KR100310665B1

KR100310665B1 - 피부질환치료용약제학적조성물

Info

Publication number: KR100310665B1
Application number: KR1019940006325A
Authority: KR
Inventors: 로버트라이더바틀렛; 클라우스율리흐바이트만; 엘렌스미쓰쿠르츠
Original assignee: 로버트 흐라이탁, 미쉘 베스트; 아벤티스 파마 도이칠란트 게엠베하
Priority date: 1993-03-31
Filing date: 1994-03-29
Publication date: 2001-12-28
Also published as: KR940021060A; DK0617959T3; ATE183088T1; CA2120319A1; US5504084A; JPH06329538A; IL109151A0; HU9400908D0; GR3031264T3; TW314467B; AU5915794A; ES2135500T3; EP0617959A1; DE69419954T2; CA2120319C; HU216194B; ZA942257B; RU2151597C1; HUT70757A; JP2930281B2

Abstract

일반식(I) 또는 (II)의 화합물 및 일반식(II)의 화합물의 생리학적으로 허용되는 염은 건선 치료에 적합하다.

상기식에서,

R¹, R², R³, 및 X는 명세서에서 정의한 바와 같다.

Description

[발명의 명칭]

피부 질환 치료용 약제학적 조성물

[발명의 상세한 설명]

본 발명은 피부 질환 치료용 약제에 관한 것이다.

유럽 공개특허공보 제 0 013 376호에는, N-(4-트리플루오로메틸페닐)-5-메틸이속사졸-4-카복스아미드(화합물 1)가 소염 활성을 갖는 것으로 기재되어 있다. 이 화합물의 제조방법 또한 이 문헌에 기술되어 있다.

추가로, 화합물 1 및 N-(4-트리플루오로메틸페닐)-2-시아노-3-하이드록시크로톤아미드(화합물 2)가 면역조절 특성을 지니기 때문에, 이들이 만성 대숙주성 이식편병 및 자가면역 질환, 특히 전신성 홍반성 낭창에 대한 약제로서 적합한 것으로 공지되어 있다(유럽 공개특허공보 제 0 217 206호).

미합중국 특허 제4,061,767호에는, 소염 및 진통 작용을 나타내는 약제를 제조하는 데 있어서의 2-하이드록시에틸리덴-시아노아세트 아닐라이드 유도체의 용도가 기재되어 있다.

건선은 적색 반점의 발현을 특징으로 하는 특정 형태의 피부 질환으로서, 건조해지고, 낙설(scaly)되는 경향이 있다. 건선은 성인에게서 가장 빈번히 발생한다. 건선의 발현은 약간의 병변으로부터 광범위한 질환에 이른다. 건선 병변은 비정상적으로 증가된 표피 세포 증식에 의해 야기되는데, 예를 들면 각질세포의 증식이 심해진다. 이 질환은 박락을 야기하게 되는데, 외관상 흉하고 감성적으로 스트레스를 유발하지만 일반적인 건강을 해치진 않는다. 1992년 미합중국에서는 4백만 내지 8백만 인구가 건선을 앓고 있는 것으로 집계되었다. 해마다 약 200,000건의 새로운 질환 사례가 진단되고 있다. 건선은 세계적인 문제로서, 유럽에서는 인구의 1 내지 2%가 이 질환을 앓고 있는 것으로 보고되었다. 건선의 병인은, 유전적 요인을 지니는 것처럼 보이지만, 미확인된 상태로 남아있다. 일반적인 건선 유형은 다음과 같다:

심상(반점) 만성 반점 건선은 보통 피부연화제, 타르, 디트란올 및 국소용 코리티코스테로이드로 가정에서 치료할 수 있다. 작용기작은 각질세포 증식 및 분화의 직접적인 조절인 것으로 보인다. 환자에 의해 피부자극이 빈번히 인식되지만, 드물게는 치료의 중단을 필요로 하기도 한다.

발진/적상 소아 및 청년에서의 발진성 건선은 베타용혈성 연쇄상 구균에 의한 상부 기도 감염에 따르는 다발성의 점적성(drop-like) 병변의 급성 발현을 특징으로 한다.

홍피증 건선은, 홍반(조홍) 및 피부 전반의 낙설을 포함하여, 쾨브너(Koebner) 현상에 의해 야기될 수 있는 중증의 만성 상태로 일반화될 수 있다.

