KR100561765B1 - 비피더스-효모 혼합 발효음료 및 그의 제조방법 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 찹쌀가루의 증류수 상층액, 쌀엿, 유청 및 유당의 혼합가공물에 식용 비피더스균 및 식용 효모균을 접종하여 순차적 또는 동시 혼합 배양한 발효음료로써 생균의 안정성이 높으면서 면역 기능을 증가시켜주는 여러가지 생리활성 물질을 함유한 비피더스-효모 발효음료 및 그의 제조방법이다.
비피더스균, 효모균, 면역기능 증가, 생균의 안정성

Description

비피더스-효모 혼합 발효음료 및 그의 제조방법{A FERMENTATED DRINK FROM BIFIDO AND YEAST, AND ITS PROCESS}
도 1은 발효음료 A 생균의 안정성 실험결과를 나타낸 도이고,
도 2는 발효음료 B 생균의 안정성 실험결과를 나타낸 도이며,
도 3은 발효음료 C 생균의 안정성 실험결과를 나타낸 도이다.
본 발명은 인체에 유익하다고 입증된 식용 비피더스 및 효모균을 순차적 또는 동시혼합 배양하여 이들 균 특히, 비피더스균의 안정성을 확보함으로써 면역기능 증가에 충분한 비피더스와 효모 균수 및 생리활성물질을 함유하는 발효음료 및 그 제조방법에 관한 것이다.
비피더스균은 모유 영양아의 분변에서 최초로 발견된 이후 여러 연구결과를 통해 유해세균의 장내 증식을 억제하며, 세균성 질환에 대한 예방능력을 보유하는 것으로 널리 알려져 있다. 또한 항암, 항종양 효과, 혈중 콜레스테롤함량의 저하 및 정장 효과와 같은 비피더스균의 다양한 생리활성이 보고되고 있다.
효모는 식품을 포함한 다양한 산업분야에서 이용되고 있으며, 최근에는 효모 세포벽의 주성분인 글루칸이 세균, 바이러스 및 각종 감염질환에 대해 저항력을 길러주고 면역세포를 활성화시킨다는 연구결과가 발표되었다. 이 외에도 비타민 B군, C, E를 비롯한 미네랄류, 식이섬유질등이 들어있어 다양한 영양성분을 균형있게 공급할 수 있다는 것이 알려지면서 식품첨가제로서의 활용도가 높아지고 있다.
위와같은 다양한 생리활성 기능을 가진 비피더스균과 효모를 식품산업에 이용하는 사례가 증가하고 있지만 실제로는 위장과 소장에서 분비되는 소화효소 및 담즙산에 의해 살아있는 상태로 대장에 도달하는 경우가 드물고, 다행히 장을 통과하더라도 균의 활성이 낮아져 장내 정착율이 저하된다는 점이 지적되어왔다. 또한제품으로 출시되었을 경우 유통기한이 짧고 초기의 생균수를 유지하지 못하고 생균이 거의 사멸된 상태에서 섭취하게 되어 그 효과를 기대하기 어려웠다.
본 발명은 상기와 같은 문제점을 해결하고, 음료에 함유된 생리활성물질뿐 아니라 생균이 살아있는 상태로 장내에 도달하는 확률을 높이는 것은 물론 장내에서도 계속 발효를 촉진하여 면역기능을 촉진하기 위한 적당한 탄소원 (유당,맥아당)과 질소원 (유청에 함유된 단백질 및 발효과정에서 생성된 부산물) 및 충분한 물을 제공하여 면역기능을 증가시킬 수 있는 발효음료와 그 제조방법을 제공함에 목적이 있다.
본 발명은 비피더스-효모 혼합 발효음료 및 그의 제조방법에 관한 것으로, 보다 상세하게는 찹쌀가루의 증류수 상층액에 쌀엿, 유청 및 유당을 첨가하고 가열멸균, 냉각 후 비피더스균 (Bifidobacterium longum) 및 효모균 (Saccharomyces cerevisiae)을 순차적 또는 동시에 혼합접종하고, 혐기성 배양 및 호기성 배양 후 안정제로 유당을 첨가한, 알코올 및 방부제를 함유하지 않은, 면역기능 증가작용을 갖는 비피더스-효모 발효음료와,
찹쌀가루의 증류수 상층액에 쌀엿, 유청 및 유당을 첨가하고 가열멸균, 냉각후 비피더스균 (Bifidobacterium longum) 및 효모균 (Saccharomyces cerevisiae)을 순차적 또는 동시에 혼합접종하고, 혐기성 배양 및 호기성 배양 후 안정제로 유당을 첨가하는, 알코올 및 방부제를 함유하지 않은, 면역기능 증가작용을 갖는 비피더스-효모 발효음료의 제조방법이다.
