KR100482694B1 - Liposome base for trichogenousness, Cosmetic composition for trichogenousness containing the same, and Method for improving absorptance of natural ingredients for trichogenousness using the same - Google Patents
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Abstract
본 발명은 생약 추출물을 봉입한 발모 촉진용 리포좀 베이스, 그를 포함한 화장료 조성물 및 그를 이용한 발모 촉진용 생약 성분의 흡수율 향상 방법에 관한 것으로서, 상기 생약 추출물은 백자인, 상표초, 사상자, 하수오, 닥나무, 상백피, 감초, 구기자 및 율무 추출물 중 하나 이상을 함유하는 것을 특징으로 한다. 본 발명은 발모 촉진용 화장료 조성물이 생약 추출물이 유효성분으로 봉입된 리포좀 베이스를 함유함으로써 활성 성분이 모낭에 효과적으로 전달되어 생약 성분의 탈모 예방 및 발모 촉진 효과를 향상시키는 효과가 있다.The present invention relates to a hair growth promoting liposome base encapsulated with a herbal extract, a cosmetic composition comprising the same, and a method for improving the absorption rate of the herbal ingredient for promoting hair growth using the same, wherein the herbal extract is white porcelain, trademark herb, filamentous, sessau, white, and white skin It is characterized by containing one or more of licorice, wolfberry and yulmu extract. According to the present invention, the cosmetic composition for promoting hair growth contains the liposome base in which the herbal extract is enclosed as an active ingredient, thereby effectively delivering the active ingredient to the hair follicle, thereby improving the hair loss prevention and hair growth promoting effect of the herbal ingredient.
Description
본 발명은 발모 촉진 효과가 확인된 9종의 식물, 즉 백자인(Thujae orientalis), 상표초(Mantidid ootheca), 사상자(Torilis Fructus), 하수오(Polygonium multiflorum), 닥나무(Broussonti kasinoki sieb), 상백피(Mulberry root bark), 감초(Glycyrrhiza), 구기자(Lycium fructus) 및 율무(Coix seed) 추출물 중 하나 이상을 함유하는 발모 촉진용 리포좀 조성물에 관한 것이다. 더욱 상세하게는, 본 발명은 발모 효과가 있는 것으로 알려진 것과 새롭게 확인된 상기 추출물이 탈모를 유발하는 활성 남성호르몬인 디하이드로테스토스테론의 생성을 촉진하는 5알파-환원효소를 저해하는 효과와 모낭의 모유두세포의 증식을 촉진하는 효과가 있음을 밝히고, 이러한 추출물을 함유하도록 레시틴으로 리포좀 제제를 제조함으로써 활성 성분이 모낭으로 효율적으로 전달되게 함으로써 효과적으로 탈모를 예방하고 발모를 촉진하는 효과가 있는 리포좀 조성물에 관한 것이다.In the present invention, nine kinds of plants that have been found to have a hair growth promoting effect, that is, white (Thujae orientalis), trademark (Mantidid ootheca), tortoise (Torilis Fructus), sewage (Polygonium multiflorum), mulberry (Broussonti kasinoki sieb), Mulberry (Mulberry) It relates to a liposome composition for promoting hair growth containing at least one of root bark), Glycyrrhiza, Lycium fructus and Coix seed extract. More specifically, the present invention is known to have a hair growth effect and the newly identified extract extracts the effect of inhibiting the 5-alpha-reductase, which promotes the production of the active male hormone dihydrotestosterone, which causes hair loss, and the nipple of hair follicles. The present invention relates to a liposome composition having the effect of effectively preventing hair loss and promoting hair growth by preparing liposome preparations with lecithin to contain such extracts, thereby efficiently delivering active ingredients to hair follicles. will be.
백자인(Thujae orientalis)은 측백나무(Thuja orientalis)의 종자로 난원형~긴 타원형이거나 또는 긴 원주형이고 길이 3~5㎜, 지름 2~3㎜이다. 바깥 면은 엷은 황색~황백색이고, 오래된 것은 점차 변하여 황갈색이 되며 기름이 스며 나온다. 종자의 바깥 면은 흔히 얇은 막질의 내종피로 싸여있고, 끝은 대개 뾰족하며, 원삼능형으로 진한 갈색의 점이 있다. 아래쪽은 둔한 원형으로 색이 엷다. 이 약의 횡단면을 현미경으로 살펴보면 백색~황백색이고 배유가 많으며 풍부한 지방질이 함유되어 있다(대한약전외 한약 규격집). 달고 평하며 독이 없고 향기롭다. 작용은 정신을 편안하게 하며 피를 돕고 땀을 멎게 한다. 간장과 신장을 윤택하게 하며, 허리가 무겁고 아픈 것을 치료한다. 백자인은 양심안신(養心安神), 윤장통편(潤腸通便)의 효능이 있다(동양학 개론).A baekjain (Thujae orientalis) is platycladus oval or oblong-in seeds (Thuja orientalis) or long circumferential length and 3 ~ 5㎜, diameter 2 ~ 3㎜. The outer surface is pale yellow to yellowish white, and the old one gradually changes to become yellowish brown, and oil leaks out. The outer surface of the seed is often enclosed by a thin membranous inner epithelium, the tip is usually pointed, and the round triad has dark brown spots. The lower part is a dull round and light in color. Microscopic examination of the cross-section of this drug is white to yellowish white, rich in endosperm, and rich in fat. Sweet, flat, nonpoisonous, and fragrant. The action relaxes the mind, helps the blood and stops sweating. The liver and kidneys are moisturized and the lower back is healed and healed. Baekjain has the efficacy of conscience of the god Anyang (안 心 安神) and Yun Jang Tongpyeon (潤腸 通便).
상표초(Mantidid ootheca)는 당랑소, 단표초라기도 하며, 사마귀과 (Mantidae)의 알이 들어 있는 벌레집을 찐 것이다. 이 생약은 원주형~반원형으로 여러 개의 막으로 된 엷은 층이 쌓여 배열되어 있고, 길이 24~45㎜, 너비 2~3㎝, 두께 15~20㎜이다. 바깥 면은 엷은 갈색~황갈색이고, 위쪽 면은 약간 융기되어 있으며, 아래면은 평탄하거나 식물의 줄기에 붙었던 자국이 있다. 성질은 달고 짜며 평하고 독이 없다. 양위 유정, 조설, 유노실금, 월경 폐지증에 사용한다.(대한약전외 한약 규격집, 동약학 개론;서경 출판사).Brand seconds (Mantidid ootheca) is dangrang cattle, danpyo humble prayer, it steamed home insects that contain eggs mantidae (Mantidae). This herb is columnar to semicircular, with thin layers of several membranes arranged, stacked 24 to 45 mm long, 2 to 3 cm wide, and 15 to 20 mm thick. The outer side is pale brown to yellowish brown, the upper side is slightly raised, and the lower side is flat or has marks on the stem of the plant. The nature is sweet, salty, flat and nonpoisonous. It is used for elder oil well, establishment, uno incontinence, and abolition of menstruation.
