KR100357402B1 - 죽내피 추출물을 함유한 미백화장료 - Google Patents

Abstract

본 발명은 미백화장료에 관한 것으로, 더욱 상세하게는 미백 유효성분으로서 대나무 속내피로부터 추출된 죽내피(竹內皮) 추출물을 함유하는 미백화장료에 관한 것이다.

본 발명에 의한 죽내피 추출물을 함유하는 미백화장료는 종래의 알부틴이나 코지산을 단독으로 사용한 미백화장료에 있어서 티로시나제 효소의 활성을 억제하는 작용과 그에 따른 멜라닌 색소의 생성을 억제하는 작용에 의한 미백효과에 비해 우수할 뿐만 아니라, 제조과정중 또는 제품의 보관중의 경시변화등의 문제점을 극복하고 피부에 자극이 없다는 장점이 있다.

Description

죽내피 추출물을 함유한 미백화장료

본 발명은 미백화장료에 관한 것으로 더욱 상세하게는 미백 유효성분으로서 대나무(Phyllostachys pubescens MAZEL)의 속내피로부터 추출된 죽내피 추출물을 함유하고 있는 미백화장료에 관한 것이다.

사람의 피부색은 주로 피부세포속에 함유되어 있는 멜라닌 색소의 양에 따라 크게 좌우된다. 멜라닌 색소가 많은 사람은 갈색 또는 검은 색 피부를 갖는 반면, 멜라닌 색소가 극히 적은 사람은 백반증의 원인이 된다. 멜라닌 색소는 피부의 기저막에 존재하는 멜라노사이트라는 색소세포에서 티로시나아제에 의해 티로신으로부터 생성된다.

멜라닌 색소는 과도한 자외선으로부터 피부를 보호함으로써 광선에 의한 피부손상, 피부암의 발생을 억제하는 중요한 역할을 한다. 그러나 일광, 호르몬변화, 염증, 약제 등에 의해 멜라닌이 과다하게 생성되는 경우 피부의 색소가 침착되며,이로 인해 미용상 여러 가지 문제를 야기한다. 예를 들어, 피부의 과색소 질환인 기미나 주근깨 등은 멜라닌 색소의 양이 증가한 것에 기인한 것으로, 이는 멜라닌 색소의 생성과정이 촉진되거나 멜라닌 세포의 수가 증가하였다는 것을 의미한다.

현재 피부미용을 위한 미백제의 개발에 있어서, 생성된 멜라닌 색소를 환원시켜 탈색하는 방법과 멜라닌 색소를 형성하는 효소인 티로시나제의 활성을 억제하는 방법이 알려져 있다. 그러나 멜라닌 색소를 환원시키기 위해 사용되는 토코페롤이나 비타민류등을 사용한 미백제는 멜라닌 색소의 탈색효과가 미미한 것으로 알려져 있다. 따라서 티로시나제의 활성을 저해시킴으로써 멜라닌 색소의 생성을 억제하는 저해제가 주목받고 있다.

티로시나아제는 모노페놀류를 산화하는 반응을 촉매하는 효소로 고등동물의 멜라닌 세포 속에 들어있다. 이 효소에 의해 티로신은 도파퀴논으로 산화되어 일련의 화학반응, 산화 등을 거쳐 멜라닌 색소가 생성되게 된다. 이 멜라닌 색소는 갈색이나 흑색을 띠는 것으로 생체 내에서 과량의 빛을 흡수하게 하여 피부미용에 나쁜 영향을 미치게 된다.

미백제 선별에 있어서, 현재 널리 사용되고 있는 방법은 버섯으로부터 정제된 티로시나제를 이용하여 티로시나제의 활성을 저해시키는 저해제를 선택하는 방법과 쥐의 흑색종 세포를 이용하여 미백원에 대한 흑색종 세포의 상태를 평가하여 선택하는 방법이 있다. 전자는 간편하고 시간, 비용 등이 절약되는 장점이 있으나 단지 티로시나제 저해제만을 선별할 수 있다는 단점이 있고, 후자는 좀더 종합적으로 미백제를 선별할 수 있으나 비용, 시간, 노력 등이 많이 소비된다는 단점이 있다.