본 발명에 의한 비피더스-효모 혼합 발효음료의 제조방법에 대해 더욱 구체적으로 설명하면 다음과 같다. 증류수에 찹쌀가루를 첨가하여 충분히 교반하고 방치한 후 침전물을 제거한 상층액에 쌀엿, 유청 및 유당을 첨가하여 가열멸균하여 냉각시킨다. 여기에 비피더스균 및 효모균을 원심분리하여 세척한 것을 순차적 또는 동시 혼합접종하고 혐기성 배양 및 호기성 배양 단계를 거쳐 안정제로 유당을 첨가하면 알코올 및 방부제를 함유하지 않은 발효음료를 제조할 수 있다.
상기 비피더스균은 비피도박테리움 롱검 (Bifidobacterium longum) KCTC 3128, 비피도박테리움 롱검 (Bifidobacterium longum) KCTC 3421 또는 비피도박테리움 롱검 (Bifidobacterium longum) KCTC 3466 균중에서 선택사용하고, 효모균은 사카로마이세스 세레비시아 (Saccharomyces cerevisiae) KCTC 7928, 사카로마이세스 세레비시아 (Saccharomyces cerevisiae) KCTC 7238, 사카로마이세스 세레비시아 (Saccharomyces cerevisiae) KCTC 7906 또는 사카로마이세스 세레비시아 (Saccharomyces cerevisiae) KCTC 7919 균중에서 선택사용하며, 이들은 모두 공지의 균주로 KCTC를 통해 구입가능하며, 쌀엿, 유청(whey) 및 유당등은 기존 유제품등에 널리 사용되는 상품으로 구입이 가능하다.
유청은 유당, 수분 5.0 % 이하, 조단백 11.0 % 이상 조지방 3.0 ~ 8.0 %, 회분 8.0 % 이하로 조성된 상품을 사용한다.
본 발명의 음료에 사용하는 효모추출물 (yeast extract)은 발효 과정에서 생산되는 부산물을 사용함으로써 건조, 멸균 등의 과정이 불필요하므로 기존의 시판 추출물을 사용하는것에 비해 비피더스에 대한 보호 작용이 훨씬 우수하다.
비피더스균, 효모균 및 이들의 추출물을 함유한 생리활성물질에 의한 면역기능 증가등 인체에 유익한 여러가지 효과를 얻기 위해서는 이미 알려져 있는 것과 같이 제품의 안정성을 확보하는 것이 중요하다.
본 발명에 따라 제조된 본 발명의 발효음료는 각각 107 cfu/㎖ 이상의 생균수를 3 개월간 유지할 수 있는 것으로 나타나 기존의 유산균 발효음료의 유통기한이 7 일 이내이면서 생균수 106 cfu/㎖를 유지하는 것과 비교할 때 안정성이 뛰어나다고 할 수 있다. 또한 본 발명의 비피더스-효모 혼합 발효음료는 마우스 면역기능 시험에서 대조군, 본 음료의 침전물, 본 음료의 상층액，비피더스 단독 발효음료， 효모 단독 발효음료 또는 비피더스와 효모를 단독발효한 후 혼합하여 투여한 투여군보다 비장세포의 Con A 와 LPS에 대한 증식반응,비장세포와 복강 대식세포의 임파종양세포에 대한 세포활성이 현저한 증가를 나타내어 T, B 임파세포의 기능이 현저히 증가되었을 뿐만 아니라 흉선 및 비장의 중량 증가도 현저한 차이를 보여주어 임파양기관의 세포량도 증가되는 것으로 나타났다.
본 발명의 음료는 안정성실험 결과와 면역기능 증가실험 결과를 종합하여 분석할 때, 기존의 효모 발효식품 또는 비피더스 식품보다 보존기간 중 안정성이 높아졌을 뿐만 아니라 함유된 생리활성물질과 생균이 살아있는 상태로 장내에 도달하는 확률을 높여 면역기능을 촉진시킨 것으로 해석된다.
