KR100515294B1

KR100515294B1 - 에스-(-)-암로디핀 니코티네이트 결정성 2수화물

Info

Publication number: KR100515294B1
Application number: KR10-2003-0001260A
Authority: KR
Inventors: 정유섭; 하문천
Original assignee: 한림제약(주)
Priority date: 2002-09-11
Filing date: 2003-01-09
Publication date: 2005-09-15
Also published as: KR100632698B1; KR20040023474A; KR20050079641A

Abstract

본 발명은 S-(-)-암로디핀 니코티네이트, 그 무수물, 그 수화물 및 S-(-)-암로디핀 니코티네이트와 그 무수물 또는 그 수화물을 제조하는 방법에 관한 것이다.

본 발명의 방법은 신규의 광학이성질체인 S-(-)-암로디핀 니코티네이트 수화물, 그 무수물, 그 수화물을 제공하는 것이며, 본 발명의 화합물은 (R.S)-암로디핀 니코티네이트에 비하여 우수한 약리효과를 가진다.

Description

에스-(-)-암로디핀 니코티네이트 결정성 2수화물 {S-(-)-amlodipine nicotinate crystalline dihydrate}

암로디핀 1a 및 그의 염은 장기간 작용하는 칼슘채널 차단제이므로, 협심증, 고혈압 및 울혈성 심마비와 같은 심장혈관계 질환의 치료에 유용하다. 암로디핀의 2가지 에난티오머 및 이들의 염은 상이한 약물학적 프로파일을 갖는다. S-(-)-이성질체는 보다 강력한 칼슘 채널 차단제이고, R-(+)-이성질체도 아테롬성 동맥경화증의 치료 또는 예방에 활성을 나타낸다.

문헌 [J.E. Arrowsmith 등, J. Med. Chem. (1986) 29 1969]에는 디아스테레오머성 아지드 에스테르 1b의 분리에 의해 암로디핀의 2가지 이성질체를 분리하는 방법이 기재되어 있고, 유럽 특허 제 A331315호[J.E. Arrowsmith]에는 산 1c 에 신코니딘을 사용하여 염을 제조한 후 광학분할하여 궁극적으로 에난치오머적으로 순수한 암로디핀 이성질체를 얻는 방법이 기재되어 있다. 문헌 [S. Goldman 등, J. Med. Chem. (1992) 35 334]에는 디아스테레오머성 아미드 이성질체 1d를 크로마토그래피적으로 분리하는 방법이 기재되어 있으며, 한국 특허 등록번호 10-0188980[스파고 피터 라이오넬, PCT/EP 1995/00847]에는 타르타르산에 의한 염 형성을 거쳐 암로디핀의 광학 이성질체를 분리하는 방법이 설명되어 있다.

화학식 1

이중 한국 특허 등록번호 10-0188980[스파고 피터 라이오넬, PCT/EP 1995/ 00847]은 높은 수율과 광학적 순도를 보이지만, 가격이 고가인 D-(-)-타르타르산으로 S-(-)-암로디핀을 분리하므로서 경제적인 측면에서 한계가 있다. 이에 본 연구자들은 보다 저렴한 L-(+)-타르타르산으로 S-(-)-암로디핀을 분리하는 방법을 개발한 후 니코티닉에시드를 반응시켜 제제학적으로 보다 안정하고 약효 측면에서 우수한 S-(-)-암로디핀 니코티네이트 염을 제조하여 본 발명을 완성하였다.

본 발명은 신규의 광학이성질체인 S-(-)-암로디핀 니코티네이트 수화물, 그 무수물, 그 수화물을 제공하는 것이며, (R.S)-암로디핀 니코티네이트에 비하여 우수한 약리효과를 가지는 조성물을 제공하는 것이다.

S-(-)-암로디핀과 니코티닉에시드를 반응시켜 제제학적으로 안정하고 약효면에서 우수한 S-(-)-암로디핀 니코티네이트를 얻는다.

반응식 1

본 발명을 다음 실시예로 예시한다.

광학순도는 Jasco DIP-1000 으로 측정하였다.

실시예 1

(S)-(-)-암로디핀 니코티네이트 염 및 그의 수화물의 제조방법

(S)-(-)-암로디핀(2.0g, 4.89mmole)을 95% 공업용 메틸화 주정 (10.0mL)중에서 완전히 녹인 다음, 이것을 95% 공업용 메틸화주정 (2.5mL)에 슬러리화 시킨 니코틴산 (602mg, 4.89mmole)에 가한다. 이 용액을 서서히 가온시켜 환류상태로 5시간 반응 시킨후, 이어서 5℃이하로 냉각하면 암로디핀 니코티네이드 염 수화물이 형성되며 이를 여과시키고 공업용 이소프로판올(5.0mL)로 세척한다.