티로시나제 효소의 활성을 억제시키면 멜라닌 색소의 생성을 억제할 수 있다는 점에 착안하여 종래의 화장품 분야에서는 미백성분으로서 히드로퀴논, 트레티노인, 코지산, 알부틴, 아스코르빈산, 글루타치온등을 티로시나제의 활성저해물질로 이용하는 방법이 이용되어 왔다. 그러나 상기 성분들을 사용하여 화장품을 제조하는 경우 그 제조과정 또는 제품보관중에 빛과의 반응에 의해 산화되어 화장품의 색이 변색되는 등의 단점이 있었다. 따라서 산화방지제, UV흡수제, 금속킬레이트제등의 첨가제를 첨가하여 이러한 변색을 줄이고자 하였다. 그러나 이러한 첨가제를 다량 사용하는 경우 피부를 자극하는등 피부안정성에 문제점이 있고, 목적하는 만큼의 충분한 미백효과를 얻을 수 없다는 단점이 있었다.

따라서 종래의 미백제에 비해 소량의 첨가제를 사용하면서도 탁월한 미백효과를 나타내며, 피부에 자극 등의 부작용이 없는 미백제를 개발하기 위해 많은 연구가 있었다.

본 발명자는 종래의 미백물질들이 갖는 문제점을 해결하고 보다 우수한 미백효과를 발휘하는 원료를 찾기 위해 천연물 중에서 과색소 침착예방에 유효한 물질들을 검색한 결과 죽내피 추출물이 티로시나제의 저해물질일뿐만 아니라 멜라닌 색소의 생성을 억제한다는 것을 발견하고 본 발명을 완성하게 되었다.

대나무는 죽순대(반죽)라고도 하며, 중국이 원산지로 주로 남부지방에서 자생하고 있는 상록성 귀화식물이다. 대나무는 식용, 관상용, 공업용으로 사용되고있으며, 한방과 민간에서는 대나무의 줄기, 잎 또는 죽순을 구토(嘔吐), 소염(消炎), 경간(驚癎), 주독(酒毒), 유산(流産), 익기(益氣), 객토혈(喀吐血), 금창(金瘡), 보약(補藥), 파상풍(破傷風), 발한(發汗), 진통(鎭痛), 중풍(中風)등의 약재로 사용하고 있다.

본 발명에서 사용되는 죽내피란 대나무의 내부면에 있는 하얀 피막을 말하는 것으로, 대나무를 쪼갠 후 피막을 박피하여 사용한다. 죽내피는 대나무의 녹색외피인 제1층피와 그 내층의 하얀 제2층피와 같이 여러 가지 약효가 있으며 미백효과가 뛰어난 것으로 실험결과 밝혀졌다. 본 발명은 상기와 같은 죽내피를 미백화장료의 원료로서 유연화장수(스킨), 영양화장수(로션), 영양크림, 맛사지크림, 에센스 또는 팩등에 적용한 것이다.

본 발명의 목적은 동량의 미백원료를 사용함에도 불구하고, 종래의 미백제에 비해 뛰어난 미백효과를 가지며 피부자극등의 부작용이 없는 미백화장료를 제공하는 것에 있다.

도 1은 티로시나제의 활성저해율을 나타낸 그래프

도 2는 멜라닌 색소의 량을 나타낸 그래프

본 발명에 의한 미백화장료는 화장료 전체 중량을 기준으로 건조 죽내피가 0.0001∼5%, 바람직하게는 0.001∼3% 함유한다.

본 발명을 보다 상세히 설명하면 다음과 같다.

도 1은 티로시나제의 활성을 억제하는 정도를 그래프로 나타낸 것으로, 티로시나제의 활성을 50% 억제하는데 필요한 시료의 양을 표준편차로 표시한 것이다.

도 2는 실험세포에 포함된 본래의 멜라닌 양과 각각의 시료를 사용하여 배양한 후 증가된 멜라닌 양을 합산한 멜라닌 총량을 그래프로 나타낸 것으로, 각각의 시료를 사용하는 경우의 멜라닌의 총량을 표준편차로 나타낸 것이다.