본 발명의 음료는 제제학적으로 허용가능한 부형제, 안정제, 교미제, 보존제, 완충제 또는 다른 적당한 첨가제를 포함할 수 있다.
본 발명의 음료는 성인기준 일일 100~150 ㎖씩 수회 음용이 가능하며, 이는 음료수나 물대신 마시는 제품으로 개발된 것이어서 일반음료수의 복용법과 유사하다.
본 발명을 구체적으로 이해하고 효과를 알아보기 위하여 다음과 같이 실시예로 나타내었다. 하기 설명한 실시예는 식용 비피더스 (Bifidobacterium)와 효모 (Saccharomyces)의 순차적 또는 혼합 발효생산에 의한 기능성 음료에 관한 것으로, 본 발명의 이해를 돕기 위하여 예시하는 것에 지나지 않으며, 따라서 본 발명의 범위가 이들 실시예로 한정되는 것은 아니다.
실시예 1 : 음료의 제조방법
1) 증류수 500 L에 500 g의 찹쌀가루를 첨가하여 충분히 교반하고 30 분간 방치한 다음 침전물을 제거하고 상층액을 배양 탱크에 옮긴다. 쌀엿 5 L, 유당 2 kg 및 유청 2 kg을 첨가하여 121 ℃에서 15 분간 가열멸균하고 냉각시켜 조제한 혼합물에 식용 비피더스균 (Bifidobacterium longum KCTC 3128) 및 효모균 (Saccharomyces cerevisiae KCTC 7928)을 순차적 (한가지 균을 먼저 접종하여 배양을 시킨 다음 다른 균을 접종하여 배양하는 방법) 또는 동시 혼합 접종하여 혐기조건에서 3 일간 배양한 후 다시 호기조건에서 3 일간 더 배양한다. 안정제로 농축 유당을 최종 농도 0.5 %가 되도록 첨가하여 제조된 배양물을 본 발명의 발효음료로 하며, 발효음료 A로 표시한다.
2) 이어서, 발효음료 A를 3,400 rpm 에서 30 분간 원심분리하여 얻어진 상층액과 침전물을 분리하여, 발효음료 A 상층액 및 발효음료 A 침전물이라 하였으며, 발효음료 A 상층액은 주로 균의 대사물질을 함유하며, 침전물은 주로 생균을 함유한다.
3) 증류수 5 L에 5 g의 찹쌀가루를 첨가하여 충분히 교반하고 30 분간 방치한 다음 침전물을 제거하고 상층액을 배양 탱크에 옮긴다. 유당 20 g 및 유청 20 g을 첨가하여 121 ℃에서 15 분간 가열멸균하여 조제한 혼합물에 식용 비피더스 (Bifidobacterium longum KCTC 3128)만 단독 접종하여 (단 접종 비례는 발효음료 A 보다 1 배 더 접종함) 3 일간 혐기배양하고 안정제로 농축 유당을 최종 농도 0.5 %가 되도록 첨가하고, 효모추출물 (yeast extract) 농축액을 최종 농도 0.3 % 가 되도록 첨가하여 제조된 배양물을 발효음료 B로 하며, 실험 대조에 사용한다.
4) 증류수 5 L에 5 g의 찹쌀가루를 첨가하여 충분히 교반하고 30 분간 방치한 다음 침전물을 제거하고 상층액을 배양 탱크에 옮긴다. 쌀엿 50 ㎖를 첨가하여 121 ℃에서 15 분간 가열멸균하여 조제한 혼합물에 식용 효모균 (Saccharomyces cerevisiae KCTC 7928)만 단독 접종하여 (단 접종 비례는 발효음료 A 보다 1배 더 접종함) 3 일간 호기 배양하여 제조된 배양물을 발효음료 C로 하며, 실험 대조에 사용한다.
실험예 1 : 발효음료의 안정성 실험
발효음료 A, 발효음료 B 및 발효음료 C를 동시에 1 주일 간격으로 안정성 실험을 시행하였다. 비피더스와 효모의 생균수 측정은 식품공전 제7, 일반시험법 8. 미생물시험법 8) 유산균수, (2)비피더스균 (Bifidobacterium), 또는 진균수 (효모 및 사상균수)에 따라 시행하였다. 그 결과를 표 1. 2. 3.과 도 1. 2. 3. 에 나타내었다. 본 발명의 발효음료 A 는 13 주 (3 개월)까지 비피더스와 효모균의 생균수를 유지할 수 있었으나 발효음료 B 는 단독배양 효모추출물을 더 첨가하였음에도 불구하고 비피더스 생균수는 1 주일 이후 급격히 감소하였다. 반면, 발효음료 C 는 효모 생균수가 15 주 까지도 변화가 없었다.
