 막전압의존성 여부는 약물의 응용가치를 평가하는 데 중요하다.
도 1에서 관찰한 억제효과를 전압-전류 관계곡선으로부터 각 막전압에서 약물이 존재하지 않을 때의 대조전류에 비해 소라렌(화합물 1) 1 μM 존재하에서의 전류의 상대적인 크기로 비교하여 도 2를 얻었다. 도 2는 각 막전압에서 약물이 존재하지 않는 대조전류에 대한 약물의 상대적 억제효과를 나타낸 것으로, -80 mV로 막전압을 고정후 -80 mV부터 +60 mV까지 막전압을 10 mV 간격으로 증가시켜 가면서 250 ms동안 자극시 마지막에 기록된 안정전류를 소라렌이 존재하지 않을 때의 대조전류에 비교하여 소라렌 존재 하에서의 전류크기를 상대적 전류로 환산하여, 각 막전압에 대하여 나타내었다. 0 ㎷이상의 막전압에서의 막전압 의존성을 나타내었다.
도 2에 나타난 바와 같이, 소라렌(화합물 1)은 -30 ㎷에서 0 ㎷사이에선 강한 막전압 의존성을 보이고 0 ㎷와 +60 ㎷사이에선 약한 막전압 의존성을 보였다. 즉, hKv1.5통로가 열리기 시작하는 막전압에서 약물이 작용이 나타나기 시작하여 최대로 열렸을 때, 그 억제효과가 최고에 달하였다.
실험예 3: 소라렌에 의한 hKv1.5통로 전류억제의 통로상태 의존성
소라렌의 hKv1.5통로 전류 억제효과가 이온통로의 어떤 상태에서 더 잘 작용하는지 분석하여 도 3을 얻었다.
도 3은, 대조군 및 소라렌(화합물 1) 300 nM이 존재할 때, -80 ㎷로 막전압 에서 +50 ㎷로 탈분극시킨 후, -50 ㎷로 재분극시킬 때 발생되는 흔적전류(tail current)를 나타낸 것이다.
대조군에서는 이 흔적전류가 아주 빠르게 감소하는데 반해서, 소라렌 존재하에서는 초기 최대(peak) 전류는 감소하나 연속적인 전류의 감소가 대조군에 비해 아주 서서히 일어나 흔적전류의 "교차현상"이 관찰되었다. 이는 소라렌이 hKv1.5통로에 대해 열린통로 차단제(open channel blocker)로 작용함을 강력히 시사한다. 즉, 소라렌은 닫힌 상태보다는 열린 상태의 hKv1.5통로에 더 잘 결합하여 억제효과를 보였다. 이는 이상적인 항부정맥제가 갖추어야 할 조건 중의 하나이기에 소라렌 및 그 유도체들은 이상적인 항부정맥제로서의 조건을 갖추고 있음이 판명되었다.
실험예 4: 흰쥐 심방세포의 활동전위에 미치는 소라렌의 효과
심장조직에서 활동전위기록은 논문(Kwak, et al., a newly synthesized benzopyran derivative, activates the cardiac ATP-sensitive K+ channel. J Pharmacol Exp Ther 1995, 275:807-812)에 기재된 방법을 사용하였다. 즉, 250 g가량의 흰쥐를 두부 타격으로 치사 시킨 후 심장을 빠르게 적출하여 97% 산소와 3% 이산화탄소로 포화된 타이로드(Tyrode) 용액이 채워진 해부접시에서 필요부위를 분리해내어 수조에 고정하고, 37℃ 타이로드 용액으로 관류시켰다. 활동전위는 1~5 Hz, 1ms 기간, 역치전압의 20 내지 30% 높은 자극을 가하여 유발하였다. 활동전위기록은 3M KCl이 채워진 유리전극(10-20 MΩ)의 신호를 증폭기(KS-700, WPI)로 증폭한 다음 오실로스코프(Dual beam storage 5113, Tektronix, Beaverton OR)와 생 리기록계(Physiograph; RS 3400, Gould, Cleveland, OH)에 기록하였다. 활동전위기간 비교시, 주로 90% 활동전위기간(APD90)을 사용하였다. 이때, APD90은, 안정막전압으로부터 최대 탈분극까지의 높이를 100%로 정하고 최대 탈분극으로부터 90% 재분극이 일어났을 때의 활동전위 기간이다. 오실로스코프 화면에 기록된 영상들을 폴라로이드 필름에 찍었다.
흰쥐 심방세포의 활동전위에 대한 소라렌의 효과를 검토하였다.
도 4a는 소라렌 투여전과 투여후의 활동전위 모양변동을 용량에 따라 나타낸 것이고, 도 4b는 소라렌의 활동전위 기간 연장효과를 90% 재분극시 평균 활동전위기간을 나타낸 도이다. 상대적 활동전위기간은 소라렌 투여 전의 APD90 의 상대적 값으로 산출하였다. 자극빈도수를 2Hz로 하였을 때, 소라렌은 용량에 비례하여 활동전위기간을 증가시켰다.
제조예 1: 정제
하기의 조성에 따라, 통상의 정제 제조방법으로 제제화하였다.
정제 조성물
소라렌 500.0 ㎎
유당 500.0 ㎎
탈크 5.0 ㎎
마그네슘 스테아레이트 1.0 ㎎
제조예 2: 캡슐제
하기와 같은 방법에 따라, 다음과 같은 조성으로 캡슐제를 제조하였다. 소라렌을 체질하여 부형제와 혼합한 후, 젤라틴 캡슐중에 충전하여 캡슐을 제조하였다.
캡슐제 조성물
소라렌 500.0 ㎎
전분 1500 10.0 ㎎
스테아르산마그네슘 100.0 ㎎
제조예 3: 산제
하기의 성분을 통상의 산제의 제조방법으로 혼합하고, 봉지에 넣어 밀봉한 후 산제를 제조하였다.
산제 조성물
소라렌 500.0 ㎎
유당 100.0 ㎎
탈크 5.0 ㎎
제조예 4: 주사제
하기의 성분을 통상의 주사제의 제조방법으로 2.0 ㎖의 용량의 앰플에 충전하고, 멸균시켜 주사제를 제조하였다.
주사제 조성물
소라렌 50.0 ㎎
산화방지제 1.0 ㎎
트윈 80 1.0 ㎎
주사용 증류수 to 2.0 ㎖
본 발명에 따른 조성물은 인체에 안전하고 독성이 적으며, 사람 심방에서 발현하는 K+통로를 선택적으로 차단하여 심장박동수가 빨라졌을 때 그 효과가 증대되고 낮은 박동수에서는 그 효과가 거의 없어 부정맥의 예방 및 치료제로서 우수한 효과를 갖는다.

