JPWO2020223573A5 - - Google Patents
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様々な具体的な実施形態が例示および記載されているが、上記明細書は限定的ではない。本発明の趣旨および範囲を逸脱することなく、様々な変更がなされ得ることが認識されるであろう。多くの変更は、本明細書を鑑みて当業者にとって明らかになるであろう。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
抗原に特異的に結合する組換えポリクローナルタンパク質（ＲＰＰ）のライブラリーであって、
ａ．前記抗原が、ｂ型Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｉｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅの多糖であり、前記ライブラリーが、配列番号３３９８１～４７１７４の配列から選択される重鎖ＣＤＲ３および軽鎖ＣＤＲ３の配列の同族対をそれぞれ有する、少なくとも１００～６５９７個のＲＰＰを含むか、または
ｂ．前記抗原が、ｂ型Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｉｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅの多糖であり、前記ライブラリーが、配列番号４７１７５～６４３４０の配列から選択される重鎖ＣＤＲ３および軽鎖ＣＤＲ３の配列の同族対をそれぞれ有する、少なくとも１００～８５８３個のＲＰＰを含むか、または
ｃ．前記抗原が、ｂ型Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｉｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅの多糖であり、前記ライブラリーが、配列番号６４３４１～８０２５２の配列から選択される重鎖ＣＤＲ３および軽鎖ＣＤＲ３の配列の同族対をそれぞれ有する、少なくとも１００～７９５６個のＲＰＰを含むか、または
ｄ．前記抗原が、ｂ型Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｉｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅの多糖であり、前記ライブラリーが、配列番号８０２５３～１００６２６の配列から選択される重鎖ＣＤＲ３および軽鎖ＣＤＲ３の配列の同族対をそれぞれ有する、少なくとも１００～１０１８７個のＲＰＰを含むか、または
ｅ．前記抗原が、肺炎球菌の多糖であり、前記ライブラリーが、配列番号１～２１０７４の配列から選択される重鎖ＣＤＲ３および軽鎖ＣＤＲ３の配列の同族対をそれぞれ有する、少なくとも１００～１０５３７個のＲＰＰを含むか、または
ｆ．前記抗原が、Ｂ型肝炎ウイルス抗原であり、前記ライブラリーが、配列番号１００６２７～１０３８６０の配列から選択される重鎖ＣＤＲ３および軽鎖ＣＤＲ３の配列の同族対をそれぞれ有する、少なくとも１００～１６１７個のＲＰＰを含むか、または
ｇ．前記抗原が、Ｂ型肝炎ウイルス抗原であり、前記ライブラリーが、配列番号１０３８６１～１０６３８０の配列から選択される重鎖ＣＤＲ３および軽鎖ＣＤＲ３の配列の同族対をそれぞれ有する、少なくとも１００～１２６０個のＲＰＰを含むか、または
ｈ．前記抗原が、ヒト胸腺細胞を含み、前記ライブラリーが、配列番号１０６３８１～１２０１５の配列から選択される重鎖ＣＤＲ３および軽鎖ＣＤＲ３の配列の同族対をそれぞれ有する、少なくとも１００～６８８９個のＲＰＰを含む、ＲＰＰライブラリー。
(項目２)
各ＲＰＰが、ｓｃＦｖである、項目１に記載のＲＰＰライブラリー。
(項目３)
各ＲＰＰが、全長抗体である、項目１に記載のＲＰＰライブラリー。
(項目４)
各ＲＰＰが、全長抗体であり、ＣＨＯ細胞において産生される、項目１に記載のＲＰＰライブラリー。
(項目５)
各ＲＰＰが、前記抗原を注射された少なくとも１体のドナーからの形質細胞または形質芽細胞に由来する配列を使用して組換えで産生される、項目１から４のいずれか一項に記載のＲＰＰライブラリー。
(項目６)
