KR100556524B1 - 항염증 및 항산화 활성을 갖는 동백 추출물 및 이를함유한 화장료 조성물 - Google Patents

Abstract

본 발명은 동백 씨앗에서 추출한 항염증 및 항산화 활성을 갖는 동백 추출물, 이를 함유하는 항염증 및 항산화 효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명에 따르면, 동백 씨앗에서 얻은 추출물의 우수한 항염증 및 항산화 활성으로 인하여, 이를 함유한 다양한 화장료 조성물에서 뚜렷한 항염증효과, 피부보호효과, 피부개선효과 및 피부노화방지 등을 발휘하면서도 피부자극이나 독성이 거의 없다.

Description

항염증 및 항산화 활성을 갖는 동백 추출물 및 이를 함유한 화장료 조성물{Camellia japonica extract having anti-inflammatory and anti-oxidative activities, and cosmetic composition comprising the same}

도 1은 본 발명의 일 실시예로서 초임계 추출법으로 동백 추출물을 추출하는 작업 공정도를 나타내고,

도 2는 본 발명의 일 실시예로서 초임계 추출법으로 동백 추출물을 추출하는 작업 공정도를 나타내고,

도 3은 본 발명의 동백 추출물의 항염 효과로서 IL-8 생산억제시험결과를 나타낸 그래프이고,

도 4는 본 발명의 동백 추출물의 세포보호효과로서 세포독성 시험결과 (in HaCaT cells)를 나타낸 그래프이고,

도 5는 본 발명의 동백 추출물의 항산화 효과로서 30분 반응을 측정한 결과를 나타낸 그래프이고,

도 6은 본 발명의 동백 추출물의 항산화 효과로서 6시간 반응을 측정한 결과를 나타낸 그래프이다.

본 발명은 기능성 화장료 조성물에 관한 것으로, 더욱 구체적으로 동백 씨앗에서 추출한 항염증 및 항산화 활성을 갖는 동백 추출물, 이를 함유하는 항염증효과, 피부보호효과 및 노화방지효과를 갖는 화장료 조성물에 관한 것이다.

우리 인체는 외부 환경과 밀접하게 접하고 있고 자외선이나 환경 오염에 의해서, 화학 물질, 세제, 꽃가루 등에 노출로 인해 쉽게 민감화 되는 것은 기지의 사실이다. 이러한 외부 환경에 의해 노출된 피부는 활성 산소나 프리라디칼이 발생되고 발생된 활성 산소와 프리라디칼은 정상적인 세포 조직이나 세포막을 공격하여 세포가 파괴되고 피부는 결국 염증 (inflammation)을 일으키게 된다. 염증화된 (inflammated) 조직은 피부에 생리학적 메카니즘에 의해 단백질이나 유전자 물질 등을 파괴하여 주름 등을 형성하는 피부 노화가 일어난다.

피부노화의 가장 큰 원인은 프리 라디칼, 즉 활성 산소이다. 프리 라디칼의 생성 원인을 보면 외적으로는 자외선, 공해, 합성세제 등이며, 내부적 요인으로는 염증, 세포 파괴, 심리적 스트레스 등이다. 최근 자외선(UV-B 및 UV-A) 에 의한 피부 세포 손상의 주 원인은 역시 활성 산소이며, 이는 태양광선 노출시 피부에서 생성되어 피부 단백질의 변성 및 지질의 과산화를 통하며, 피부염 및 광발암 등을 일으킬 수 있다고 보고 되어 있다. 생체 피부 세포가 노령화 되면서 피부 세포중의 과산화물의 수치가 급격히 증가한다. 활성산소에 의해 세포(또는 세포막)의 구성성분이 과산화물질로 되고 단백질 손상이 일어난다면 세포 또는 세포막은 기능을 원활히 수행할 수 없게 된다. 따라서 이들의 기능적, 구조적 손상으로 인해 주름이 생기게 되며 이들로 인해 노화가 촉진된다고 알려져 있다. 또한, 프리라디칼에 의해 손상된 세포나 조직을 치유하기 위해 염증이 유발된다. 염증은 해로운 주위 환경 즉, 세균과 같은 외부 이물질의 침입과 기계적 손상으로부터 생체를 보호하는 생리적인 반응이다. 그러나 이들의 작용은 때로는 인접해 있는 조직 세포와 비세포 성분들에게도 해로운 손상을 일으키기도 한다. 따라서 적절한 조건하에서는 염증은 초기 상태가 지난 후에는 정상기능을 되찾게 되지만, 염증을 자극하는 자극제가 없어지지 않거나 계속해서 만들어지면, 결과적으로 만성염증이 일어나게 되어서 더욱더 심각한 조직의 손상을 가져온다. 이처럼, 과다 염증에 의해 유발되는 단백질 분해 효소들에 의해 세포 및 결합조직이 손상을 입고 결합조직의 손상은 피부의 탄력을 감소시켜 주름의 원인이 될 뿐 아니라 나아가 빠른 피부 노화를 초래하게 된다. 그러므로 활성산소를 억제하는 것은 피부노화 화장료에 중요한 요소이다.