대나무의 속내피는 주로 죽세공품으로 사용되는 제2층피를 생산하는 공정에서 한약재로 사용되는 제1층피인 죽여(竹茹)와 더불어 부산물로서 얻어진다. 수득된 죽내피를 건조하여 잘게 분쇄한 후, 용매로서 에탄올 또는 메탄올과 물을 8 : 2로 혼합한 용액, 혹은 에탄올 또는 메탄올 단독으로 추출한다. 죽내피 추출물은 건조 죽내피를 15∼37℃에서 1∼15일 동안 추출용매에 침적시킴으로써 수득된다. 이렇게 하여 추출한 죽내피 추출물을 냉각콘덴서가 구비된 증류장치를 이용하여 증발되어 나오는 용매를 회수하면서 완전히 감압농축한 후 건조시키고, 건조 죽내피 0.0001∼5%, 바람직하게는 0.001∼3%를 미백화장료에 첨가한다.

본 발명을 하기의 실시예, 실험예 및 처방예들을 들어 설명하지만, 이에 한정되는 것은 아니며, 본 발명의 사상과 범위 내에서 다양한 실시예, 실험예 및 처방예의 변화가 가능하다.

(실시예)

실시예 1

대나무의 속내피 100g을 건조시켜 잘게 분쇄한 후, 80% 메탄올 3ℓ에 넣고 15∼37℃에서 14일간 추출하였다. 그 추출물을 300메시 여과포로 여과하고 5∼15℃에서 5일간 방치하여 숙성시킨 후, 여과지로 여과하였다. 이 추출물을 냉각콘덴서가 구비된 증류장치에서 70℃로 감압농축하여 건조 죽내피추출물 1.07g을 얻었다.

실시예 2

대나무의 속내피 100g을 건조시켜 잘게 분쇄한 후, 80% 에탄올 3ℓ에 넣고 15∼37℃에서 14일간 추출하였다. 그 추출물을 300메시 여과포로 여과하고 5∼15℃에서 5일간 방치하여 숙성시킨 후, 여과지로 여과하였다. 이 추출물을 냉각콘덴서가 구비된 증류장치에서 70℃로 감압농축하여 건조 죽내피추출물 1.93g을 얻었다.

(실험예)

실험예 1

실시예 1에서 수득된 건조 죽내피 추출물과 알부틴에 대하여 티로시나제 저해효과를 측정하였다. 티로시나아제는 감자나 버섯으로부터 정제되는 효소로서, 본 실험에서는 버섯 류로부터 추출한 시그마(Sigma)사의 것을 사용하였다.

먼저 기질인 티로신을 인산나트륨 완충용액(0.1M, pH6.8)에 용해시켜 0.3㎎/㎖의 농도를 갖는 용액으로 만들고, 그 용액을 334㎕를 취해 시험관에 넣은 후, 여기에 다시 인산나트륨 완충용액(0.1M, pH6.8)을 576㎕를 첨가하였다. 실시예 1의 건조 죽내피추출물을 메탄올에 용해시켜 10㎎/㎖으로 한 후, 메탄올을 사용하여 각각 5, 1.5, 1㎎/㎖, 500, 150, 100㎍/㎖로 희석시켜 실험군으로 하였다. 이 희석된 추출물 시료들을 각각 70㎕씩 취해 상기 시험관내의 용액에 첨가하고 37℃ 항온조에서 10분 동안 반응시켰다.

대조군은 상기 죽내피 추출물 대신에 메탄올 70㎕를 넣었다. 실험군 및 대조군의 반응용액에 1700유니트/㎖의 티로시나제 용액 20㎕씩 넣어 전체 부피가 1㎖가 되게 하고, 다시 37℃ 항온조에서 30분 동안 반응시켰다. 이 반응용액이 들어 있는 시험관을 얼음물 속에 넣어 급냉시켜 티로시나제의 활성을 중지시킨 후, 광전분광분석계로 파장 470nm에서의 흡광도를 측정하였다.

실험군의 블랭크(blank)는 티로시나제 용액을 제외한 반응물, 즉 티로신, 죽내피 추출물 및 인산나트륨 완충용액으로 된 반응물이며, 대조군의 블랭크는 실험군의 블랭크에서 죽내피 추출물 대신에 메탄올을 첨가한 것으로 하였다.

