KR100803925B1 - Cosmetic Composition for Preventing Skin Aging Comprising Radix glycyrrhizae, Phellodendri Cortex, Radix Cynanchi Wilfordii and Cortex mori Extract Stabilized in Nanoliposome - Google Patents

Cosmetic Composition for Preventing Skin Aging Comprising Radix glycyrrhizae, Phellodendri Cortex, Radix Cynanchi Wilfordii and Cortex mori Extract Stabilized in Nanoliposome Download PDF

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Abstract

본 발명은 생약 추출물을 안정화한 나노리포좀을 포함하는 피부노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 감초, 산수유, 백하수오, 상백피 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 추출물을 안정화한 나노리포좀에 유효성분으로 포함하는 피부노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다. 본 발명의 화장료 조성물은 섬유아세포의 증식 촉진, 항산화 효과, 콜라겐 합성의 촉진에 의한 피부 주름 개선과 피부 탄력 개선, 보습력 향상을 통하여 피부 노화를 방지한다. 더욱이, 본 발명의 화장료 조성물에서, 생약 추출물은 나노리포좀에 의해 내포되어 있기 때문에 피부침투 효과가 크게 증가하고, 제형의 안정성도 크게 개선된다.The present invention relates to a cosmetic composition for preventing skin aging comprising nanoliposomes stabilized with herbal extracts, and more particularly, nanoliposomes stabilized extract selected from the group consisting of licorice, cornus milk, baekshou, lettuce, and combinations thereof. It relates to a cosmetic composition for preventing skin aging comprising as an active ingredient. The cosmetic composition of the present invention prevents skin aging through the improvement of skin wrinkles and the improvement of skin elasticity and the moisturizing ability by promoting the growth of fibroblasts, antioxidant effect, promotion of collagen synthesis. Furthermore, in the cosmetic composition of the present invention, since the herbal extract is contained by the nanoliposomes, the skin penetration effect is greatly increased, and the stability of the formulation is also greatly improved.

감초, 산수유, 백하수오, 상백피, 화장료, 나노리포좀Licorice, Cornus, Baekshao, Sangbaekpi, Cosmetics, Nanoliposomes

Description

나노리포좀으로 안정화된 감초, 산수유, 백하수오 및 상백피 추출물을 포함하는 피부노화 방지용 화장료 조성물{Cosmetic Composition for Preventing Skin Aging Comprising Radix glycyrrhizae, Phellodendri Cortex, Radix Cynanchi Wilfordii and Cortex mori Extract Stabilized in Nanoliposome}Cosmetic Composition for Preventing Skin Aging Comprising Radix glycyrrhizae, Phellodendri Cortex, Radix Cynanchi Wilfordii and Cortex mori Extract Stabilized in Nanoliposome}

본 발명은 화장료 조성물에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 감초, 산수유, 백하수오, 상백피 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택된 추출물의 유효 성분을 나노리포좀으로 안정화시킨 피부노화 방지용 화장료 조성물에 관한 것이다.The present invention relates to a cosmetic composition, and more particularly, to a cosmetic composition for preventing skin aging, in which an active ingredient of an extract selected from the group consisting of licorice, cornus, baekshou, lettuce, and combinations thereof is stabilized with nanoliposomes.

건강한 피부는 피부세포의 생리활성이 활발하여 진피 (dermis)에 있는 섬유아세포 (fibroblast)에서 피부 탄력 증진 및 주름형성을 억제하는데 중요한 역할을 하는 콜라겐 (collagen)의 합성 및 피부수분유지에 필수적인 히아루론산 (hyaluronic acid)을 포함한 당단백질류인 GAGS (glycos aminoglycans)의 합성이 활발하여 피부에 탄력성, 부드러움, 유연성 및 보습성이 부여된다. 또한, 표피 (epidermis)에서는 기저세포 (basal layer cell)의 증식 (proliferation)이 활발하 고, 피부세포간의 결합을 강화시키는 라미닌, 인테그린 및 데스모좀과 같은 결합단백질 (adhesion protein)의 생성이 균형적으로 이루어져 피부 세포조직을 강화시켜 건강한 피부를 유지해 준다.Healthy skin has active physiological activity of skin cells, and hyaluronic acid, which is essential for the synthesis and collagen of collagen, which plays an important role in enhancing skin elasticity and suppressing wrinkle formation in fibroblasts in the dermis. Synthesis of glycosaminoglycans (GAGS), a glycoprotein that includes hyaluronic acid, is active to give skin elasticity, softness, flexibility and moisture retention. In the epidermis, the proliferation of basal layer cells is active, and the production of binding proteins such as laminin, integrin, and desmosome, which enhance the binding between skin cells, is balanced. Consists of strengthening skin cell tissue to maintain healthy skin.

그러나, 현대인의 피부는 외부의 각종 유해 환경 및 스트레스에 노출되어 다양한 손상을 받고 있으며, 나이가 들면서 피부의 생리활성이 저하되고 손상된 피부의 회복속도가 느려지면서 피부는 탄력저하, 건조, 주름형성 및 칙칙함 등의 다양한 피부노화 현상을 맞게 된다.However, the skin of modern people is exposed to various harmful environments and stresses outside, and suffers various damages. As the skin ages, the skin's physiological activity decreases and the damaged skin's recovery rate slows down, the skin loses elasticity, dryness, wrinkle formation and Various skin aging symptoms such as dullness are encountered.

노화에 따른 피부의 생리적 변화로는 피부의 구성 성분인 표피, 진피 및 피하조직의 두께가 얇아지고, 피부장벽의 기능을 맡고 있는 지질 장벽 (lipid barrier)의 지질 조성과 함량이 변화되면서 그 기능이 급격하게 저하되어 피부의 수분함량이 떨어지며, 피부가 건조해지고 기미, 주근께 및 색소침착이 나타나는 등 다양한 변화가 있을 수 있다. 뿐만 아니라, 최근에는 자외선량의 증가와 대기 오염 및 현대인의 과도한 피로와 스트레스 등으로 인해 생성되는 반응성이 높은 활성산소 및 자유라디칼이 생체성분 (단백질, 핵산, 세포막 지질 등)을 산화시키거나 변성시킴으로써 피부노화를 일으키는 주원인으로 대두되면서 자유라디칼에 대한 관심이 높아졌다. 생체가 호흡하는 과정에서 산소의 환원이나, 자외선조사, 식균작용 등으로 인해 발생하는 자유라디칼 (free radical)에 의한 손상은 인체 내에서 광범위하게 발생하며 노화 발생기작중 중요한 이론으로 인식되고 있다. 피부노화에 관여하는 라디칼로는 히드록실 라디칼 (Hydroxyl radical), 슈퍼옥사이드 라디칼 (superoxide radical), 활성산소 (singlet oxygen), 과산화수소 (hydrogen peroxide: H2O2) 등이 있다.The physiological changes of the skin by aging include the thinning of the skin's constituents, the epidermis, the dermis, and the subcutaneous tissue, and the change in the lipid composition and content of the lipid barrier, which functions as a skin barrier. There may be various changes such as a sudden decrease in the moisture content of the skin, dry skin, blemishes, freckles and pigmentation. In addition, in recent years, highly reactive free radicals and free radicals generated by the increase in the amount of ultraviolet rays, air pollution, and excessive fatigue and stress of modern people, oxidize or denature biological components (proteins, nucleic acids, membrane lipids, etc.). As a major cause of skin aging, interest in free radicals has increased. Damage caused by free radicals caused by reduction of oxygen, UV irradiation, phagocytosis, etc. in the process of breathing the living body occurs widely in the human body and is recognized as an important theory during the mechanism of aging. Radicals involved in skin aging include hydroxyl radical, superoxide radical, singlet oxygen, hydrogen peroxide (H 2 O 2 ), and the like.

본 발명자들은 피부에 유해한 유기 자유 라디칼을 잘 소거하여 피부노화를 억제할 수 있으며, 피부 탄력 증진 및 주름형성을 억제하는데 중요한 역할을 하는 콜라겐(Collagen)의 합성의 증진을 줄 수 있는 화장료를 제공하고자 연구한 결과, 감초, 산수유, 백하수오, 상백피 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 추출물을 나노리포좀으로 안정화시켜 피부노화 방지용 화장물로 상기한 목적을 달성할 수 있음을 발견하였다.The present inventors can suppress skin aging by well eliminating organic free radicals harmful to the skin, and provide a cosmetic that can enhance the synthesis of collagen (Collagen), which plays an important role in enhancing skin elasticity and suppressing wrinkle formation. As a result of the study, it was found that the extracts selected from the group consisting of licorice, cornus, baekshou, baekbaekpi and combinations thereof were stabilized with nanoliposomes to achieve the above-mentioned objectives as cosmetics for preventing skin aging.

최근에는 천연으로부터 얻어지는 성분들이 화장품에 사용하는 사례가 늘고 있는데, 이는 천연 식물성분들로서 피부 친화적이며 친환경적이어서 많은 연구기관에서 연구가 활발히 진행되고 있다. 하지만 대부분의 생약 성분들은 그 자체가 불안정할 뿐만 아니라 화장료에 적용시 화장료의 안정성에 큰 문제점을 가지고 있다.Recently, the use of natural ingredients are increasing in cosmetics, which are skin-friendly and environmentally friendly as natural plant ingredients, and many research institutes are actively researching them. However, most herbal ingredients are not only unstable by themselves, but also have a big problem in the stability of the cosmetic when applied to the cosmetic.

따라서, 이러한 문제점을 해결하고자 제약뿐만 아니라, 화장품 및 식품 등에서 생리활성 성분이 파괴되지 않고 안정하게 전달될 수 있으며, 생리활성 성분이 지용성이든 수용성이든 모두 내포시킬 수 있는 나노리포좀을 이용하고 있다. 최근에는 나노 기술의 발달과 함께 피부 침투 효과를 극대화 할 수 있는 나노리포좀에 대한 연구 개발도 활발히 진행되고 있다.Therefore, in order to solve such a problem, not only pharmaceuticals, but also cosmetics and foods can be delivered in a stable manner without destroying the bioactive components, and the biolipoactive nanoliposomes are used that can contain both fat-soluble or water-soluble. Recently, with the development of nano technology, research and development on nano liposomes that can maximize the skin penetration effect is actively progressing.

