KR100203456B1 - 디하이드로에보디아민-에이치씨1를 유효성분으로 함유하는 알츠하이머병에 의한 치매 치료제 - Google Patents

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Abstract

본 발명은 아세틸콜린 에스터레이즈(acetylcholinesterase; AChE)의 활성을 저해하는 디하이드로에보디아민-HCl(Dehydroevodiamine-HCl)을 유효성분으로 함유하는 기억항진 및 치매 치료제에 관한 것이다. 본 발명의AChE의 활성을 저해하는 디하이드로에보디아민-HCl는 기억감퇴를 유발시킨 동물모델에서 기억항진효과를 가지고 있음을 확인하였다. 따라서, 본 발명의 AChE 활성을 저해하는 저해하는 디하이드로에보디아민-HCl는 약제학적으로 허용되는 담체와 함께 효과적인 기억항진 및 치매 치료제로 사용될 수 있다.

Description

디하이드로에보디아민 -HCl를 유효성분을 함유하는 알츠허아머병에 의한 치매 치료제
제 1 도는 오수유(Evodia rutaecarpa Benth.)의 소분획 추출물에 의한 AChE 활성억제 정도를 나타낸 그래프로서 각각의 값은 평균값±평균오차를 나타내며, *는 대조군과 소분획 사이의 Wilcoxon-rank sum test에 의하여 얻은 값(p〈0.05)이다.
제 2 도는 DHED의 핵자기공명분석(NMR)결과이다.
제 3 도는 오수유(Evodia rutaecarpa Benth.)로부터 추출한 디하이드로에보디아민-HCl(Dehydroevodiamine-HCl)의 농도에 따른 아세틸콜린 에스터레이즈(acetylcholinesterase)의 활성 저해정도를 나타내는 그래프로서 각각의 값은 평균값±평균오차(n=5)이다.
제 4 도는 DHED(40μm)를 첨가한 경우(a)와 DHED를 첨가하지 않은 경우(b) 각각의 기질농도 변화(23∼230μM)에 따른 AChE 활성에 대한 Lineweaver-Burk plots이다.
제 5도는 DHED의 1회 투여(6.25 mg/kg)에 의한 기억증진효과를 나타낸 것으로서 각각의 값은 평균값±평균오차(n=5)이다.
*는 염수(saline)대조군과의 차이가 유의성이 있으며, 이 값은 Wilcoxon-rank sum test에 의하여 얻은 값(p〈0.05)이다.
**는 스코폴아민 처리군과의 차이가 유의성이 있으며, 이 값은 Wilcoxon-rank sum test에 의하여 얻은 값(p〈0.05)이다.
제 6도는 DHED의 만성 투여(1회/1일씩 5일)에 의한 기억증진효과를 나타낸 것으로서 각각의 값은 평균값±평균오차(n=10)이다.
*는 염수(saline)대조군과의 차이가 유의성이 있으며, 이 값은 Wilcoxon-rank sum test에 의하여 얻은 값(p〈0.05)이다.
**는 스코폴아민 처리군과의 차이가 유의성이 있으며, 이 값은 Wilcoxon-rank sum test에 의하여 얻은 값(p〈0.05)이다.
본 발명은 다음 구조식(Ⅰ)로 표시되는 디하이드로에보디아민HCl(Dehydroevodiamine-HCl)를 유효성분으로 함유하는 알츠하이머병에 의한 치매 치료제에 관한 것으로서, 더욱 상세하기로는 아세틸콜린 에스레이즈(acetylcholinesterase)의 활성을 저해하고 기억을 증진시키는 디하이드로에보디아민-HCl의 알츠하이머병에 의한 치매에 대한 치료제로서의 용도에 관한 것이다.
알츠하이머병(Alzheimer's disease)으로 알려진 노인성 치매질환은 동·서양, 인종 및 남녀를 불문하고 발병할 수 있으므로 노인 인구가 급증하고 있는 현재의 상황을 고려할 때, 21세기에 인류가 당면할 최대의 보건문제로 대두되고 있다. 현재, 대한민국에서는 약 30만명 이상의 노인성 또는 혈관성 치매 환자가 있는 것으로 추정되며, 서구사회에서는 65세 이상 인구의 약 10%, 80세 이상 인구의 약 40 내지 50%가 알츠하이머병에 이환되어 있을 것으로 추정되어 있다. 아울러, 일본 및 중국에서도 해마다 알츠하이머병의 이환율이 증가하고 있는 실정이다.
