JPWO2011074607A1 - トリテルペン誘導体およびｃ型慢性肝炎の予防または治療のための薬剤 - Google Patents

Abstract

一般式（Ｉ）で示すトリテルペン誘導体または医薬的に許容されるその塩、およびそれを有効成分とするＣ型慢性肝炎の予防または治療のための薬剤を提供する。【化１】［式（Ｉ）中、Ｒ１はカルボキシル基、ヒドロキシメチル基、−ＣＨ２ＯＳＯ３Ｈ、または【化２】を表し、Ｒ２は−ＯＲ３、または−Ｏ−（ＣＨ２）ｍ−ＯＲ４を表す。ここで、Ｒ３はヒドロキシメチル基、ジメチルアミノメチル基、フェニルアミノメチル基、モルホリノメチル基、カルボキシル基もしくはホルミル基で置換されていてもよいベンジル基、Ｃ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基、Ｃ２−６アルキニル基、またはヒドロキシＣ１−６アルキル基を表し、Ｒ４はカルボキシル基で置換されていてもよいフェニル基を表し、ｍは１〜３の整数を表す。ただし、Ｒ１が−ＣＨ２ＯＨであり、かつ、Ｒ３がＣ１−６アルキル基、Ｃ２−６アルケニル基またはベンジル基である場合は除く。］

Description

本発明は、新規なトリテルペン誘導体または医薬的に許容されるその塩、および、それらを有効成分として含んでなるＣ型慢性肝炎の予防または治療のための薬剤に関する。

国内のＣ型肝炎ウイルス（ＨＣＶ）の持続感染者は約１５０万〜２００万人と推計され、その多くは、慢性肝炎の症状を呈しているＣ型慢性肝炎と推定されている（非特許文献１参照）。ＨＣＶ感染者の８０〜９０％は肝組織所見からみればＣ型慢性肝炎であり、これら感染者の５０〜６０％は慢性肝炎から肝硬変・肝細胞癌へと進展する可能性がある（非特許文献２参照）。肝癌はＨＣＶの感染に起因するものが多くを占め、肝癌の死亡者数は年間約３万人になる（非特許文献３参照）。一方、諸外国では国毎に差異があるものの、米国では４１０万人（３２０万人が慢性肝炎）が、欧州では約９００万の人々がＨＣＶに感染していると推定されており（非特許文献４、５参照）、Ｃ型肝炎は世界的にも重要な医療上の問題となっている。

Ｃ型慢性肝炎の予防または治療の対象となる患者はＨＣＶに感染した患者である。ＨＣＶには、遺伝子型（Ｇｅｎｏｔｙｐｅ）として主として１型から６型の６タイプがあり、特に、遺伝子型１型や遺伝子型２型は世界的にも広く分布していることが知られている（非特許文献６、７参照）。これら遺伝子型のタイプには、さらにサブタイプが存在する。サブタイプの違いはＨＣＶを構成するＲＮＡの特定領域の塩基配列によって識別可能であり、各サブタイプのＨＣＶ量の測定も可能となっている（非特許文献８参照）。

Ｃ型慢性肝炎の予防または治療には、ＨＣＶの除去を目的としてインターフェロン（ＩＦＮ）が広く用いられている。ＩＦＮは、ウイルス感染時の自然免疫系で産生され、ウイルス複製を阻害する抗ウイルス活性を有する生理活性物質である。ＩＦＮは、高度に相同性を有する種特異的タンパク質であり、４つのクラスのＩＦＮがヒトに存在していることが知られている（非特許文献９参照）。現在、ＩＦＮにポリエチレングリコール（ＰＥＧ）を付加し体内での持続時間を延長したタイプのものを含む、いくつかの異なるタイプのインターフェロンα（ＩＦＮα）やインターフェロンβ（ＩＦＮβ）が、Ｃ型慢性肝炎に効果を示す医薬品として認可されている（非特許文献１０参照）。

Ｃ型慢性肝炎におけるＩＦＮの効果を左右する因子として、患者の血中のＨＣＶ量とＨＣＶの遺伝子型が重要であることが知られている。血中のＨＣＶ量が高ウイルス量（１Ｍｅｑ／ｍｌ、５．０ＬｏｇＩＵ／ｍｌ（１００ＫＩＵ／ｍｌ）あるいは３００ｆｍｏｌ／Ｌ 以上）の場合や、ＨＣＶの遺伝子型が遺伝子型１型や４型の場合はＩＦＮの効果は低く、特に遺伝子型１ｂの場合では最もＩＦＮの効果が低いことが明らかとなっている（非特許文献１１，１２参照）。

現在、Ｃ型慢性肝炎患者に対して、ペグインターフェロン（ＰＥＧ-ＩＦＮ）とリバビリンの４８週間併用療法が標準治療法となっており、最も効果が高い治療法として期待されている。しかしながら、特に、血中のＨＣＶが遺伝子型１ｂでかつ高ウイルス量である患者は最も治療が難しく、その効果は約５０％程度に留まっている（非特許文献１１参照）。この理由として、遺伝子型１ｂが標準治療法に対して治療抵抗性を示すことなどのウイルス側の要因の他、リバビリンで生ずる貧血などの副作用により、薬剤量の減量が必要となり、治療効果不十分のために治療中断や中止となることの影響が大きいと考えられている（非特許文献６，１３参照）。このように、現在使用可能な薬剤では治療が困難なＣ型慢性肝炎難治症例が存在し、医療上で解決すべき大きな課題となっている。我が国ではＣ型慢性肝炎患者は、７割以上が遺伝子型１ｂの患者であり、高齢者の患者の割合も高い。

近年、Ｃ型慢性肝炎難治症例を含むＣ型慢性肝炎患者の治療薬として、ＨＣＶの増殖を直接抑制する薬剤の研究が進められてきている。これらは、ＩＦＮとリバビリン併用の標準療法に追加する３剤〜多剤併用療法で、Ｃ型慢性肝炎難治症例を含め、ＨＣＶを体内から早期に除去することが期待されている。しかしながら、ＨＣＶの増殖を直接に抑制する薬剤は、ＨＣＶに薬剤抵抗性を生じさせること、薬剤固有の副作用により治療完遂ができないことなど、いまだ解決すべき課題が指摘されており、現在、Ｃ型慢性肝炎難治症例の予防または治療のための薬剤として、通常で使用できるものは存在しない（非特許文献１４参照）。また、高い治療効果を期待するには、リバビリンの併用が必要となるため、リバビリンによる副作用の課題は回避することはできない。Ｃ型慢性肝炎難治症例に対して、有用で、かつ安全性の高い薬剤が開発されれば、これら医療上の課題を解決でき、今後、より高度に治療困難なＨＣＶのサブタイプなどの治療剤として、あるいはＨＣＶの増殖を直接に抑制する薬剤やインターフェロン製剤を含む抗ＨＣＶ薬などと複数の組み合わせで併用可能な治療効果の高い治療剤としての利用が期待できる。

一方、トリテルペン誘導体の一部は肝細胞障害抑制効果を有することが報告されている（特許文献１，２参照）。特に、ソヤサポゲノールＢ由来のトリテルペン誘導体である２２β−メトキシオレアン−１２−エン−３β，２４−ジオールは、肝細胞障害抑制効果だけではなく、インターフェロンと組み合わせることで相乗的な抗ＨＣＶ活性を有することが報告されている（特許文献３参照）。

しかし、２２β−メトキシオレアン−１２−エン−３β，２４−ジオール以外のソヤサポゲノールＢ由来のトリテルペン誘導体については、抗ＨＣＶ活性は知られていない。

特許第３２７９５７４号 特許第３７２７３５３号 国際公開第２００８／００４６５３号

日本肝臓学会編，「慢性肝炎の治療ガイド」，（株）文光堂，２００８年，ｐ．２１ 飯野四郎，「Ｃ型肝炎治療ガイドライン」，日本臨牀，２００４，第６２巻，増刊号７，ｐ．３４２−３４６ 国立がんセンターがん対策情報センター．人口動態統計（厚生労働省大臣官房統計情報部編）によるがん死亡データ（１９５８年〜２００５年） 「アナルス・オブ・インターナル・メディシン（Ａｎｎａｌｓ ｏｆ Ｉｎｔｅｒｎａｌ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）」，（米国），２００６年，１４４巻，ｐ．７０５−７６５ 「イー・エル・ピー・エー、サマリー エキスパート リコメンデーションズ（ＥＬＰＡ、Ｓｕｍｍａｒｙ ｅｘｐｅｒｔ ｒｅｃｏｍｍｅｎｄａｔｉｏｎｓ）」，（ベルギー）,２００９年 「ニュー・イングランド・ジャーナル・オブ・メディシン（Ｎｅｗ Ｅｎｇｌａｎｄ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）」，（米国）,２００１年，３４５巻，Ｎｏ１，ｐ．４１−５２ 「ジャーナル・オブ・クリニカル・マイクロバイオロジー（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ）」,（米国），１９９４年,３２巻，Ｎｏ４，ｐ．８８４−８９２ 「ジャーナル・オブ・クリニカル・マイクロバイオロジー（Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ）」，（米国）,２００６年，ｐ．３１８−３２３ 「アニュアル・レビュー・オブ・バイオケミストリー（Ａｎｎｕａｌ Ｒｅｖｉｅｗ ｏｆ Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ）」，（米国），１９８７年，第５６巻，ｐ．７２７−７７７ ［慢性肝炎の治療ガイド２００８］，日本肝臓学会編，２００８年 「Ｂ型，Ｃ型肝炎治療における新たな問題点」，メディカル・ジャーナル社，２００８年，ｐ．１９−２５ 「ランセット（Ｌａｎｃｅｔ）」，（英国），１９９８年，第３５２巻，第９１３８号，ｐ．１４２６−１４３２ 「ウイルス肝炎の新しい治療法」，メジカル・ビュー社，２００８年，第２５巻，第３号，ｐ．７６−８１ 「ネイチャー・レビュー（Ｎａｔｕｒｅ Ｒｅｖｉｅｗｓ）」，（米国）,２００７年，第６号，ｐ．９９１−１０００

本発明は、このような状況に鑑みてなされたものであり、その目的は、新規なトリテルペン誘導体を提供することにある。本発明は、その好ましい態様において、Ｃ型慢性肝炎に対して、従来のトリテルペン誘導体よりも、さらに強い抗ウイルス活性を示すトリテルペン誘導体を提供することを目的とする。本発明は、他の好ましい態様において、良好な体内動態を有するトリテルペン誘導体を提供することを目的とする。さらに、本発明は、これらトリテルペン誘導体を有効成分とする、Ｃ型慢性肝炎の予防または治療のための薬剤を提供することをも目的とする。

本発明者は、上記課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、多様な置換基を有する新規なトリテルペン誘導体の合成に成功した。合成したトリテルペン誘導体について、抗ＨＣＶ作用の検討を行ったところ、従来の２２β−メトキシオレアン−１２−エン−３β，２４−ジオールと比較して、より強い抗ＨＣＶ作用を示す複数の化合物を見出した。さらに、これら化合物の多くは、良好な体内動態をも示した。このような特性から、本発明者は、同定したトリテルペン誘導体が、Ｃ型慢性肝炎の優れた予防剤または治療剤になりうることを見出し、本発明を完成するに至った。

すなわち、本発明は、下記発明を提供するものである。

（１） 一般式（Ｉ）で表されるトリテルペン誘導体または医薬的に許容されるその塩。

［式（Ｉ）中、Ｒ^１はカルボキシル基、ヒドロキシメチル基、−ＣＨ_２ＯＳＯ_３Ｈ、または

を表し、Ｒ^２は−ＯＲ^３、または−Ｏ−（ＣＨ_２）ｍ−ＯＲ^４を表す。ここで、Ｒ^３はヒドロキシメチル基、ジメチルアミノメチル基、フェニルアミノメチル基、モルホリノメチル基、カルボキシル基もしくはホルミル基で置換されていてもよいベンジル基、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、Ｃ_２−６アルキニル基、またはヒドロキシＣ_１−６アルキル基を表し、Ｒ^４はカルボキシル基で置換されていてもよいフェニル基を表し、ｍは１〜３の整数を表す。ただし、Ｒ^１がヒドロキシメチル基であり、Ｒ^２が−ＯＲ^３であり、かつ、Ｒ^３がＣ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基またはベンジル基である場合は除く。］
（２） 一般式（Ｉ）で表されるトリテルペン誘導体または医薬的に許容されるその塩。

［式（Ｉ）中、Ｒ^１はカルボキシル基を表し、Ｒ^２は−ＯＲ^３を表す。ここで、Ｒ^３はベンジル基、メチル基またはアリル基を表す。］
（３） 一般式（Ｉ）で表されるトリテルペン誘導体または医薬的に許容されるその塩。

［式（Ｉ）中、Ｒ^１はヒドロキシメチル基を表し、Ｒ^２は−ＯＲ^３、または−Ｏ−（ＣＨ_２）_３−ＯＲ^４を表す。ここで、Ｒ^３はヒドロキシメチル基、ジメチルアミノメチル基、フェニルアミノメチル基、モルホリノメチル基、カルボキシル基もしくはホルミル基で置換されているベンジル基、２−プロピニル基、３−ヒドロキシプロピル基、または２−ヒドロキシプロピル基を表す。Ｒ^４はフェニル基またはカルボキシル基で置換されているフェニル基を表す。］
（４） 一般式（Ｉ）で表されるトリテルペン誘導体または医薬的に許容されるその塩。

［式中、Ｒ^１は−ＣＨ_２ＯＳＯ_３Ｈを表し、Ｒ^２はメトキシ基を表す。］
（５） 一般式（Ｉ）で表されるトリテルペン誘導体または医薬的に許容されるその塩。

［式（Ｉ）中、 Ｒ^１は

を表し、Ｒ^２はメトキシ基を表す］
（６） Ｃ型肝炎ウイルスの阻害活性のＩＣ５０値が２０μＭ以下である、（１）から（５）のいずれかに記載のトリテルペン誘導体または医薬的に許容されるその塩。

