JPWO2020139796A5

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Publication number: JPWO2020139796A5
Application number: JP2021536371A
Authority: JP
Publication date: 2023-01-05

Claims

発現ベクターであって、ＨＰＲＴをノックダウンするｓｈＲＮＡをコードする第１の核酸配列に作動可能に連結した第１の発現制御配列；およびウィスコット・アルドリッチ症候群タンパク質をコードする第２の核酸配列に作動可能に連結した第２の発現制御配列を含む、前記発現ベクター。
ｓｈＲＮＡは、配列番号１６、配列番号２６、配列番号２３、配列番号２４および配列番号２５からなる群から選択される核酸配列と少なくとも９５％配列同一性を有する、請求項１に記載の発現ベクター。
第１の発現制御配列は、ｐｏｌＩＩＩプロモーターまたはｐｏｌＩＩプロモーターを含む、請求項１に記載の発現ベクター。
ｐｏｌＩＩＩプロモーターは、７ｓｋプロモーター、突然変異を含む７ｓｋプロモーター、Ｈ１プロモーター、またはＥＦ１ａプロモーターを含む、請求項３に記載の発現ベクター。
７ｓｋプロモーターは、配列番号２８または配列番号２９の１つと少なくとも９５％配列同一性を含む、請求項４に記載の発現ベクター。
第２の核酸配列は、野生型ウィスコット・アルドリッチ症候群タンパク質、またはコドン最適化ウィスコット・アルドリッチ症候群タンパク質をコードする、請求項１に記載の発現ベクター。
ウィスコット・アルドリッチ症候群タンパク質をコードする第２の核酸は、配列番号１、２、３、および４のいずれか１つと少なくとも９５％同一性を有する配列を有する、請求項６に記載の発現ベクター。
ウィスコット・アルドリッチ症候群タンパク質をコードする第２の核酸は、配列番号１、２、３、および４のいずれか１つと少なくとも９７％同一性を有する配列を有する、請
求項６に記載の発現ベクター。
ウィスコット・アルドリッチ症候群タンパク質をコードする第２の核酸は、配列番号１、２、３、および４のいずれか１つと少なくとも９９％同一性を有する配列を有する、請求項６に記載の発現ベクター。
第２の発現制御配列は、ＭＮＤプロモーターを含む、請求項１に記載の発現ベクター。
ＭＮＤプロモーターは、配列番号７、８、９、１０、１１、および１２のいずれか１つと少なくとも９５％同一性を有する核酸配列を有する、請求項１０に記載の発現ベクター。
第１の核酸配列に作動可能に連結した第１の発現制御配列は、第２の核酸配列に作動可能に連結した第２の発現制御配列の下流に位置する；または
第１の核酸配列に作動可能に連結した第１の発現制御配列は、第２の核酸配列に作動可能に連結した第２の発現制御配列の上流に位置する、
請求項１に記載の発現ベクター。
第１の核酸配列に作動可能に連結した第１の発現制御配列は、第２の核酸配列に作動可能に連結した第２の発現制御配列と同じ方向に配向されている；または
第１の核酸配列に作動可能に連結した第１の発現制御配列は、第１の方向に配向され、第２の核酸配列に作動可能に連結した第２の発現制御配列は、第２の方向に配向され、第１の方向と第２の方向は反対である、
請求項１に記載の発現ベクター。
第２の核酸配列は、配列番号５および６のいずれか１つと少なくとも９５％同一性を有するアミノ酸配列を含むペプチドをコードし；第１の核酸配列は、配列番号１６またはその相補鎖と少なくとも９５％同一性を有する核酸分子をコードする、請求項１に記載の発現ベクター。
６５０ｃＨＳ４インスレーター、４００ｃＨＳ４インスレーター、および泡沫状ウイルスインスレーターからなる群から選択されるインスレーターをさらに含む、請求項１に記載の発現ベクター。
インスレーターが、配列番号３８、配列番号３９、および配列番号４０からなる群から選択される核酸配列と少なくとも９５％配列同一性を有する、請求項１５に記載の発現ベクター。
レンチウイルス発現ベクターである、請求項１に記載の発現ベクター。
配列番号４２～５７のいずれか１つと少なくとも９０％同一性を有する核酸配列を含む、請求項１に記載の発現ベクター。
配列番号４２～５７のいずれか１つと少なくとも９５％同一性を有する核酸配列を含む、請求項１に記載の発現ベクター。
配列番号４２～５７のいずれか１つと少なくとも９７％同一性を有する核酸配列を含む、請求項１に記載の発現ベクター。
配列番号４２～５７のいずれか１つと少なくとも９９％同一性を有する核酸配列を含む
、請求項１に記載の発現ベクター。
配列番号４２～５７のいずれか１つを有する核酸配列を含む、請求項１に記載の発現ベクター。
請求項１～２２のいずれか１項に記載の発現ベクターによって形質導入されたｅｘｖｉｖｏ宿主細胞。
実質的にＨＰＲＴを欠損した。請求項２３に記載のｅｘｖｉｖｏ宿主細胞。
ウィスコット－アルドリッチ症候群タンパク質を発現する、請求項２３に記載のｅｘｖｉｖｏ宿主細胞。
造血幹細胞（ＨＳＣ）である、請求項２３に記載のｅｘｖｉｖｏ宿主細胞。
配列番号５および６のいずれか１つを有するアミノ酸配列と少なくとも９５％同一性を有するペプチドを発現する、請求項２３～２６のいずれか１項に記載のｅｘｖｉｖｏ宿主細胞。
ポリヌクレオチドであって、配列番号４２～５７のいずれか１つと少なくとも９０％同一性を有する核酸配列を含む、前記ポリヌクレオチド。
核酸配列は、配列番号４２～５７のいずれか１つと少なくとも９５％同一性を有する、請求項２８に記載のポリヌクレオチド。
核酸配列は、配列番号４２～５７のいずれか１つと少なくとも９７％同一性を有する、請求項２８に記載のポリヌクレオチド。
核酸配列は、配列番号４２～５７のいずれか１つと少なくとも９８％同一性を有する、請求項２８に記載のポリヌクレオチド。
核酸配列は、配列番号４２～５７のいずれか１つと少なくとも９９％同一性を有する、請求項２８に記載のポリヌクレオチド。
ポリヌクレオチドであって、配列番号４２～５７のいずれか１つを有する、前記ポリヌクレオチド。
ポリヌクレオチドであって、配列番号５０と少なくとも９０％同一性を有する、前記ポリヌクレオチド。
核酸配列は、配列番号５０と少なくとも９５％同一性を有する、請求項３４に記載のポリヌクレオチド。
核酸配列は、配列番号５０と少なくとも９９％同一性を有する、請求項３４に記載のポリヌクレオチド。
ポリヌクレオチドであって、配列番号５２と少なくとも９０％同一性を有する核酸配列を含む、前記ポリヌクレオチド。
核酸配列は、配列番号５２と少なくとも９５％同一性を有する、請求項３７に記載のポ
リヌクレオチド。
核酸配列は、配列番号５２と少なくとも９９％同一性を有する、請求項３７に記載のポリヌクレオチド。
ウィスコット・アルドリッチ症候群の処置のための医薬組成物の調製のための、請求項１～２２のいずれか１項に記載の発現ベクター、または請求項２８～３９のいずれか１項に記載のポリヌクレオチドの使用であって、該医薬組成物は宿主細胞および薬学的に許容される担体または賦形剤を含む、前記使用。