노인성 치매의 원인에 대해서는 지금까지 바이러스설 및 알루미늄 중독설 등이 제시되었고, 최근에는 노인성 치매환자의 뇌병변에 침착하는 베타-아밀로이드 단백질의 독성이 그 원인으로 제시되기도 하였으나, 아직까지 확실하게 밝혀지지 않고 있다.
이와 같은 원인불명 때문에 치매를 원인적으로 치료할 수는 없지만, 중추신경계의 아세틸콜린 기능의 감소가 노인성 치매환자에게서 나타나는 가장 현저한 특징이므로, 여러 연구자들에 의해 아세틸콜린의 전구체를 투여하거나 아세틸콜린의 분해를 저해하는 약물(acetylcholinesterase inhibitor ; 이하 AChEI라함)을 투여하여 뇌의 아세틸콜린 농도를 높여 줌으로써, 치매증상을 개선시키려는 노력이 시도되어 왔다.
이러한 노력의 결과로 카바메이트계 또는 L-Huperzine A를 유효성분으로 하는 약물이 개발되었으나, 아직까지 만족할 만한 치매 치료효과를 나타내지 못하고 있으며 더욱이 중추신경계에 특이적인 AChEI의 개발은 아직도 미흡하다.
국내외에서 현재 사용되고 있는 치매 치료제로는 증상개선을 위한 AChEI, 신경세포의 에너지 대사를 비특이적으로 항진시키는 대사항진약물, 그리고 미세혈액순환을 증진시키는 혈액순환개선제 등이 있으나, 이 약물들의 효과는 일시적이고 미약하며, 특히 상기 약물에 의한 노인성 치매환자의 뇌병변이 개선되었다는 보고는 아직 없다. 또한, 상기 약물들은 부교감신경자극을 통해 오심, 구토 및 기관지수축 등의 부작용을 나타내고, 우울증, 불면증, 고혈압 및 변비 등을 야기하는 문제점을 가지고 있다.
따라서, 노인성 및 혈관성 치매의 치료효능이 우수하고, 뇌병변의 개성까지 가능하며, 부작용이 적은 치료제가 절실히 필요하게 되었다.
이에, 본 발명자들은 상기와 같은 문제점을 해결할 수 있는 가능성을 지닌 새로운 치매 치료제를 천연물로부터 찾아내고자 노력한 결과, 오수유(Evodia rutaecarpa Benth)로부터 분리한 상기 구조식(Ⅰ)로 표시되는 디하이드로에보디아민-HCl(Dehydroevodiamine-HCl; 이하, DHED라 함)이 아세틸콜린 에스터레이즈(acetylcholinesterase; 이하, AChE 라 함)의 활성을 저해할 뿐만 아니라 기억감퇴를 유발시킨 동물모텔에서 기억 항진효과를 나타냄을 발견함으로써 본 발명을 완성하였다.
따라서 본 발명은 AChE의 활성을 저해하는 DHED를 유효성분으로 함유하는 알츠하이머병으로 인한 치매 치료제를 제공하는데 그 목적이 있다.
이하, 본 발명은 상세히 설명하면 다음과 같다.
본 발명은 디하이드로에보디아민-HCl(Dehydroevodiamine-HCl) 및 그의 기능적 등가물을 유효성분으로 하고 약학적으로 허용되는 담체가 함유되어 있는 알츠하이머병 치매 치료제를 그 특징으로 한다.
본 발명에 따른 알츠하이머병 치매 치료제에 있어서, 유효성분으로 사용되는 DHED는 오수유로부터 추출분리된 천연추출물이거나 또는 합성물질이다.