（７） （１）から（６）のいずれかに記載のトリテルペン誘導体または医薬的に許容されるその塩を有効成分として含んでなるＣ型慢性肝炎の予防または治療のための薬剤。

（８） 医薬的に許容される担体を含む、（７）に記載の薬剤。

（９） さらにインターフェロンを組み合わせてなる、（７）または（８）に記載の薬剤。

（１０） （７）から（９）のいずれかに記載の薬剤を、Ｃ型慢性肝炎の予防または治療が必要な患者に、予防上または治療上の有効量を投与することを含む、Ｃ型慢性肝炎の予防または治療の方法。

（１１） Ｃ型慢性肝炎の予防または治療のための薬剤の製造のための、（１）から（６）のいずれかに記載のトリテルペン誘導体または医薬的に許容される塩の使用方法。

（１２） Ｃ型慢性肝炎の予防または治療のための薬剤が、（７）から（９）のいずれかに記載の薬剤である、（１１）に記載の使用方法。

（１３） Ｃ型慢性肝炎の予防または治療における使用のための、（１）から（６）のいずれかに記載のトリテルペン誘導体または医薬的に許容される塩。

本発明の予防剤または治療剤は、一般式（Ｉ）で示すトリテルペン誘導体または医薬的に許容されるその塩を有効成分とする。これらトリテルペン誘導体は、有効量で投与することにより、優れた抗ＨＣＶ活性や優れた体内動態を示すことが可能であるため、Ｃ型慢性肝炎に対して、高い予防効果または治療効果が期待できる。また、本発明の予防剤または治療剤は、臨床上使用されているＩＦＮやリバビリンあるいは今後臨床使用される各種抗ＨＣＶ剤と組み合わせても、より良好な予防効果または治療効果が期待できる。

本発明において、「Ｃ型慢性肝炎」とは、Ｃ型肝炎ウイルスが持続的に肝臓に感染して起こる肝臓の炎症性の疾患をいい、６ヶ月以上の感染が持続しているＣ型肝炎を意味する。

本発明のトリテルペン誘導体は、優れた抗ＨＣＶ活性を発揮しうる。ここでいう抗ＨＣＶ活性は、主にＨＣＶの増殖を阻害する活性を示し、ＨＣＶを５０％増殖阻害する濃度（ＩＣ５０値）が小さいほど抗ＨＣＶ活性が強い。ＩＣ５０値が２０μＭを超える化合物は抗ＨＣＶ活性が強いとは言えず、Ｃ型慢性肝炎の予防または治療における単剤での抗ウイルス効果は小さいと考えられる。従って、本発明のトリテルペン誘導体は、好ましくは、抗ＨＣＶ活性が強いもの、すなわち、ＩＣ５０値が２０μＭ以下（例えば、１５μＭ以下、１０μＭ以下、８μＭ以下、６μＭ以下）のものである。本発明のトリテルペン誘導体の中で、抗ＨＣＶ活性が特に強いもの（ＩＣ５０値が１０μＭ以下）としては、後に示した表１の化合物の中で、化合物２〜１０、化合物１２〜１４が挙げられる。

また、本発明のトリテルペン誘導体は、好ましくは、体内動態が良好なもの、すなわち、ＡＵＣが５０μｇ・ｈｒ/ｍｌ以上（例えば、６０μｇ・ｈｒ/ｍｌ以上、７０μｇ・ｈｒ/ｍｌ以上、８０μｇ・ｈｒ/ｍｌ以上）のもの、あるいはＡＵＣが３０〜５０μｇ・ｈｒ/ｍｌであり、かつ半減期（ｔ_１／２）が１０時間以上（例えば、１１時間以上、１２時間以上、１３時間以上）のものである。本発明のトリテルペン誘導体のうち、体内動態が良好な化合物として、化合物２、１２〜１４が挙げられる。

本発明のトリテルペン誘導体において、特に強い抗ＨＣＶ活性を有し、かつ、体内動態が良好な化合物としては、化合物２、１２〜１４が挙げられる。

本発明の予防剤または治療剤における有効成分としては、一般式（Ｉ）で示すトリテルペン誘導体または医薬的に許容されるその塩が挙げられる。

本発明のトリテルペン誘導体の好ましい態様は、式（Ｉ）において、Ｒ^１がカルボキシル基であって、Ｒ^２が−ＯＲ^３を表し、Ｒ^３がヒドロキシメチル基、ジメチルアミノメチル基、フェニルアミノメチル基、モルホリノメチル基、カルボキシル基もしくはホルミル基で置換されていてもよいベンジル基、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、Ｃ_２−６アルキニル基、またはヒドロキシＣ_１−６アルキル基を表す化合物である。ここで、Ｒ^３が表す「ヒドロキシメチル基、ジメチルアミノメチル基、フェニルアミノメチル基、モルホリノメチル基、カルボキシル基もしくはホルミル基で置換されていてもよいベンジル基」は、それぞれの基で置換されている場合、その置換位置はどの位置でもよいが、４位がヒドロキシメチル基、ジメチルアミノメチル基、フェニルアミノメチル基、モルホリノメチル基、カルボキシル基、もしくはホルミル基で置換されているベンジル基が好ましい。また、Ｒ^３が表す「Ｃ_１−６アルキル基」とは、直鎖または分岐鎖状の炭素数１〜６、好ましくは炭素数１〜４のアルキル基を意味する。その具体例としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｎ−プロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔ−ブチル基などが挙げられる。その中で、好ましくはメチル基、エチル基が挙げられる。より好ましくはメチル基が挙げられる。また、Ｒ^３が表す「Ｃ_2−６アルケニル基」とは、直鎖または分岐状の炭素数２〜６、好ましくは炭素数２〜４のアルケニル基を意味する。その具体例としてはビニル基、アリル基、１−プロペニル基、イソプロペニル基、１−ブテニル基、２−ブテニル基、３−ブテニル基、２−メチル−１−プロペニル基などが挙げられる。その中でも好ましくはアリル基が挙げられる。またＲ^３が表す「Ｃ_２−６アルキニル基」とは、直鎖または分岐状の炭素数２〜６、好ましくは炭素数２〜４のアルキニル基を意味する。その具体例としては、２−プロピニル基、１−メチル−２−プロピニル基、２−ブチニル基、３−ブチニル基などが挙げられる。その中でも、好ましくは２−プロピニル基が挙げられる。また、Ｒ^３が表す「ヒドロキシＣ_１−６アルキル基」は、そのヒドロキシル基による置換位置はどの位置でもよいが、その具体例としては、ヒドロキシメチル基、ヒドロキシエチル基、２−ヒドロキシプロピル基、３−ヒドロキシプロピル基などが挙げられる。その中でも、好ましくは２−ヒドロキシプロピル基または３−ヒドロキシプロピル基が挙げられる。

本発明のトリテルペン誘導体の他の好ましい態様は、式（Ｉ）において、Ｒ^１がカルボキシル基であって、Ｒ^２が−Ｏ−（ＣＨ_２）ｍ−ＯＲ^４（ｍは１〜３の整数を表す）を表し、Ｒ^４はカルボキシル基で置換されていてもよいフェニル基を表す化合物である。ここで、Ｒ^２が表す−Ｏ−（ＣＨ_２）ｍ−ＯＲ^４において、Ｒ^４が示す「カルボキシル基で置換されていてもよいフェニル基」は、置換されている場合、その置換位置はどの位置でもよいが、好ましくは、フェニル基または４位がカルボキシル基で置換されているフェニル基である。また、好ましい整数ｍは３である。

本発明のトリテルペン誘導体の他の好ましい態様は、式（Ｉ）において、Ｒ^１がヒドロキシメチル基であって、Ｒ^２が−ＯＲ^３を表し、Ｒ^３はヒドロキシメチル基、ジメチルアミノメチル基、フェニルアミノメチル基、モルホリノメチル基、カルボキシル基もしくはホルミル基で置換されていてもよいベンジル基、Ｃ_２−６アルキニル基またはヒドロキシＣ_１−６アルキル基を表す化合物である。ここで、Ｒ^３が表す「ヒドロキシメチル基、ジメチルアミノメチル基、フェニルアミノメチル基、モルホリノメチル基、カルボキシル基もしくはホルミル基で置換されていてもよいベンジル基」は、その置換位置はどの位置でもよいが、４位がヒドロキシメチル基、ジメチルアミノメチル基、フェニルアミノメチル基、モルホリノメチル基、カルボキシル基またはホルミル基で置換されているベンジル基が好ましい。また、Ｒ^３が表す「Ｃ_２−６アルキニル基」とは、直鎖または分岐状の炭素数２〜６、好ましくは炭素数２〜４のアルキニル基を意味する。その具体例としては、２−プロピニル基、１−メチル−２−プロピニル基、２−ブチニル基、３−ブチニル基などが挙げられる。その中でも、好ましくは２−プロピニル基が挙げられる。また、Ｒ^３が表す「ヒドロキシＣ_１−６アルキル基」は、そのヒドロキシル基による置換位置はどの位置でもよいが、その具体例としては、ヒドロキシメチル基、ヒドロキシエチル基、２−ヒドロキシプロピル基、３−ヒドロキシプロピル基などが挙げられる。その中でも、好ましくは２−ヒドロキシプロピル基または３−ヒドロキシプロピル基が挙げられる。本発明のトリテルペン誘導体においては、Ｒ^１がヒドロキシメチル基であり、Ｒ^２が−ＯＲ^３であり、かつ、Ｒ^３がＣ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基またはベンジル基である場合は除かれる。

本発明のトリテルペン誘導体の他の好ましい態様は、式（Ｉ）において、Ｒ^１がヒドロキシメチル基であって、Ｒ^２が−Ｏ−（ＣＨ_２）ｍ−ＯＲ^４（ｍは１〜３の整数を表す）を表し、Ｒ^４はカルボキシル基で置換されていてもよいフェニル基を表す化合物である。ここで、Ｒ^２が表す−Ｏ−（ＣＨ_２）ｍ−ＯＲ^４において、Ｒ^４が示す「カルボキシル基で置換されていてもよいフェニル基」は、置換されている場合、その置換位置はどの位置でもよい。好ましくは、フェニル基または４位がカルボキシル基で置換されているフェニル基である。また、好ましい整数ｍは３である。

本発明のトリテルペン誘導体の他の好ましい態様は、式（Ｉ）において、Ｒ^１が−ＣＨ_２ＯＳＯ_３Ｈであって、Ｒ^２が−ＯＲ^３を表し、Ｒ^３がヒドロキシメチル基、ジメチルアミノメチル基、フェニルアミノメチル基、モルホリノメチル基、カルボキシル基もしくはホルミル基で置換されていてもよいベンジル基、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、Ｃ_２−６アルキニル基またはヒドロキシＣ_１−６アルキル基を表す化合物である。ここで、Ｒ^３が表す「ヒドロキシメチル基、ジメチルアミノメチル基、フェニルアミノメチル基、モルホリノメチル基、カルボキシル基もしくはホルミル基で置換されていてもよいベンジル基」は、それぞれの基で置換されている場合、その置換位置はどの位置でもよいが、４位がヒドロキシメチル基、ジメチルアミノメチル基、フェニルアミノメチル基、モルホリノメチル基、カルボキシル基またはホルミル基で置換されているベンジル基が好ましい。また、Ｒ^３が表す「Ｃ_１−６アルキル基」とは、直鎖または分岐鎖状の炭素数１〜６、好ましくは炭素数１〜４のアルキル基を意味する。その具体例としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｎ−プロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔ−ブチル基などが挙げられる。その中で、好ましくはメチル基、エチル基が挙げられる。より好ましくはメチル基が挙げられる。また、Ｒ^３が表す「Ｃ_2−６アルケニル基」とは、直鎖または分岐状の炭素数２〜６、好ましくは炭素数２〜４のアルケニル基を意味する。その具体例としてはビニル基、アリル基、１−プロペニル基、イソプロペニル基、１−ブテニル基、２−ブテニル基、３−ブテニル基、２−メチル−１−プロペニル基などが挙げられる。その中でも、好ましくはアリル基が挙げられる。また、Ｒ^３が表す「Ｃ_２−６アルキニル基」とは、直鎖または分岐状の炭素数２〜６、好ましくは炭素数２〜４のアルキニル基を意味する。その具体例としては、２−プロピニル基、１−メチル−２−プロピニル基、２−ブチニル基、３−ブチニル基などが挙げられる。その中でも、好ましくは２−プロピニル基が挙げられる。また、Ｒ^３が表す「ヒドロキシＣ_１−６アルキル基」は、そのヒドロキシル基による置換位置はどの位置でもよいが、その具体例としては、ヒドロキシメチル基、ヒドロキシエチル基、２−ヒドロキシプロピル基、３−ヒドロキシプロピル基などが挙げられる。その中でも、好ましくは２−ヒドロキシプロピル基または３−ヒドロキシプロピル基が挙げられる。

本発明のトリテルペン誘導体の他の好ましい態様は、式（Ｉ）において、Ｒ^１が−ＣＨ_２ＯＳＯ_３Ｈであって、Ｒ^２が−Ｏ−（ＣＨ_２）ｍ−ＯＲ^４（ｍは１〜３の整数を表す）を表し、Ｒ^４はカルボキシル基で置換されていてもよいフェニル基を表す化合物である。ここで、Ｒ^２が表す−Ｏ−（ＣＨ_２）ｍ−ＯＲ^４において、Ｒ^４が示す「カルボキシル基で置換されていてもよいフェニル基」は、置換されている場合、その置換位置はどの位置でもよい。好ましくは、フェニル基または４位がカルボキシル基で置換されているフェニル基でよい。また、好ましい整数ｍは３である。

