JPWO2017022315A1 - 腎疾患の検査方法 - Google Patents
腎疾患の検査方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JPWO2017022315A1 JPWO2017022315A1 JP2017532411A JP2017532411A JPWO2017022315A1 JP WO2017022315 A1 JPWO2017022315 A1 JP WO2017022315A1 JP 2017532411 A JP2017532411 A JP 2017532411A JP 2017532411 A JP2017532411 A JP 2017532411A JP WO2017022315 A1 JPWO2017022315 A1 JP WO2017022315A1
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- aim
- antibody
- free aim
- kit
- biological sample
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 title claims abstract description 55
- 238000010998 test method Methods 0.000 title claims 2
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 90
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 claims abstract description 41
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 claims abstract description 11
- 208000020832 chronic kidney disease Diseases 0.000 claims description 25
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 22
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 21
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 21
- 208000009304 Acute Kidney Injury Diseases 0.000 claims description 19
- 208000033626 Renal failure acute Diseases 0.000 claims description 19
- 201000011040 acute kidney failure Diseases 0.000 claims description 19
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 claims description 16
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 15
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims description 15
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 13
- 238000011002 quantification Methods 0.000 claims description 12
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 11
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 claims description 10
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 9
- 206010018367 Glomerulonephritis chronic Diseases 0.000 claims description 6
- 208000022831 chronic renal failure syndrome Diseases 0.000 claims description 6
- 201000009925 nephrosclerosis Diseases 0.000 claims description 6
- 208000007342 Diabetic Nephropathies Diseases 0.000 claims description 5
- 208000010159 IgA glomerulonephritis Diseases 0.000 claims description 5
- 206010021263 IgA nephropathy Diseases 0.000 claims description 5
- 208000033679 diabetic kidney disease Diseases 0.000 claims description 5
- 208000027932 Collagen disease Diseases 0.000 claims description 4
- 206010055171 Hypertensive nephropathy Diseases 0.000 claims description 4
- 206010029164 Nephrotic syndrome Diseases 0.000 claims description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 claims description 3
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 abstract description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 abstract description 7
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 15
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 13
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 13
- 230000027455 binding Effects 0.000 description 12
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 10
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 description 8
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 8
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 8
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 6
- 102000003992 Peroxidases Human genes 0.000 description 6
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 6
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 6