사상자(Torilis Fructus)는 미나리과(Torilis japonica Decanodolle)의 과실로 타원형의 상현과로서 각 분과는 편평하고 길이 2~4㎜, 지름 1㎜이다. 분과의 바깥 면은 회황색~회갈색으로 끝부분에 작은 돌기가 있고, 밑부분에는 가는 과병이 붙어있다. 등쪽면은 3개의 늑선이 있고 봉합 면은 평탄하나 2개의 갈색 늑선이 있다. 사상자는 향기가 있고 맛은 조금 맵고 혀를 자극한다(대한약전외 한약 규격집). 남자의 음위. 습양, 부인음종, 관절통, 자궁냉증 등에 쓴다(동양학 개론). Torilis Fructus is a fruit of the genus Torilis japonica Decanodolle, which is an elliptical standing genus that is flat with 2-4 mm in length and 1 mm in diameter. The outer surface of the branch is grayish yellow to gray brown with a small projection at the end and a thin fruit bottle at the bottom. The dorsal side has three solid lines and the suture surface is flat but there are two brown lines. Casualties are fragrant, taste is a little spicy and irritate the tongue. Man's genitals. It is used for weeping, gynecological, arthralgia, and hypothermia (introduction to oriental science).
한방에서 가리키는 하수오(Polygonium multiflorum)는 하수오(Polygonum multiflorum Thunb.)의 덩이 뿌리이다. 추출물의 주된 작용은 동물의 장관운동을 촉진한다. 이외에도 피로한 심장에 강심작이 있으며, 혈청 콜레스테롤 증가를 억제하고, 시험관 시험에서 결핵간균 억제 활성 및 심근허혈 손상에 대한 용량의존적인 개선 효과가 있다. Polygonium multiflorum ( Polygonium multiflorum ) is the root of the tuber of Polygonum multiflorum Thunb. The main action of the extract promotes the intestinal motility of the animal. In addition, there is a strong heart attack on the tired heart, inhibits serum cholesterol increase, and in vitro tests have a dose-dependent improvement in mycobacterium tuberculosis inhibitory activity and myocardial ischemic injury.
닥나무(Broussonti kasinoki sieb)는 주로 사포닌과 지방 오일(fatty oil), 세로틴 등이 많이 함유되어 있으며, 제지. 옷을 만들기 위한 섬유로 많이 사용되었으며, 거습(祛濕), 이뇨, 활혈(活血)의 효능. 류머티즘에 의한 비통(痺痛), 타박상, 허종(虛腫)(부종냉증(浮腫冷症)), 피부염, 서경임파선염(鼠徑淋巴腺炎)을 치료하는데 이용된다. Paper mulberry ( Broussonti kasinoki sieb ) mainly contains saponin, fatty oil, serotonin , and paper. It is used as a fiber for making clothes, and it has the effect of moistening, diuresis, and blood circulation. It is used for the treatment of rheumatism, pain, bruises, swelling (cold edema), dermatitis, and circumferential lymphadenitis.
상백피(Mulberry root bark)는 뽕나무 또는 그 밖의 동속식물의 뿌리 껍질로, 관상, 반관상 또는 띠모양의 껍질 조각이며 두께는 0.1~0.6cm이고, 바깥면은 흰색~등황색을 띠고 때로 흰색 명주실 모양의 섬유가 다수 노출되어 있다. 보통 혈압강하성 플라보노이드가 주류를 이루고 있으며, 혈당강화 기능도 있는 것으로 알려져 있다.(Taro Nomura et al, Planta Med ,1, 127(1984))Mulberry root bark is the root bark of mulberry or other cognate plants, tubular, semi-tubular, or banded bark, 0.1-0.6 cm thick, white-orange, and sometimes white silk-like. Many of the fibers are exposed. Usually, hypotensive flavonoids are the mainstream, and it is known to have a blood glucose enhancing function (Taro Nomura et al, Planta Med, 1, 127 (1984)).
감초(Glycyrrhiza)는 글리시리자 글라브라 엘.(Glycirrhiza glabra L.), 글리시리자 우랄렌시스 피셔(G. uralensis Fisher) 또는 동속식물의 뿌리와 주출경을 그대로(피부감초) 또는 껍질을 벗긴(거피 감초) 것이다. 추출물에는 항궤양 작용 부신피질의 수전해질 호르몬양 작용과 항염증 작용, 에스트로겐 호른몬양 작용, 해독작용, 고지혈증, 인터페론 유기작용 등이 있다.(생약학교재편찬회, 생약학, 개정3판(2002), 동명사)Licorice (Glycyrrhiza) is the same as Glycirrhiza glabra L., G. uralensis Fisher, or the same vegetation roots or gourds (skin licorice) or peeled. (Peel licorice) would. Extracts include hormonal and anti-inflammatory effects of anti-ulcerative adrenal cortex, hormonal and anti-inflammatory effects, estrogen-hormone action, detoxification, hyperlipidemia, and interferon organic activity. )
구기자(Lycium fructus)는 구기자 나무(Lycium chinese Miller)의 열매이며, 과실의 씨를 제거하여 음건한 것을 사용한다. 구기자의 물 엑스는 뚜렷한 혈압하강을 나타내고, 지질의 증가를 억제하며, 항지간성 및 간기능 보호작용이 추정된다. 최근에는 면역기능의 촉진 및 조절작용을 비롯하여 항노화작용, 항동맥경화작용, 여성호르몬양 작용, 항악성 종양작용, 조혈기능 촉진작용이 알려져 있다.(육창수, 정남일, 임효종, 현대방약합편, 381(1999), 계축문화사) Lycium fructus is the fruit of the Lycium chinese Miller and removes fruit seeds and uses the shade. The water extract of goji berries shows a marked drop in blood pressure, inhibits the increase of lipids, and anti-interstitial and hepatic function protection. Recently, anti-aging, anti-arteriosclerosis, female hormone-positive action, anti-malignant tumor function, and hematopoietic function-promoting action are known, including promoting and regulating immune function. (1999), Culture and Culture History)
율무(Coix seed)는 율무(Coix lachryma-jobi L. var. ma-yuen Stapf)의 종피를 제거한 씨이며, 코이제놀리드(coixenolide)의 항종양작용과 코익스 세멘 페이스트(Coix semen paste)의 이상각질증식에 의 한 사마귀 제거 효과 등이 알려져 있고, 기타 성분에 의한 진통, 진정, 진경, 해열 및 살충작용이 있는 것으로 알려져 있다.(생약학교재편찬회, 생약학, 개정3판(2002), 동명사)Coix seed is a seed removed from the seed of Coix lachryma-jobi L. var. Ma-yuen Stapf, which is characterized by the antitumor activity of coixenolide and the coix semen paste. It is known to have wart elimination effect due to abnormal keratin proliferation, and it is known to have analgesic, sedation, cough, antipyretic and insecticidal action by other ingredients.
남성의 형질발현에 있어서, 남성 성충동, 골격근 증가, 남성 외부 생식기 발달, 음낭성장, 정자형성 등은 테스토스테론이 관여하고 여드름, 피지증가, 탈모 및 전립선비대증 등은 디하이드로테스토스테론이 해당 조직에서 관여하는 것으로 알려져 있다(J. Invest. Dermatol. 1995; 105(2): 209-14). 남성 호르몬 의존성 질환 중 남성형 탈모는 미용을 중시하는 현대사회의 남성들에게 심각한 정신적 고통을 주고 있기 때문에, 탈모의 기전을 밝혀 이를 개선하기 위한 연구가 활발히 진행되고 있다.In male expression, male impulse, skeletal muscle increase, male external genital development, scrotum growth, and spermatogenesis are involved in testosterone, and acne, sebum increase, hair loss and prostatic hyperplasia are related to dehydrotestosterone in the tissues. Known ( J. Invest. Dermatol . 1995; 105 (2): 209-14). Among male hormone-dependent diseases, male-type hair loss causes serious mental pain for men in the modern society, which focuses on beauty.
