KR100491102B1 - 아이리스의 조직배양방법 - Google Patents

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Abstract

본원발명은 아이리스의 조직배양방법에 관한 것으로, 아이리스의 조직을 본원발명에서 제조된 초대배양배지에 치상하여 캘루스를 유기하고, 유기되어 증식된 캘루스를 증식배지에 치상하여 신초를 재분화시키는 것 또는 본원발명에서 제조된 배지에 아이리스의 측아를 치상하여 신초를 재분화 하는 것을 특징으로 하는 본원발명의 아이리스 조직배양방법은 아이리스를 짧은 시간에 대량으로 생산할 수 있는 뛰어난 효과를 제공한다.

Description

아이리스의 조직배양방법{Tissue culture method of Iris sp.}
본 발명은 아이리스(Iris sp)의 조직배양방법에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 소독된 아이리스의 조직을 초대배양배지에 치상하여 캘루스를 유기하고, 유기된 캘루스를 증식한 후 증식배지에 치상하여 신초를 재분화시키는 것 또는 아이리스의 측아를 상기 초대배양배지와 동일한 조성 및 pH를 가지는 배지에 치상하여 신초를 재분화시키는 것을 특징으로 하는 아이리스의 조직배양방법에 관한 것이다.
아이리스(Iris sp)는 우리말로는 붓꽃, 계손(溪蓀), 수창포, 창포붓꽃이라고 한다. 외떡잎식물 백합목 붓꽃과의 여러해살이풀로서 한국, 일본, 중국 북동부, 시베리아 동부에 분포하고, 산기슭의 건조한 곳이 자생지이며, 높이는 60cm 내외이다. 뿌리줄기가 옆으로 자라면서 새싹이 나와 뭉쳐나며, 밑부분에 붉은빛을 띤 갈색 섬유가 있다. 잎은 나비 5∼10mm이고 도드라진 맥이 없으며 밑부분은 잎집처럼 되고 붉은빛이 도는 것도 있다.
꽃은 5∼6월에 피고 자줏빛이며 지름 8cm 정도로 꽃줄기 끝에 2∼3개씩 달린다. 포는 잎처럼 생기고 녹색이며 작은포가 포보다 긴 것도 있다. 작은꽃자루는 작은포보다 짧고 씨방보다 길다. 외화피는 넓은 달걀을 거꾸로 새운 듯한 모양이며 밑부분에 옆으로 달린 자줏빛 맥이 있고 내화피는 곧게 선다.
열매는 삭과로서 대가 있고 양 끝이 뾰족한 원기둥 모양이다. 종자는 갈색이고 삭과 끝이 터지면서 나온다. 민간에서 뿌리줄기를 피부병·인후염 등에 쓴다.
번식은 9월 하순~10월상순경 새싹을 2-3개 붙여 나누는 포기나누기에 의해 수행되며, 흙위로 뿌리가 1/3정도 드러나게 심는다. 비료는 봄,가을로 퇴비나 부엽토를 주고 토양은 물빠짐이 좋은 사질양토로 약알카리성이 되게 하여 사용하며, 직사광선 또는 밝은 빛이 들게 하여 재배한다.
그러나 상기와 같은 번식법으로는 대량생산에 한계가 있어, 그 대안으로 조직배양에 의한 대량생산 방법을 고려할 수 있는데 이와 관한 종래의 연구는 미미하다.
이에 본 발명자들은 아이리스에 대한 대량생산방법의 일환으로 아이리스의 조직배양방법을 개발하고자 예의 노력하였으며, 그 결과, 하이포넥스(20-20-20) 3.0 mg/L, 펩톤 2.0 mg/L, 아데네 설페이트 80.0 mg/L, NAA 1.0 mg/L, BA 1.0 mg/L, 수크로오스 40,000 mg/L, 아가 8,000 mg/L로 제조된 배지를 이용하여 아이리스의 조직배양방법을 확립함으로써 본원발명을 완성하였다.
따라서, 본 발명의 목적은 아이리스의 대량증식을 위한 조직배양방법을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 아이리스의 조직을 하이포넥스(20-20-20) 3.0 mg/L, 펩톤 2.0 mg/L, 아데네 설페이트 80.0 mg/L, NAA 1.0 mg/L, BA 1.0 mg/L, 수크로오스 40,000 mg/L, 아가 8,000 mg/L로 제조된 초대 배양배지에 치상하여 캘루스를 유기하고 초대 배양배지와 같은 조성의 증식배지로 옮겨 치상하여 신초를 재분화하는 것을 특징으로 하는 아이리스의 조직배양방법 및 하이포넥스(20-20-20) 3.0 mg/L, 펩톤 2.0 mg/L, 아데네 설페이트 80.0 mg/L, NAA 1.0 mg/L, BA 1.0 mg/L, 수크로오스 40,000 mg/L, 아가 8,000 mg/L로 제조된 배지에 아이리스의 측아를 치상하여 싹을 틔우고, 같은 배지에 옮겨 치상함으로써 신초를 재분화하는 것을 특징으로 하는 아이리스의 조직배양방법을 제공한다.