오수유(Evodia rutaecarpa Benth.)는 콜레라균, 피부사상균의 일부 및 회충을 포함한 기생충에 대하여 실험실 조건에서(in vitro) 강한 항균활성 및 살충효과를 나타내며, 자궁수축, 혈압강하 및 체온상승 등의 효과가 있고, 습진(eczema)또는 신경피부염(neurodematitis)의 치료에 효과가 있는 것으로 알려져 있다.
이러한 오수유로부터 추출된 상기 구조식(Ⅰ)로 표시되는 DHED는 여러 가지 생물학적 효과가 있는 것으로 보고되어 있는 바, 예를들면 혈압강하작용[Yang H. Y. et al., Asian Pac. J. Pharmacol. 3, 191∼196(1988)], 심박수강하작용[Yang M. C. et al., Eur. J. Pharmacol. 182, 537∼542(1990)], 이온채널억제 활성[Loh S. H. et al., Br. J. Pharmacol. 106, 517∼523(1992)], 뇌혈류증진 활성[Haji. A. et al., Nat. Prod. 57, 387∼389(1994)]등에 효과가 있다고 알려져 있다. 또한 AChEI가 백내장, 중증근무력증 및 폐쇄성알레우수에 유효한 약물임을 밝히는 많은 임상실험이 보고된 바 있다[Millard C. B. et al., J. Neurochem. 64, 1909∼1918(1995)].
오수유로부터 DHED를 추출하기 위해서는 먼저 오수유(Evodia rutaecarpa Benth.)를 80% 메탄올로 추출한 다음, 메탄올 추출물로부터 디클로로메탄으로 다시 추출하여 분획을 수득하고, 수득한 분획을 실리카 겔 크로마토그래피하여 소분획을 얻었다. 그런다음, 소분획 각각에 대한 AChE의 활성 저해정도를 측정하고, 가장 효과적으로 AChE의 활성을 저해하는 소분획 하나를 선택하여 사용하였다.
상기 소분획의 성분중 AChE 활성을 저해하는 성분이 무엇인지를 확인하기 위하여, 소분획을 메탄올로 재결정을 반복 실시하여 단일성분의 결정 화합물을 수득한 다음, 여러 가지 이화학적 특성과 함께 자외선(UV), 적외선(IR, 질량(MS) 및 핵자기공명(NMR) 분광기로 그 구조를 분석하였다. 그 결과 상기 소분획에 존재하는 AChE활성을 억제하는 물질이 이미 뇌 혈액의 흐름을 증가시키고 혈압강하의 효과를 지닌 것으로 공지된 상기 구조식(Ⅰ)로 표시되는 DHED임을 확인하였다.
또한, 상기 오수유 추출물에 함유된 DHED의 AChE에 대한 활성 저해정도를 농도별로 측정한 결과, 농도 의존적으로 AChE의 활성을 강하게 억제함을 확인하였다. 따라서, 실험실 조건에서(in vitro) AChE의 활성을 강하게 억제하는 DHED는 아세틸콜린 농도를 높여 줄 수 있으므로, 노인성 및 혈관성 치매 증상을 개선시킬 수 있으리라 예측되었다.
이러한 예측을 검정하기 위하여, DHED가 실제로 생체내에서 기억을 증진시키는지를 확인하기 위하여 기억감퇴를 유발한 동물모델을 이용한 수동적인 회피 테스트(passive avoidance test)로 알아보았다. 그 결과, 스코폴아민에 의해 유도된 건망증(scopolamine-induced amnesia)이 DHED 투여에 의해 기억이 증진됨을 알 수 있었다.
특히, AChE 활성억제 및 아세틸콜린의 농도를 높여주는 경우 알츠하이머병에 의한 치매치료에 효과가 있는 것으로 보고되어 있으므로, 위 결과로부터 본 발명의 DHED는 AChE에 대한 활성억제와 아세틸콜린의 농도를 높여주는 유의성 있는 효과가 있으므로 알츠하이머병에 의한 치매치료제의 용도로 더욱 유용할 것이다.
따라서, 본 발명에 따른 기억항진 및 치매 치료제는 오수유로부터 추출한 DHED를 유효성분으로 함유하고, 여기에 약제학적으로 허용 가능한 담체를 함유시킨 것이다.
