KR100364288B1

KR100364288B1 - 표피성장인자를 함유하는 피부보호 화장료 조성물

Info

Publication number: KR100364288B1
Application number: KR1019990057742A
Authority: KR
Inventors: 김범준; 조병기
Original assignee: 주식회사 대웅; 주식회사 코리아나화장품
Priority date: 1999-12-15
Filing date: 1999-12-15
Publication date: 2002-12-26
Also published as: KR20010056327A

Abstract

본 발명은 기존 화장료 성분중 하나인 비타민 C와 함께 표피성장인자(Epidermal growth factor: EGF)를 함유하는 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 화장료 조성물은 EGF를 함유함으로써 비타민 C의 피부미용 효과를 현저히 향상시키고, 이들 성분이 함유된 화장료가 가지고 있는 임상적 효능효과의 미약, 가시적 임상결과에 필요한 사용기간의 장기화 등 문제점을 해결할 수 있었다.

본 발명의 화장료 조성물에서 EGF는 화장료 총 중량에 대하여 0.00001∼1중량%, 바람직하게는 0.0001∼0.1중량%의 양으로 함유된다.

Description

표피성장인자를 함유하는 피부보호 화장료 조성물{Skin care composition containing Epidermal Growth Factor}

본 발명은 비타민 C(L-ascorbic acid)와 함께 표피성장인자인 Epidermal growth factor(EGF)를 함유함으로써, 비타민 C의 피부미용 효과를 향상시키고 이 성분이 가지고 있는 화장료로서의 문제점을 개선한 피부보호 화장료 조성물에 관한 것이다.

표피, 진피, 피하지방으로 구성되어 있는 피부는 인체를 이루고 있는 가장 큰 기관으로 보호기능과 장벽기능, 온도조절기능, 배설기능, 호흡기능 등 다양한 역할을 담당하고 있는 아주 중요한 기관이다. 그러나, 나이가 들면서 피부는 그 기능이 급격하게 저하되고, 이로 인한 다양한 변화가 오면서 노화되어 가게 된다. 노화에 따른 피부의 생리적 변화로는 피부의 구성 성분인 표피, 진피 및 피하조직의 두께가 얇아지는 현상, 피부장벽의 기능을 맡고있는 Lipid barrier의 lipid 조성과 함량이 변화하면서 그 기능이 급격하게 저하됨으로써 피부의 수분함량이 떨어지고 피부가 건조해지는 현상, 기미, 주근깨, 색소침착 또는 다양한 피부 병변이 유발되는 현상 등이 있다. 특히, 자외선량의 증가와 대기오염 및 현대인의 과도한 피로와 스트레스 등으로 인해 생성되는 반응성이 높은 활성산소와 자유라디칼은 생체성분(단백질, 핵산, 세포막 지질 등)을 산화시키거나 변성시킴으로써 피부노화의 주원인으로 작용한다. 따라서 피부노화에 따른 주름형성, 피부 탄력감소, 색소침착, 기미, 주근깨, 건조 등은 화장료 분야에서 피부 보호 및 미용 차원에서 중요한 과제로 가장 많이 연구되어 지고 있는 영역중 하나이다.

이러한 피부노화에 따른 문제점을 해결하기 위한 다양한 화장료 조성물이 연구되어지고 있는데, 피부의 주름개선 효과는 현재 일부 가시적인 성과를 보이고 있는 상황이다. 일본 특허공개 평5-246838호에는 콜라겐 합성에 따른 피부 주름의 개선 방법이 소개되어 있는데, 이에 의하면, 나이가 들면서 콜라겐을 분해하여 콜라겐 대사를 원활하게하는 콜라게나제(collagenase)의 활성이 저하되면 가교형 콜라겐의 생성이 증가되어 피부조직의 주름 형성이 증가하게된다.