이러한 활성 산소종의 중화를 목적으로 토코페롤, 폴리페놀류, Coenzyme Q 10, BHT, BHA 등 항 산화제가 폭 넓게 이용되고 있으나 이들은 대부분 합성품으로서 장기간 인간의 피부에 적용할 경우 안전성이 문제화되므로 사용이 제한된다. 따라서, 사람의 피부에 대한 안정성이 보증되는 천연물로서 항산화제를 찾으려는 노력이 진행되었는 바, 많은 식물 종에는 식물 보호효과가 우수한 폴리페놀류가 다양하게 함유되어 있으므로, 녹차, 상백피, 황금 등 수많은 식물 추출물이 항산화제로서 화장품에 폭 넓게 사용되고 있다.

이에 본 발명자들은 피부보호 효과를 갖는 식물 종을 찾기 위한 연구를 진행 하던 중에, 동백 씨에는 leucoanthocyanin, anthocyanin, camellin, camelliagenin A B C, 다양한 정유 등이 함유된 사실을 발견하였으며, 특히 대한민국 통영시 일대의 남해안에 자생하는 동백 (Camellia japonica) 씨앗에서 추출한 동백추출물이 우수한 항염증 및 항산화 활성을 가진다는 사실을 발견하여 본 발명을 완성하였다.

또한 본 발명자들은 동백 씨에 함유되어 있는 항 산화 성분 등 피부에 유용한 성분들이 파괴되지 않고 추출할 수 있는 방법을 모색하게 되었다. 연구 끝에 본 연구자들이 연구 발명하여 기 출원한 출원번호 03-67437에 적용한 초임계 추출법을 이용하여 성공적으로 동백 추출물을 개발할 수 있게 되었고 이을 함유한 화장료가 항염증효과, 피부보호효과 및 노화방지효과를 나타내면서도 피부에 매우 안전하다는 사실을 발견하여 본 발명을 완성하게 되었다.

따라서, 본 발명의 목적은 항염증 및 항산화 활성을 갖는 동백 추출물을 제공하는 것이다.

본 발명의 다른 목적은 이러한 효능을 갖는 추출물을 함유하는 항염증효과, 피부보호효과 및 노화방지효과를 갖는 화장료 조성물을 제공하는 것이다.

본 발명은 이러한 견지에서 항 염증효과, 항 산화효과 (피부 보호 효과)를 갖는 동백을 연구하게 되었고, 우리나라에서는 통영지역을 중심으로 한 남해안 일대에 서식하는 동백의 생육이 가장 우수하다는 사실을 알게 되었다.

동백 (Camellia japonica)은 우리나라에서 쓰이는 이름이고 중국에서는 산다화(山茶花)라 하고 일본에서는 쓰바기(椿)로 불리운다. 동백나무는 산다과(Theaceae)에 속하는 상록의 작은 교목으로 높이는 7m 내외까지 자라고 수피는 회갈색이며 잎은 약간 긴 타원형이고 어긋나며 작은 톱니를 갖고 있다. 끝이 뾰족하고 색깔은 녹색이며 잎 표면은 약간의 각질기를 띠고 있으며 매우 윤택하다. 꽃은 선홍색(鮮紅色) 또는 백색(흰동백)을 띠고 있다. 꽃이 피는 시기는 이른봄으로 되어 있으나 지역에 따라서는 그보다 앞서 피기도 한다. 과기(果期)는 9∼10월 경이며 우리나라 남부지방에서 자생한다.

동백 종자의 성분으로 배당체 camellin이 있고 사포닌(C57, H90O28, 2H2O)이 있는데 그 게닌체는 (C29, H44, O5)의 조성을 갖는다. 종자유의 함량은 66%이고 oleic acid glyceride가 주류를 이룬다. 종자유에서 두 종류의 인돌(indol) 화합물이 발견됐다. 또한, 동백의 잎과 꽃에서 항균성분인 camellidin Ⅰ 과 camellidin Ⅱ가 분리되었는데 이는 triterpenoid saponin이다.

본 발명의 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 동백(Camellia japonica) 씨앗으로부터 추출한 것을 특징으로 하는 항염증 및 항산화 활성을 갖는 동백 추출물을 제공한다.

바람직하게는, 상기 동백은 우리나라 통영지역을 포함한 남해안 일대에 서식하는 것을 특징으로 한다. 이 지역의 동백이 우리나라 사람의 체질에 가장 잘 맞고 약효가 뛰어나기 때문이다.

본 발명에서, 동백 추출물의 추출방법은 우선 씨앗의 외피를 벗기고 내피를 종래에 알려진 각종 추출방법으로 추출할 수 있다. 예컨대, 추출용매로서 물, 에탄올, 메탄올, 부탄올, 에틸아세테이트, 핵산, 부틸렌글리콜 , 프로필렌글리콜, 글리 세린으로 구성된 그룹으로부터 선택된 한가지 이상의 용매를 씨앗의 10 ~ 20 배 부피량을 가한후 50 ~ 95℃, 2 ~ 20 시간 가열하여 추출할 수 도 있다.