本発明のトリテルペン誘導体の他の好ましい態様は、式（Ｉ）において、Ｒ^１が

であって、Ｒ^２が−ＯＲ^３を表し、Ｒ^３はヒドロキシメチル基、ジメチルアミノメチル基、フェニルアミノメチル基、モルホリノメチル基、カルボキシル基もしくはホルミル基で置換されていてもよいベンジル基、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、Ｃ_２−６アルキニル基またはヒドロキシＣ_１−６アルキル基を表す化合物である。ここで、Ｒ^３が表す「ヒドロキシメチル基、ジメチルアミノメチル基、フェニルアミノメチル基、モルホリノメチル基、カルボキシル基もしくはホルミル基で置換されていてもよいベンジル基」は、それぞれの基で置換されている場合、その置換位置はどの位置でもよいが、４位がヒドロキシメチル基、ジメチルアミノメチル基、フェニルアミノメチル基、モルホリノメチル基、カルボキシル基またはホルミル基で置換されているベンジル基が好ましい。また、Ｒ^３が表す「Ｃ_１−６アルキル基」とは、直鎖または分岐鎖状の炭素数１〜６、好ましくは炭素数１〜４のアルキル基を意味する。その具体例としては、メチル基、エチル基、プロピル基、イソプロピル基、ｎ−プロピル基、ｎ−ブチル基、イソブチル基、ｔ−ブチル基などが挙げられる。その中で、好ましくはメチル基、エチル基が挙げられる。より好ましくはメチル基が挙げられる。また、Ｒ^３が表す「Ｃ_2−６アルケニル基」とは、直鎖または分岐状の炭素数２〜６、好ましくは炭素数２〜４のアルケニル基を意味する。その具体例としてはビニル基、アリル基、１−プロペニル基、イソプロペニル基、１−ブテニル基、２−ブテニル基、３−ブテニル基、２−メチル−１−プロペニル基などが挙げられる。その中でも、好ましくはアリル基が挙げられる。また、Ｒ^３が表す「Ｃ_２−６アルキニル基」とは、直鎖または分岐状の炭素数２〜６、好ましくは炭素数２〜４のアルキニル基を意味する。その具体例としては、２−プロピニル基、１−メチル−２−プロピニル基、２−ブチニル基、３−ブチニル基などが挙げられる。その中で、好ましくは２−プロピニル基が挙げられる。また、Ｒ^３が表す「ヒドロキシＣ_１−６アルキル基」は、そのヒドロキシル基による置換位置はどの位置でもよいが、その具体例としては、ヒドロキシメチル基、ヒドロキシエチル基、２−ヒドロキシプロピル基、３−ヒドロキシプロピル基などが挙げられる。その中で、好ましくは２−ヒドロキシプロピル基または３−ヒドロキシプロピル基が挙げられる。

本発明のトリテルペン誘導体の他の好ましい態様は、式（Ｉ）において、Ｒ^１が

であって、Ｒ^２が−Ｏ−（ＣＨ_２）ｍ−ＯＲ^４（ｍは１〜３の整数を表す）を表し、Ｒ^４はカルボキシル基で置換されていてもよいフェニル基を表す化合物である。ここで、Ｒ^２が表す−Ｏ−（ＣＨ_２）ｍ−ＯＲ^４において、Ｒ^４が示す「カルボキシル基で置換されていてもよいフェニル基」は、置換されている場合、その置換位置はどの位置でもよい。好ましくは、フェニル基または４位がカルボキシル基で置換されているフェニル基でよい。また、好ましい整数ｍは３である。

式（Ｉ）の化合物には、種々の異性体が存在するが、本発明はその異性体およびそれらの混合物のいずれをも包含するものである。また、式（Ｉ）中の他の基に起因する異性体の存在も考えられるが、これらの異性体およびその混合物も本発明に包含されるものである。

本発明のトリテルペン誘導体は、好ましくは、下記の式（Ｉ−１）で表される立体配置を有するものである。式（Ｉ−１）のＲ^１およびＲ^２の定義は、上記の場合と同じである。

さらに、本発明における式（Ｉ）のトリテルペン誘導体の具体例としては、表１に示される置換基の組み合わせを有する化合物が挙げられるが、本発明はこれらの化合物に限定されるものではない。

本発明の一般式（Ｉ）で表されるトリテルペン誘導体の好ましい製造法は、次の通りである。なお、以下の製造法において、反応に関与しない官能基は保護されていることが望ましく、官能基の保護のための保護基としては公知のものを利用することができる。これら事実は、当業者には明らかである。

＜方法（Ａ）＞
一般式（Ｉ）で示されるトリテルペン誘導体のうち、式（Ｉａ）の化合物は、下 記の方法により製造することができる。

まず、第一工程において、式（ＩＩ）の化合物（Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，３６．１５３（１９８８）に記載の方法により合成可能）と、式（ＩＩＩ）の化合物（式中、ＸおよびＹはハロゲン原子であり、同一または異なっていてもよい)とを、塩基存在下で反応させることにより、式（ＩＶ）の化合物を製造する。反応は、反応に関与しない溶媒（例えば、クロロホルム、ジクロロメタン、ジエチルエーテル、ＴＨＦ、ベンゼン、トルエン、ＤＭＦ、ＤＭＳＯなどの単独あるいは混合溶媒）中において、−７８℃〜１００℃の範囲の温度で実施される。使用可能な塩基としては、例えばピリジン、トリエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、水素化ナトリウム、水素化カリウム、ｎ−ブチルリチウム、ＮａＣＨ_２ＳＯＣＨ_３、ｔｅｒｔ−ＢｕＯＫ、ｔｅｒｔ−ＢｕＯＮａなどが挙げられる。塩基および式（ＩＩＩ）の化合物は、式（ＩＩ）の化合物に対して１〜１０当量の範囲で用いられることが望ましい。

次に、第二工程において、式（ＩＶ）の化合物を適当な塩基で処理しハロゲン−メタル交換反応を行った後に、ＤＭＦと反応させることにより化合物（Ｖ）を製造する。反応は反応に関与しない溶媒（例えば、テトラヒドロフラン、ジエチルエーテル、１，４−ジオキサン、アニソール、ジメトキシエタン、ジクロロメタン、トルエンなどの単独あるいは混合溶媒）中において、−７８℃〜３０℃の範囲の温度で実施される。使用可能な塩基としては、例えばｎ−ブチルリチウム、ｓｅｃ−ブチルリチウム、ｔｅｒｔ−ブチルリチウム、エチルマグネシウムブロマイド、イソプロピルマグネシウムブロマイドなどが挙げられる。塩基およびＤＭＦは、式（ＩＶ）の化合物に対して１〜１０当量の範囲で用いられることが望ましい。

次に、第三工程において、式（Ｖ）で表される化合物を、酸存在下、加水分解反応することにより式（Ｉａ）で表される化合物を製造することができる。この反応に用いられる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、水、ジクロロメタン、クロロホルム、またはＴＨＦなどの単独ああるいは混合溶媒などが挙げられる。酸としては、例えば、塩酸および硫酸などの鉱酸、またはＢＦ_３・ＯＥｔ_２などのルイス酸などが挙げられる。反応は、０℃〜１００℃の範囲の温度で実施される。

＜方法（Ｂ）＞
一般式（Ｉ）で示されるトリテルペン誘導体のうち、式（Ｉｂ）の化合物は、まず、第一工程において、式（Ｖ）の化合物を適当な還元剤と反応させ、次いで、第二工程において、加水分解反応を行うことにより製造することができる。

第一工程に用いる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、ＴＨＦ、クロロホルム、ジクロロメタンなどの単独あるいは混合溶媒などが挙げられる。反応は、−４０℃〜３０℃の範囲の温度で実施される。また、還元剤としては、水素化リチウムアルミニウム、水素化ホウ素ナトリウム、水素化ホウ素リチウムなどが挙げられ、式（Ｖ）の化合物に対して１〜１０当量の範囲で用いられることが望ましい。第二工程は、上記方法（Ａ）の第三工程に記載の方法に従って行うことができる。

＜方法（Ｃ）＞
一般式（Ｉ）で示されるトリテルペン誘導体のうち、式（Ｉｃ）の化合物（式中、Ｒ^３ｃはジメチルアミノメチル基、フェニルアミノメチル基またはモルホリノメチル基で置換されているベンジルである）は、まず、第一工程において、式（Ｖ）の化合物を、通常の還元的アミノアルキル化反応の方法に従って反応させ、次いで、第二工程において、加水分解反応を行うことにより製造することができる。

まず、第一工程において、式（Ｖ）の化合物と、式（ＶＩ）の化合物（式中、ＨＮＲ⁵Ｒ⁶は、ジメチルアミン、アニリンまたはモルホリンである）とを、通常の還元的アミノアルキル化反応の方法に従って反応させる。式（Ｖ）の化合物に対して１当量または過剰量の式（ＶＩ）の化合物を用い、１当量または過剰量の酸（例えば、酢酸、トリフルオロ酢酸など）の存在下、不活性溶媒（例えば、１、２-ジクロロエタン、ジクロロメタンなど）中で０℃〜５０℃で反応させシッフ塩基とし、これに還元剤（例えば、水素化ホウ素ナトリウム、水素化シアノホウ素ナトリウム、水素化トリアセトキシホウ素ナトリウムなど）を加え、０℃〜５０℃において反応させる。還元剤は、式（Ｖ）の化合物に対して１〜１０当量の範囲で用いられることが望ましい。第二工程は、上記方法（Ａ）の第三工程に記載の方法に従って行うことができる。

＜方法（Ｄ）＞
一般式（Ｉ）で示されるトリテルペン誘導体のうち、式（Ｉｄ）の化合物は、まず、第一工程において、式（Ｖ）の化合物を、通常の酸化反応の方法に従って反応させ、次いで、第二工程において、加水分解反応を行うことにより製造することができる。

第一工程の酸化反応に使用可能な酸化剤としては、ピリジニウムダイクロメート、Ｊｏｎｅｓ試薬、過マンガン酸カリウム、亜塩素酸ナトリウムなどが挙げられ、式（Ｖ）の化合物に対して１〜３０当量の範囲で用いられることが好ましい。酸化反応は、反応に関与しない溶媒（例えば、ＤＭＦ、ｔｅｒｔ−ブタノール、アセトン、水など）中で、０℃〜６０℃の範囲の温度で実施される。第二工程は、上記方法（Ａ）の第三工程に記載の方法に従って行うことができる。

＜方法（Ｅ）＞
一般式（Ｉ）で示されるトリテルペン誘導体のうち、式（Ｉｅ）の化合物（式中、Ｒ^３ｅはＣ_２−６アルキニル基である）は、下記の方法により製造することができる。

まず、第一工程において、式（ＩＩ）の化合物と、式（ＶＩＩ）の化合物：Ｒ^３ｅＹ（式中、Ｒ^３ｅは前記と同義であり、Ｙはハロゲン原子である)とを、塩基存在下で反応させることにより、式（ＶＩＩＩ）の化合物を製造する。反応は、反応に関与しない溶媒（例えば、クロロホルム、ジクロロメタン、ジエチルエーテル、ＴＨＦ，ベンゼン、トルエン、ＤＭＦ、ＤＭＳＯなどの単独あるいは混合溶媒）中において、−７８℃〜１００℃の範囲の温度で実施される。使用可能な塩基としては、例えば、ピリジン、トリエチルアミン、４−ジメチルアミノピリジン、水素化ナトリウム、水素化カリウム、ｎ−ブチルリチウム、ＮａＣＨ_２ＳＯＣＨ_３、ｔｅｒｔ−ＢｕＯＫ、ｔｅｒｔ−ＢｕＯＮａなどが挙げられる。塩基および式（ＶＩＩ）の化合物は、式（ＩＩ）の化合物に対して１〜１０当量の範囲で用いられることが望ましい。第二工程は、上記方法（Ａ）の第三工程に記載の方法に従って行うことができる。

＜方法（Ｆ）＞
一般式（Ｉ）で示されるトリテルペン誘導体のうち、化合物５および化合物７は、下記の方法により製造することができる。

まず、第一工程において、式（ＩＸ）の化合物（日本特許第３２７９５７４号の明細書に記載の方法により合成可能）を、ハイドロボレーョン反応の試薬と反応させ、次いで、酸化することにより、式（Ｘ）と式（ＸＩ）の化合物を得る。ハイドロボレーション試剤としては、例えば、ＢＨ_３−ＴＨＦ、テキシルボラン、９−ボラビシクロ（３，３，１）ノナンなどが挙げられる。この反応試剤は、式(ＩＸ)の化合物に対して１〜１０当量の範囲で用いられることが好ましい。反応は、反応に関与しない溶媒（例えば、ジエチルエーテル、ＴＨＦなど）中で、０℃〜５０℃範囲の温度で実施される。また、酸化反応は、上記反応液に酸化剤（例えば水酸化ナトリウム、３０％過酸化水素水）を加え、０℃〜４０℃の範囲の温度で実施される。第二工程は、上記方法（Ａ）の第三工程に記載の方法に従って行うことができる
＜方法（Ｇ）＞
一般式（Ｉ）で示されるトリテルペン誘導体のうち、式（Ｉｇ）の化合物（式中、Ｒ^４およびｍは前記と同義である）は、下記の方法により製造することができる。

まず、第一工程において、式（ＸＩＩ）の化合物（上記方法Ｆなどにより合成可能）と、式（ＸＩＩＩ）の化合物（式中、Ｒ^７は水素原子またはカルボン酸のメチルエステルである)とを、通常の光延反応の方法に従って反応させる。即ち、式（ＸＩＩ）の化合物に対して１当量または過剰量の式（ＸＩＩＩ）の化合物を用い、１当量または過剰量のホスフィン試薬（例えば、トリフェニルホスフィン）と１当量または過剰量のアゾ系試薬（例えば、ジエチルアゾジカルボキシレート、１，１’−（アゾジカルボニル）ジピペリジンなど）の存在下、反応に関与しない溶媒（例えば、ＴＨＦ、ジクロロメタン、トルエン、ベンゼンなど）中で、０℃〜５０℃にて反応させる。