各ＲＰＰが、前記抗原を注射された少なくとも１体のドナーからの形質細胞または形質芽細胞に由来する配列を使用して組換えで産生され、前記ＲＰＰライブラリーの活性が、前記抗原に対する前記ドナーの血清力価活性を少なくとも１０倍超える、項目１から４のいずれか一項に記載のＲＰＰライブラリー。
(項目７)
前記活性が、ｉｎ ｖｉｔｒｏ病原体中和アッセイまたは抗原に対するｉｎ ｖｉｔｒｏ結合アッセイまたはｉｎ ｖｉｖｏ有効性アッセイによって測定される、項目６に記載のＲＰＰライブラリー。
(項目８)
前記ドナーが、ヒトである、項目５から７のいずれか一項に記載のＲＰＰライブラリー。
(項目９)
少なくとも１００個、少なくとも１０００個、少なくとも１０，０００個または少なくとも１００，０００個のＲＰＰを含む、項目１から８のいずれか一項に記載のＲＰＰライブラリー。
(項目１０)
項目１から９のいずれか一項に記載のＲＰＰライブラリーおよび薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
(項目１１)
必要な対象を処置する方法であって、項目１から９のいずれか一項に記載のＲＰＰライブラリーまたは項目１０に記載の医薬組成物の有効量を前記対象に投与するステップを含む、方法。
(項目１２)
前記対象が、免疫不全、がん、アルツハイマー病、ウイルス感染症、細菌感染症を有するか、または実質臓器もしくは細胞の移植術を受けている、項目１１に記載の方法。
(項目１３)
項目１から９のいずれか一項に記載のＲＰＰライブラリーまたは項目１０に記載の医薬組成物の有効量を対象に投与するステップを含む方法。
(項目１４)
１つまたは複数の薬剤の投与をさらに含む、項目１１から１３のいずれか一項に記載の方法。
(項目１５)
各ポリヌクレオチドが、項目１から９のいずれか一項に記載のＲＰＰライブラリーの１つのメンバーをコードする、複数の単離されたポリヌクレオチド。
(項目１６)
各ベクターが、項目１から９のいずれか一項に記載のＲＰＰライブラリーの１つのメンバーをコードするポリヌクレオチドを含む、複数の単離されたベクター。
(項目１７)
発現ベクターである、項目１６に記載の複数の単離されたベクター。
(項目１８)
項目１５に記載の複数の単離されたポリヌクレオチドまたは項目１６もしくは項目１７に記載の複数の単離されたベクターを含む複数の単離された宿主細胞。
(項目１９)
項目１から９のいずれか一項に記載のＲＰＰライブラリーを産生する方法であって、項目１８に記載の単離された宿主細胞を、前記ＲＰＰライブラリーの発現のための条件下でインキュベートするステップと、前記ＲＰＰを単離するステップとを含む、方法。
(項目２０)
前記ＲＰＰが、全長抗体であり、前記単離された宿主細胞が、ＣＨＯ細胞である、項目１９に記載の方法。
本発明は、例えば、以下の項目を提供する。
(項目１)
抗原に特異的に結合する組換えポリクローナルタンパク質（ＲＰＰ）のライブラリーであって、
ａ．前記抗原が、ｂ型Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｉｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅの多糖であり、前記ライブラリーが、配列番号３３９８１～４７１７４の配列から選択される重鎖ＣＤＲ３および軽鎖ＣＤＲ３の配列の同族対をそれぞれ有する、少なくとも１００～６５９７個のＲＰＰを含むか、または
ｂ．前記抗原が、ｂ型Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｉｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅの多糖であり、前記ライブラリーが、配列番号４７１７５～６４３４０の配列から選択される重鎖ＣＤＲ３および軽鎖ＣＤＲ３の配列の同族対をそれぞれ有する、少なくとも１００～８５８３個のＲＰＰを含むか、または
ｃ．前記抗原が、ｂ型Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｉｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅの多糖であり、前記ライブラリーが、配列番号６４３４１～８０２５２の配列から選択される重鎖ＣＤＲ３および軽鎖ＣＤＲ３の配列の同族対をそれぞれ有する、少なくとも１００～７９５６個のＲＰＰを含むか、または
