JPWO2019172419A1 - 免疫関連疾患の指標の検出方法 - Google Patents
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Abstract
Description
(1)被験体から採取された被験検体における免疫関連疾患の指標を検出する方法であって、被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛を観察し、当該被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果と正常検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果とを比較し、被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果と正常検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果との差異を免疫関連疾患の指標として検出することを特徴とする免疫関連疾患の指標の検出方法、
(2)被験体における免疫関連疾患の診断を補助する方法であって、被験体から採取された被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛を観察し、当該被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果と比較対象検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果とを比較し、得られた比較結果に基づいて、被験体における免疫関連疾患の罹患の有無の診断の補助情報または被験体における免疫関連疾患の予後の診断の補助情報を得ることを特徴とする被験体における免疫関連疾患の診断の補助方法、
(3)被験体における免疫関連疾患を検査するためのキットであって、免疫関連細胞の一次繊毛に対する特異的結合物質を含有することを特徴とする免疫関連疾患の検査キット、
(4)免疫関連疾患に罹患した被験体に施された治療または当該被験体に投与された免疫関連疾患抑制剤による免疫関連疾患に対する抑制効果を評価する方法であって、被験体から採取された治療前後または免疫関連疾患抑制剤投与前後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛を観察し、治療前後または免疫関連疾患抑制剤投与前後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果を比較し、治療前後または免疫関連疾患抑制剤投与前後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の変化を免疫関連疾患に対する抑制効果の指標として用いることを特徴とする免疫関連疾患に対する抑制効果の評価方法、
(5)被験試料が免疫機能制御作用を有する物質であるかどうかを評価する被験試料の評価方法であって、(A)一次繊毛を有する免疫関連細胞を含有する細胞群における免疫関連細胞の一次繊毛を観察するステップ、
(B)一次繊毛を有する免疫関連細胞を含有する細胞群と被験試料とを接触させ、当該被験試料に接触させた細胞群における免疫関連細胞の一次繊毛を観察するステップ、および
(C)ステップ(A)で観察された細胞群における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果と、ステップ(B)で観察された細胞群における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果との差異に基づき、被験試料が免疫機能制御作用を有する物質であるかどうかを評価するステップ
を含むことを特徴とする被験試料の評価方法、
(6)免疫機能を抑制するための免疫機能制御剤であって、一次繊毛を有する免疫関連細胞から一次繊毛を除去する作用を有する一次繊毛除去作用物質を有効成分として含有することを特徴とする免疫機能制御剤、および
(7)一次繊毛を有する免疫関連細胞から一次繊毛を除去するための免疫関連細胞の一次繊毛除去剤であって、ステロイド剤および生理活性物質からなる群より選ばれた少なくとも1種を有効成分として含有することを特徴とする免疫関連細胞の一次繊毛除去剤
に関する。
本発明の免疫関連疾患の指標の検出方法は、前記したように、被験体から採取された被験検体における免疫関連疾患の指標を検出する方法であって、被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛を観察し、当該被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果と正常検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果とを比較し、被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果と正常検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果との差異を免疫関連疾患の指標として検出することを特徴とする。
[検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率]
=〔[検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数]/[検体における全免疫関連細胞数]〕×100 (I)
(式中、「検体」は被験検体または正常検体を示す)
に基づいて算出することができる。
<差異A>
被験検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数と正常検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数との間の差異
<差異B>
被験検体における免疫関連細胞1個あたりの一次繊毛の数と正常検体における免疫関連細胞1個あたりの一次繊毛の数との間の差異
<差異C>
被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さと正常検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さとの間の差異
<指標A>
被験検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数が正常検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数と比べて有意に多いこと