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 6
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 6
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 6
- 108040007629 peroxidase activity proteins Proteins 0.000 description 6
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 5
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 5
- 101000911996 Homo sapiens CD5 antigen-like Proteins 0.000 description 5
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 5
- 238000011161 development Methods 0.000 description 5
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 1,2-phenylenediamine Chemical compound NC1=CC=CC=C1N GEYOCULIXLDCMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 4
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 206010061481 Renal injury Diseases 0.000 description 4
- 230000004520 agglutination Effects 0.000 description 4
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 description 4
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 4
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 4
- 102000051875 human CD5L Human genes 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 4
- 238000008157 ELISA kit Methods 0.000 description 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 3
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 3
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 3
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 3
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 3
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 3
- 238000011984 electrochemiluminescence immunoassay Methods 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 description 3
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 3
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 3
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 3
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- 108010000239 Aequorin Proteins 0.000 description 2
- 229940088872 Apoptosis inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 2
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 2
- 102100026862 CD5 antigen-like Human genes 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N D-Luciferin Chemical compound OC(=O)[C@H]1CSC(C=2SC3=CC=C(O)C=C3N=2)=N1 IGXWBGJHJZYPQS-SSDOTTSWSA-N 0.000 description 2
- XPDXVDYUQZHFPV-UHFFFAOYSA-N Dansyl Chloride Chemical compound C1=CC=C2C(N(C)C)=CC=CC2=C1S(Cl)(=O)=O XPDXVDYUQZHFPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N Dehydro-luciferin Natural products OC(=O)C1=CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 CYCGRDQQIOGCKX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 2
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 2
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 2
- BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N Fivefly Luciferin Natural products OC(=O)C1CSC(C=2SC3=CC(O)=CC=C3N=2)=N1 BJGNCJDXODQBOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108060001084 Luciferase Proteins 0.000 description 2
- 239000005089 Luciferase Substances 0.000 description 2
- DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N Luciferin Natural products CCc1c(C)c(CC2NC(=O)C(=C2C=C)C)[nH]c1Cc3[nH]c4C(=C5/NC(CC(=O)O)C(C)C5CC(=O)O)CC(=O)c4c3C DDWFXDSYGUXRAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 2
- 108010004729 Phycoerythrin Proteins 0.000 description 2
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 2