농포 대부분의 성인에게서 발병하는 농포성 건선은 국소적이며 만성적이거나, 보다 심한 경우에는 전신에 나타날 수 있다. 국소적 형태와 전신성 형태 모두에 영향을 주는 침착 인자에는 다양한 약물(예: 리튬, 하이드로클로로퀸), 자극성 국소요법(예: 코올타르), 치아 및 상부 호흡기 감염, 임신 및 일광 자극이 포함된다. 유발 인자의 제거가 관리의 첫번째 주안점이다.

건선 치료가 전적으로 만족스러운 것은 아니다. 다수의 연고 및 납고가 사용되었으나, 이에 대한 반응은 예상할 수 없었다. 빈번하게는, 일광 또는 자외선으로의 노출이 상태를 호전시켰으나, 이러한 형태의 치료에도 불구하고 건선이 완화되지 못하는 경우가 있다.

건선 치료를 위한 유망한 치료적 접근책은 면역억제제를 사용하는 것이다. 건선 치료를 위해 경구용 사이클로스포린 A를 사용한 인체 연구가 근 9년 동안 진행중이다. 이는 전세계적으로 중증 건선을 앓는 수천명의 환자를 치료하였고, 높은 성공률을 보이고 있다. 대부분의 강력한 약물과 같이, 사이클로스포린 A는 다수의 부작용을 나타내며, 이중 대부분은 일시적이고 심각한 정도는 아니다. 하지만, 가장 극단적 부작용이 신부전증으로 남아 있다[참조; Mason J. Pharmacol rev, 41: 423, 1989; Borel and Kis, Transplantation Proc., 23; 1867-1874, 1991].

면역억제제를 사용한 치료는 종종 신경독성을 포함하는 독성, 고혈압, 저마그네슘혈증, 빈형, 백혈구감소증, 혈판감소증, 감염에 대한 감수성, 신기능 손상 및 배자기형 발생과 같은 심각한 부작용과 관련되어 있다.

건선 치료를 위한 보다 우수한 제제를 개발하기 위한 시도로서, 일반식(I) 또는 (II)의 화합물이 각질세포 증식을 효과적으로 억제한다는 사실이 밝혀졌다. 일반식(I) 또는 (II)의 화합물은 사람에게 널리 허용된다. 사람 치료 동안 감염에 대한 내성 감소, 신부전증, 또는 간 효소, 혈구 카운트 또는 체중과 같은 실험치의 관련 변화는 관찰되지 않는다. 일반식(I) 또는 (II)의 화합물은 기타 면역억제제에 비해, 위험성과 수익성의 비율이 보다 양호하고, 투약 중지 후에도 지속적인 약효를 나타내며 단기요법 및 장기 경감 간격의 가능성을 제공한다.

따라서 본 발명은, 유효량의 일반식(I) 또는 (II)의 화합물[여기서, 일반식(II)의 화합물은 화합물 자체로 또는 생리학적으로 허용되는 염의 형태로 존재한다]을 투여함으로써, 피부 질환의 예방 또는 치료를 필요로 하는 환자의 피부 질환을 예방하거나 치료하는 방법에 관한 것이다.

위의 일반식(I) 및 (II)에서,

R¹은 메틸, (C₃-C₆)-사이클로알킬 또는 탄소원자들 사이에 하나 이상의 이중 결합 또는 삼중결합을 갖는 (C₂-C₆)-알킬을 나타내고,

R²는 -CF₃또는 -CN을 나타내며,

R³은 (C₁-C₄)-알킬 또는 수소원자를 나타내고,

X는 -CH- 그룹 또는 질소원자를 나타낸다.

R¹이 메틸, 사이클로프로필 또는 -CH₂-CH₂-C ≡CH이고 R²가 -CF₃이며 R³이 메틸 또는 수소 원자이고 X가 -CH- 그룹인 일반식(I) 또는 (II)의 화합물이 바람직하다.

R¹이 메틸이고, R²가 -CF₃이며 R³이 수소원자이고 X가 탄소원자인 일반식(I)의 화합물[N-(4-트리플루오로메틸페닐)-5-메틸이속사졸-4-카복스아미드], 또는 R¹이 메틸이고 R²가 -CF₃이며 R³이 수소원자이고 X가 -CH- 그룹인 일반식(II)의 화합물 [N-(4-트리플루오로메틸페닐)-2-시아노-3-하이드록시크로톤아미드]이 특히 바람직하다.