第二工程は、Ｒ^７が水素原子の場合、上記方法（Ａ）の第三工程に記載の方法に従って行うことができる。また、Ｒ^７がカルボン酸のメチルエステルの場合、第二工程においては、まず、塩基によるメチルエステル部の加水分解反応を行った後、続けて酸存在下による加水分解反応を行う。ここでの塩基によるメチルエステルの加水分解反応は、１当量から過剰量の塩基（例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、水酸化バリウム、ｔｅｒｔ−ＢｕＯＫなど）を、極性溶媒（例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、水などの単独あるいは混合溶媒）中で０℃〜１００℃の範囲の温度で反応させることにより実施される。続けて行われる酸存在下による加水分解反応は、メチルエステルの加水分解が終了した反応系中に、ワンポットで酸（塩酸および硫酸などの鉱酸、またはＢＦ_３・ＯＥｔ_２などのルイス酸など）を、反応系が酸性になるまで、加えることにより行う。また、その際の反応は、０℃〜１００℃の範囲の温度で実施される。

＜方法（Ｈ）＞
一般式（Ｉ）で示されるトリテルペン誘導体のうち、式（Ｉｈ）の化合物（式中、Ｒ^３ｈはＣ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基またはＣ_２−６アルキニル基、またはベンジルである）は、下記の方法により製造することができる。

まず、第一工程において、式（ＸＩＶ）の化合物（日本特許第３２７９５７４号の明細書あるいは、日本特許第３７２７３５３号の明細書、あるいはＢｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１３，４９００（２００５）に記載の方法などにより合成可能）を酸化することにより、式（ＸＶ）の化合物に変換する。使用可能な酸化剤としては、(1)ピリジニウムクロロメート、(2)ピリジニウムダイクロメート、(3)二酸化マンガン、(4)テトラ−ｎ−プロピルアンモニウムペルルテナートとＮ−メチルモルホリン−Ｎ−オキサイドの組合せ、(5)ジメチルスルホキサイド（ＤＭＳＯ)とオギザリルクロライドの組合せなどのＤＭＳＯ酸化試剤、などが挙げられる。酸化剤は、式（ＸＩＶ）の化合物に対して２−１０当量の範囲で用いることが好ましい。酸化反応は、反応に関与しない溶媒（例えば、ジクロロメタン、クロロホルム、ジエチルエーテル、ＴＨＦなど）中において、−７８℃〜４０℃の範囲の温度で実施できる。

次いで、第二工程において、式（ＸＶ）の化合物を酸化した後、生じたカルボン酸を、第三工程において、通常の保護基で保護することにより、式（ＸＶＩ）の化合物（ここでＰＧ^１は、カルボキシル基の通常の保護基を表す。ここでカルボキシル基の通常の保護基とは、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｔｈｅｏｄｏｒａ Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ，Ｐｅｔｅｒ Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ著、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．出版）に記載のものを示すものであり当業者においては周知である。さらに好ましくは、ＰＧ^１はメチル、エチル、ベンジル基などが挙げられる。）に変換する。第二工程の酸化反応に使用可能な酸化剤としては、ピリジニウムダイクロメート、Ｊｏｎｅｓ試薬、過マンガン酸カリウム、亜塩素酸ナトリウムなどが挙げられ、式（ＸＶ）の化合物に対して１〜３０当量の範囲で用いられることが好ましい。酸化反応は、反応に関与しない溶媒（例えば、ＤＭＦ、ｔｅｒｔ−ブタノール、アセトン、水などの単独あるいは混合溶媒）中で、０℃〜６０℃の範囲の温度で実施される。第三工程のカルボン酸の保護の条件は、用いる保護基の種類によって異なる。保護は、例えば、ＰＧ^１がメチル、エチル、ベンジルの場合、式（ＸＶ）の化合物に対して１当量から１０当量のＰＧ^１Ｙ（ここでＹはハロゲン原子である）を用い、１当量から過剰量の塩基（例えば、炭酸カリウム、炭酸ナトリウム、炭酸セシウム、水素化ナトリウムなど）の存在下、反応に関与しない溶媒（例えば、トルエン、ベンゼン、ＴＨＦ、ＤＭＦ、ＤＭＳＯなど）中で室温〜１００℃の範囲の温度で反応させることにより実施できる。また、ＰＧ^１がメチルの場合、式（ＸＶ）の化合物に対して１当量〜１０当量のトリメチルシリルジアゾメタンを用い、非極性溶媒とアルコール溶媒との混合溶媒（例えば、トルエンとメタノール、ベンゼンとメタノールなど）中で０℃〜５０℃の範囲の温度で反応させることにより実施できる。

次いで、第四工程において、式（ＸＶＩ）を通常の還元反応で還元し、式（ＸＶＩＩ）の化合物へと変換する。還元反応に用いる溶媒としては、例えば、メタノール、エタノール、ＴＨＦ、クロロホルム、ジクロロメタンなどの単独あるいは混合溶媒などが挙げられる。反応温度としては、−７８℃〜３０℃の範囲の温度で実施される。また、還元剤としては、水素化リチウムアルミニウム、水素化ホウ素ナトリウム、水素化ホウ素リチウム、水素化ジイソブチルアルミニウムなどが挙げられ、式（ＸＶＩ）の化合物に対して１〜１０当量の範囲で用いられることが望ましい。

次いで、第五工程において、式（ＸＶＩＩ）の化合物のＰＧ^１を、通常のカルボキシル基の保護基の脱保護の条件によって除去し、式（Ｉｈ）の化合物を製造する。この際、保護基の除去のための脱保護条件は、用いた保護基の種類によって異なる。脱保護は、例えば、ＰＧ^１がメチル、エチル、ベンジルの場合、１当量から過剰量の塩基（例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、水酸化バリウム、ｔｅｒｔ−ＢｕＯＫなど）を用い、極性溶媒（例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、水などの単独あるいは混合溶媒）中で０℃から１００℃の範囲の温度で反応させることにより実施される。また、ＰＧ^１がベンジルの場合、０．１〜０．５当量の触媒（例えば、パラジウム炭素、パラジウム黒、水酸化パラジウムなど）を用い、接触還元することにより実施することができる。反応は、反応に関与しない溶媒（例えば、メタノール、エタノール、ＴＨＦ、ジオキサン、ジクロロメタン、クロロホルム、水）中において、通常１〜４気圧の水素雰囲気下、室温において実施することができる。

＜方法（Ｉ）＞
一般式（Ｉ）で示されるトリテルペン誘導体のうち、式（Ｉｉ）の化合物（式中、Ｒ^３ｉはＣ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基またはＣ_２−６アルキニル基である）は、下記の方法によっても製造することができる。

まず、第一工程において式（ＸＶＩＩＩ）の化合物を、方法（Ｈ）の第一工程に記載の方法により酸化し、式（ＸＩＸ）の化合物へと変換する。式（ＸＶＩＩＩ）の化合物において、ＰＧ^２は水酸基の通常の保護基を表す。「水酸基の通常の保護基」とは、Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｔｈｅｏｄｏｒａ Ｗ．Ｇｒｅｅｎｅ，Ｐｅｔｅｒ Ｇ．Ｍ．Ｗｕｔｓ著、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．出版）に記載のものを示し、当業者に周知である。この反応において、ＰＧ^２は、好ましくはベンジルである。式（ＸＶＩＩＩ）の化合物は、日本特許第３２７９５７４号の明細書あるいは、日本特許第３７２７３５３号の明細書、あるいはＢｉｏｏｒｇａｎｉｃ＆Ｍｅｄｉｃｉｎａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ，１３，４９００（２００５）に記載の方法などにより合成可能である。

次いで、第二工程において、方法（Ｈ）の第二工程に記載の方法により酸化して式（ＸＸ）の化合物へと変換する。

次いで、第三工程において、通常の水酸基の保護基の脱保護の条件によって保護基を除去し、式（Ｉｉ）の化合物を製造する。第三工程の水酸基の保護基の除去のための脱保護の条件は用いた保護基の種類によって異なる。脱保護は、例えば、ＰＧ^２がベンジルの場合、０．１〜０．５当量の触媒（例えば、パラジウム炭素、パラジウム黒、水酸化パラジウムなど）を用い、接触還元することにより実施することができる。反応は、反応に関与しない溶媒（例えば、メタノール、エタノール、ＴＨＦ、ジオキサン、ジクロロメタン、クロロホルム、水）中において、通常１〜４気圧の水素雰囲気下、室温において実施することができる。

＜方法（Ｊ）＞
一般式（Ｉ）で示されるトリテルペン誘導体のうち、式（Ｉｊ）の化合物（式中、Ｒ^３ｉは前記と同義である）は、下記の方法によっても製造することができる。

まず、第一工程において、式（ＸＶＩＩＩ）の化合物（式中、ＰＧ^２は前記と同義であり、この反応において好ましくはベンジルである）と、１当量または過剰量のクロルスルホン酸を、反応に関与しない溶媒（例えば、ＴＨＦ、ジオキサン、ジクロロメタン、トルエン、ベンゼンなど）中で−２０℃〜５０℃の範囲の温度において反応させる。

次いで、第二工程において、通常の水酸基の保護基の脱保護の条件によって保護基を除去し、式（Ｉｊ）の化合物を製造する。第二工程の水酸基の保護基の除去のための脱保護の条件は用いた保護基の種類によって異なる。脱保護は、例えば、ＰＧ^２がベンジルの場合、０．１〜０．５当量の触媒（例えば、パラジウム炭素、パラジウム黒、水酸化パラジウムなど）を用い、接触還元することにより実施することができる。反応は、反応に関与しない溶媒（例えば、メタノール、エタノール、ＴＨＦ、ジオキサン、ジクロロメタン、クロロホルム、水などの単独あるいは混合溶媒）中において、通常１〜４気圧の水素雰囲気下、室温において実施することができる。

＜方法（Ｋ）＞
一般式（Ｉ）で示されるトリテルペン誘導体のうち、式（Ｉｋ）の化合物（式中、Ｒ^３ｉは前記と同義である）は、下記の方法によっても製造することができる。

まず、第一工程において、式（ＸＶＩＩＩ）の化合物（式中、ＰＧ^２は前記と同義であり、この反応において好ましくはベンジルである）を、通常のグリコシル化反応の条件において、式（ＸＸＩ）の化合物と反応させる。この第一工程は、式（ＸＶＩＩＩ）の化合物に対して１当量または過剰量の式（ＸＸＩ）の化合物を用い、１当量または過剰量のブロモ糖の活性化剤（例えば、銀トリフラート、炭酸銀など）の存在下、不活性溶媒（例えば、１、２-ジクロロエタン、ジクロロメタン、ベンゼン、トルエンなど）中で０℃〜１００℃の範囲の温度にて反応させることにより実施される。

次いで、第二工程において、塩基を用いてアセチル基とメチルエステル部の加水分解反応を行う。この第二工程は、１当量から過剰量の塩基（例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム、水酸化バリウム、ｔｅｒｔ−ＢｕＯＫなど）の存在下、極性溶媒（例えば、メタノール、エタノール、プロパノール、水などの単独あるいは混合溶媒）中で０℃〜１００℃の範囲の温度で反応させることにより実施される。

次いで、第三工程において、通常の水酸基の保護基の脱保護の条件によって保護基を除去し、式（Ｉｋ）の化合物を製造する。第三工程の水酸基の保護基の除去のための脱保護の条件は、用いた保護基の種類によって異なる。脱保護は、例えば、ＰＧ^２がベンジルの場合、０．１〜０．５当量の触媒（例えば、パラジウム炭素、パラジウム黒、水酸化パラジウムなど）を用い、接触還元することにより実施することができる。反応は、反応に関与しない溶媒（例えば、メタノール、エタノール、ＴＨＦ、ジオキサン、ジクロロメタン、クロロホルム、水）中において、通常１〜４気圧の水素雰囲気下、室温において実施することができる。

上記（Ｉ）で表される本発明のトリテルペン誘導体は、塩として存在することができる。本発明のトリテルペン誘導体に対して、通常の方法に従って製薬学的に許容される塩基を作用させることにより、容易に塩とすることができる。塩基としては、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化アルミニウム、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム、炭酸水素ナトリウムなどの無機塩基、あるいはピペラジン、モルホリン、ピペリジン、エチルアミン、トリメチルアミンなどの有機塩基を使用することができる。

本発明のトリテルペン誘導体は、Ｃ型慢性肝炎の予防剤または治療剤として用いることができる。本発明の予防剤または治療剤は、例えば、カプセル剤、マイクロカプセル剤、錠剤、顆粒剤、細粒剤、粉末などの剤形として、経口投与することができる。また、慣用の医薬製剤の形で非経口（例えば、静注、筋注、皮下投与、腹腔内投与、直腸投与、経皮投与）投与することもできる。上記の剤形には、医薬的に許容される担体を添加することができる。医薬的に許容される担体として、例えば、賦形剤、増量剤、結合剤、湿潤化剤、崩壊剤、表面活性剤、滑沢剤、分散剤、緩衝剤、保存剤、溶解補助剤、防腐剤、矯味矯臭剤、無痛化剤、安定化剤などの医薬品添加剤が挙げられる。各剤形は常法により製造することができる。具体的な添加剤としては、例えば、乳糖、果糖、ブドウ糖、でん粉、ゼラチン、炭酸マグネシウム、合成ケイ酸マグネシウム、タルク、ステアリン酸マグネシウム、結晶セルロース、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースまたはその塩、アラビアゴム、ポリエチレングリコール、シロップ、ワセリン、グレセリン、エタノール、プロピレングリコール、クエン酸、塩化ナトリウム、亜硫酸ソーダ、リン酸ナトリウムなどが挙げられる。

本発明の予防剤または治療剤の剤形、投与方法、投与量、投与期間、投与経路などは、例えば、患者の体重、年齢、症状の程度、患者におけるウイルス量などによって適宜設定することができる。本発明の予防剤または治療剤は、例えば、１日１〜１０００ｍｇを１回あるいは複数回に分けて、経口または非経口投与される。投与量は、好ましくは、１日５〜５００ｍｇである。