상기한 콜라겐 합성 과정에 필수적인 비타민 C를 함유하는 화장료 조성물이 피부주름개선, 자외선차단, 기미, 주근깨, 검버섯 등의 색소침착에 효과적이라는 보고가 있다. (USP4,938,969, USP4,772,591, EP0533667)

비타민 C는 피부가 이용할 수 있는 생물학적인 활성을 갖고 있는 형태로 골격, 치아, 혈관이 튼튼해지도록 돕고 면역기능을 돕는 기능을 가지고 있다. 또한, 비타민 C는 콜라겐 합성과정에 관여하여 콜라겐 합성을 촉진하는 기능을 가지고 있는데, 콜라겐 합성의 유전정보를 제공하는 mRNA의 합성을 촉진하고, 과립형 질내세망(rER)에서 콜라겐 합성에 중요한 Hydroxyprolin의 Hydroxylation 과정의 Co-factor로 작용한다. Hydroxyproline은 콜라겐 Polypeptide의 10% 정도를 차지하고 있으며 동물에만 존재하는데, Prolin과 α-Ketoglutarate가 산소(O₂)가 존재하는 조건 하에서 Prolyl hydroxylase에 의해 Hydroxylation 됨으로써 생합성 되며, 이 Hydroxylation 과정에 비타민 C가 Co-factor로 작용하게 되는 것이다. 즉 비타민 C는 Prolyl hydroxylase의 활성을 촉진하여 Hydroxyprolin 생합성을 촉진함으로써, Triple helix 구조인 콜라겐의 생합성을 촉진하여 피부주름 개선 효과를 주게 되는 것이다. Prolyl hydroxylase는 UVA에 의해 그 활성이 저해를 받는데, 비타민 C에는 자외선 차단 기능도 있어 UVA에 의한 Prolyl hydroxylase의 활성 저해를 차단하는 효과도 가지고 있다. 비타민 C에 의한 자외선 차단효과는 기존의 자외선 차단제와는 다른 작용으로 수행되는데, 이는 UVA와 UVB의 스펙트럼 선상에 비타민 C가 흡수할 수 있는 영역이 전혀 없는 것으로 알 수 있다. 비타민 C의 자외선 차단기능은 UVB 보다는 UVA에 대해 더 강하지만 UVB로 인해 발생하는 홍반 및 부종을 충분히 감소시킬 수 있다. 이런 다양한 생물학적인 기능을 갖고 있는 비타민 C는 일단 피부에 들어오면 저장되는 효능이 있어서 사용을 중단해도 장시간 동안 그 효능을 유지할 수 있다.

또한, 피부 내에 비타민 C가 부족할 경우, 이미 형성된 콜라겐의 분해가 촉진되어 Hydroxyproline이 뇨에서 다량 검출됨을 볼 수 있어, 비타민 C가 콜라겐 합성 뿐 아니라 분해억제에도 효과적이라는 것을 알 수 있다.

비타민 C는 피부, 혈액 및 기타 조직에서 강력한 생체 항산화제로 작용하는데, 두 개의 전자를 받아 Dehydro-L-ascorbic acid 형태로 쉽게 산화되는 당유사 구조(Sugarlike structure)로서, 생체 내에서 반응성이 높은 활성산소, 자유라디칼 및 과산화물에 의한 생체성분(단백질, 핵산, 세포막 지질 등)의 산화 또는 변성을 방지함으로써 피부노화의 원인을 차단하는 효과를 가지고 있다.

아울러, 비타민 C는 색소침착 억제 효과를 갖고 있는데, 이는 색소침착과 깊은 관련이 있는 멜라닌 생성 억제 효과를 가지고 있기 때문이다. 비타민 C는 멜라닌 형성에 중요한 티로신나제의 활성을 억제하고, 산화과정에 의해 형성된 산화형 멜라닌을 다시 환원시켜 환원형 멜라닌으로 변화시킴으로써 멜라닌에 의한 색소침착증을 개선시키는 효과를 가지고 있다.

