KR100592551B1 - 저 콜레스테롤 청색계란의 생산방법 및 상기방법으로 생산된 청색계란 - Google Patents

저 콜레스테롤 청색계란의 생산방법 및 상기방법으로 생산된 청색계란 Download PDF

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Abstract

본 발명은 저 콜레스테롤 청색계란을 생산하는 방법 및 상기방법으로 생산된 청색계란에 관한 것으로, 보다 상세하게는 콜레스테롤 생산을 억제하는 로바스타틴을 대량생산하는 균주 배양액을 유효성분으로 하는 사료첨가제 및 이를 사료에 혼합급여 함으로써 저 콜레스테롤 청색계란의 생산방법 및 상기 방법으로 생산된 저 콜레스테롤 청색계란에 관한 것이다.
본 발명에 의하면, 일반계란과 달리 외관상 난각색의 시각적 차별화로 소비자의 기호성을 향상시키면서도 콜레스테롤 함량이 저하된 청색계란을 생산할 수 있으므로, 성인병 환자나 노약자 등의 건강식으로 이용 가능하다.
청색계란, 저 콜레스테롤, 로바스타틴

Description

저 콜레스테롤 청색계란의 생산방법 및 상기방법으로 생산된 청색계란{THE PRODUCTION METHOD OF LOW-CHOLESTEROL EGG AND THEREOF EGG}
도 1은 본 발명에 따른 청색계란을 생산하기 위한 아라카나 종과 백색레그혼종의 교배에 관한 가계도를 설계한 것이다.
도 2는 본 발명에서 로바스타틴 생성균주인 모나스커스 앤카의 배양에 의한 사료첨가제를 제조공정의 개략도를 나타낸 것이다.
도 3은 본 발명의 사료첨가제를 혼합한 사료의 급여시 수당 사료섭취량을 비교한 그래프이다.
도 4는 본 발명의 사료첨가제를 혼합한 사료의 급여시 사료요구율을 비교한 그래프이다.
도 5은 본 발명의 사료첨가제를 혼합한 사료의 급여시 산란계의 산란율을 비교한 그래프이다.
도 6은 본 발명의 사료첨가제를 혼합한 사료의 급여시 난중을 비교한 그래프이다.
도 7은 본 발명의 사료첨가제를 혼합한 사료의 급여시 난황의 조성분을 분석한 그래프이다.
도 8은 본 발명의 사료첨가제를 혼합한 사료의 급여시 난황중의 콜레스테롤 함량을 비교한 그래프이다.
도 9는 본 발명의 방법에 의해 생산된 청색계란의 난각두께를 비교한 그래프이다.
도 10은 본 발명의 방법에 의해 생산된 청색계란의 난각강도를 비교한 그래프이다.
본 발명은 저 콜레스테롤 청색계란의 생산하는 방법 및 상기방법으로 생산된 청색계란에 관한 것이다.
콜레스테롤은 모든 동물성 식품에 존재하는 지방의 일종으로, 세포의 구성성분이며, 호르몬 합성에 필수적인 성분으로 적정량의 콜레스테롤은 건강유지에 아주 중요한 역할을 한다. 그러나 지나치게 많은 콜레스테롤은 오히려 각종 성인병과 심장 및 심혈관 질환에 영향을 미친다는 것은 이미 널리 알려져 있다.
계란은 오래전부터 식단의 하나로 구성되어 있으며, 비타민 C를 제외한 13종의 비타민, 아미노산, 무기질이 골고루 들어있고, 지방도 소화 흡수되기 쉬운 형태로 들어있어 성장기의 어린이에게는 양질의 영양소를 제공하는 완전식품이며, 간에 쌓이기 쉬운 지방을 제거해 주는 레시틴(lecitin)이 많이 들어 있어 성인에게는 성인병을 예방할 수 있도록 하는 건강식품이다. 그러나, 이러한 계란의 영양학적 장점에도 불구하고 계란의 높은 콜레스테롤 함량(평균 215㎎/계란 1개)은 계란 소비 에 있어 가장 큰 걸림돌이 되고 있다. 따라서, 최근 소비자들의 건강식품에 대한 선호의식이 증가하면서 콜레스테롤 함량을 저하시킨 계란의 개발에 대한 연구가 시급한 실정이다.
로바스타틴(lovastatin)은 균사형성 곰팡이인 아스퍼질러스(Aspergillus) 속 균주들과 모나스커스(Monascus) 속 균주들에 의해 폴리케티드(polyketide) 경로를 통해 생산되는 이차대사산물이며, 나프탈렌 고리 시스템(naphthalene ring system), 베타-히드록시락톤(β-hydroxylactone) 및 메틸부틸산(methylbutyric acid)을 포함하고 있는 고지혈증(hyperlipidemia) 치료제로서 알려져 있다.