바람직하게는, 동백 추출물의 추출방법은 우선 씨앗의 외피를 벗긴후 내피를 분쇄한 후 캐리어 가스로 이산화탄소를 사용하고 초임계(초고압) 추출법을 이용하여 추출한 것을 특징으로 한다. 이러한 초임계 추출법은 기존 열 추출이나 용매 추출과는 달리 저온에서 초고압으로 식물의 필요한 성분만을 고농도로 추출하는 방법으로 동백이 가지는 항산화 성분등 피부에 유용한 성분들을 파괴하지 않고 추출할 수 있으며, 유기 용매 대신 인체에 무해한 이산화탄소를 이용하기 때문에 피부에 독성도 없습니다.

바람직하게는, 동백 추출물의 추출방법은 상기 초임계 추출법의 캐리어 개스로 이산화탄소를 이용하고 동시에 수용성(water soluble) 공용매(Co-Solvent)을 사용한 것을 특징으로 한다.

수용성 공용매를 사용하는 이유는 초임계 이산화탄소로 추출이 어려운 친수성이나 극성의 동백 유효 성분을 효과적으로 추출하기 위함이다. 이러한 수용성 공용매를 이산화탄소의 0-20 mole% 정도 첨가하면 초임계 이산화탄소의 용해력을 10배 이상 증가시킬 수 있다.

본 발명에서, 수용성 공용매는 종래에 초임계 추출법에 사용된 어떠한 수용성 공용매도 될 수 있으나, 바람직하게는 Glycerin, Propylene glycol 또는 1,3-butylene glycol과 95% ethanol의 혼합용액인 것을 특징으로 한다.

본 발명의 다른 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 본 발명에 따른 동백 추 출물을 유효성분으로 함유하는 항 염증효과, 피부보호효과 및 노화방지효과를 갖는 화장료 조성물을 제공한다.

바람직하게는, 본 발명의 화장료 조성물은 상기 동백 추출물을 조성물전체에 대해서 0.01~10 %(w/v) 의 양으로 함유하는 것을 특징으로 한다. 함량이 0.01% 보다 낮으면 본 발명의 실질적인 항염증효과, 피부보호효 및 노화방지효과를 기대하기 어렵고, 10%보다 높으면 화장료 조성물의 성상을 유지하기 힘들고 제품의 안정성에 영향을 미친다.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 동백 추출물 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 용매, 안정화제, 용해화제, 유화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함할 수 있다.

본 발명의 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으나, 바람직하게는, 화장수, 영양로션, 영양크림, 맛사지크림, 영양에센스, 팩, 메이컵베이스, 파운데이션, 바디오일, 헤어오일, 샴프, 린스로 구성된 군에서 선택된 제형으로 제조되는 것을 특징으로 한다. 이러한 화장료 조성물의 제형예에 상관없이 본 발명의 동백 추출물을 함유하는 한 본 발명의 항염증효과 및 피부보호효과를 가지며, 피부에 발생한 자유라디칼을 소거하고 세포내 항산화계 보호효과가 있어 자유라디칼 등의 작용에 의한 산화에 의하여 발생하는 피부 노화의 예방 및 지연 효과를 발휘할 수 있다.

이하, 제조예 및 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하기로 한다. 이들 예들은 단지 본 발명을 예시하기 위한 것이므로, 본 발명의 범위가 이들 제조예 및 실시예에 의해 제한되는 것으로 해석되지는 않는다.

동백 추출물의 제조 예 1 :

동백 (camellia japonica) 씨앗의 외피를 벗긴 내피 5,423g을 분쇄하여 내부용적 10 L의 초임계 추출조에 투입하고 추출조를 밀봉하고, 고압용 기체 펌프를 이용하여 추출조에 이산화탄소를 공급하여 압력을 높였다. 압력이 300기압에 달하면 이산화탄소의 공급을 중단하고, PID 온도제어기를 이용하여 추출조에 외부를 감싸고 있는 열선을 이용하여 추출조 내부의 온도를 0.5 ℃/min 속도로 40 ℃까지 승온 시켰다. 승온으로 인한 추출조의 압력은 추출조의 출구에 부착된 압력조절기를 이용하여 이산화탄소를 일부 배출하여 압력을 300 기압으로 조절하고, 추출조의 온도와 압력을 40 ℃, 300 기압으로 50분간 유지시켰다.

고압용 기체펌프를 재가동하여 20 L/min의 유량으로 이산화탄소를 추출조에 연속적으로 공급하는 동시에 출구쪽에 부착된 압력조절기를 이용하여 추출물을 방출시키며 추출조의 온도와 압력을 일정하게 유지시켰다. 압력조절기를 통하여 방출된 압력 및 온도강하로 인하여 이산화탄소가 고체 드라이아이스로 전이되어 최종 출구쪽의 튜브가 막히는 현상이 발생하므로,이를 방지하기 위하여 압력조절기의 온도를 70 ℃로 유지 하였다. 방출된 추출물은 상압으로 감압 되어 이산화탄소는 대기로 방출되고, 동백 씨의 추출물을 포집기 내로 회수하였다. 상기 과정을 96시간 동안 수행한 후 이산화탄소의 투입을 중단하고 추출조업을 종료하였다. 추출을 종료한 후 추출물을 3000rpm에서 40분간 원심 분리하여 최종적으로 오일을 회수할 수 있었으며 회수된 오일의 무게는 882g 이었다. 본 제조예의 동백 추출물을 추출하는 작업공정도를 도 1에 도시하였다.