또한, 본 발명에 따른 기억항진 및 치매 치료제는 오수유로부터 추출한 DHED 대신에 합성된 DHED를 유효성분으로 함유할 수도 있는바, DHED의 합성방법은 이미 공지되어 있다.[Chem. Pharm. Bull., 33(1), 101∼107(1967); J. Chem. Soc., 85(1969); J.A.C.S., 29, 6186∼6188(1976);일본약학잡지 Vol.82, 619].
이하, 본 발명을 실시예에 의하여 보다 구체적으로 설명하고자 한다. 이들 실시예는 오로지 본 발명을 설명하기 위한 것으로 본 발명의 범위가 이들 실시예에 국한되지 않는다는 것은 당업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 자명할 것이다.
실시예 1 : 오수유로부터의 소분획 제조
오수유 10kg을 80% 메탄올로 수욕상에서 추출하고 감압 농축하여 메탄올 추출물을 수득하였다. 이 추출물을 디클로로메탄(CH2Cl2)과 증류수가 1:1 부피비로 조합된 혼합용액에 가하고 진탕하여 방치한 다음, 디클로로메탄 분획 240g을 수득하였다. 이중 디클로로메탄 분획 120g을 실리카 겔(Merck 7734, USA)컬럼에 주입하고, 클로로포롬(CHCl3), 클로로포름/아세톤=30/1(v/v), 20/1(v/v), 10/1(v/v)의 각 혼합용액, 클로로포름/메탄올=10/1(v/v), 1/1(v/v)의 각 혼합용액으로 용출시켜 소분획을 수득하였다. 이들 소분획들을 얇은 막 크로마토그래피(thin layer chromatography: TLC)한 다음, 동일한 특정밴드를 나타내는 소분획끼리 합하여 20개의 소분획을 수득하고 각각을 동결건조시켰다.
실시예 2 : AChE의 활성 저해능 측정
상기 실시예 1에서 수득한 20개의 소분획 각각에 대한 AChE의 활성 저해정도를 측정하기 위하여, 우선 마우스의 대뇌피질에 10배의 인산 완충용액(400mM NaCl를 포함한 12.5 mM 인산 완충용액, pH 7.0)을 첨가하고 균질기(Potter-Elvehjem homogenizer)로 대뇌피질을 부쇄하였다. 이 균질액을 1,000g에서 10분간 원심분리하고 상등액을 수득한 다음, 상기의 인산 완충용액에 0.5% Triton X-100을 첨가하여 제조한 완충용액을 상충액 부피의 9배를 가하여 30분간 교반하고, 10,000g에서 10분간 윈심분리하여 그 상충액을 수득하고, 이를 AChE의 시료로 사용하였다.
상기 실시예 1의 동결건조된 20개 소분획 추출물을 소량의 증류수나 디메틸설폭사이드(DMSO)에 요해시키고, 100 mM 인산 완충용액(pH 8.0; 이하, 완충용액Ⅰ이라 함)으로 200㎍/㎖의 농도가 되도록 희석하였다. 이렇게 희석한 생약 추출물 1.5㎖, 완충용액 Ⅰ 1.5 ㎖, 75 mM 아세틸티오클린 아이오다이드(acetylthiocholine iodide)용액 20㎕ 및 Ellman 시약(buffered Ellman's reagent:10mM DTNB (5.5'-dithiobis-(2-nitrobenzoic acid)) 및 17.85mM NaHCO3로 구성된 용액)100㎕를 혼합하고 25℃에서 10분간 반응시칸 다음, 상기에서 제조한 AChE시료를 첨가하여 30초 간격으로 410nm에서 흡광도를 측정하였다. 5분간 흡광도를 측정하여, 각 소분획 추출물의 AChE 활성 저해능을 조사하였다. 이때, 대조군으로는 AChE시료를 첨가하지 않고 대신에 염수(saline)를 첨가한 반응액을 사용하였다. 또한, 아세틸티오콜린 아이오다이드를 첨가하지 않고 반응시켜 흡광도를 측정함으로써, 생약 추출물과 효소활성 측정용 시약 사이의 비특이적 반응은 일어나지 않음을 확인하였다.