로바스타틴의 구조가 콜레스테롤 합성을 조절하는 가장 중요한 효소인 HMG-CoA 환원효소와 결합하는 HMG-CoA와 유사하여 HMG-CoA 대신 HMG-CoA 환원효소와 미리 결합함으로써 메발로네이트(mevalonate)의 합성을 저해하도록 한다. 따라서 이 효소의 활성을 저해시키면 콜레스테롤 생하성을 저해함으로써 혈중 콜레스테롤을 낮추는 것으로 알려져 있다. 따라서, 미국특허 제6,177,121호의 경우를 예로 들면, 로바스타틴을 닭에게 먹이면 닭의 혈중 콜레스테롤이 낮아져 저콜레스테롤 계란이 생산되나, 고가인 의약품인 로바스타틴을 사용하게 되므로 생산단가가 일반 계란에 비해 거의 20배 이상 높아지므로 경제성을 고려할 때 실용화되기에는 무리가 따른다.
한편, 계란에 기능성을 갖도록 생산하는 기능성계란이 다양하게 생산되고 있으며, 난황의 색상을 선명하게 하기 위해 홍게박을 이용하거나(대한민국 공개특허공보 제10-1995-0016503호), 아스탁산틴을 함유한 계란을 생산하기 위한 방법(대한 민국 공개 특허공보 제10-1996-0013227호)이 연구되고 있으나, 난각색에 변화를 주는 계란의 생산방법에 대해서는 그 연구가 거의 전무한 상태이다. 다만, 본 발명자들에 의해 아라카나종 수컷과 이사브라운 암컷을 교배시켜 생산된 자손 1세대 교잡종을 육종하여 청색계란을 생산하는 방법(대한민국 공개 특허공보 제10-2003-0026502호)에 관해 개시하고 있으나, 안정적이면서 실용적으로 저 콜레스테롤 청색계란을 생산하기 위한 육종방법에 대해서는 아직 연구가 이루어지지 않고 있는 실정이다.
상기와 같은 문제점을 해결하기 위한 본 발명의 목적은 콜레스테롤 생산을 억제하는 로바스타틴을 대량생산하는 균주 배양액을 유효성분으로 하는 사료첨가제 및 이를 사료에 혼합급여 함으로써 저 콜레스테롤 청색계란을 생산하는 방법을 제공하고자 한다.
또한, 본 발명의 또다른 목적은 상기 방법에 의해 생산된 청색계란을 제공하고자 한다.
상기와 같은 기술적 과제를 달성하기 위한 본 발명은 아라카나종(Arakana) 수컷과 백색레그혼종 암컷을 교배시켜 1세대 교잡종 산란계를 얻고, 상기 1세대 교잡종 암컷을 다시 아라카나종 수컷과 교배시켜 생성된 2세대 교잡종 산란계를 로바스타틴 생성균주가 포함된 사료첨가제를 급여하여 육종하여 저 콜레스테롤 청색계란을 생산하는 방법 및 상기 방법에 의해 생산된 저 콜레스테롤 청색계란을 제공한 다.
이하 본 발명의 구성을 상세히 설명하기로 한다.
본 발명은 6 ~ 10월령의 아라카나종 수컷과 5 ~ 9월령의 백색레그혼종 암컷을 인공수정에 의해 교배시켜 1세대 교잡종 산란계를 얻은 후, 7 ~ 9월령의 상기 1세대 교잡종 암컷을 6 ~ 10월령의 아라카나종 수컷과 인공수정에 의해 교배시켜 생성된 2세대 교잡종 산란계를 로바스타틴 생성균주가 포함된 사료첨가제를 급여하여 육종하여 저 콜레스테롤 청색계란을 생산하는 방법을 제공한다.
이때, 상기 2세대 교잡종 산란계는 6 ~ 10월령의 아라카나종 수컷과 5 ~ 9월령의 백색레그혼종 암컷을 인공수정에 의해 교배시켜 1세대 교잡종 산란계를 얻는 단계, 7 ~ 9월령의 상기 1세대 교잡종 암컷을 6 ~ 10월령의 아라카나종 수컷과 인공수정에 의해 교배시켜 2세대 교잡종 종란(수정란)을 수득하는 단계, 상기 종란을 13 ~ 17℃의 온도, 70 ~ 80%의 습도조건에서 1주일간 보관하는 단계, 및 상기 보관된 종란을, 18일간의 발육기 동안은 37.5 ~ 38℃의 온도, 75%의 습도조건에서, 3일간의 발생기 동안은 37℃의 온도, 70%의 습도조건에서 부화시키는 단계를 포함하여 생산된 산란계이다.