Claims (6)

  1. 하기의 화학식 1로 표시되는 소라렌 또는 그 유도체와 약제학적으로 허용 가능한 담체를 포함하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물:
    Figure 112004053209535-pat00020
    1
    상기 식 중,
    R1은 수소, 히드록시, 탄소수 1 내지 5의 저급알콕시, 탄소수 1 내지 5의 저급알케닐, 탄소수 1-5의 저급알케닐옥시, 탄소수 1 내지 5의 저급알킬카보닐옥시, 페닐아세톡시, 탄소수 1 내지 5의 히드록시알킬, 탄소수 1 내지 5의 알킬카보닐옥시알킬, 트리플루오로메탄설폭시, 메톡시에톡시메톡시 및 메톡시에톡시메톡시알킬(알킬은 탄소수 1 내지 5임)로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있으며;
    R2는 수소, 히드록시, 탄소수 1 내지 5의 저급알콕시, 탄소수 1-5의 저급알케닐옥시, 탄소수 1-5의 저급알콕시메틸, 탄소수 1 내지 5의 저급알킬카보닐옥시, 페닐아세톡시, 메톡시에톡시메톡시 및 말단에 아데닌이 치환된 탄소수 2 내지 9의 알콕시메틸기로 이루어진 군으로부터 선택될 수 있다.
  2. 제1항에 있어서, 화학식 1의 소라렌 또는 그 유도체가 하기의 화합물 군으로부터 선택되는 것인 부정맥의 예방 및 치료용 조성물:
    7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    4-메톡시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    4-페닐아세톡시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    4-아세톡시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    4-(1-옥소부톡시)-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    4-(2-프로페닐옥시)-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    4-메톡시에톡시메톡시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    4-부톡시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    9-메톡시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    9-페닐아세톡시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    9-아세톡시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    9-(1-옥소부톡시)-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    9-(2-프로페닐옥시)-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    9-메톡시에톡시메톡시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    9-부톡시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    9-메톡시-4-(프로폭시메틸)-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    4-{(3'-(6"-아미노-9"H-9"-푸리닐)프로폭시)메틸}-9-메톡시-7H-퓨로[3,2- g][1]벤조피란-7-온;
    4-{(8'-(6"-아미노-9"H-9"-푸리닐)옥톡시)메틸}-9-메톡시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    9-트리플루오로메탄설폭시-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    9-에테닐-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    9-(2-프로페닐)-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    9-(3-히드록시프로필)-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    9-(3-아세톡시프로필)-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온;
    9-(3-메톡시에톡시메톡시프로필)-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온; 및
    9-{3-(1-옥소부톡시)프로필}-7H-퓨로[3,2-g][1]벤조피란-7-온.
  3. 제1항에 있어서, K+ 통로-매개된 질환의 예방 및 치료용 조성물.
  4. 제3항에 있어서, hKv1.5 통로-매개된 질환의 예방 및 치료용 조성물.
  5. 어수리 추출물을 포함하는 부정맥의 예방 및 치료용 조성물.
  6. 삭제
KR1020040093690A 2003-11-17 2004-11-16 소라렌 또는 그 유도체를 포함하는 부정맥의 예방 및치료용 조성물 KR100627828B1 (ko)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020030081120 2003-11-17
KR20030081120 2003-11-17