5알파-환원효소(5α-reductase)는 피지선, 모낭, 전립선 또는 부고환 등 남성 호르몬 반응성 조직에 존재하며 정소에서 생합성되는 남성 호르몬인 테스토스테론(testosterone)을 활성 남성 호르몬인 디하이드로테스토스테론 (dihydrotestosterone, DHT)으로 전환시키는 데 관여하는 환원효소인데, 이 전환과정에는 NADPH가 조효소로서 이용되는 것으로 알려져 있다. 사춘기 이후 과량 분비된 디하이드로테스토스테론은 피지세포(sebocyte)에서 피지를 과잉 생성하는 주 원인 물질로 작용하여 여드름 및 남성형 탈모를 유발한다. 특히, 여러 모낭 세포에서도 테스토스테론에 비하여 디하이드로테스토스테론이 호르몬 수용체에 더욱 잘 결합하기 때문에 탈모를 일으키는 원인을 제공한다. 이 때문에, 디하이드로테스토스테론의 생성을 촉진하는 5알파-환원효소의 활성 및 생성을 억제하는 물질을 개발하여 발모제 또는 탈모방지제로 이용하기 위한 연구들이 활발히 진행되고 있다.5alpha-reductase is present in testosterone, a testosterone biosynthesis in testes, present in testosterone-reactive tissues such as sebaceous glands, hair follicles, prostate, or epididymis, and dihydrotestosterone (DHT), an active testosterone. It is known to be a reductase involved in the conversion of NADPH as a coenzyme. Excessive secretion of dihydrotestosterone after puberty acts as a major causative agent in the production of sebum in sebocytes, causing acne and male hair loss. In particular, many hair follicle cells provide a cause for hair loss because dihydrotestosterone binds to hormone receptors better than testosterone. For this reason, studies are being actively conducted to develop a substance that inhibits the activity and production of 5-alpha-reductase, which promotes the production of dihydrotestosterone, and to use it as a hair regrowth or hair loss prevention agent.
남성형 탈모의 치료를 위해 종래에는 에스트로겐 등의 여성 호르몬을 이용해왔으나, 여성 호르몬제 등은 그 효과에 비하여 피부 염증 발생, 호르몬 투여에 따른 부작용 발생 등의 보고가 있어 현재는 사용을 중단하거나 아주 극미량을 사용하고 있는 실정이다. 최근, 미국의 머크사에서 5알파-환원효소의 작용을 저해하여 디하이드로테스토스테론의 생성을 억제하는 약제인 피나스테라이드(finasteride, proscar)를 합성하여 이를 경구투여용 발모제로 시판하고 있으나, 고가이고 두피 도포용으로 제조하여 직접 도포하는 경우 효과가 떨어지며 경구투여에 따른 기타 부작용이 발생하는 등 사용에 제한이 있는 실정이다.Conventionally, female hormones such as estrogen have been used for the treatment of androgenetic alopecia, but female hormones have been reported to cause skin inflammation and side effects due to hormone administration. I'm using it. Recently, Merck in the United States has synthesized finasteride (finasteride, proscar), a drug that inhibits the action of 5 alpha-reductase and inhibits the production of dihydrotestosterone, and is commercially available as an oral administration hair regrowth, but is expensive and applied to the scalp If manufactured for direct application and the effect is ineffective and other side effects of oral administration occurs, there is a limit to use.
보통 모낭을 구성하는 모유두세포는 모발주기를 조절하는 중심 위치에서 이와 관련된 여러 신호전달체계의 매개자 역할을 담당하고 표피 세포의 증식을 조절하는 기능을 특별하게 가지고 있다. 또한, 모낭에서의 모유두의 크기 즉, 모유두 세포의 수에 비례하여 모발의 두께가 결정되고, 섬모와 직모의 구분을 할 수 있는 중요한 기준이 된다. 따라서, 모낭세포 중에서 외모근초세포(Outer Root Sheath Cell) 및 모유두세포(Dermal Papillae Cell)의 증식을 촉진하는 발모제 등이 개발되고 있다(J Dermatol Sci 1994 Jul;7 Suppl:S55-72). Normally, the dermal papilla cells that form hair follicles play a role as mediators of several signaling systems in the central position that regulates the hair cycle and have special functions to control epidermal cell proliferation. In addition, the thickness of the hair is determined in proportion to the size of the dermal papilla in the hair follicle, that is, the number of dermal papilla cells, and is an important criterion for distinguishing the cilia and the straight hair. Therefore, hair growth agents for promoting proliferation of outer root sheath cells and dermal papillae cells among hair follicle cells have been developed (J Dermatol Sci 1994 Jul; 7 Suppl: S55-72).
피부를 통한 흡수경로는 각질층을 통한 흡수, 모낭과 피지선을 통한 흡수, 에크린한선을 통한 흡수 등의 3 가지 경로가 있다. 현재까지 알려진 바로는 이 중 각질층을 통한 흡수가 가장 중요한 흡수 경로이며, 각질층은 각질세포 간격이 비극성 지질들로 이루어져 있기 때문에 극성 물질은 거의 흡수가 되지 않고 친유성 (Lipophilic) 물질은 흡수가 될 수가 있다. 극성 물질의 경우 세포질이나 간극 (Interstices)내의 단백질 부분과 수소결합 등의 방법으로 결합이 되어 피부를 통해 흡수되지 못한다. 반면, 비극성 물질은 주로 세포 간격에 용해된 상태로 존재하여 피부장벽을 통과하기도 한다. 그러나, 각질층을 통과하여도 각질층 하부에서의 용해도가 적고 여러 가지 대사를 일으키는 효소들과 각질세포의 탈락 등의 기전에 의해서 전신으로 흡수되는 것을 막게 된다. 이러한 원리로 각질층은 수많은 외부의 극성 물질로부터 인체를 보호하지만 비극성을 띠는 독성물은 각질층내로 흡수가 될 수도 있다. 경피 흡수의 가장 큰 장벽은 전술한 바와 같은 각질층내의 각질세포와 이들 사이의 각질 세포간 지질이다. 대부분의 유효 성분은 피부 각질층의 저항성 때문에 경피 투과율이 낮아지므로 이를 극복하고 유효성분의 투과를 촉진시킬 수 있는 다양한 방법이 필요하다. 에탄올, 프로필렌글리콜, 계면활성제, 지방산류 등과 친지성 물질의 혼합은 필요한 속도와 유효 농도로 성분을 경피 전달하는 매우 효과적인 방법이다. 또한 유효 성분을 레시틴이나 피부 세포간 지질 성분 등으로 만든 리포좀 사용은 훨씬 더 효과적인 경피 흡수 방법이다(공개특허 특2001-0083712).There are three pathways through the skin: absorption through the stratum corneum, absorption through the hair follicle and sebaceous glands, and absorption through the eccrine gland. As far as is known, absorption through the stratum corneum is the most important absorption pathway. Since the stratum corneum is composed of nonpolar lipids in the stratum corneum, the polar substance is hardly absorbed and the lipophilic substance can be absorbed. have. In the case of a polar substance, it is combined with a protein part in the cytoplasm or interstices by a hydrogen bonding method and is not absorbed through the skin. Nonpolar substances, on the other hand, are primarily dissolved in the cell gap and sometimes cross the skin barrier. However, even through the stratum corneum, the solubility in the lower stratum corneum is less, it is prevented from being absorbed systemically by mechanisms such as enzymes that cause various metabolism and the exfoliation of keratinocytes. On this principle, the stratum corneum protects the body from numerous external polar substances, but nonpolar poisons can be absorbed into the stratum corneum. The greatest barrier to transdermal absorption is keratinocytes in the stratum corneum as described above and keratinocyte lipids therebetween. Since most of the active ingredients have a low percutaneous permeability due to the resistance of the stratum corneum, various methods are needed to overcome them and promote permeation of the active ingredients. The mixing of lipophilic substances with ethanol, propylene glycol, surfactants, fatty acids, etc. is a very effective method of transdermal delivery of components at the required speed and effective concentration. In addition, the use of liposomes made of lecithin or intercellular lipid components of the active ingredient is a much more effective method of transdermal absorption (Patent No. 2001-0083712).