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N Pyruvic acid Chemical compound CC(=O)C(O)=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 2
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 2
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 239000000158 apoptosis inhibitor Substances 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 2
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N fluorescein-5-isothiocyanate Chemical compound O1C(=O)C2=CC(N=C=S)=CC=C2C21C1=CC=C(O)C=C1OC1=CC(O)=CC=C21 MHMNJMPURVTYEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 2
- 210000000548 hind-foot Anatomy 0.000 description 2
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 2
- 208000037806 kidney injury Diseases 0.000 description 2
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 238000004020 luminiscence type Methods 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 2
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 2
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 2
- XOJVVFBFDXDTEG-UHFFFAOYSA-N pristane Chemical compound CC(C)CCCC(C)CCCC(C)CCCC(C)C XOJVVFBFDXDTEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 238000002331 protein detection Methods 0.000 description 2
- 239000002096 quantum dot Substances 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- 210000005084 renal tissue Anatomy 0.000 description 2
- PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N rhodamine B Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(=[N+](CC)CC)C=C2OC2=CC(N(CC)CC)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O PYWVYCXTNDRMGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000003118 sandwich ELISA Methods 0.000 description 2
- 108091005725 scavenger receptor cysteine-rich superfamily Proteins 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 3,3',5,5'-tetramethylbenzidine Chemical compound CC1=C(N)C(C)=CC(C=2C=C(C)C(N)=C(C)C=2)=C1 UAIUNKRWKOVEES-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HSTOKWSFWGCZMH-UHFFFAOYSA-N 3,3'-diaminobenzidine Chemical compound C1=C(N)C(N)=CC=C1C1=CC=C(N)C(N)=C1 HSTOKWSFWGCZMH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 102000053028 CD36 Antigens Human genes 0.000 description 1
- 108010045374 CD36 Antigens Proteins 0.000 description 1
- 101710122347 CD5 antigen-like Proteins 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 235000005956 Cosmos caudatus Nutrition 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 229920002535 Polyethylene Glycol 1500 Polymers 0.000 description 1
- 206010063897 Renal ischaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010038540 Renal tubular necrosis Diseases 0.000 description 1
- 208000036071 Rhinorrhea Diseases 0.000 description 1
- 206010039101 Rhinorrhoea Diseases 0.000 description 1
- KJTLSVCANCCWHF-UHFFFAOYSA-N Ruthenium Chemical compound [Ru] KJTLSVCANCCWHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 1
- XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N Silicon Chemical compound [Si] XUIMIQQOPSSXEZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000473945 Theria <moth genus> Species 0.000 description 1
- ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-M Thiocyanate anion Chemical compound [S-]C#N ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 210000000683 abdominal cavity Anatomy 0.000 description 1