본 발명자들은 생약재를 이용한 피부 노화 방지, 즉 피부 보호용 화장료 조성물을 개발하고자 예의 연구 노력한 결과, 감초, 산수유, 백하수오 및 상백피 추출물이 우수한 섬유아세포의 증식, 항산화, 및 콜라겐 합성 효과를 갖고 있다는 것을 발견하였다. 또한, 이들 활성 성분들이 화장료 조성물 내에서 안정하게 유지하고자 상기 추출물을 나노리포좀에 안정화한 제형과 우수한 피부 침투력 향상을 개발하여 피부노화 방지용 화장료 조성물을 완성하였다.The present inventors have diligently researched to develop a cosmetic composition for preventing skin aging, that is, skin protection using herbal medicines, and found that licorice, cornus oil, baekshou and lettuce extract have excellent fibroblast proliferation, antioxidant, and collagen synthesis effects. It was. In addition, in order to keep these active ingredients stable in the cosmetic composition, the formulation was stabilized to nanoliposomes and developed an excellent skin penetration enhancer to complete the cosmetic composition for preventing skin aging.

따라서, 본 발명의 목적은 생약 추출물을 안정화한 나노리포좀을 유효성분으로 포함하는 피부노화 방지용 화장료 조성물을 제공하는 데 있다.Accordingly, an object of the present invention to provide a cosmetic composition for preventing skin aging comprising nanoliposomes stabilized herbal extract as an active ingredient.

본 발명의 양태에 따르면, 본 발명은 감초, 산수유, 백하수오, 상백피 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 추출물을 안정화한 나노리포좀을 유효성분으로 포함하는 피부노화 방지용 화장료을 제공한다.According to an aspect of the present invention, the present invention provides a cosmetic for preventing skin aging comprising nanoliposomes stabilized with an extract selected from the group consisting of licorice, cornus, baekshou, lettuce, and combinations thereof.

본 발명자들은 피부에 대하여 부작용을 나타내는 종래의 피부 노화 방지용 화장료 조성물의 문제점을 개선하고자, 천연추출물에 대한 연구를 지속적으로 수행하였다. 그 결과 감초, 산수유, 백하수오 및 상백피추출물이 피부에 탄력을 부여하는 성분인 콜라겐 합성을 촉진시키고, 콜라겐 합성이 주로 이루어지는 섬유아세포의 증식을 촉진하며, 항산화 효과와 더불어 피부의 보습력을 증강시키면서도 피부 자극 부작용이 거의 없다는 것을 확인하였다.The present inventors continued to study the natural extracts to improve the problems of conventional skin anti-aging cosmetic composition exhibiting side effects on the skin. As a result, licorice, cornus, baekshou and cedar extracts promote the synthesis of collagen, a component that gives skin elasticity, promote the proliferation of fibroblasts, which are mainly collagen synthesis, and increase the skin's moisturizing power with antioxidant effect It was confirmed that there are few irritation side effects.

더욱이, 상술한 생약 추출물을 나노리포좀에 내포(Encapsulation)시킨 경우, 피부 보습력, 피부 탄력이 개선되고, 피부 침투 효과가 크게 증가할 뿐만 아니라, 제형의 안정성도 매우 개선됨을 발견하였다.Furthermore, when encapsulation of the above-mentioned herbal extract in nanoliposomes (Encapsulation), it was found that the skin moisturizing power, skin elasticity is improved, the skin penetration effect is greatly increased, and the stability of the formulation is also greatly improved.

감초 (Radix glycyrrhizae)는 콩과 식물인 감초의 뿌리, 잎을 말린 것으로 항염 및 항알러지 작용으로 피부 면역력을 강화시키는 작용을 한다.Licorice (Radix glycyrrhizae) is a dried root and leaf of the legume licorice, which acts as an anti-inflammatory and anti-allergic agent to strengthen skin immunity.

또한, 산수유는 층층나무과의 갈잎떨기나무 산수유나무(cornus officinalis)의 열매로 성질은 약간 따뜻하고 맛은 시고 떫으며 독이 없다. 음(陰)을 왕성하게 하며, 신정(精)과 신기(腎氣)를 보하고 성기능을 높이며 음경을 딴딴하고 크게 한다. 또한 정수(精髓)를 보(補)해 주고 허리와 무릎을 덥혀 준다. 오줌이 잦은 것을 낫게 하며 늙은이가 때없이 오줌 누는 것을 낫게 하고 두풍과 코가 메는 것, 귀먹는 것을 낫게 한다. 또한, 사포닌의 함량이 15% 이상 함유되어 있어 수렴효과가 우수하며 또한 유해산소 제거 효과도 우수하여 피부를 개선해 주는 효과를 갖는다. 동물실험에서 이뇨작용과 혈압강하작용을 보이며, 약물달인 물은 포도상구균, 이질균의 억제 작용과 복수암 세포의 억제작용이 있고, 혈당강하작용도 있다. 심근의 수축력을 높이고, 혈압을 올리며, 면역 계통에 림프세포 증식작용을 보이고, 혈소판 응집억제 작용도 보인다.
또한, 백하수오 (Radix Cynanchi Wilfordii)는 마디풀과 식물인 하수오의 괴근을 말린 것으로 피부세포를 활성화하여 피부를 투명하고 건강하게 해주며, 유효성분의 피부침투를 원활하게 해주는 기능이 있다.
Cornus is also the fruit of the cornus officinalis of the dogwood of the dogwood, which is slightly warm in nature, tastes sour, and has no poison. Yin (陰) is vigorous, Shinjeong (精) and Shin (腎氣) to see, enhance the sexual function, penis is enlarged and enlarged. It also helps cleanse (精髓) and warm your back and knees. It helps to urinate more often, to help older people to pee at times, and to soothe wind, nose, and deafness. In addition, the content of saponin 15% or more is excellent in the convergence effect, and also has an effect of removing harmful oxygen to improve the skin. In animal experiments, it shows diuretic and blood pressure-lowering effects, and drug decoction has staphylococcus and dysentery inhibitory effects and ascites cancer cells. Increasing myocardial contractility, raising blood pressure, lymphatic cell proliferation in the immune system, and platelet aggregation suppression.
In addition, Baixiu (Radix Cynanchi Wilfordii) is a dried grass root of the sessile of plants and plants and activates skin cells to make skin clear and healthy, and has the function of smoothing skin penetration of active ingredients.

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또한, 상백피 (Cortex mori)는 뽕나무 식물인 뽕나무 근피를 말린 것으로 미백효과가 우수하며, 가벼운 진해작용과 이뇨작용이 나타나고, 달임물은 혈압강하작용을 보인다. 또한, 진정, 진통, 체온강하, 진경작용을 보이고, 황색포도상구균, 인플루엔자균, 이질균의 발육을 억제하는 작용을 보인다.In addition, Cortex mori is dried mulberry roots of the mulberry plant is excellent in whitening effect, mild antitussive and diuretic effect, decoction shows blood pressure lowering effect. In addition, it shows sedation, analgesic, body temperature lowering, jingyeong, inhibiting the development of Staphylococcus aureus, influenza bacteria, dysentery bacteria.

본 발명의 생약 추출물은 당업계에 공지된 다양한 추출 방법을 이용하여 수득할 수 있으며, 바람직하게는, (a) 물, (b) 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알 코올 (메탄올, 에탄올, 프로판올, 부탄올 등), (c) 상기 저급 알코올과 물과의 혼합용매, (d) 아세톤, (e) 에틸 아세테이트, (f) 클로로포름 또는 (g) 1,3-부틸렌글리콜을 추출 용매로 하여 수득할 수 있다. The herbal extract of the present invention may be obtained using various extraction methods known in the art, and preferably, (a) water, (b) anhydrous or hydrous lower alcohol having 1 to 4 carbon atoms (methanol, ethanol, Propanol, butanol, etc.), (c) the mixed solvent of the lower alcohol and water, (d) acetone, (e) ethyl acetate, (f) chloroform or (g) 1,3-butylene glycol Can be obtained.

한편, 본 발명의 추출물은 상기한 추출 용매뿐만 아니라, 다른 추출 용매를 이용하여도 실질적으로 동일한 효과를 나타내는 생약 추출물이 얻어질 수 있다는 것은 당업자에게 자명한 것이다.On the other hand, it will be apparent to those skilled in the art that the extract of the present invention can be obtained not only the above-described extraction solvent but also herbal extracts having substantially the same effect using other extraction solvents.

또한, 본 발명의 추출물은 상술한 추출 용매에 의한 추출물뿐만 아니라, 통상적인 정제 과정을 거친 추출물도 포함한다. 예컨대, 일정한 분자량 컷-오프 값을 갖는 한외여과막을 이용한 분리, 다양한 크로마토그래피 (크기, 전하, 소수성 또는 친화성에 따른 분리를 위해 제작된 것)에 의한 분리 등, 추가적으로 실시된 다양한 정제 방법을 통해 얻어진 분획도 본 발명의 생약 출물에 포함되는 것이다.In addition, the extract of the present invention includes not only the extract by the above-described extraction solvent, but also the extract that has undergone a conventional purification process. Obtained by various additional purification methods, such as, for example, separation using ultrafiltration membranes having a constant molecular weight cut-off value, separation by various chromatography (manufactured for separation according to size, charge, hydrophobicity or affinity). The fraction is also included in the herbal extract of the present invention.

본 발명의 생약 추출물은 감압 증류 및 동결 건조 또는 분무 건조 등과 같은 추가적인 과정에 의해 분말 상태로 제조될 수 있다.The herbal extract of the present invention may be prepared in powder form by an additional process such as distillation under reduced pressure and freeze drying or spray drying.

본 명세서에서, 용어 "나노리포좀"은 통상적인 리포좀의 형태를 갖는 것으로서 평균 입자 지름이 1-100 ㎚인 리포좀을 의미한다. 본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 나노리포좀의 평균 입자 지름은 30-70 ㎚이다. 상기 나노리포좀의 평균 입자 지름이 70 ㎚를 초과하는 경우에는 본 발명에서 달성하고자 하는 기술적 효과 중 피부침투의 개선 및 제형 안정성의 개선이 매우 미약하다.As used herein, the term "nanoliposomes" refers to liposomes having an average particle diameter of 1-100 nm as having the form of conventional liposomes. According to a preferred embodiment of the invention, the average particle diameter of the nanoliposomes is 30-70 nm. When the average particle diameter of the nanoliposomes exceeds 70 nm, the improvement of skin penetration and the improvement of formulation stability are very weak among the technical effects to be achieved in the present invention.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 생약 추출물은 나노리포좀 총 중 량에 대하여 0.01-40 중량% 함유되고, 보다 바람직하게는 0.1-20 중량% 함유되며, 가장 바람직하게는 4-14 중량% 함유된다.According to a preferred embodiment of the present invention, the herbal extract is contained 0.01-40% by weight, more preferably 0.1-20% by weight, most preferably 4-14% by weight relative to the total weight of nanoliposomes do.