아라카나종(Arakana)종은 칠레북부가 원산지로 야생계였으나 남아메리카와 벨기에등 유럽에서 육종개량한 품종으로서, 성질이 사나운 편이며 산육겸용으로 활용되나 훈련을 통하여 싸움닭으로도 이용하기도 한다. 모색은 은갈색 또는 황홍색을 띄지만 가슴털은 검은색이고, 머리는 작은 편이고, 볏은 주름져 있고, 귓불은 노란색이고, 정강이는 대부분 노란색이나 옆은 회갈색도 있다. 체중은 암탉이 1.5 ~ 1.8kg, 수탉은 2.5 ~ 2.7kg 정도이며, 초산일령(初産日齡)은 170 ~ 180일령이며, 연간 산란수는 160 ~ 180개 정도이다. 난중은 대략 45g 정도이다. 한편, 백색레그혼종은 원산지가 이탈리아인 전형적인 산란계로서, 성질이 예민하고 재빠르며 체질이 강건하고, 볏이 크며 귓불은 희고 정강이는 누렇다. 표준 체중은 암컷이 1.8kg, 수컷은 2.5kg이며, 초산일령은 150 ~ 160일이고, 연간 산란수는 220 ~ 250개이며, 난중은 대략 55 ~ 60g이다.
6 ~ 10월령의 아라카나종 수컷과 5 ~ 9월령의 백색레그혼종 암컷을 인공수정하여 1세대(F1) 교잡종 산란계를 생산한다. 1세대 교잡종 산란계 중에서 아라카나종과 백색레그혼종이 이형접합체로서 존재하는 종란(수정란)을 선별한 후, 인공부화기를 통하여 병아리를 생산하고 육성한다. 이렇게 병아리에서 7 ~ 9월령의 성계된 1세대 교잡종 암컷을 6 ~ 10월령의 아라카나종 수컷과 다시 인공수정하여 2세대(F2) 교잡종 종란(수정란)을 생산한다. 상기 종란을 이에 한정하는 것은 아니나, 13 ~ 17℃의 온도, 70 ~ 80%의 습도조건에서 1주일간 보관하는 것이 바람직하다. 그 후, 상기 보관된 종란을, 18일간의 발육기 동안은 37.5 ~ 38℃의 온도, 75%의 습도조건에서, 3일간의 발생기 동안은 37℃의 온도, 70%의 습도조건에서 부화시키는 것이 바람직하다. 이는 입란 이후에는 온도 및 습도가 부화율에 중요한 영향을 미치기 때문이다. 부화된 병아리를 육종하여 생산된 닭을 실용계로서"청색계"라 부른다(도 1 참조). 상기와 같은 3원교배(Three-way crosses)를 통해 생산된 청색계의 생산율은 약 75 ~ 80 %이다.
본 발명의 방법에 의해 생산된 청색계는 외관상 모색은 대부분 백색이며, 머 리는 작은편이며, 볏은 주름져있고, 정강이는 노란색이며, 체중은 암탉이 1.5kg, 수탉은 2.5kg이며, 연간산란수는 200개 정도이고, 초산일령은 165일령 정도이며, 난중은 평균 50 ~ 55g 정도이다.
본 발명에 있어서, 상기 로바스타틴 생성균주는 모나스커스 속 균주인 모나스커스 앤카(Monascus anka)(KCTC 6121)인 것이 바람직하다.
상기 분양받은 로바스타틴 생성균주를 배양하고, 곡물에 접종 및 배양하여 균주로부터 로바스타틴을 대량 생산한 후, 상기 로바스타틴 생성 균주를 건조하여 저 콜레스테롤 생산용 사료첨가제로 사용한다. 구체적으로, 본 발명의 바람직한 실시예에서는 예를 들면, 상기 모나스커스 앤카 균주를 24℃의 감자 덱스트로스 아가(potato dextrose agar) 배지에서 4일간 고체배양한다. 배양된 포자현탁액을 다시 보리 또는 밀과 같은 곡물에 접종하여 28℃에서 10 ~ 15일간 고체배양하여 로바스타틴을 생성하는 균주를 얻은 후, 이를 건조하여 사료첨가제로 사용한다.
본 발명에 있어서, 상기 사료첨가제는 1일급여 축종에 따라 사료량의 0.01 ~ 5%까지 사용이 가능하지만, 양계(닭)의 경우에는 평균적 0.2 ~ 0.5 %의 첨가가 적당하다. 본 발명의 로바스타틴 생성 균주를 0.01 중량% 미만으로 첨가하면 사료를 섭취한 산란계로부터 목적하는 만큼의 콜레스테롤이 감소한 계란을 얻을 수 없으며, 5 중량% 초과하여 첨가하면 산란율이 저하되는 문제점이 있다.