얻어진 염을 95%메탄올 : 이소프로판올(1:9) 또는 물 : 이소프로판올 (5:95)용액 (10.0mL)에 가온하여 완전히 녹인후 서서히 실온에서 교반하고, 0℃로 냉각한 다음 생성된 결정을 여과하여 이소프로판올(5.0mL)로 세척후, 감압하에 80℃에서 5시간동안 건조시킨다.

하기 분석치를 갖는 2수화물염 2.2-2.26g을 수득하였다.

수율 : 79.3-81.4%

융점 : 178-180℃

¹H-NMR(CDCl₃) : 9.19(s, 1H), 8.63(d, 1H), 8.24(d, 1H), 7.75(s, 1H)

6.97-7.34(m. 5H), 5.33(s, 1H), 4.74(gq, 2H), 4.01(m, 2H)

3.76(bs, 2H), 3.55(s, 3H), 3.17(bs, 2H), 2.28(s, 3H)

1.15(t, 3H)

[α]_D ²⁵ = -24.4(c=1, MeOH)

도 1 은 실시예 2에서 제조된 S-(-)-암로디핀 니코티네이트의 XRD 차트이다.

도 2 는 실시예 2에서 제조된 S-(-)-암로디핀 니코티네이트의 XRD 패턴의 피크 리스트 데이터 이다.

* XRD 모델명 ; Rigaku Rotaflex 12Kw XRD-2000

LOD(건조감량실험) : 상기염 200mg을 정밀하게 취한다음 120℃, 5mmHg 이하 감압하에서 5시간 동안 건조한 후 중량차이에 의해 2수화물임을 확인하였다.

실시예 2

실시예 1 에서 얻은 (S)-(-)-암로디핀 니코티네이트 염 수화물을 감압하에 115-125℃에서 5시간 건조하여 암로디핀 니코티네이트 염 무수물을 얻었다.

융점 : 179-181℃

계산치(%) : C; 58.70 H; 5.68 N; 7.90

실측치(%) : C; 58.65 H; 5.60 N; 7.91

실험예 1

Amlodipine nicotinate와 광학활성 S-(-)-Amlodipine nicotinate의 약효시험 결과

1. 서론

본 실험은 2종류의 시험물질 Amlodipine nicotinate와 광학활성 S-(-)-Amlodipine nicotinate에 대한 심장순환계 약리효과를 측정/비교하기 위하여 수행되었다. 실험 항목으로서는 선천성 고혈압쥐에서의 항고혈압작용을 측정하는 in vivo 활성 측정법을 사용하였다.

2. 실험방법

(1) 시약

Amlodipine nicotinate(M.W. 531.0), 광학활성 S-(-)-Amlodipine- nicotinate(M.W. 531.0)를 증류수에 용해하여 투여하였다. 실험에 사용된 모든 약물 및 시약들은 사용직전에 조제하였다.

(2) 실험동물

선천성 고혈압쥐 (SHR, 웅성, 13-14주령)는 일본의 Charles River사로부터 구입하였으며, 항온(22.5 ±1 ℃), 항습 (55 ±5%) 및 12시간 간격으로 명암이 자동 조절되는 청정 동물 사육실에서 안정화된 후 실험에 사용되었다.

(3) 선천성 고혈압쥐 (SHR)에서의 항고혈압작용

SHR은 수축기혈압이 170 mmHg 이상인 것만을 사용하였으며, 1군당 6-8마리로 하였다. 혈압 측정은 실험동물의 꼬리로부터 혈압을 측정하는 방법인 tail-cuff method를 이용하여, Multichannel 8000 (TSE사, 독일)으로 측정하였다. 혈압을 원활하게 측정하기 위하여, 실험동물을 37 ℃의 항온 box에서 약 10분간 warming하였다. 시험물질 1, 3 및 10 mg/kg 용량을 증류수 (0.5 ml/100g rat)에 용해하여 경구투여 하였다. 혈압 측정은 약물 투여전, 약물투여 2, 4, 6, 8, 10, 24 시간후에 이루어졌다.

(4) 통계

모든 실험결과는 mean ±S.E.M. 으로 표시하였고, 실험결과의 통계분석은 미국 Jandel Co.사의 Sigma Stat 프로그램을 이용하여, unpaired t-test 및 one-way analysis of variance (ANOVA)로 처리하였고, 2차검정은 Dunnett multiple comparisons test로 하였다.

