KR100338193B1 - 신규 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2 및 그 배양방법 - Google Patents
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Abstract
본 발명은 해양미생물 중에서 배양하기 쉽고 경제적이며 특히 현재까지 발견한 균주 중에서나 미세조류 중에서 필수아미노산과 고도 불포화지방산, 특히 오메가-3 지방산인 DHA(22:6n-3)와 오메가-6 지방산인 DPA(22:5n-6) 함량이 높아서 양식산업에 있어 치·자어의 기초먹이인 윤충(Rotifer)과 Artemia의 먹이 또는 영양강화제로써 이용했을 때 윤충(Rotifer)과 Artemia에게 DHA와 DPA의 함량을 높여 결국 치·자어의 영양을 충족시키므로 건강한 종묘를 생산하는 것이다.
Description
본 발명은 신규 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2(KCTC 0694BP)에 관한 것으로 보다 상세하게는 고도 불포화지방산의 함량, 특히 DHA(22 : 6n-3)와 DPA(22 : 5n-6)의 함량이 매우 높은 해산 미세조류로서 양식산업의 기초먹이인 윤충(Rotifer)의 영양강화 먹이로써 자·치어에게 꼭 필요한 DHA와 DPA를 충족시키는데 유용한 신규 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2(Sπ-2)에 관한 것이다.
양식 산업에 있어 어류가 육상동물 및 사람과는 다른 필수지방산을 요구한다는 것이 밝혀진 것은 1970년대 이후이다. 어류에 있어 최초로 필수지방산의 요구량과 결핍증상이 밝혀진 것은 무지개 송어에 대한 실험으로서 필수지방산 결핍 사료를 먹이면 성장저하, 심근염증, 쇼크증상, 혈액 헤모글로빈의 양이 감소하는 현상이 나타나고, 이것을 방지하는데는 사람이나 육상동물들의 필수지방산인 18 : 2n-6, 즉 오메가-6 지방산이 아니라 오메가-3 지방산인 18 : 3n-3이 수행한다는 것을 밝혀냈다 (Castell, J.D., D.J. Lee and R.O. Sinnhuber. 1972. Essential fatty acids in the diet of rainbow trout (Salmo gairdneri): Lipid metabolism and fatty acids composition. J. Nutr., 102, 3-100.)
그 후 1980년대에 해산어류는 담수와 육상 포유동물과는 달리 오메가-3 고도 불포화지방산(주로 EPA, DHA)을 필수지방산으로 요구한다는 것이 밝혀졌다.
해산어류는 담수어와는 달리 사료내의 18 탄소 전구체의 지방산에서부터 충분한 양의 필수지방산을 생합성할 수 없어 사료를 통하여 이들 성분을 공급해야만 하기 때문에 해산어류의 양식에 있어서 DHA의 중요성이 대두되었다(Yone, Y., K. Yamada and K. Kobayashi. 1980. Conversion of linolenic acid to n-3 highly unsaturated fatty acids in marine fishes and rainbow trout. Nippon Suisan Gakkaishi, 46, 1231-1233)
1990년대에 와서는 사료내에 필수지방산의 한 종류인 EPA(20 : 5n-3)가 충분히 함유되어 있다 하더라도 DHA(22 : 6n-3)로 전환되는 속도가 늦기 때문에 EPA로는 해산어 자·치어의 DHA 요구를 충족시킬 수 없다는 것이 밝혀져 DHA의 중요성이 강조되었다(Bell, M.V., R.S. Batty, J.R. Dick, K. Fretwell, J.C. Navarro and J.R. Sargent. 1995. Dietary deficiency of docosahexaenoic acid impairs vision at low intensities in juvenile herring (Clupea harengus L.). Lipids, 30, 443-449 / Sargent, J.R., L.A. McEvoy and J.G. Bell. 1997. Requirements, presentation and sources of polyunsaturated fatty acids in marine fish larval feeds. Aquaculture, 155, 117-128.)