이외에도 비타민 C의 생리적 활성은 다양하여, 생체내 엽산대사 및 아미노산의 대사과정에 관여하며, 면역시스템계에서도 매우 중요한 역할을 담당하여 백혈구의 식균작용을 도와주고, 감염이 전개되는 동안 백혈구의 이동을 촉진하여 감염을 억제하고 백혈구의 세포막을 프리라디칼로부터 보호함은 물론 바이러스 증식 억제물질인 인터페론의 생합성을 증가시키는 작용을 하여, 다양한 감염성 질환에 대한 생체의 저항력을 상승시켜준다. 이와 같은 비타민 C는 대부분 동물들의 경우 포도당(글루코스)으로부터 생합성되는데, 사람은 포도당(글루코스)으로부터 비타민 C로 전환되는데 필요한 효소가 부족하여 생합성을 할 수 없으므로 외부로부터 공급받아야 한다. 뿐만아니라 비타민 C는 열, 빛, 수분, 산소 등에 매우 민감하여 불안정하고, 수용성으로 인하여 지용성 비타민에 비해 체내 저장능력도 아주 낮기 때문에, 음식 또는 기타 방법으로 계속 공급해 주어야한다. 이와 같이 비타민 C가 결핍되는경우에는 콜라겐 생합성의 저하로 인해 주름이 형성되며, 피로하고, 피부가 거칠어지며, 감염에 대한 저항력이 떨어지고, 모세관 출혈이 나타나는 등 다양한 피부보호 기능이 저하되어 피부병변이 발생하며, 장기적인 결핍인 경우 괴혈병과 같은 심각한 질병을 유발할 수도 있다. 따라서 적정 1일 권장량을 섭취하고, 피부보호를 위해 적절한 비타민 C 함유 경피 흡수제로서의 화장료를 사용해야만 한다.

수용성 상태로 피부에 도포 했을 때 비타민 C는 이온화되지 않은 조건에서 피부장벽을 쉽게 통과하여 흡수되는데, 비이온 상태를 유지하기 위해서는 비타민 C 용액의 산도(pH)가 반드시 4.2 이하 이어야한다. 이런 조건하에서 피부에 비타민 C를 발랐을 때 약 15% 정도가 48시간 이내에 피부에 흡수될 수 있다. 일단 피부 내로 들어온 비타민 C는 안정화되어져 물이나 기타 문지름 등에 의해 제거되지 않고 피부에 축적되며, 비타민 C를 입을 통해 경구투여 했을 경우, 혈액을 통해 피부까지 도달하는 양은 미량으로 피부 미용을 위해서는 피부에 직접 비타민 C를 바르는 것이 효과적이다. 비타민 C의 피부 축적량은 피부에 도포 했을 때가 입을 통한 경구투여보다 20 내지 40배 정도 높기 때문에 현재 외용제에 비타민 C를 사용하는 연구가 활발히 진행되고 있다.

본 발명의 목적은 비타민 C의 효과는 향상시키고 이것이 함유된 화장료의 문제점은 개선하고자 하는 것이다. 구체적으로, 본 발명의 목적은 여드름 치료, 피부 주름 개선, 항산화 효과에 의한 피부 노화의 방지, 기미, 주근깨, 검버섯 등 색소침착의 개선, 피부 탄력 증진, 손상피부의 치료, 자외선 차단, 미백효과 및 보습효과 등 화장료로서의 효능은 현저하게 향상되었으면서도 임상적 효능효과의 미약, 가시적 임상결과에 필요한 사용기간의 장기화 등의 부작용은 완화된 화장료 조성물을 제공하고자 하는 것이다.

이와 같은 목적을 달성하기 위하여 본 발명은 기존 피부개선 성분으로써 비타민 C와 함께 이들 성분의 효과를 향상시키고, 피부 자극성을 완화시키는 성분으로써 표피성장인자(Epidermal growth factor: EGF)를 함유하는 화장료 조성물을 제공하는 것으로 수행된다.

본 발명은 여드름 치료, 피부 주름 개선, 항산화 효과에 의한 피부 노화의 방지, 기미, 주근깨, 검버섯 등 색소침착의 개선, 손상피부의 치료, 자외선 차단, 등을 목적으로 하여 사용하고 있는 비타민 C와 함께 EGF를 함유하는 피부보호 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명자들은 표피성장인자인 Epidermal growth factor(EGF)가 여드름 치료, 피부 주름 개선, 항산화 효과에 의한 피부 노화의 방지, 기미, 주근깨, 검버섯 등 색소침착의 개선, 손상피부의 치료, 자외선 차단, 등을 위해 치료용 외용제 및 화장료에 널리 사용되고 있는 비타민 C의 효과를 현저하게 향상시키고, 이 성분이 가지는 임상적 효능효과의 미약, 가시적 임상결과에 필요한 사용기간의 장기화 등 문제점들을 효과적으로 완화시킬 수 있음을 발견하여 본 발명을 완성하였다.