本発明の予防剤または治療剤は、場合によりＩＦＮやリバビリンなどの抗ウイルス効果を有する他の薬剤との組み合わせで用いる（即ち、併用する）ことができる。本発明の予防剤または治療剤と他の薬剤との組み合わせにおいては、それぞれ単独製剤の形態であってもよく、双方の薬剤の有効成分を含む１剤系の薬剤であってもよい。それぞれ単独製剤の形態である場合には、各薬剤は、同時にまたは時間差をおいて投与することができ、各薬剤の投与回数は同じであっても、異なっていてもよい。

本発明の予防剤または治療剤において、併用される「インターフェロン」としては、天然型ＩＦＮα（スミフェロン：大日本住友製薬社製など）、ＩＦＮα−２ａ、ＩＦＮα−２ｂ（イントロンＡ:シェリング・プラウ社製）、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）化天然型ＩＦＮα、ＰＥＧ化ＩＦＮα−２ａ（ペガシス:ロシュ社製・中外製薬社製）、ＰＥＧ化ＩＦＮα−２ｂ（ペグイントロンＡ:シェリング・プラウ社製）、天然型ＩＦＮβ（ＩＦＮβモチダ：持田製薬社製、フェロン：東レ社製）、ＰＥＧ化ＩＦＮβ、天然型ＩＦＮγ、コンセンサスＩＦＮ（アドバフェロン：アステラス製薬社製など）もしくはＰＥＧ化コンセンサスＩＦＮ、長時間型ＩＦＮなどの治療に用いられるＩＦＮ誘導体が挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、ＩＦＮα２ｂまたはＩＦＮα２ａである。これらＩＦＮは、好ましくは、ＰＥＧ化されたものである。

ＩＦＮは、通常、皮下、静脈内、または筋肉内に投与される。しかしながら、他の非経口的方法（例えば、鼻スプレー、経皮、坐薬などによる）を用いることも考えられる。また、経口用ＩＦＮのように、経口的方法で効果があるＩＦＮを用いる場合には、経口投与も考えられる。

併用剤における、各有効成分の比率（使用比率あるいは配合比率）は、Ｃ型慢性肝炎症例の予防または治療に有効であれば、特に制限はない。例えば、通常、ＩＦＮの有効用量に対して、本発明のトリテルペン誘導体は、１日１ｍｇ〜１０００ｍｇの範囲内から、適宜、用量が決められる。本発明のトリテルペン誘導体の用量は、１日５ｍｇ〜５００ｍｇの範囲が好ましい。本発明の予防剤または治療剤と他薬剤との組み合わせにおける、適切な投与量や投与間隔は、制御された臨床試験により決定され得る。

以下、実施例によって本発明を具体的に説明するが、これらの実施例は本発明の範囲を限定するものではない。

下記に示す表２に記載の化合物を合成した。なお、比較対象の化合物１７は日本国特許第３２７９５７４号の明細書に記載の方法により合成した。

[実施例１] ２２β−（４−カルボキシベンジルオキシ）オレアン−１２−エン−３β，２４−ジオール（化合物１）の製造方法
（ステップ１）
２２β−（４−ヨードベンジルオキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン

２２β−ヒドロキシ−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン１．５７４ｇ（Ｃｈｅｍ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．，３６．１５３（１９８８）に記載の方法により合成）をＤＭＦ２３ｍｌに溶解し、６０％水素化ナトリウム６３６ｍｇを加え、室温で１５分間撹拌した。テトラ−Ｎ−ブチルアンモニウムヨージド１．１６７ｇと、４−ヨードベンジルブロミド１．８９１ｇを加え、７０℃に加熱し、１時間撹拌した。さらに４−ヨードベンジルブロミド１．８９１ｇを加え１０分撹拌した後、室温まで冷却し、飽和塩化アンモニウム水溶液で反応を停止した。反応溶液を酢酸エチルで希釈後、飽和食塩水で３回洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。無機塩を濾別し、溶媒を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝４９：１）で精製し、ステップ１の表題化合物を１．５３５ｇ（収率 ６８％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.89(3H,s),0.92(3H,s),0.99(3H,s),1.03(3H,s),1.12(3H,s),1.15(3H,s),1.22(3H,s),1.38(3H,s),1.44(3H,s),0.87-2.18(21H,m),3.05(1H,dd,J=2.9,6.1Hz),3.23(1H,d,J=11.6Hz),3.46(1H,dd,J=4.6,9.3Hz),4.05(1H,d,J=11.6Hz),4.25(1H,d,J=12.0Hz),4.55(1H,d,J=12.0Hz),5.24(1H,t-like),7.07-7.10(2H,m),7.62-7.66(2H,m).
MS FAB(m/z):715(M⁺+1)
（ステップ２）
２２β−（４−ホルミルベンジルオキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン

２２β−（４−ヨードベンジルオキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン５０６ｍｇをＴＨＦ７．１ｍｌに溶解し、−７８℃に冷却した。ｎ−ブチルリチウム（２．７７Ｍ ヘキサン溶液）０．３１ｍｌを加え、５分間撹拌した後、ＤＭＦ０．２７ｍｌを加えた。−７８℃で２０分撹拌後、−４０℃へ１５分かけて昇温した。反応を飽和塩化アンモニウム水で停止し、反応溶液を酢酸エチルで希釈後、水、飽和食塩水で順次洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、無機塩を濾別し、溶媒を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝４９：１〜１９：１）で精製し、ステップ２の表題化合物を１８６ｍｇ（４２％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.91(3H,s),0.96(3H,s),1.00(3H,s),1.05(3H,s),1.13(3H,s),1.16(3H,s),1.22(3H,s),1.38(3H,s),1.44(3H,s),0.83-2.05(20H,m),2.19(1H,m),3.10(1H,dd,J=2.9,6.1Hz),3.23(1H,d,J=11.5Hz),3.45(1H,dd,J=4.7,9.5Hz),4.07(1H,d,J=11.5Hz),4.40(1H,d,J=12.9Hz),4.70(1H,d,J=12.9Hz),5.26(1H,t-like),7.50(2H,d,J=8.1Hz),7.84(2H,d,J=8.1Hz),10.0(1H,s).
MS FAB(m/z):617(M⁺+1)
（ステップ３）
２２β−（４−カルボキシベンジルオキシ）オレアン−１２−エン−３β，２４−ジオール（化合物１）

２２β−（４−ホルミルベンジルオキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン１８６ｍｇをｔｅｒｔ−ブタノール３ｍｌとＴＨＦ１ｍｌの混液に溶解し、２−メチル−２−ブテン０．３２ｍｌを加えた。この溶液に、リン酸二水素ナトリウム・二水和物１４３ｍｇと亜塩素酸ナトリウム８３ｍｇの水０．７５ｍｌ溶液をゆっくり加え、室温で１．５時間撹拌した。反応溶液をクロロホルムで希釈後、1規定塩酸水溶液と飽和食塩水の混液で洗浄した。水層からクロロホルムで再抽出し、併せた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、無機塩を濾別し、溶媒を減圧濃縮した。得られた残渣をＴＨＦ５ｍｌと水１ｍｌの混液に溶解し、1規定塩酸水溶液０．３ｍｌを加えた。溶液を室温で３０分間撹拌後、飽和食塩水で希釈し、クロロホルムで３回抽出した。併せた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、無機塩を濾別し、溶媒を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、クロロホルム：メタノール＝４９：１〜９７：３）で精製し、化合物１を１４５ｍｇ（収率８１％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.89(3H,s),0.90(3H,s),0.95(6H,s),1.04(3H,s),1.12(3H,s),1.25(3H,s),0.79-2.20(21H,m),3.09(1H,m),3.36(1H,d,J=11.2Hz),3.45(1H,dd,J=4.4,11.7Hz),4.22(1H,d,J=11.2Hz),4.38(1H,d,J=12.8Hz),4.68(1H,d,J=12.8Hz),5.24(1H,t-like),7.44(2H,d,J=7.9Hz),8.06(2H,d,J=7.9Hz).
MS ES(m/z):593(M⁺+1)
[実施例２] ２２β−（２−プロピニルオキシ）オレアン−１２−エン−３β，２４−ジオール（化合物２）の製造方法
（ステップ１）
２２β−（２−プロピニルオキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン

２２β−ヒドロキシ−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン２０３ｍｇをＤＭＦ４ｍｌに溶解し、６０％水素化ナトリウム１６２ｍｇを加え、室温で１５分間撹拌した。テトラ−Ｎ−ブチルアンモニウムヨージド１５１ｍｇと、プロパルギルブロミド０．３１ｍｌを加え、室温で３日間撹拌した。水で反応を停止し、反応溶液を酢酸エチルで希釈後、セライトを用いて不溶物を濾去した。濾液を飽和塩化アンモニウム水溶液で洗浄し、有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。無機塩を濾別し、溶媒を減圧濃縮後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝４９：１）で精製し、ステップ１の表題化合物を３１ｍｇ（収率１４％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.88(3H,s),0.91(3H,s),0.99(3H,s),1.01(3H,s),1.12(3H,s),1.16(3H,s),1.22(3H,s),1.38(3H,s),1.44(3H,s),0.82-2.19(21H,m),2.35(1H,t,J=2.4Hz),3.18(1H,dd,J=3.2,6.6Hz),3.23(1H,d,J=11.5Hz),3.46(1H,dd,J=4.4,9.3Hz),4.04(1H,d,J=11.5Hz),4.06(1H,dd,J=2.4,16.1Hz),4.19(1H,dd,J=2.4,16.1Hz),5.24(1H,t-like).
MS FAB(m/z):559(M+Na)⁺
（ステップ２）
２２β−（２−プロピニルオキシ）オレアン−１２−エン−３β，２４−ジオール（化合物２）

２２β−（２−プロピニルオキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン１７９ｍｇをクロロホルム１．８ｍｌとメタノール１．８ｍｌの混液に溶解し、１規定塩酸水溶液９０μｌを加え、室温で２０分撹拌した。反応を飽和重曹水で停止し、反応溶液をクロロホルムで希釈後、飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、無機塩を濾別し、溶媒を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝４：１〜７：３）で精製し、化合物２を１２５ｍｇ（収率７５％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.87(3H,s),0.89(3H,s),0.90(3H,s),0.94(3H,s),1.00(3H,s),1.11(3H,s),1.25(3H,s),0.83-1.88(20H,m),2.11(1H,m),2.34(1H,dd,J=4.2,11.0Hz),2.35(1H,t,J=2.4Hz),2.68(1H,m),3.18(1H,dd,J=3.2,6.8Hz),3.35(1H,m),3.44(1H,m),4.06(1H,dd,J=2.4,15.8Hz),4.17(1H,dd,J=2.4,15.8Hz),4.22(1H,m),5.22(1H,t-like).
MS FAB(m/z):519(M+Na)⁺
[実施例３] ２２β−（４−ヒドロキシメチルベンジルオキシ）オレアン−１２−エン−３β，２４−ジオール（化合物３）

２２β−（４−ホルミルベンジルオキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン１５２ｍｇをメタノール１．２ｍｌとＴＨＦ２．４ｍｌに溶解し、氷冷下、水素化ほう素ナトリウム９．９ｍｇを加え、１０分間撹拌した。その後、１規定塩酸水溶液１ｍｌを加え、室温まで昇温し、２０分間撹拌した。飽和重曹水で反応を停止後、反応溶液をクロロホルムで希釈し、飽和食塩水で洗浄した。水層をクロロホルムで２回抽出後、併せた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥した。無機塩を濾別し、溶媒を減圧濃縮後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：２〜１：１）で精製し、化合物３を１１５ｍｇ（収率８０％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.89(6H,s),0.93(3H,s),0.94(3H,s),1.04(3H,s),1.11(3H,s),1.25(3H,s),0.83-1.88(21H,m),2.15(1H,m),2.35(1H,dd,J=4.2,11.0Hz),2.69(1H,m),3.18(1H,dd,J=2.9,6.1Hz),3.35(1H,m),3.47(1H,m),4.20(1H,m),4.30(1H,d,J=11.9Hz),4.61(1H,d,J=11.9Hz),4.68(2H,d,J=6.1Hz),5.22(1H,t-like),7.33(4H,s).
MS FAB(m/z):601(M+Na)⁺
[実施例４] ２２β−（４−ホルミルベンジルオキシ）オレアン−１２−エン−３β，２４−ジオール（化合物４）の製造方法

２２β−（４−ホルミルベンジルオキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン１４８ｍｇをＴＨＦ２．４ｍｌに溶解し、１規定塩酸水溶液０．６ｍｌを加え、室温で１５分撹拌した。反応を飽和重曹水で停止し、反応溶液を酢酸エチルで希釈後、飽和食塩水で洗浄した。無水硫酸マグネシウムで乾燥後、無機塩を濾別し、溶媒を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝７：３〜３：２）で精製し、化合物４を１３０ｍｇ（収率９３％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.89(3H,s),0.90(3H,s),0.95(6H,s),1.04(3H,s),1.12(3H,s),1.25(3H,s),0.83-1.88(20H,m),2.17(1H,m),2.35(1H,dd,J=4.2,11.0Hz),2.68(1H,m),3.10(1H,dd,J=2.9,6.1Hz),3.35(1H,m),3.44(1H,m),4.20(1H,m),4.39(1H,d,J=12.9Hz),4.70(1H,d,J=12.9Hz),5.24(1H,t-like),7.50(2H,d,J=8.1Hz),7.84(2H,d,J=8.1Hz),10.0(1H,s).
MS FAB(m/z):599(M+Na)⁺
[実施例５] ２２β−（２−ヒドロキシプロポオキシ）オレアン−１２−エン−３β，２４−ジオール（化合物５）の製造方法
（ステップ１）
２２β−（２−ヒドロキシプロポオキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン、および２２β−（３−ヒドロキシプロポキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン

２２β−アリルオキシ−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン１．３６ｇ（日本特許第３２７９５７４号の明細書に記載の方法により合成）のＴＨＦ１３．６ｍｌ溶液を−４０℃に冷却後、ボランジメチルスルフィド錯体（２．０Ｍ テトラヒドロフラン溶液）２．５ｍｌを加え、その温度で３０分間、室温まで昇温後、１時間撹拌した。氷冷下、ボランジメチルスルフィド錯体（２．０Ｍ テトラヒドロフラン溶液）１．３ｍｌ追加し、室温で１．５時間撹拌した。氷冷後、発泡がなくなるまで水をゆっくり加え、５規定水酸化ナトリウム水溶液５ｍｌと、３１％過酸化水素水溶液９ｍｌを加え、室温で１時間撹拌した。反応溶液を酢酸エチルで希釈後、飽和重曹水、飽和食塩水で順次洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥した。無機塩を濾別し、溶媒を減圧濃縮後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝４９：１〜４：１）で精製し、２２β−（２−ヒドロキシプロポオキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エンを２３６ｍｇ（収率１６％）、および、２２β−（３−ヒドロキシプロポキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エンを８７１ｍｇ（収率６２％）得た。

２２β−（２−ヒドロキシプロポオキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン（下記の化合物との１：１のジアステレオマー混合物）
¹H-NMR(CDCl₃)...0.83-2.38(51H,m),2.37(0.5H,d,J=3.2Hz),2.47(0.5H,d,J=2.8Hz),2.95-3.02(1.5H,m)3.21-3.27(1.5H,m),3.32(0.5H,t,J=9.3Hz),3.45(1H,dd,J=4.6,9.5Hz),3.54(0.5H,dd,J=2.8,9.1Hz),3.91(1H,m),4.05(1H,d,J=11.5Hz),5.25(1H,t-like).
MS FAB(m/z):557(M⁺+1).
２２β−（３−ヒドロキシプロポキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン
¹H-NMR(CDCl₃)...0.86(3H,s),0.90(3H,s),0.98(3H,s),1.00(3H,s),1.11(3H,s),1.15(3H,s),1.22(3H,s),1.38(3H,s),1.44(3H,s),0.82-2.09(23H,m),2.54(1H,t,J=5.6Hz),2.94(1H,dd,J=2.9,6.6Hz),3.23(1H,d,J=11.6Hz),3.40(1H,m),3.45(1H,m),3.72-3.80(3H,m),4.05(1H,d,J=11.6Hz),5.24(1H,t-like).
MS FAB(m/z):557(M⁺+1).
（ステップ２）
２２β−（２−ヒドロキシプロポオキシ）オレアン−１２−エン−３β，２４−ジオール（化合物５）

２２β−（２−ヒドロキシプロポオキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン２２５ｍｇを用いて、実施例２のステップ２と同様の方法により、化合物５を１８６ｍｇ（８９％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.83-1.88(44H,m),2.11-2.16(1H,m),2.37-2.48(2H,m),2.73(0.5H,m),2.95-3.01(1.5H,m),3.24(0.5H,dd,J=3.2,9.0Hz),3.22-3.38(1.5H,m),3.43-3.46(1.5H,m),3.54(0.5H,dd,J=3.2,9.0Hz),3.88-3.92(1H,m),4.19-4.22(1H,m),5.23(1H,t-like).
MS ES(m/z):517(M⁺+1)
[実施例６] ２２β−（３−フェノキシプロポキシ）オレアン−１２−エン−３β，２４−ジオール（化合物６）の製造方法
（ステップ１）
２２β−（３−フェノキシプロポキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン

２２β−（３−ヒドロキシプロポキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン１５１ｍｇとトリフェニルホスフィン１４２ｍｇの塩化メチレン２．７ｍｌ溶液に、氷冷下、１，１’−（アゾジカルボニル）ジピペリジン１４０ｍｇと、フェノール５２ｍｇを加えた。室温で１時間撹拌後、反応溶液をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝４９：１〜９７：３）で精製し、ステップ１の表題化合物を１６４ｍｇ（収率９５％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.86(3H,s),0.87(3H,s),0.98(3H,s),1.00(3H,s),1.12(3H,s),1.15(3H,s),1.22(3H,s),1.38(3H,s),1.44(3H,s),0.86-2.12(23H,m),2.91(1H,m),3.23(1H,d,J=11.5Hz),3.36(1H,dt,J=9.5,5.8Hz),3.45(1H,dd,J=4.6,9.5Hz),3.70(1H,dt,J=9.0,5.8Hz),4.03-4.08(3H,m),5.24(1H,t-like),6.88-7.00(3H,m),7.25-7.29(2H,m).
MS FAB(m/z):633(M⁺+1).
（ステップ２）
２２β−（３−フェノキシプロポキシ）オレアン−１２−エン−３β，２４−ジオール（化合物６）

２２β−（３−フェノキシプロポキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン１７６ｍｇを用いて、実施例２のステップ２と同様の方法により、化合物６を１８６ｍｇ（収率９８％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.86(3H,s),0.87(3H,s),0.89(3H,s),0.94(3H,s),1.00(3H,s),1.11(3H,s),1.25(3H,s),0.83-1.87(20H,m),1.98-2.09(2H,m),2.12(1H,m),2.35(1H,m),2.71(1H,m),2.91(1H,m),3.29-3.38(2H,m),3.44(1H,m),3.70(1H,m),4.07(2H,t,J=6.3Hz),4.22(1H,d,J=11.0Hz),5.21(1H,t-like),6.88-6.94(2H,m),7.25-7.29(2H,m).
MS FAB(m/z):631(M+K)⁺
[実施例７] ２２β−（３−ヒドロキシプロポキシ）オレアン−１２−エン−３β，２４−ジオール（化合物７）の製造方法

２２β−（３−ヒドロキシプロポキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン１５１ｍｇを用いて、実施例２のステップ２と同様の方法により、化合物７を１１４ｍｇ（８１％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.86(3H,s),0.89(3H,s),0.90(3H,s),0.93(3H,s),1.01(3H,s),1.11(3H,s),1.24(3H,s),0.83-1.91(22H,m),2.07(1H,m),2.64(2H,brs),2.88(1H,brs),2.94(1H,dd,J=2.9,6.6Hz),3.32-3.46(3H,m),3.72-3.79(3H,m),4.21(1H,d,J=11.2Hz),5.21(1H,t-like).
MS FAB(m/z):516(M⁺)
[実施例８] ２２β−（３−（４−カルボキシフェニル）オキシプロポキシ）オレアン−１２−エン−３β，２４−ジオール（化合物８）の製造方法
（ステップ１）
２２β−（３−（４−メトキシカルボニルフェニル）オキシプロポキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン

２２β−（３−ヒドロキシプロポキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン１８１ｍｇと、４−ヒドロキシ安息香酸 メチルエステル１０１ｍｇを用いて、実施例６のステップ１と同様の方法により、ステップ１の表題化合物を２０７ｍｇ（収率９２％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.86(3H,s),0.87(3H,s),0.98(3H,s),0.99(3H,s),1.12(3H,s),1.15(3H,s),1.22(3H,s),1.38(3H,s),1.44(3H,s),0.85-2.12(23H,m),2.91(1H,dd,J=2.9,5.5Hz),3.23(1H,d,J=11.5Hz),3.35(1H,dt,J=9.4,6.4Hz),3.45(1H,dd,J=4.2,9.0Hz),3.70(1H,dt,J=9.4,5.5Hz),3.88(3H,s),4.05(1H,d,J=11.7Hz),4.09-4.15(2H,m),5.22(1H,t-like),6.8-7.26(2H,m),7.96-7.99(2H,m).
MS FAB(m/z):691(M⁺+1).
（ステップ２）
２２β−（３−（４−カルボキシフェニル）オキシプロポキシ）オレアン−１２−エン−３β，２４−ジオール（化合物８）

２２β−（３−（４−メトキシカルボニルフェニル）オキシプロポキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン２０３ｍｇのＴＨＦ４ｍｌ溶液に１規定水酸化ナトリウム水溶液１．６ｍｌとメタノール１．５ｍｌを加え、室温で１時間、６０℃で３．５時間撹拌した。室温まで冷却後、５規定塩酸水溶液０．６３ｍｌを加え室温で１０分間撹拌後、飽和食塩水で希釈した。酢酸エチルで２回抽出後、併せた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥し、無機塩を濾別した。溶媒を減圧濃縮後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、メタノール：クロロホルム＝１：４９）で精製し、化合物８を１７７ｍｇ（収率９５％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.85(3H,s),0.87(3H,s),0.89(3H,s),0.93(3H,s),0.99(3H,s),1.11(3H,s),1.25(3H,s),0.83-1.87(20H,m),2.00-2.04(2H,m),2.12(1H,m),2.91(1H,m),3.33-3.38(2H,m),3.44(1H,m),3.70(1H,m),4.13-4.16(2H,m),4.21(1H,d,J=11.2Hz),5.21(1H,t-like),6.92-6.94(2H,m),8.02-8.05(2H,m).
MS ES(m/z):637(M⁺+1)
[実施例９] ２２β−（４−（４−モルホリルメチル）ベンジルオキシ）オレアン−１２−エン−３β，２４−ジオール（化合物９）の製造方法
（ステップ１）
２２β−（４−（４−モルホリルメチル）ベンジルオキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン

２２β−（４−ホルミルベンジルオキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン２００ｍｇの１，２−ジクロロエタン６ｍｌ溶液に、モルホリン１４２μｌと酢酸７４μｌと無水硫酸マグネシウム６００ｍｇを加え、室温で１０分間撹拌した。氷冷後、トリアセトキシヒドロほう酸ナトリウム１３９ｍｇを加え、室温で終夜撹拌した。飽和重曹水と飽和食塩水を加えた後、クロロホルムで３回抽出し、併せた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥、無機塩を濾別した。溶媒を減圧濃縮後、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、メタノール：クロロホルム＝１：９９〜１：４９）で精製し、ステップ１の表題化合物を２２３ｍｇ（収率９９％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.89(3H,s),0.93(3H,s),0.98(3H,s),1.04(3H,s),1.11(3H,s),1.15(3H,s),1.22(3H,s),1.38(3H,s),1.47(3H,s),0.86-2.01(20H,m),2.15(1H,m),2.43-2.45(4H,m),3.07(1H,dd,J=2.9,6.3Hz),3.23(1H,d,J=11.5Hz),3.44(1H,dd,J=4.4,9.5Hz),3.48(2H,s),3.69-3.72(4H,m),4.05(1H,d,J=11.5Hz),4.30(1H,d,J=11.9Hz),4.59(1H,d,J=11.9Hz),5.23(1H,t-like),7.26-7.37(4H,m).
MS ES(m/z):688(M⁺)
（ステップ２）
２２β−（４−（４−モルホリルメチル）ベンジルオキシ）オレアン−１２−エン−３β，２４−ジオール（化合物９）

２２β−（４−（４−モルホリルメチル）ベンジルオキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン２２０ｍｇを用いて、実施例２のステップ２と同様の方法により、化合物９を１８９ｍｇ（収率９１％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.89(6H,s),0.93(3H,s),0.94(3H,s),1.04(3H,s),1.11(3H,s),1.27(3H,s),0.83-1.86(20H,m),2.17(1H,m),2.42-2.44(5H,m),2.71(1H,m),3.06(1H,dd,J=2.7,6.1Hz),3.33(1H,m),3.43(1H,m),3.48(2H,s),3.69-3.72(4H,m),4.20(1H,d,J=11.2Hz),4.30(1H,d,J=11.7Hz),4.59(1H,d,J=11.7Hz),5.22(1H,t-like),7.23-7.30(4H,m).
MS ES(m/z):648(M⁺+1)
[実施例１０] ２２β−（４−ジメチルアミノメチルベンジルオキシ）オレアン−１２−エン−３β，２４−ジオール（化合物１０）の製造方法
（ステップ１）
２２β−（４−ジメチルアミノメチルベンジルオキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン

２２β−（４−ホルミルベンジルオキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン２００ｍｇとジメチルアミン（２．０Ｍ、ＴＨＦ溶液）１．６ｍｌを用いて、実施例９のステップ１と同様の方法により、ステップ１の表題化合物を２０４ｍｇ（９７％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.89(3H,s),0.93(3H,s),0.98(3H,s),1.04(3H,s),1.11(3H,s),1.15(3H,s),1.22(3H,s),1.38(3H,s),1.44(3H,s),0.83-2.04(20H,m),2.13(1H,m),2.23(6H,s),3.06(1H,dd,J=2.9,6.3Hz),3.23(1H,d,J=11.6Hz),3.41(2H,s),3.46(1H,dd,J=4.4,9.3Hz),4.05(1H,d,J=11.6Hz),4.31(1H,d,J=11.9Hz),4.59(1H,d,J=11.9Hz),5.24(1H,t-like),7.26-7.53(4H,m).
MS FAB(m/z):646(M⁺)
（ステップ２）
２２β−（４−ジメチルアミノメチルベンジルオキシ）オレアン−１２−エン−３β，２４−ジオール（化合物１０）

２２β−（４−ジメチルアミノメチルベンジルオキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン２００ｍｇを用いて、実施例２のステップ２と同様の方法により、化合物１０を１２８ｍｇ（収率６８％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.89(6H,s),0.92(3H,s),0.94(3H,s),1.04(3H,s),1.10(3H,s),1.24(3H,s),0.83-1.86(20H,m),2.17(1H,m),2.23(6H,s),3.06(1H,dd,J=2.9,6.3Hz),3.34(1H,d,J=11.2Hz),3.40(2H,s),3.45(1H,dd,J=4.2,11.5Hz),4.20(1H,d,J=11.2Hz),4.31(1H,d,J=11.9Hz),4.59(1H,d,J=11.9Hz),5.24(1H,t-like),7.25-7.29(4H,m).
MS ES(m/z):606(M⁺+1)
[実施例１１] ２２β−（４−フェニルアミノメチルベンジルオキシ）オレアン−１２−エン−３β，２４−ジオール（化合物１１）の製造方法