- QPMSXSBEVQLBIL-CZRHPSIPSA-N ac1mix0p Chemical compound C1=CC=C2N(C[C@H](C)CN(C)C)C3=CC(OC)=CC=C3SC2=C1.O([C@H]1[C@]2(OC)C=CC34C[C@@H]2[C@](C)(O)CCC)C2=C5[C@]41CCN(C)[C@@H]3CC5=CC=C2O QPMSXSBEVQLBIL-CZRHPSIPSA-N 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000001079 digestive effect Effects 0.000 description 1
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 1
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 1
- KAKKHKRHCKCAGH-UHFFFAOYSA-L disodium;(4-nitrophenyl) phosphate;hexahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.[Na+].[Na+].[O-][N+](=O)C1=CC=C(OP([O-])([O-])=O)C=C1 KAKKHKRHCKCAGH-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 125000002228 disulfide group Chemical group 0.000 description 1
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 1
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 description 1
- 210000003238 esophagus Anatomy 0.000 description 1
- 238000002875 fluorescence polarization Methods 0.000 description 1
- 230000006870 function Effects 0.000 description 1
- 210000000232 gallbladder Anatomy 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-N hydrogen thiocyanate Natural products SC#N ZMZDMBWJUHKJPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000001678 irradiating effect Effects 0.000 description 1
- 150000002540 isothiocyanates Chemical class 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 1
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004130 lipolysis Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 1
- 210000004880 lymph fluid Anatomy 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 1
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 108010089193 pattern recognition receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000007863 pattern recognition receptors Human genes 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 210000003800 pharynx Anatomy 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 1
- 238000005086 pumping Methods 0.000 description 1
- 229940107700 pyruvic acid Drugs 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000941 radioactive substance Substances 0.000 description 1
- 230000010410 reperfusion Effects 0.000 description 1
- 229910052707 ruthenium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 1
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 239000012089 stop solution Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- WGTODYJZXSJIAG-UHFFFAOYSA-N tetramethylrhodamine chloride Chemical compound [Cl-].C=12C=CC(N(C)C)=CC2=[O+]C2=CC(N(C)C)=CC=C2C=1C1=CC=CC=C1C(O)=O WGTODYJZXSJIAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000010257 thawing Methods 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 1
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 1
- 210000002105 tongue Anatomy 0.000 description 1
- 210000000626 ureter Anatomy 0.000 description 1
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 description 1
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
- G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
- G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
- G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
- G01N2333/70596—Molecules with a "CD"-designation not provided for elsewhere in G01N2333/705
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/34—Genitourinary disorders
- G01N2800/347—Renal failures; Glomerular diseases; Tubulointerstitial diseases, e.g. nephritic syndrome, glomerulonephritis; Renovascular diseases, e.g. renal artery occlusion, nephropathy
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/56—Staging of a disease; Further complications associated with the disease