EGF는 외배엽 및 중배엽에서 기원하는 다양한 상피세포의 강력한 세포분열 촉진인자로서 신체의 체액 중에 널리 분포되어 있고 뇨와 모유 등에 고농도로 존재하는(Capenter, 1985) 53개의 아미노산 잔기를 가진 Single polypeptide로 분자량은 6,200 daltons이다.(Capenter and Cohen, 1979: Capenter and Wahl, 1990) EGF는 1962년 Cohen이 성숙쥐 수컷의 턱밑샘으로부터 분리, 동정하였고 1972년 Savage와 Taylor 등은 Mouse EGF의 1차 구조와 생리적인 작용에 필수적인 역할을 하는 3개의 intramolecular disulfide bonds의 위치를 확인하였다. 사람의 표피성장인자(Human EGF, hEGF)는 1975년 Gregory가 임산부의 뇨에서 추출한 위산 분비억제 호르몬인 Urogastron human EGF와 동일한 것임을 증명하고 구조를 확인하였다. EGF는 상피세포, 내피세포 및 섬유아세포 세포증식의 강력한 촉진제로 작용하며, 상피세포 결손시 상피세포의 이동과 증식을 촉진시키기 때문에 상처치유 효과가 우수하다. 본 발명에 사용된 EGF는 재조합 대장균으로부터 순수 분리 정제한 것으로 인간의 hEGF와 동일하다는 것이 증명되었다. (US5,652,120, JP2609515, EP652954, KR102993, KR107023, KR110123, KR114856)

본 발명은 EGF를 함유함으로써 비타민 C(L-ascorbic acid)의 피부미용 효과를 증진시키고, 비타민 C가 가지고 있는 임상적 효능효과의 미약, 가시적 임상결과에 필요한 사용기간의 장기화 등 문제점을 개선시킨 피부보호 화장료 조성물에 관한 것이다.

본 발명의 화장료에서 EGF는 화장료 총 중량에 대하여 0.00001∼1중량%, 바람직하게는 0.0001∼0.1중량%의 함량으로 함유되고, 비타민 C는 화장료 총 중량에대하여 0.01∼20중량%, 바람직하게는 0.05∼10.0중량%의 함량으로 함유된다.

본 발명에 사용된 EGF는 재조합 대장균(E. coliJM101)을 반회분식(Fed-batch) 방법으로 48∼72시간 동안 발효시킨 후 발효 상등액을 Amberchrome CG71 chromatography와 Q-sepharose chromatography 방법으로 순수 분리함으로써 정제한다. (US5,652,120, JP2609515, EP652954, KR102993, KR107023, KR110123, KR114856)

본 발명의 화장료 조성물은 그 제형에 있어서 특별히 한정되는 바가 없는데, 예를 들면, 유연화장수, 수렴화장수, 영양화장수, 아이크림, 영양크림, 맛사지크림, 클렌징크림, 클렌징폼, 클렌징워터, 파우더, 엣센스, 팩 등의 제형을 가질 수 있다.

또한, 각 제형의 화장료 조성물에 있어서, 상기한 EGF를 포함하여 피부개선 원료로써 비타민 C 이외의 성분들을 화장료의 제형 또는 사용목적 등에 따라 당업자가 어려움 없이 적의 선정하여 배합할 수 있다.

이하, 시험예를 들어 본 발명의 구성 및 효과를 상세히 설명하고자 하나, 본 발명을 이들 시험예에 한정하고자 하는 것은 아니다

시험예를 위하여 하기 표 1과 같이 본 발명에 따라 비타민 C와 함께 EGF를 함유하는 조성물(실시예) 및 비타민 C 만을 함유하는 조성물(비교실시예)이 제조되었다.

표 1.

실시예 및 비교실시예

단위(중량부)
배합성분	실시예	비교실시예
EGF	0.05	-
L-ascorbic acid	3.0	3.0
바셀린	7.0	7.0
유동파라핀	10.0	10.0
밀납	2.0	2.0
폴리솔베이트 60	2.0	2.0
솔비탄세스퀴올레이트	2.5	2.5
스쿠알란	3.0	3.0
프로필렌글리콜	6.0	6.0
글리세린	4.0	4.0
트리에탄올아민	0.5	0.5
카르복시비닐폴리머	0.5	0.5
토코페릴아세테이트	0.1	0.1
향, 방부제	미량	미량
정제수	to 100	to 100

[시험예 1] 피부주름개선효과

상기 본 발명의 EGF 함유 피부보호 화장료에 대한 피부주름 개선 효과를 측정하였다.

