JPWO2018212221A1 - インスリンの測定方法及び測定試薬 - Google Patents
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Abstract
Description
(1)生体から分離された試料と、界面活性剤及び酸性化剤のいずれか又は両方を含む前処理液とを混和する前処理工程を含む、生体から分離された試料中のインスリンを測定する方法。
(2)前記試料中のインスリンをイムノアッセイにより測定する、(1)に記載の方法。
(3)前記前処理液が酸性化剤を含み、前処理工程が0.01N以上の酸濃度の条件下で行われる、(1)または(2)に記載の方法。
(4)前記前処理液が界面活性剤を含み、前記界面活性剤が陰イオン性界面活性剤である、(1)または(2)に記載の方法。
(5)前記前処理液が界面活性剤と酸性化剤とを含み、前記界面活性剤が非イオン性界面活性剤、両イオン性界面活性剤、または陽イオン性界面活性剤である、(1)または(2)に記載の方法。
(6)前記前処理工程が、加熱条件下で行われる、(4)または(5)に記載の方法。
(7)界面活性剤及び酸性化剤のいずれか又は両方を含む前処理液を備える、インスリン測定用試薬。
本発明で測定されるインスリンは、任意の動物由来のインスリンであるが、好ましくは、哺乳動物(例、ヒト、サル、チンパンジー等の霊長類;マウス、ラット、ウサギ等の齧歯類;イヌ、ネコ等の愛玩動物;ブタ、ウシ等の家畜;ウマ、ヒツジ等の使役動物)由来のインスリンであり、より好ましくは霊長類由来のインスリンであり、特に好ましくは、ヒト由来のインスリンである。
本発明の方法は、生体試料と抗体とを反応させる免疫反応により生体試料中に存在するインスリンを測定する方法であるが、免疫反応(反応工程)の前に、生体試料と前処理液とを混和することによる前処理工程を含むことを特徴とする。前処理工程により、インスリンを抗インスリン自己抗体等から遊離させた状態とすることができる。前処理液は、界面活性剤及び酸性化剤のいずれか一方のみを含んでいてもよく、両方を含んでいてもよい。
本発明の方法の前処理工程で処理された生体試料混和液は、次いで反応工程に供される。反応工程においては、生体試料混和液を緩衝液と混合させ、混合液中の抗原をインスリンに対する抗体と反応させる。
一次抗体又は二次抗体に標識を用いた場合、使用する標識に適した方法、例えば酵素標識を用いた場合は酵素の基質を添加することによって、検出する。例えば、アルカリホスファターゼ(ALP)を標識抗体として用いた場合は、3−(2’−スピロアダマンタン)−4−メトキシ−4−(3’−ホスホリルオキシ)フェニル−1,2−ジオキセタン・2ナトリウム塩(AMPPD)を酵素基質として用いた化学発光酵素免疫測定法(CLEIA)の系とすることができる。
本発明のインスリンの測定試薬は、上述のインスリンの測定方法を実現し得る測定試薬である。本発明の測定試薬は、通常のイムノアッセイに使用される構成に加え、界面活性剤及び酸性化剤のいずれか又は両方を含む前処理液を構成成分として含むことを特徴とする。
(1)検体前処理
血清検体37例について、各30μLを酸性化前処理液(2.5M 尿素、0.41M 塩酸、0.08M クエン酸二水和物、2.5% マルトース、10.0% CTAB、4.9% TritonX−100)30μLと混和し、37℃で6分間加温した。次いで、中和液(500mM Bicine、50mM MOPS、200mM NaCl、20mM EDTA3Na、10.0% BSA、NaOH(〜pH9.5))を60μL加え、酸性化前処理サンプルとした。
各酸性化前処理サンプルと各未処理サンプルについて、自動分析装置ルミパルスプレスト及び専用試薬ルミパルスプレストインシュリン(いずれも富士レビオ社製)を用いてインスリン濃度の測定を行った。ルミパルスプレストインシュリンの通常の測定方法はワンステップの免疫測定であるが、前処理液中の尿素等が標識酵素等に与える影響を回避するため、以下の通り、ツーステップの免疫測定方法に変更して測定した。なお、抗体結合粒子液、洗浄液、酵素標識抗体液、基質液は、いずれもルミパルスプレストインシュリンの構成試薬を使用した。
各検体の酸性化前処理サンプル、未処理サンプルの、発光量(カウント)、インスリン測定値を表1に示す。併せて、既存の方法(ラジオイムノアッセイ(RIA)法)で測定された、各検体のインスリン抗体(抗インスリン自己抗体)測定値を表1に示す。キャリブレータについては、酸性化前処理の有無による影響はほとんど見られなかった。検体については、特に抗インスリン自己抗体の濃度の高い検体(No.16、34)で、未処理サンプルと比して、酸性化前処理サンプルにおけるインスリン測定値が高くなった。
実施例1で前処理により測定値が増加したNo.16の検体について、未処理サンプル、酸性化前処理サンプルを調製し、ゲル濾過クロマログラフィーを行った。
未処理サンプルは、酸性化前処理液50μLと中和液100μLとを混合した緩衝液に検体50μLとを混合し、PBS400μLで希釈して調製した。酸性化前処理サンプルは、検体50μLと酸性化前処理液50μLとを混和して37℃で6分間加温した後、中和液100μLを添加し、PBS400μLで希釈して調製した。これらのサンプルを0.22μm孔のフィルターでろ過した後、500μLをゲル濾過カラムに通した。
(分離条件)
カラム:Superdex 200 10/30
分離緩衝液:PBS, 0.05% CHAPS, 0.08% Tween20, 0.1% NaN3 (pH 7.4)
流速:0.5mL/分
回収範囲:6mL〜26mL(0.5mL/画分)
回収した各画分について、再度の前処理は行わず、ルミパルスプレストインシュリン(富士レビオ社製)を用いて、通常の方法でインスリン測定を行った。
酸性化前処理に用いる酸性化剤の至適濃度を検討した。酸性化前処理液を純水で希釈して、表2に示す塩酸濃度となるよう複数の酸性化前処理剤を調製した。表2に示す複数のpHの粒子希釈液(組成:500mM Tris、50mM MOPS、200mM NaCl、20mM EDTA 3Na、0.10% ProCline300、10.0% BSA、NaOH)を調製し、それぞれに磁性粒子を終濃度0.02%となるように懸濁し粒子液とした。酸性化前処理液と粒子希釈液は、表2に示す通りに組み合せて使用した。