일반식(II)의 화합물의 적합한 생리학적으로 허용되는 염으로는, 예를 들면, 생리학적으로 허용되는 유기 암모늄 염기염을 포함하여, 알칼리 금속염, 알칼리 토금속염 또는 암모늄염을 들 수 있다:

일반식(I) 또는 (II)의 화합물은 다음 방법으로 제조할 수 있다.

Y가 할로겐원자, 바람직하게는 염소 또는 브롬인 일반식(III)의 화합물을 일반식(IV)의 아민과 반응시켜 일반식(I)의 화합물을 수득한 다음, 이를 염기성 제제의 존재하에 반응시켜 일반식(II)의 화합물을 수득한다.

상기 반응은 공지의 방법[참고: EP 제13,376호; EP 제484,223호; EP 제538,783호; US 제4,061,767호]에 의해 표준 조건하에서 수행한다.

반응을 위한 출발물질은 공지되어 있거나 문헌으로부터 공지된 방법에 의해 용이하게 제조할 수 있다.

본 발명은 또한, 습진, 피부염, 약물성 피부염, 알레르기성 피부염, 중독성 피부염, 광알레르기성 피부염 및 아토피성 피부염의 성공적인 의학적 치료법에 관한 것이다.

본 발명은 추가로, 유효량의 일반식(I) 또는 (II)의 화합물 또는 일반식(II)의 화합물의 생리학적으로 허용되는 염을 투여함을 특징으로 하여, 각질 세포 증식을 억제하는 방법에 관한 것이다.

본 발명은 또한, 유효량의 일반식(I)의 화합물 및/또는 일반식(II)의 화합물을 약제학적으로 적합하고 생리학적으로 허용되는 부형제, 희석제 및/또는 기타 활성 물질 및 보조제와 함께 함유하는 약제에 관한 것으로, 이때 일반식(II)의 화합물은 화합물 자체로 존재하거나 생리학적으로 허용되는 염의 형태로 존재한다.

본 발명은 또한 일반식(I) 또는 (II)의 화합물 및/또는 일반식(II)의 화합물의 생리학적으로 허용되는 염을, 약제학적으로 적합하고 생리적으로 허용되는 부형제 및, 경우에 따라, 기타 적합한 활성 물질, 부가제 또는 보조제를 사용하여 적합한 투여형태로 제형화함을 특징으로 하는, 건선 치료용 약제의 제조방법에 관한 것이다.

본 발명에 따른 약제는 경구 투여, 국소 투여, 직장 투여 또는 비경구 투여할 수 있다.

적합한 고체 또는 액체 약제학적 투여형은 예를 들면, 입제, 산제, 피복 정제, 정제, (마이크로)캡슐제, 좌제, 시럽제, 쥬스, 현탁액, 유제, 점적제 또는 주사용 액제이고, 활성 성분의 서방성 제제는 통상의 보조제, 즉 부형제, 붕해제, 결합제, 피복제, 팽윤제, 윤활제, 풍미제, 감미제 또는 용해제를 함유한다. 언급될 수 있는 보편적으로 사용되는 보조제로는, 예를 들면, 탄산마그네슘, 이산화티탄, 락토오스, 만니톨 및 기타 당, 탈크, 유단백질, 젤라틴, 전분, 셀룰로스 및 이의 유도체, 동물성 및 식물성 오일, 폴리에틸렌 글리콜 및 용매, 예를 들면 멸균수 및 1가 또는 다가 알콜, 예를 들면 글리세롤을 들 수 있다.

바람직하게는, 약제학적 제제를 제조하여, 각각의 단위가 활성 성분으로서 특정 용량의 일반식(I) 및/또는 (II)의 화합물(여기서, 일반식(II)의 화합물은 화합물 자체로 또는 생리학적으로 허용되는 염 형태로 존재한다)을 함유하는 단위 용량 형태로 투여한다. 정제, 캡슐제 또는 좌제와 같은 고체 단위 용량 형태의 경우, 이러한 용량은 약 500㎎ 이하, 바람직하게는 5 내지 400㎎, 5 내지 200㎎, 10 내지 100㎎, 10 내지 25㎎일 수 있다.

초기 단계의 건선을 앓는 환자(70kg)를 치료하기 위해서는, N-(4-트리플루오로메틸페닐)-5-메틸이속사졸-4-카복스아미드 및/또는 N-(4-트리플루오로메틸페닐)-2-시아노-3-하이드록시크로톤아미드를 1일 600㎎ 이하, 바람직하게는 1일 300㎎의 부하용량이, 후기 재활기에서는 1일 200㎎씩 3회, 바람직하게는 1일 20㎎씩 1회 투여하도록 지시된다.