피부에서의 약물의 투과의 한 수단으로 70년대부터 부각되기 시작한 것은 리포좀 제제이며, 코티코스테로이드(corticosteroid)와 베타메타손(betamethasone)의 경우 일반 에멀젼 제형에 비해 피부 투과가 효과적으로 이루어지는 것을 관찰하였다(Crit Rev Ther Drug Carrier Syst 1994;11(2-3):97-118). 이러한 연구결과로부터 모낭(hair follicle)으로의 효과적인 약물전달 체계가 여러 연구 그룹에 의해서 진행되었으며, 실제로 모낭에 유전자와 단백질과 육안으로 구분이 가능한 형광염료를 리포좀으로 포집하여 전달시킨 연구가 진행되었다(J Drug Target. 1998;5(2):67-74). 한 예로 멜라닌을 가지고 리포좀의 형태로 모낭으로 침투시켰을 때, 모낭내의 농도는 시간에 따라 증가하였으나 혈액 내에서는 전혀 검출되지 않았다는 보고가 있었다(J Dermatol Sci 1997; 14: 101-8). 또 다른 실험에서도 lacZ 유전자를 리포좀에 싸서 쥐에 도포한 결과 모모세포(hair matrix cell)와 간세포(stem cell)가 모여 있는 것으로 알려진 벌지영역(bulge area)에만 선택적으로 발현되는 것을 관찰하였는데 진피와 표피의 다른 부위에서는 관찰되지 않았다(Nature Medicine 1995; 1: 705-6). 리포좀의 입자 크기는 60nm ~ 600nm로 이중에서 가장 작은 크기는 각질층에, 중간크기인 300nm의 크기가 모낭 깊이 가장 많이 축적됨을 보였다(Int J Pharm 1994; 103:277). 항안드로젠 수용체가 피지선에 많이 분포하며, 항안드로젠 제제는 경구복용시 제한적 효과와 전신 부작용을 나타낸다는 점을 고려할 때 항 안드로젠 제제를 리포좀 형태로 모피지 단위에 선택적으로 침투시키는 방안이 연구중이다(Int J Pharm 1995; 126: 235).Liposome preparations that began to emerge from the 70s as a means of penetration of drugs in the skin were observed, and corticosteroids and betamethasone were observed to be effective in skin permeation compared to general emulsion formulations (Crit Rev Ther). Drug Carrier Syst 1994; 11 (2-3): 97-118). From these results, an effective drug delivery system to hair follicles has been conducted by various research groups, and in fact, studies have been carried out to collect and deliver fluorescent dyes that can be distinguished by genes, proteins and the naked eye into hair follicles as liposomes. J Drug Target. 1998; 5 (2): 67-74). For example, when infiltrating hair follicles with melanin in the form of liposomes, the concentrations in the hair follicles increased with time but were not detected in the blood at all (J Dermatol Sci 1997; 14: 101-8). In another experiment, the lacZ gene was wrapped in liposomes and applied to rats, which showed selective expression only in the bulge area where hair matrix cells and stem cells are known. No other site was observed (Nature Medicine 1995; 1: 705-6). The particle size of liposomes was 60 nm to 600 nm, the smallest of which was accumulated in the stratum corneum, the largest size of 300 nm in the follicle depth (Int J Pharm 1994; 103: 277). Considering the fact that anti-androgen receptors are widely distributed in sebaceous glands and anti-androgen agents have limited effects and systemic side effects during oral administration, the infiltration of anti-androgen agents into liposomes in the form of liposomes is under study (Int J Pharm 1995; 126: 235.
이에, 본 발명자들은 시험관 실험방법으로 모낭세포 증식 촉진 효과와 5알파-환원효소 저해효과를 천연식물 추출물 9종을 대상으로 시험한 결과, 본 발명 천연추출물이 테스토스테론을 디하이드로테스토스테론으로 전환시켜 탈모를 유발하는 5알파-환원효소를 효과적으로 저해하며 모낭세포 증식을 촉진하는 유효물질을 다량 함유하고 있어 뛰어난 발모촉진효과가 있음을 확인하고 이러한 추출물을 함유하도록 리포좀 베이스를 제조하고 발모촉진용 피부외용제에 이용하는 것으로 본 발명을 완성하였다. Therefore, the present inventors tested 9 natural plant extracts for promoting hair follicle cell proliferation and 5 alpha-reductase inhibitory effects by in vitro test methods, and the natural extract of the present invention converts testosterone to dihydrotestosterone to reduce hair loss. It effectively inhibits the 5 alpha-reducing enzymes that induce and contains a large amount of active substances that promote hair follicle cell proliferation, so that it has an excellent hair growth promoting effect. The liposome base is prepared to contain such extracts and used for external skin preparations for hair growth promotion. The present invention has been completed.
따라서, 본 발명의 목적은 상기 9종 추출물이 발모를 촉진하는 유효성분을 가지고 있는 것을 확인하고, 이를 레시틴 등을 이용한 리포좀에 봉입하여 발모 촉진 유효성분의 흡수율이 향상된 발모 촉진용 피부 외용 치료 제제와 화장품 조성물을 제공하는 데에 있다. 또한, 상기 천연식물 추출물의 유효성분이 5알파-환원효소 억제효과와 모낭세포 증식 촉진 및 모발성장 촉진 효과가 있음을 밝히고, 이를 유효성분으로 함유함으로써 탈모를 예방하고 발모 또는 육모를 촉진하는 발모촉진용 리포좀 화장료 조성물을 제공하는 데 있다.Therefore, it is an object of the present invention to confirm that the nine kinds of extracts have an active ingredient for promoting hair growth, and encapsulated it in liposomes using lecithin and the like for the treatment of external skin treatment for promoting hair growth with improved absorption of the hair growth promoting active ingredient; It is to provide a cosmetic composition. In addition, it is revealed that the active ingredient of the natural plant extract has a 5 alpha-reductase inhibitory effect and promotes hair follicle cell growth and hair growth promoting effect, and by containing it as an active ingredient for preventing hair loss and promoting hair growth or hair growth. It is to provide a liposome cosmetic composition.