血清検体37例について、各50μLをSDS前処理液(347mM SDS、2mM EDTA2Na、10mM Tris−HCl、pH7.2)100μLと混和し、1000rpmの振とう条件下で80℃で5分間加熱した。次いで、中和液(1.2% C16TAC、4% CHAPS、2.9% Tween20)で4倍希釈し、室温で30分間インキュベーションした後、15℃、12000rpmの条件下で15分間遠心分離し、得られた上清をSDS前処理サンプルとした。同時に、同じ検体について、SDS前処理液に代えてPBS100μLを使用したことと、加熱を行わないこと以外は、上記SDS前処理と同様の処理を行い、得られたサンプルを未処理サンプルとした。ルミパルスインシュリン−Nキャリブレータについても、上記と同様の方法でSDS前処理サンプルと未処理サンプルを調製した。
各検体及びキャリブレータのSDS前処理サンプル及び未処理サンプルを、ルミパルスプレストインシュリン(富士レビオ社製)を用いて、通常の方法でインスリンの測定を行った。
Claims (7)
- 生体から分離された試料と、界面活性剤及び酸性化剤のいずれか又は両方を含む前処理液とを混和する前処理工程を含む、生体から分離された試料中のインスリンを測定する方法。
- 前記試料中のインスリンをイムノアッセイにより測定する、請求項1に記載の方法。
- 前記前処理液が酸性化剤を含み、前処理工程が0.01N以上の酸濃度の条件下で行われる、請求項1または2に記載の方法。
- 前記前処理液が界面活性剤を含み、前記界面活性剤が陰イオン性界面活性剤である、請求項1または2に記載の方法。
- 前記前処理液が界面活性剤と酸性化剤を含み、その界面活性剤が非イオン性界面活性剤、または両イオン性界面活性剤、または陽イオン性界面活性剤である、請求項1または2に記載の方法。
- 前記前処理工程が、加熱条件下で行われる、請求項4または5に記載の方法。
- 界面活性剤及び酸性化剤のいずれか又は両方を含む前処理液を備える、インスリン測定用試薬。
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Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS6338163A (ja) * | 1986-08-04 | 1988-02-18 | Eiji Ishikawa | 抗原の測定方法 |
JPH08145998A (ja) * | 1994-11-15 | 1996-06-07 | Daiichi Rajio Isotope Kenkyusho:Kk | インスリン様成長因子の免疫学的測定方法ならびにインスリン様成長因子測定用キット |
US5900376A (en) * | 1997-11-07 | 1999-05-04 | Geno Technology, Inc. | Agent for protein precipitation, a method of protein precipitation, a method of protein assay using protein precipitation agent, and a kit for protein assay |
JP2000241429A (ja) * | 1998-07-31 | 2000-09-08 | Mitsubishi Chemicals Corp | 生理活性成分の測定法 |
WO2005111620A1 (ja) * | 2004-05-19 | 2005-11-24 | Advanced Life Science Institute, Inc. | B型肝炎ウィルスの検出方法 |
JP2007010418A (ja) * | 2005-06-29 | 2007-01-18 | Shibayagi:Kk | 検体中の内分泌物質測定方法 |
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Patent Citations (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JPS6338163A (ja) * | 1986-08-04 | 1988-02-18 | Eiji Ishikawa | 抗原の測定方法 |
JPH08145998A (ja) * | 1994-11-15 | 1996-06-07 | Daiichi Rajio Isotope Kenkyusho:Kk | インスリン様成長因子の免疫学的測定方法ならびにインスリン様成長因子測定用キット |
US5900376A (en) * | 1997-11-07 | 1999-05-04 | Geno Technology, Inc. | Agent for protein precipitation, a method of protein precipitation, a method of protein assay using protein precipitation agent, and a kit for protein assay |
JP2000241429A (ja) * | 1998-07-31 | 2000-09-08 | Mitsubishi Chemicals Corp | 生理活性成分の測定法 |
WO2005111620A1 (ja) * | 2004-05-19 | 2005-11-24 | Advanced Life Science Institute, Inc. | B型肝炎ウィルスの検出方法 |
JP2007010418A (ja) * | 2005-06-29 | 2007-01-18 | Shibayagi:Kk | 検体中の内分泌物質測定方法 |
JP2007218714A (ja) * | 2006-02-16 | 2007-08-30 | Seikagaku Kogyo Co Ltd | 検体試料の調製方法とその応用 |
Non-Patent Citations (1)
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---|
RINDERKNECHT, E. AND HUMBEL, R. E.: "The Amino Acid Sequence of Human Insulin-like Growth Factor I and Its Structural Homology with Proin", THE JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY, vol. 253, no. 8, JPN6018030450, 1978, pages 2769 - 2776, XP002252470, ISSN: 0004676206 * |
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