30세 이상의 여성 20명을 2그룹(A,B)으로 나누어 A그룹을 대상으로는 실시예를, B그룹을 대상으로는 비교실시예를 각각 상기 표 1에 따라 제형하여 팔의 상박 2X2 ㎠의 면적에(2회/일, 0.2g/회) 8주 및 24주간 도포한 후, 투명한 실리콘 재질의 용액을 이용하여 피부주름의 레플리카(Replica)를 떠서 피부주름측정기(SKIN VISIOMETER SV400, C+K Electronics GmbH. Germany)로 피부주름변화를 측정하였다. 레플리카의 상을 CCD 카메라로 3차원적 분석하고, 각각의 주름의 거칠기(R_m: m은 1이상의 정수)의 합을 주름의 개수로 나눈 값인 하기 식의 평균주름거칠기(R_z)로 주름개선 효과를 분석하였다. 시험결과는 하기 표 2 및 표 3에 나타내었다.

표 2.

피부주름개선효과(8주)

	평균주름거칠기(R_z,㎛)
	실시예	비교실시예
	T0	T8	△R_z	T0	T8	△R_z
피검자 1	114	95	-19	107	102	-5
피검자 2	133	101	-32	118	103	-15
피검자 3	138	102	-36	126	112	-14
피검자 4	124	103	-21	120	115	-5
피검자 5	120	98	-22	135	108	-27
피검자 6	115	84	-31	127	109	-18
피검자 7	142	113	-29	133	130	-3
피검자 8	128	107	-21	119	111	-8
피검자 9	135	115	-20	120	108	-12
피검자 10	105	74	-31	99	77	-22
평균		-26.2		-12.9

표 3.

피부주름개선효과(24주)

	평균주름거칠기(R_z,㎛)
	실시예	비교실시예
	T0	T24	△R_z	T0	T24	△R_z
피검자 1	114	73	-41	107	82	-25
피검자 2	133	89	-44	118	93	-25
피검자 3	138	90	-48	126	99	-27
피검자 4	124	81	-43	120	101	-19
피검자 5	120	84	-36	135	94	-41
피검자 6	115	76	-39	127	102	-25
피검자 7	142	97	-45	133	102	-21
피검자 8	128	92	-36	119	99	-20
피검자 9	135	101	-34	120	85	-35
피검자 10	105	55	-50	99	58	-41
평균		-41.6		-27.9

시험 결과, 비타민 C와 EGF를 함유한 실시예는 26.2㎛ 낮아져(p<0.01) 비타민 C 만을 함유한 비교실시예에 비해 약 103% 이상 주름이 더 개선되었다. 따라서 위의 결과로부터 EGF가 비타민 C의 주름개선효과를 매우 효과적으로 상승시킴을 알 수 있다.

아울러 표 3의 피부주름 개선효과(24주)를 보면, 비교실시예의 주름개선효과가 표 2의 실시예의 피부주름개선효과(8주) 시험 결과와 유사함을 알 수 있다. 이는 일반적으로 현재 주름개선용으로 사용되는 화장료들이 가시적인 효과를 보이는데 24주 이상의 장시간이 걸리는데 비해 본 발명의 EGF 함유 화장료는 아주 짧은 단시간 안에 가시적인 효과를 볼 수 있음을 보여주고 있다.

[시험예 2] 피부주름개선의 임상효과

상기 본 발명의 EGF 함유 피부보호 화장료에 대한 피부주름개선 임상효과를측정하였다.

30세 이상의 여성 20명(평균연령 37.7세)을 2그룹(A,B)으로 나누고, A그룹에는실시예를, B그룹에는 비교실시예를 각각 상기 표 1에 따라 제형하여 주름이 있는 눈가를 중심으로 8주간 도포한 후, 숙련자의 객관적 평가와 피검자의 주관적 평가를 다음의 6등급으로 분류하여 평가함으로써 피부주름의 개선정도(ΔW)를 측정하였다. 결과는 하기 표 4 및 표 5에 나타내었다.

·피부주름개선 평가 기준 :

-3: 극히 심하게 악화 -2: 악화 -1: 약간 악화

0: 변화없음 1: 약간 개선 2: 개선 3: 매우 개선

표 4.