또한, 본 발명의 사료첨가제는 계란 고유의 비린내 제거 및 생산성 향상을 높이기 위해, 급여되는 사료 총 중량 대비 0.01 ~ 0.1 중량%의 비타민 A, 0.01 ~ 0.1 중량%의 비타민 D, 0.01 ~ 0.05 중량%의 항산화제 및 0.05 ~ 0.5 중량%의 야생 쑥을 추가로 더 포함할 수 있다.
본 발명의 로바스타틴 생성균주가 포함된 사료 첨가제를 산란계에 급여하는 조건은 통상적으로 산란계에 급여하는 사료와 같은 조건으로 급여한다.
또한, 본 발명은 상기 방법에 의해 생산된 저 콜레스테롤 청색계란을 제공한다. 본 발명에 있어서, 상기 방법에 의해 생산된 2세대 교잡종 산란계를 육종한 후, 여기서 생산된 계란을 "청색계란"이라고 칭한다. 구체적으로, 계란의 난각색은 백색과 진한녹색의 중간색인 연한청색 또는 옥색을 띄고 있다. 일반적으로 난각의 외곽에 주로 저장되어 있는 오포르피린(ooporphyrin) 색소에 좌우되는데, 이 색소는 난각에 함유된 프로토포르피린으로 혈액의 헤모글로빈과 관계가 있으며, 산란초기가 말기보다 더 진한색을 나타낸다. 또한 난각색의 유전력은 0.30 ~ 0.90으로 매우 높은 유전력을 갖는다.
이하 본 발명의 구성을 실시예, 도면 및 표를 통하여 상세히 설명하기로 한다. 다만, 본 발명의 권리범위는 실시예, 도면 및 표에 의하여 본 발명의 청구범위가 한정되는 것은 아니다.
실시예 1. 시험동물의 준비
30주령의 아라카나종 수컷(2.5㎏)(일본기후현축산연구소 양계연구부)과 35주령의 백색레그혼종 암컷(1.7㎏)(안성소재 양지부화장에서 백색레그혼 하이라인 97종계 입수)을 시험동물로 사용하였다. 사육환경은 무창계사내 온도는 20 ~ 25℃, 습도는 70 ~ 85%정도였고, 점등시간은 백열전구(60W)를 설치하였고, 1일 평균 8시간이 자동으로 소등이 되도록 자동점등 개폐장치로 점등유지·관리되도록 하였다. 실험에 사용된 사료는 양계용 사료(농협안동사료공장에서 생산한 종계용사료)를 구입하여 자유급이 하였으며, 음수는 자외선 유수멸균기(Dynamics, M600, USA)를 통과시킨 물을 자유급수하였다.
실시예 2. 시험동물의 교배 및 종란(수정란)의 선별
30주령의 아라카나종 수컷(AA)과 35주령의 백색레그혼 하이라인 암컷(aa)을 인공수정하여 1세대(F1) 교잡종 산란계(암컷) 500수를 생산하였다.
구체적으로, 수컷의 정액채취는 생리식염수로 수컷의 항문을 깨끗이 닦고 왼손으로 손바닥으로 닭의 꼬리를 뒤로 들고 손가락으로 총배설강을 가볍게 잡은후, 오른손으로 치골의 하부를 따라서 치골과 용골사이에 부드러운 곳을 가볍게 전후로 맛사지하여 멸균된 스포이드로 정액을 채취하였다(복부맛사지). 채취정액량은 채취정액은 30분이내에 모두 사용할 수 있는 량으로 멸균 50ml병에 담아 사용하였다.
백색 레그혼 하이라인 암컷과의 인공수정은 오후 2 ~ 3시경에 1수당 멸균스포이드를 통하여 원정액 0.03ml 정도를 주입하며, 정액 주입간격은 5일간격으로 인공수정하였다. 그래서 이러한 과정을 계속하여 생산된 종란(수정란)은 1일 2회 집란을 하였고, 이때의 종란(수정란) 선별은 난중이 50g 이상으로서, 난각이 매끄럽고, 오염 및 파란이 아닌 종란을 선별사용하였다. 그리고 종란보관실의 종란의 오염을 막기위하여 훈증소독기를 설치하여 과망산카리 20g과, 포르말린 40ml를 5일에 1회씩 20분간에 걸처 내부전체를 훈증소독하였다. 종란보관 온도는 평균 15℃, 습 도는 75%가 자동으로 조절되는 저장실에서 종란기실이 위쪽으로 향하도록하여 최장 1주일 보관하였다가 부화기에 입란하였다(부화기조건 : 발육기(18일간) - 37.5~ 38℃, 습도 75%, 발생기(3일간) - 37℃, 상대습도 70%을 유지). 입란 이후에는 부화율에 미치는 영향은 온습도가 가장 중요하고, 이외에 계란의 기실을 향하도록 계란축을 45˚로 두어야 하며, 전란은 1일 8회이상 해야하며 하란은 병아리가 15% 정도 발생되었을 때 발생실로 옮겼으며, 발생을 촉진하기 위하여 1일 1회정도 외부의 산소를 주입하기 위하여 3분 정도 환기시켜주었다.