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Pathology (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
Abstract
【解決手段】被験体に由来する生体試料中のfree AIMを検出または定量する工程を含む、腎疾患の検出方法または腎疾患の診断の補助方法、およびfree AIMに結合する抗体を含む、腎疾患の検査または診断補助用キットを提供する。
【選択図】なし
Description
free AIMフラグメントは、free AIMの部分ペプチドであり、抗free AIMフラグメント抗体は、free AIMを認識する。また、免疫原としては、例えば、ヒトやサルなどの霊長類、ラットやマウスなどのげっ歯類、イヌ、ネコ、ウマ、ヒツジ、ブタなどのfree AIMまたはfree AIMフラグメントが挙げられるが、これらに限定されない。
洗浄後、酵素基質と反応、発色させ、吸光度を測定することにより、free AIM濃度を求めることができる。また、固相担体に固定した抗free AIM抗体と生体試料中のfree AIMを反応させた後、非標識free AIM抗体(一次抗体)を添加し、この非標識抗体に対する抗体(二次抗体)を酵素標識してさらに添加してもよい。
また、基準値は、例えば、健常人の検出レベルの平均値に、標準偏差を2倍あるいは3倍した値を加算した値として定めることもでき、更に、感度(検出率)・特異性(偽陽性率の低さ)をバランスよく満たす値に適宜定めることができる。
捕獲抗体と標識抗体は、異なるエピトープを認識する。
このようなキットの場合、まず、マイクロタイタープレートに捕獲抗体を固定し、ここに適宜処理し希釈した生体試料を添加した後インキュベートし、試料を除去して洗浄する。次に、標識抗体を添加した後インキュベートし、基質を加えて発色させる。マイクロタイタープレートリーダー等を用いて発色を測定することにより、free AIM濃度を求めることができる。
捕獲抗体と一次抗体は、異なるエピトープを認識する。
このようなキットでは、まず、マイクロタイタープレートに捕獲抗体を固定し、ここに適宜処理し希釈した生体試料を添加した後インキュベートし、試料を除去して洗浄する。続いて、一次抗体を添加してインキュベートおよび洗浄を行い、さらに酵素標識した二次抗体を添加してインキュベートを行った後、基質を加えて発色させる。マイクロタイタープレートリーダー等を用いて発色を測定することにより、free AIM濃度を求めることができる。二次抗体を用いることにより、反応が増幅され検出感度を高めることができる。
本発明の診断用キットのさらに別の態様として、電気化学発光法によってfree AIM濃度を測定するためのものも挙げられる。このキットは、抗free AIM抗体を担持する担体を含み、適宜処理し希釈した生体試料を添加してインキュベート後、試料を除去して洗浄する。次に電気化学発光物質(ルテニウム等)標識抗体を加えてインキュベート後、電極上で電気エネルギーを与えて発光させる。この発光量を計測することによりfree AIM濃度を定量する。
<動物感作>
抗原として全長ヒトrAIM(2mg/ml)を等量のTiterMaxGold(G−1フナコシ)と混合しエマルジョンを作製した。免疫動物にはBalb/cマウス(チャールズリバー(株))8週齢のメス2匹を用い、後ろ足底部へ50μLを投与した。2週間後に同様の投与を行い、更に2週間以上をおいて抗原溶液50μgを後ろ足底部へ投与し3日後の細胞融合に備えた。
ミエローマ細胞にはマウスP3U1を用い、増殖培養には、RPMI1640(11875−119 GIBCO)にグルタミンとピルビン酸を加えFBS(S1560 BWT社)を10%になるように添加した培地を用いた。抗生物質としてはペニシリン、ストレプトマイシンを適量加えた。
麻酔下にて心臓採血を行ったマウスから無菌的に膝窩リンパ節を摘出し、#200メッシュ付ビーカーにのせ、シリコン棒で押しながら細胞浮遊液を調整した。細胞はRPMI1640にて2回の遠心洗浄を行った後、細胞数をカウントした。対数増殖期の状態のミエローマ細胞を遠心により集め洗浄後、リンパ細胞とミエローマ細胞の比率が5対1となるように調整し、混合遠心を行った。細胞融合はPEG1500(783641 ロシュ)を用いて行った。すなわち、細胞ペレットへ1mLのPEG液を3分間かけて反応させ、その後、段階的に希釈を行い遠心にて洗浄した後、培地を加え96ウェルプレート15枚へ200μLずつ入れ、1週間の培養を行った。培地にはミエローマ細胞用培地にHATサプリメント(21060−017 GIBCO)を加え、FBS濃度を15%にしたものを用いた。
凍結保存された融合細胞を解凍し、増殖培養を行った後、1週間以上前に0.5mlのプリスタン(42−002 コスモバイオ)を腹腔内投与したヌードマウス(BALB/cAJcl−nu/nu 日本クレア)の腹腔へ1×107個を投与し、およそ2週間後に4〜12mlの腹水を得た。遠心処理にて固形物を除去した後、凍結保存を行った。
健常人3例、急性腎障害(AKI)患者6例の血清におけるAIMを、抗AIM抗体を用いたウエスタンブロットにて検討した。血清を非還元条件下でSDS−ポリアクリルアミドゲル電気泳動を行い、蛋白質をPVDF膜(Immobilon,ミリポア社)に転写し、実施例1で作製したマウス抗ヒトAIMモノクローナル抗体と4℃、overnightにて一次抗体反応を行った。二次抗体にHRP結合抗マウスIgG抗体、検出試薬としてLuminata Forte Western HRP Substrate (ミリポア社)を用い、シグナルの検出はImage Quant LAS 4000 (GE Healthcare)にて行った。
AIMを定量するELISA を用いて、健常人とAKI患者の尿中のfree AIM濃度を測定した。AIM ELISAでは、実施例1で作製されたマウス抗ヒトAIMモノクローナル抗体をプレートに固相化し、患者尿を添加した。洗浄後、HRP標識マウス抗ヒトAIMモノクローナル抗体を反応させ、HRP基質によって発色させた。尿中ではfree AIMのみが存在することから、本ELISAによって検出される尿中AIMは、free AIMである。
健常人5例、AKI患者(Acute)5例、AKIから回復した患者(Recovery)5例の尿中のfree AIM濃度を測定した。統計解析はMan−Whittney U testを用いた。その結果、尿中のfree AIM濃度は、健常人と比べ、AKI患者で有意に高かった(p<0.001)。また、AKIからの回復に伴い、尿中free AIM濃度が低下することが示された(図2)。
健常人3例、慢性腎臓病(CKD)患者13例の血清におけるAIMを、実施例2に記載の方法による抗AIM抗体を用いたウエスタンブロットにて検討した。CKD患者血清では、分子量>600 kDa のIgM結合AIMのバンドに加え、分子量<40kDaのfree AIMのバンドが検出された(図3)。本方法におけるCKD患者には、慢性腎炎(慢性糸球体腎炎)、糖尿病性腎症、IgA腎症、腎硬化症の患者が含まれていた。
free AIMを定量するHuman AIM ELISA kit(CircuLex社CY−8080)を用い、健常人20例、CKD患者15例の血清中のfree AIM濃度を測定した。測定はキットの取り扱い手順書に従って実施した。統計解析はMan−Whittney U testを用いた。その結果、free AIM濃度は、健常人と比べ、CKD患者で有意に高かった(図4)(p<0.001)。
Claims (15)
- 腎疾患の検査方法であって、
被験体に由来する生体試料中のfree AIMを検出または定量する工程を含む、
方法。 - 腎疾患の診断を補助する方法であって、