상기한 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 9종의 천연 생약에 유기용매를 혼합하여 가열추출한 후 감압농축함으로써, 특히 5알파-환원효소를 저해하고 모유두세포의 증식을 촉진하는 효과가 있는 유효 추출물을 획득하고, 이 추출물을 유효성분으로 함유하도록 레시틴으로 리포좀을 제조함으로써 탈모예방 및 발모촉진 효과가 뛰어난 발모촉진용 화장료 조성물인 점에 그 특징이 있다. In order to achieve the above object, the present invention is an effective extract having the effect of inhibiting the 5 alpha-reductase and promoting the growth of dermal papilla cells, especially by heating and extracting nine natural herbs mixed with organic solvents, followed by heat extraction. It is characterized by the fact that it is a hair growth promoting cosmetic composition excellent in preventing hair loss and promoting hair growth by preparing liposomes with lecithin to contain the extract as an active ingredient.
상기한 본 발명에 의한 조성물에서, 상기 천연 추출물은 리포좀 베이스 전체에 대하여 0.0001 내지 20중량%의 농도로 리포좀 베이스 내에 봉입된 것을 특징으로 하며, 이러한 생약이 봉입된 리포좀 베이스가 화장료 조성물 전체에 대하여 1 내지 30중량%의 농도로 함유된 것을 특징으로 한다.In the composition according to the present invention, the natural extract is characterized in that it is encapsulated in the liposome base at a concentration of 0.0001 to 20% by weight based on the entire liposome base, the crude drug-packed liposome base 1 It is characterized by containing at a concentration of 30% by weight.
이하, 본 발명의 구성을 상세히 설명한다. Hereinafter, the configuration of the present invention will be described in detail.
5알파-환원효소 저해효과 및 모낭세포 증식 촉진효과가 있어 탈모방지 및 발모촉진 효과가 있는 본 발명 9종의 천연 추출물은 다음의 단계들을 통해 리포좀에 봉입된 형태로 제조된다.The five natural extracts of the present invention having a 5-alpha-reductase inhibitory effect and a hair follicle cell growth promoting effect and thus preventing hair loss and promoting hair growth are prepared in a form encapsulated in liposomes through the following steps.
(1) 건조된 천연 생약에 유기용매를 생약 건조중량에 대하여 단독으로 2∼5배의 용량으로 첨가 혼합하는 단계;(1) adding and mixing the organic solvent to the dried natural herbal medicine in a capacity of 2 to 5 times alone based on the dry weight of the herbal medicine;
` (2) 냉각콘덴서가 장착된 추출기에서 상기 천연생약 -유기용매 혼합물을 가열하여 천연 생약 추출액을 제조하는 단계;(2) preparing a natural herbal extract by heating the natural herbal-organic solvent mixture in an extractor equipped with a cooling capacitor;
(3) 상기 천연 생약 추출액을 냉각콘덴서가 달린 감압 증발기에서 감압농축하고 완전히 건조시키는 단계;(3) concentrating the natural herbal extracts under reduced pressure in a reduced pressure evaporator with a cooling capacitor and completely drying the extract;
(4) 레시틴, 에탄올, 에스테르 오일, 프로필렌글리콜, 식물성 오일, 항산화제 및 계면활성제와 함께 상기 추출액을 교반하여 리포좀을 제조하는 단계를 포함하는 제조 방법에 따라 제조됨을 특징으로 한다. (4) characterized in that it is prepared according to the production method comprising the step of preparing a liposome by stirring the extract with lecithin, ethanol, ester oil, propylene glycol, vegetable oil, antioxidant and surfactant.
상기 9종의 백자인, 상표초, 사상자, 하수오, 닥나무, 상백피, 감초, 구기자, 율무는 생약제로 판매되고 있는 것을 사용할 수 있다. The nine kinds of white porcelain, trademarked herb, casualty, sewage, young mulberry, cedar, licorice, goji berry, and yulmu can be used as a herbal medicine.
상기 유기용매로는 탄소수 1∼4개의 무수 또는 함수 저급 알코올(alcohol), 헥산(hexane), 에틸에테르(ethylether) 또는 에틸아세테이트(ethylacetate) 등을 이용할 수 있다. 이 때, 상기 유기용매 중 한가지 용매만을 사용하여 단순 추출할 수 있으며, 상기 유기용매와 물을 사용하여 단계적으로 분획 추출할 수도 있다. As the organic solvent, anhydrous or hydrous lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms, hexane, hexane, ethyl ether or ethylacetate may be used. At this time, it can be extracted simply by using only one solvent of the organic solvent, it may be fractionally extracted using the organic solvent and water.
상기 (2)의 가열시 50∼100℃로 1∼10시간 동안 가열하는 것이 바람직하나, 이에 한정되는 것은 아니다. 또한, 상기와 같은 가열 추출 이외에도 천연생약을 상기 유기용매에 0∼40℃에서 1∼30일간 침적하여 유효성분을 추출할 수 있다. In the heating of (2), it is preferable to heat at 50 to 100 ° C. for 1 to 10 hours, but is not limited thereto. In addition to the above-described heat extraction, the natural herbal may be deposited in the organic solvent at 0 to 40 ° C. for 1 to 30 days to extract the active ingredient.
상기 (4)의 제조단계시 본 발명의 리포좀 조성물은 레시틴, 에탄올, 에스테르 오일, 프로필렌글리콜, 식물성 오일, 항산화제 및 계면활성제 등을 이용하여 안정화시킨 리포좀에 천연 생약 추출물을 봉입한 리포좀 화장료 조성물이다. 바람직하게는, 본 발명은 레시틴 2 내지 8중량%, 에탄올 10 내지 15중량%, 에스테르 오일 10 내지 30중량%, 프로필렌글리콜 5 내지 10중량% 및 정제수와 함께 천연생약 추출물을 첨가하여 제조된 리포좀 베이스로서, 조성물 전체 중량을 기준으로 하여, 리포좀 베이스를 1~30중량%의 농도로 두발 또는 피부에 적용할 수 있는 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 팩, 헤어토닉, 헤어로션, 샴푸 및 토닉 등의 제형에 첨가하여 사용할 수 있다.The liposome composition of the present invention at the preparation step (4) is a liposome cosmetic composition in which a natural herbal extract is encapsulated in a liposome stabilized using lecithin, ethanol, ester oil, propylene glycol, vegetable oil, antioxidant and surfactant. . Preferably, the present invention is a liposome base prepared by adding a natural herbal extract with 2 to 8% by weight of lecithin, 10 to 15% by weight of ethanol, 10 to 30% by weight of ester oil, 5 to 10% by weight of propylene glycol and purified water. For example, based on the total weight of the composition, liposome base can be applied to the hair or skin at a concentration of 1 to 30% by weight, softening lotion, nourishing cream, nutrition cream, massage cream, essence, pack, hair tonic, hair lotion It can be used in addition to formulations such as shampoos and tonics.
상기의 방법으로 제조한 발모 촉진 효과가 있는 생약 추출물은 랫트의 전립선에서 얻은 5알파-환원효소를 이용한 시험을 통하여 탁월한 5알파-환원효소 억제효과가 있는 것으로 나타났다. 또한, 모낭세포 증식 효과와 함께 마우스를 이용한 모발 생장 효과 시험에서도 유의적인 모발 생장 촉진효과가 있는 것으로 나타났다. The herbal extract prepared by the above method was found to have an excellent inhibitory effect of 5-alpha-reductase through a test using 5-alpha-reductase obtained from the prostate of rats. In addition, hair growth effect test using a mouse along with hair follicle proliferation effect was found to have a significant hair growth promoting effect.