본 발명의 바람직한 구현예에 따르면, 상기 나노리포좀은 화장료 총 중량에 대하여 0.0001-20 중량% 함유되며, 보다 바람직하게는 0.01-15 중량% 함유되고, 가장 바람직하게는 0.1-10 중량% 함유된다.According to a preferred embodiment of the present invention, the nanoliposome is contained 0.0001-20% by weight, more preferably 0.01-15% by weight, most preferably 0.1-10% by weight based on the total weight of the cosmetic.

본 발명의 나노리포좀은 폴리올, 계면활성제, 인지질, 지방산 및 물을 포함하는 혼합물에 의해 제조되며, 1가 알코올 (예: 에탄올 등)을 이용하지 않는다는 것이 특징이다. The nanoliposomes of the present invention are prepared by a mixture comprising polyols, surfactants, phospholipids, fatty acids and water, and are characterized by not using monohydric alcohols (eg ethanol).

본 발명의 나노리포좀에 이용되는 폴리올은 특히 제한되지 않으며, 바람직하게는 프로필렌글리콜, 디프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 글리세린, 메틸프로판디올, 이소프렌글리콜, 펜틸렌글리콜, 에리스티톨, 자이리톨, 솔비톨, 및 이의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택된다. 바람직하게는 프로필렌글리콜, 1,3-부틸렌글리콜, 글리세린 및 이의 혼합물로 구성된 군으로부터 선택되는 것이고, 가장 바람직하게는 글리세린이다. 그 사용량은 나노리포좀 총 중량에 대하여 10-80 중량%, 바람직하게는 30-70 중량%이다.The polyol used in the nanoliposome of the present invention is not particularly limited, preferably propylene glycol, dipropylene glycol, 1,3-butylene glycol, glycerin, methyl propanediol, isoprene glycol, pentylene glycol, erythritol, Ziitol, sorbitol, and mixtures thereof. It is preferably selected from the group consisting of propylene glycol, 1,3-butylene glycol, glycerin and mixtures thereof, most preferably glycerin. The amount used is 10-80% by weight, preferably 30-70% by weight based on the total weight of the nanoliposomes.

본 발명의 나노리포좀의 제조에 이용되는 계면활성제는 당업계에 공지된 어떠한 것도 사용할 수 있으며, 예를 들어, 음이온성 계면활성제, 양이온성 계면활성제, 양성 계면활성제 및 비이온성 계면활성제가 사용될 수 있고, 바람직하게는 음이온성 계면활성제 및 비이온성 계면활성제가 사용된다. 음이온성 계면활성제의 구체적인 예는 알킬아실글루타메이트, 알킬포스페이트, 알킬락틸레이트, 디알킬포스페이트 및 트리알킬포스페이트를 포함한다. 비이온성 계면활성제의 구체적인 예는 알콕시레이티드알킬에테르, 알콕시레이티드알킬에스테르, 알킬폴리글리코사이드, 폴리글리세릴에스테르 및 슈가에스테르를 포함한다. 가장 바람직하게는, 비이온성 계면활성제에 속하는 폴리솔베이트류가 이용된다. 계면활성제의 사용량은, 일반적으로 나노리포좀 총 중량에 대하여 0.1-10 중량%이고, 바람직하게는 0.5-5.0 중량%이다.Surfactants used in the preparation of the nanoliposomes of the present invention may be any known in the art, for example, anionic surfactants, cationic surfactants, amphoteric surfactants and nonionic surfactants may be used. , Preferably anionic surfactants and nonionic surfactants are used. Specific examples of anionic surfactants include alkylacylglutamate, alkylphosphates, alkyllactylates, dialkylphosphates and trialkylphosphates. Specific examples of nonionic surfactants include alkoxylated alkyl ethers, alkoxylated alkyl esters, alkylpolyglycosides, polyglyceryl esters and sugar esters. Most preferably, polysorbates belonging to the nonionic surfactant are used. The amount of the surfactant to be used is generally 0.1-10% by weight, preferably 0.5-5.0% by weight based on the total weight of the nanoliposomes.

본 발명의 나노리포좀의 제조에 이용되는 또 다른 성분인 인지질은 양쪽친화성 지질로 이용된 것으로서, 천연 인지질 (예: 난황 레시틴 또는 대두 레시틴, 스핑고마이엘린) 및 합성 인지질 (예: 디팔미토일포스파티딜콜린 또는 수첨 레시틴)을 포함하며, 바람직하게는 레시틴이다. 보다 바람직하게는, 상기 레시틴은 대두 또는 난황에서 추출한 천연 유래의 불포화 레시틴 또는 포화 레시틴이다. 통상적으로 천연 유래의 레시틴은 포스파티딜 콜린의 양이 23-95%, 그리고 포스파디딜에탄올아민의 양이 20% 이하이다. 본 발명의 나노리포좀의 제조에 있어서, 레시틴의 사용량은 나노리포좀 총 중량에 대하여 0.5-20 중량%이며, 바람직하게는 2-8 중량%이다.Phospholipids, another component used in the preparation of the nanoliposomes of the present invention, are used as amphoteric lipids, including natural phospholipids (eg, egg yolk lecithin or soy lecithin, sphingomyelin) and synthetic phospholipids (eg dipalmitoyl). Phosphatidylcholine or hydrogenated lecithin), preferably lecithin. More preferably, the lecithin is naturally occurring unsaturated lecithin or saturated lecithin extracted from soybean or egg yolk. Typically, lecithin derived from nature has 23-95% phosphatidyl choline and 20% or less phosphadidylethanolamine. In preparing the nanoliposomes of the present invention, the amount of lecithin used is 0.5-20% by weight, preferably 2-8% by weight, based on the total weight of the nanoliposomes.

본 발명의 나노리포좀 제조에 이용되는 지방산은 고급 지방산으로서, 바람직하게는 C12-22 알킬 체인의 포화 또는 불포화 지방산으로서, 예컨대, 라우린산, 미리스트산, 팔미트산, 스테아린산, 올레산 및 리놀레산을 포함한다. 그 사용량은 나노리포좀 총 중량에 대하여 0.05-3.0 중량%이고, 바람직하게는 0.1-1.0 중량%이다. The fatty acids used in the preparation of the nanoliposomes of the present invention are higher fatty acids, preferably saturated or unsaturated fatty acids of C 12-22 alkyl chains such as lauric acid, myristic acid, palmitic acid, stearic acid, oleic acid and linoleic acid. It includes. The amount used is 0.05-3.0 wt% with respect to the total weight of nanoliposomes, preferably 0.1-1.0 wt%.

본 발명의 나노리포좀의 제조에 이용되는 물은 일반적으로 탈이온화된 증류수이며, 그 사용량은 나노리포좀 총 중량에 대하여 5.0-40 중량%이다.Water used for the preparation of the nanoliposomes of the present invention is generally deionized distilled water, the amount of which is used is 5.0-40% by weight relative to the total weight of nanoliposomes.

나노리포좀의 제조는 당업계에 공지된 다양한 방법을 통해 이루어질 수 있으나, 가장 바람직하게는 상기 성분들을 포함하는 혼합물을 고압 호모게나이저에 적용하여 제조된다. 고압 호모게나이저에 의한 나노리포좀의 제조는 소망하는 입자 크기에 따라 다양한 조건 (예: 압력, 횟수 등)으로 실시할 수 있으며, 바람직하게는 600-1200 bar 압력 하에서 1-5회 고압 호모게나아저를 통과하도록 하여 나노리포좀을 제조한다.The preparation of nanoliposomes can be accomplished through various methods known in the art, but most preferably, a mixture comprising the above components is applied to a high pressure homogenizer. The preparation of nanoliposomes by high pressure homogenizer can be carried out under various conditions (eg pressure, frequency, etc.) depending on the desired particle size, preferably 1-5 times high pressure homogenizer under 600-1200 bar pressure. Nanoliposomes are prepared by passing through.

이렇게 제조된 나노리포좀 시스템은 여러 종류의 난용성 물질을 녹임과 동시에 불안정한 물질을 안정화시켜 피부침투효과를 극대화 하는 장점을 가지고 있다.The nanoliposome system thus prepared has the advantage of maximizing skin penetration effect by dissolving various types of poorly soluble substances and stabilizing unstable substances.

본 발명의 화장료 조성물에 포함되는 성분은 유효 성분으로서의 생약 추출물을 포함하는 나노리포좀 이외에 화장료 조성물에 통상적으로 이용되는 성분들을 포함하며, 예컨대 안정화제, 용해화제, 비타민, 안료 및 향료와 같은 통상적인 보조제, 그리고 담체를 포함한다.The components included in the cosmetic composition of the present invention include components commonly used in cosmetic compositions in addition to nanoliposomes containing herbal extracts as active ingredients, and include conventional auxiliaries such as stabilizers, solubilizers, vitamins, pigments and flavorings. And carriers.

본 발명의 피부보호용 화장료 조성물은 당업계에서 통상적으로 제조되는 어떠한 제형으로도 제조될 수 있으며, 예를 들어, 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이 등으로 제형화될 수 있으나, 이 에 한정되는 것은 아니다. 보다 상세하게는, 유연 화장수, 영양 화장수, 영양 크림, 마사지 크림, 에센스, 아이 크림, 클렌징 크림, 클렌징 포옴, 클렌징 워터, 팩, 스프레이 또는 파우더의 제형으로 제조될 수 있다.The cosmetic composition for protecting the skin of the present invention may be prepared in any formulation commonly prepared in the art, for example, solutions, suspensions, emulsions, pastes, gels, creams, lotions, powders, soaps, surfactants- It may be formulated as containing cleansing, oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation, spray, and the like, but is not limited thereto. More specifically, it may be prepared in the form of a flexible lotion, nutrition lotion, nutrition cream, massage cream, essence, eye cream, cleansing cream, cleansing foam, cleansing water, pack, spray or powder.

본 발명의 제형이 페이스트, 크림 또는 겔인 경우에는 담체 성분으로서 동물성유, 식물성유, 왁스, 파라핀, 전분, 트라칸트, 셀룰로오스 유도체, 폴리에틸렌 글리콜, 실리콘, 벤토나이트, 실리카, 탈크 또는 산화아연 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a paste, cream or gel, animal oils, vegetable oils, waxes, paraffins, starches, trachants, cellulose derivatives, polyethylene glycols, silicones, bentonites, silicas, talc or zinc oxide may be used as carrier components. Can be.

본 발명의 제형이 파우더 또는 스프레이인 경우에는 담체 성분으로서 락토스, 탈크, 실리카, 알루미늄 히드록시드, 칼슘 실리케이트 또는 폴리아미드 파우더가 이용될 수 있고, 특히 스프레이인 경우에는 추가적으로 클로로플루오로히드로카본, 프로판/부탄 또는 디메틸 에테르와 같은 추진체를 포함할 수 있다.When the formulation of the present invention is a powder or a spray, lactose, talc, silica, aluminum hydroxide, calcium silicate or polyamide powder may be used, in particular in the case of a spray, additionally chlorofluorohydrocarbon, propane Propellant such as butane or dimethyl ether.