被験体に由来する生体試料中のfree AIMを検出または定量する工程を含む、
方法。 - 腎疾患を検査するために、被験体に由来する生体試料中のfree AIMを検出または定量する方法。
- 請求項1〜3のいずれか1項に記載の方法であって、
前記生体試料が、血清、血漿、全血および尿からなる群から選択される、
方法。 - 請求項1〜4のいずれか1項に記載の方法であって、
前記腎疾患が、急性腎障害又は慢性腎臓病である、
方法。 - 請求項5に記載の方法であって、
前記慢性腎臓病が、慢性腎炎、慢性腎不全、ネフローゼ症候群、糖尿病性腎症、腎硬化症、IgA腎症、高血圧性腎症、膠原病に伴う腎症又はIgM腎症である、
方法。 - 請求項1〜6のいずれか1項に記載の方法であって、
前記検出または定量は、イムノアッセイによるものである、
方法。 - 請求項7に記載の方法であって、
前記検出または定量は、生体試料とfree AIMに結合する抗体とを接触させることにより行う、
方法。 - 請求項8に記載の方法であって、
前記検出または定量は、free AIMに特異的に結合する抗体により行う、
方法。 - 請求項8または請求項9に記載の方法であって、
前記検出または定量は、ELISAによる測定である、
方法。 - 請求項7〜10のいずれか1項に記載の方法であって、
前記検出または定量は、血清、血漿または全血から選択される血液試料をタンパク質変性条件に曝露することなく、かつ、還元条件に曝露することなく行うことを特徴とする、
方法。 - free AIMに結合する抗体を含む、腎疾患の検査または診断補助用キット。
- 請求項12に記載のキットであって、
前記抗体が、free AIMに特異的に結合する抗体である、
キット。 - 請求項12または請求項13に記載のキットであって、
前記腎疾患が、急性腎障害または慢性腎臓病である、
キット。 - 請求項14に記載のキットであって、
前記慢性腎臓病が、慢性腎炎、慢性腎不全、ネフローゼ症候群、糖尿病性腎症、腎硬化症、IgA腎症、高血圧性腎症、膠原病に伴う腎症またはIgM腎症である、
キット。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2015155975 | 2015-08-06 | ||
JP2015155975 | 2015-08-06 | ||
PCT/JP2016/066227 WO2017022315A1 (ja) | 2015-08-06 | 2016-06-01 | 腎疾患の検査方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2017022315A1 true JPWO2017022315A1 (ja) | 2018-06-21 |
JP6666916B2 JP6666916B2 (ja) | 2020-03-18 |
Family
ID=57944070
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2017532411A Active JP6666916B2 (ja) | 2015-08-06 | 2016-06-01 | 腎疾患の検査方法 |
Country Status (4)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US10996217B2 (ja) |
JP (1) | JP6666916B2 (ja) |
TW (1) | TWI704348B (ja) |
WO (1) | WO2017022315A1 (ja) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113728233A (zh) * | 2019-01-31 | 2021-11-30 | 积水医疗株式会社 | 用于生物样品中的游离aim的免疫分析方法和分析试剂盒 |
Families Citing this family (10)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CA2944767C (en) | 2014-04-04 | 2022-07-12 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Isotyping immunoglobulins using accurate molecular mass |
US10690676B2 (en) | 2014-07-29 | 2020-06-23 | Mayo Roundation for Medical Education and Research | Quantifying monoclonal antibody therapeutics by LC-MS/MS |
CN108351358B (zh) * | 2015-09-10 | 2021-05-07 | 积水医疗株式会社 | 肝癌测试方法 |
WO2017053932A1 (en) | 2015-09-24 | 2017-03-30 | Mayo Foundation For Medical Education And Research | Identification of immunoglobulin free light chains by mass spectrometry |
CN109863395B (zh) | 2016-09-07 | 2023-05-23 | 梅约医学教育与研究基金会 | 分子量法鉴定和监测裂解免疫球蛋白 |
EP3681528A4 (en) | 2017-09-13 | 2021-07-21 | Mayo Foundation for Medical Education and Research | IDENTIFICATION AND MONITORING OF THE APOPTOSIS INHIBITOR OF MACROPHAGES |
EP3879270A4 (en) * | 2018-11-09 | 2022-08-10 | Sekisui Medical Co., Ltd. | METHOD FOR DETECTION OF LIVER CANCER OF VIRAL ORIGIN |
CN113711038A (zh) * | 2019-01-31 | 2021-11-26 | 积水医疗株式会社 | 用于生物样品中游离aim的免疫分析方法及用于检测对象中nash的方法 |
WO2020158856A1 (ja) * | 2019-01-31 | 2020-08-06 | 積水メディカル株式会社 | 生物学的試料中の遊離aimの免疫学的分析方法 |
WO2021050089A1 (en) * | 2019-09-09 | 2021-03-18 | Washington State University | Genetic test for identifying cats at a high risk for developing tubulointerstitial fibrosis |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2011145725A1 (ja) * | 2010-05-20 | 2011-11-24 | Miyazaki Toru | Aim関連疾患の診断方法及び診断用キット |
WO2013162021A1 (ja) * | 2012-04-27 | 2013-10-31 | 大日本住友製薬株式会社 | 肝疾患の予防または治療剤 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5314804A (en) * | 1992-03-24 | 1994-05-24 | Serim Research Corporation | Test for Helicobacter pylori |