상기에서 측정한 흡광도를 흡광계수 1.36 ℓ/mmol/min으로 나누어 AChE의 활성을 계산하였으며, 생약 추출물을 첨가하지 않은 반응액의 AChE활성도를 100%로 하였을 때 생약 추출물을 첨가한 반응액의 AChE활성 저해도를 '%억제'로서 도면 제 1도에 나타내었다. 이때, 각 실험을 5회 반복하여 실험결과의 유의성을 Wilcoxon-rank sum test 및 Median 2-sample test로 검정하였다.
도면 제 1도에 나타내었듯이, 소분획 #17 및 #20이 AChE의 활성을 가장 효과적으로 억제함을 알 수 있다.
따라서, AChE 활성을 억제하는 물질을 확인하기 위하여, 활성분획중 소분획 #17을 메탄올로 재결정을 반복 실시하여 미황색의 결정 화합물을 수득하였다.
실시예 3 : 활성분획에 존재하는 AChE 활성억제 물질의 확인
상기 실시예 2에서 수득한 소분획 #17의 결정 화합물의 구조를 동정하기 위하여, 융점 측정과 함께 자외선(UV), 적외선(IR), 질량(MS) 및 핵자기공명(NMR; 도면 제 2 도로서 첨부함) 분광기로 측정한 결과, 상기 결정 화합물의 이화학적 특성 및 분광학적 특성은 다음과 같다.
융점(mp) : 249∼251℃
UV λ max(MeOH)nm(log ℓ) :246(4.08), 305(sh, 3.64), 314(3.71), 365(4.36)
IR νmax(KBr)㎝-1: 3437, 3235, 1709, 1611, 1557, 1501, 1350, 1339, 1285, 1219, 1103, 766, 721, 687
MS m/z(rel. int) : 302[M-Cl]+
1H-NMR(300 MHz, DMSO-d6) δ : 3.35(2H, t, J=6.9Hz, H-6), 4.47(2H, t, J=6.7Hz, H-5), 4.37(3H, s, CH3), 7.29(1H, brt, J=7.6Hz, H-10), 7.54(1H, brt, J=7.6Hz, H-11), 7.69(1H, brt, J=8.6Hz, H-12), 7.81(1H, dt, J=1.2, 8.5Hz, H-18), 7.89(1H, brt, J=8.2Hz, H-9), 8.14(1H, dt, J=1.1, 8.6Hz, H-17), 8.20(1H, brt, J=8.3Hz, H-16), 8.36(1H, brt, J=7.8Hz, H-19), 12.33(1H, s, NH)
13C-NMR(75.5 MHz, DMSO-d6) δ : 18.44(C-6), 40.64(CH3), 42.02(C-5), 113.37(C-12), 118.44(C-16), 118.65(C-20), 120.05(C-2), 121.50(C-10), 121.56(C-9), 123.26(C-8), 127.60(C-9), 128.55(C-18), 128.75(C-11), 130.38(C-7), 136.57(C-17), 139.62(C-15), 141.30(C-13), 149.94(C-3), 158.09(C=0)
상기와 같은 결과로부터 소분획 #17에 존재하는 AChE활성을 억제하는 물질은 이미 공지된 DHED임을 확인하였다.
실시예 4 : DHED의 합성
상기 실시예 3에서 AChE활성 억제 물질로서 판명된 DHED는 다음과 같은 방법으로 합성이 가능하며, 합성된 DHED의 자외선(UV),적외선(IR),질량(MS) 및 핵자기공명(NMR) 분광기 측정 결과는 상기 실시예 3과 일치하였다.