알부틴에 대한 티로시나제의 활성 저해효과를 측정하는 경우는, 알부틴을 인산나트륨 용액에 용해시켜 농도 10㎎/㎖로 한 후, 다시 인산나트륨 완충용액을 사용하여 5, 1.5, 1㎎/㎖, 500, 150, 100㎍/㎖로 희석하여 실험군으로 하였다. 알부틴의 실험군의 블랭크는 티로시나제를 제외한 반응물, 즉 티로신, 알부틴용액, 인산나트륨 완충용액으로 이루어진 반응물이다. 알부틴의 대조군은 알부틴용액 대신에 인산나트륨 완충용액을 넣은 것이고, 알부틴 대조군의 블랭크는 티로시나제용액을 제외한 반응물, 즉 티로신, 인산나트륨 완충용액을 넣은 것으로 하였다. 이상의 내용을 정리한 것을 표 1에 나타낸다.

죽내피 추출물 및 알부틴에 대한 티로시나제의 저해율은 하기의 식을 구하였다. 그 실험결과를 표 2에 나타낸다.

티로시나제 저해율(%) = 100 - ( t 100 )

A: 대조군의 흡광도 B: 대조군의 블랭크 흡광도

C: 실험군의 흡광도 D: 실험군의 블랭크 흡광도

사용물질	실험군	실험군의 블랭크	대조군	대조군의 블랭크
티로신(0.3㎎/㎖)	334㎕	334㎕	334㎕	334㎕
인산나트륨완충용액(0.1M, pH6.8)	576㎕	596㎕	576㎕	596㎕
시료	70㎕	70㎕	70㎕	70㎕
티로시나제용액 (1700units/㎖)	20㎕	-	20㎕	-
주) 총 부피 1㎖

시료	티로시나제 활성을 50% 억제하는 시료의 농도(IC 50: ㎍/㎖)
죽내피추출물	242.30 ± 93.15
알부틴	722.23 ± 348.77
주) 상기의 수치는 평균 ± 표준편차로 나타낸 것임

상기 표 2에 나타난 바와 같이, 죽내피 추출물은 알부틴 보다 티로시나제의 활성을 억제하는 능력이 약 3배 정도 높다는 것을 알 수 있다.

실험예 2

상기 죽내피 추출물에 대한 멜라닌 색소의 생성 저해효과를 측정하였다.

쥐의 흑색종 세포로부터 유도된 색소형성 세포를 표준방법으로 배양물 중에 성장시켰다. 본 실험에서는 B-16세포(ATCC사, 미국)의 세포주를 사용하였으나, 다른 세포주 또는 사람의 멜라닌세포를 사용할 수 있다.

흑색종 세포를 10% 소의 태아혈청, 1% 항생제, 10^-7M의 α-MSH(멜라닌세포 자극호르몬, Sigma사 제조)가 들어 있는 RPMI(Gibco사)의 세포배양 배지에 공급하여 약 1/3 정도의 콘플루언스(confluence)로 성장시켰다. 이어서 각각의 시료, 예를 들어 실시예 1에서 수득된 건조 죽내피추출물, 코지산, 알부틴 및 아스코르빈산을 50㎍/㎖의 농도로 배양배지에 용해하고, 계속해서 시료가 들어 있는 용액을 흑색종 세포에 가한 후 2일 이상 배양하였다. 대조군은 시료가 들어 있지 않은 배양배지를넣어 주었다. 배양후 세포들을 트립신-EDTA(Gibco사)로 처리하여 시험관에 모은 후 세포들의 수를 세고, 4,000,000 세포당 1㎖의 1N 수산화용액을 첨가하여 멜라닌을 녹여 낸 후 470nm에서의 흡광도를 측정하여 분석하였다. 그 실험결과를 표 3에 나타낸다.

시료	멜라닌량(㎍/㎖/4,000,000셀)	억제율(%)
대조군	97.17 ± 18.85	-
죽내피추출물	43.79 ± 15.50	54.9%
알부틴	51.79 ± 8.90	46.7%
코지산	49.83 ± 8.25	48.7%
아스코르빈산	137.03 ± 41.39	-41.0%
주) 상기 수치는 평균 ± 표준편차로 나타낸 것임

표 3에서 알 수 있는 바와 같이, 죽내피 추출물은 대조군에 비해 B-16 흑색종 세포의 멜라닌양을 억제할 수 있으며, 같은 양의 알부틴이나 코지산을 사용하는 경우 보다 멜라닌 생성양이 적음을 알 수 있다.