이 때, 첨가하는 9종의 천연생약 추출물의 양은 리포좀 베이스 전체에 대하여 최종적으로 0.0001∼20중량%, 베이스의 안정도상 바람직하게는 0.001∼5중량%의 양으로 리포좀 베이스에 배합할 수 있다. At this time, the amount of the nine natural herbal extracts to be added may be added to the liposome base in an amount of 0.0001 to 20% by weight, and preferably 0.001 to 5% by weight, based on the stability of the base to the entire liposome base.
본 발명의 발모촉진용 리포좀 화장료는 상기에서 생약을 봉입한 리포좀 베이스를 0.001~30중량%의 양을 배합하여 두발 또는 피부에 적용할 수 있는 유연화장수, 영양화장수, 영양크림, 마사지크림, 에센스, 팩, 헤어토닉, 헤어로션, 샴푸 및 토닉 등의 제형으로 제조하여 사용할 수 있다. The liposome cosmetic for promoting hair growth of the present invention is formulated in an amount of 0.001 to 30% by weight of the liposome base encapsulated in the above-mentioned medicines can be applied to the hair or skin, supple cosmetics, nourishing cosmetics, nutrition cream, massage cream, essence, It can be prepared and used in formulations such as packs, hair tonics, hair lotions, shampoos and tonics.
이하, 본 발명의 구성을 제조예 및 시험예를 들어 상세히 설명하고자 하지만 본 발명의 권리범위가 이들에만 한정되는 것은 아니다.Hereinafter, the configuration of the present invention will be described in detail by the production examples and test examples, but the scope of the present invention is not limited thereto.
제조예 1. 9종의 생약 추출물의 제조Preparation Example 1 Preparation of 9 Herbal Extracts
1) 건조된 생약 100g에 70% 에탄올(ethanol)을 250㎖ 가하고 냉각콘덴서가 달려있는 추출기에서 약 2시간동안 끓여서 추출한 후 여과하여 찌꺼기를 제거하고 추출액을 제조하였다. 그 추출액을 냉각콘덴서가 달린 증류장치를 이용하여 60oC에서 감압 농축하여 건조된 생약 추출물 I을 획득하였다.1) 250ml of 70% ethanol (ethanol) was added to 100 g of the dried herbal medicine, which was boiled and extracted for about 2 hours in an extractor equipped with a cooling capacitor, filtered to remove the residue, and an extract was prepared. The extract was concentrated under reduced pressure at 60 ° C. using a distillation apparatus equipped with a cooling capacitor to obtain dried herbal extract I.
2) 건조된 생약 100g에 헥산(hexane)을 250㎖ 가하고 냉각콘덴서가 달려있는 추출기에서 약 2시간동안 끓여서 추출한 후 여과하여 찌꺼기를 제거하고 추출액을 제조하였다. 그 추출액을 냉각콘덴서가 달린 증류장치를 이용하여 60oC에서 감압 농축하여 건조된 생약 추출물 Ⅱ를 획득하였다.2) 250 mL of hexane (hexane) was added to 100 g of the dried herbal medicine, which was boiled and extracted for about 2 hours in an extractor equipped with a cooling capacitor, and then filtered to remove the residue, thereby preparing an extract. The extract was concentrated under reduced pressure at 60 ° C. using a distillation apparatus equipped with a cooling capacitor to obtain dried herbal extract II.
3) 건조된 생약 100g에 에틸아세테이트(ethylacetate)를 200㎖ 가하고 냉각콘덴서가 달려있는 추출기에서 약 2시간동안 끓여서 추출한 후 여과하여 찌꺼기를 제거하고 추출액을 제조하였다. 그 추출액을 냉각콘덴서가 달린 증류장치를 이용하여 60oC에서 감압 농축하여 건조된 생약 추출물 Ⅲ을 획득하였다.3) 200 ml of ethyl acetate (ethylacetate) was added to 100 g of the dried herbal medicine, which was boiled and extracted for about 2 hours in an extractor equipped with a cooling capacitor, filtered to remove the residue, and an extract was prepared. The extract was concentrated under reduced pressure at 60 ° C. using a distillation apparatus equipped with a cooling capacitor to obtain dried herbal extract III.
제조예 2. 9종의 생약추출물을 함유한 리포좀의 제조Preparation Example 2 Preparation of Liposomes Containing 9 Herbal Extracts
제조예 1에서 기술한 바와 같이 제조된 생약 추출물 2.5중량%, 레시틴 2.5중량%, 에탄올 13중량%, 에스테르 오일 25중량%, 프로필렌글리콜 7중량%, 비이온성 계면활성제 0.1중량% 및 정제수를 호모 믹서로 70℃에서 3000rpm으로 10분 동안 균질화시켰다. 이어서, 균질화된 레시틴 혼합물을 마이크로플루다이져 (Microfludizer)로 70℃에서 1,000기압으로 1회 정도 처리하여 리포좀 베이스를 형성시켰다. 위와 같이 형성된 리포좀 베이스를 이용하여 유효 추출물이 봉입된 리포좀 베이스를 제조하였다. 2.5% by weight of the herbal extract prepared as described in Preparation Example 1, 2.5% by weight of lecithin, 13% by weight of ethanol, 25% by weight of ester oil, 7% by weight of propylene glycol, 0.1% by weight of nonionic surfactant and purified water Homogenized at 3000 ° C. at 70 ° C. for 10 minutes. Subsequently, the homogenized lecithin mixture was treated once with a microfludizer at about 70 at about 1,000 atm to form a liposome base. Using the liposome base formed as described above to prepare a liposome base encapsulated effective extract.
이렇게 제조된 상기 리포좀 베이스와 생약 추출물과의 효능 비교를 위해서는 최종 농도를 같도록 정제수에 희석하여 사용하였고, 5 알파-환원효소 저해 효과를 알아 보기 위하여 다음의 방법에 따라 시험예를 실시하였다.In order to compare the efficacy of the liposome base and the herbal extract prepared in this way, the final concentration was used in dilution in purified water, and a test example was carried out according to the following method in order to find the 5 alpha-reductase inhibitory effect.
시험예 1. 스프라그 다우리 전립선을 이용한 5알파-환원효소 저해 효과 시험Experimental Example 1 Test of 5-alpha-Reductase Inhibitory Effect Using Sprague Dawley Prostate
생후 7∼8주의 성숙한 수컷 스프라그-다우리(Sprague-Dawley)를 디에틸에테르(diethylether)로 치사시킨 후 복부 전립선을 떼내어 결합조직을 제거하였다. 여기에 완충액[0.32M 수크로스(sucrose), 0.1mM 디티오트레이톨(dithiothreitol), 20mM 아세트산나트륨염(sodium acetate)]을 첨가하고 분쇄기로 잘게 자른 후 현탁하였다. 상기 현탁액을 거즈로 여과한 여과액을 1500×g에서 원심분리한 후 펠렛(pellet)을 취해 상기 완충액을 혼합하여 20~30㎎/㎖ 농도로 현탁하였다. 7-8 weeks old male Sprague-Dawley was killed with diethylether and the abdominal prostate was removed to remove connective tissue. Buffer (0.32M sucrose, 0.1 mM dithiothreitol, 20 mM sodium acetate) was added thereto, chopped finely by a grinder and suspended. The suspension was filtered with gauze, and the filtrate was centrifuged at 1500 × g, pellets were taken, and the buffer solution was mixed and suspended at a concentration of 20-30 mg / ml.