<指標B>
被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率が正常検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率と比べて有意に高いこと
<指標C>
被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さが正常検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さと比べて有意に長いこと
<指標D>
被験検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数が正常検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数と比べて有意に少ないこと
<指標E>
被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率が正常検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率と比べて有意に低いこと
本発明の免疫関連疾患の診断の補助方法は、被験体における免疫関連疾患の診断を補助する方法であって、被験体から採取された被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛を観察し、当該被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果と比較対象検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果とを比較し、得られた比較結果に基づいて、被験体における免疫関連疾患の罹患の有無の診断の補助情報または被験体における免疫関連疾患の予後の診断の補助情報を得ることを特徴とする。
<差異a>
被験検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数と比較対象検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数との間の差異
<差異b>
被験検体における免疫関連細胞1個あたりの一次繊毛の数と比較対象検体における免疫関連細胞1個あたりの一次繊毛の数との間の差異
<差異c>
被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さと比較対象検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さとの間の差異
<比較結果A>
被験検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数が、比較対象検体としての正常検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数と比べて有意に多いことを示す比較結果
<比較結果B>
被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率が、比較対象検体としての正常検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率と比べて有意に高いことを示す比較結果
<比較結果C>
被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さが、比較対象検体としての正常検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さと比べて有意に長いことを示す比較結果
<比較結果D>
被験検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数が、比較対象検体としての正常検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数と比べて有意に少ないことを示す比較結果
<比較結果E>
被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率が、比較対象検体としての正常検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率と比べて有意に低いことを示す比較結果
(予後良好の診断の補助情報)
<比較結果a−1>
治療後の被験検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数が、比較対象検体としての未治療検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数よりも有意に少ないことを示す比較結果
<比較結果b−1>
治療後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率が、比較対象検体としての未治療検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率よりも有意に低いことを示す比較結果
<比較結果c−1>
治療後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さが、比較対象検体としての未治療検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さよりも有意に短いことを示す比較結果
(予後不良の診断の補助情報)
<比較結果a−2>
治療後の被験検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数が、比較対象検体としての未治療検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数と同じであるか、未治療検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数よりも多いことを示す比較結果
<比較結果b−2>
治療後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率が、比較対象検体としての未治療検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率と同じであるか、未治療検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率よりも高いことを示す比較結果
<比較結果c−2>