동백 추출물의 제조 예 2 :

동백 (camellia japonica) 씨앗의 외피를 벗긴 내피 6.120 g을 분쇄하여 내부 용적 10 L의 초임계 추출조에 투입하고 동백 추출물의 제조 예 1과 동일한 방법으로 오일 915g을 회수할 수 있었다.

동백 추출물의 제조 예 3 :

동백 (camellia japonica) 씨앗의 외피를 벗긴 내피 5.960 g을 분쇄하여 내부 용적 10 L의 초임계 추출조에 투입하고 동백 추출물의 제조 예 1과 동일한 방법으로 오일 905g을 회수할 수 있었다.

동백 추출물의 제조 예 4 :

동백 (camellia japonica) 씨앗의 외피를 벗긴 내피 603g을 분쇄하여 내부 용적 1.2 L의 초임계 추출조에 투입하고 추출조를 밀봉하고, 고압용 기체펌프를 이용하여 추출조에 이산화탄소를 공급하여 압력을 높였다. 동시에 고압용 액체펌프를 이용하여 수용성 공용매인 1,3-butylene glycol 과 95% ethanol의 혼합용액 (1,3-butylene glycol : 95% Ethanol = 100:5)을 1.1g/min 속도로 이산화탄소와 동시에 추출조에 투입하였다. 압력이 300기압에 달하면 이산화탄소와 공용매의 공급을 중단하고, PID 온도제어기를 이용하여 추출조에 외부를 감싸고 있는 열선을 이용하여 추출조 내부의 온도를 0.5 ℃/min 속도로 40 ℃까지 승온 시켰다. 승온으로 인한 추출조의 압력은 추출조의 출구에 부착된 압력조절기를 이용하여 이산화탄소를 일 부 배출하여 압력을 300 기압으로 조절하고, 추출조의 온도와 압력을 40 ℃, 300 기압으로 50분간 유지시켰다.

고압용 기체펌프를 재가동하여 20 L/min의 유량으로 이산화탄소를 추출조에 연속적으로 공급하는 동시에 고압용 액체펌프를 재가동하여 water soluble 공용매를 1.1g/min 속도로 공급하였다. 동시에 출구쪽에 부착된 압력조절기를 이용하여 추출물을 방출시키며 추출조의 온도와 압력을 일정하게 유지시켰다. 압력조절기를 통하여 방출된 압력 및 온도강하로 인하여 이산화탄소가 고체 드라이아이스로 전이되어 최종 출구쪽의 튜브가 막히는 현상이 발생하므로, 이를 방지하기 위하여 압력조절기의 온도를 70 ℃로 유지하였다. 방출된 추출물은 상압 으로 감압 되어 이산화탄소는 대기로 방출되고, 동백 씨의 water soluble 유효성분과 공용매를 함께 포집기 내로 회수하였다. 상기 과정을 6시간 동안 수행한 후 water soluble 공용매 투입을 중단하고 추출조업을 종료하였다. 추출종료 후 3000rpm에서 30분간 원심분리 하여 상층의 oil 층을 제거한 최종 제품 180g을 얻었다. 본 제조예의 동백 추출물을 추출하는 작업공정도를 도 2에 도시하였다.

동백 추출물의 제조 예 5 :

동백 (camellia japonica) 씨앗의 외피를 벗긴 내피 590g을 분쇄하여 내부 용적 1.2 L 의 초임계 추출조에 투입하고 동백 워터의 제조 예 4과 동일한 방법으로 식물 추출물을 제조하여 170g을 얻었다.

실험 1. 호염증성 싸이토카인 Interleukin-8 생산 억제능 시험

상기 동백 추출물 제조 예 4에 대해 항 염증 효과를 측정하였다. 일반적으로 human monocyte인 THP-1 세포는 외부자극물질인 LPS (Lipopolysaccharide) 에 의해 호염증성 싸이토카인인 Interleukin-8을 세포 밖으로 분비한다. IL-8은 염증을 유발하는 싸이토카인으로 알려져 있어 THP-1 세포에 의한 IL-8 생산 증감 여부를 통해 항 염증 효과 여부를 판단할 수 있다.

- 시험방법:

(1) THP-1 세포의 적당 수를 96 well plate에 각각 분주한다.

(2) THP-1 세포의 자극물질인 LPS를 세포에 처리하여 세포를 활성화 시킨다.

(3) THP-1 세포를 LPS로 처리한 well에, 시험물질을 각 농도별로 세포에 처리한 후 16시간 incubation한다.