본 발명의 제형이 용액 또는 유탁액인 경우에는 담체 성분으로서 용매, 용해화제 또는 유탁화제가 이용되고, 예컨대 물, 에탄올, 이소프로판올, 에틸 카보네이트, 에틸 아세테이트, 벤질 알코올, 벤질 벤조에이트, 프로필렌 글리콜, 1,3-부틸글리콜 오일, 글리세롤 지방족 에스테르, 폴리에틸렌 글리콜 또는 소르비탄의 지방산 에스테르가 있다.When the formulation of the present invention is a solution or emulsion, a solvent, solubilizer or emulsifier is used as the carrier component, such as water, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, benzyl alcohol, benzyl benzoate, propylene glycol, 1 Fatty acid esters of, 3-butylglycol oil, glycerol aliphatic ester, polyethylene glycol or sorbitan.

본 발명의 제형이 현탁액인 경우에는 담체 성분으로서 물, 에탄올 또는 프로필렌 글리콜과 같은 액상의 희석제, 에톡실화 이소스테아릴 알코올, 폴리옥시에틸렌 소르비톨 에스테르 및 폴리옥시에틸렌 소르비탄 에스테르와 같은 현탁제, 미소결정성 셀룰로오스, 알루미늄 메타히드록시드, 벤토나이트, 아가 또는 트라칸트 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a suspension, liquid carrier diluents such as water, ethanol or propylene glycol, suspending agents such as ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol ester and polyoxyethylene sorbitan ester, microcrystals Soluble cellulose, aluminum metahydroxy, bentonite, agar or tracant and the like can be used.

본 발명의 제형이 계면-활성제 함유 클린징인 경우에는 담체 성분으로서 지방족 알코올 설페이트, 지방족 알코올 에테르 설페이트, 설포숙신산 모노에스테르, 이세티오네이트, 이미다졸리늄 유도체, 메틸타우레이트, 사르코시네이트, 지방산 아미드 에테르 설페이트, 알킬아미도베타인, 지방족 알코올, 지방산 글리세리드, 지방산 디에탄올아미드, 식물성 유, 라놀린 유도체 또는 에톡실화 글리세롤 지방산 에스테르 등이 이용될 수 있다.When the formulation of the present invention is a surfactant-containing cleansing, the carrier component is an aliphatic alcohol sulfate, an aliphatic alcohol ether sulfate, a sulfosuccinic acid monoester, an isethionate, an imidazolinium derivative, a methyltaurate, a sarcosinate, a fatty acid amide. Ether sulfates, alkylamidobetaines, aliphatic alcohols, fatty acid glycerides, fatty acid diethanolamides, vegetable oils, lanolin derivatives or ethoxylated glycerol fatty acid esters and the like can be used.

본 발명의 화장료 조성물은 피부 노화 방지 (피부 보호)의 용도를 갖는다. 본 명세서에서 용어 "피부 노화 방지"는 피부 노화 예방 및 치료를 포괄적으로 포함하는 의미를 갖는다. 또한, 본 명세서에서 "피부 노화 방지" 및 "피부 보호"는 특별한 언급이 없는 한 동일한 의미로 사용된다.The cosmetic composition of the present invention has the use of skin anti-aging (skin protection). As used herein, the term "anti-aging of skin" has the meaning encompassing comprehensively the prevention and treatment of skin aging. Also, in this specification, "anti-aging of skin" and "skin protection" are used in the same sense unless otherwise specified.

본 발명의 화장료 조성물은 섬유아세포의 증식 촉진, 콜라겐 합성의 촉진에 의한 피부 주름 개선과 피부 탄력 개선, 항산화 증대 및 보습력 향상을 통하여 피부 노화를 방지하며, 이와 같은 사실은 하기의 실시예에 명시되어 있다. 따라서, 본 발명의 용도인 피부 노화 방지 (즉, 피부 보호)는 주름 개선, 탄력 개선, 보습력 개선 및 피부 항산화능 개선 용도를 포함하는 것으로 해석된다. 더욱이, 본 발명의 화장료 조성물에서, 생약 추출물은 나노리포좀에 의해 내포되어 있기 때문에 피부침투 효과가 크게 증가하고, 제형의 안정성도 크게 개선된다.The cosmetic composition of the present invention prevents skin aging through the improvement of skin wrinkles and the improvement of skin elasticity, the increase of antioxidant activity, and the moisturizing ability by promoting the proliferation of fibroblasts, the promotion of collagen synthesis, and this fact is specified in the following examples. have. Therefore, skin aging prevention (ie, skin protection), which is the use of the present invention, is interpreted to include the use of wrinkle improvement, elasticity improvement, moisturizing improvement and skin antioxidant ability improvement. Furthermore, in the cosmetic composition of the present invention, since the herbal extract is contained by the nanoliposomes, the skin penetration effect is greatly increased, and the stability of the formulation is also greatly improved.

이하, 실시예를 통하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하고자 한다. 이들 실시 예는 오로지 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것으로서, 본 발명의 요 지에 따라 본 발명의 범위가 이들 실시예에 의해 제한되지 않는다는 것은 본 발명이 속하는 기술분야에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.Hereinafter, the present invention will be described in more detail with reference to Examples. These examples are only for illustrating the present invention in more detail, it is to those of ordinary skill in the art that the scope of the present invention is not limited by these examples in accordance with the gist of the present invention. Will be self-evident.

제조예 1: 각종 추출 용매를 이용한 생약추출물의 수득Preparation Example 1: Obtaining a Herb Extract Using Various Extraction Solvents

제조예 1-aPreparation Example 1-a

감초, 산수유, 백하수오 및 상백피 각 20 g을 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 분말화한 가루 20 g을 70% 에탄올 용액 1.5 ℓ에 첨가하고, 냉각 콘덴서가 장착된 환류 추출기에서 4시간 동안 가열 추출하였다. 그런 다음, 수득한 추출액을 와트만여과지 300 메쉬 여과포로 여과하고, 잔사를 동일한 방법으로 1회 더 추출한 후, 각각의 추출액을 합하여 와트만 5번 여과지로 다시 여과하며, 감압 농축기를 이용하여 용매를 제거하고, 동결 건조하여 건조 중량 4.89 g의 추출물을 수득하였다.20 g each of licorice, cornus oil, white sewage and lettuce were washed with purified water, dried and 20 g of powdered powder was added to 1.5 L of a 70% ethanol solution and heated and extracted for 4 hours in a reflux extractor equipped with a cooling condenser. . Then, the obtained extract was filtered with a 300 mesh filter cloth of Wattman filter paper, the residue was extracted once more in the same manner, and the respective extracts were combined and filtered again with filter paper of Wattman No. 5, and the solvent was removed using a vacuum concentrator. Removed and lyophilized to give an extract of 4.89 g dry weight.

제조예 1-bPreparation Example 1-b

감초, 산수유, 백하수오 및 상백피 각 20 g을 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 분말화한 가루 20 g을 1,3-부틸렌글리콜 용액 1.5 ℓ에 첨가하고, 제조예 1-a과 동일한 방법을 수행하여 건조중량 4.01 g의 추출물을 수득하였다.20 g each of licorice, cornus oil, white sewage and baekbaekpi were washed with purified water and dried, and then 20 g of powdered powder was added to 1.5 l of 1,3-butylene glycol solution, and the same method as in Preparation Example 1-a was performed. To give a dry weight of 4.01 g of an extract.

제조예 1-cPreparation Example 1-c

감초, 산수유, 백하수오 및 상백피 각 20g 을 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 분말화한 가루 20 g을 아세톤 1.5 ℓ에 첨가하고, 제조예 1-a과 동일한 방법을 수행하여 건조중량 4.72 g의 추출물을 수득하였다.20 g each of licorice, cornus oil, white sewage and baekbaekpi were washed with purified water and dried. Then, 20 g of powdered powder was added to 1.5 L of acetone, and the same procedure as in Preparation Example 1-a was carried out to obtain a dry weight of 4.72 g of extract. Obtained.

제조예 1-dPreparation Example 1-d

감초, 산수유, 백하수오 및 상백피 각 20 g 을 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 분말화한 가루 20 g을 정제수 1.5 ℓ에 첨가하고, 제조예 1-a과 동일한 방법을 수행하여 건조중량 1.32 g의 추출물을 수득하였다.20 g each of licorice, cornus oil, white sewage and baekbaekpi were washed with purified water and dried. Then, 20 g of powdered powder was added to 1.5 l of purified water, and the same procedure as in Preparation Example 1-a was carried out to extract a dry weight of 1.32 g. Obtained.

제조예 1-ePreparation Example 1-e

감초, 산수유, 백하수오 및 상백피 각 20 g 을 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 분말화한 가루 20 g을 70% 메탄올 1.5 ℓ에 첨가하고, 제조예 1-a과 동일한 방법을 수행하여 건조중량 4.19 g의 추출물을 수득하였다.20 g of licorice, cornus oil, white sewage and baekbaekpi were washed with purified water and dried. Then, 20 g of powdered powder was added to 1.5 L of 70% methanol and dried in the same manner as in Preparation Example 1-a, to obtain a dry weight of 4.19 g. An extract of was obtained.

제조예 1-fPreparation Example 1-f

감초, 산수유, 백하수오 및 상백피 각 20 g 을 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 분말화한 가루 20 g을 에틸아세테이트 용액 1.5 ℓ에 첨가하고, 제조예 1-a과 동일한 방법을 수행하여 건조중량 3.96 g의 추출물을 수득하였다.20 g each of licorice, cornus oil, white sewage and baekbaekpi were washed with purified water and dried. Then, 20 g of powdered powder was added to 1.5 L of ethyl acetate solution and dried in the same manner as in Preparation Example 1-a. An extract of was obtained.

제조예 1-gPreparation Example 1-g

감초, 산수유, 백하수오 및 상백피 각 20 g 을 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 분말화한 가루 20 g을 클로로포름 용액 1.5 ℓ에 첨가하고, 제조예 1-a과 동일한 방법을 수행하여 건조중량 4.27 g의 추출물을 수득하였다.20 g each of licorice, cornus oil, white sewage and baekbaekpi were washed with purified water and dried. Then, 20 g of powdered powder was added to 1.5 L of chloroform solution, and the same method as in Preparation Example 1-a, An extract was obtained.