(처방예)

처방예 1: 영양크림

하기와 같이, 실시예 2에서 수득한 죽내피 추출물을 함유한 영양크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량(중량%)
죽내피추출물	0.1
유동파라핀	6.0
스쿠알란	4.0
소르비탄세스퀴올레이트	0.5
폴리솔베이트 60	1.5
밀랍	10.0
카프필릭/카프릭트리글리세라이드	5.0
농 글리세린	6.0
프로필렌글리콜	3.0
부틸렌글리콜	2.0
트리에탄올아민	0.2
방부제	미량
색소	미량
향료	미량
정제수	잔부

처방예 2: 영양화장수

하기와 같이, 실시예 2에서 수득한 죽내피 추출물을 함유한 영양화장수(로션)을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량(중량%)
죽내피추출물	0.1
세탄올	1.0
스테아릴알코올	1.0
글리세린모노스테아레이트	3.0
소르비탄모노스테아레이트	1.0
폴리옥시에틸렌소르비탄 모노올레이트	2.0
바셀린	2.0
유동파라핀	6.0
스쿠알란	5.0
옥틸도데실미리스테이트	5.0
글리세린	5.0
1,3-부틸렌글리콜	5.0
카르복시비닐폴리머	0.3
트리에탄올아민	0.3
방부제	미량
색소	미량
향료	미량
정제수	잔부

처방예 3: 유연화장수

하기와 같이, 실시예 2에서 수득한 죽내피 추출물을 함유한 유연화장수(스킨)을 통상의 방법에 따라 제조하였다

성분	함량(중량%)
죽내피추출물	0.1
농 글리세린	2.0
프로필렌글리콜	3.0
부틸렌글리콜	2.0
에탄올	10.0
카르복시비닐폴리머	0.1
트리에탄올아민	0.1
방부제	미량
색소	미량
향료	미량
정제수	잔부

처방예 4: 에센스

하기와 같이, 실시예 2에서 수득한 죽내피 추출물을 함유한 에센스를 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량(중량%)
죽내피추출물	0.1
플로필렌글리콜	5.0
글리세린	10.0
1,3-부틸렌글리콜	10.0
폴리에틸렌글리콜 1500	5.0
카르복시비닐폴리머	0.5
히드록시에틸셀룰로오스	0.5
트리에탄올아민	0.5
에탄올	5.0
폴리옥시에틸렌노닐페닐에테르	0.7
방부제	미량
색소	미량
향료	미량
정제수	잔부

처방예 5: 맛사지크림

하기와 같이, 실시예 2에서 수득한 죽내피 추출물을 함유한 맛사지크림을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량(중량%)
죽내피추출물	0.1
유동파라핀	40.0
스쿠알란	5.0
소르비탄세스퀴올레이트	0.8
폴리솔베이트 60	1.5
밀랍	10.0
카프필릭/카프릭트리글리세라이드	4.0
농 글리세린	6.0
프로필렌글리콜	2.0
부틸렌글리콜	4.0
트리에탄올아민	0.2
방부제	미량
색소	미량
향료	미량
정제수	잔부

처방예 6: 팩

하기와 같이, 실시예 2에서 수득한 죽내피 추출물을 함유한 팩을 통상의 방법에 따라 제조하였다.

성분	함량(중량%)
죽내피추출물	0.1
알란토인	0.2
에탄올	5.0
노닐페닐에테르	0.3
나트륨카르복시메틸셀룰로오스	0.2
폴리비닐알코올	13.0
방부제	미량
색소	미량
향료	미량
정제수	잔부

상기의 시험결과로부터 본 발명의 죽내피 추출물은 종래의 알부틴 또는 코지산과 비해 멜라닌 색소형성의 억제작용이 우수하며, 이에 따라 피부미백효과가 우수하다는 것을 알 수 있다.

Claims (4)

1. 미백화장료에 있어서, 죽내피 추출물을 화장료 전중량에 대해 건조 중량 기준으로 0.0001~5% 함유하는 미백화장료.
2. 제1항에 있어서, 상기한 죽내피 추출물이 에탄올 또는 메탄올 추출 용매로 추출된 것인 미백화장료.
3. 제1항에 있어서, 상기한 죽내피 추출물이 에탄올 또는 메탄올과, 물과의 혼합추출용매로 추출된 것인 미백화장료.
4. 제2항 또는 제3항에 있어서, 상기한 죽내피 추출물이 죽내피를 15~37℃에서 상기한 추출용매 중에 1~15일 동안 침적하여 추출시키는 것에 의해 수득되는 것인 미백화장료.