상기 방법에 의해 선별된 1세대 교잡종 산란계(암컷)(Aa)를 다시 상기의 방법과 동일한 방법을 이용하여 아라카나종 수컷(AA)과 다시 교배육종하여 이형접합체로서 존재하는 종란(수정란)을 선별한 후, 종란을 인공부화기(배아발육 성장에 따라 37.5~38℃, 상대습도 55~60%, 21일간)를 통하여 실용계인 청색계(CC) 500수(암컷)(F2)를 생산하여 시험용으로 사용하였다(도 1 참조).
실시예 3. 사료첨가제의 제조
청색계란내의 콜레스테롤함량을 낮추기 위하여 사료첨가제를 하기의 방법으로 제조하였다.
사료첨가제 제조에 사용한 균주는 모나스커스 앤카(Monascus anka)(KCTC 6121번)를 생명공학연구소 유전자원센터(KCTC)로부터 분양받아 사용하였다.균주배양은 감자 덱스트로스 아가(potato dextrose agar)(diced potatoes 300g, glucose 20g, agar 15g, distilled water 1L의 혼합배양배지)에서 24℃로 4일간 고체배양하였다. 성장된 배양체를 채취하여 다시 삼각플라스크에서 살균된 거칠게 분쇄한 보 리 또는 밀 10g에 100 ㎕의 포자현탁액(1x108 spores/ml)을 접종하여 28℃에서 13일간 고체배양한 후, 상기 배양된 균체를 40℃의 온도에서 24시간 동안 건조하여 수분 함유량이 15%가 되도록 건조한 다음 사료첨가제로 사용하였다(도 2 참조).
실시예 4. 사료의 급여
상기 실시예 2에서 생산한 실용 청색계 90수(처리구당 30수씩)를 대상으로 하여, 0.05 중량%의 비타민 A, 0.05 중량%의 비타민 D, 0.02 중량%의 항산화제 및 0.1 중량%의 야생쑥 건조물을 포함하는 일반 양계용 사료(농협안동사료공장에서 생산한 종계용사료)에 상기 실시예 3에서 제조한 사료첨가제 0.3 중량% 및 0.5 중량%를 각각 혼합한 후, 이를 각각 시험 1구 및 시험 2구로 하여 상기 실시예 2에서 생산한 실용 청색계에 급여하였다. 한편, 대조군에서는 본 발명의 사료첨가제를 혼합하지 아니한 일반 양계용 사료만을 급여하였다. 사료의 급여는 부화 25주령부터 40주령까지 실시하였으며, 하기 표 1 내지 표 3, 도 3 및 도 4에서 볼 수 있는 바와 같이, 수당 사료섭취량, 사료 요구율 및 초산일령 및 체중에 있어서 유의한 차이는 없었다.
수당 사료섭취량 (단위 : g)
구 분 대조구 시험 1구 시험 2구
부화 25주령 107.00 ± 2.38 109.77 ± 2.36 105.41 ± 3.14
부화 27주령 108.56 ± 3.47 110.15 ± 2.78 112.41 ± 2.08
부화 30주령 123.93 ± 3.51 123.20 ± 3.58 118.77 ± 3.61
부화 35주령 125.91 ± 2.87 128.48 ± 3.14 124.79 ± 3.89
부화 37주령 125.88 ± 2.44 128.67 ± 2.89 125.01 ± 3.68
부화 40주령 126.17 ± 3.44 128.89 ± 3.49 125.68 ± 3.52
평 균 119.58 121.53 118.68
사료요구율
구 분 대조구 시험 1구 시험 2구
부화 25주령 2.18 ± 1.14 2.21 ± 1.36 2.21 ± 1.14
부화 27주령 2.35 ± 0.88 2.28 ± 1.25 2.39 ± 2.08
부화 30주령 2.41 ± 1.01 2.30 ± 1.47 2.41 ± 0.98
부화 35주령 2.29 ± 1.15 2.21 ± 1.09 2.22 ± 1.12
부화 37주령 2.20 ± 0.87 2.34 ± 0.98 2.30 ± 1.01
부화 40주령 2.29 ± 0.98 2.23 ± 0.94 2.18 ± 1.00
평 균 2.29 2.26 2.29
초산일령 및 체중
구 분 대조구 시험 1구 시험 2구
초산일령(일) 166 165 167
초산체중(㎏) 1.89 1.90 1.89
생존율(%) (40주령까지) 85.8 86.6 84.7
시험예 1. 청색계란의 산란율, 파란율 및 난중 분석
상기 실시예 4에서 생산된 청색계란의 산란율(산란지수), 파란율 및 난중을 비교 분석하였다. 산란율은 산란초기 부터 시험종료시까지 산란여부를 조사하여 환산하였고, 파란율은 파란수를 산란수로 나누어 환산하였고, 난중은 집란시에 개체별에 따라 접시저울로 무게를 측정하였다.
