JPWO2019026413A1 - 液体中微粒子分析システムおよび液体中微粒子分析方法 - Google Patents
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Abstract
Description
以下、本発明の実施形態1について、詳細に説明する。
図1は、本発明の実施形態1に係る液体中微粒子分析システム101の概略構成を示す模式図であり、液体中微粒子分析システム101を側面側から示す図である。図2は、集積回路チップ121の概略構成を模式的に示す図であり、集積回路チップ121を上面側から視た平面図である。
図3に示すように、光源駆動回路40は、制御回路30の制御に応じた駆動パルス信号により、励起光源50の励起源を、発光と消灯とを繰り返すパルス発光させる。制御回路30は、光源駆動回路40が励起光源50の励起源を発光させる駆動パルス信号を出している照射動作期間中は、光子検知部21の受光動作を停止する。励起光源50の照射範囲では、励起光源50からの励起光が照射されることにより、マイクロ流路10中の蛍光分子FMが励起し蛍光光子が発生する。
本実施形態1によれば、液体中微粒子分析システム101は、フォトダイオード23を含む光子検知部21が内蔵された集積回路チップ121と、集積回路チップ121の表面側に設けられたマイクロ流路10と、マイクロ流路10に励起光を照射する励起光源50と、光子検知部21の検知動作、および励起光源50の照射動作を同期的に制御する制御回路30と、を備えている。制御回路30は、励起光源50の照射動作のタイミングを基準として、光子検知部21の光子検知動作を制御する。光子検知部21は、マイクロ流路10に照射された励起光の消光後に、マイクロ流路10中を流れている対象物から生じる蛍光の光子を検知する。
本発明の実施形態2について、図5〜図7に基づいて説明すれば、以下のとおりである。なお、説明の便宜上、上述の実施形態1にて説明した部材と同じ機能を有する部材については、同じ符号を付記し、その説明を省略する。
図5は、実施形態2に係る液体中微粒子分析システム102の概略構成を示す模式図であり、液体中微粒子分析システム102を側面側から示す図である。図6は、集積回路チップ122を上面側から視た平面図である。
図7は、蛍光分子FMを持つ二つの細胞X1,X2がマイクロ流路10内の流れた時に想定される、光子検知部21A,21B,21Cからの出力の例を示している。この図7では、上述の図4と同様に、1000回の光子検知動作ごとの蛍光光子検知パルス数を、時間を横軸にプロットしたグラフである。
本実施形態2によれば、マイクロ流路10に沿って少なくとも二つの光子検知部21(21A,21B,21C)が設けられている。
本発明の実施形態3について、図8〜図10に基づいて説明すれば、以下のとおりである。なお、説明の便宜上、上述の実施形態1にて説明した部材と同じ機能を有する部材については、同じ符号を付記し、その説明を省略する。
図8は、実施形態3に係る液体中微粒子分析システム103の概略構成を示す模式図であり、液体中微粒子分析システム103を側面側から示す図である。図9は、集積回路チップ123を上面側から視た平面図である。
各マイクロ流路10A,10B内を流れる液体中の微粒子は、液体の流れに沿って、それぞれの流路の下方にある光子検知部21A,21Bにより独立して観測される。図10は、蛍光分子FMを持つ細胞Xがマイクロ流路10A,10B内をそれぞれ流れた時に想定される、光子検知部21A,21Bからの出力の例を示している。この図10は、上述の図4と同様に、1000回の光子検知動作ごとの蛍光光子検知パルス数を、時間を横軸にプロットしたグラフである。
本実施形態3によれば、少なくとも二つのマイクロ流路10(10A,10B)を備え、マイクロ流路10のそれぞれに光子検知部21(21A,21B)が備えられている。
本発明の実施形態4について、図11〜図13に基づいて説明すれば、以下のとおりである。なお、説明の便宜上、前記実施形態にて説明した部材と同じ機能を有する部材については、同じ符号を付記し、その説明を省略する。
図11は、実施形態4に係る液体中微粒子分析システム104の概略構成を示す模式図であり、液体中微粒子分析システム104を側面側から示す図である。
図13は、レーザー光源50A、および、レーザー光源50Bのそれぞれの励起光の照射動作と、光子検知部21の光子検知動作と、の制御のタイミングを示すタイミングチャートである。
本実施形態4によれば、励起光源50は、それぞれ波長の異なる複数のレーザー光源50A,50Bを備え、照射動作を行うレーザー光源50A,50Bを切り替えることで波長を替えてパルス発光を行う。
本発明の実施形態5について、図14〜図17に基づいて説明すれば、以下のとおりである。なお、説明の便宜上、前記実施形態にて説明した部材と同じ機能を有する部材については、同じ符号を付記し、その説明を省略する。
図14は、実施形態5に係る液体中微粒子分析システム105の概略構成を示す模式図であり、液体中微粒子分析システム105を側面側から示す図である。図15は、集積回路チップ125を上面側から視た平面図である。
図16は、励起光源50の励起光の照射動作(駆動パルス)と、光子検知部21の光子検知動作と、受光回路22の蛍光光子検知パルスの出力のタイミングを例示すタイミングチャートである。