실시예 5 : AChE에 대한 활성 저해효과 측정
상기 실시예 3 또는 실시예 4에서 수득한 DHED의 농도에 따른 AChE에 대한 활성저해정도를 측정하여 도면 제3도에 도시하였다. 도면 제3도에 의하면 DHED는 농도 의존적으로 AChE의 활성을 강하게 억제함을 알수 있고, 50%효소 활성억제농도(IC50)가 37.8. μM임을 확인할 수 있었다. 또한, 도면 제 4도는 DHED(40μM)를 첨가한 경우(a)와 DHED를 첨가하니 않은 경우 (b) 각각의 기질 농도 변화(23~230μM)에 따른 AChE의 활성에 대한 Lineweaver-Burk plots로서 DHED는 비경쟁적으로 AChE의 활성을 억제함을 확인하였다. 따라서, 이와같이 실험실 조건에서 AChE의 활성을 강하게 억제하는 DHED는 아세틸콜린 농도를 높여 줄 수 있으므로, 치매 증상을 개선시킬 수 있으리라 예측되었다.
실시예 6 : DHED에 의한 기억 증진효과 측정
DHED이 생체내에서 기억 증진효과를 나타내는지 알아보기 위하여, 기억감퇴를 유발한 동물모델을 이용하여 DHED의 1회 및 만성투여에 따른 기억증진 효과를 수동적인 외피 테스트(passive avoidance test)를 통하여 측정하였다.
DHED의 1회투여에 따른 기억 증진효과 측정
DHED의 1회 투여 효과를 알아보기 위하여, 소분획 #17의 동결건조물을 DMSO에 25㎎/㎖가 되도록 용해시키고, PBS(phosphate buffered saline)로 희석한 희석액을 체중이 180 내지 200g인 응성의 스프라그-돌리 래트(Sprague-Dawley rat)에 6.25㎎/㎏ 체중의 농도로 복강내 1회 투여하였다. 30분 경과 후, PBS에 용해된 스코폴아민(scopolamine)용액을 1㎎/㎏ 체중의 농도로 상기 래트에 투여한 다음, 30분 경과하면 바닥에 전기 그릿이 부착된 셔틀 상자(shuttle box with electric grid floor: 19L×9W×10.875H,Columbus Instruments, Model PACS-30, USA)의 칸막이 방(A)에 넣고 1500Lux의 조명을 켜면서 칸막이 문(connectic guillotine door : 3H×2.625 W)을 열어 주었다.
이때, 래트는 방안을 여기저기 살피다가 조명이 있는 칸막이 방(B)로 옮겨가게 되는데, 이와 동시에 자동적으로 칸막이 문이 닫혔다. 래트가 칸막이 방(B)로 옮겨가면, 불이 커진 상태에서 1mA의 전류를 5초 동안 통하게 하여 래트에게 발바닥 쇼크(footshock)를 주었다. 그러면, 래트는 어두운 방과 발바닥 쇼크와의 관계를 기억하게 되며, 24시간 후 칸막이 방 (A)에 넣어주고 불을 비추어도 칸막이 방(B)로 옮겨가는 것을 망설이게 된다. 이때의 망설임 시간 (latency)을 DHED와 스코폴아민 모두를 투여하지 않은 대조군과 스코폴아민(1 ㎎/㎏), DHED(6.25 ㎎/㎏) 각각 1회 투여한 그룹과 비교하였으며, 이는 도면 제 5도에 나타내었다.
도면 제5도 의하면, 스코폴아민에 의해 유도된 건망증(scopolamine-induced amnesia)이 DHED의 1회 전처리에 의해 기억이 유의성 있게 증진됨을 알 수 있다.
DHED의 만성투여에 따른 기억 증진효과 측정
DHED의 만성투여 효과를 알아보기 위하여, DHED를 5일동안 1일 1회 6.25㎎/㎏체중의 농도로 래트의 복강내 투여한 다음, 스코폴아민 용액을 1㎎/㎏체중의 농도로 상기 래트에 1회 투여하는 것을 제외하고는 상기 1회투여에 따른 기억증진 효과 측정 방법과 동일한 방법으로 망설임 시간을 측정하였으며, 그 결과는 도면 제6도에 나타내었다.
도면 제6도에 의하면, 1회 전처리한 DHED의 기억증진 효과는 물론 DHED의 만성투여에 의해 기억이 더욱 유의성 있게 증진됨을 알 수 있다. 따라서, DHED는 약학적으로 허용되는 담체와 함께 장기투여시 효과적인 기억항진 및 치매 치료제로 사용할 수 있음을 확인 할 수 있었다.