하기 표 4 내지 표 6, 도 5 및 도 6에 나타난 바와 같이, 산란율에 영향을 주지 않으면서도 파란율이 감소되고, 난중이 우수함을 확인할 수 있었다.
산란율(산란지수) (단위 : %, 개)
구 분 대조구 시험 1구 시험 2구
부화 25주령 75.83±2.14(5.82) 76.61±1.57(5.95) 74.93±1.52(5.74)
부화 27주령 78.71±2.11(5.63) 80.15±2.01(5.99) 81.65±2.01(5.88)
부화 30주령 82.67±1.78(5.90) 84.98±1.99(6.01) 85.02±1.87(5.68)
부화 35주령 84.56±1.47(5.98) 85.12±2.11(5.94) 86.09±1.56(6.05)
부화 37주령 88.36±1.36(6.01) 88.96±1.78(5.89) 88.67±1.32(6.00)
부화 40주령 91.36±1.24(5.91) 90.65±1.45(5.99) 90.41±1.47(5.90)
평 균 119.58(5.88) 84.41(5.96) 84.46(5.88)
파란율 (단위: %)
구 분 대조구 시험 1구 시험 2구
부화 25주령 2.83 ± 0.77 2.41 ± 1.14 2.93 ± 1.11
부화 27주령 2.95 ± 0.54 2.25 ± 0.15 2.45 ± 1.01
부화 30주령 2.07 ± 1.11 2.01 ± 0.14 1.92 ± 0.88
부화 35주령 1.56 ± 0.88 1.12 ± 0.41 1.09 ± 0.79
부화 37주령 1.50 ± 0.69 1.56 ± 0.11 1.56 ± 0.95
부화 40주령 1.36 ± 0.14 1.65 ± 0.47 1.41 ± 0.94
평 균 2.05 1.83 1.89
난중 (단위: g)
구 분 일반계란 대조구 시험 1구 시험 2구
부화 25주령 58.98±1.14 50.83±2.36 56.61±2.89 54.93±2.74
부화 27주령 59.65±2.35 51.67±3.01 56.78±3.14 56.10±2.88
부화 30주령 60.48±2.41 52.67±2.51 54.98±2.49 55.02±2.71
부화 35주령 61.05±1.89 56.56±2.37 57.12±2.14 58.09±3.14
부화 37주령 62.00±2.88 58.86±2.68 59.82±3.47 60.10±3.55
부화 40주령 62.34±1.99 64.36±3.14 65.65±2.35 63.41±3.64
평 균 60.75 55.83 58.50 57.94
시험예 2. 청색계란의 난황 및 난백의 조성분 분석
상기 실시예 4에서 사료급여 후 생산된 청색계의 난황 및 난백의 조성분을 조사하였다.
구체적으로, 상기 실시예 4에서 생산된 부화 40주령의 청색계란의 난백을 분리한 다음 난황만을 얻고, 난황 100g에 증류수 400㎖를 넣고 잘 저은다음 호모게나이저(homogenizer)로 10,000 rpm에서 5분간 교반하였으며, 상기 시료를 8,000 rpm 에서 20분간 원심분리하여 상등액을 취하고, 상등액 100㎖를 취하여 진공농축기에서 10㎖로 농축액을 시료로 하여 각 성분을 측정하였다. 즉, 상기 난황 농축액을 AOAC(1998)의 방법에 준하여 수분은 시료 5g을 사용하여 105~110℃의 건조법으로, 조단백질은 시료1g을 채취하여 키엘달(Kjeldahl) 방법을, 조지방은 시료 30g으로 속스헬트(Soxhlet) 추출법으로, 조회분은 시료 7g을 칭량하여 550℃에서 전기로에서 회화시키는 방법으로 분석하였다.
그 결과, 하기의 표 7 및 도 7과 같은 함량의 성분상을 나타내었다.
저 콜레스테롤 청색계란의 난황의 조성분 (단위 : %)
구 분 수분 단백질 지 방 탄수화물 회분
일반계란 48.90±1.58 15.80±1.34 33.30±2.84 0.60±0.02 1.40±0.01 100
대 조 구 47.30±2.38 16.40±1.24 33.30±3.01 1.60±0.01 1.40±0.01 100
시험 1구 48.08±3.01 18.12±1.81 27.90±2.35 2.70±0.14 3.20±0.07 100
시험 2구 48.80±2.88 18.11±1.37 25.97±2.14 3.88±0.09 3.24±0.08 100
한편, 상기에서 분리한 난백 100g에 증류수 200㎖를 넣고 잘 저은 다음 호모게나이저(homogenizer)로 10,000 rpm에서 5분간 교반하였으며, 상기 시료를 8,000 rpm에서 20분간 원심분리하여 상등액을 취하고, 상등액 80㎖를 취하여 진공농축기에서 8㎖로 농축액을 시료로 하여 상기 난황의 성분측정과 동일한 방법을 사용하여 각 성분을 측정하였다.