이에 본 발명은 다량의 필수아미노산과 오메가-3 고도 불포화지방산인 DHA와 오메가-6 고도 불포화지방산인 DPA를 함유한 신규 해산미세조류를 분리배양하여 본 발명을 완성하게 되었다.
본 발명은 원시균류(Kind of protista)에 속하며 필수아미노산과 고도 불포화지방산, 특히 DHA(22:6n-3)와 DPA(22:5n-6)의 함량이 높은 신규 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2(Sπ-2)를 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 양식 종묘산업에 있어 기초먹이로 이용되는 윤충(Rotifer)과 Artemia의 먹이 또는 영양강화제로써 이들 기초먹이에 필요한 필수아미노산 뿐만 아니라 DHA, DPA등의 고도 불포화지방산을 보충할 수 있는 신규 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2(Sπ-2)를 제공하는 것을 목적으로 한다.
또한, 본 발명은 일련의 과정을 거쳐 조성된 배지에서 상기의 신규 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2(Sπ-2)를 배양하는 방법을 제공하는 것을 그 목적으로 한다.
도 1은 담수클로렐라, 해산클로렐라, 빵효모 및 본 발명에 의한 신규 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2를 로티퍼, 브라치오누스 로톤디포르미스에 투여했을 때의 성장관계를 나타낸 것이다.
상기한 바와 같은 목적을 달성하기 위한 본 발명의 특징은 다음과 같다.
본 발명은 다량의 필수아미노산과 오메가-3 고도 불포화지방산인 DHA(22:6n-3)와 오메가-6 고도 불포화지방산인 DPA(22:5n-6)를 함유한 신규 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2(KCTC 0694BP)에 관한 것이다.
이하에서 첨부한 도면을 참고로 하여 본 발명의 바람직한 실시예를 상세히 설명하고자 한다. 그러나, 하기한 실시예는 본 발명의 구성 및 효과를 입증하기 위한 본 발명의 일실시예일 뿐 본 발명이 하기한 실시예에 한정되는 것은 아니다.
먼저, 신규 원시균류를 분리하기 위하여 경상남도 고성군 삼삼면 연안의 해수 및 모래에서 무균적으로 멸균 광구병에 채취하였고 세균 실험용 해수 시료는 채수기로 채수하여 1㎛ 여과 필터로 여과시켜 121℃에서 15분간 습열멸균한 멸균해수에서 십진법으로 희석하였다.
이스트 추출물 1g, 폴리펩톤(polypeptone) 1g, 프로테오스펩톤(proteose peptone) No.3 1g, 소이톤(soytone) 1g, 페릭 시트레이트(ferric citrate) 0.1%, 한천(agar) 1.5%를 여과해수 1ℓ에 녹여 습열멸균하여 1N HCI로 pH 4.8로 맞춘 후 페트리 접시(petridish)에 20㎖씩 분주하여 굳게 한다(표 1).
| 이스트 추출물 | 1g |
| 소이톤(Soytone) | 1g |
| 프로테오스펩톤(Proteose pepton No.3 ) | 1g |
| 폴리펩톤(Polypeptone) | 1g |
| 페릭 시트레이트(Ferric citrate) | 0.1% |
| 포도당(Glucose) | 5g |
| 해수 | 1ℓ |
| 한천(Agar) | 1.5% |
| pH | 4.8 |
| 이스트 추출물 | 1g |
| Soytone | 1g |
| Proteose pepton No.3 | 1g |
| Polypeptone | 1g |
| Ferric citrate | 0.1% |
| Glucose | 5g |
| 해수 | 1ℓ |
| pH | 7.5 |
상기와 같이 만들어진 평판배지상에서 희석된 시료를 도말한 후 72시간 이상을 암환경에서 배양하였다. 배양된 모든 콜로니를 하나씩 백금이로 찍어 액체배지(표 2)에 접종하여 20-25℃에서 72시간 교반 배양하였다. 각각의 배양된 액체배지를 10000rpm에서 저온 원심분리하여 집균한 다음 같은 방법으로 집균된 균체를 멸균해수로 3번 세척하였다. 준비된 균체를 Bligh, E.G. and W.M. Dyer 방법에 따라 총지질을 추출하여 메틸에스테르화시켜 유기화합물 혼합체 분석기(Gas liquid chromatography(Shimadzu GC 14A)로 도코사헥사애노익산(docosahexaenoic acid)의 여부판정 분석하였다. (Bligh, E.G. and W.M. Dyer. 1959. A rapid method of lipid extraction and purification. Can. J. Biochem. Physiol., 37, 911-917.)분리된 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2(기탁번호 : KCTC 0694BP)로 명명하여 생명공학연구소 유전자원센터 유전자은행에 1999. 11. 16.에 기탁하였다.