피부주름개선 임상효과(숙련자의 객관적 평가)

	피부주름 개선정도(△W)
	실시예	비교실시예
	T0	T8	T0	T8
피검자 1	0	2	0	1
피검자 2	0	3	0	1
피검자 3	0	3	0	0
피검자 4	0	2	0	1
피검자 5	0	1	0	1
피검자 6	0	1	0	2
피검자 7	0	2	0	2
피검자 8	0	2	0	2
피검자 9	0	2	0	1
피검자 10	0	1	0	0
△W(T8-T0)	1.9	1.1

표 5.

피부주름개선 임상효과(피검자의 주관적 평가)

	피부주름 개선정도(△W)
	실시예	비교실시예
	T0	T8	T0	T8
피검자 1	0	2	0	1
피검자 2	0	1	0	-1
피검자 3	0	3	0	2
피검자 4	0	2	0	1
피검자 5	0	2	0	2
피검자 6	0	1	0	2
피검자 7	0	1	0	1
피검자 8	0	1	0	2
피검자 9	0	2	0	1
피검자 10	0	2	0	0
△W(T8-T0)	1.7	1.1

임상 시험 결과, 비타민 C와 EGF를 함유한 실시예에서 숙련자의 객관적 평가와 피검자의 주관적 평가는 각각 1.9, 1.7로 주름이 확실히 개선되었음을 알 수 있는데, 이는 비타민 C 만을 함유한 비교실시예에 비해 각각 72.7%, 54.5% 증가한 것으로, EGF가 비타민 C의 주름개선 효과를 현저하게 향상시킴을 알 수 있다.

[시험예 3] 피부탄력개선의 임상효과

상기 본 발명의 EGF 함유 피부보호 화장료에 대한 피부탄력개선 임상효과를 측정하였다.

온도 24-26℃, 습도 75% 조건에서 건강한 여성 15명(평균연령 36.3세)을 대상으로 실시예와 비교실시예를 상기 표 1에 따라 제형하여 눈가를 중심으로 왼쪽에는 실시예를 오른쪽에는 비교실시예를 8주간 도포한 후, 피부탄력측정기(Cutometer SEM 575, C+K Electronic Co., Germany)를 이용하여 피부탄력을 측정하였다. 시험결과는 하기 표 6에 Cutometer SEM 575의 △R8 값으로 기재하였는데, R8 값은 피부 점탄성(viscoelasticity)의 성질을 나타낸다.

표 6.

피부탄력

실험제품	피부탄력효과
실시예	0.30
비교실시예	0.08

표 6 의 결과에서 알 수 있듯이 EGF를 함유한 실시예의 피부탄력은 비교실시예에 비해 275% 증가했다. 이를 볼 때, 비타민 C가 콜라겐의 합성을 촉진시켜 피부의 탄력을 증진시키는데 EGF가 상승효과를 가져다줌을 알 수 있다. EGF는 표피세포성장인자로 세포의 생리활성을 매우 효과적으로 촉진함으로써 비타민 C에 의한 피부탄력이 급격하게 증가되는 것으로 본다.

[시험예 4] 보습효과

상기 본 발명의 EGF 함유 피부보호 화장료에 대한 보습효과를 측정하였다.

25℃, 상대습도 45%, 공기의 흐름이 없는 실내에서 건강한 여성 15명(평균연령 36.3세)을 대상으로 실시예와 비교실시예를 각각 상기 표 1에 따라 제형하여 팔의 상박에 하루에 3회 6주간 도포한 후, TEWAMETER TM210(C+K electronic GmbH. Germany)를 이용하여 경피수분손실량 즉, TEWL(Transepidermal Water Loss) 값을 시간 변화에 따른 TEWL 값 변화량 △TEWL로 측정하고, CORNEOMETER CM 820 PC(C+K electronic GmbH. Germany)를 이용하여 표피 수분량에 따른 전기전도도의 변화로 0에서 150까지 피부의 수분량을 수치화하여 보습효과를 측정하였다. 시험결과는 하기 표 7에 나타내었다.

표 7.

피부보습효과

실험제품	△TEWL	Corneometer Value
실시예	5.5	122
비교실시예	1.5	102

시험 결과, 실시예의 △TEWL 값은 5.5g/hm²로 비교실시예에 비해 경피수분손실량이 6주 후 효과적으로 개선되었음을 알 수 있다.