그 결과, 하기 표 8과 같은 함량의 성분상을 나타내었다.
저 콜레스테롤 청색계란의 난백의 조성분 (단위 : %)
구 분 수분 단백질 지 방 탄수화물 회분
일반계란 88.75±2.14 9.70±1.20 0.05±0.02 0.90±0.01 0.60±0.01 100
대 조 구 87.30±3.52 10.65±1.25 0.05±0.01 0.60±0.01 1.40±0.01 100
시험 1구 88.00±3.14 10.10±1.36 0.00 0.70±0.02 1.20±0.02 100
시험 2구 87.80±3.25 10.11±1.25 0.00 0.85±0.01 1.24±0.04 100
상기 시험결과, 본 발명의 사료첨가제를 급여하지 않은 청색계란에 비해 본 발명의 방법에 의해 생산된 청색계란의 경우, 난황에서 지방의 함량은 적으면서도 단백질, 무기물 및 기타 당류의 함량이 우수하며, 난백에서는 무기물의 함량이 우수함을 확인할 수 있었다.
시험예 3. 청색계란의 콜레스테롤 함량의 분석
시중에 유통되고 있는 일반계란, 상기 실시예 4에서 생산된 대조구 산란계에서 수득한 청색계란 및 시험구 산란계에서 생산된 청색계란의 콜레스테롤 함량을 측정하였다.
구체적으로, 계란의 난황 100g을 3ℓ의 에탄올(EtOH)과 혼합하고, 24℃ 온도의 혼합 배양기(shaking incubator)에서 2시간 이상 추출한 뒤, 4,000rpm에서 10분간 원심분리하여 상등액을 얻고, 이 상등액을 콜레스테롤 측정용 키트(영동 BC 108-E kit, 영동제약)를 이용하여 500nm에서 흡광도를 측정하는 방법으로 계란의 콜레스테롤 함량을 측정하였다. 그 결과, 하기 표 9 및 도 8과 같은 함량의 차이를 나타내었다.
㎎/100g 일반계란 대조구 시험구 1 시험구 2
콜레스테롤 함량 485±34 430±38 311±21 297±29
시험예 4. 저 콜레스테롤 청색계란의 난황색, 난각의 두께 및 강도 조사
상기 실시예 4에서 생산된 각각의 청색계란의 난황의 색상, 난각의 두께 및 강도를 조사하였다.
구체적으로, 난황의 색상은 컬러팬색도(Roche, Sweden)를 이용하여 측정하였고, 난각두께와 난각강도(ozaki-MFG. Co. Ltd., Japan)를 측정하였다.
난황색
구 분 일반계란 대조구 시험 1구 시험 2구
부화 25주령 6.52±1.24 6.77±1.41 7.49±1.14 7.34±1.14
부화 27주령 6.88±1.35 7.51±1.33 7.36±1.08 7.41±1.36
부화 30주령 6.95±1.84 7.08±1.71 7.84±1.25 7.64±1.25
부화 35주령 7.55±1.45 8.19±1.14 8.34±1.41 8.38±1.00
부화 37주령 7.99±1.65 8.36±0.99 8.99±1.36 9.25±0.97
부화 40주령 8.55±1.55 8.98±0.19 9.65±1.25 9.70±0.99
평 균 7.41 7.82 8.28 8.29
난각의 두께 (단위: mm)
구 분 일반계란 대조구 시험 1구 시험 2구
부화 25주령 0.393±0.04 0.383±0.04 0.346±0.05 0.344±0.08
부화 27주령 0.386±0.05 0.377±0.02 0.364±0.02 0.355±0.01
부화 30주령 0.375±0.03 0.367±0.02 0.344±0.02 0.345±0.04
부화 35주령 0.377±0.02 0.356±0.03 0.347±0.05 0.389±0.07
부화 37주령 0.368±0.05 0.326±0.01 0.362±0.05 0.377±0.06
부화 40주령 0.358±0.06 0.306±0.04 0.355±0.03 0.410±0.01
평 균 0.38 0.35 0.35 0.37
난각의 강도 (단위:kg/㎠)
구 분 일반계란 대조구 시험 1구 시험 2구
부화 25주령 4.59±1.01 4.383±1.01 4.346±1.14 4.344±1.00
부화 27주령 4.57±1.11 4.112±1.15 4.628±1.07 4.589±1.41
부화 30주령 4.55±0.84 4.367±0.89 4.844±1.24 4.345±0.99
부화 35주령 4.49±0.99 4.356±1.11 4.347±0.99 4.389±1.22
부화 37주령 4.49±1.11 4.810±1.35 4.368±1.14 4.854±1.34
부화 40주령 4.48±1.24 4.306±1.25 4.655±1.34 5.410±1.14
평 균 4.53 4.39 4.53 4.66
상기 표 10에 나타난 바와 같이 산란초기보다는 산란 말기에 더 진한색을 나 타내었으며, 표 11, 표 12, 도 9 및 도 10에서 볼 수 있는 바와 같이 본 발명의 저콜레스테롤 청색계란에서의 난각의 두께 및 강도가 일반계란 및 대조구 청색계란에 비해 우수하였음을 확인할 수 있었다.