(4) 세포를 원심분리로 침전시킨 후, 상층 액을 모은다.

(5) 수집된 각 상층 액을 96 well 에 100 μl 씩 분주한다. 여기에 희석된 biotinylated detection antibody를 50ml 씩 투여한 후, 상온에서 1 시간동안 incubation 한다.

(6) 각 well 을 PBS로 3번 세척한 후, 다시 streptavidin-HRP 100μl를 분주한다.

(7) 30분 동안 상온에 incubation 한 후, PBS로 3번 세척한다.

(8) 각 well 에 TMB 용액 100μl 씩 첨가 후, 상온에서 2분 내지 15분 정도 방치한다. (단, 빛에 노출시키지 않는다.)

(9) 황산용액 100μl를 각 well 에 첨가한 후, A450nm 에서 absorbance를 측정한다.

- 평가방법 :

시료에 의한 IL-8 생산감소여부를 통해, 항 염증기전에 관여하는지를 판단한다.

- 시험결과:

시료에 의한 Interleukin-8 생산증감을 absorbance 수치로 나타낸 후, 이를 각각 히스토그램을 이용하여 자료를 정리하였다 (도 3). 도 3에서 알 수 있듯이, 동백 추출물을 세포에 처리하였을 경우 0.1 % 농도에선 IL-8 생산량이 감소되지 않았지만, 1.0 %와 5.0 %의 시료를 처리한 결과 THP-1 세포에 의한 IL-8 생산이 크게 억제되는 현상을 관찰하였다. 그리고 동백 추출물에 의한 항 염증효과가 세포 독성에 의해 나타날 수 있는 가능성을 배재시키기 위하여 MTT assay를 수행하였다. MTT assay 는 배양한 세포(HaCaT cells)에 MTT 용액 0.1㎖ 을 가한 후 4 시간동안 배양한 다음 ELISA reader 를 사용해 540㎚ 에서 흡광도를 측정하였다. 도 4에 제시된 것처럼, IL-8 생산 억제 효과가 나타나는 1.0 %와 5.0 %에서 전혀 세포독성을 보이지 않았다. 이러한 결과는 동백 추출물에 의해 IL-8 생산이 감소됨을 확인하여 항 염증 효과가 있음을 알 수 있고 세포독성이 전혀 없는 피부에 매우 안전한 물질임을 재확인할 수 있었다. 또한, 이러한 MTT assay 결과는 본 발명의 동백 추출물이 그 자체로서 우수한 세포보호효과를 가진다는 것을 증명한다.

실험 2. 항 산화 효과 시험

상기 동백 추출물의 제조 예 1에 대해 항 산화 효과 여부를 테스트하였다.

- 시험원리 및 시험방법 : 일반적으로 널리 알려진 DPPH 법 (Radical scavenging activity)을 사용하였고, DPPH (1, 1-diphenyl-2-picrylhydrazyl) 는 색을 띠는 라디칼로 시료의 라디칼 제거 능력을 직접 확인할 수 있다.

- 시험방법:

(1) 시료를 증류수 또는 용매에 녹인다.

(2) 액상상태의 100 ul 시료에 200uM DPPH 900 ul을 섞어준다.

(3) 잘 섞은 후, 상온에서 30분간 incubation 한다.

(4) 남아있는 DPPH 양을, 517nm에서의 흡광도 측정을 통해 파악한다.

(Blank : 증류수 또는 용매, Control : 1에서 시료를 넣지 않고 DPPH와 증류수 또는 용매로만 구성된 실험구).

- 평가방법 :

각 가수분해물의 항 산화력을 대조구의 흡광도와 비교하여 낮아진 비율로 나타냄.

[ 계산 ]

RSA (%) = [Absorbance of hydroxylate / Absorbance of control] × 100

- 시험결과:

[표 1] 동백 추출물 (Camellia japonica seed oil;CJO) 30분 반응

[표 2] 동백 추출물(Camellia japonica seed oil ;CJO) 6시간 반응

상기 표1은 항 산화능 실험 결과를 수치로 나타낸 것이다. 이를 히스토그램을 이용하여 자료를 정리하였다. 도 5는 CJO (Camellia japonica seed oil)시료를 30분 반응 후 항 산화효과를 O.D 값으로 나타낸 것이고 도 6은 6시간 반응 후 지연 된 항 산화능 (delayed antioxidant)을 보이는 CJO 의 DPPH법에 의한 항산화능을 나타낸 것이다. 그리고 도 7은 CJO의 RSA(Radical Scavenging Activity) 값의 비교를 나타낸 것이다. 보통 자유라디칼 측정은 시료와 DPPH 용액을 30분 정도 반응 시킨 후 O.D 값을 측정하는데 이러한 일반적인 DPPH 측정법에서는 CJO 자유라디칼 소거에 의미있는 효과를 보이지 않았다. 그러나 CJO의 경우 6시간 동안 반응시켰을 때 자유라디칼 소거력이 관찰되었다. 이는 CJO가 서서히 항 산화능을 가지고 자유라디칼을 소거함을 나타내고 있다.