양식산업에 있어 종묘생산에는 윤충(Rotifer)은 아주 적합한 자·치어의 초기 먹이로 알에서 부화 후 4일째부터 보통 15일간 자·치어에게 먹이는데 이때 윤충(Rotifer)의 먹이로는 주로 빵효모나 해산 클로렐라, 담수 농축클로렐라, 광합성 세균등을 급이하는데 경제적인 문제로 현장에서는 주로 빵효모를 급이하고 있으나 표 3에서와 같이 빵효모나 클로렐라를 급이한 윤충(Rotifer)에서는 DHA(22:6n-3) 함량은 0.29 ∼ 0.90Wt%로 극미량인 반면에, 본 발명에 의한 상기 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2를 급이했을 때는 7.98Wt%로 대단히 높게 함유하는 것을 볼 수 있다.
| Diets지방산 | A(wt%) | B(wt%) | C(wt%) | D(wt%) |
| 14 : 0 | 1.73 | 1.25 | 4.15 | 1.73 |
| 16 : 0 | 9.23 | 14.35 | 14.46 | 2.25 |
| 16 : 1n-7 | 2.61 | 1.72 | 16.11 | 13.14 |
| 18 : 0 | 4.59 | 4.81 | 2.46 | 5.03 |
| 18 : 1n-9 | 6.56 | 3.29 | 2.82 | 19.46 |
| 18 : 1n-7 | 5.60 | 1.36 | 3.60 | 3.88 |
| 18 : 2n-6 | 9.64 | 35.64 | 3.05 | 4.06 |
| 18 : 3n-3 | 0.86 | 2.67 | 0.22 | 0.77 |
| 18 : 4n-3 | 0.60 | 0 | 0.21 | 0.11 |
| 20 : 1n-9 | 1.16 | 0.85 | 0.93 | 2.81 |
| 20 : 2n-6 | 0.82 | 2.55 | 0.23 | 0.97 |
| 20 : 3n-6 | 1.35 | 1.68 | 0.54 | 0.60 |
| 20 : 4n-6 | 1.96 | 1.97 | 2.88 | 2.03 |
| 20 : 3n-3 | 0.17 | 0.21 | 0.16 | 0.11 |
| 20 : 4n-3 | 0.96 | 0.42 | 0.71 | 0.06 |
| 20 : 5n-3 (EPA) | 7.66 | 0.75 | 22.48 | 0.98 |
| 22 : 4n-6 | 0.26 | 0.09 | 0.46 | 0.83 |
| 22 : 5n-6 (DPA) | 0.91 | 0 | 0 | 0.08 |
| 22 : 6n-3 (DHA) | 7.98 | 0.29 | 0.90 | 0.30 |
| Σn-3HUFA | 16.77 | 1.95 | 31.19 | 4.37 |
(A : 본 발명의 신규 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2가 급이된 로티퍼
B : 클로렐라(chlorella)가 농축된 담수가 급이된 로티퍼
C : 클로렐라 엘립소이데아(chlorella ellipsoidea)가 급이된 로티퍼
D : 빵 효소가 급이된 로티퍼)
도 1은 본 발명의 신규 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2, 담수 클로렐라, 해산 클로렐라, 빵효모를 로티퍼, 브라치오누스 로톤디포르미스에 투여했을 때의 성장관계를 나타낸 것이며, 그 수치는 하기의 표 4과 같다.