Publications (2)

Publication Number Publication Date
KR20050047489A KR20050047489A (ko) 2005-05-20
KR100627828B1 true KR100627828B1 (ko) 2006-09-25

Family

ID=37246459

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
KR1020040093690A KR100627828B1 (ko) 2003-11-17 2004-11-16 소라렌 또는 그 유도체를 포함하는 부정맥의 예방 및치료용 조성물

Country Status (1)

Country Link
KR (1) KR100627828B1 (ko)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20230160973A (ko) 2022-05-17 2023-11-27 강원대학교산학협력단 신규한 솔라렌 유도체, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 퇴행성 뇌질환 증상 개선용 조성물

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR100716768B1 (ko) * 2005-09-26 2007-05-14 우석대학교 산학협력단 데쿠르신을 유효성분으로 하는 부정맥의 예방 및 치료용조성물, 및 그 제조방법
KR100802767B1 (ko) 2005-11-04 2008-02-12 현대자동차주식회사 하이브리드 차량의 배터리유닛 및 모터제어유닛 냉각시스템
KR100715887B1 (ko) * 2006-11-27 2007-05-09 우석대학교 산학협력단 부정맥의 예방용 기능성 식품

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
논문
연구보고서

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20230160973A (ko) 2022-05-17 2023-11-27 강원대학교산학협력단 신규한 솔라렌 유도체, 이의 제조방법 및 이를 포함하는 퇴행성 뇌질환 증상 개선용 조성물

Also Published As

Publication number Publication date
KR20050047489A (ko) 2005-05-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US7105534B2 (en) Imidazo[1,2-α]pyridine ether compounds as ion channel modulators
DE69915063T2 (de) Aminocyclohexylverbindungen und deren verwendung
EP3444249B1 (en) Sodium channel blockers, preparation method thereof and use thereof
SG176983A1 (en) Tofa analogs useful in treating dermatological disorders or conditions
JP2002525355A (ja) 哺乳動物の脱毛症の治療に有用な複素環２−置換ケトアミド
JP2023517541A (ja) 不整脈の治療のためのニコチンアミドモノヌクレオチド誘導体
FI90545B (fi) Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten 2,2-dimetyylikromeenijohdannaisten valmistamiseksi
KR100627828B1 (ko) 소라렌 또는 그 유도체를 포함하는 부정맥의 예방 및치료용 조성물
DE4041482A1 (de) Neue pharmazeutische verwendung carbocyclisch und heterocyclisch annelierter dihydropyridine
KR100545930B1 (ko) 첼리도닌 또는 그 유도체를 포함하는 약제학적 조성물
EP3906969A1 (en) Antihypertensive polyol compound and derivative thereof
TWI225397B (en) Uses of thaliporphine or its derivatives in treatment of cardiac diseases and preparation of the same
JPH02108688A (ja) キノリン化合物
UA109551C2 (uk) Пантенолу докозагексаєноат і його застосування для лікування і попередження серцево-судинних захворювань
JP5583325B2 (ja) イオンチャネル調節化合物の投与レジメ
US6602880B2 (en) 3-phenyl-3,7-diazabicyclo[3.3.1] nonane compounds, process for preparing them, pharmaceutical compositions containing them and use thereof to inhibit cardiac arrhythmia
KR100715887B1 (ko) 부정맥의 예방용 기능성 식품
US5541201A (en) Antiarrhythmic piperidin-1-yl-2,2-dialkylpropanone arylsulfonamide derivatives
EP0125406A2 (de) Neue therapeutische Verwendung von Pyrazolonderivaten, Arzneimittel hierfür und Verfahren zu deren Herstellung
KR100760676B1 (ko) 신규 벤조푸란 유도체와 이를 포함하는 부정맥 예방 및치료용 조성물
JP2007532576A (ja) 心不整脈治療のための新化合物およびその使用方法
KR100752613B1 (ko) 신규 벤조푸란 유도체를 포함하는 부정맥 예방용 식품
KR20050110681A (ko) 2-(부틸-1-설포닐아미노)-ｎ-[1(ｒ)-(6-메톡시피리딘-3-일)-프로필]-벤즈아미드, 약물로서의 이의 용도, 및 이를함유하는 약제학적 제제
KR102332892B1 (ko) 페닐시클로헥산카복스아마이드 화합물을 포함하는 발기부전의 예방, 개선 또는 치료용 조성물
CA2617519A1 (en) Agent for treating atrial fibrillation

Legal Events

Date Code Title Description
A201 Request for examination
N231 Notification of change of applicant
E902 Notification of reason for refusal
E701 Decision to grant or registration of patent right
GRNT Written decision to grant
FPAY Annual fee payment

Payment date: 20110228

Year of fee payment: 5

LAPS Lapse due to unpaid annual fee