이하, 본 발명에 대해 더욱 상세히 설명한다.
본원발명은 본원발명에서 제조된 초대배양배지에서 캘루스를 유기하고, 유기되어 증식된 캘루스를 증식배지에 치상하여 신초를 재분화시키는 것 또는 본원발명에서 제조된 배지에 아이리스의 측아를 치상하여 신초를 재분화 하는 것에 특징이 있는 아이리스의 조직배양방법이다. 따라서, 배지를 제외한 전반적인 조직배양방법은 공지의 방법에 의하여 수행한다.
캘루스를 유기할 때는 아이리스에 있어, 캘루스 유기가 가능한 조직이라면 어느 부위를 사용하도 무방하나, 바람직스럽게 아이리스의 화경을 채취하여 사용하는 것이 좋고, 종래의 방법으로 NaOCl에 Tween20을 첨가하여 소독한 후 사용하는 것이 좋으며, 소독된 화경은 멸균수에 헹구어 사용하는 것이 좋다.
상기와 같이 멸균수에 헹구어진 조직은 바람직스럽게 pH가 5.6으로 조정된 아이리스 초대 배양배지에 치상하는 것이 좋고, 치상한지 약 6 주 후에 캘루스가 유기된다. 한편, 상기 아이리스 초대배양배지는 하이포넥스(20-20-20) 3.0 mg/L, 펩톤 2.0 mg/L, 아데네 설페이트 80.0 mg/L, NAA 1.0 mg/L, BA 1.0 mg/L, 수크로오스 40,000 mg/L, 아가 8,000 mg/L로 제조된 것을 사용한다.
유기된 캘루스를 충분히 증식한 후, 증식배지 옮겨 치상하면 6~7주 후에 신초가 재분화된다. 증식배지는 초대 배양배지와 같은 것을 사용한다.
또한, 본 발명은 아이리스의 측아를 채취하여 상기의 초대 배양배지와 같은 조성 및 같은 pH의 배지에 치상하여 신초를 재분화시킨다. 상기 측아는 바람직스럽게 관행적인 방법으로 NaOCl에 Tween20을 첨가하여 소독하는 것이 좋다.
치상한지 4주 후에 싹이 트고, 이를 같은 배지에 옮겨 치상하면 6~7주 후에 신초가 재분화된다.
상기 캘루스로부터 재분화된 아이리스 신초 또는 측아로부터 재분화된 아이리스 신초는 45일 간격으로 계대배양을 하여 대량증식을 하는 것이 좋다.
이하, 본 발명의 구성에 대해 하기 실시예를 들어 더욱 상세히 설명하지만, 본 발명의 권리범위가 하기 실시예에만 한정되는 것은 아니다.
실시예 1: 아이리스로부터 캘루스의 유기 및 신초의 재분화
아이리스(I. germanica)의 화경을 채취하여 당업계의 통상적인 방법으로 NaOCl에 Tween20을 첨가하여 소독하였다. 소독된 화경을 멸균수에 헹구어 pH 5.6으로 조정된 아이리스 초대 배양배지에 치상하였다. 아이리스 초대 배양배지는 하이포넥스(20-20-20) 3.0 mg/L, 펩톤 2.0 mg/L, 아데네 설페이트 80.0 mg/L, NAA 1.0 mg/L, BA 1.0 mg/L, 수크로오스 40,000 mg/L, 아가 8,000 mg/L를 혼합한 것으로 1 L를 사용하였다.
6주 후에 캘루스가 유기되었으며, 유기된 캘루스를 충분히 증식한 후, 증식배지에 치상하였다(도 1). 증식배지는 상기 초대 배양배지와 동일한 것이었다. 6주 후에 신초가 재분화되었다(도 2).
재분화된 신초를 45일 간격으로 계대배양하여 아이리스를 대량생산하였다.
실시예 2: 아이리스의 측아로부터 신초의 재분화
실시예 1과 같은 방법으로 소독작업을 거친 아이리스 측아를 실시예 1에서 사용한 초대 배양배지와 같은 pH 및 조성을 가지는 배지에 치상하였다. 치상한지 4주 후 싹이 트였고, 이를 같은 배지에 옮겨 치상하였는데 6주 후에 신초가 재분화 되었다. 재분화된 신초를 45일 간격으로 계대배양하여 아이리스를 대량생산하였다.
이상, 상기에서 살펴본 바와 같이 본원발명에서 제조된 초대배양배지에서 캘루스를 유기하고, 유기되어 증식된 캘루스를 증식배지에 치상하여 신초를 재분화시키는 것 또는 본원발명에서 제조된 배지에 아이리스의 측아를 치상하여 신초를 재분화 하는 것을 특징으로 하는 본원발명의 아이리스 조직배양방법은 아이리스을 짧은 시간에 대량으로 생산할 수 있으므로 화훼산업상 매우 유용한 것이다.
도 1은 조직배양에 의한 아이리스의 캘루스 증식 사진도이다.
도 2는 조직배양에 의한 아이리스의 식물체 분화 증식 사진도이다.