| 0 | 1 | 2 | 3 | 4 | 5 | 6 | 7 | |
| Sπ-2 | 10 | 12 | 34 | 62 | 96 | 162 | 172 | 173 |
| 담수클로렐라 | 10 | 26 | 52 | 100 | 127 | 180 | 210 | 220 |
| 해산클로렐라 | 10 | 16 | 40 | 88 | 125 | 160 | 177 | 189 |
| 빵효모 | 10 | 20 | 33 | 75 | 100 | 150 | 160 | 170 |
양식어의 자·치어가 윤충(Rotifer)을 먹고난 후에 짧게는 7일 길게는 15일간을 갑각류 프랑크톤인 알테미아(Artemia) 유생을 먹이는데 이것 역시 윤충(Rotifer)과 마찬가지로 처음에는 담수종이었기 때문에 자·치어가 필요한 필수지방산이 부족하여 반드시 오메가-3 고도 불포화지방산, 특히 DHA 함량을 보충시키는 영양강화제로 영양강화시켜 자·치어에 급이하고 있다.
이렇게 윤충이나 알테미아는 양식어 종묘생산에 있어 중요한 먹이생물로 취급되고 있으나 위에서 지적한 바와 같이, 자·치어에게 꼭 필요한 필수지방산이 부족하기 때문에 영양강화라는 방법으로 오메가-3 고도 불포화지방산, 특히 DHA 함량을 높여주고 있다.
이러한 영양강화제로는 유지효모, 어유 유화오일, 마이크로캡슐 등이 나와 있으나 이들 유화제는 본질적으로
1) 영양강화시 높은 수온 (25-30℃)과 강한 에어레이션으로 인하여 고도 불포화지방산이 쉽게 산화되고,
2) DHA를 고농도로 농축시킨 제품들은 유리상태의 DHA를 메틸에스테르나 에틸에스테르 형태로 만든 제품이므로 이들 유리상태의 지방산은 어류 자·치어에게 독성이 있으며(Takeuchi, T., T. Arakawa, S. Satoh and Watanabe. 1992. Supplemental effect of phospholipids and requirement of eicosapentaenoic acid and docosahexaenoic acid if juvenile striped jack. Nippon Suisan Gakkaishi, 58, 707-713.)
3) 지질의 형태가 대부분 중성지질(트리글리세라이드)로 구성되어 있고 오메가-3 지방산과 오메가-6 지방산의 비가 불균형을 이루고 있으며,
4) 알테미아 영양강화시 DHA가 EPA로 역전환되고,
5) 윤충 고밀도 배양시의 배양수에 유막을 형성시켜 윤충의 생존율을 급격히 감소시킨다.
따라서, 유화제 된 영양강화제로는 자·치어에 꼭 필요한 영양을 충족시킬 수 없기 때문에 천연 영양강화제의 개발이 필수적이다.
본 발명에서는 천연 영양강화제를 개발하기 위하여 오메가-3 고도 불포화지방산을 다량 함유한 생물을 찾기 위하여 육상 동물과는 달리 해양생물에 풍부하게 분포하고 있는 오메가-3 고도 불포화지방산의 기원이 해양의 미세조류에서 시작되었음에 착안하였고 이는 식물성 프랑크톤이 광합성을 할 때 광합성 생체막의 필수성분이 오메가-3 고도 불포화지방산이기 때문이다.
그러나 해양에 분포하는 식물성 프랑크톤이 오메가-3 고도 불포화지방산의 주성분, 특히 DHA를 고함량으로 함유하는 일은 드물다.