3. 실험결과

선천성 고혈압쥐에 대한 시험물질 Amlodipine nicotinate 및 광학활성 S-(-)-Amlodipine nicotinate의 항고혈압효과를 측정한 실험결과를 도 3 내지 도5 및 표 1 내지 표2에 나타내었다. Amlodipine nicotinate(도 3, 표1), 광학활성 S-(-)-Amlodipine nicotinate(도 4, 표 1) 모두 다 용량 의존적으로 혈압을 강하시켰으며, 이때 혈압강하 양상은 모든 투여군에서 비슷하게 나타났다. 시험물질 투여 2시간 후부터는 유의성 있는 항고혈압효과가 나타나기 시작하여, 투여 2 - 6 시간 사이에 최대효과가 나타났다. 이들 항고혈압효과는 투여 10시간 이상 지속되었고, 특히 10 mg/kg의 고용량에서는 투여 24시간 후에도 여전히 유의성 있는 항고혈압효과를 나타내는 지속성을 보였다. 각 투여용량에 대한 최대 항고혈압효과만을 따로 도 5에 나타내었는데, 이때 1 mg/kg 용량에서의 Amlodipine nicotinate 및 광학활성 S-(-)-Amlodipine nicotinate의 최대 항고혈압효과는 각각 -10.20 ±2.71, -12.4 ±1.73% (p<0.05 vs. Amlodipine nicotinate) 이었고, 3 mg/kg 용량에서는 각각 -26.8 ±3.22, -28.3 ±3.31% 이었으며, 10 mg/kg 의 고용량에서는 각각 -40.9 ±2.08, -43.6 ±1.65% 로 나타나, 1 mg/kg 용량에서는 상당한 유의성이 있었다. 한편, ED₂₀ 수치 (혈압을 20% 억제하는 용량, 95% 신뢰구간) 는 Amlodipine nicotinate 및 광학활성 S-(-)-Amlodipine nicotinate가 각각 2.19 ±0.57, 1.91 ±0.49 mg/kg 으로 나타났다 (표 2).

각 용량별 최대 항고혈압효과

Sample 명＼투여량	1mg/kg	혈압강하 강도	3mg/kg	혈압강하 강도	10mg/kg	혈압강하 강도
Amlodipinenicotinate	-10.20±2.71	1.00	-26.8±3.22	1.00	-40.9±2.08	1.00
광학활성 S-(-)-Amlodipinenicotinate	-12.4±1.73	1.22	-28.3±3.31	1.06	-43.6±1.65	1.07

ED₂₀ values

Sample 명	용량(mg)	약 효 강 도
Amlodipine nicotinate	2.19±0.57	1.00
광학활성 S-(-)- Amlodipine nicotinate	1.91±0.49	1.15

4. 결론

Amlodipine nicotinate 및 광학활성 S-(-)-Amlodipine nicotinate에 대하여 선천성 고혈압쥐에서의 항고혈압작용을 측정한 결과, 이들 물질의 혈압강하 양상은 각 농도에서의 최대 혈압강하효과를 비교할 때, 광학활성 S-(-)-Amlodipine nicotinate 1 mg/kg 농도 (p<0.05 vs. Amlodipine nicotinate)에서 Amlodipine nicotinate 보다 1.22배 우수한 약효를 확인할 수 있었다. 한편, 항고혈압작용에 대한 ED₂₀ 수치를 비교해 볼때, 광학활성 S-(-)-Amlodipine nicotinate가 Amlodipine nicotinate에 비해 1.15배 강한 것으로 나타났다.

도 1 은 실시예 2에서 제조된 S-(-)-암로디핀 니코티네이트의 XRD 차트,

도 2 는 실시예 2에서 제조된 S-(-)-암로디핀 니코티네이트의 XRD 패턴의 피크 리스트 데이터이며,

도 3은 선천성 고혈압 쥐에서 수축기 혈압에서의 암로디핀 니코티네이트의 효과를 나타낸 그래프이며,

도 4는 선천성 고혈압 쥐에서 수축기 혈압에서의 광학활성 S-(-)-암로디핀 니코티네이트의 효과를 나타낸 그래프이며,

도 5는 선천성 고혈압 쥐에서의 수축기 혈압의 최고 변화에 대한 암로디핀 니코티네이트와 광학활성 S-(-)-암로디핀 니코티네이트의 용량-반응곡선을 나타낸 그래프이다.

Claims

다음의 XRD 패턴을 가지는 에스-(-)-암로디핀 니코티네이트 결정성 2수화물.

2-Theta Intensity ratio count %

8.87024 49.5

12.40769 50.5

13.25102 100.0

14.65376 25.7

17.44421 26.1

19.73034 28.1

20.34481 27.2

21.99343 46.5

22.48365 51.7

24.65381 34.1

26.70359 38.0

28.63978 19.6
삭제
삭제
삭제
삭제