이하, 본 발명의 실시예로서 유화장수, 영양 로션, 영양 크림, 마사지 크림, 영양 에센스를 예시하고 있으나, 본 발명의 화장료 조성물의 제형은 이에 제한되는 것은 아니다.

실시예 1 : 화장수

산수유 추출물을 함유한 화장료 중 화장수(스킨로션)의 처방예는 다음과 같다. 여기서 처방된 동백 추출물는 제조예 4 의 것을 말한다.

[표 3] 화장수의 처방예

번 호	원 료	실시예 1	비교예 1
1	동백 추출물	5.0	-
2	글리세린	3.0	3.0
3	부틸렌 글리콜	2.0	2.0
4	프로필렌 글리콜	2.0	2.0
5	폴리옥시에칠렌(60) 경화피마자유	1.0	1.0
6	에탄올	10.0	10.0
7	트리에탄올아민	0.1	0.1
8	방부제	미량	미량
9	색소	미량	미량
10	향료	미량	미량
11	정제수	잔량	잔량

<제조방법>

실시예 1 : 11번에 2, 3, 4, 8 번을 순서대로 투입하여 교반하며 용해시킨 후, 5번을 60℃정도 가열하여 용해시킨 후, 10번을 투입 교반하여 11번에 투입한다.마지막으로 1, 6, 7, 9번을 투입하여 충분히 교반한 뒤 숙성시킨다.

비교예 1 : 11번에 2, 3, 4, 8 번을 순서대로 투입하여 교반하여 용해시킨 후 5번을 60℃ 정도 가열하여 용해시킨 후 10번을 투입 교반하여 11번에 투입한다. 마지막으로 6, 7, 9번을 투입하여 충분히 교반한 뒤 숙성시킨다.

실시예 2 : 영양로숀

동백 추출물을 함유한 화장료 중 영양로숀의 처방예는 다음과 같다. 여기서 처방된 동백 추출물는 제조예 4 의 것을 말한다.

[표 4]

번호	원 료	실시예 2	비교예 2
1	동백 추출물	3.0	-
2	밀납	1.00	1.0
3	폴리솔베이트 60	1.5	1.5
4	솔비탄세스퀴올레이트	0.5	0.5
5	유동파라핀	8.0	11.0
6	스쿠알란	3.0	3.0
7	소르비탄 스테아레이트	1.0	1.0
8	글리세릴 스테아레이트/피이지-400 스테아레이트	1.2	1.2
9	친유성 모노스테아린산 글리세린	0.50	0.50
10	스테아린산	1.50	1.50
11	글리세린	5.00	5.00
12	부틸렌글리콜	5.00	5.00
13	카르복시비닐폴리머	0.1	0.1
14	트리에탄올아민	0.2	0.2
15	방부제	미량	미량
16	색소	미량	미량
17	향료	미량	미량
18	정제수	잔량	잔량

〈제조방법〉

실시예 2 : 11, 12, 13, 15, 18를 혼합교반하면서 70～75℃ 사이로 가열하여 제조부에 투입한 후, 유화기를 작용시키고 1,2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 14를 70～75℃ 사이로 가열하여 투입한 뒤 혼합 유화한다. 유화가 끝나면 교반기를 이용하여 교반하면서 50℃까지 냉각한 뒤 15,16,17번을 투입하고 재유화한 후, 탈포하여 25℃까지 냉각한 뒤 숙성시킨다.

비교예 2 : 11, 12, 13, 15, 18를 혼합교반하면서 70～75℃ 사이로 가열하여 제조부에 투입한 후, 유화기를 작용시키고 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 14를 70～75℃ 사이로 가열하여 투입한 뒤 혼합 유화한다. 유화가 끝나면 교반기를 이용하여 교반하면서 50℃까지 냉각한 뒤 15,16,17번을 투입하고 재유화한 후, 탈포 하여 25℃까지 냉각한 뒤 숙성시킨다.

실시예 3 : 영양크림

동백 추출물을 함유한 화장료중 영양크림의 처방예는 다음과 같다. 여기서 처방된 동백 추출물는 제조예 1 의 것을 말한다.

[표 5]

번호	원 료	실시예 3	비교예 3
1	동백 추출물	3.0	-
2	밀납	1.8	1.8
3	폴리솔베이트 60	1.5	1.5
4	솔비탄세스퀴올레이트	0.5	0.5
5	유동파라핀	10.0	13.0
6	스쿠알란	5.0	5.0
7	소르비탄 스테아레이트	1.00	1.0
8	글리세릴 스테아레이트/피이지-400 스테아레이트	1.00	1.0
9	친유성 모노스테아린산 글리세린	0.50	0.50
10	스테아린산	1.50	1.50
11	글리세린	5.00	5.00
12	부틸렌글리콜	5.00	5.00
13	트리에탄올아민	0.2	0.2
14	방부제	미량	미량
15	색소	미량	미량
16	향료	미량	미량
17	정제수	잔량	잔량

〈제조방법〉

실시예 3 : 11, 12, 14, 17을 혼합교반하면서 70～75℃ 사이로 가열하여 제조부에 투입한 후, 유화기를 작용시키고 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 13을 70～75℃ 사이로 가열하여 투입한 뒤 유화한다. 유화가 끝나면 교반기를 이용하여 교반하면서 50℃까지 냉각한 뒤 14,15,16번을 투입하고 재유화 시킨 후, 25℃까지 냉각한 뒤 숙성시킨다.