治療後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さが、比較対象検体としての未治療検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さと同じであるか、未治療検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さよりも長いことを示す比較結果
(予後良好の診断の補助情報)
<比較結果e−1>
治療後の被験検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数が、比較対象検体としての未治療検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数よりも有意に多いことを示す比較結果
<比較結果f−1>
治療後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率が、比較対象検体としての未治療検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率よりも有意に高いことを示す比較結果
(予後不良の診断の補助情報)
<比較結果e−2>
治療後の被験検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数が、未治療検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数と同じであるか、未治療検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数よりも少ないことを示す比較結果
<比較結果f−2>
治療後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率が、未治療検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率と同じであるか、未治療検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率よりも低いことを示す比較結果
本発明の免疫関連疾患の検査キットは、被験体における免疫関連疾患を検査するためのキットであって、第1の特異的結合物質を含有することを特徴とする。
本発明の免疫関連疾患に対する抑制効果の評価方法は、免疫関連疾患に罹患した被験体に施された治療または当該被験体に投与された免疫関連疾患抑制剤による免疫関連疾患に対する抑制効果を評価する方法であって、被験体から採取された治療前後または免疫関連疾患抑制剤投与前後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛を観察し、治療前後または免疫関連疾患抑制剤投与前後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果を比較し、治療前後または免疫関連疾患抑制剤投与前後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の変化を免疫関連疾患に対する抑制効果の指標として用いることを特徴とする。
<効果ありの評価基準>
A−1:治療後の被験検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数が、未治療検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数よりも有意に少ないこと
A−2:治療後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率が、未治療検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率よりも有意に低いこと
A−3:治療後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さが、未治療検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さよりも有意に短いこと
<効果なしの評価基準>
B−1:治療後の被験検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数が、未治療検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数と同じであるか、未治療検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数よりも有意に多いこと
B−2:治療後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率が、未治療検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率と同じであるか、未治療検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率よりも有意に高いこと
B−3:治療後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さが、未治療検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さと同じであるか、未治療検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さよりも有意に長いこと
<効果ありの評価基準>
C−1:治療後の被験検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数が、未治療検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数よりも有意に多いこと
C−2:治療後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率が、未治療検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率よりも有意に高いこと
<効果なしの評価基準>
D−1:治療後の被験検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数が、未治療検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数と同じであるか、未治療検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数よりも有意に少ないこと