아울러 피부의 수분량을 측정한 Corneometer value에서도 실시예가 비교실시예에 비해 높은 증가를 보였다.

[시험예 5] 피부 안전성 시험

상기 본 발명의 EGF 함유 피부보호 화장료에 대한 피부 안정성 시험을 실시하였다.

피검자 30명(평균연령 22세, 연령분포 19세-34세)을 2그룹(A,B)으로 나누어 A그룹을 대상으로는 실시예를, B그룹을 대상으로는 비교실시예를 각각 상기 표 1에 따라 제형하여 Haye's Test Chamber를 이용 상박에 피부 첩포시험(Patch Test)을 실시하였다. 단 건선(Psoriasis), 습진(Eczema), 기타 피부병변 보유자나 임신, 수유부 또는 피임제, 항히스타민제 등을 복용하고 있는 사람은 본 실험에서 제외 하였다.

시험부위를 70% 에탄올로 닦아낸 뒤 건조시키고, A그룹에는 실시예를, B그룹에는 비교실시예를 각각 15㎍씩 Chamber에 적하 시킨 후, 시험 부위인 상박 부위에 얹어 고정시킨다. 첩포는 24시간 동안 도포하고 첩포를 제거한 후에는 Marking Pen으로 시험부위를 표시하여 각각 24시간, 48시간, 72시간 후에 시험부위를 관찰한다.

판정은 첩포 제거 24시간, 48시간, 72시간 후에 행하며 피부반응은 하기 표 8의 국제접촉피부염연구회(International Contact Dermatitis Research Group:ICDRG)의 규정에 따라 판정하였다. 시험결과는 하기 표 9에 나타내었다.

표 8. 국제접촉피부염연구회의 판정 기준

기호	판 정 기 준	평 가	Mean Score
±++++++-	Doubtful or slight reaction and erythemaErythema + IndurationErythema + Induration + VesicleErythema + Induration + BullaeNegative	미소자극경자극중자극강자극무자극	0∼0.91.0∼2.93.0∼4.95.0이상0

표 9.

피부 안전성

경과시간	실시예	비교실시예
24시간	0	0.5
48시간	0	0
72시간	0	0

피부안전성 시험 결과, 실시예는 평균 자극정도가 0으로 피부에 자극이 없는 안전한 화장료임을 알 수 있다. 비타민 C 만을 함유한 비교실시예도 피부에 큰 자극은 없으나 24시간에서 약간의 자극을 보였다.

[시험예 6] 제형의 안정성 시험

상기 본 발명의 EGF 함유 피부보호 화장료에 대한 제형의 안정성 시험을 실시하였다.

화장료의 안정성을 시험하기 위해 상기 실시예 및 비교실시예를 45℃로 일정하게 유지되는 항온조에서 불투명 초자 용기에 담아 12주동안 보관하고, 또한 4℃로 일정하게 유지되는 완전히 차광된 냉장고 내에서 불투명 초자 용기에 담아 12주 동안 보관한 후, 분리 정도 및 변색 정도를 비교 측정하였다. 그 결과를 하기 표 10에 나타내었다. 이때 제품 분리 및 변색 정도를 다음의 6등급으로 분류하여 평가하였다.

·제품 변색 평가 기준 :

0: 변화 없음 1: 극히 조금 분리(변색)

2: 조금 분리(변색) 3: 조금 심하게 분리(변색)

4: 심하게 분리(변색) 5: 극히 심하게 분리(변색)

표 10.

분리 및 변색정도

온도	시험물질 변색 정도
온도	실시예	비교실시예
45℃	0	0
4℃	0	0

상기 표 10에서 알 수 있는 바와 같이, 실시예 및 비교실시예는 변색 및 분리현상이 전혀 없어 안정한 기제임을 알 수 있다.

상기한 시험예들의 결과를 볼 때, EGF 함유 화장료는 피부 미용 및 보호를 위해 화장료에 많이 사용되고 있는 비타민 C가 가지고 있는 문제점인 임상적 효능효과의 미약, 가시적 임상결과에 필요한 사용기간의 장기화 등의 문제점을 극복하였으며, 이에 따라 피부개선에 효과적인 본 발명의 EGF 함유 화장료가 제공될 수 있게 되었다.