예를 들면, 현재까지 전세계적으로 발견되어 양식종묘에 이용하고 있는 식물성 프랑크톤으로써 해산 녹조류인 클로렐라 에스피, 테트라셀미스 수에시카(Chlorellasp,Tetraselmis suecica)와 규조류인 캐토세로스 칼시트란스(Chaetoceros calcitrans)에는 EPA(20 : 5n-3)의 함량은 높으나 DHA(22 : 6n-3)는 거의 검출되지 않으며 편모 조류인 파브로바 루테리(Pavlova lutheri)와 아이소크라이시스 갈바나(Isochrysis galbana)등에는 DHA가 검출되는데 특히 아이소크라이시스 갈바나(Isochrysis galbana)에는 20.21wt%의 높은 DHA를 함유하고 있으나 본 발명의 신규 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2(Sπ-2)의 37.52wt%에는 절반에 미치고, 특히 최근에 주목받고 있는 고분자 불포화지방산인 DPA(22 : 5n-6)는 녹조류나 규조류, 편모조류에는 극미량으로 또는 검출되지 않는 반면, 본 발명의 주체인 신규 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2(Sπ-2)에는 13.85wt%라는 높은 함량을 보임을 하기의 표 5에서 확인할 수 있다.
| 지방산 | Chlorella sp. | Tetraselmis suecica | Chaetoceros calcitrans | Pavlova lutheri | Isochrysis galbana | 본 발명에 의한 Sπ-2 |
| 14 : 0 | 5.06 | 0.21 | 12.81 | 6.84 | 5.92 | 2.43 |
| 15 : 0 | 0.56 | - | 0.35 | 0.21 | 0.49 | 22.17 |
| 16 : 0 | 17.13 | 19.82 | 7.50 | 17.55 | 11.82 | 10.34 |
| 16 : 1n-9 | 0.15 | 0.34 | - | - | - | - |
| 16 : 1n-7 | 29.90 | 0.14 | 21.88 | 14.57 | 0.97 | 0.14 |
| 16 : 1n-5 | 0.47 | - | 0.43 | 0.12 | 2.25 | 0.05 |
| 16 : 2n-6 | - | 0.12 | 5.12 | 2.12 | - | - |
| 16 : 2n-4 | - | - | 6.30 | 0.72 | 0.05 | - |
| 16 : 3n-4 | 0.12 | - | 10.36 | - | - | - |
| 16 : 3n-3 | 0.27 | 1.54 | 0.30 | - | - | 0.05 |
| 16 : 4n-3 | - | 16.64 | - | - | 0.70 | - |
| 16 : 4n-1 | - | - | 2.36 | - | 0.17 | - |
| 18 : 0 | 1.63 | 0.34 | 0.79 | 0.30 | 0.34 | 0.60 |
| 18 : 1n-9 | 8.65 | 6.87 | 0.19 | 0.68 | 26.41 | 0.15 |
| 18 : 1n-7 | 0.02 | 3.45 | 0.78 | 2.43 | 0.85 | 0.13 |
| 18 : 1n-5 | 0.21 | 4.65 | 0.16 | - | - | - |
| 18 : 2n-6 | 1.02 | 1.63 | 0.07 | 0.65 | 4.33 | - |
| 18 : 2n-4 | 0.30 | - | 0.29 | - | - | - |
| 18 : 3n-6 | 0.44 | 0.42 | 0.09 | 0.54 | 0.98 | 0.24 |
| 18 : 3n-4 | 0.25 | - | - | - | - | - |
| 18 : 3n-3 | 0.26 | 24.56 | 0.29 | 2.15 | 4.99 | 0.06 |
| 18 : 4n-3 | - | 6.72 | 0.97 | 11.97 | 16.17 | 0.23 |