Claims (5)

  1. 아이리스의 화경조직을 하이포넥스(20-20-20) 3.0 mg/L, 펩톤 2.0 mg/L, 아데네 설페이트 80.0 mg/L, NAA 1.0 mg/L, BA 1.0 mg/L, 수크로오스 40,000 mg/L, 아가 8,000 mg/L로 제조된 초대 배양배지에 치상하여 캘루스를 유기하고 초대 배양배지와 같은 조성의 증식배지로 옮겨 치상하여 신초를 재분화하는 것을 특징으로 하는 아이리스의 조직배양방법.
  2. 삭제
  3. 하이포넥스(20-20-20) 3.0 mg/L, 펩톤 2.0 mg/L, 아데네 설페이트 80.0 mg/L, NAA 1.0 mg/L, BA 1.0 mg/L, 수크로오스 40,000 mg/L, 아가 8,000 mg/L로 제조된 배지에 아이리스의 측아를 치상하여 싹을 틔우고, 같은 배지에 옮겨 치상함으로써 신초를 재분화하는 것을 특징으로 하는 아이리스의 조직배양방법.
  4. 제 1항 또는 제 3항에 있어서, 상기 배지는 pH가 5.6임을 특징으로 하는 아이리스의 조직배양방법.
  5. 제 1항 또는 제 3항에 있어서, 재분화된 신초는 45일 간격으로 계대배양하는 것을 추가로 포함하는 것을 특징으로 하는 아이리스의 조직배양방법.
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