제조예 1-hPreparation Example 1-h

감초, 산수유, 백하수오 및 상백피 각 20g 을 정제수로 세척하고 건조시킨 다음 분말화한 가루 20 g을 노말 부탄올 용액 1.5 ℓ에 첨가하고, 제조예 1-a과 동일한 방법을 수행하여 건조중량 3.77 g의 추출물을 수득하였다.20 g each of licorice, cornus oil, white sewage and baekbaekpi was washed with purified water and dried, and then 20 g of powdered powder was added to 1.5 L of a normal butanol solution, followed by the same method as Preparation Example 1-a to give a dry weight of 3.77 g An extract was obtained.

실험예 1: 섬유아세포 증식 효과Experimental Example 1 Fibroblast Proliferation Effect

인체 정상 섬유아세포 (한국 세포주은행)를 96-웰 마이크로 플레이트(96-well microplate)의 각 웰에 1 x 104 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지 (sigma사 구입)에서 24시간 동안 37℃에서 배양하였다. 이어, 상기 실시예 1-a 내지 1-h에서 제조한 각각의 생약 추출물이 최종 농도 100 ㎍/㎖로 포함된 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 실험군과 생약 추출물이 포함되지 않은 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 대조군을 24시간 동안 추가로 배양하였다. 그런 다음, MTT 용액 (3-(4,5-디메틸티아졸-2-일) 2,5-디페닐테트라졸륨 브로마이드: 5 mg/㎖)을 각각에 10 ㎕씩 첨가하고, 4시간 동안 배양한 후, 배지를 제거하고, 각 웰 당 100 ㎕의 디메틸 설폭시드 용액을 가하여 20분 동안 진탕시키고, 마이크로 플레이트 판독기 (microplate reader, Molecular Devices, 미합중국)를 이용하여 570 ㎚에서 상층액 의 흡광도를 측정하였다. 측정값을 하기의 수학식 1에 대입하여 세포 증식 효과를 산출하고, 그 결과를 하기 표 1에 나타내었다.Human normal fibroblasts (Korea Cell Line Bank) are seeded to 1 x 10 4 cells in each well of a 96-well microplate and incubated at 37 ° C. for 24 hours in DMEM medium (purchased by sigma). It was. Subsequently, each experimental herbal extract prepared in Examples 1-a to 1-h was replaced with serum-free DMEM medium containing a final concentration of 100 μg / ml and serum-free DMEM medium without herbal extracts Controls replaced with were further incubated for 24 hours. Then, 10 μl of MTT solution (3- (4,5-dimethylthiazol-2-yl) 2,5-diphenyltetrazolium bromide: 5 mg / ml) was added to each, and incubated for 4 hours. The medium was then removed, shaken for 20 minutes by addition of 100 μl of dimethyl sulfoxide solution per well and the absorbance of the supernatant was measured at 570 nm using a microplate reader (Molecular Devices, USA). . The measured values were substituted into the following Equation 1 to calculate the cell proliferation effect, and the results are shown in Table 1 below.

Figure 112005037956009-pat00001
Figure 112005037956009-pat00001

추출물extract 흡광도Absorbance 세포증식효과(%)Cell proliferation effect (%) 대조군Control 0.3250.325 -- 제조예 1-aPreparation Example 1-a 0.5010.501 41.641.6 제조예 1-bPreparation Example 1-b 0.4760.476 30.330.3 제조예 1-cPreparation Example 1-c 0.4850.485 35.435.4 제조예 1-dPreparation Example 1-d 0.4450.445 21.121.1 제조예 1-ePreparation Example 1-e 0.4840.484 34.334.3 제조예 1-fPreparation Example 1-f 0.4310.431 25.325.3 제조예 1-gPreparation Example 1-g 0.4960.496 38.638.6 제조예 1-hPreparation Example 1-h 0.4310.431 24.224.2

상기 표 1에서 알 수 있듯이, 추출물을 처리하지 않은 대조군와 비교하여, 본원 발명이 추출물을 100 ㎍/㎖ 농도에서 약 20-42%의 섬유아세포 증식 효과를 나타내고 있음을 알 수 있다.As can be seen in Table 1, it can be seen that the present invention shows a fibroblast proliferation effect of about 20-42% at 100 ㎍ / ㎖ concentration of the extract compared to the control not treated with the extract.

실험예 2: 생약추출물의 농도에 따른 세포증식 효과Experimental Example 2: Effect of Cell Proliferation According to the Concentration of Herbal Extracts

상기 실험예 1에서 섬유아세포 증식 효과가 가장 우수한 것으로 확인된 상기 제조예 1-a에서 제조된 추출물을 50, 100 또는 200 ㎍/㎖ 농도로, 실험예 1과 동일한 방법으로 세포 증식 효과를 측정하였고, 그 결과는 하기 표 2에 나타나 있다.In Example 1, the extract prepared in Preparation Example 1-a, which was found to have the best fibroblast proliferation effect, was measured at a concentration of 50, 100 or 200 ㎍ / ml, and the cell proliferation effect was measured in the same manner as in Experiment 1. The results are shown in Table 2 below.

농도 (㎍/㎖)Concentration (μg / ml) 흡광도 (570 nm)Absorbance (570 nm) 세포 증식 효과 (%)Cell proliferation effect (%) 대조군Control 0.3250.325 -- 5050 0.4250.425 32.4632.46 100100 0.4740.474 41.5741.57 200200 0.5210.521 57.2257.22

상기 표 2에서 볼 수 있듯이, 추출물은 농도-의존적으로 섬유아세포의 증식을 촉진시킴을 알 수 있고, 더불어 상기 실험예 1에서의 결과가 유의함을 확인할 수 있다.As can be seen in Table 2, it can be seen that the extract promotes the growth of fibroblasts in a concentration-dependent manner, and it can be confirmed that the results in Experimental Example 1 are significant.

실험예 3: 콜라겐 합성 증진 효과Experimental Example 3: Collagen Synthesis Enhancement Effect

인체 정상 섬유아세포 (한국 세포주은행)를 96-웰 마이크로 플레이트의 각 웰에 2 x 104 세포가 되도록 접종하고, DMEM 배지에서 37℃에서 24시간 동안 배양하였다. 이어, 상기 실시예 1-a에서 제조한 생약 추출물이 최종 농도 50, 100 또는 200 ㎍/㎖로 포함된 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 실험군과 생약추출물이 포함되지 않은 혈청이 없는 DMEM 배지로 교체한 대조군을 24시간 동안 추가로 배양하고, 아스코르브산 (50 g/㎖)을 첨가하여 콜라겐 합성을 촉진시킨 다음, 다시 24시간 동안 추가로 배양하였다. 그런 다음, 각 웰을 세척하고 혈청이 함유되지 않은 DMEM 배지로 교체한 후 24시간 추가로 배양하였다. 배양 후, 각 웰의 상층액을 모아 프로콜라겐 (procollagen) 타입 I C-펩타이드 (PICP) 양을 키트 (Takara, 일본국)를 이용하여 새로 합성된 콜라겐 양을 측정하였다. PICP 양은 ng/2x104 세포로 환산하였으며, 그 결과는 하기 표 3에 나타나 있다.Human normal fibroblasts (Korea Cell Line Bank) were seeded in each well of a 96-well microplate to be 2 × 10 4 cells and incubated for 24 hours at 37 ° C. in DMEM medium. Subsequently, the herbal extract prepared in Example 1-a was replaced with a serum-free DMEM medium containing a serum-free DMEM medium containing a final concentration of 50, 100 or 200 μg / ml and a serum-free DMEM medium containing no herbal extracts. One control was further incubated for 24 hours, ascorbic acid (50 g / ml) was added to promote collagen synthesis, followed by another 24 hours. Each well was then washed and replaced with serum-free DMEM medium and incubated for an additional 24 hours. After incubation, the supernatant of each well was collected and the amount of newly synthesized collagen was measured using a kit (Takara, Japan) for the amount of procollagen (procollagen) type I C-peptide (PICP). PICP amount was converted to ng / 2 × 10 4 cells, and the results are shown in Table 3 below.

농도 (㎍/㎖)Concentration (μg / ml) 콜라겐 합성량 (ng/2 x 104)Collagen Synthesis (ng / 2 x 10 4 ) 대조군Control 154154 50 50 187187 100100 205205 200200 248248

상기 표 3에서 볼 수 있듯이, 생약추출물의 농도가 증가함에 따라 콜라겐의 합성이 증가함을 알 수 있고, 이에 생약추출물이 탁월한 콜라겐 합성 증진 효과를 나타냄을 알 수 있다.As can be seen in Table 3, it can be seen that the synthesis of collagen increases as the concentration of the herbal extract increases, and thus it can be seen that the herbal extract shows an excellent collagen synthesis promoting effect.

실험예 4: 항산화 효과Experimental Example 4: Antioxidant Effect

실험예 4-1: 지질과산화반응 실험Experimental Example 4-1: Lipid Peroxidation Experiment

상기 실험예 1에서 섬유아세포 증식 효과가 가장 우수한 것으로 확인된 상기 제조예 1-a에서 제조된 추출물을 50, 100 또는 200 ㎍/㎖로 제조한 생약 추출물에 대하여 항산화 작용을 펜톤반응 (fenton reaction)에 의한 지질과산화반응계 (lipid peroxidation system)를 이용한 티오바르비츄릭산법 (TBA assay)으로 측정하였다.The fenton reaction of antioxidant activity against the herbal extract prepared in 50, 100 or 200 μg / ml of the extract prepared in Preparation Example 1-a, which was confirmed to have the best fibroblast proliferation effect in Experimental Example 1 It was measured by thiobarbituric acid method (TBA assay) using a lipid peroxidation system.

에틸리놀레이트 10 ㎕, 0.2% 소디움도데실설폭시드(SDS), 염화제일철 10 μmol, 과산화수소 2 μmol을 함유하는 25mM 트리즈마 (Trizma) 염산/0.75mM 염화칼륨완충액 5 ㎖에 생약추출물의 디메틸설폭시드 (DMSO) 시험용액을 가한 후 55℃에서 16시간동안 항온시킨 후, 4% 디부틸히드록실톨루엔(BHT) 50 ㎕를 가하여 반응을 정지시킨다. 이 용액 0.3 ㎖를 시험관에 넣고 0.05N 염산 3.0 ㎖, 0.67% 티오바르비츄릭산(TBA) 용액을 가하고 30분간 끓인다. 이 반응액을 냉각시킨 후 85% 부탄올 4.0 ㎖을 가하고 원심분리 후 부탄올층의 흡광도를 535 ㎚에서 측정하였다.Dimethylsulfoxide of the herbal extract in 5 ml of 25 mM Trizma hydrochloric acid / 0.75 mM potassium chloride buffer containing 10 μl of ethyl linoleate, 0.2% sodium dodecyl sulfoxide (SDS), 10 μmol of ferrous chloride, and 2 μmol of hydrogen peroxide. DMSO) After adding the test solution and incubating at 55 ° C. for 16 hours, 50 μl of 4% dibutylhydroxytoluene (BHT) is added to stop the reaction. 0.3 ml of this solution is added to a test tube, and 0.05 ml hydrochloric acid 3.0 ml and 0.67% thiobarbituric acid (TBA) solution are added and boiled for 30 minutes. After cooling the reaction solution, 4.0 ml of 85% butanol was added thereto, and the absorbance of the butanol layer was measured at 535 nm after centrifugation.