표 1. 발효음료 A 생균의 안정성 실험결과 (생균수 : cfu/㎖)
0 주 1 주 2 주 3 주 4 주 5 주 6 주 7 주
비피더스 1.9x107 1.7x107 1.8x107 1.8x107 1.9x107 1.8x107 1.7x107 1.8x107
효 모 2.1x107 2.5x107 2.0x107 2.1x107 1.9x107 2.3x107 2.1x107 2.5x107
8 주 9 주 10 주 11 주 12 주 13 주 14 주 15 주
비피더스 1.7x107 1.7x107 1.8x107 1.8x107 1.9x107 1.8x107 1.0x107 0.5x107
효 모 2.1x107 2.0x107 1.9x107 2.3x107 2.1x107 2.4x107 2.1x107 2.2x107
표 2. 발효음료 B 생균의 안정성 실험결과 (생균수 : cfu/㎖)
0 주 1 주 2 주 3 주 4 주 5 주 6 주 7 주
비피더스 3,8x107 3.8x107 8.0x104 1.8x104 0.6x104 - - -
표 3. 발효음료 C 생균의 안정성 실험결과 (생균수 : cfu/㎖)
0 주 1 주 2 주 3 주 4 주 5 주 6 주 7 주
효 모 3.5x107 3.8x107 3.8x107 3.5x107 3.6x107 3.6x107 3.5x107 3.8x107
8 주 9 주 10 주 11 주 12 주 13 주 14 주 15 주
효 모 3.8x107 3.9x107 3.5x107 3.9x107 3.5x107 3.5x107 3.6x107 3.8x107
실험예 2 : 면역기능 증가 실험
1. 자료와 시험 방법
1.1. 실험 동물과 처리:
18~22 g 정도의 건강한 마우스 (암컷) 70 마리를 선택하여 체중에 따라 무작위 7군으로 나누어 대조군, 발효음료 A 투여군, 발효음료 A 침전물 투여군, 발효음료 A 상층액 투여군, 발효음료 B 투여군, 발효음료 C 투여군 및 발효음료 B와 발효음료 C 혼합 투여군으로 하여 연속 30 일간 물 대신 하루에 50~65 ㎖/케이지 (마우스 10마리/케이지)정도로 공급하였다. 단, 대조군은 물을 공급하였고, 발효음료 A 침전물 투여군은 발효음료 A 와 같은 양으로 계산한 것으로 발효액 65 ㎖ 을 원심분리한 침전물을 사료에 혼합시켜 투여하였다. 발효음료 B 는 생균수를 유지하기 위하여 1 주일 간격으로 새로 제조한 것을 투여하였다.
1.2. 임파기관 중량 측정
31 일째 체중을 측정하고 마우스를 경추탈골 시킨 후, 대식세포를 조제하고, 무균적으로 흉선과 비장을 채취하여 무게를 측정하였다. 비장은 비장세포 현탁액 제조에 사용하였으며, 흉선과 비장의 무게는 g/100 g 체중으로 표시하였다.
1.3. 비장세포와 대식세포의 조제
마우스를 경추탈골 시킨 다음 10 ml 냉각 Hank's 액으로 복강 내에 주사하여 세척한다. 냉각 Hank's 액으로 3 회 세척하여 얻은 복강세포를 RPMI-1640 배지에 균질화 시킨 후 배양평판에 접종하고, 37 ℃, 5 % CO2 배양기에서 배양한다. 2 시간 배양 후 배양상층액을 버리고 벽면에 부착된 세포를 수거하여 RPMI-1640 배지에 현탁시킨 후, 트립판-블루 (trypan-blue) 염색법으로 생존율이 95 % 이상인 것을 확인하고, ANAE법 염색에서 대식세포가 98 % 이상인 것을 확인한다. 무균조건에서 비장을 갈아 0.125 % 트립신 (trypsin)으로 30 분간 37 ℃ 수욕에 방치하고 단일 세포 부유액으로 조제하여 Hank's액으로 3 차 세척한 후 10 % 소 태아 혈청, 2mM 엘-글루타민 (L-glutamine), 100 unit 페니실린 (penicillin), 100 ㎍ 스트렙토마이신 (streptomycin)을 함유한 RPMI-1640 배지에 접종한다.