D−2:治療後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率が、未治療検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率と同じであるか、未治療検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率よりも有意に低いこと
<効果ありの評価基準>
a−1:投与後検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数が、未投与検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数よりも有意に少ないこと
a−2:投与後検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率が、未投与検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率よりも有意に低いこと
a−3:投与後検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さが、未投与検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さよりも有意に短いこと
<効果なしの評価基準>
b−1:投与後検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数が、未投与検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数と同じであるか、未投与検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数よりも有意に多いこと
b−2:投与後検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率が、未投与検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率と同じであるか、未投与検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率よりも有意に高いこと
b−3:投与後検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さが、未投与検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さと同じであるか、未投与検体における免疫関連細胞の一次繊毛の長さよりも有意に長いこと
<効果ありの評価基準>
c−1:投与後検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数が未投与検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数よりも有意に多いこと
c−2:投与後検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率が未投与検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率よりも有意に高いこと
<効果なしの評価基準>
d−1:投与後検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数が未投与検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数と同じであるか、未投与検体における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数よりも有意に少ないこと
d−2:投与後検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率が未投与検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率と同じであるか、未投与検体における免疫関連細胞の一次繊毛の形成率よりも有意に低いこと
本発明の被験試料の評価方法は、被験試料が免疫機能制御作用を有する物質であるかどうかを評価する被験試料の評価方法であって、(A)一次繊毛を有する免疫関連細胞を含有する細胞群における免疫関連細胞の一次繊毛を観察するステップ、
(B)一次繊毛を有する免疫関連細胞を含有する細胞群と被験試料とを接触させ、当該被験試料に接触させた細胞群における免疫関連細胞の一次繊毛を観察するステップ、および
(C)ステップ(A)で観察された細胞群における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果と、ステップ(B)で観察された細胞群における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果との差異に基づき、被験試料が免疫機能制御作用を有する物質であるかどうかを評価するステップ
を含むことを特徴とする。
<指標a>
ステップ(B)で測定された細胞群における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数と、ステップ(A)で測定された細胞群における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数との間に有意な差異があること
<指標b>
ステップ(B)で測定された細胞群における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数から算出された免疫関連細胞の一次繊毛の形成率とステップ(A)で測定された細胞群における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数から算出された免疫関連細胞の一次繊毛の形成率との間に有意な差異があること
<指標c>
ステップ(B)で測定された細胞群における免疫関連細胞1個あたりの一次繊毛の数と、ステップ(A)で測定された細胞群における免疫関連細胞1個あたりの一次繊毛の数との間に有意な差異があること
<指標d>
ステップ(B)で測定された細胞群における免疫関連細胞の一次繊毛の長さと、ステップ(A)で測定された細胞群における免疫関連細胞の一次繊毛の長さとの間に有意な差異があること
<指標a−1>
ステップ(B)で測定された細胞群における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数が、ステップ(A)で測定された細胞群における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数と比べて有意に少ないこと