각 추출물의 항산화 효과는 다음의 수학식 2로 산출하였다. 그 결과는 하기 표 4에 나타나 있다.

Figure 112005037956009-pat00002
The antioxidant effect of each extract was calculated by the following equation. The results are shown in Table 4 below.
Figure 112005037956009-pat00002

Figure 112005037956009-pat00003
Figure 112005037956009-pat00003

추출물extract 항산화 작용(%)Antioxidant activity (%) 실험농도 (㎍/㎖)* Experimental concentration (㎍ / ㎖) * 1010 5050 100100 대조군Control 55 55 55 제조예 1-aPreparation Example 1-a 4848 6262 8383 제조예 1-bPreparation Example 1-b 4747 5959 8282 제조예 1-cPreparation Example 1-c 4141 5656 7373 제조예 1-dPreparation Example 1-d 1919 5252 6969 제조예 1-ePreparation Example 1-e 4040 6363 8080 제조예 1-fPreparation Example 1-f 2525 4949 8181 제조예 1-gPreparation Example 1-g 4242 6060 7979 제조예 1-hPreparation Example 1-h 2626 5050 7777

*3회 평균치* 3 times average

생약추출물은 대부분 높은 활성을 나타내었다, 비극성 용매 보다는 극성용매의 추출물에서 효과가 컸다.Most herbal extracts showed high activity, which was more effective in extracts of polar solvents than nonpolar solvents.

실험예 4-2: 자유라디칼 소거 실험Experimental Example 4-2: Free Radical Scavenging Experiment

자유 라디칼 DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl)는 시그마 사의 것을 사용하였다. DPPH는 안정한 자유라디칼로서 보라색을 나타내므로, 시료가 라디칼을 소거함에 따라 보라색이 제거되는 정도를 측정하는 것이다. 먼저 DPPH를 1.5x 10-4 M 농도로 메탄올에 녹여, 이 용액 500 ㎕를 시험관에 넣었다. 여기에 각 농도의 추출물을 메탄올에 녹여 500 ㎕를 넣고, 상온에서 30분간 반응 후 517 ㎚에서 흡광도를 측정하였다. 이때, 추출물이 메탄올에 녹지 않을 경우에는 디메칠설폭사이드 : 메탄올 = 4 : 1 용매를 사용하였다. 대조군으로서 실시예의 추출물 대신 아스콜빈산을 사용하였다. 각 추출물의 자유 라디칼 소거효과는 다음의 수학식 3을 이용하여 라디칼을 50% 소거하는 농도를 구하여 EC50으로 표시하였다. 그 결과는 하기 표 5에 나타나 있다.

Figure 112005037956009-pat00004
Free radical DPPH (1,1-diphenyl-2-picryl hydrazyl) was used as Sigma. Since DPPH is purple as a stable free radical, it is a measure of the extent to which purple is removed as the sample eliminates radicals. First, DPPH was dissolved in methanol at a concentration of 1.5 × 10 −4 M and 500 μl of this solution was placed in a test tube. The extract of each concentration was dissolved in methanol, 500 µl was added thereto, and the absorbance was measured at 517 nm after reaction at room temperature for 30 minutes. In this case, when the extract was not dissolved in methanol, dimethyl sulfoxide: methanol = 4: 1 solvent was used. Ascolic acid was used instead of the extract of Example as a control. The free radical scavenging effect of each extract was expressed as EC 50 by obtaining a concentration of 50% scavenging of radicals by using Equation 3 below. The results are shown in Table 5 below.
Figure 112005037956009-pat00004

Figure 112005037956009-pat00005
Figure 112005037956009-pat00005

추출물extract 자유리디칼 소거능(%)Free radical scavenging ability (%) 실험농도 (㎍/㎖)Experimental concentration (㎍ / ㎖) 1010 5050 100100 아스코빌 산Ascoville Mountain 10.510.5 10.510.5 10.510.5 제조예 1-aPreparation Example 1-a 1818 4646 6767 제조예 1-bPreparation Example 1-b 1616 4242 6666 제조예 1-cPreparation Example 1-c 1515 3939 6262 제조예 1-dPreparation Example 1-d 1111 3030 5151 제조예 1-ePreparation Example 1-e 1313 3535 5757 제조예 1-fPreparation Example 1-f 1515 3737 6161 제조예 1-gPreparation Example 1-g 1616 4141 6363 제조예 1-hPreparation Example 1-h 1515 3838 6060

표 5에서 보는 바와 같이 본 발명의 생약 추출물은 강력한 항산화제인 아스콜빈 산(비타민 C)과 비교할 때 강력한 활성을 나타내었다.As shown in Table 5, the herbal extract of the present invention showed a potent activity compared to ascorbic acid (vitamin C), a powerful antioxidant.

실험예 5: 생약 추출물을 함유하는 나노리포좀의 제조Experimental Example 5: Preparation of nanoliposomes containing herbal extracts

나노리포좀은 하기 표 6의 조성으로 A상에 B상을 첨가하고, 균일하게 습윤 시킨 후 C 상을 첨가하고 70-80℃까지 가열 혼합하였다. 이 용액을 600-1000 bar의 조건으로 고압 호모게나이저에 2-4회 통과 시킨후 냉각하여 지름 30-70 nm 입자 크기의 생약 추출물을 안정화시킨 나노리포좀을 얻었다.The nanoliposomes were added to phase A in the composition of Table 6 below, wetted uniformly, and then phase C was added and heated and mixed to 70-80 ° C. The solution was passed through a high-pressure homogenizer 2-4 times under conditions of 600-1000 bar and cooled to obtain nanoliposomes in which herbal extracts having a diameter of 30-70 nm were stabilized.

Prize 성 분ingredient 함량 (중량%)Content (% by weight) AA 프로필렌 글리콜Propylene glycol 4040 BB 레시틴lecithin 55 콜레스테롤cholesterol 2.52.5 세라마이드Ceramide 2.52.5 소듐스테아로일 락테이트Sodium Stearoyl Lactate 0.50.5 폴리솔베이트-80Polysorbate-80 0.50.5 스테아린산Stearic acid 0.50.5 CC 생약 추출물 (고형분)Herbal Extract (Solid) 1010 수산화 칼륨Potassium hydroxide 적량 Quantity 정제수Purified water To 100To 100

실시예 및 비교 실시예Examples and Comparative Examples

본 발명의 생약 추출물을 안정화한 나노리포좀을 포함하는 조성물 (실시예) 및 나노 리포좀을 함유하지 않은 조성물 (비교 실시예)을 다음의 조성으로 제조하였다.Compositions containing nanoliposomes stabilized with the herbal extracts of the present invention (examples) and compositions without nanoliposomes (comparative examples) were prepared in the following compositions.

성 분ingredient 실시예Example 비교 실시예Comparative Example 함량(중량%)Content (% by weight) 함량(중량%)Content (% by weight) 나노리포좀 (표 6)Nanoliposomes (Table 6) 1010 -- 생약 추출물 (고형분)Herbal Extract (Solid) -- 1010 AA 세토스테아릴알콜Cetostearyl alcohol 2.02.0 2.02.0 글리세릴스테아레이트Glyceryl Stearate 1.51.5 1.51.5 마이키로크리스탈린Mikey-Crystalline 0.70.7 0.70.7 스쿠알란Squalane 5.05.0 5.05.0 유동파라핀Liquid paraffin 3.03.0 3.03.0 트리옥타노인Trioctanoine 5.05.0 5.05.0 폴리솔베이트Polysorbate 1.21.2 1.21.2 솔비탄스테아레이트Sorbitan stearate 0.50.5 0.50.5 토코페롤아세테이트Tocopherol Acetate 0.20.2 0.20.2 마이크로메치콘Micromethicone 3.03.0 3.03.0 BHTBHT 0.050.05 0.050.05 BB 글리세린glycerin 4.04.0 4.04.0 1,3-부틸렌글리콜1,3-butylene glycol 2.02.0 2.02.0 EDTA-2NaEDTA-2Na 0.050.05 0.050.05 정제수Purified water To 100To 100 To 100To 100 향, 방부제Incense, preservative 적량Quantity 적량Quantity

실험예 6: 보습 효과Experimental Example 6: Moisturizing Effect

상기 실시예 및 비교 실시예에서 제조된 각 화장료의 보습력을 평가하기 위하여, 각 화장료가 도포된 피부를 대상으로 하여 수분 보유능 및 수분 증발량을 다음과 같이 측정하였다.In order to evaluate the moisturizing power of each cosmetic prepared in the above Examples and Comparative Examples, the moisture retention capacity and the water evaporation amount of the skin to which each cosmetic was applied were measured as follows.

실험예 6-1: 수분 보유능의 측정Experimental Example 6-1: Measurement of Water Retention Capacity

22℃ 및 상대습도 45%의 항온 항습실에서 상기 실시예 및 비교 실시예에서 제조된 각 화장료를 30명의 피시험자 하박 안쪽에 일정량 (0.03 g/16 ㎠)을 도포하고, 도포전, 도포 1시간 후 및 도포 2시간 후의 피부의 수분 함량을 측정하였으며, 아무런 처리를 하지 않은 정상 피부를 대조군으로 사용하였다. 측정 기기는 피부의 수분 함량에 따른 피부의 전기 용량을 측정하여 보습력을 측정하는 수분 함량측정기 (corneometer CM820, Conrage + Khazaka사, 독일연방국)를 사용하였다. 그 결과는 하기 표 6에 나타나 있다.In the constant temperature and humidity room of 22 ° C. and 45% RH, each cosmetic prepared in Examples and Comparative Examples was coated with a predetermined amount (0.03 g / 16 cm 2) in the inner half of 30 test subjects, before application and after 1 hour of application. And moisture content of the skin 2 hours after application was measured, and normal skin without any treatment was used as a control. As a measuring device, a moisture content meter (corneometer CM820, Conrage + Khazaka, Germany) was used to measure the moisturizing power by measuring the electric capacity of the skin according to the moisture content of the skin. The results are shown in Table 6 below.