本実施形態5によれば、励起光源50の照射動作のタイミングを基準として、光子検知部21が光子を検知したタイミングを計測するTDC回路と、TDC回路の計測結果に応じて、光子検知部21が検知した光子の蛍光寿命を計算する蛍光寿命計算部62と、を備えた。
本発明の態様1に係る液体中微粒子分析システム101は、フォトダイオード23を含む光子検知部21が内蔵された集積回路チップ121と、上記集積回路チップ121の表面側に形成されたマイクロ流路10と、上記マイクロ流路10に励起光を照射する励起光源50と、上記光子検知部21の光子検知動作、および上記励起光源50の照射動作を同期的に制御する制御回路30と、を備え、上記制御回路30は、上記励起光源50の照射動作のタイミングを基準として、上記光子検知部21の光子検知動作を制御し、上記光子検知部21は、上記マイクロ流路10に照射された励起光の消光後に、上記マイクロ流路10中を流れている対象物から生じる蛍光の光子を検知する構成である。
11 注入孔
12 排出孔
21、21A、21B、21C 光子検知部
22 受光回路
23、23A、23B、23C フォトダイオード
30 制御回路
40 光源駆動回路
50 励起光源
50A、50B レーザー光源
61 TDC回路
62 蛍光寿命計算部
101、102、103、104、105 液体中微粒子分析システム
121、122、123、125 集積回路チップ
Claims (10)
- フォトダイオードを含む光子検知部が内蔵された集積回路チップと、
上記集積回路チップの表面側に形成されたマイクロ流路と、
上記マイクロ流路に励起光を照射する励起光源と、
上記光子検知部の光子検知動作、および上記励起光源の照射動作を同期的に制御する制御回路と、を備え、
上記制御回路は、上記励起光源の照射動作のタイミングを基準として、上記光子検知部の光子検知動作を制御し、
上記光子検知部は、上記マイクロ流路に照射された励起光の消光後に、上記マイクロ流路中を流れている対象物から生じる蛍光の光子を検知する
ことを特徴とする液体中微粒子分析システム。 - 上記マイクロ流路に沿って少なくとも二つの上記光子検知部が設けられていることを特徴とする請求項1に記載の液体中微粒子分析システム。
- 少なくとも二つの上記マイクロ流路を備え、上記マイクロ流路のそれぞれに上記光子検知部が備えられていることを特徴とする請求項1または2に記載の液体中微粒子分析システム。
- 上記励起光源は、それぞれ波長の異なる複数のレーザー光源を備え、照射動作を行う上記レーザー光源を切り替えることで波長を替えてパルス発光を行うことを特徴とする請求項1から3の何れか1項に記載の液体中微粒子分析システム。
- 上記励起光源の照射動作のタイミングを基準として、上記光子検知部が光子を検知したタイミングを計測するTDC回路と、
上記TDC回路の計測結果に応じて、上記光子検知部が検知した光子の蛍光寿命を計算する蛍光寿命計算部と、を備えた
ことを特徴とする請求項1から4の何れか1項に記載の液体中微粒子分析システム。 - 請求項1に記載の液体中微粒子分析システムを用いて液体中の微粒子を分析する液体中微粒子分析方法において、
励起光を照射し、上記励起光の消光後に生ずる蛍光の光子を検知する光子検知動作を周期的に繰り返して行い、上記マイクロ流路中を流れる単一対象物が、上記光子検知部を通過するに要する時間内に行われた上記光子検知動作の結果を合算することで、上記単一対象物からの蛍光光子を検知することを特徴とする液体中微粒子分析方法。 - 請求項2に記載の液体中微粒子分析システムを用いて液体中の微粒子を分析する液体中微粒子分析方法において、
励起光を照射し、上記励起光の消光後に生ずる蛍光の光子を検知する光子検知動作を周期的に繰り返して行い、上記マイクロ流路中を流れる単一対象物が、複数の上記光子検知部を順次通過するに要する時間内に行われたそれぞれの上記光子検知動作の結果を合算することで、上記単一対象物からの蛍光光子を検知することを特徴とする液体中微粒子分析方法。 - 請求項3に記載の液体中微粒子分析システムを用いて液体中の微粒子を分析する液体中微粒子分析方法において
複数の上記マイクロ流路のそれぞれに設けられた上記光子検知部は、同時並行的に動作し、それぞれの流路を流れる対象物からの蛍光光子を検知することを特徴とする液体中微粒子分析方法。 - 請求項4に記載の液体中微粒子分析システムを用いて液体中の微粒子を分析する液体中微粒子分析方法において、
複数の波長の上記レーザー光源のそれぞれにより照射された励起光の消光後に生ずる蛍光の光子を検知する光子検知動作における検知結果を、上記レーザー光源の波長毎に合算することで、励起波長と蛍光強度との関係を推定し、あるいはさらに蛍光分子の種別の推定を行うことを特徴とする液体中微粒子分析方法。 - 請求項5に記載の液体中微粒子分析システムを用いて液体中の微粒子を分析する液体中微粒子分析方法において、
上記励起光源により照射された励起光の消光後に生ずる蛍光の光子を検知する光子検知動作を繰り返し、各光子検知動作において得られた光子検知タイミングの分布情報から蛍光分子の蛍光寿命を推定し、あるいは、さらに蛍光分子の種別の推定を行うことを特徴とする液体中微粒子分析方法。
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