비교예 3 : 11, 12, 14, 17을 혼합교반하면서 70～75℃ 사이로 가열하여 제조부에 투입한 후, 유화기를 작용시키고 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 13을 70～75℃ 사이로 가열하여 투입한 뒤 유화한다. 유화가 끝나면 교반기를 이용하여 교반하면서 50℃까지 냉각한 뒤 14,15,16번을 투입하고 재유화 시킨 후, 25℃까지 냉각한 뒤 숙성시킨다.

실시예 4 : 맛사지 크림

동백 추출물을 함유한 화장료 중, 맛사지 크림의 처방예는 다음과 같다. 여기서 처방된 동백 추출물는 제조예 1 의 것을 말한다.

[표 6]

번호	원 료	실시예 4	비교예 4
1	동백 추출물	3.0	-
2	밀납	2.0	2.0
3	폴리솔베이트 60	1.5	1.5
4	솔비탄세스퀴올레이트	0.8	0.8
5	유동파라핀	40.0	43.0
6	스쿠알란	5.0	5.0
7	카프릴릭/카프릭트리글리세라이드	4.0	4.0
8	카르복시 비닐폴리머	0.2	0.2
9	글리세린	5.0	5.0
10	부틸렌글리콜	3.0	3.0
11	프로필렌글리콜	3.0	3.0
12	트리에탄올아민	0.2	0.2
13	방부제	미량	미량
14	색소	미량	미량
15	향료	미량	미량
16	정제수	잔량	잔량

<제조방법>

실시예 4 : 8, 9, 10, 11, 12, 13, 16을 혼합교반하면서 70～75℃ 사이로 가열하여 제조부에 투입한 후 유화기를 작용시키고 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7을 70～75℃ 사이로 가열하여 투입한 뒤 유화한다. 유화가 끝나면 교반기를 이용하여 교반하면서 50℃까지 냉각한 뒤 14,15번을 투입하고 재유화 시킨 후, 25℃까지 냉각한 뒤 숙성시킨다.

비교예 4 : 8, 9, 10, 11, 12, 13, 16을 혼합교반하면서 70～75℃ 사이로 가열하여 제조부에 투입한 후 유화기를 작용시키고 2, 3, 4, 5, 6, 7을 70～75℃ 사이로 가열하여 투입한 뒤 유화한다. 유화가 끝나면 교반기를 이용하여 교반하면서 50℃까지 냉각한 뒤 14,15번을 투입하고 재유화 시킨 후, 25℃까지 냉각한 뒤 숙성시킨다.

실시예 5 : 영양 에센스

동백 추출물을 함유한 화장료 중, 영양 에센스의 처방예는 다음과 같다. 여 기서 처방된 동백 추출물는 제조예 1 의 것을 말한다.

[표 7]

번호	원 료	실시예 5	비교예 5
1	동백 추출물	3.0	-
2	스쿠알란	1.70	1.70
3	폴리글리세릴 2-올레이트	1.50	1.50
4	세라마이드	0.7	0.7
5	세테아레스-4	1.0	1.0
6	콜레스테롤	0.2	0.2
7	디세틸포스페이트	0.4	0.4
8	농글리세린	5.0	5.0
9	선플라우어오일	12.0	15.0
10	카르복시비닐폴리머	0.2	0.2
11	산탄검	0.2	0.2
12	방부제	미량	미량
13	향료	미량	미량
14	정제수	잔량	잔량

〈제조방법〉

실시예 5 : 원료물질1, 2, 3, 4, 5 및 6을 일정한 온도에서 균질화하여 비이온계 양친매성 지질이라 칭한다. 상기 비이온계 양친매성 지질과 원료물질 1, 7, 8 및 14를 혼합하고 일정한 온도에서 균질화하여 마이크로 플루다이져를 통과하고, 이어 원료물질 9를 일정한 온도에서 서서히 첨가하여 균질화한 후 다시 마이크로 플루다이져에 재차 통과시킨다. 그리고 10, 11, 12, 13을 투입하여 분산시켜 안정화하고 숙성시킨다.

비교예 5 : 원료물질 2, 3, 4, 5 및 6을 일정한 온도에서 균질화하여 비이온계 양친매성 지질이라 칭한다. 상기 비이온계 양친매성 지질과 원료물질 7, 8 및 14를 혼합하고 일정한 온도에서 균질화하여 마이크로 플루다이져를 통과하고 이어 원료물질 9를 일정한 온도에서 서서히 첨가하여 균질화한 후 다시 마이크로 플루다이져에 재차 통과시킨다. 그리고 10, 11, 12, 13을 투입하여 분산시켜 안정화하고 숙성시킨다.