구 분division 실시예Example 비교 실시예Comparative Example 대조군Control 도포전 피부 전기전도도Skin electrical conductivity before application 5050 5050 5050 도포 1시간후 피부 전기전도도Skin electrical conductivity 1 hour after application 8787 7474 5050 도포 2시간후 피부 전기전도도Skin electrical conductivity 2 hours after application 7676 6363 5050

실험예 6-2: 수분 증발량의 측정Experimental Example 6-2: Measurement of Water Evaporation Amount

팔의 상박 부위에 테입 스트리핑 (tape stripping)을 실시하여 피부의 방어막을 약화시킨 후, 실험예 4-1과 동일한 방법으로 피실험자에게 각 화장료를 도포한 후, 수분증발량기 (TEWA meter, koln, 독일연방국)를 이용하여 1시간, 2시간, 4시간 6시간, 8시간후를 15회씩 수분 증발량을 측정하여 평균값을 구하였다. 그 결과는 하기 표 9와 같다.After tape stripping on the upper arm of the arm to weaken the skin's protective film, apply the cosmetics to the subject in the same manner as in Experiment 4-1, and then use a moisture evaporator (TEWA meter, koln, Germany). Federated water evaporation was measured 15 times in 1 hour, 2 hours, 4 hours, 6 hours, and 8 hours, and the average value was obtained. The results are shown in Table 9 below.

구 분division 실시예 Example 비교 실시예Comparative Example 대조군Control 0시간 후 수분증발량Moisture evaporation after 0 hours 3.0%3.0% 3.0%3.0% 0.0%0.0% 1시간 후 수분증발량Moisture evaporation after 1 hour -8.7%-8.7% -4.6%-4.6% -0.3%-0.3% 2시간 후 수분증발량Water evaporation after 2 hours -7.5%-7.5% -0.8%-0.8% 0.1%0.1% 4시간 후 수분증발량Water evaporation after 4 hours -4.6%-4.6% 2.2% 2.2% 0.1%0.1% 6시간 후 수분증발량Water evaporation after 6 hours -2.1%-2.1% 2.8% 2.8% -0.2%-0.2% 8시간 후 수분증발양Evaporation after 8 hours -1.5%-1.5% 3.1%3.1% 0.0%0.0%

상기 실험예 6-1 및 6-2의 결과에서 보듯이, 본 발명의 실시예 화장료가 비교 실시예의 화장료에 비해서 피부의 전기 전도도가 높고, 적은 수분 손실량을 나타낸다. 따라서, 본 발명의 화장료가 우수한 보습 효과를 나타냄을 알 수 있다.As shown in the results of Experimental Examples 6-1 and 6-2, the cosmetics of the examples of the present invention have higher electrical conductivity of the skin and less water loss than the cosmetics of the comparative examples. Therefore, it can be seen that the cosmetic of the present invention exhibits an excellent moisturizing effect.

실험예 7: 피부탄력효과Experimental Example 7: Skin Elasticity Effect

본 발명의 조성물인 생약 추출물을 안정화한 나노리포좀을 함유하는 화장료의 피부 탄력 증진효과를 측정하였다.The skin elasticity enhancing effect of the cosmetic composition containing the nanoliposome stabilized herbal extract of the present invention was measured.

온도 24-26℃, 습도 75의 조건에서 20세 이상의 건강한 여성 30명 (평균연령 38세)을 2 그룹으로 나누고, A 그룹에는 실시예를, B 그룹에는 비교예의 제형을 눈가를 중심으로 하루 2회씩 (아침 및 저녁) 12주간 도포한 후, 피부탄력 측정기(Cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germary)를 이용하여 피부탄력을 측정하였다. 시험결과는 cutometer SEM 575의 R8(R8(12주)-R8(0주)) 값으로 기재하였는데, R8 값은 피부점탄성 (Vicoelasticity)의 성질을 나타내며, 결과는 하기 표 10에 기재되어 있다.Thirty healthy women (mean age 38 years old) over 20 years old (average age 38 years) were divided into two groups under the conditions of temperature 24-26 ° C and humidity 75. After 12 weeks of application (morning and evening), skin elasticity was measured using a skin elasticity measuring instrument (Cutometer SEM 575, C + K Electronic Co., Germary). The test results are described as R8 (R8 (12 weeks) -R8 (0 weeks)) values of cutometer SEM 575, where R8 values indicate the nature of the viscoelasticity, and the results are shown in Table 10 below.

실험 제형Experimental Formulation 피부탄력효과Skin elasticity effect 실시예Example 0.680.68 비교 실시예Comparative Example 0.340.34

표 10의 결과에서와 같이, 나노리포좀으로 안정화한 생약추출물을 함유한 실시예의 피부탄력은 생약추출물을 안정화하지 않고 직접 제형에 사용한 비교 실시예에 비해 2 배나 증가하였다. 따라서 생약추출물을 안정화한 나노리포좀을 함유한 실시예가 피부탄력증진에 있어 훨씬 더 뛰어난 효과를 나타냄을 알 수 있다.As shown in the results of Table 10, the skin elasticity of the examples containing the herbal extracts stabilized with nanoliposomes increased by two times compared to the comparative example used in the formulation directly without stabilizing the herbal extracts. Therefore, it can be seen that the embodiment containing the nanoliposomes stabilized herbal extract shows a much better effect on skin elasticity.

실험예 7: 피부침투효과Experimental Example 7: Skin Penetration Effect

본 발명의 생약추출물을 안정화한 나노리포좀을 함유한 화장료에 대한 피부침투 효과를 측정하였다.The skin penetration effect on the cosmetic containing nanoliposomes stabilized herbal extract of the present invention was measured.

Dermal Equivalent (DE)-인체 정상 섬유아세포 1 X 105 cell/㎖를 인체의 결합조직을 이루는 섬유조직과 유사한 겔 구조에 콜라겐 수용액 3 mg/㎖:5 X DEM : 2:2 소듐바이카보네이트와 200 mM Hepes 완충액이 포함된 0.05 N 수산화나트륨이 7:2:1로 혼합된 배지에 접종하여 5CO2, 37℃에서 7일 동안 배양하였다. 이를 3 ㎛ 다공성폴리카보네이트 (porous polycarbonate) 재질로 된 막 (membrane)에 의해 안쪽과 바깥쪽이 구분된 플레이트의 안쪽에 넣고 섬유아세포가 배양된 Derma Equivalent(DE) 표면 위에 표피각질형성세포 (Epidermal Keratinocyte) 1 X 105 cell/㎖ 세포를 접종하여 EGF와 BPE가 함유된 K-SFM 배지를 안쪽과 바깥쪽에 넣고 7일 동안 배양하였다. 그 후 플레이트 안쪽의 배지를 버려 공기가 배양세포의 표면에 접촉되도록 하고 바깥쪽에 10FBS가 함유된 K-SFM과 EGF가 들어있지 않은 DMEM이 동량으로 혼합된 배지를 넣고 2주간 배양하여 다층의 표피와 진피가 형성된 인공피부를 얻었다. 여기에 본 발명의 실험예 및 비교 실시예를 맨 위층의 인공피부 조직에 적용하여 4시간 배양 후 10FBS가 함유된 K-SFM과 물의 양을 HPLC로 분석하였다. 시험결과는 하기 표 11에 나타나 있다.Dermal Equivalent (DE) -human normal fibroblasts 1 X 10 5 cells / mL in a gel structure similar to that of human connective tissue 3 mg / mL: 5 X DEM: 2: 2 sodium bicarbonate and 200 0.05 N sodium hydroxide containing mM Hepes buffer was inoculated in a medium mixed with 7: 2: 1 and incubated at 5CO 2 , 37 ° C for 7 days. It was placed inside a plate separated from the inside and the outside by a membrane made of a 3 μm porous polycarbonate material, and epidermal Keratinocyte on the surface of Derma Equivalent (DE) where fibroblasts were cultured. ) Inoculated with 1 X 10 5 cell / ㎖ cells and cultured for 7 days in the inner and outer K-SFM medium containing EGF and BPE. Afterwards, the medium inside the plate was discarded to allow the air to come into contact with the surface of the cultured cells. The medium was mixed with K-SFM containing 10FBS and DMEM without EGF in the same amount and incubated for 2 weeks. Artificial skin with dermis was obtained. The experimental and comparative examples of the present invention were applied to the artificial skin tissue of the top layer, and after 4 hours of incubation, the amounts of 10-FBS-containing K-SFM and water were analyzed by HPLC. The test results are shown in Table 11 below.

배지 중의 생약 추출물의 양 (㎍/㎖)Amount of herbal extract in the medium (µg / ml) 실시예Example 비교 실시예Comparative Example 40.540.5 2.92.9

실험결과 표 11에서와 같이, 본 발명의 나노리포좀으로 안정화한 생약추출물을 함유한 화장료는 생약추출물을 그대로 사용한 비교예에 비해 10배 이상의 피부 침투 효과가 우수함을 알 수 있다. 이는 본 발명의 나노리포좀의 평균입자 크기가 30-70 ㎚로 아주 작아 피부침투가 용이하기 때문이다. 따라서, 상기의 실험예 7의 피부탄력 증진 효과에 있어서, 본 발명의 실시예는 피부 침투효과가 비교 예보다 우수하여 좀 더 우수한 피부탄력 증진효과를 보이고 있음을 알 수 있다.Experimental results As shown in Table 11, the cosmetic containing the herbal extracts stabilized with the nanoliposomes of the present invention can be seen that the skin penetration effect is more than 10 times better than the comparative example using the herbal extracts as it is. This is because the average particle size of the nanoliposome of the present invention is very small, 30-70 nm, so that skin penetration is easy. Therefore, in the above-mentioned skin elasticity enhancing effect of Experimental Example 7, it can be seen that the embodiment of the present invention exhibits an excellent skin elasticity enhancing effect because the skin penetration effect is superior to the comparative example.

실험예 8: 피부 자극성 시험Experimental Example 8: Skin irritation test

상기 제조예에서 따라 제조된 생약추출물의 피부 자극성을 알아보기 위하여, 건강한 성인 남,여 30명을 대상으로 양팔 하박부에 5x20 ㎝ 부위에 각 시료의 일정량 (약 0.1 g)을 24시간 동안 첩포한 후, 제거하고 1시간 및 24시간이 경과한 다음, 하기의 판정 기준에 의하여 육안으로 피부 상태 변화를 판독하였고, 자극율은 다음 수학식 4에 따라 계산하였다. 실험 결과는 하기의 표 12에 나타나 있다.In order to examine the skin irritation of the herbal extract prepared according to the preparation example, a certain amount (about 0.1 g) of each sample was patched for 24 hours on 5x20 cm in the lower part of both arms for 30 healthy adults males and females. Then, after 1 hour and 24 hours after removal, the skin condition change was read visually by the following criteria, and the stimulation rate was calculated according to the following equation (4). The experimental results are shown in Table 12 below.