이하 상기한 시험예들의 결과를 근거로 하여 EGF를 함유하는 본 발명의 화장료를 조성하여 제시한다. 그러나, 본 발명의 조성물을 하기의 제형예들로 한정하고자 하는 것은 아니다.

제형예 1. 유연화장수(스킨로션)

배합성분	중량부
L-ascorbic acid	0.05
EGF	0.0001
1,3-부틸렌글리콜	6.0
글리세린	4.0
올레일알코올	0.1
폴리솔베이트 20	0.5
에탄올	15.0
벤조페논-9	0.05
향, 방부제	미량
정제수	to 100

제형예 2. 영양화장수(밀크로션)

배합성분	중량부
L-ascorbic acid	0.5
EGF	0.0002
프로필렌글리콜	6.0
글리세린	4.0
트리에탄올아민	1.2
토코페릴아세테이트	3.0
유동 파라핀	5.0
스쿠알란	3.0
마카다미아너트오일	2.0
폴리솔베이트 60	1.5
솔비탄세스퀴올레이트	1.0
카르복시비닐 폴리머	1.0
향, 방부제	미량
정제수	to 100

제형예 3. 영양크림

배합성분	중량부
L-ascorbic acid	3.0
EGF	0.0005
바셀린	7.0
유동파라핀	10.0
밀납	2.0
폴리솔베이트 60	2.0
솔비탄세스퀴올레이트	2.5
스쿠알란	3.0
프로필렌글리콜	6.0
글리세린	4.0
트리에탄올아민	0.5
카르복시비닐폴리머	0.5
토코페릴아세테이트	0.1
향, 방부제	미량
정제수	to 100

제형예 4. 마사지크림

배합성분	중량부
L-ascorbic acid	0.5
EGF	0.0002
프로필렌글리콜	6.0
글리세린	4.0
트리에탄올아민	0.5
밀납	2.0
토코페릴아세테이트	0.1
폴리솔베이트 60	3.0
솔비탄세스퀴올레이트	2.5
세테아릴알코올	2.0
유동파라핀	30.0
카르복시비닐폴리머	0.5
향, 방부제	미량
정제수	to 100

제형예 5. 팩

배합성분	중량부
L-ascorbic acid	1.0
EGF	0.0005
프로필렌글리콜	2.0
글리세린	4.0
카르복시비닐 폴리머	0.3
에탄올	7.0
피이지-40 히드로게비이티드 캐스터 오일	0.8
트리에탄올아민	0.3
향, 방부제	미량
정제수	to 100

이상에서 살펴본 바와 같이 본 발명의 화장료 조성물에 함유되는 EGF는 피부주름 및 기미, 주근깨, 색소침착 개선, 피부 노화방지, 미백효과, 보습효과 등을 위한 치료용 외용제 또는 화장료 등에 널리 사용되고 있는 비타민 C가 가지고 있는 효과를 현저하게 개선시키고, 임상적 효능효과의 미약, 가시적 임상결과에 필요한 사용기간의 장기화 등의 문제점을 효과적으로 해결할 수 있었다.

이에 따라, 본 발명의 EGF 함유 피부보호 화장료 조성물이 완성됨으로써 기존 화장료 성분의 단점이 개선되고 피부개선 효과는 더욱 향상된 화장료 조성물이 제공될 수 있게 되었다.

Claims

비타민 C에 의해 달성되는 피부 보호 효과의 증진제로서의 표피성장인자 및 비타민 C로 구성된 유효 성분을 포함하며, 상기한 피부 보호 효과는 피부 주름 개선 및 피부 탄력 개선인 것을 특징으로 하는 피부 보호 화장료 조성물.
제 1항에 있어서,

표피성장인자는 화장료의 총 중량에 대하여 0.00001∼1중량% 의 양으로 함유됨을 특징으로 하는, 피부보호 화장료 조성물.
제 1항 또는 제 2항에 있어서,

표피성장인자는 화장료의 총 중량에 대하여 0.0001∼0.1중량%의 양으로 함유됨을 특징으로 하는, 피부보호 화장료 조성물.
제 1항에 있어서,

표피성장인자는 재조합 대장균(E. coliJM101)으로부터 생산된 것임을 특징으로 하는, 피부보호 화장료 조성물.