1.4. 세포 증식 반응 시험
비장세포를 2x106 cells/㎖ 농도로 조절하여 96 well plate 에 well당 0.1 ml씩 접종하고, T세포 유사분열원 Con A (Concanavalin-A from Conavalia ensiformis, SIGMA) 1.5 μg/well, B세포 유사분열원 LPS (Lipopolysaccharides, SIGMA) 4 μg/well를 각각 접종하고 동물마다 3 well씩 접종한 후, 37 ℃ 5 % CO2 배양기에서 65 시간 배양한다. 세포증식반응은 MTT (Methylthiazole tetrazolium, SIGMA)를 사용하여 비색법으로 측정한다. MTT (5 mg/ml)용액을 각 well에 20 μl 첨가하고 4 시간 더 배양한 후, MDF-SDS (Macrophage disappearance factor, Sodium dodecyl sulfate solution, SIGMA) 용해액을 첨가하여 590 nm 에서 흡광도를 측정한다. 세포증식반응은 Con A 또는 LPS 자극지수 (SI)로 표시한다. 즉 실험 well 과 대조 well의 흡광도의 비율로 표시한다.
1.5. NK세포 (Natural killer cell : 자연살세포) 활성시험
비장세포를 5x106 cells/㎖ 농도로 조절하고 표적세포로는 임파종양세포 (YAC-1)를 1x105 cells/㎖ 농도로 조절하여 즉, 효능세포와 표적세포의 비율 (E:T)은 50:1 로 0.1 ㎖ 씩 96 well plate에 접종하였다. 매개 동물의 비장세포 현탁액은 3 well씩 접종하였다. 대조군은 위 농도로 비장세포와 표적세포를 plate마다 각각 3 well씩 접종한다. 37 ℃, 5 % CO2 배양기에서 24 시간 배양한 후, 위에서 서술한 MTT 비색법으로 NK세포 활성을 측정한다. NK세포 활성은 아래의 계산식으로 계산한다.
(효능세포+표적세포)흡광도-효능세포흡광도
( 1 - ) x 100
표적세포흡광도
1.6. 대식세포 활성 시험
대식세포를 2x106 cells/㎖ 농도로 조절하고 표적세포 임파종양세포 (YAC-1)를 1x105 cells/㎖ 농도로 조절하여 즉, 효능세포와 표적세포의 비율 (E:T)은 20:1 로 0.1 ml씩 96 well plate에 접종하였다. 매개 동물의 비장세포 현탁액은 3 well씩 접종하였다. 대조군은 위 농도로 대식세포와 표적세포를 plate마다 각각 3 well씩 접종한다. 37 ℃, 5 % CO2 배양기에서 24 시간 배양한 후, 위에 서술한 NK세포 활성 시험과 같은 측정방법 및 계산법으로 한다.
2. 결과
2.1. 임파양 기관의 중량의 변화
임파양 기관의 중량 변화는 표 4.와 같은 결과를 얻었다.
1) 흉선 중량의 변화:발효음료 A 투여군은 대조군, 본 음료 (발효음료 A)의 침전물,본 음료 (발효음료 A)의 상층액，비피더스 단독 발효음료， 효모 단독 발효음료 및 비피더스와 효모를 단독발효한 후 혼합하여 투여한 투여군보다 현저히 증가하였으며, 본 음료의 침전물,본 음료의 상층액，비피더스 단독 발효음료， 효모 단독 발효음료 및 비피더스와 효모를 단독발효한 후 혼합하여 투여한 투여군은 상호간 현저한 차이를 나타내지 않았고 본 음료의 침전물, 비피더스 단독 발효음료 및 비피더스와 효모를 단독발효한 후 혼합하여 투여한 투여군은 대조군과 비교할 때 현저한 차이를 보여주었으며, 본 음료의 상층액 및 효모 단독 음료는 대조군과 비교할 때 현저한 차이를 나타내지 않았다;
2) 비장 중량의 변화: 발효음료 A 투여군은 대조군, 본 음료 (발효음료 A)의 침전물, 본 음료 (발효음료 A)의 상층액，비피더스 단독 발효음료， 효모 단독 발효음료 및 비피더스와 효모를 단독발효한 후 혼합하여 투여한 투여군보다 현저히 증가하였으며, 대조군, 본 음료의 침전물,본 음료의 상층액，비피더스 단독 발효음료， 효모 단독 발효음료 및 비피더스와 효모를 단독발효한 후 혼합하여 투여한 투여군은 상호간 현저한 차이를 나타내지 않았다.