| 20 : 0 | 0.13 | - | 0.33 | - | 0.04 | 0.05 |
| 18 : 5n-3 | - | - | - | - | 1.70 | - |
| 20 : 3n-6 | 0.05 | - | 0.01 | - | 0.07 | 0.39 |
| 20 : 3n-3 | 0.01 | 0.14 | - | - | 0.22 | - |
| 20 : 4n-6 | 4.96 | 0.98 | 0.19 | 0.78 | - | 0.89 |
| 20 : 4n-3 | - | 0.63 | 0.17 | - | - | 1.36 |
| 20 : 5n-3 | 28.68 | 8.78 | 24.70 | 28.76 | 0.39 | - |
| 21 : 5n-3 | - | - | 0.07 | - | 0.09 | - |
| 22 : 0 | 0.12 | - | 0.13 | - | 0.05 | - |
| 22 : 5n-6 | - | - | 0.07 | 0.95 | - | 13.85 |
| 22 : 5n-3 | - | - | 0.03 | - | 0.09 | 1.51 |
| 22 : 6n-3 | - | - | 1.06 | 8.03 | 20.21 | 37.52 |
| others | 0.33 | 2.02 | 1.41 | 0.70 | 0.70 | 7.22 |
| 20 : 5n-3 (EPA) | 28.68 | 8.78 | 24.70 | 28.76 | 0.39 | - |
| 22 : 5n-6 (DPA) | - | - | 0.07 | 0.95 | - | 13.85 |
| 22 : 6n-3 (DHA) | - | - | 1.06 | 8.03 | 20.21 | 37.52 |
| Σn-3HUFA | 28.69 | 9.55 | 26.03 | 36.79 | 20.78 | 40.39 |
현재까지 대부분의 해양세균(Bacteria)과 곰팡이(Fungi)는 오메가-3 고도 포화지방산을 생합성하지 못하는 것으로 알려져 있으며, 단지 몇 종류의 곰팡이 종류가 오메가-3 고도 불포화지방산을 소량, 혹은 흔적적으로 생산하는 것으로 알려져 있다(Wette, J.D. 1980. Lipid biochemistry of fungi and other organisms. Pleumn Press, New York, pp. 45-95. / Wassef, M. 1977. Fungal lipids. Adv. Lipid Res., 15, 159-232. / Erwin, J. 1973. Comparative biochemistry of fatty acids in eukaryotic microorganisms. In: Lipids and Biomembranes of Eukaryotic Microorganisms. J. Erwin (ed.), Academic Press, New York, pp. 41-143.)또한, 오메가-6 고도 불포화지방산을 다량으로 함유하는 일차 생산자는 거의 찾아 볼 수 없다.
해산어류에서도 오메가-6 고도 불포화지방산인 ARA(20 : 4n-6)는 2% 이하이며, ARA 보다는 더욱 고분자 불포화지방산인 DPA(22 : 5n-6)는 아주 소량으로 나타나기 때문에 해양 프랑크톤중에서 오메가-3 지방산의 최종 합성물질인 DHA와 오메가-6 지방산의 최종 생합성물질인 DPA를 동시에 갖는 미세조류는 양식 종묘산업의 영양강화 문제점 해결에 획기적인 기여를 할 것이다.
하기의 표 6은 필수 아미노산의 함량 비교를 나타낸 것으로 표 3에 의하면, 본 발명에 의한 신규 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2는 양식 종묘산업에 있어 기초먹이로 이용되는 윤충과 알테미아의 먹이 또는 영양강화제로써 이들 기초먹이에 필요한 필수아미노산을 다량함유하고 있음을 알 수 있다.