２２β−（４−ホルミルベンジルオキシ）−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン３４０ｍｇとアニリン０．２５ｍｌを用いて、実施例９のステップ１と同様の方法により還元的アミノ化反応を行った後、実施例２のステップ２と同様の方法により脱保護反応を行い、化合物１１を３０４ｍｇ（収率８４％、２工程）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.89(6H,s),0.93(3H,s),0.94(3H,s),1.04(3H,s),1.11(3H,s),1.25(3H,s),0.83-1.86(20H,m),2.05(1H,m),2.41(1H,m),2.72(1H,m),3.06(1H,dd,J=2.9,5.8Hz),3.34(1H,m),3.44(1H,m),4.03(1H,m),4.22(1H,d,J=11.0Hz),4.30(1H,d,J=12.0Hz),4.31(2H,s),4.59(1H,d,J=12.0Hz),5.22(1H,t-like),6.62-6.65(2H,m),6.71(1H,m),7.14-7.20(2H,m),7.29-7.34(4H,m).
MS ES(m/z):654(M⁺+1)
[実施例１２] ２２β−ベンジルオキシオレアン−１２−エン−３β−ヒドロキシ−２４―オイックアシッド（化合物１２）の製造方法
（ステップ１）
２２β−ベンジルオキシ−３−オキソオレアン−１２−エン−２４―オイックアシッド メチルエステル

２２β−ベンジルオキシ−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン５０４ｍｇ（日本特許第３２７９５７４号の明細書に記載の方法により合成）のクロロホルム５ｍｌとメタノール５ｍｌ溶液に１規定塩酸水溶液０．５ｍｌを加え、室温で３０分間撹拌した。飽和重曹水で反応を停止後、反応溶液を飽和食塩水で希釈し、クロロホルムで３回抽出した。併せた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥後、無機塩を濾別し、溶媒を減圧濃縮した。

得られた残渣を塩化メチレン８．５ｍｌで溶解し、モレキュラーシーブス４Å５２１ｍｇと４−メチルモルホリンＮ−オキシド４０８ｍｇと、テトラ−Ｎ−プロピルアンモニウム ペルルテナート３０ｍｇを加え、室温で２０分間撹拌した。反応溶液をそのままシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝４９：１）で精製しアルデヒド体を得た。このアルデヒド体はそのまま次の反応に用いた。

アルデヒドをＴＨＦ４．３ｍｌと２−メチルプロパノール４．３ｍｌに溶解後、２−メチル−２−ブテン０．４５ｍｌを加えた。リン酸二水素ナトリウム・二水和物２１０ｍｇと亜塩素酸ナトリウム１４７ｍｇの水２．１ｍｌ溶液を加え、室温で４０分間撹拌した。さらにリン酸二水素ナトリウム・２水和物１００ｍｇと亜塩素酸ナトリウム７２ｍｇの水１ｍｌ溶液を加え、室温で２０分間撹拌した。反応を飽和チオ硫酸ナトリウム水溶液で停止後、反応溶液を希塩酸と酢酸エチルで希釈した。分液後、有機層を水と飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウム水溶液で乾燥した。無機塩を濾別後、溶媒を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、メタノール：クロロホルム＝１：９９〜１：４５）で精製し、カルボン酸体を得た。このカルボン酸体はそのまま次の反応に用いた。

カルボン酸のトルエン８ｍｌとメタノール２ｍｌ溶液にトリメチルシリルジアゾメタン（０．６Ｍ、ヘキサン溶液）２．１ｍｌを加え、室温で１０分間撹拌した。溶媒を減圧濃縮後、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝９９：１〜９７：３）で精製し、ステップ１の表題化合物を３６１ｍｇ（収率７３％、４工程）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.89(3H,s),0.94(3H,s),1.04(6H,s),1.07(3H,s),1.10(3H,s),1.37(3H,s),0.89-2.05(18H,m),2.17(1H,m),2.36(1H,m),2.95(1H,ddd,J=6.3,14.6,14.6Hz),3.08(1H,dd,J=2.7,6.3Hz),3.68(3H,s),4.32(1H,d,J=11.7Hz),4.62(1H,d,J=11.7Hz),5.24(1H,t-like),7.24-7.35(5H,m).
MS FAB(m/z):575(M⁺+1)
（ステップ２）
２２β−ベンジルオキシオレアン−１２−エン−３β−ヒドロキシ−２４―オイックアシッド メチルエステル

２２β−ベンジルオキシ−３−オキソオレアン−１２−エン−２４―オイックアシッド メチルエステル２３８ｍｇのＴＨＦ４．１ｍｌとメタノール１ｍｌ溶液を−７８℃に冷却後、水素化ほう素ナトリウム３３ｍｇを加えた。１．５時間かけて０℃まで昇温後、飽和塩化アンモニウム水溶液で反応を停止し、反応溶液を水で希釈した。酢酸エチルで抽出後、有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した。無機塩を濾別後、溶媒を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝１９：１〜９：１）で精製し、ステップ２の表題化合物を２２８ｍｇ（収率９５％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.79(3H,s),0.89(3H,s),0.94(3H,s),0.98(3H,s),1.04(3H,s),1.11(3H,s),1.40(3H,s),0.83-1.89(19H,m),2.03(1H,m),2.15(1H,m),3.06-3.12(2H,m),3.35(1H,d,J=12.0Hz),3.68(3H,s),4.32(1H,d,J=12.0Hz),4.62(1H,d,J=12.0Hz),5.24(1H,t-like),7.23-7.35(5H,m).
MS FAB(m/z):577(M⁺+1)
（ステップ３）
２２β−ベンジルオキシオレアン−１２−エン−３β−ヒドロキシ−２４―オイックアシッド（化合物１２）

ｔｅｒｔ−ブトキシカリウム（１．０Ｍ、ＴＨＦ溶液）９．５ｍｌに水４２．４μｌと２２β−ベンジルオキシオレアン−１２−エン−３β−オール−２４−オイックアシッド メチルエステル２１８ｍｇのＴＨＦ２ｍｌ溶液を順次加え、マイクロウェーブ反応装置を用いて、７５℃で１時間反応させた。室温まで冷却後、水と５規定塩酸水溶液を用いて酸性に調整し、酢酸エチルで抽出した。有機層を飽和食塩水で洗浄後、無水硫酸マグネシウムで乾燥、無機塩を濾別した。溶媒を減圧濃縮後、得られた残渣をプレパラティブＴＬＣ（展開系、メタノール：クロロホルム＝３：９７）で精製し、化合物１２を１１２ｍｇ（収率５２％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.90(3H,s),0.91(3H,s),0.94(3H,s),1.00(3H,s),1.04(3H,s),1.11(3H,s),1.48(3H,s),0.85-1.90(19H,m),2.00(1H,m),2.15(1H,m),3.08(1H,m),3.15(1H,dd,J=4.2,12.1),4.32(1H,d,J=12.0Hz),4.62(1H,d,J=12.0Hz),5.24(1H,m),7.26-7.35(5H,m).
MS ES(m/z):563(M⁺+1)
[実施例１３] ２２β−アリルオキシオレアン−１２−エン−３β−ヒドロキシ−２４―オイックアシッド（化合物１３）の製造方法
（ステップ１）
２２β−アリルオキシ−３−オキソオレアン−１２−エン−２４―オイックアシッド メチルエステル

２２β−アリルオキシ−３β，２４−イソプロピリデンジオキシオレアン−１２−エン８１７ｍｇ（日本特許第３２７９５７４号の明細書に記載の方法により合成）を用いて、実施例１２のステップ１と同様の方法を用いて、ステップ１の表題化合物を５５９ｍｇ（７０％、４工程）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.89(3H,s),0.90(3H,s),1.01(3H,s),1.04(3H,s),1.07(3H,s),1.10(3H,s),1.37(3H,s),0.86-2.05(18H,m),2.12(1H,m),2.38(1H,ddd,J=2.3,4.6,14.6Hz),2.90-3.00(2H,m),3.68(3H,s),3.80(1H,m),4.05(1H,m),5.11(1H,m),5.23-5.29(2H,m),5.90(1H,m).
MS FAB(m/z):525(M⁺+1)
（ステップ２）
２２β−アリルオキシオレアン−１２−エン−３β−ヒドロキシ−２４―オイックアシッド メチルエステル

２２β−アリルオキシ−３−オキソオレアン−１２−エン−２４―オイックアシッド メチルエステル５５７ｍｇを用いて、実施例１２のステップ２と同様の方法により、ステップ２の表題化合物を５５１ｍｇ（９８％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.79(3H,s),0.89(6H,s),0.98(3H,s),1.01(3H,s),1.11(3H,s),1.41(3H,s),0.82-1.89(19H,m),1.99(1H,m),2.09(1H,m),2.99(1H,dd,J=2.9,6.8Hz),3.09(1H,dt,4.4,12.0Hz),3.35(1H,d,J=12.0Hz),3.68(3H,s),3.79(1H,m),4.06(1H,m),5.11(1H,m),5.23-5.28(2H,m),5.90(1H,m).
MS FAB(m/z):527(M⁺+1)
（ステップ３）
２２β−アリルオキシオレアン−１２−エン−３β−ヒドロキシ−２４―オイックアシッド（化合物１３）

２２β−アリルオキシオレアン−１２−エン−３β−オール−２４―オイックアシッド メチルエステル５５０ｍｇを用いて、実施例１２のステップ３と同様の方法により、化合物１３を３２１ｍｇ（６０％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.89(6H,s),0.90(3H,s),1.00(3H,s),1.01(3H,s),1.12(3H,s),1.48(3H,s),0.85-1.90(19H,m),2.01(1H,m),2.12(1H,m),2.99(1H,dd,J=2.9,6.8Hz),3.15(1H,dd,J=4.2,11.7),3.80(1H,dd,J=5.4,13.0Hz),4.06(1H,dd,J=5.1,13.0Hz),5.10(1H,dd,J=1.5,10.5Hz),5.23-5.28(2H,m),5.90(1H,m).
MS ES(m/z):535(M+Na)⁺
[実施例１４] ３β−ヒドロキシ−２２β−メトキシオレアン−１２−エン−２４−オイックアシッド（化合物１４）の製造方法

２２β−メトキシオレアン−１２−エン−３β，２４−ジオール ２０．０ｇ（日本特許第３２７９５７４号の明細書に記載の方法により合成）をピリジン２００ｍｌに溶解し、トリフェニルメチルクロライド１７．５ｇを加え、７５℃で２４時間攪拌した。室温まで冷却し、溶媒を減圧留去した後、残渣に水と酢酸エチル３５０ｍｌを加え、分液した。有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、無機塩を濾別し、溶媒を減圧濃縮した。得られた残渣をＤＭＦ４５０ｍｌに溶解し、４５℃に加温した。６０％水素化ナトリウム５．０ｇを加え、１時間攪拌した後にベンジルブロマイド２２ｇを加え１６時間攪拌した。室温まで冷却し、酢酸エチル２Ｌと水３Ｌを加え分液し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、無機塩を濾別し、溶媒を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、ベンゼン：ｎ−ヘキサン＝２：３）で精製し、３β−ベンジルオキシ−２２β−メトキシオレアン−２４−トリフェニルメチルオキシ−１２−エンを９．１ｇ得た。３β−ベンジルオキシ−２２β−メトキシオレアン−２４−トリフェニルメチルオキシ−１２−エン９．１ｇをアセトン３２ｍｌとメタノール１９０ｍｌの混液に溶解し、濃塩酸３２ｍｌを加え、２．５時間加熱還流した。反応溶液を冷却し２規定水酸化ナトリウム水溶液で中和後、溶媒を留去した。残渣に酢酸エチル７００ｍｌおよび水を加え分液し、有機層を飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、無機塩を濾別し、溶媒を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、ベンゼン：ｎ−ヘキサン＝２０：１）で精製し、３β−ベンジルオキシ−２２β−メトキシオレアン−１２−エン−２４−オールを２．７ｇ得た。

オギザリルクロライド３．６ｍｌを塩化メチレン８０ｍｌに溶解し、−６５℃に冷却後、１０分間攪拌した。３β−ベンジルオキシ−２２β−メトキシオレアン−１２−エン−２４−オール２．７ｇを塩化メチレン２３ｍｌに溶解した溶液を加え、さらに１．５時間攪拌した。反応溶液にトリエチルアミン１６ｍｌを加え、室温まで昇温させながら攪拌した。水５０ｍｌを加え、塩化メチレン４０ｍｌで抽出し、有機層を飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。その後、無機塩を濾別し、溶媒を減圧濃縮した。得られた残渣をｔ−ブタノール１５０ｍｌに溶解し、２−メチル−２−ブテン１６．７ｇを加え、３０℃まで加温した。この反応液にリン酸二水素ナトリウム２．９ｇと亜塩素酸ナトリウム２．７ｇを水１５ｍｌに溶解した溶液を３回に分けて加え、３０℃で２日間攪拌した。ｔ−ブタノールを減圧留去し、酢酸エチルに溶解させた後、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させた。その後、無機塩を濾別し、溶媒を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、ヘキサン：酢酸エチル＝７：１）で精製し、３β−ベンジルオキシ−２２β−メトキシオレアン−１２−エン−２４−オイック酸２．７ｇを得た。３β−ベンジルオキシ−２２β−メトキシオレアン−１２−エン−２４−オイック酸２．７ｇを酢酸エチル７０ｍｌとエタノール４５ｍｌの混液に溶解し、水酸化パラジウム/C ０．９０ｇを加え、水素ガス雰囲気下、室温で４時間撹拌した。セライトろ過により触媒を濾別後、溶媒を濃縮し、得られた残渣に酢酸エチルを加えた。析出した固体を濾取し、化合物１４を０．８５ｇ（収率４％）得た。
¹H-NMR(CDCl₃)...0.86(3H,s),0.90(6H,s),1.00(6H,s),1.11(3H,s),1.31(1H,dd,J=3.0,13.9Hz),1.48(3H,s),0.88-2.12(20H,m),2.82(1H,dd,J=2.8,7.0Hz),3.15(1H,dd,J=4.4,12.4Hz),3.28(3H,s),5.24(1H,dd,J=3.6,3.6Hz).
MS FAB(m/z):509(M⁺+Na)
[実施例１５] ３β−ヒドロキシ−２２β−メトキシオレアン−１２−エン−２４−イル硫酸 ナトリウム塩（化合物１５）の製造方法