하지만 특정 상태하에서는, 보다 높거나 낮은 용량이 적절할 수 있다. 용량 투여는 개개의 단위 용량 형태 또는 다수의 보다 적은 단위 용량 형태로 단독 투여하거나 분할된 용량을 소정 간격을 두고 수회 투여시킬 수 있다.

예방은 감염되기 쉬운 포유동물이 건선에 걸리는 것을 예방하는 것을 포함하고, 치료는 감염되기 쉬운 포유동물의 건선이 진전되는 것을 막고 진행을 지연시킴을 포함한다.

일반식(I) 또는 (II)의 화합물 및/또는 이의 상응하는 염은 또한 상기 약제학적 투여형을 제조하는 동안 기타 적합한 활성 물질, 예를 들면 항요산증제, 혈소판응집 억제제, 진통제 및 스테로이드성 또는 비스테로이드성 소염제와 함께 혼합할 수 있다.

[실시예 1]

N-(4-트리플루오로메틸페닐)-5-메틸이속사졸-4-카복스아미드(화합물 1)의 제조

아세토니트릴 20㎖ 중의 5-메틸이속사졸-4-카보닐 클로라이드 0.05몰(7.3g)의 용액을 실온에서 아세토니트릴 150㎖ 중의 4-트리플루오로메틸아닐린 0.1몰(16.1g)의 용액에 적가한다. 20분간 교반한 후, 침전된 4-트리플루오로메틸아닐린 하이드로클로라이드를 흡인여과하여 아세토니트릴 20㎖로 2회 세척하고, 합한 여액을 감압하에 농축시킨다. 이로써 백색 결정질 N-(4-트리플루오로메틸페닐)-5-메틸이속사졸-4-카복스아미드(화합물 1) 12.8g을 수득한다.

[실시예 2]

N-(4-트리플루오로메틸페닐)-2-시아노-3-하이드록시크로톤아미드(화합물 2)의 제조

N-(4-트리플루오로메틸페닐)-5-메틸이속사졸-4-카복스아미드 0.1몰을 메탄올 100㎖에 용해시키고, +10℃에서 물 100㎖ 중의 수산화나트륨 0.11몰(4.4g)의 용액으로 처리한다. 혼합물을 30분간 교반하여 물로 희석시킨 후, 진한 염산으로 산성화한다. 침전된 결정 수득물을 흡인여과하고, 물로 세척한 후 공기 건조시킨다.

N-(4-트리플루오로메틸페닐)-2-시아노-3-하이드록시 크로톤아미드(화합물 2)24.4g을 수득한다.

메탄올로부터의 융점은 205 내지 206℃이다.

[실시예 3]

하기 스크린은 배양 중인 복제 세포의 DNA 내로의 티미딘 동족체 5-브로모-2'-데옥시-우리딘(BrdU)의 혼입을 측정함으로써 화합물의 시험관내 DNA 합성 억제력을 평가한다.

[재 료]

세포 : 정상 사람 표피 각질세포(NHEK, Clonetics Corp., San Diego, Ca).

표지화 시약 : 5-브로모-2'-데옥시우리딘 및 5-플루오로-2'-데옥시우리딘의 수용액(Amersham Corp., II).

뉴클레아제를 함유하는 항-브로모데옥시우리딘 항체(Clone BU-1, Amersham Corp., II).

퍼옥시다제-항-마우스 면역글로불린(양 항혈청 풀로부터의 Ig, Amersham Corp., II).

퍼옥시다제 기질 : ABTS [(2,2'-아지노-디-(3-에틸-벤즈티아졸린설포네이트)], Amersham Corp., II.

화합물 : 화합물은 무수 에탄올에 용해시킨다(최종 농도 ≤0.1%). 다양한 농도의 약물을 BrdU의 존재하에 티미딘 비함유 각질세포 생장배지(KGM, 하이드로코르티손 비함유, Clonetics Corp., CA)에서 제조한다.

410nm 필터 장착된 다이나텍(Dynatech) MR 7000 미세 평판 판독기

H₂O 1ℓ중 인산염 완충된 식염수(PBS).