WO2010001617A1 (en) * | 2008-07-04 | 2010-01-07 | Ono Pharmaceutical Co., Ltd. | Use of an efficacy marker for optimizing therapeutic efficacy of an anti-human pd-1 antibody on cancers |
US20130115220A1 (en) * | 2010-05-20 | 2013-05-09 | Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. | Method for prevention or treatment of metabolic syndrome |
EP3103466A4 (en) | 2014-02-07 | 2017-11-22 | Toru Miyazaki | Preventive or therapeutic agent for kidney disease |
-
2016
- 2016-06-01 JP JP2017532411A patent/JP6666916B2/ja active Active
- 2016-06-01 WO PCT/JP2016/066227 patent/WO2017022315A1/ja active Application Filing
- 2016-06-01 US US15/749,696 patent/US10996217B2/en active Active
- 2016-07-28 TW TW105123899A patent/TWI704348B/zh active
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2011145725A1 (ja) * | 2010-05-20 | 2011-11-24 | Miyazaki Toru | Aim関連疾患の診断方法及び診断用キット |
WO2013162021A1 (ja) * | 2012-04-27 | 2013-10-31 | 大日本住友製薬株式会社 | 肝疾患の予防または治療剤 |
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
北田研人ほか: "Apoptosis inhibitor of macrophage (AIM)は、尿細管壊死の除去を促進し、腎障害の修復・再生を誘導する", 日本腎臓学会誌, vol. 56, no. 3, JPN6015010354, 25 May 2014 (2014-05-25), pages 321, ISSN: 0004201738 * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN113728233A (zh) * | 2019-01-31 | 2021-11-30 | 积水医疗株式会社 | 用于生物样品中的游离aim的免疫分析方法和分析试剂盒 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
TW201719169A (zh) | 2017-06-01 |
WO2017022315A1 (ja) | 2017-02-09 |
TWI704348B (zh) | 2020-09-11 |
US10996217B2 (en) | 2021-05-04 |
JP6666916B2 (ja) | 2020-03-18 |
US20180224437A1 (en) | 2018-08-09 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP6666916B2 (ja) | 腎疾患の検査方法 | |
US20210123917A1 (en) | Method for examining liver cancer | |
JP5425063B2 (ja) | IgA腎症の検査方法及び検出キット | |
JP6829445B2 (ja) | 肝細胞癌および膵臓がんを診断するためのラミニン2の使用 | |
CN108469523A (zh) | 癌症的预后和诊断方法 | |
WO2020158858A1 (ja) | 生物学的試料中の遊離aimの免疫学的分析方法及び対象におけるnashの検出方法 | |
EA034364B1 (ru) | Иммуноанализ для обнаружения хромогранина а | |
JP5754844B2 (ja) | 泌尿器科がんの検査方法及び検査用キット | |
JP7315965B2 (ja) | ウィルス性肝癌の検出方法 | |
US11242408B2 (en) | Monoclonal antibody specific for gamma-glutamyl-l-epsilon-lysine for the monitoring of apoptosis | |
WO2017170847A1 (ja) | 糖尿病の罹患を測定する方法 | |
WO2013046760A1 (ja) | 胃癌の検査方法及び検査キット | |
JP2022075614A (ja) | 遊離aimに特異的なモノクローナル抗体およびその利用 | |
EP1539791A4 (en) | METHOD FOR THE DISTINCTION OF COLITIS ULCEROSA OF MORBUS CROHN BY EVIDENCE OF THE PRESENCE OF FUZAL ANTI-NEUTROPHIL CYTOPLASMIC ANTIBODIES (ANCA) | |
JP2024521881A (ja) | 非アルコール性脂肪性肝疾患のための線維症バイオマーカー | |
JPWO2019098328A1 (ja) | IgA腎症診断用キット | |
JP2013083556A (ja) | 膵臓癌の検査方法及び検査キット | |
JP2017003529A (ja) | 糸球体障害の検査方法 | |
JP2005077258A (ja) | Pcnaを用いた悪性腫瘍(癌及び肉腫)の血清診断 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A80 | Written request to apply exceptions to lack of novelty of invention |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A801 Effective date: 20180219 |
|
A80 | Written request to apply exceptions to lack of novelty of invention |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A80 Effective date: 20180220 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20190422 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20200203 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20200221 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 6666916 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |
|
R250 | Receipt of annual fees |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250 |