３β−ベンジルオキシ−２２β−メトキシオレアン−１２−エン−２４−オール１０．０ｇ（実施例１４に記載の方法により合成）をジオキサン２００ｍｌに溶解し、クロルスルホン酸６．２ｇをジオキサン４０ｍｌに溶解した溶液を１２℃で滴下した。室温で１時間攪拌した後に冷水４０ｍｌを加え減圧濃縮した。得られた残渣をエタノール２００ｍｌに溶解し、水酸化パラジウム/Cを１ｇ加え、水素ガスを吹き込みながら室温で１時間攪拌した。セライト濾過によりパラジウム触媒を濾別し、溶媒を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、クロロホルム：メタノール＝５：１）で精製し、溶出フラクションにナトリウムメトキシド２８％メタノール溶液を加えてアルカリ性にした後に減圧濃縮し、粗結晶を得た。得られた粗結晶を水洗し、濾別した結晶をメタノールとＴＨＦの混合溶液に溶解し、不溶物を濾別し、減圧濃縮した。得られた結晶を酢酸エチルでスラリー洗浄した後に減圧乾燥し、化合物１５を３．３５ｇ（３３％）得た。
¹H-NMR(DMSO-d6)...0.81(3H,s),0.87(3H,s),0.91(3H,s),0.94(3H,s),0.97(3H,s),1.01(3H,s),1.08(3H,s),0.68-1.89(20H,m),2.01-2.05(1H,m),2.79-2.81(1H,m),3.01-3.06(1H,m),3.19(3H,s),3.83(1H,d,J=10.4Hz),3.86(1H,d,J=10.4Hz),4.35(1H,d,J=6.3Hz),5.17(1H,t-like).
MS TSP(m/z):551(M⁺-1)
[実施例１６] １−Ｏ−（３β−ヒドロキシ−２２β−メトキシオレアン−１２−エン−２４−イル）−β−Ｄ−グルクロン酸（化合物１６）の製造方法

３β−ベンジルオキシ−２２β−メトキシオレアン−１２−エン−２４−オール１．４８ｇをベンゼン１４０ｍｌに溶解し、硫酸カルシウム３．７８ｇ、炭酸銀１．５３ｇおよび２、３、４−トリ−Ｏ−アセチル−１−ブロモ−１−デオキシ−α−Ｄ−グルクロン酸メチルエステル１．８３ｇを加え、７８℃で７時間加熱還流した。室温まで冷却し、不溶物を濾別後、減圧濃縮した。得られた残渣７．２３ｇをシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝３：１）で精製し、２、３、４−トリ−Ｏ−アセチル−１−Ｏ−（３β−ベンジルオキシ−２２β−メトキシオレアン−１２−エン−２４−イル）−β−Ｄ−グルクロン酸メチルエステルを１．０８ｇ得た。

２、３、４−トリ−Ｏ−アセチル−１−Ｏ−（３β−ベンジルオキシ−２２β−メトキシオレアン−１２−エン−２４−イル）−β−Ｄ−グルクロン酸メチルエステル１．０８ｇを酢酸エチル２５ｍｌとエタノール１６ｍｌの混合溶媒に溶解し、水酸化パラジウム/Cを０．２ｇ加え、水素雰囲気下、室温で３時間攪拌した。触媒を濾別し、濾液を減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（展開系、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝２：１）で精製し、脱ベンジル体０．９１ｇを得た。

脱ベンジル体０．９１ｇをメタノール１４０ｍｌに溶解し、２規定水酸化カリウム水溶液１７．４ｍｌを加え、６０℃で８時間攪拌した。室温まで冷却し、酢酸を加え中和した後に減圧濃縮した。得られた残渣に水を加え析出した結晶を濾取した。得られた結晶を酢酸エチルおよびＴＨＦでスラリー洗浄し、化合物１６を５１７ｍｇ得た。
¹H-NMR(CD₃OD)...0.85(3H,s),0.89(3H,s),0.97(3H,s),0.98(3H,s),1.00(3H,s),1.14(3H,s),1.20(3H,s),0.81-1.91(20H,m),2.09(1H,d,J=10.5Hz),2.84(1H,dd,J=2.9,6.1Hz),3.17-3.23(2H,m),3.26(3H,s),3.37(1H,dd,J=9.0,9.0Hz),3.48(1H,dd,J=9.0,9.0Hz),3.68(1H,d,J=9.8Hz),3.79(1H,d,J=9.8Hz),4.04(1H,d,J=9.5Hz),4.28(1H,d,J=7.8Hz),5.21(1H,t-like).
MS TSP(m/z):647(M⁺-1)
[実施例１７] ＨＣＶ（Ｃｏｎ１株）レプリコンアッセイおよび細胞毒性試験
式（Ｉ）で表される化合物について、ＨＣＶレプリコンアッセイおよび細胞毒性試験を行った。

ＨＣＶのウイルス増殖度合いを定量化するために、Ｃｏｎ１株のＨＣＶゲノム遺伝子配列の中にレポーター遺伝子としてルシフェラーゼ遺伝子を導入したものを構築した。Ｋｒｉｅｇｅｒら（Ｊ．Ｖｉｒｏｌ．７５：４６１４（２００１））の方法に従い、ＨＣＶ遺伝子のＩＲＥＳ（Internal Ribosome Entry Site）の直後に、ネオマイシン耐性遺伝子と融合する形でルシフェラーゼ遺伝子を導入した。構築したＲＮＡをエレクトロポレーション法でＨｕｈ７細胞に導入し、Ｇ４１８耐性クローンとして単離した。

ルシフェラーゼ遺伝子とネオマイシン耐性遺伝子を含むＨＣＶレプリコン細胞を培養液[１０％ウシ胎児血清（EQUITECH-BIO,INC.）を含むＤ−ＭＥＭ（SIGMA,D6046）]に懸濁し、９６穴プレートに５０００〜８１００細胞／ウェルで播種した。様々な濃度になるように試験化合物を添加し、５％ＣＯ_２、３７℃で３日間培養した。試験化合物添加に際しては、ジメチルスルホキシド（ＤＭＳＯ）に溶解した試験化合物溶液を用いて、適切な濃度になるように上述の培養液に希釈して用いた。試験化合物溶解に用いたＤＭＳＯのレプリコン細胞培養時における最終濃度が０．４％となるように実験を行った。試験化合物未添加のウェルには、最終濃度が０．４％になるようにＤＭＳＯを加えた。

アッセイプレートを２系統用意し、１つは白色プレート、他はクリアープレートでアッセイを行った。試験化合物処理のための培養が終了後、白色プレートはＨＣＶレプリコン増殖に対する影響を検出するために、Ｓｔｅａｄｙ−Ｇｌｏ Ｌｕｃｉｆｅｒａｓｅ Ａｓｓａｙ Ｓｙｓｔｅｍ（Promega,E2520）を用いて化学発光を測定した。この化学発光の測定には、ＥｎＶｉｓｉｏｎマルチラベルカウンター（PerkinElmer 2102）を用いた。試験化合物未添加の値を阻害０％として薬剤処理による阻害率を算出した。

また、薬剤処理した際の細胞への毒性の評価を、Ｃｅｌｌ Ｃｏｕｎｔｉｎｇ Ｋｉｔ−８（（株）同仁化学研究所,CK04）を用いて行った。細胞毒性の測定においては、クリアープレートを用い、ＨＣＶレプリコンアッセイと同様に、試験化合物処理のための培養終了後に測定した。

ＨＣＶレプリコンアッセイにおいて、薬剤未添加の値を阻害０％として薬剤のＩＣ５０（50%増殖阻害濃度）を算出した。その結果、化合物１７のＩＣ５０値は＞２０μＭであったのに対し、本発明の化合物のＩＣ５０値は以下の表３の通りであった。

これらの結果から、本発明の化合物は２２β−メトキシオレアン−１２-エン−３β，２４−ジオール（化合物１７）と比較しても優れたＨＣＶ増殖抑制効果を示すことが確認された。

[実施例１８] マウス薬物動態試験
Ｂａｌｂ／ｃマウス（雄、７〜８週齢）を用いた（一群３匹以上）。オリーブオイルにて懸濁させた試験化合物を２０ｍｇ/ｋｇ経口投与し、２、６および２４時間後に、あるいは２、４、６、８、２４および４８時間後に、頸静脈より採血し、Ｌｉｑｕｉｄ ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈ／Ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ／Ｍａｓｓ ｓｐｅｃｔｒｏｍｅｔｒｙ（ＬＣ−ＭＳ／ＭＳ）を用いて血漿中薬物濃度を測定した。また得られた血漿中濃度推移から、薬物動態パラメータを求めた。

本試験で得られた各化合物の最高血漿中濃度（Ｃ_ｍａｘ）、血漿中半減期（ｔ_１／２）、および血漿中薬物濃度−時間曲線下面積（ＡＵＣ）を表４に示した。

以上のマウス経口投与試験の結果から、２２β−メトキシオレアン−１２-エン−３β，２４−ジオール（化合物１７）と比較しても、本発明の化合物は、高い吸収性および血漿中濃度の持続性の面で、優れた薬物動態を有することが確認された。

本発明のトリテルペン誘導体は、有効量で投与することにより、優れた抗ＨＣＶ活性や優れた体内動態を示すことが可能であるため、Ｃ型慢性肝炎に対して、高い予防効果または治療効果が期待できる。従って、本発明は、特に、医療分野において利用可能である。

Claims (13)

1. 一般式（Ｉ）で表されるトリテルペン誘導体または医薬的に許容されるその塩。
   ［式（Ｉ）中、Ｒ^１はカルボキシル基、ヒドロキシメチル基、−ＣＨ_２ＯＳＯ_３Ｈ、または
   を表し、Ｒ^２は−ＯＲ^３、または−Ｏ−（ＣＨ_２）ｍ−ＯＲ^４を表す。ここで、Ｒ^３はヒドロキシメチル基、ジメチルアミノメチル基、フェニルアミノメチル基、モルホリノメチル基、カルボキシル基もしくはホルミル基で置換されていてもよいベンジル基、Ｃ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基、Ｃ_２−６アルキニル基、またはヒドロキシＣ_１−６アルキル基を表し、Ｒ^４はカルボキシル基で置換されていてもよいフェニル基を表し、ｍは１〜３の整数を表す。ただし、Ｒ^１がヒドロキシメチル基であり、Ｒ^２が−ＯＲ^３であり、かつ、Ｒ^３がＣ_１−６アルキル基、Ｃ_２−６アルケニル基またはベンジル基である場合は除く。］
2. 一般式（Ｉ）で表されるトリテルペン誘導体または医薬的に許容されるその塩。
   ［式（Ｉ）中、Ｒ^１はカルボキシル基を表し、Ｒ^２は−ＯＲ^３を表す。ここで、Ｒ^３はベンジル基、メチル基またはアリル基を表す。］
3. 一般式（Ｉ）で表されるトリテルペン誘導体または医薬的に許容されるその塩。
   ［式（Ｉ）中、Ｒ^１はヒドロキシメチル基を表し、Ｒ^２は−ＯＲ^３、または−Ｏ−（ＣＨ_２）_３−ＯＲ^４を表す。ここで、Ｒ^３はヒドロキシメチル基、ジメチルアミノメチル基、フェニルアミノメチル基、モルホリノメチル基、カルボキシル基もしくはホルミル基で置換されているベンジル基、２−プロピニル基、３−ヒドロキシプロピル基、または２−ヒドロキシプロピル基を表す。Ｒ^４はフェニル基またはカルボキシル基で置換されているフェニル基を表す。］
4. 一般式（Ｉ）で表されるトリテルペン誘導体または医薬的に許容されるその塩。
   ［式（Ｉ）中、Ｒ^１は−ＣＨ_２ＯＳＯ_３Ｈを表し、Ｒ^２はメトキシ基を表す。］
5. 一般式（Ｉ）で表されるトリテルペン誘導体または医薬的に許容されるその塩。
   ［式（Ｉ）中、Ｒ^１は
   を表し、Ｒ^２はメトキシ基を表す］
6. Ｃ型肝炎ウイルスの阻害活性のＩＣ５０値が２０μＭ以下である、請求項１から５のいずれかに記載のトリテルペン誘導体または医薬的に許容されるその塩。
7. 請求項１から６のいずれかに記載のトリテルペン誘導体または医薬的に許容されるその塩を有効成分として含んでなるＣ型慢性肝炎の予防または治療のための薬剤。
8. 医薬的に許容される担体を含む、請求項７に記載の薬剤。
9. さらにインターフェロンを組み合わせてなる、請求項７または８に記載の薬剤。
10. 請求項７から９のいずれかに記載の薬剤を、Ｃ型慢性肝炎の予防または治療が必要な患者に、予防上または治療上の有効量を投与することを含む、Ｃ型慢性肝炎の予防または治療の方法。
11. Ｃ型慢性肝炎の予防または治療のための薬剤の製造のための、請求項１から６のいずれかに記載のトリテルペン誘導体または医薬的に許容される塩の使用方法。
12. Ｃ型慢性肝炎の予防または治療のための薬剤が、請求項７から９のいずれかに記載の薬剤である、請求項１１に記載の使用方法。
13. Ｃ型慢性肝炎の予防または治療における使用のための、請求項１から６のいずれかに記載のトリテルペン誘導体または医薬的に許容される塩。