상기 현탁액의 일부를 취하여 0.02M 인산 완충액에 넣은 후, 동위 원소인 3H 가 붙어있는 기질 테스토스테론과 함께 반응시켜 생성물인 디하이드로테스토스테론의 생성량을 측정하였다. 이 때, 반응 용액은 1mM의 디티오트레이톨, 20mM의 인산염 완충액(pH 6.5), 50μM의 NADPH, [1,2,6,7-3H] 테스토스테론 0.1μCi/테스토스테론(1×10-7M)과 36㎍ 효소 현탁액을 첨가하여 전체 반응액을 565㎕가 되도록 조제하였다.After taking a portion of the suspension was placed in a 0.02M phosphate buffer, it is reacted with a substrate which is a testosterone isotopes 3 H attached to measure the amount of dihydrotestosterone product. At this time, the reaction solution is dithiothreitol, 20mM of phosphate buffer (pH 6.5) in 1mM, of 50μM NADPH, [1,2,6,7- 3 H] testosterone 0.1μCi / testosterone (1 × 10 -7 M ) And 36 μg enzyme suspension were added to prepare a total reaction solution of 565 μl.
상기 제조한 본 발명 생약 추출물 Ⅰ~Ⅲ과 리포좀 베이스 일정량을 각각 10% 디메틸설폭사이드(DMSO)와 정제수에 녹여 한 반응당 10㎕로 가하고, 대조군으로는 같은 부피의 용매를, 양성 대조군으로는 피나스테라이드(finasteride)를 이용하였다.The above-mentioned herbal extracts I-III of the present invention and a certain amount of liposome base were dissolved in 10% dimethyl sulfoxide (DMSO) and purified water, respectively, and added to 10 μl per reaction, and the same volume of solvent was used as a control and finasteride was used as a positive control. (finasteride) was used.
또한, 반응은 상기 준비한 효소 현탁액을 가하여 37℃에서 30분간 진행시킨 후, 600㎕의 에틸아세테이트를 가하여 반응을 정지시키고 생성물을 질소 가스를 통해 건조시켰다. 이를 50㎕의 에틸아세테이트로 녹인 후 전량을 실리카 플라스틱 시트 카이젤겔 60 F254(Silica plastic sheet kieselgel 60 F254)상에 점적한 후 전개 용매인 에틸아세테이트:사이클로헥산(cyclohexane)(1:1)을 사용하여 전개하였다.In addition, the reaction was carried out at 37 ° C. for 30 minutes by adding the prepared enzyme suspension. Then, 600 µl of ethyl acetate was added to stop the reaction, and the product was dried through nitrogen gas. This is a drip on the total amount of ethyl acetate to the silica plastic sheet kayijel gel 60 F was dissolved in 254 of 50㎕ (Silica plastic sheet kieselgel 60 F 254) and then a developing solvent ethyl acetate: (1: 1) cyclohexane (cyclohexane) Developed using.
실리카 플라스틱 시트를 자연상태에서 건조시킨 후, 동위원소의 양을 측정하기 위해 바스(Bas, 후지필름, 일본) 시스템을 사용하였으며, 건조된 플라스틱 시트와 노출 필름을 함께 바스 카셋트에 넣어 1주일 동안 보관한 후에 필름에 노출된 테스토스테론과 생성된 디하이드로테스토스테론의 동위원소 양을 노출된 강도를 이용해 정량하였다.After drying the silica plastic sheet in the natural state, a bath (Bas, FUJIFILM, Japan) system was used to measure the amount of isotopes, and the dried plastic sheet and the exposed film were put together in a bath cassette and stored for one week. The isotope amounts of testosterone and resulting dihydrotestosterone exposed to the film were then quantified using the exposed intensity.
실험은 2차에 걸쳐 반복적으로 사용하였으며, 그 측정 결과를 바탕으로 각각의 5알파-환원효소 저해율을 하기 계산법으로 산출하였다. 본 발명에 따른 리포좀 베이스의 5 알파-환원효소 저해 실험 결과를 표 5 및 도 2에 나타내었다. The experiment was used repeatedly for two times, and based on the measurement result, each of 5 alpha-reductase inhibition rates was calculated by the following calculation method. The results of the 5 alpha-reductase inhibition of the liposome base according to the present invention are shown in Table 5 and FIG. 2.
이상의 결과에서 살펴본 바와 같이, 본 발명의 9종의 생약 추출물 함유제의 경우 5알파-환원효소 저해 효과가 있었으며, 각각 9종의 봉입된 리포좀 베이스(제조예 2)가 추출물 자체(제조예 1) 보다 더욱 저해효과가 높은 것을 발견하였다.As described in the above results, the nine herbal extracts of the present invention had a 5 alpha-reductase inhibitory effect, and each of the nine encapsulated liposome bases (Preparation Example 2) was the extract itself (Preparation Example 1). The inhibitory effect was found to be higher.
시험예 2. 모낭세포 중 모유두세포(dermal papillae cell)의 증식 촉진 효과 시험Test Example 2 Test for promoting the proliferation of dermal papillae cells in hair follicle cells
2%의 우태아 혈청이 함유된 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Media)배지에서 배양한 인체 모낭 모유두세포를 96공 평판배양기(96-well microtiter plate)에 5,000세포/웰이 되도록 분주하고, 시료로서 상기 9가지의 생약 추출물 및 그 각각의 봉입 리포좀 베이스를 생약추출물의 농도가 최종적으로 0.01%의 양이 되도록, 배양배지로 1/10씩 순차적으로 희석하여 첨가한 후, 37℃ 온도에서 4일간 배양하였다. 배양 후, 0.2% MTT(3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]- 2,5-diphenyltetrazolium bromide) 용액을 각 웰당 50㎕ 씩을 첨가하고, 다시 37℃ 온도에서 4시간 동안 배양한 후, 생성된 포르마잔(formazane)을 DMSO(Dimethyl sulfoxide)로 용해시켰다. 용해된 포르마잔의 흡광도를 평판배양측정기(microplate reader)를 이용하여 570nm에서 측정하였다. 이를 대조군에 대하여 상기와 동일한 방법으로 실시하여 흡광도를 측정하였다. 9종의 생약 추출물과 각각의 봉입 리포좀 베이스를 함유한 실험군과 이를 함유하지 않은 대조군의 흡광도를 각각 비교한 후 그 결과를 표 2 및 도 3에 나타내었다.Human hair follicle dermal papilla cells cultured in DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Media) medium containing 2% fetal bovine serum were dispensed in a 96-well microtiter plate at 5,000 cells / well, and the sample 9 was used as a sample. The herbal extract of eggplant and each of the encapsulated liposome bases were added by diluting sequentially by 1/10 with a culture medium so that the concentration of the herbal extract was finally 0.01%, and then incubated at 37 ° C. for 4 days. After incubation, 50 μl of 0.2% MTT (3- [4,5-dimethylthiazol-2-yl] -2,5-diphenyltetrazolium bromide) solution was added to each well, followed by incubation at 37 ° C. for 4 hours. The resulting formazan was dissolved in dimethyl sulfoxide (DMSO). The absorbance of the dissolved formazan was measured at 570 nm using a microplate reader. This was carried out in the same manner as above for the control to measure the absorbance. After comparing the absorbance of each of the nine herbal extracts and the experimental group containing each of the encapsulated liposome base and the control group without the same, the results are shown in Table 2 and FIG. 3.