<指標b−1>
ステップ(B)で測定された細胞群における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数から算出された免疫関連細胞の一次繊毛の形成率が、ステップ(A)で測定された細胞群における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数から算出された免疫関連細胞の一次繊毛の形成率と比べて有意に低いこと
<指標c−1>
ステップ(B)で測定された細胞群における免疫関連細胞の一次繊毛の長さが、ステップ(A)で測定された細胞群における免疫関連細胞の一次繊毛の長さよりも有意に短いこと
<指標a−2>
ステップ(B)で測定された細胞群における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数が、ステップ(A)で測定された細胞群における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数と比べて有意に多いこと
<指標b−2>
ステップ(B)で測定された細胞群における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数から算出された免疫関連細胞の一次繊毛の形成率が、ステップ(A)で測定された細胞群における一次繊毛を有する免疫関連細胞の数から算出された免疫関連細胞の一次繊毛の形成率と比べて有意に高いこと
本発明の免疫機能制御剤は、免疫機能を抑制するための免疫機能制御剤であって、一次繊毛を有する免疫関連細胞から一次繊毛を除去する作用を有する一次繊毛除去作用物質を有効成分として含有することを特徴とする。
本発明の免疫関連細胞の一次繊毛除去剤は、一次繊毛を有する免疫関連細胞から一次繊毛を除去するための免疫関連細胞の一次繊毛除去剤であって、ステロイド剤および生理活性物質からなる群より選ばれた少なくとも1種を有効成分として含有することを特徴とする。
DMSO:ジメチルスルホキシド
EDTA:エチレンジアミン四酢酸
FBS:ウシ胎仔血清
PBS:リン酸緩衝生理食塩水
PFA:パラホルムアルデヒド
TNF:腫瘍壊死因子
IL−4:インターロイキン−4
GM−CSF:顆粒球単球コロニー刺激因子
ヒト健常皮膚組織〔国立大学法人大阪大学医学研究科から入手〕から皮膚片を得た。得られた皮膚片を凍結組織切片作製用包埋剤〔サクラファインテックジャパン(株)製、商品名:ティッシュー・テックO.C.Tコンパウンド〕に包埋させた。包埋後の皮膚片を液体窒素で冷却されたイソペンタン中で凍結させ、凍結皮膚片を得た。つぎに、クライオミクロトームを用い、凍結皮膚片を切削して切片(厚さ:10μm)を得た。得られた切片を4v/v%PFA含有PBS溶液に浸漬させ、室温で10分間固定した。固定後の切片をブロッキング・透過処理剤〔0.1v/v%ポリエチレングリコール tert−オクチルフェニルエーテル(TritonX−100)と10v/v%FBS含PBS溶液〕中でインキュベーションすることによってブロッキング処理および透過処理を行ない、試料を得た。
パラフィン用ミクロトームを用い、固定・パラフィン包埋済アトピー性皮膚炎皮膚組織〔アステランド・バイオサイエンス(Asterand Bioscience)社製、Patient ID:95253〕を切削し、切片(厚さ:7μm)を得た。得られた切片をキシレンに5分間浸漬させることによって脱パラフィン処理を行なった。エタノール、95体積%エタノール水溶液および精製水をこの順に用い、脱パラフィン処理後の切片を洗浄することによって切片の水和を段階的に行なった。水和後の切片を1mM EDTA水溶液中で15分間煮沸させることによって抗原賦活化処理を行なった。得られた切片をブロッキング・透過処理剤中でインキュベーションすることによってブロッキング処理および透過処理を行ない、試料を得た。
観察項目として一次繊毛を有するランゲルハンス細胞の数を用い、実施例1で得られたヒト健常皮膚組織(正常組織)由来の観察用試料および実施例2で得られたアトピー性皮膚炎病巣組織由来の観察用試料を観察することにより、正常組織における一次繊毛を有するランゲルハンス細胞の数およびアトピー性皮膚炎病巣組織における一次繊毛を有するランゲルハンス細胞の数を求めた。
健常ボランティアから採取された末梢血10mLおよびヒトリンパ球分離用媒体〔GEヘルスケア社製、商品名:Ficoll−Paque PLUS〕15mLを用い、密度勾配遠心法にしたがい、末梢血から末梢血単核細胞を分離した。培地〔50ng/mL IL−4、50ng/mL GM−CSFおよび10v/v%FBSを含有するRPMI1640培地〕中、末梢血単核細胞を37℃で7日間培養することによって末梢血単核細胞を樹状細胞に分化させた。
[未成熟樹状細胞の一次繊毛の形成率]
=[未成熟樹状細胞の一次繊毛の数]/[全未成熟樹状細胞数]×100
(Ia)
にしたがい、未成熟樹状細胞の一次繊毛の形成率を算出した。
健常ボランティアから採取された末梢血10mLおよびヒトリンパ球分離用媒体〔GEヘルスケア社製、商品名:Ficoll−Paque PLUS〕15mLを用い、密度勾配遠心法にしたがい、末梢血から末梢血単核細胞を分離した。分離後の末梢血単核細胞の一部を分離直後に4v/v%PFA含有PBS溶液で固定した。固定細胞をブロッキング・透過処理剤中でインキュベーションすることによってブロッキングおよび透過処理を行ない、未培養の細胞を含有する試料を得た。
[成熟樹状細胞の一次繊毛の形成率]
=〔[成熟樹状細胞の一次繊毛の数]/[全成熟樹状細胞数]〕×100
(Ib)
にしたがい、成熟樹状細胞の一次繊毛の形成率を算出した。
喘息患者から採取された末梢血10mLおよびヒトリンパ球分離用媒体〔GEヘルスケア社製、商品名:Ficoll−Paque PLUS〕15mLを用い、密度勾配遠心法にしたがい、末梢血から末梢血単核細胞を分離した。培養容器内のステロイド剤含有培地〔10μMヒドロコルチゾンまたは10μMデキサメタゾンと、0.1v/v%DMSOと、10v/v%FBSとを含有するRPMI1640培地〕または対照培地〔0.1v/v%DMSOと、10v/v%FBSとを含有するRPMI1640培地〕中、分離後の末梢血単核細胞の一部を37℃で24時間培養した。得られた細胞の形態および状態を位相差倒立顕微鏡〔ライカ・マイクロシステムズ(Leica Microsystems)社製、商品名:DM IL LED〕で観察した。