판정기준Criteria

- : 홍반이나 특이한 현상 없음-: No erythema or unusual phenomenon

+- : 주위보다 약간 붉어짐+-: Slightly reddish

+ : 주위보다 현저히 붉어짐+: Significantly redder than the surroundings

++ : 주위보다 심하게 붉어지고 부풀음++: Severe reddening and swelling around

Figure 112005037956009-pat00006
Figure 112005037956009-pat00006

제조예Production Example 판정결과Judgment result 자극율 (%)Stimulation rate (%) ++++ ++ +-+- -- 1-a1-a -- -- 22 2828 2.22.2 1-b1-b -- -- 1One 2929 1.11.1 1-c1-c -- -- 22 2828 2.22.2 1-d1-d -- -- 22 2828 2.22.2 1-e1-e -- -- 1One 2929 1.11.1 1-f1-f -- -- 33 2727 3.33.3 1-g1-g -- -- 33 2727 3.33.3 1-h1-h -- -- 1One 2929 1.11.1

상기 표 12의 피부 자극성 실험 결과에서 알 수 있듯이, 본 발명의 추출물은 피부 자극이 없음을 알 수 있다.As can be seen from the skin irritation test results of Table 12, the extract of the present invention can be seen that there is no skin irritation.

이하 상기한 실험예의 결과를 근거로 하여 본 발명의 나노리포좀으로 안정화한 생약추출물 함유하는 화장료를 조성하여 제시한다. 그러나, 본 발명의 조성물을 하기의 제형예들로 한정하고자 하는 것은 아니다.Hereinafter, based on the results of the experimental example described above, a cosmetic composition containing the herbal extract stabilized with the nanoliposome of the present invention is presented. However, the composition of the present invention is not intended to be limited to the following formulation examples.

제형예 1: 유연화장수(스킨로션)Formulation Example 1: Softener (Skin Lotion)

하기 표에 나타난 바와 같이 유연화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.As shown in the following table, the softening lotion was prepared according to a conventional method.

배합 성분Compounding ingredients 함량 (중량%)Content (% by weight) 나노리포좀Nanoliposomes 1.01.0 1.3-부틸렌글리콜1.3-butylene glycol 6.06.0 글리세린glycerin 4.04.0 올레일알코올Oleyl alcohol 0.10.1 폴리솔베이트 20Polysorbate 20 0.50.5 에탄올ethanol 15.015.0 벤조페논-9Benzophenone-9 0.050.05 향,방부제Incense, preservative 미량a very small amount 정제수Purified water to 100to 100

제형예 2. 영양화장수(밀크로션)Formulation Example 2. Nutrients (Milk Lotion)

하기 표에 나타난 바와 같이 영양화장수를 통상의 방법에 따라 제조하였다.Nutrients were prepared according to a conventional method as shown in the table below.

배합 성분Compounding ingredients 함량 (중량%)Content (% by weight) 나노리포좀Nanoliposomes 3.03.0 프로필렌글리콜Propylene glycol 6.06.0 글리세린glycerin 4.04.0 트리에탄올아민Triethanolamine 1.21.2 토코페닐아세테이트Tocophenyl Acetate 3.03.0 유동파라핀Liquid paraffin 5.05.0 스쿠알란Squalane 3.03.0 마카다이아너트오일Macadamia Nut Oil 2.02.0 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.51.5 솔비탄세스퀴올레이트Sorbitan sesquioleate 1.01.0 카르복시비닐 폴리머Carboxyvinyl Polymer 1.01.0 비에치티이Bietchiti 0.010.01 EDTA-2NaEDTA-2Na 0.010.01 향,방부제Incense, preservative 미량a very small amount 정제수Purified water to 100to 100

제형예 3. 영양크림Formulation Example 3. Nutrition Cream

하기 표에 나타난 바와 같이 영양크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.Nutritious cream was prepared according to a conventional method as shown in the following table.

배합 성분Compounding ingredients 함량 (중량%)Content (% by weight) 나노리포좀Nanoliposomes 10.010.0 세토스테아릴알콜Cetostearyl alcohol 2.02.0 글리세릴스테아레이트Glyceryl Stearate 1.51.5 트리옥타노인Trioctanoine 5.05.0 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 1.21.2 솔비탄스테아레이트Sorbitan stearate 0.50.5 스쿠알란Squalane 5.05.0 유동 파라핀Floating paraffin 3.03.0 싸이클로메치콘Cyclomethicone 3.03.0 비에이치티이BH 0.050.05 델타-토코페롤Delta-tocopherol 0.20.2 농글리세린Concentrated glycerin 4.04.0 1,3-부틸렌글리콜1,3-butylene glycol 2.02.0 산타검Santa sword 0.10.1 EDTA-2NaEDTA-2Na 0.050.05 향, 방부제Incense, preservative 미량a very small amount 정제수Purified water to 100to 100

제형예 4. 마사지크림Formulation Example 4 Massage Cream

하기 표에 나타난 바와 같이 마사지크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.Massage cream was prepared according to a conventional method as shown in the table below.

배합 성분Compounding ingredients 함량 (중량%)Content (% by weight) 나노리포좀Nanoliposomes 1.01.0 프로필렌글리콜Propylene glycol 6.06.0 글리세린glycerin 4.04.0 트리에탄올아민Triethanolamine 0.50.5 밀납Beeswax 2.02.0 토코페릴아세테이트Tocopheryl Acetate 0.10.1 폴리솔베이트 60Polysorbate 60 3.03.0 솔비탄세스퀴올레이트Sorbitan sesquioleate 2.52.5 세테아릴알코올Cetearyl Alcohol 2.02.0 유동파라핀Liquid paraffin 30.030.0 카르복시비닐폴리머Carboxy Vinyl Polymer 0.50.5 향, 방부제Incense, preservative 미량a very small amount 정제수Purified water to 100to 100

제형예 5. 팩Formulation Example 5 Pack

하기 표에 나타난 바와 같이 팩을 통상의 방법에 따라 제조하였다.Packs were prepared according to conventional methods as shown in the table below.

배합 성분Compounding ingredients 함량 (중량%)Content (% by weight) 나노리포좀Nanoliposomes 2.02.0 프로필렌글리콜Propylene glycol 2.02.0 글리세린glycerin 4.04.0 카르복시비닐 폴리머Carboxyvinyl Polymer 0.30.3 에탄올ethanol 7.07.0 피이지-40 히드로게네이티드 캐스터 오일Fiji-40 Hydrogenated Castor Oil 0.80.8 트리에탄올아민Triethanolamine 0.30.3 비에치티이Bietchiti 0.010.01 EDTA-2NaEDTA-2Na 0.010.01 향, 방부제Incense, preservative 미량a very small amount 정제수Purified water to 100to 100

상술한 바와 같이, 본 발명은 감초, 황백, 백하수오, 상백피 및 이들의 조합으로 구성된 군으로부터 선택되는 추출물이 내포된 나노리포좀을 유효성분으로 포함하는 피부노화 방지용 화장료 조성물을 제공한다. 본 발명의 화장료 조성물은 섬유아세포의 증식 촉진, 콜라겐 합성의 촉진에 의한 피부 주름 개선과 피부 탄력 개선, 보습력 향상 및 항산화 효과를 통하여 피부 노화를 방지한다. 더욱이, 본 발명의 화장료 조성물에서, 생약 추출물은 나노리포좀에 의해 내포되어 있기 때문에 피부침투 효과가 크게 증가하고, 제형의 안정성도 크게 개선된다.As described above, the present invention provides a cosmetic composition for preventing skin aging comprising nanoliposomes containing an extract selected from the group consisting of licorice, yellowish white, baekshou, baekbaekpi and combinations thereof as an active ingredient. The cosmetic composition of the present invention prevents skin aging through the improvement of skin wrinkles and the improvement of skin elasticity, the moisturizing ability and the antioxidant effect by promoting the growth of fibroblasts, the promotion of collagen synthesis. Furthermore, in the cosmetic composition of the present invention, since the herbal extract is contained by the nanoliposomes, the skin penetration effect is greatly increased, and the stability of the formulation is also greatly improved.

Claims (6)

감초, 산수유, 백하수오 및 상백피로 구성된 생약추출물을 안정화한 나노리포좀을 유효성분으로 포함하는 피부노화 방지용 화장료 조성물.A cosmetic composition for preventing skin aging comprising nanoliposomes stabilized with herbal extracts consisting of licorice, cornus, baekshou and baekbaekpi as active ingredients. 제 1 항에 있어서, 생약추출물은 (a) 물, (b) 탄소수 1-4의 무수 또는 함수 저급 알코올, (c) 아세톤, (d) 에틸 아세테이트, (e) 클로로포름 또는 (f) 1,3-부틸렌글리콜을 추출 용매로 하여 수득한 것임을 특징으로 하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물.The herbal extract of claim 1, wherein the herbal extract comprises (a) water, (b) anhydrous or hydrous lower alcohol having 1-4 carbon atoms, (c) acetone, (d) ethyl acetate, (e) chloroform or (f) 1,3 A cosmetic composition for preventing skin aging, characterized in that obtained by using butylene glycol as an extraction solvent. 제 1 항에 있어서, 상기 생약 추출물은 나노리포좀 총 중량에 대하여 0.01-40 중량%로 함유된 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물.The cosmetic composition for preventing skin aging according to claim 1, wherein the herbal extract is contained in an amount of 0.01-40% by weight based on the total weight of nanoliposomes. 제 1 항에 있어서, 상기 나노리포좀을 화장료 총 중량에 대하여 0.0001-20 중량%로 함유하는 화장료 조성물. The cosmetic composition according to claim 1, wherein the cosmetic composition comprises 0.0001-20% by weight of the nanoliposome with respect to the total weight of the cosmetic. 제 1 항 내지 제 4 항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 나노리포좀은 폴리올, 계면활성제, 인지질, 지방산 및 물을 포함하는 혼합물에 의해 제조된 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물.The cosmetic composition for preventing skin aging according to any one of claims 1 to 4, wherein the nanoliposomes are prepared by a mixture comprising a polyol, a surfactant, a phospholipid, a fatty acid, and water. 제 1 항에 있어서, 상기 화장료 조성물은 용액, 현탁액, 유탁액, 페이스트, 겔, 크림, 로션, 파우더, 비누, 계면활성제-함유 클린싱, 오일, 분말 파운데이션, 유탁액 파운데이션, 왁스 파운데이션 및 스프레이로 구성된 군으로부터 선택되는 제형을 갖는 것을 특징으로 하는 피부노화 방지용 화장료 조성물.The composition of claim 1 wherein the cosmetic composition consists of a solution, suspension, emulsion, paste, gel, cream, lotion, powder, soap, surfactant-containing cleansing, oil, powder foundation, emulsion foundation, wax foundation and spray Cosmetic composition for preventing skin aging, characterized in that it has a formulation selected from the group.
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