표 4. 임파양 기관의 중량의 변화
임파기관의 중량(g/100 g체중)
흉 선 비 장
1.발효음료 A 0.56 ± 0.10 0.71 ± 0.09
2.발효음료 A 침전물 0.46 ± 0.07 0.58 ± 0.07
3.발효음료 A 상층액 0.39 ± 0.09 0.55 ± 0.08
4.발효음료 B 0.45 ± 0.09 0.60 ± 0.11
5.발효음료 C 0.38 ± 0.09 0.55 ± 0.09
6.발효음료 B와 발효음료 C 혼합 0.44 ± 0.10 0.58 ± 0.09
7.대조군 0.33 ± 0.08 0.52 ± 0.08
2.2. 세포증식 반응에 미치는 영향
마우스 비장세포의 Con A와 LPS 에 대한 증식반응은 표 5에 나타낸 바와 같다. 마우스 비장세포의 Con A와 LPS 에 대한 증식반응에서, 발효음료 A 투여군은 대조군, 본 음료 (발효음료 A)의 침전물, 본 음료 (발효음료 A)의 상층액，비피더스 단독 발효음료，효모 단독 발효음료 및 비피더스와 효모를 단독발효한 후 혼합하여 투여한 투여군보다 현저히 증가하였으며, 본 음료의 침전물，비피더스 단독 발효음료， 효모 단독 발효음료 및 비피더스와 효모를 단독발효한 후 혼합하여 투여한 투여군은 상호간 현저한 차이를 나타내지 않았다. 본 음료의 침전물，비피더스 단독 발효음료 및 비피더스와 효모를 단독발효한 후 혼합하여 투여한 투여군은 상호간 현저한 차이를 나타내지 않았고 대조군과 비교할 때는 현저한 차이를 보여주었으며, 단독 효모음료와 본 음료의 상층액 투여군간은 현저한 차이가 없었으며, 본 음료의 상층액과 대조군간도 현저한 차이를 보여주지는 않았다.
표 5. 세포증식 반응에 미치는 영향
비장세포증식반응 (SI)
Con A 증식반응 LPS 증식반응
1.발효음료 A 1.32 ± 0.06 1.22 ± 0.07
2.발효음료 A 침전물 1.10 ± 0.06 1.09 ± 0.05
3.발효음료 A 상층액 1.05 ± 0.08 1.03 ± 0.05
4.발효음료 B 1.11 ± 0.04 1.09 ± 0.04
5.발효음료 C 1.06 ± 0.06 1.06 ± 0.04
6.발효음료 B와 발효음료 C 혼합 1.12 ± 0.05 1,10 ± 0.06
7.대조군 1.01 ± 0.05 0.99 ± 0.04
2.3. NK세포와 복강 대식세포의 세포활성
마우스 비장세포와 복강 대식세포의 세포활성을 표 6에 표시하였다.
1) NK세포활성: 발효음료 A 투여군은 대조군, 본 음료 (발효음료 A)의 침전물, 본 음료(발효음료 A)의 상층액，비피더스 단독 발효음료， 효모 단독 발효음료 및 비피더스와 효모를 단독발효한 후 혼합하여 투여한 투여군보다 현저히 증가하였으며, 대조군, 본 음료의 침전물,본 음료의 상층액，비피더스 단독 발효음료， 효모 단독 발효음료 및 비피더스와 효모를 단독발효한 후 혼합하여 투여한 투여군은 상호간 현저한 차이를 나타내지 않았다.