시험예 5. 저 콜레스테롤 청색계란의 관능검사
상기 실시예 4에서 생산한 청색계란 및 일반계란의 비린내 및 기호도를 비교하였는 바, 실험은 20명의 관능 검사원에 대해 상기 40주령의 청색계란 및 일반계란 각 5개를 준비한 다음, 삶은계란, 계란말이, 계란찜으로 요리하여 종합적인 기호도의 관능검사를 실시하였다. 평가 기준은 A : 비린내 대단히 양호, B : 비린내 양호, C : 보통, D : 비린내 조금 발생, E : 비린내 매우 불량으로 정하였다. 그 결과를 하기 표 6에 나타내었다.
관능검사(비린내측정)
구 분 일반계란 대조구 시험 1구 시험 2구
A 14 17 18 19
B 3 2 1 1
C 2 1 1 0
D 1 0 0 0
E 0 0 0 0
그 결과, 일반계란에 비해 비린내의 발생 정도가 저조하며, 기호도가 우수한 바 우수한 관능효과를 나타냄을 확인할 수 있었다.
본 발명은 상술한 특정의 실시예, 시험예, 도면 또는 표에 기재된 내용에 기술적 사상이 한정되지 아니하며, 청구범위에서 청구하는 본 발명의 요지를 벗어남 이 없이 당해 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자라면 누구든지 다양한 변형의 실시가 가능한 것은 물론이고, 그와 같은 변경은 청구범위 기재의 범위 내에 있게 된다.
상기에서 설명한 바와 같이, 본 발명은 콜레스테롤 생산을 억제하는 로바스타틴을 대량생산하는 균주 배양액을 유효성분으로 하는 사료첨가제 및 이를 사료에 혼합급여 함으로써 저 콜레스테롤 청색계란의 생산방법 및 상기 방법으로 생산된 저 콜레스테롤 청색계란에 관한 것으로, 본 발명에 의하면, 일반계란과 달리 외관상 난각색의 시각적 차별화로 소비자의 기호성을 향상시키면서도 콜레스테롤 함량이 저하된 청색계란을 생산할 수 있으므로, 성인병 환자나 노약자 등의 건강식으로 이용 가능하다.

Claims (5)

  1. 6 ~ 10월령의 아라카나종 수컷과 5 ~ 9월령의 백색레그혼종 암컷을 인공수정에 의해 교배시켜 1세대 교잡종 산란계를 얻은 후, 7 ~ 9월령의 상기 1세대 교잡종 암컷을 6 ~ 10월령의 아라카나종 수컷과 인공수정에 의해 교배시켜 생성된 2세대 교잡종 산란계를 로바스타틴 생성균주가 포함된 사료첨가제를 급여하여 육종하여 저 콜레스테롤 청색계란을 생산하는 방법.
  2. 제 1항에 있어서, 상기 로바스타틴 생성균주는 모나스커스 앤카(Monascus anka)(KCTC 6121)인 것을 특징으로 하는 저 콜레스테롤 청색계란을 생산하는 방법.
  3. 제 1항에 있어서, 상기 사료첨가제는 급여되는 사료 총 중량 대비 0.01 ~ 5 중량%인 것을 특징으로 하는 저 콜레스테롤 청색계란을 생산하는 방법.
  4. 제 1항에 있어서, 상기 사료첨가제는 급여되는 사료 총 중량 대비 0.01 ~ 0.1 중량%의 비타민 A, 0.01 ~ 0.1 중량%의 비타민 D, 0.01 ~ 0.05 중량%의 항산화제 및 0.05 ~ 0.5 중량%의 야생쑥을 추가로 더 포함하는 것을 특징으로 하는 저 콜레스테롤 청색계란을 생산하는 방법.
  5. 제 1항 내지 제 4항 중 어느 한 항의 방법으로 생산된 저 콜레스테롤 청색계 란.
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