Na₂HPO₄11.5g

NaH₂PO₄ㆍ2H₂O 2.96g

NaCl 5.84g

트윈-20(Sigma)

소혈청 알부민(BSA; Sigma)

아세트산/에탄올 고정제

빙초산 50㎖

에탄올 900㎖

물 50㎖

정지제(100㎖)

나트륨 아지드 0.01g

시트르산 일수화물 2.10g

[방 법]

각질세포를 96-웰 바닥이 편평한 배양 디쉬(직경 6.4mm)에 5,000세포/웰이 되도록 접종한다. 세포를 생장시킨 후(2 내지 3일), BrdU 존재하에(1:200), 티미딘과 하이드로코르티손의 부재하에 KGM 중에서 제조된 다양한 농도의 화합물로 투여한다. 37℃, 5% CO₂하에 18 내지 24시간 후, 세포를 고온 PBS로 세척하고 아세트산/에탄올로 실온에서 30분간 고정시킨다. 웰을 PBS/0.1% 트윈-20으로 세척한 후, 남아있는 폴리스티렌 평판상의 정전부위를 PBS/0.1% 트윈-20 중의 3% BSA로 차단한다. DNA를 변성시키기 위해, 뉴클레아제와 함께 항-브로모데옥시우리딘 항체 용액을 각각의 웰에 가해 37℃, 5% CO₂하에서 2시간 동안 배양한다. 평판을 PBS/0.1% 트윈-20으로 재세척한 후 실온에서 퍼옥시다제-함유(lined) 항-마우스 면역글로불린(1:600)과 함께 배양한다. 제2 항체를 세척한 후, 1mM ABTS 기질 용액을 목적하는 색도(녹색)가 수득될 때까지 모든 웰에 가한다. 정지제를 부가하여 발색을 중단시킨다. 그후, BrdU에 노출되지 않은 웰 중의 세포를 블랭크로서 사용하여, 흡광도를 미세평판 판독기로 410nm에서 측정한다.

[결 과]

색반응도는 증식세포에 의해 혼입되는 BrdU에 비례한다. 웰에서 처리된 세포 내에 혼입된 BrdU의 양을 하기와 같이 비처리된 대조군의 그것과 비교한다:

대조군으로부터의 변화율(%) =×100(-100)

[표 1 nhek 증식 억제(BRDU)]

IC₅₀: 억제 농도; NS : 유의적이지 않음.

[실시예 4]

[복강내 투여후 급성 독성]

시험물질의 복강내 투여후 급성 독성을 NMRI 마우스(20 내지 25g) 및 SD 래트(120 내지 195g)를 사용하여 측정한다. 시험물질을 1% 농도의 나트륨 카복시메틸셀룰로스 용액에 현탁시킨다. 상이한 투여량의 시험물질을 마우스에서는 체중 kg당 10㎖의 용량으로, 래트에서는 체중 kg당 5㎖의 용량으로 투여한다. 투여당, 10마리 동물을 사용한다. 3주 후, 리치필드 및 윌콕스(Litchfield and Wilcox)의 방법에 의해 급성 독성을 측정한다.

결과는 표 2에 요약되어 있다.

[표 2]

[실시예 5]

[사람을 이용한 이중 블라인드 연구]

400명의 사람을 대상으로 한 무작위 이중 블라인드(double blind) 연구에서, 환자는 화합물 1을 각각 50, 100 및 100mg의 1회 초기 용량을 투여한 후, 매일 5, 10 및 25mg을 6개월간 투여하여 치료한다. 이러한 연구에서 사람의 뇨 분석은 신부전증을 나타내지 않는다(신독성 없음).

Claims

활성 성분으로서 N-(4-트리플루오로메틸페닐)-2-시아노-3-하이드록시크로톤아미드, 또는 N-(4-트리플루오로메틸페닐)-5-메틸이속사졸-4-카복스아미드 또는 생이학적으로 허용되는 이의 염을 포함하는, 각질 세포 증식으로부터 야기되는 피부 질환 치료용 약제학적 조성물.
제1항에 있어서, 피부 질환이 건선, 심상성 건선, 발진성 건선, 홍반성 건선 및 농포성 건선으로 이루어진 그룹으로부터 선택되는 약제학적 조성물.
제2항에 있어서, 피부 질환이 건선인 약제학적 조성물,
제1항에 있어서, 정맥내, 경구, 국소 또는 비경구 투여되는 약제학적 조성물.
제1항에 있어서, 약 500mg 이하의 고체 단위 용량 형태로 투여되는 약제학적 조성물.