상기 표 2 및 도 3에서 보는 바와 같이 9종의 생약 추출물이 일정농도(0.01%)에서 모낭세포중의 하나인 모유두세포의 증식 촉진 활성을 나타내었고, 이러한 생약 추출물을 리포좀 베이스로 봉입한 것(제조예 2)이 추출물 자체(제조예 1)를 사용한 것보다 모유두세포 증식 능력이 높다는 것을 확인하였다. As shown in Table 2 and FIG. 3, nine herbal extracts showed growth promoting activity of one of the hair follicle cells, one of the hair follicle cells at a constant concentration (0.01%), and the herbal extract was encapsulated with a liposome base ( Preparation Example 2) confirmed that the dermal papilla cell proliferation ability was higher than that of the extract itself (Preparation Example 1).
시험예 3. 마우스를 통한 생약추출물 및 그 리포좀 베이스의 모발생장효과 시험Experimental Example 3. Test of hair growth effect of herbal extract and its liposome base through mouse
상기 제조된 본 발명 9가지 생약의 추출물 및 그 각각의 봉입 리포좀 베이스를 최종 추출물의 농도가 2%로 동일하게 일반 추출물은 30% 함수 에탄올(ethanol) 용액을 제조하고, 리포좀은 정제수에 희석하여 본 발명 생약추출물과 그 리포좀 베이스의 모발 생장 효과를 테스트하였다. The nine extracts of the present invention prepared above and their respective encapsulated liposome bases were prepared in 30% hydrous ethanol solution with the same concentration of 2% final extract, and the liposomes were diluted in purified water. The hair growth effect of the inventive herbal extract and its liposome base was tested.
생후 47∼53일된 마우스(C57BL/6)의 등 부위 털을 제거하고, 등 부위 피부가 깨끗한 것을 골라 물질군마다 10마리씩을 선정하여 매일 상기 본 발명 시험 추출물 및 리포좀 베이스 희석액을 개체당 100㎕씩 도포하였다. Remove the back hair of 47-53 days old mouse (C57BL / 6), select the clean back skin, and select 10 animals for each substance group, and 100 μl of the test extract and liposome base dilution solution of the present invention daily. Applied.
시간 경과에 따른 모발의 길이 및 모발 생장 정도를 모 제거 후 복원 정도에 따라 점수를 0에서 3까지 부가하여 각각 비교하였다. 모발 생장 정도를 비교하기 위하여, 대조군에는 30% 알코올 용액을 각 개체에 도포하여 모발의 생장 상태를 관찰하였다. 그 결과를 표 3, 도 4a 및 도 4b에 나타내었다.The length of hair and the extent of hair growth over time were compared by adding scores from 0 to 3 according to the degree of restoration after hair removal. In order to compare the degree of hair growth, the control group was applied with 30% alcohol solution to each individual to observe the hair growth state. The result is shown in Table 3, FIG. 4A and FIG. 4B.
이상의 결과에서, 상기 제조예에 따른 본 발명 9종 추출물 함유제의 경우 유의적인 모발 생장 촉진 효과가 있음을 확인할 수 있었고, 각각 상기 추출물을 봉입한 리포좀 베이스(제조예 2)가 추출물 자체(제조예 1)보다 더욱 높게 모발 생장을 촉진한 것을 확인하였다.In the above results, in the case of the nine kinds of extract-containing agent of the present invention according to the above preparation it was confirmed that there is a significant hair growth promoting effect, the liposome base (Preparation Example 2) each of the extract is the extract itself (Preparation Example It confirmed that the hair growth was promoted higher than 1).
생약 추출물이 봉입된 리포좀 베이스는 조성물 전체 중량에 대하여 1~30중량%로 발모 촉진용 피부외용제로 사용하고자 하였으며, 이에 대한 대표적인 제형예는 아래와 같다. 그러나 본원 발명의 범위가 하기 제형예들에 한정하는 것은 아니다.The liposome base encapsulated with the herbal extract was intended to be used as a skin external preparation for promoting hair growth in an amount of 1 to 30% by weight based on the total weight of the composition. However, the scope of the present invention is not limited to the following formulation examples.
제형예 1. 영양 화장수Formulation Example 1. Nutritional lotion
제형예 2. 헤어 토닉Formulation Example 2. Hair Tonic
제형예 3. 헤어 로션Formulation Example 3. Hair Lotion
제형예 4. 헤어 비누Formulation Example 4. Hair Soap
이상의 제조예 및 시험예를 통하여 살펴본 바와 같이, 9종의 생약을 유기용매로 가열 및 분획추출하고 감압농축한 생약 추출물을 레시틴으로 구성된 리포좀에 봉입한 리포좀 베이스는 5알파-환원효소 저해 효과가 뛰어나고, 모낭세포 증식을 촉진하며 모발 생장을 촉진하는 뛰어난 효과가 있으므로, 이를 첨가하여 피부외용제를 제조하는 경우, 발모촉진 및 탈모치료용 의약 또는 화장료로 유용하게 이용할 수 있다. 한편 과다한 피지의 분비로 인한 여드름, 지루성 피부염 또는 비듬 등의 치료용 제제 또는 화장료로 이용할 수 있고, 5알파-환원효소 저해효과를 이용하여 남성형 탈모증 이외에도 전립선 암, 전립선 비대증 등 5알파-환원효소가 관여되는 각종 질환의 치료에도 이용할 수 있다. As shown in the preparation and test examples above, the liposome base in which nine herbal medicines were heated and fractionated with an organic solvent and the concentrated herbal extract was encapsulated in a liposome composed of lecithin has an excellent 5-alpha-reductase inhibitory effect. In addition, since it has an excellent effect of promoting hair follicle cell proliferation and promoting hair growth, it may be usefully used as a medicine or cosmetic for promoting hair growth and hair loss treatment when preparing an external preparation for skin. On the other hand, it can be used as a therapeutic agent or cosmetic for treatment of acne, seborrheic dermatitis or dandruff due to excessive sebum secretion. It can also be used for the treatment of various diseases involved.
도 1은 남성 호르몬의 모발세포에서의 효과 및 전달 과정을 도시한 것이다.Figure 1 shows the effect and delivery process of the male hormone in the hair cells.
도 2는 발모촉진 유효성분을 함유하는 본 발명 추출물 제조예의 5알파-환원효소 저해 효과를 도시한 그래프이다.Figure 2 is a graph showing the 5 alpha-reductase inhibitory effect of the extract preparation of the present invention containing the hair growth promoting active ingredient.
도 3은 발모촉진 유효성분을 함유하는 본 발명 추출물이 인간 모낭세포 중에서 모유두세포의 증식을 촉진하는 효과를 도시한 그래프이다.Figure 3 is a graph showing the effect of promoting the proliferation of dermal papilla cells in human hair follicle cells extracts containing hair growth promoting active ingredient.
도 4a 및 도4b는 발모 촉진 유효 식물 추출물 및 그 리포좀 조성물 각각에 대해 C57BL/6 마우스를 이용하여 육모 효과를 시험한 결과를 도시한 그래프이다.4A and 4B are graphs showing the results of testing hair growth effects using C57BL / 6 mice for hair growth promoting effective plant extracts and liposome compositions thereof.
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