喘息患者から採取された末梢血10mLおよびヒトリンパ球分離用媒体〔GEヘルスケア社製、商品名:Ficoll−Paque PLUS〕15mLを用い、密度勾配遠心法にしたがい、末梢血から末梢血単核細胞を分離した。分離後の末梢血単核細胞の一部を4v/v%PFA含有PBS溶液で固定した。固定細胞をブロッキング・透過処理剤中でインキュベーションすることによってブロッキングおよび透過処理を行ない、未培養の細胞を含有する試料を得た。
[免疫細胞の一次繊毛の形成率]
=〔[免疫細胞の一次繊毛の数]/[全免疫細胞数]〕×100
(Ic)
にしたがい、免疫細胞の一次繊毛の形成率を算出した。
一次繊毛を有するケラチノサイトを含有する細胞群におけるケラチノサイトの一次繊毛の数Aを測定する。低分子化合物、高分子化合物、植物抽出物などをPBSなどの溶媒に溶解させ、被験試料を得る。つぎに、当該細胞群と低分子化合物、高分子化合物、植物抽出物などの被験試料とを接触させる。接触後、当該被験試料に接触させた細胞群におけるケラチノサイトの一次繊毛の数Bを測定する。ケラチノサイトの一次繊毛の数Aと、ケラチノサイトの一次繊毛の数Bとの差異を求める。ケラチノサイトの一次繊毛の数Bがケラチノサイトの一次繊毛の数Aよりも有意に多い場合、被験試料が免疫機能促進作用を有すると評価することができる。ケラチノサイトの一次繊毛の数Bがケラチノサイトの一次繊毛の数Aよりも有意に少ない場合、被験試料が免疫機能抑制作用を有すると評価することができる。なお、前記において、ケラチノサイトの代わりに他の免疫関連細胞を用いた場合にも、ケラチノサイトを用いたときと同様に被験試料が有する免疫機能促進作用または免疫機能抑制作用を評価することができる。
観察項目として一次繊毛を有するランゲルハンス細胞の数を用い、実施例1と同様にして得られたヒト健常皮膚組織(正常組織)由来の観察用試料および実施例2と同様にして得られたアトピー性皮膚炎病巣組織由来の観察用試料それぞれに含まれる細胞を観察し、一次繊毛を有するランゲルハンス細胞の数を計数した。観察された細胞集団の細胞数と一次繊毛を有するランゲルハンス細胞の数とを用い、式(II):
[細胞集団における一次繊毛を有するランゲルハンス細胞の含有率]
=〔[一次繊毛を有するランゲルハンス細胞の数]/[細胞集団の細胞数]〕×100 (II)
にしたがい、細胞集団における一次繊毛を有するランゲルハンス細胞の含有率を求めた。
[細胞集団における一次繊毛を有するケラチノサイトの含有率]
=〔[一次繊毛を有するケラチノサイトの数]/[細胞集団の細胞数]〕×100 (III)
にしたがい、細胞集団における一次繊毛を有するケラチノサイトの含有率を求めた。
2 真皮
Claims (7)
- 被験体から採取された被験検体における免疫関連疾患の指標を検出する方法であって、被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛を観察し、当該被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果と正常検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果とを比較し、被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果と正常検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果との差異を免疫関連疾患の指標として検出することを特徴とする免疫関連疾患の指標の検出方法。
- 被験体における免疫関連疾患の診断を補助する方法であって、被験体から採取された被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛を観察し、当該被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果と比較対象検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果とを比較し、得られた比較結果に基づいて、被験体における免疫関連疾患の罹患の有無の診断の補助情報または被験体における免疫関連疾患の予後の診断の補助情報を得ることを特徴とする被験体における免疫関連疾患の診断の補助方法。
- 被験体における免疫関連疾患を検査するためのキットであって、免疫関連細胞の一次繊毛に対する特異的結合物質を含有することを特徴とする免疫関連疾患の検査キット。
- 免疫関連疾患に罹患した被験体に施された治療または当該被験体に投与された免疫関連疾患抑制剤による免疫関連疾患に対する抑制効果を評価する方法であって、被験体から採取された治療前後または免疫関連疾患抑制剤投与前後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛を観察し、治療前後または免疫関連疾患抑制剤投与前後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果を比較し、治療前後または免疫関連疾患抑制剤投与前後の被験検体における免疫関連細胞の一次繊毛の変化を免疫関連疾患に対する抑制効果の指標として用いることを特徴とする免疫関連疾患に対する抑制効果の評価方法。
- 被験試料が免疫機能制御作用を有する物質であるかどうかを評価する被験試料の評価方法であって、(A)一次繊毛を有する免疫関連細胞を含有する細胞群における免疫関連細胞の一次繊毛を観察するステップ、
(B)一次繊毛を有する免疫関連細胞を含有する細胞群と被験試料とを接触させ、当該被験試料に接触させた細胞群における免疫関連細胞の一次繊毛を観察するステップ、および
(C)ステップ(A)で観察された細胞群における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果と、ステップ(B)で観察された細胞群における免疫関連細胞の一次繊毛の観察結果との差異に基づき、被験試料が免疫機能制御作用を有する物質であるかどうかを評価するステップ
を含むことを特徴とする被験試料の評価方法。 - 免疫機能を抑制するための免疫機能制御剤であって、一次繊毛を有する免疫関連細胞から一次繊毛を除去する作用を有する一次繊毛除去作用物質を有効成分として含有することを特徴とする免疫機能制御剤。
- 一次繊毛を有する免疫関連細胞から一次繊毛を除去するための免疫関連細胞の一次繊毛除去剤であって、ステロイド剤および生理活性物質からなる群より選ばれた少なくとも1種を有効成分として含有することを特徴とする免疫関連細胞の一次繊毛除去剤。
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