ｄ．前記抗原が、ｂ型Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｉｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅの多糖であり、前記ライブラリーが、配列番号８０２５３～１００６２６の配列から選択される重鎖ＣＤＲ３および軽鎖ＣＤＲ３の配列の同族対をそれぞれ有する、少なくとも１００～１０１８７個のＲＰＰを含むか、または
ｅ．前記抗原が、肺炎球菌の多糖であり、前記ライブラリーが、配列番号１～２１０７４の配列から選択される重鎖ＣＤＲ３および軽鎖ＣＤＲ３の配列の同族対をそれぞれ有する、少なくとも１００～１０５３７個のＲＰＰを含むか、または
ｆ．前記抗原が、Ｂ型肝炎ウイルス抗原であり、前記ライブラリーが、配列番号１００６２７～１０３８６０の配列から選択される重鎖ＣＤＲ３および軽鎖ＣＤＲ３の配列の同族対をそれぞれ有する、少なくとも１００～１６１７個のＲＰＰを含むか、または
ｇ．前記抗原が、Ｂ型肝炎ウイルス抗原であり、前記ライブラリーが、配列番号１０３８６１～１０６３８０の配列から選択される重鎖ＣＤＲ３および軽鎖ＣＤＲ３の配列の同族対をそれぞれ有する、少なくとも１００～１２６０個のＲＰＰを含むか、または
ｈ．前記抗原が、ヒト胸腺細胞を含み、前記ライブラリーが、配列番号１０６３８１～１２０１５の配列から選択される重鎖ＣＤＲ３および軽鎖ＣＤＲ３の配列の同族対をそれぞれ有する、少なくとも１００～６８８９個のＲＰＰを含む、ＲＰＰライブラリー。
(項目２)
各ＲＰＰが、ｓｃＦｖである、項目１に記載のＲＰＰライブラリー。
(項目３)
各ＲＰＰが、全長抗体である、項目１に記載のＲＰＰライブラリー。
(項目４)
各ＲＰＰが、全長抗体であり、ＣＨＯ細胞において産生される、項目１に記載のＲＰＰライブラリー。
(項目５)
各ＲＰＰが、前記抗原を注射された少なくとも１体のドナーからの形質細胞または形質芽細胞に由来する配列を使用して組換えで産生される、項目１から４のいずれか一項に記載のＲＰＰライブラリー。
(項目６)
各ＲＰＰが、前記抗原を注射された少なくとも１体のドナーからの形質細胞または形質芽細胞に由来する配列を使用して組換えで産生され、前記ＲＰＰライブラリーの活性が、前記抗原に対する前記ドナーの血清力価活性を少なくとも１０倍超える、項目１から４のいずれか一項に記載のＲＰＰライブラリー。
(項目７)
前記活性が、ｉｎ ｖｉｔｒｏ病原体中和アッセイまたは抗原に対するｉｎ ｖｉｔｒｏ結合アッセイまたはｉｎ ｖｉｖｏ有効性アッセイによって測定される、項目６に記載のＲＰＰライブラリー。
(項目８)
前記ドナーが、ヒトである、項目５から７のいずれか一項に記載のＲＰＰライブラリー。
(項目９)
少なくとも１００個、少なくとも１０００個、少なくとも１０，０００個または少なくとも１００，０００個のＲＰＰを含む、項目１から８のいずれか一項に記載のＲＰＰライブラリー。
(項目１０)
項目１から９のいずれか一項に記載のＲＰＰライブラリーおよび薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物。
(項目１１)
必要な対象を処置する方法であって、項目１から９のいずれか一項に記載のＲＰＰライブラリーまたは項目１０に記載の医薬組成物の有効量を前記対象に投与するステップを含む、方法。
(項目１２)
前記対象が、免疫不全、がん、アルツハイマー病、ウイルス感染症、細菌感染症を有するか、または実質臓器もしくは細胞の移植術を受けている、項目１１に記載の方法。
(項目１３)
項目１から９のいずれか一項に記載のＲＰＰライブラリーまたは項目１０に記載の医薬組成物の有効量を対象に投与するステップを含む方法。
(項目１４)
１つまたは複数の薬剤の投与をさらに含む、項目１１から１３のいずれか一項に記載の方法。
(項目１５)
各ポリヌクレオチドが、項目１から９のいずれか一項に記載のＲＰＰライブラリーの１つのメンバーをコードする、複数の単離されたポリヌクレオチド。
(項目１６)
各ベクターが、項目１から９のいずれか一項に記載のＲＰＰライブラリーの１つのメンバーをコードするポリヌクレオチドを含む、複数の単離されたベクター。
(項目１７)
発現ベクターである、項目１６に記載の複数の単離されたベクター。
(項目１８)
項目１５に記載の複数の単離されたポリヌクレオチドまたは項目１６もしくは項目１７に記載の複数の単離されたベクターを含む複数の単離された宿主細胞。