| 담수산chlorella sp.(wt%) | 해수산chlorella sp.(wt%) | 본 발명에 의한Sπ-2 (wt%) | |
| Asp | 12.02 | 14.91 | 17.39 |
| Thr | 5.95 | 6.30 | 8.50 |
| Ser | 5.53 | 6.15 | 8.12 |
| Glu | 16.13 | 24.47 | 24.60 |
| Gly | 12.90 | 12.01 | 14.41 |
| Ala | 12.80 | 12.96 | 12.72 |
| Val | 8.21 | 7.85 | 10.20 |
| Met | 2.07 | 1.80 | 3.57 |
| Ilo | 5.68 | 5.93 | 8.33 |
| Leu | 12.13 | 12.27 | 13.53 |
| Tyr | 4.56 | 4.60 | 5.21 |
| Phe | 6.71 | 7.94 | 7.82 |
| His | 8.00 | 8.18 | 9.64 |
| Lys | 13.83 | 8.37 | 16.05 |
| NH3 | 3.02 | 2.76 | 2.61 |
| Arg | 10.96 | 9.67 | 12.88 |
| Total | 140.50 | 146.17 | 175.58 |
상기한 바와 같이, 본 발명에 의한 신규 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2는 필수 아미노산과 고도 불포화지방산, 특히 DHA(22 : 6n-3)와 DPA(22 : 5n-6)의 함량이 매우 높아 양식 종묘산업의 영양강화 문제를 해결할 수 있으며, 또한, 양식 종묘산업에 있어 기초먹이로 이용되는 윤충과 알테미아의 먹이 또는 영양강화제로서 이들 기초먹이에 필요한 필수 아미노산 뿐만 아니라 DHA, DPA 등의 고도 불포화지방산을 보충할 수 있는 잇점이 있다.
Claims (2)
- 다량의 필수아미노산과 오메가-3 고도 불포화지방산인 DHA(22:6n-3)와 오메가-6 고도 불포화지방산인 DPA(22:5n-6)를 함유한 신규 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2(KCTC 0694BP).
- 이스트 추출물, 소이톤(soytone), 프로테오스 펩톤 No.3(proteose pepton No.3), 폴리펩톤, 페릭 시트레이트(ferric citrate), 글루코즈로 이루어지는 조성물에 해수를 혼합하여 제조되는 배지에서 배양하는 것을 특징으로 하는 신규 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2(KCTC 0694BP)의 배양방법.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1019990057191A KR100338193B1 (ko) | 1999-12-13 | 1999-12-13 | 신규 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2 및 그 배양방법 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1019990057191A KR100338193B1 (ko) | 1999-12-13 | 1999-12-13 | 신규 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2 및 그 배양방법 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| KR20010055871A KR20010055871A (ko) | 2001-07-04 |
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ID=19625439
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| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| KR1019990057191A KR100338193B1 (ko) | 1999-12-13 | 1999-12-13 | 신규 원시균류 씨져카이트리움 에스피. 에스파이-2 및 그 배양방법 |
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|---|---|
| KR (1) | KR100338193B1 (ko) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1989000606A1 (en) * | 1987-07-20 | 1989-01-26 | Maricultura, Incorporated | Microorganism production of omega-3 (n-3) lipids |
| US5130242A (en) * | 1988-09-07 | 1992-07-14 | Phycotech, Inc. | Process for the heterotrophic production of microbial products with high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids |
| US5340742A (en) * | 1988-09-07 | 1994-08-23 | Omegatech Inc. | Process for growing thraustochytrium and schizochytrium using non-chloride salts to produce a microfloral biomass having omega-3-highly unsaturated fatty acids |
-
1999
- 1999-12-13 KR KR1019990057191A patent/KR100338193B1/ko not_active IP Right Cessation
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO1989000606A1 (en) * | 1987-07-20 | 1989-01-26 | Maricultura, Incorporated | Microorganism production of omega-3 (n-3) lipids |
| US5130242A (en) * | 1988-09-07 | 1992-07-14 | Phycotech, Inc. | Process for the heterotrophic production of microbial products with high concentrations of omega-3 highly unsaturated fatty acids |
| US5340742A (en) * | 1988-09-07 | 1994-08-23 | Omegatech Inc. | Process for growing thraustochytrium and schizochytrium using non-chloride salts to produce a microfloral biomass having omega-3-highly unsaturated fatty acids |
| US5518918A (en) * | 1988-09-07 | 1996-05-21 | Omegatech, Inc. | Microfloral biomass having omega-3 highly unsaturated fatty acids |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20010055871A (ko) | 2001-07-04 |
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