2) 대식세포활성: 발효음료 A 투여군은 대조군, 본 음료 (발효음료 A)의 침전물, 본 음료 (발효음료 A)의 상층액，비피더스 단독 발효음료， 효모 단독 발효 음료 및 비피더스와 효모를 단독발효한 후 혼합하여 투여한 투여군보다 현저히 증가하였으며, 본 음료의 침전물，비피더스 단독 발효음료， 효모 단독 발효음료 및 비피더스와 효모를 단독발효한 후 혼합하여 투여한 투여군은 상호간 현저한 차이를 나타내지 않았다. 본 음료의 침전물，비피더스 단독 발효음료 및 비피더스와 효모를 단독발효한 후 혼합하여 투여한 투여군은 본 음료의 상층액 및 대조군과 비교할 때 현저한 차이를 보여주었으며, 효모 단독 발효음료, 본 음료의 상층액 및 대조군은 상호간 현저한 차이를 보여주지 않았다.
표 6. NK세포와 복강 대식세포의 세포활성
NK세포세포활성(%) 대식세포세포활성(%)
1.발효음료 A 52.2 ± 6.7 52.8 ± 6.7
2.발효음료 A 침전물 40.1 ± 6.3 36.6 ± 6.4
3.발효음료 A 상층액 35.7± 7.2 29.8 ± 6.6
4.발효음료 B 40.8 ± 7.5 36.9 ± 5.4
5.발효음료 C 36.9 ± 7.8 30.8 ± 3.5
6.발효음료 B와 발효음료 C 혼합 40.7 ± 6.0 37.2 ± 5.2
7.대조군 32.7 ± 5.7 25.7 ± 5.2
본 발명의 발효음료는 비피더스나 효모의 단독 발효음료 혹은 두가지 단독 발효음료를 혼합하거나 단독 생균, 단독 발효균 추출물보다 우월한 안정성과 면역기능 증가작용을 기대할 수 있다.

Claims (5)

  1. 찹쌀가루의 증류수 상층액에 쌀엿, 유청 및 유당을 첨가하여 구성된 비피더스-효모 발효생산을 위한 배지조성물.
  2. 찹쌀가루의 증류수 상층액에 쌀엿, 유청 및 유당을 첨가하고 가열멸균, 냉각 후 비피더스균 (Bifidobacterium longum) 및 효모균 (Saccharomyces cerevisiae)을 순차적 또는 동시에 혼합접종하고, 혐기성 배양 및 호기성 배양 후 안정제로 유당을 첨가한, 알코올 및 방부제를 함유하지 않은, 면역기능증가 작용을 갖는 비피더스-효모 발효음료.
  3. 제2항에 있어서, 비피더스균은 비피도박테리움 롱검 (Bifidobacterium longum) KCTC 3128, 비피도박테리움 롱검 (Bifidobacterium longum) KCTC 3421 또는 비피도박테리움 롱검 (Bifidobacterium longum) KCTC 3466 균주중에서 선택사용하고,
    효모균은 사카로마이세스 세레비시아 (Saccharomyces cerevisiae) KCTC 7928, 사카로마이세스 세레비시아 (Saccharomyces cerevisiae) KCTC 7238, 사카로마이세스 세레비시아 (Saccharomyces cerevisiae) KCTC 7906 또는 사카로마이세스 세레비시아 (Saccharomyces cerevisiae) KCTC 7919 균주중에서 선택사용한 비피더스-효모 발효음료.
  4. 찹쌀가루의 증류수 상층액에 쌀엿, 유청 및 유당을 첨가하고 가열멸균, 냉각후 비피더스균 (Bifidobacterium longum) 및 효모균 (Saccharomyces cerevisiae)을 순차적 또는 동시에 혼합접종하고, 혐기성 배양 및 호기성 배양 후 안정제로 유당을 첨가하는, 알코올 및 방부제를 함유하지 않은, 면역기능증가 작용을 갖는 비피더스-효모 발효음료의 제조방법.
  5. 제4항에 있어서, 비피더스균은 비피도박테리움 롱검 (Bifidobacterium longum) KCTC 3128, 비피도박테리움 롱검 (Bifidobacterium longum) KCTC 3421 또는 비피도박테리움 롱검 (Bifidobacterium longum) KCTC 3466 균주중에서 선택하고, 효모군은 사카로마이세스 세레비시아 (Saccharomyces cerevisiae) KCTC 7928, 사카로마이세스 세레비시아 (Saccharomyces cerevisiae) KCTC 7238, 사카로마이세스 세레비시아 (Saccharomyces cerevisiae) KCTC 7906 또는 사카로마이세스 세레비시아 (Saccharomyces cerevisiae) KCTC 7919 균주중에서 선택사용하는 비피더스-효모 발효음료의 제조방법.
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