실시예 7 : 안정성 실험
본 발명에 따른 치매 치료제의 1회 독성을 래트를 가지고 시험하였다. 그 결과, 오수유 추출물의 LD50값이 피하주사에서 705 ㎎/㎏체중, 정맥주사에서 135㎎/㎏체중[참조: 中藥大辭典 上海科學技術出版社, 小學館 $, 831~834(1995)]이었다. 그리고 DHED 1회 경구투여에 의한 치사율을 측정한 결과는 다음표와 같다.
상기 표에 의하면 본 발명에 따른 DHED함유 약제조성물을 1회 경구투여했을 때 치사량(LD)이 2,000 ㎎/㎏체중인 것을 감안한다면, 본 발명의 AChE활성을 저해하는 DHED는 오수유에 내재하고 있으므로 후술하는 경구 및 비경구 투여시 효과량의 범위내에서 충분히 안전하게 사용될 수 있음을 알 수 있었다.
실시예8: 투여방법 및 효과량
성인(체중 50kg 기준)이 경우, 경구 투여 방법에 의해서는 10mg 내지 250mg 투여하고, 비경구 투여방법 예를들면 정맥주사 방법에 의해서는 10mg 내지 150 mg, 피하 및 근육주사 방법에 의해서는 10mg 내지 200mg의 용량으로 투여한다.
본 발명의 AChE 활성을 저해하는 DHED를 유효성분으로 함유하는 약제학적 조성물은 경구 또는 주사형태로 투여할 수 있다. 경구용 조성물로는 예를들면 정제 및 젤라틴 캡슐이 있으며, 이들은 활성 성분이외에 희석제(예: 락토스, 덱스트로스, 수크로스, 만니톨, 솔비톨, 셀룰로즈 및/또는 글리신), 활탁제(예:실리카, 탈크, 스테아르산 및 그의 마그네슘 또는 칼슘염 및/ 또는 폴리에틸렌 글리콜)를 함유하고, 정제는 또한 결합체(예: 마그네슘 알루미늄 실리케이드, 전분 페이스트, 젤라틴, 메틸셀룰로스, 나트륨 카복시메틸 셀룰로스 및/ 또는 폴리비닐피롤리돈)를 함유하며, 경우에 따라서 붕해제(예: 전분, 한천, 알긴산 또는 그의 나트륨염) 또는 비등 혼합물 및/또는 흡수제, 착색제, 향미제 및 감미제를 함유하는 것이 바람직하다. 주사용 조성물은 등장성 수용액 또는 현탁액이 바람직하고, 상기 조성물은 멸균하거나 또는 보조제(예: 방부제, 안정화제, 습윤제, 또는 유화제, 용액 촉진제, 삼투압 조절을 위한 염 및/ 또는 완충제)를 함유한다. 또한, 이들은 기타 치료적으로 유용한 물질을 함유할 수 있다.
이상에서 상세히 설명하고 입증하였듯이, 본 발명은 AChE의 활성을 저해하는 DHED를 유효성분으로 함유하는 기억항진 기억항진 및 치매 치료제를 제공한다.
본 발명의 AChE의 활성을 저해하는 DHED는 기억감퇴를 유발시킨 동물모델에서 기억항진효과를 가지고 있음을 확인하였다.

Claims (2)

  1. 다음구조식(I)로 표시되는 디하이드로에보디아민-HCl(Dehydrevodamine-HCl)을 유효성분으로 하고 약학적으로 허용되는 담체가 함유되어 있는 것을 특징으로 하는 알츠하이머병에 의한 치매 치료제
  2. 오수유로부터 구조식(I)의 디하이드로에보디아민을 추출하는 방법이 있어서, 오수유를 80% 메탄올로 1차 추출한 후 이 추출물을 진탕추출하여 디클로로메탄층을 얻고 이 분획을 실리카겔 크로마토그래피를 이용하여 클로로포름과 아세톤(1 내지 10:1 칼럼) 혼합액으로 용출하여 분획으로 제조함을 특징으로 하는 디하이드로에보디아민-HCl(DHED.HCl)의 제조방법.
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