실험예 1. 피부 상태 개선효과 확인 실험

실시예 3과 비교예 3의 영양크림에 대한 피부도포 시, 피부상태 개선효과를 확인하기 위하여 다음과 같은 임상 확인 실험을 하였다. 20～55세의 여성층으로서 정상, 지성, 건성, 복합성 피부의 소유자 50명을 각각 25%씩으로 구성하여 피부상태 개선과 피부의 유수분 상태를 조사하였다. 동일인에게 안면 윗쪽 부분에는 실시예 3의 영양크림을, 안면 오른쪽 부분에는 비교예 3의 영양크림을 매일 아침 세안 후 피부에 1일 1회 20일간 도포한 후 피부상태 개선을 확인하기 위하여 피부상태 개선 정도를 측정하였다. 시험결과를 표8에 나타낸다.

[표 8] 피부 상태 개선효과 확인 실험 결과

조사항목 견 본		피부상태 개선		비 고
		인원수	%
실시예 3	매우 좋다	26	52.0
	좋다	10	20.0
	보통이다	14	28.0
	그저 그렇다	-	-
비교예 3	매우 좋다	-	-
	좋다	9	18.0
	보통이다	15	30.0
	그저 그렇다	26	52.0

상기 조사결과와 같이 혼합 식물 추출물을 첨가하여 제조한 실시예 2의 화장료가 첨가되지 않고 제조한 비교예 2보다 피부 개선효과가 우수하다는 것을 알 수 있다.

실험예 2. 피부 노화 개선 효과 확인 시험

실시예 5과 비교예 5의 영양에센스에 대한 피부도포 시, 피부노화 개선효과 를 확인하기 위하여 20명의 왼쪽눈 가장자리에 하루에 두번 실시예 4를 적용하였다. 오른쪽 눈 가장자리는 비교예 4를 적용하였다. 각각 처리하고 난 14일 후 피부 표면의 주름깊이 감소를 Cutometer SEM 474에 의해 측정하였다. Cutometer SEM 474는 주름의 깊이를 측정하는 것으로서, 값이 적을수록 피부 노화개선효과가 높고 피부 탄력성이 좋은 것이다. 피부노화개선도 값은 대조군에 비해 감소한 값을 %로 나타내었으며, 피검자 20명의 평균값을 결과에 나타내었다. 대조군은 시료를 처리하기 전의 측정값이다.

[표 9] 피부 탄력성 증가 시험 결과

시 료	피부노화개선(주름깊이 감소) 효과(%)
	15일	30일
실시예 5	8.5	17.8
비교예 5	2.4	5.8

이상 설명한 바와 같이, 본 발명에 따르면 동백 씨앗으로부터 초임계추출법으로 얻은 동백 추출물은 우수한 항 염증효과, 항 산화효과를 갖는 것을 확인할 수 있었으며 또한 이들 추출물들은 피부독성이 없는 피부에 안전한 원료임을 확인 할 수 있었다. 이들 원료를 함유한 화장료 조성물은 피부에 매우 안전하면서 외부 자극으로부터 피부를 보호하고, 피부개선효과 및 노화개선효과 등을 발휘할 수 있다.

Claims (8)

1. 동백(Camellia japonica) 씨앗으로부터 추출한 것을 특징으로 하는 항염증 활성을 갖는 동백 추출물.
2. 제 1항에 있어서, 상기 동백은 우리나라 통영지역을 포함한 남해안 일대에 서식하는 것을 특징으로 하는 항염증 활성을 갖는 동백 추출물.
3. 제 1항에 있어서, 캐리어 가스로 이산화탄소를 사용하고 초임계 추출법을 이용하여 추출한 것을 특징으로 하는 항염증 활성을 갖는 동백 추출물.
4. 제 1항에 있어서, 상기 초임계 추출법의 캐리어 개스로 이산화탄소를 이용하고 동시에 수용성(water soluble) 공용매를 사용한 것을 특징으로 하는 항염증 활성을 갖는 동백 추출물.
5. 제 4항에 있어서, 상기 수용성 공용매는 글리세린, 프로필렌 글리콜 또는 1,3-부틸렌 글리콜과 95% 에탄올의 혼합용액인 것을 특징으로 하는 항염증 활성을 갖는 동백 추출물.
6. 제 1항 내지 제 5항 중 어느 한 항의 동백 추출물을 유효성분으로 함유하는 항 염증효과를 갖는 화장료 조성물.
7. 제 6항에 있어서, 상기 동백 추출물을 조성물전체에 대해서 0.01~10 %(w/v) 의 양으로 함유하는 것을 특징으로 하는 항염증효과를 갖는 화장료 조성물.
8. 제 6항에 있어서, 상기 화장료 조성물이 화장수, 영양로션, 영양크림, 맛사지크림, 영양에센스, 팩, 메이컵베이스, 파운데이션, 바디오일, 헤어오일, 샴프, 린스로 구성된 군에서 선택된 것을 특징으로 하는 항염증효과를 갖는 화장료 조성물.

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