(項目１９)
項目１から９のいずれか一項に記載のＲＰＰライブラリーを産生する方法であって、項目１８に記載の単離された宿主細胞を、前記ＲＰＰライブラリーの発現のための条件下でインキュベートするステップと、前記ＲＰＰを単離するステップとを含む、方法。
(項目２０)
前記ＲＰＰが、全長抗体であり、前記単離された宿主細胞が、ＣＨＯ細胞である、項目１９に記載の方法。
Claims (13)
- 対象の処置における使用のための抗体タンパク質のライブラリーであって、
前記抗体タンパク質は、抗原に曝露された少なくとも１名のドナーからの形質芽細胞および形質細胞に由来し、
（ａ）前記形質芽細胞および形質細胞を、単一細胞反応容器中に単離し、それにより数百万個の単一細胞を得るステップ、
（ｂ）前記単一細胞を溶解させるステップ、
（ｃ）前記数百万個の単一細胞から並行して、ビーズなどの固体支持体上の抗体特異的核酸を精製および捕捉するステップ、
（ｄ）重鎖および軽鎖免疫グロブリンをコードする核酸を増幅するステップ、
（ｄ）次に、前記核酸を、重鎖と軽鎖免疫グロブリンとの両方をコードする融合構築物のライブラリーに関連づけ、それにより核酸の前記ライブラリーを得るステップ
により生成される、核酸のライブラリーによりコードされ、核酸の前記ライブラリーが前記形質芽細胞および形質細胞において元々見られるように、前記数百万個の単一細胞からの重鎖および軽鎖免疫グロブリンの自然に対合した配列を含む、ライブラリー。 - （ａ）前記抗原がｂ型Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ（Ｈｉｂ）の抗原である、または
（ｂ）前記抗原がＳｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅの抗原である、または
（ｃ）前記抗原がＡ型インフルエンザの抗原である、または
（ｄ）前記抗原がＢ型肝炎ウイルスの抗原である、または
（ｅ）前記抗原がヒト胸腺細胞もしくはヒトＴ細胞の抗原である、または
（ｆ）前記抗原がＣＤ４、ＣＤ４５およびＣＤ８１から選択される、
請求項１に記載のライブラリー。 - 少なくとも１００個、少なくとも１０００個、または少なくとも１０，０００個の抗体タンパク質を含む、請求項１または２に記載のライブラリー。
- 前記単一細胞がＣＤ４３＋形質芽細胞、ＣＤ２７＋メモリーＢ細胞、抹消ＣＤ１３８＋形質細胞または汎Ｂ細胞である、請求項１～３のいずれか一項に記載のライブラリー。
- 前記単一細胞がＣＤ１３８＋形質細胞である、請求項４に記載のライブラリー。
- 前記形質芽細胞および形質細胞を単離するステップが、前記少なくとも１名のドナーからの試料から、ＣＤ４３＋形質芽細胞、ＣＤ２７＋メモリーＢ細胞、抹消ＣＤ１３８＋形質細胞または汎Ｂ細胞を単離することを含む、請求項４または５に記載のライブラリー。
- 前記抗体タンパク質の各々がＩｇＧ１抗体である、請求項１～６のいずれか一項に記載のライブラリー。
- 前記対象に、有効量の前記ライブラリーを投与することによる、対象の処置における使用のための、請求項１～７のいずれか一項に記載のライブラリー。
- 前記対象ががん、アルツハイマー病、ウイルス感染症、細菌感染症を有するか、または実質臓器もしくは細胞の移植術を受けている、請求項１～７のいずれか一項に記載のライブラリー、または請求項８に記載の使用。
- 処置の必要のある前記対象がウイルスまたは細菌感染症を有し、前記抗原がｂ型Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ（Ｈｉｂ）、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ａ型インフルエンザまたはＢ型肝炎ウイルスの抗原である、請求項１～７のいずれか一項に記載のライブラリー、または請求項８に記載の使用。
- 前記有効量が３００ｍｇ／ｋｇの単回静脈内投与である、請求項８～１０のいずれか一項に記載のライブラリー。
- 前記有効量が１００ｍｇ／ｋｇの単回静脈内投与である、請求項１１に記載のライブラリー。
- 前記有効量が３０ｍｇ／ｋｇの単回静脈内投与である、請求項１２に記載のライブラリー。
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